包括具有含植物脂质的核心和含磷脂或极性脂质的脂质小球的营养组合物

摘要

本发明涉及用于婴儿和/或幼儿的营养组合物，包含具有大脂质小球尺寸的脂质成分。所述组合物可用于在以后的生活中防止肥胖和/或改善身体成分。所述脂质成分包含10-50重量％的植物脂质，并且所述脂质小球的体积加权直径大于1.0μm并且/或者至少45体积％的量的直径为2-12μm。

说明书

技术领域

本发明涉及用于在以后的生活(later in life)中预防肥胖的婴儿配方奶(infant milk formula)和成长奶(growing up milk)的领域。

背景技术

母乳喂养是优选的喂养婴儿的方法。但是，存在一些使得母乳喂养难以办到或不太合乎需要的情况。在这些情况下婴儿配方奶是很好的替代品。以如下方式对现有婴儿配方的组成加以改变，即使得其能满足快速生长和发育中的婴儿的很多特殊营养要求。

似乎仍然可对婴儿配方奶的构成做出改进。与以配方奶喂养的婴儿相比，母乳喂养的婴儿在以后的生活中变肥胖的可能性更低，但是关于婴儿配方奶中的成分对以后的生活中肥胖的作用知之甚少。到目前为止，大部分研究致力于蛋白质浓度或脂肪酸组成的作用。肥胖是西方世界中的一个主要健康问题。肥胖是这样一种医学病症，其中多余重量已积累至可能对健康有害并因而导致预期寿命减小的程度；并且肥胖与多种疾病相关，特别是心脏病和2型糖尿病。肥胖是全世界范围内一种最主要的可预防死因，其在儿童和成人中的流行率正在日益增高，并且专家视其为21世纪最严重的公共健康问题之一。

本发明涉及这样的未来健康身体成分。

WO 2007/073194涉及用于预防肥胖的包含磷脂、鞘脂类和胆固醇的婴儿配方奶。WO 2007/073193涉及用于在以后的生活中防止肥胖的具有特定亚油酸与α-亚麻酸比例、低亚油酸含量并且包含磷脂、鞘脂类、胆固醇和/或胆碱加尿苷的婴儿配方奶。EP1800675涉及用于改善膜组成以治疗多种病症的含有多不饱和脂肪酸、蛋白质和锰和/或钼的组合物。

Michalski et al，2005，J Dairy Sci 88：1927-1940公开了人乳和婴儿配方奶中的脂质小球的粒径分布。WO 2005/051091涉及脂质结合物，所述结合物当在基本水性介质中分散或乳化时与其他婴儿配方奶成分形成基本上同质的分散液或乳液，所述分散液或乳液具有包含脂质小球的微观结构，并且所述包含脂质小球的微观结构基本模仿天然HMF的相应球状微观结构。SU 1084006公开了用于儿童和残疾人的食物，所述食物为4μM直径的脂质小球大小，与人乳相似。

发明内容

发明人惊讶地发现婴儿配方奶中脂质小球的尺寸影响以后生活中的身体成分。婴儿配方奶中脂质小球尺寸的特定选择可使得以后生活中脂肪量减少和/或肥胖减轻。婴儿配方奶中脂质小球尺寸的特定选择还使得以后生活中瘦体重增加。当在幼年时给予包含脂质(所述脂质具有与存在于常规婴儿配方奶的脂质小球相比尺寸更大的脂质小球)的本发明婴儿配方奶时，观察到以后生活中身体成分的改变，导致与给予常规婴儿配方奶的身体成分相比更低的脂肪量、更低的相对于总体重的脂肪量以及更高的瘦体重。特别是与健康问题最相关的内脏型肥胖(visceral obesity)减轻。特别是脂肪细胞肥大减轻。由脂肪细胞肥大导致的肥胖被认为是指示以后生活中肥胖发作的指标，并且与由脂肪细胞增生引起的肥胖相比，它与诸如胰岛素抵抗的健康问题相关性更大。

