总皂苷与总黄酮在制备治疗心血管疾病药中的应用

摘要

本发明公开了总皂苷与总黄酮在制备治疗心血管疾病药物中的应用，属于中药有效成分组的医药用途领域。所述总皂苷为西洋参茎叶总皂苷，所述总黄酮为山楂叶总黄酮，两者的重量份比为1∶0.2～5。山楂叶总黄酮与西洋参茎叶总皂苷合用组与西洋参茎叶总皂苷单用组比较，大鼠血浆中Rg1、Re、Rb1的含量分别提高了59.3%、73.3%、47.9%。由于本发明组合物具有协同效应，所以能够显著提升疗效，呈现良出好的改善心肌缺血、改善心肌代谢、营养心肌、保护心肌细胞、提高心肌抗氧化的能力。

说明书

技术领域

本发明涉及具有协同效应的药物组合物及其应用，尤其涉及两种中药有效 部位组成的具有协同效应的药物组合物及其在制备治疗心血管疾病药中的应 用，属于中药有效成分组的医药用途领域。

背景技术

心血管疾病是造成我国人民死亡的首要疾病，据20世纪90年代流行病学 调查表明，该类疾病死亡率在我国城市与农村分别占疾病总死亡率的37.16％和 26.33％。预计在未来的10～20年中我国心血管疾病的患病率和死亡率还将上升。 近年来传统中医药学在心肌缺血的治疗方面表现出明显的优势和特点。

西洋参(Panax quinquefolium Linn.)系五加科人参属植物，西洋参茎叶总 皂苷含有R₀、Rb₁、Rb₂、Rb₃、Rc、Rd、Re、Rg₁、Rg₂、Rg₃、Rh₁、Rh₂、F₂、RA₀、F₁₁等多种有效成分，具有抗心肌缺血、抗心律失常、保护心肌细胞等生理活性。 山楂(Cr ataegus pinnatifiola Bunge)为蔷薇科植物，其叶中富含黄酮类成分 如槲皮素、花色素苷、金丝桃甙、牡荆素、牡荆素葡萄糖苷等，对心血管系统 具有明显的扩张冠状动脉、强心、降血脂、降血压及利尿、兴奋中枢神经系统、 增强机体免疫力作用。

利用现代工艺提取两味药的有效部位，并对其药理、药效进行深入研究是 实现中药现代化、振兴民族医药的新途径。

发明内容

本发明人发现了总皂苷与总黄酮治疗心血管疾病的活性，二者不仅具有协 同作用而且对心血管疾病具有很好的疗效。

本发明提供了总皂苷与总黄酮在制备用于治疗心血管疾病药物中的应用。

所述总皂苷为西洋参茎叶总皂苷；所述总黄酮为山楂叶总黄酮。

所述西洋参茎叶总皂苷与山楂叶总黄酮的重量份比为1∶0.2～5，优选重量 份比为1∶0.5。

所述西洋参茎叶总皂苷由以下方法制备：

以西洋参茎、叶为原料，将其茎叶适度碎断，加水煎煮3次，每次1.5小 时，每次加水的重量为原料重量的10倍，过滤，药渣弃掉；将煎煮液合并，浓 缩至相对密度为1.04～1.06，该密度在30℃测定，室温放置24小时，沉淀弃 掉；将上清液通过D101大孔树脂柱，先用水洗至无色，弃去洗液，再以20％乙 醇洗脱，弃去洗液，最后以70％乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇，减压干燥， 以乙醇精制，干燥，粉碎成细粉，得西洋参茎叶提取物；采用高效液相色谱法 测定其人参皂苷Rb₁的含量、采用分光光度法测定其总皂苷的含量，确定西洋参 茎叶提取物中，人参皂苷Rb₁(C₅₄H₉₂O₂₃)含量不得少于4％，总皂苷含量不得少于 55％。

