一种日本乙型脑炎病毒样颗粒及其制备方法和应用

摘要

本发明公开了一种日本乙型脑炎病毒样颗粒（Virus Likeparticles,VLPs）及其制备方法和应用。该病毒样颗粒是由日本乙型脑炎病毒(Japanese Encephalitis Virus,JEV)的PrM/E基因和核苷酸序列如SEQIDNO:1的JEVRNA复制子组装而成。该病毒样颗粒的制备方法是将RT-PCR扩增的JEVPrM/E基因连接到Tet-onadvance表达系统的质粒pTRE-Tight中，形成重组载体，Xfect法转染HelaTet-onadvanced细胞，经HygB筛选鉴定后，有限稀释法获得可调控的稳定表达PrM/E基因的Hela细胞系，诱导可表达PrM/E蛋白，可包装出常规的病毒样颗粒；用JEV复制子RNA载体转染该Hela细胞系，可包装出具有“一过性感染”能力的病毒样颗粒。本发明的日本乙型脑炎病毒样颗粒可以用于制备疫苗或作为检测试剂，具有良好的免疫原性和反应性，安全可靠。