所研究的配方之间的重要区别在于脂质小球的尺寸，而所述配方奶中脂肪酸组成(fatty acid profile)相似。

所研究的配方还能够在幼年时实现相似的良好生长和发育，更具体而言，所研究的配方对幼年时的脂肪量没有影响。因此所述饮食没有直接作用，例如对肥胖的预防作用。这是有利的，因为在婴儿和幼儿(toddler)中脂肪量在能量储存、隔热、脂溶性维生素储存和激素形成(如瘦素和胰岛素敏感性的形成)中有重要作用，因此不希望降低婴儿和幼儿的脂肪量。

当所述大脂质小球包被有极性脂质外层时，在以后的生活中观察到甚至提高的对脂肪量以及相对于总体重的脂肪量的作用。这种提高不能由所述极性脂质本身的存在来解释，因为仅加入极性脂质而不包被脂质小球未显示出这些改善作用。

标准婴儿配方奶以植物油作为脂质成分。所述脂质被均质化以形成稳定的乳液，并且脂质小球较小，其体积加权众数直径(volume-weighted mode diameter)为约0.3-0.6μm。以总脂质计，少于55体积％，一般少于35体积％的脂质小球有2至12μm的直径。所述脂质小球很大一部分被乳蛋白特别是酪蛋白所包被。

本发明涉及包含植物脂肪的婴儿配方奶和幼儿成长奶，所述植物脂肪的脂质小球尺寸大于常规婴儿配方奶的脂质小球。本发明的组合物包含脂质小球，所述脂质小球的脂质体积加权众数直径大于1.0μm、优选为1.0至10μm，并且/或者以总脂质计至少45体积％，更优选55体积％的脂质小球具有2至12μm的直径。这可以通过将包含植物脂肪的脂质组分在较低压力下均质化来实现，优选在存在极性脂质的情况下以包被所述更大的脂质小球并且使它们更稳定。发现这样得到的水包油乳液中稳定可至少48小时。特别地，当所述配方被干燥为粉末并且随后在使用前不久用水复原为即饮配方奶时，没有发现对稳定性的不利影响。

现在发明人惊讶地发现，幼年时给予的脂质小球的尺寸是影响以后生活中身体成分，特别是脂肪量，更特别是内脏脂肪量和瘦体重的决定因素之一。当所述大脂质小球包被有极性脂质如磷脂时，对脂肪量的这种影响甚至更显著。由于有利地没有观察到所述饮食对身体成分的急性作用，因此结论是所述饮食以这样的方式预设(programme)或影响身体，即在相似条件下进一步生长后在以后的生活中形成更佳的身体成分。

因此本发明可用于食物组合物，所述食物组合物用于婴儿和/或幼儿以在以后的生活中防止肥胖、内脏肥胖，增加瘦体重和/或降低脂肪量。

具体实施方式

因此本发明涉及一种用于预防肥胖、降低肥胖风险和/或治疗肥胖的方法，所述方法包括对人受试者给予营养组合物，所述营养组合物包含

a)以所述组合物的干重计10至50重量％的植物脂质，和

b)脂质小球

i)体积加权众数直径超过1.0μm，优选1.0至10μm，并且/或者

ii)以总脂质计至少45体积％、更优选至少55体积％的量的直径为2至12μm。

为了清楚的缘故，应注意如b)下所定义的脂质小球包括如a)下所定义的植物脂质，或者换句话说a)和b)重叠。

本发明还涉及一种用于改善身体成分的方法，所述身体成分的改善选自：瘦体重增加、脂肪量下降和相对脂肪量下降，所述方法包括对人受试者给予营养组合物，所述营养组合物包括

a)以所述组合物的干重计10至50重量％的植物脂质，和

b)脂质小球

i)体积加权众数直径超过1.0μm，优选1.0至10μm，并且/或者

ii)以总脂质计至少45体积％、更优选至少55体积％的量的直径为2至12μm。

在一个方面，本发明涉及预防肥胖和/或减少肥胖风险的非治疗性方法，所述方法包括对人受试者给予营养组合物，所述营养组合物包括

a)以所述组合物的干重计10至50重量％的植物脂质，和

b)脂质小球

i)体积加权众数直径超过1.0μm，优选为1.0至10μm，并且/或者

ii)以总脂质计至少45体积％、更优选至少55体积％量的直径为2至12μm。

在另一个方面，本发明涉及一种用于改善身体成分的非治疗性方法，所述身体成分的改善选自瘦体重增加、脂肪量下降和相对脂肪量下降，所述方法包括给予人受试者营养组合物，所述营养组合物包括