所述山楂叶总黄酮由以下方法制备：

以山楂叶为原料，加50％乙醇回流提取2次，每次2小时，第1次加10 倍量(重量倍数)，第2次家8倍量(重量倍数)，过滤，药渣弃掉；将提取液 合并，回收乙醇，得无醇味清膏；将所得清膏加等重量的水，溶解稀释，静置， 上清液通过D101大孔树脂柱，先用水洗至无色，弃去洗液，再用85％乙醇洗脱， 收集洗脱液，回收乙醇，浓缩至清膏，减压喷雾干燥，粉碎成细粉，得山楂叶 提取物；采用高效液相色谱法测定其牡荆素鼠李糖苷的含量、采用分光光度法 测定其总黄酮的含量，确定山楂叶提取物中，牡荆素鼠李糖苷(C₂₇H₃₀O₁₄)含量不 得少于8.8％，总黄酮苷含量不得少于80％。

本发明所述心血管疾病包括急性心肌缺血、心肌缺血再灌注损伤、氧化应 激心肌细胞损伤等。

本发明提供了总皂苷与总黄酮在制备用于治疗心血管疾病药物中的应用，

所述用于治疗心血管疾病的药物由总皂苷和总黄酮与一种或多种药学上可 接受的载体或赋形剂制成的临床上任何可接受的剂型形式。

所述剂型为片剂、胶囊、软胶囊、口服液、糖浆、颗粒、滴丸、口崩片、 缓释片、缓释胶囊、控释片、控释胶囊、水针、冻干粉针、无菌粉针、输液等。

所述药学上可接受的载体或赋形剂选自适用于制剂的溶剂、填充剂、粘合 剂、润滑剂、崩解剂、助溶剂、表面活性剂、抗氧剂、渗透压调节剂、PH调节 剂、吸附载体等。

一种药物制剂，所述药物制剂中含有总皂苷与总黄酮。

所述总皂苷为西洋参茎叶总皂苷；所述总黄酮为山楂叶总黄酮。

所述西洋参茎叶总皂苷与山楂叶总黄酮的重量份比为1∶0.2～5，优选重量 份比为1∶0.5。

上述药物制剂，其中还含有一种或多种药学上可接受的载体或赋形剂。

上述药物制剂以口服或注射的方法施用于受体。

本发明剂型可使用药物制剂工艺学本领域熟练技术人员所公知的惯常使用 的任何方法产生并且对此没有特别限制。

例如，本发明片剂可通过使用本领域公知的合适的方法粒化、干燥和筛分 主要药剂和赋形剂、粘合剂等等，向所得混合物中加入润滑剂等等然后混合并 形成片剂。造粒可通过本领域公知的任何合适的方法进行，例如湿法造粒、干 法造粒或加热造粒。合适的非限制性实例包括使用高速搅拌造粒机、流动造粒 干燥机、挤压造粒机或滚筒压紧器进行这些造粒方法。此外，例如干燥和筛分 的方法可以根据进行造粒的需要进行。主要药剂、赋形剂、粘合剂、润滑剂等 等的混合物还可直接形成片剂。

如果需要薄膜包衣，可以使用本领域已知的任何薄膜包衣装置，并且作为 薄膜包衣基质，合适的实例包括糖衣基、亲水膜包衣基、肠溶薄膜包衣基和缓 释薄膜包衣基。

本发明人在科研过程中惊奇的发现山楂叶总黄酮能显著提高西洋参茎叶 总皂苷在体内的吸收程度，呈现出药效、药代双协同的作用效果，实现结果显 示山楂叶总黄酮与西洋参茎叶总皂苷合用组与西洋参茎叶总皂苷单用组比较， 大鼠血浆中Rg1、Re、Rb1的含量分别提高了59.3％、73.3％、47.9％。由于本发 明组合物具有协同效应，所以能够显著提升疗效，呈现良出好的改善心肌缺血、 改善心肌代谢、营养心肌、保护心肌细胞、提高心肌抗氧化的能力。不仅组合 物治疗药效好于单一药物、而且降低了用药剂量的双重作用，有利于减轻长期 应用药物对人体产生的副作用，提高用药安全性。本发明药物组合物针对心血 管重大疾病进行研制，具有中医药特色，为心肌缺血、冠心病、心绞痛的防治 提供了一个安全有效的治疗药物。通过现代科学技术手段进行中药组合物创新 改造，使此组合物产量更高、疗效更好、不良反应更少、价格更便宜，成为适 合广大群众基本医疗服务的治疗药物。此组合物为理想的用于治疗心血管疾病 的药物。