a)以所述组合物的干重计10至50重量％的植物脂质，和

b)脂质小球

i)体积加权众数直径超过1.0μm，优选1.0至10μm，并且/或者

ii)以总脂质计至少45体积％、更优选至少55体积％的量的直径为2至12μm。

本发明还可被表述为脂质用于制备一种用于预防肥胖、减少肥胖风险和/或治疗肥胖的营养组合物的用途，所述营养组合物包括

a)以所述组合物的干重计10至50重量％的植物脂质，和

b)脂质小球

i)体积加权众数直径超过1.0μm，优选1.0至10μm，并且/或者

ii)以总脂质计至少45体积％、更优选至少55体积％的量的直径为2至12μm。

本发明还涉及脂质用于制备改善身体成分的营养组合物的用途，所述身体成分的改善选自瘦体重增加、脂肪量下降和相对脂肪量下降，所述营养组合物包括

a)以所述组合物的干重计10至50重量％的植物脂质，和

b)脂质小球

i)体积加权众数直径超过1.0μm，优选1.0至10μm，并且/或者

ii)以总脂质计至少45体积％、更优选至少55体积％的量的直径为2至12μm。

本发明还可以被叙述为一种用于预防肥胖、降低肥胖风险和/或治疗肥胖的营养组合物，所述营养组合物包括

a)以所述组合物的干重计10至50重量％的植物脂质，和

b)脂质小球

i)体积加权众数直径超过1.0μm，优选1.0至10μm，并且/或者

ii)以总脂质计至少45体积％、更优选至少55体积％的量的直径为2至12μm。

本发明还涉及一种用于改善身体成分的营养组合物，所述身体成分的改善选自瘦体重增加、脂肪量下降和相对脂肪量下降，所述营养组合物包括

a)以所述组合物的干重计10至50重量％的植物脂质，和

b)脂质小球

i)体积加权众数直径超过1.0μm，优选1.0至10μm，并且/或者

ii)以总脂质计至少45体积％、更优选至少55体积％的量的直径为2至12μm。

此外本发明还涉及营养组合物，所述营养组合物包含

a)以所述组合物的干重计10至50重量％的植物脂质，和

b)脂质小球

i)体积加权众数直径超过1.0μm，优选1.0至10μm，并且/或者

ii)以总脂质计至少45体积％、更优选至少55体积％的量的直径为2至12μm，并且

c)以总脂质计0.5-20重量％的磷脂，其中所述磷脂来自乳脂质。

此外本发明还涉及营养组合物，所述营养组合物包含

a)以所述组合物的干重计10至50重量％的植物脂质，和

b)脂质小球

i)体积加权众数直径超过1.0μm，优选1.0至10μm，并且/或者

ii)以总脂质计至少45体积％、更优选至少55体积％的量的直径为2至12μm，并且。

c)以总脂质计0.6至25重量％的极性脂质，其中极性脂质是以总脂质计磷脂、鞘糖脂和胆固醇的总和。

本发明还涉及一种用于制备营养组合物的方法，包括以下步骤

a)提供水性混合物，所述水性混合物包括脂质、蛋白质、可消化的碳水化合物和任选的不可消化的寡糖，其中所述脂质包括以总脂质计50至100重量％的植物脂质，并且其中以总脂质计0.2至20重量％的是磷脂，并且

b)将所述混合物分两步均质化，第一步用5-100bar，优选30-100bar，而第二步用5-50bar，并且

c)优选地将所述均质化的混合物灭菌，并且

d)优选地将所述灭菌的混合物喷雾干燥

也可在步骤b)之前进行灭菌步骤。在这种情况下优选地省略步骤c)。因此在一个实施方案中本发明的方法包括将步骤a)得到的水性混合物灭菌的步骤a1)。

肥胖

本发明的组合物优选被给予年龄在36个月以下，优选18个月以下，更优选12个月以下，甚至更优选6个月以下的人受试者。所述人受试者优选不肥胖和/或不超重。

本发明的肥胖涉及身体脂肪量过多。脂肪量也被称为脂肪组织(adipose tissue或fat tissue)。如果成人体重的多于25重量％(对于男性)或多于30重量％(对于女性)是脂肪则其患有肥胖。肥胖有时被称为肥胖症(adiposity)。

确定身体脂肪量百分比的合适方法是水下称重、皮肤褶襞测量(skin fold measurement)、生物电阻抗分析、计算机断层照相法(CT/CAT扫描)、磁共振成像(MRI/NMR)、超声波检查和双能X射线吸收测量法(Dual Energy X-ray Aborbiometry，DEXA)。优选的方法是DEXA测量。在本发明文中身体脂肪量是由DEXA测定。

以后生活中的健康问题(如糖尿病和心血管疾病)的风险增加是与内脏肥胖而不是全身性肥胖的发生有关。术语“内脏肥胖”是指内脏脂肪组织增加的病症。内脏肥胖一般是由过多的内脏脂肪组织(的堆积)导致的。内脏脂肪——也被称为器官脂肪、腹腔内脂肪、腹膜脂肪或中腹脂肪(central fat)——与位于皮肤下的皮下脂肪和散布在骨骼肌中的肌肉脂肪不同，一般位于腹膜腔内。内脏脂肪包括包围生命器官的腹部脂肪，并且包括肠系膜脂肪、肾周围脂肪、腹膜后脂肪和腹膜前脂肪(包围肝脏的脂肪)。成年男性腰围大于102cm或者成年女性腰围大于88cm表示存在内脏肥胖。男性腰围臀围比超过0.9、女性超过0.85表示存在内脏肥胖。对于3-19岁的儿童，根据年龄和性别的腰围合适取舍点可见于Taylor et al，2000 Am J Clin Nutr72：490-495。当满足上述一个或多个标准(VAT、腰围或腰围臀位比阈值)时受试者患有内脏肥胖。

脂质成分

本发明的组合物包括脂质。所述脂质优选提供所述组合物总热量的30至60％。本发明的组合物更优选地包含提供总热量的30至55％的脂质，本发明的组合物甚至更优选地包含提供总热量的40至50％的脂质。当所述组合物是液体形式例如是即食液体时，优选每100ml包含2.1至6.5g脂质，更优选每100ml包含3.0至4.0g脂质。以干重计本发明的组合物优选包含10至50重量％、更优选12.5至40重量％脂质，甚至更优选19至30重量％的脂质。

脂质包括极性脂质(如磷脂、糖脂、鞘磷脂和胆固醇)、甘油单酯、甘油二酯、甘油三酯和游离脂肪酸。所述组合物优选包含以总脂质计至少75重量％、更优选至少85重量％的甘油三酯。

本发明的脂质包括植物脂质。植物脂质的存在有利地实现最佳脂肪酸组成，高(多)不饱和脂肪酸含量并且/或者更类似于人乳脂肪。仅使用来自牛乳(或其他家畜)的脂质不能提供最佳脂肪酸组成。已知这种非最佳脂肪酸组成(如大量饱和脂肪酸)会导致肥胖增加。本发明的组合物优选包含至少一种、优选至少两种脂质来源，所述脂质来源选自亚麻子油(亚麻籽油)、菜子油(rape seed oil，如菜籽油(colza oil)、低芥酸菜子油(low erucic acid rape seed oil)和芥花籽油(canola oil))、鼠尾草油(salvia oil)、紫苏子油(perilla oil)、马齿苋油(purslane oil)、越橘油(lingonberry oil)、沙棘油(sea buckthorn oil)、大麻油(hemp oil)、向日葵油、高油酸向日葵油(high oleic sunflower oil)、红花油、高油酸红花油(high oleic safflower oil)、橄榄油、红醋栗籽油(black currant seed oil)、蓝蓟油(echium oil)、椰子油、棕榈油和棕榈仁油。本发明的组合物优选包含至少一种、优选至少两种脂质来源，所述脂质来源选自亚麻子油、芥花籽油、椰子油、向日葵油和高油酸向日葵油。市售的植物脂质一般以连续油相的形式提供。当本发明的组合物是液体形式例如是即食液体时，优选每100ml包含2.1至6.5g，更优选每100ml包含3.0至4.0g植物脂质。以干重计，本发明的组合物优选包含10至50重量％，更优选12.5至40重量％，甚至更优选19至30重量％的植物脂质。本发明的组合物优选包含以总脂质计50至100重量％，更优选70至100重量％，甚至更优选75至97重量％的植物脂质。因此应注意本发明的组合物还包含非植物脂质。合适且优选的非植物脂质在下文进一步详述。