附图说明

图1Rg1一级全扫描质谱图和二级全扫描质谱图

图2Re一级全扫描质谱图和二级全扫描质谱图

图3Rb1一级全扫描质谱图和二级全扫描质谱图

图4山楂叶黄酮增加西洋参茎叶皂苷的体内吸收

图5组合物对氧化应激心肌细胞损伤的保护作用(A：空白对照组；B：H₂O₂模型组；C：100ug/ml组合物高剂量组；D：50ug/ml组合物低剂量组)

具体实施方式

下面结合具体实施方式对本发明做进一步详细说明。

实施例1山楂叶总黄酮提高西洋参茎叶总皂苷的体内吸收

实验方法：

取雄性SD大鼠16只，220-240g，随机分为2组。

西洋参茎叶总皂苷单用组，单次灌胃给药60mg/kg，灌胃体积1mL/100g；

山楂叶总黄酮与西洋参茎叶总皂苷合用组，连续3天灌胃给予大鼠 30mg/kg山楂叶总黄酮，第3天给予山楂叶总黄酮1h后灌胃给予大鼠60mg/kg 西洋参茎叶总皂苷；

以上2组，西洋参茎叶总皂苷给予0.5h后，处死大鼠，分取血浆，采用 美国AB公司API 3000型串联质谱仪，以LC/MSⁿ方法测定大鼠血浆中Rg1、Re 和Rb1含量。

实验结果：

山楂叶总黄酮对西洋参茎叶总皂苷具有显著的促进体内吸收作用。合用组 与单用组比较，大鼠血浆中Rg1、Re、Rb1的含量分别提高了59.3％、73.3％、47.9％， 请见图1、图2、图3、图4。

实施例2西洋参茎叶总皂苷与山楂叶总黄酮制备

所述西洋参茎叶总皂苷由以下方法制备：

以西洋参茎、叶为原料(5公斤)，将其茎叶适度碎断，加水煎煮3次，每 次1.5小时，每次加水的重量为原料重量的10倍，过滤，药渣弃掉；将煎煮液 合并，浓缩至相对密度为1.04～1.06，该密度在30℃测定，室温放置24小时， 沉淀弃掉；将上清液通过D101大孔树脂柱，先用水洗至无色，弃去洗液，再以 20％乙醇洗脱，弃去洗液，最后以70％乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇，减压 干燥，以乙醇精制，干燥，粉碎成细粉，得西洋参茎叶提取物；采用高效液相 色谱法测定其人参皂苷Rb₁的含量、采用分光光度法测定其总皂苷的含量，确定 西洋参茎叶提取物中，人参皂苷Rb₁(C₅₄H₉₂O₂₃)含量不得少于4％，总皂苷含量不得 少于55％。

所述山楂叶总黄酮由以下方法制备：

以山楂叶为原料(5公斤)，加50％乙醇回流提取2次，每次2小时，第1 次加10倍量(重量倍数)，第2次家8倍量(重量倍数)，过滤，药渣弃掉；将 提取液合并，回收乙醇，得无醇味清膏；将所得清膏加等重量的水，溶解稀释， 静置，上清液通过D101大孔树脂柱，先用水洗至无色，弃去洗液，再用85％乙 醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇，浓缩至清膏，减压喷雾干燥，粉碎成细粉， 得山楂叶提取物；采用高效液相色谱法测定其牡荆素鼠李糖苷的含量、采用分 光光度法测定其总黄酮的含量，确定山楂叶提取物中，牡荆素鼠李糖苷(C₂₇H₃₀O₁₄) 含量不得少于8.8％，总黄酮苷含量不得少于80％。

实施例3组合物对大鼠急性心肌缺血的保护作用。

实验方法：

取雄性SD大鼠80只，220-240g，随机分为8组，分别为正常对照组，正常 实验大鼠，未经异丙肾上腺素造模处理，也不给予药物治疗；模型组，实验大 鼠经异丙肾上腺素造模处理，不给予药物治疗；西洋参茎叶总皂苷组；山楂叶 总黄酮组；皂苷合用黄酮的高、中、低剂量组和地奥心血康组。

每天灌胃1次，连续给药7天。第7天以15mg/kg剂量皮下注射盐酸异丙肾上 腺素造模。第8天给药治疗后1小时测定大鼠心电图ST段值。然后处死大鼠分取 心肌组织测定心肌梗死面积以及超氧化物歧化酶(SOD)活性与丙二醛(MDA) 含量，分取血清测定乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)活性，采集数据，进 行数理统计。

实验结果：

组合物总量以45-180mg/kg剂量给药可明显改善大鼠心肌缺血程度，对异 丙肾上腺素造成的心肌缺血具有很好的缓解作用，可使心肌缺血动物心肌酶 (CK、LDH)活性明显降低，呈现出量效关系明显的心肌保护作用；组合物能明 显减小冠脉结扎大鼠心肌缺血程度和范围，缩小心肌梗死面积，降低血清中MDA 的含量，提高心肌SOD活性水平，抑制过氧化脂质的产生；降低由缺血造成的 心电图ST段升高，对心肌缺血损伤大鼠心电图具有剂量依赖性的改善作用；并 可以降低冠脉阻力，增加心排血和每搏输出量，增加冠脉流量，减少心肌耗氧 量，保护缺血心肌。

表1大鼠血清LDH、CK及心肌组织SOD、MDA含量：

与正常对照组比较：*P＜0.05；与模型组比较：#P＜0.05

表2大鼠急性心肌缺血心肌梗死面积：

与正常对照组比较：*P＜0.05；与模型组比较：#P＜0.05

表3大鼠心电图ST段：

与正常对照组比较：*P＜0.05；与模型组比较：#P＜0.05

实施例4组合物对离体大鼠缺血再灌注心肌的保护作用。

实验方法：

观察组合物对离体大鼠心脏血流动力学的影响。

将大鼠断头处死，取出心脏，悬挂于Langendorff灌流装置。经主动脉插 管，记录心室内压，采用37℃、(95％O₂+5％CO₂)平衡的Krebs-Henseleit(K-H) 缓冲液(pH 7.4)进行Langendorff逆灌。采用多导生理记录仪记录左室收缩压 (LVSP)、左室舒张期末压(LVEDP)、左室内压等容收缩期最大上升及下降速率 (±dp/d tmax)。以K-H缓冲液10ml/min灌流离体大鼠心脏，平衡20min，然后停 灌30min，再灌注30min。

给药组在停灌前10min灌注不同浓度的含药灌流液，再灌注时则继续灌注含 药灌流液；

模型组，实验大鼠心脏经缺血再灌注造模处理，不给予药物治疗，以不含 药的K-H缓冲液灌流，中间停灌30min；

正常对照组，正常实验大鼠心脏，未经缺血再灌注造模处理，也不给予药 物治疗，则是持续灌注不含药的K-H缓冲液80min。

实验结束取左前壁心肌组织，制成10％组织匀浆，测定心肌中SOD活性及过 氧化物脂质(LPO)含量。

实验结果：

模型组缺血30min再灌注30min后，各血流动力学参数与空白组比较差异 显著，LVSP与±dp/dtmax明显降低，LVEDP明显增高，P值均＜0.05。与模型组 比较，西洋参茎叶总皂苷和山楂叶总黄酮组合物可剂量依赖性地改善上述指标 参数。表明组合物可以明显改善受损心肌的舒缩功能，对缺血再灌注引起的心 肌损伤具有保护作用。

西洋参茎叶总皂苷和山楂叶总黄酮组合物可以抑制脂质过氧化反应，减少 LPO的形成，并可以通过提高SOD活性对抗氧自由基引起的心肌损伤，且具有剂 量依赖性。组合物还可以减少缺血再灌注性心律失常的发生率。正常对照组大 鼠均未发生心律失常，缺血再灌注组中全部出现心律失常，其中4只频发室性早 搏，3只室颤，1只室速。大剂量组有3只偶发室早，中剂量组4只偶发室早，小 剂量组4只发生室早，1只室颤，地奥心血康组3只偶发室早。

表4大鼠离体工作心血流动力学

与正常对照组比较：*P＜0.05；与模型组比较：#P＜0.05

表5心肌中SOD活性及L PO含量：

与正常对照组比较：*P＜0.05；与模型组比较：#P＜0.05

实施例5组合物对氧化应激心肌细胞损伤的保护作用。

实验方法：

取对数生长期的H9C2细胞以5×10⁴个/孔的密度接种于96孔板中，37℃、 5％CO₂条件下培养24h，按不同组别分别进行处理。

皂苷加黄酮组合物组分别以100μg/ml和50μg/ml剂量预孵育细胞12h， 其中皂苷∶黄酮重量份均为比为2∶1，然后加入H₂O₂使终浓度为100μM，继续孵 育24h；