脂质小球尺寸

根据本发明，脂质在所述组合物中以脂质小球的形式存在，所述脂质小球在水相中乳化。本发明的脂质小球具有

1.大于1.0μm，优选大于3.0μm，更优选4.0μm或更大，优选1.0至10μm，更优选2.0至8.0μm，甚至更优选3.0至8.0μm，最优选4.0至8.0μm的体积加权众数直径，和/或

2.以下方式的粒径分布，即至少45体积％，优选至少55体积％，甚至更优选至少65体积％，甚至更优选75体积％的脂质小球具有2至12μm的直径。更优选至少45体积％，优选至少55体积％，甚至更优选至少65体积％，甚至更优选至少75体积％的脂质小球具有2至10μm的直径。甚至更优选至少45体积％，优选至少55体积％，甚至更优选至少65体积％，甚至更优选至少75体积％的脂质小球具有4至10μm的直径。

脂质小球的百分比是以总脂质的体积计。所述众数直径涉及以总脂质体积计最常存在的直径，或者是以X作为直径而以Y作为体积(％)的图示中的峰值。所述脂质小球的体积及其粒径分布可使用粒径分析器如Mastersizer(Malvern Instruments，Malvern，UK)，通过例如Michalski et al，2001，Lait 81：787-796中描述的方法来合适地确定。

极性脂质

本发明的组合物优选包含极性脂质。极性脂质是两性的并且包括甘油磷脂、鞘糖脂、鞘磷脂和/或胆固醇。所述组合物更优选包含磷脂(甘油磷脂和鞘磷脂的总和)。本发明中的极性磷脂涉及甘油磷脂、鞘糖脂、鞘磷脂和胆固醇的总和。所述极性磷脂优选作为所述脂质小球的包被层或外层而存在。作为包被层或外层的极性脂质的存在被发现有利地进一步降低了脂肪量和相对脂肪量，即肥胖。极性脂质的存在帮助维持所述在所述水性组合物中乳化的脂质小球。当所述脂质小球尺寸较大时这一点特别重要。因此在本发明的一个实施方案中，所述脂质小球包被有磷脂或极性脂质层。因此所述脂质小球优选地包含核心和包被层。所述核心包含植物脂肪，并且优选地包含至少90重量％的甘油三酯，更优选地基本上由甘油三酯组成。所述包被层包含磷脂和/或极性脂质。并非所有存在于所述组合物中的磷脂和/或极性脂质都必须被包含在所述包被层中，但是优选地大部分如此。存在于所述组合物中的磷脂和/或极性脂质的优选大于50重量％，更优选大于70重量％，甚至更优选大于85重量％，最优选大于95重量％被包含在所述脂质小球的包被层中。不是所有存在于所述组合物中的植物脂质都必须被包含在脂质小球的核心中，但是优选大部分如此，存在于所述组合物中的植物脂质的优选大于50重量％、更优选大于70重量％、甚至更优选大于85重量％、最优选大于98重量％被包含在所述脂质小球的核心中。

本发明的组合物优选包括甘油磷脂。甘油磷脂是一类由在骨架甘油部分的碳-1和碳-2上的羟基基团处酯化的脂肪酸和通过酯键连接在甘油的碳-3的带负电磷酸基团，以及任选地连接在磷酸基团上的胆碱基团(对于卵磷脂的情况，PC)、丝氨酸基团(对于磷脂酰丝氨酸的情况，PS)、乙醇胺基团(对于磷脂酰乙醇胺的情况，PE)、肌醇(对于磷脂酰肌醇的情况，PI)或甘油基团(对于磷脂酰甘油的情况，PG)所构成的脂质。溶血磷脂是一类具有一条脂肪酰基链的磷脂。本发明的组合物优选包含PC、PS、PI和/或PE，更优选至少包含PC。所述甘油磷脂优选包含带负电的磷脂，特别是PS和/或PI。带负电的甘油磷脂有利地提高所述水包油乳液的稳定性。

本发明的组合物优选包含鞘糖脂。本发明中的术语鞘糖脂具体地指带有氨基醇鞘氨醇的糖脂。所述鞘氨醇骨架为与荷电首基(如乙醇胺、丝氨酸或胆碱骨架)以O键连。所述骨架还与脂肪酰基基团以酰胺键接。鞘糖脂是在1-羟基位点上以β-糖苷键连接有一个或多个糖残基的神经酰胺。本发明的组合物优选包含神经节苷脂，更优选包含至少一种选自GM3和GD3的神经节苷脂。

本发明的组合物优选包含鞘磷脂。鞘磷脂具有酯化至神经酰胺的1-羟基基团上的磷酸胆碱或磷酸乙醇胺分子。它们被归为磷脂以及鞘脂，但是不被归为甘油磷脂或鞘糖脂。

鞘脂类在本发明中被定义为鞘磷脂和鞘糖脂的总和。磷脂在本发明中被定义为鞘磷脂和甘油磷脂的总和。所述磷脂来自乳脂质。磷脂∶鞘糖脂的重量比优选为2∶1至10∶1，更优选2∶1至5∶1。

本发明的组合物优选包含磷脂。本发明的组合物优选包含以总脂质计0.2至20重量％，更优选0.5至20重量％，更优选0.5至10重量％，更优选1至10重量％，甚至更优选3至8重量％的磷脂。本发明的组合物优选包含以总脂质计0.1至10重量％，更优选0.5至5重量％，甚至更优选2至4重量％的鞘糖脂。本发明的组合物优选包含以总脂质计0.3至20重量％的(鞘糖脂加磷脂)，更优选包含以总脂质计0.5至20重量％，更优选1至10重量％的(鞘糖脂加磷脂)。

本发明的组合物优选包含胆固醇。本发明的组合物优选包含以总脂质计至少0.005重量％，更优选至少0.02重量％，更优选至少0.05重量％，甚至更优选至少0.1重量％的胆固醇。胆固醇的量优选不多于总脂质的10重量％，更优选不多于总脂质的5重量％，甚至更优选不多于总脂质的1重量％。

本发明的组合物优选包含以总脂质计0.3至25重量％的极性脂质，其中所述极性脂质是磷脂、鞘糖脂和胆固醇的总和，更优选包含以总脂质计0.6至25重量％，更优选0.6至12重量％，更优选1至10重量％，甚至更优选3至10重量％的极性脂质。

用于提供磷脂、鞘糖脂和/或胆固醇的优选来源是卵脂质(egg lipid)、乳脂、酪乳脂肪(buttermilk fat)和奶油乳清脂肪(butter serum fat，如β乳清脂肪(beta serum fat)。磷脂特别是PC的优选来源是大豆卵磷脂和/或向日葵卵磷脂。本发明的组合物优选包含来自乳的磷脂。本发明的组合物优选包含来自乳的磷脂和鞘糖脂。胆固醇也优选从乳中得到。所述极性脂质优选从乳中得到。来自乳的极性脂质包括从乳脂质、乳酪脂质、奶油乳清脂质(β乳清脂质)、乳清脂质、干酪脂质和/或酪乳脂质中分离的极性脂质。所述酪乳脂质一般是在制造酪乳的过程中得到的。所述奶油乳清脂质或β乳清脂质一般是在从奶油制造无水乳脂的过程中得到的。所述磷脂、鞘糖脂和/或胆固醇优选从乳酪中得到。所述组合物优选包含来自牛、母马(mare)、绵羊、山羊、水牛、公马(horse)和骆驼的乳的磷脂、鞘糖脂和/或胆固醇。最优选使用从牛乳中分离的脂质提取物。有利地，源自脂肪乳的极性脂质的脂肪量降低程度至比其他来源的极性脂质更大。所述极性脂质优选位于所述脂质小球的表面上，即作为包被层或外层。确定所述极性脂质是否位于所述脂质小球表面上的合适方法为如实施例1中所描述的激光扫描显微检查法。因此来自家畜乳的极性脂质和来自植物脂质的甘油三酯的共同使用使得能够制造构造与人乳更相似的脂肪小球，同时提供最佳脂肪酸组成。乳极性脂质的合适市售来源是Corman，Salibra of Glanbia的BAEF、SM2、SM3和SM4粉末，以及来自Arla的LacProdan MFGM-10或PL20。所述乳极性脂质的来源优选包含以总脂质计至少4重量％，更优选包含以总脂质计7至75重量％，最优选包含以总脂质计20至70重量％的磷脂。