H₂O₂模型组以无血清DMEM培养基预孵育细胞12h，然后加入H₂O₂使终浓度 为100μM，继续孵育24h；

空白对照组则以无血清DMEM培养基处理，不加H₂O₂和药物。

以上各组均以MTT法测定OD值，计算细胞存活率。细胞存活率(％)＝实验 组OD值/对照组OD值×100％

实验结果：

MTT结果显示100和50μg/ml的组合物对H9C2细胞无毒性作用。组合物在这2 个浓度下对H₂O₂造成的H9C2细胞损伤具有保护作用，呈现效应-剂量依赖性趋势。 H9C2经与组合物预孵育，可以使细胞存活率由H₂O₂模型组的41.3％上升至82.5％ (高剂量100μg/ml组)和65.7％(低剂量50μg/ml组)。

实施例6西洋参茎叶总皂苷和山楂叶总黄酮重量份比例1∶0.5，规格为180mg/ 片的片剂制备

工艺：

1、原、辅料分别粉碎过80目筛备用；

2、取2％HPMC加浓度为30～95％药用乙醇制成5～10％的溶液，即得；

3、取西洋参茎叶总皂苷、山楂叶总黄酮、微晶纤维素、可压性淀粉、羧甲 基淀粉钠混合均匀，加入2％HPMC乙醇溶液制软材，16目筛制粒，60℃干燥；

4、16目筛整粒，加入硬脂酸镁、滑石粉混合10分钟，使均匀，压片即得。

实施例7西洋参茎叶总皂苷和山楂叶总黄酮重量份比例1∶0.5，规格为90mg/ 片的片剂制备

工艺：

1、原、辅料分别粉碎过80目筛备用；

2、取2％HPMC加浓度为30～95％药用乙醇制成5～10％的溶液，即得；

3、取西洋参茎叶总皂苷、山楂叶总黄酮、微晶纤维素、可压性淀粉、羧甲 基淀粉钠混合均匀，加入2％HPMC乙醇溶液制软材，16目筛制粒，60℃干燥；

4、16目筛整粒，加入硬脂酸镁、滑石粉混合10分钟，使均匀，压片即得。

实施例8西洋参茎叶总皂苷和山楂叶总黄酮重量份比例1∶0.5，规格为45mg/ 片的片剂制备

工艺：

1、原、辅料分别粉碎过80目筛备用；

2、取2％HPMC加浓度为30～95％药用乙醇制成5～10％的溶液，即得；

3、取西洋参茎叶总皂苷、山楂叶总黄酮、微晶纤维素、可压性淀粉、羧甲 基淀粉钠混合均匀，加入2％HPMC乙醇溶液制软材，16目筛制粒，60℃干燥；

4、16目筛整粒，加入硬脂酸镁、滑石粉混合10分钟，使均匀，压片即得。

实施例9西洋参茎叶总皂苷和山楂叶总黄酮重量份比例1∶0.5，规格为300mg/ 片的片剂制备

工艺：

1、原、辅料分别粉碎过80目筛备用；

2、取2％HPMC加浓度为30～95％药用乙醇制成5～10％的溶液，即得；

3、取西洋参茎叶总皂苷、山楂叶总黄酮、微晶纤维素、可压性淀粉、羧甲 基淀粉钠混合均匀，加入2％HPMC乙醇溶液制软材，16目筛制粒，60℃干燥；

4、16目筛整粒，加入硬脂酸镁、滑石粉混合10分钟，使均匀，压片即得。

实施例10西洋参茎叶总皂苷和山楂叶总黄酮重量份比例1∶0.2，规格为90mg/ 片的片剂制备

工艺：

1、原、辅料分别粉碎过80目筛备用；

2、取2％HPMC加浓度为30～95％药用乙醇制成5～10％的溶液，即得；

3、取西洋参茎叶总皂苷、山楂叶总黄酮、微晶纤维素、可压性淀粉、羧甲 基淀粉钠混合均匀，加入2％HPMC乙醇溶液制软材，16目筛制粒，60℃干燥；

4、16目筛整粒，加入硬脂酸镁、滑石粉混合10分钟，使均匀，压片即得。

实施例11西洋参茎叶总皂苷和山楂叶总黄酮重量份比例1∶5，规格为180mg/ 片的片剂制备

工艺：

1、原、辅料分别粉碎过80目筛备用；

2、取2％HPMC加浓度为30～95％药用乙醇制成5～10％的溶液，即得；

3、取西洋参茎叶总皂苷、山楂叶总黄酮、微晶纤维素、可压性淀粉、羧甲 基淀粉钠混合均匀，加入2％HPMC乙醇溶液制软材，16目筛制粒，60℃干燥；

4、16目筛整粒，加入硬脂酸镁、滑石粉混合10分钟，使均匀，压片即得。

实施例12西洋参茎叶总皂苷与山楂叶总黄酮片剂在高温条件下的稳定性对比 试验

取实施例6至11所得片剂各10片，分别置密封洁净容器中，在60℃条件 下放置10天；分别于第0天、第5天和第10天取样，检测，结果如下：

在60℃高温条件放置变化情况

  时间 0天：外观  5天：外观   10天：外观   皂苷+黄酮120+60mg/片 无变化  无变化   无变化   皂苷+黄酮60+30mg/片 无变化  无变化   无变化   皂苷+黄酮30+15mg/片 无变化  无变化   无变化   皂苷+黄酮200+100mg/片 无变化  无变化   无变化   皂苷+黄酮75+25mg/片 无变化  无变化   无变化   皂苷+黄酮30+150mg/片 无变化  无变化   无变化

由上表可见，在高温60℃条件下放置10天后，西洋参茎叶总皂苷与山楂叶 总黄酮片剂外观变化不大，对高温的稳定性很好。

实施例13西洋参茎叶总皂苷与山楂叶总黄酮片剂高湿条件下的稳定性对比试 验。

取实施例6至11所得片剂各10片，置恒湿密闭容器中，于92.5％相对湿 度条件下放置10天；分别于第0天、第5天和第10天取样，检测，结果如下：

在92.5％相对湿度高湿条件下放置变化情况

  时间  0天：外观  5天：外观   10天：外观   皂苷+黄酮120+60mg/片  无变化  无变化   无变化   皂苷+黄酮60+30mg/片  无变化  无变化   无变化   皂苷+黄酮30+15mg/片  无变化  无变化   无变化   皂苷+黄酮200+100mg/片  无变化  无变化   无变化   皂苷+黄酮75+25mg/片  无变化  无变化   无变化   皂苷+黄酮30+150mg/片  无变化  无变化   其中三片表面出现2到4个小坑

由上表可见，在高湿92.5％相对湿度条件下放置10天后，仅有皂苷+黄酮 30+150mg/片剂中的三个片剂表面出现2到4个小坑，外观稍有变化，其余片剂外 观无变化，表明西洋参茎叶总皂苷与山楂叶总黄酮片剂对高湿稳定。

实施例14西洋参茎叶总皂苷与山楂叶总黄酮片剂在强光照射条件下的稳定 性对比试验。

取实施例6至11所得片剂各10片，置光照箱，于照度5000Lx条件下放 置10天，分别于第0天第、5天和第10天取样，检测，结果如下：

在光照5000Lx条件下放置变化情况

  时间  0天：外观  5天：外观   10天：外观   皂苷+黄酮120+60mg/片  无变化  无变化   无变化   皂苷+黄酮60+30mg/片  无变化  无变化   无变化   皂苷+黄酮30+15mg/片  无变化  无变化   无变化   皂苷+黄酮200+100mg/片  无变化  无变化   无变化   皂苷+黄酮75+25mg/片  无变化  无变化   无变化   皂苷+黄酮30+150mg/片  无变化  无变化   无变化

由上表可见，在光照5000Lx条件下放置10天后，西洋参茎叶总皂苷与山 楂叶总黄酮片剂对光照的稳定性很好。

显然，本发明的上述实施例仅仅是为清楚地说明本发明所作的举例，而并 非是对本发明的实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述 说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有 的实施方式予以穷举。而这些属于本发明的精神所引伸出的显而易见的变化或 变动仍处于本发明的保护范围之中。