磷脂与蛋白质的重量比优选大于0.10，更优选大于0.20，甚至更优选大于0.3。所述极性脂质的优选至少25重量％，更优选至少40重量％，最优选至少75重量％来自乳极性脂质。

脂肪酸组成

本文中LA是指亚油酸链和/或亚油酰链(18:2 n6)；ALA是指α-亚麻酸链和/或α-亚麻酰链(18:3 n3)；LC-PUFA是指在脂肪酰链中包含至少20个碳原子并且具有2个或多个不饱和键的长链多不饱和脂肪酸链和/或长链多不饱和脂肪酰链；DHA是指二十二碳六烯酸链和/或二十二碳六烯酰链(22:6，n3)；EPA是指二十碳五烯酸链和/或二十碳五烯酰链(20:5 n3)；ARA是指花生四烯酸链和/或花生四烯酰链(20:4 n6)；DPA是指二十二碳五烯酸链和/或二十二碳五烯酰链(22:5 n3)。中链脂肪酸(MCFA)是指链长为6、8和10个碳原子的脂肪酸链和/或脂肪酰链。

LA优选以足量存在以促进健康生长和发育，但其量尽可能低以防止在以后的生活中发生肥胖。因此所述组合物优选包含以总脂肪酸计少于15重量％，优选5至14.5重量％，更优选6至10重量％的LA。所述组合物优选包含以脂肪酸计大于5重量％的LA。ALA优选以足量存在以促进婴儿健康生长和发育。因此本发明的组合物优选包含以总脂肪酸计至少1.0重量％的ALA。本发明的组合物优选包含以总脂肪酸计1.5重量％，更优选至少2.0重量％的ALA。所述组合物优选包含以总脂肪酸计少于10重量％，更优选少于5.0重量％的ALA。LA/ALA的重量比应良好平衡以预防肥胖，同时确保正常生长和发育。因此，优选地，本发明组合物的LA/ALA重量比为2至15，优选2至7，更优选4至7，更优选3至6，甚至更优选4至5.5，甚至更优选4至5。

由于当给予婴儿时MCFA有助于在以后的生活中减少脂肪量，因此本发明的组合物优选包含以总脂肪酸计至少3重量％，更优选至少10重量％，甚至更优选15重量％的MCFA。由于MCFA减少身体脂肪沉积但不优先减少中腹脂肪量(central fat mass)，并且由于MCFA不减少脂肪细胞的数量，因此本发明的组合物有利地包含以总脂肪酸计少于50重量％，更优选少于40重量，甚至更优选少于25重量％的MCFA。

本发明的组合物优选包含n-3 LC-PUFA，因为n-3 LC-PUFA在以后的生活中降低肥胖，更优先降低向心性肥胖。本发明的组合物更优选包含EPA、DPA和/或DHA，甚至更优选DHA。由于低浓度的DHA、DPA和/或EPA已经有效并且正常生长和发育是非常重要的，本发明组合物中n-3 LC-PUFA的含量优选不超过总脂肪酸含量的15重量％，优选不超过10重量％，甚至更优选不超过5重量％。本发明的组合物优选包含以总脂肪酸含量计至少0.2重量％，优选至少0.5重量％，更优选至少0.75重量％的n-3 LC-PUFA。

由于n-6脂肪酸组——特别是花生四烯酸(AA)及作为其前体的LA——抵消n-3脂肪酸组——特别是DHA和EPA及作为它们前体的ALA，因此本发明组合物包含较少量的AA。所述n-6LC-PUFA含量优选以总脂肪酸计不超过5重量％，更优选不超过2.0重量％，更优选不超过0.75重量％，甚至更优选不超过0.5重量％。由于AA在婴儿中对于最佳功能性膜，特别是神经组织的膜很重要，n-6 LC-PUFA的量优选以总脂肪酸计为至少0.02重量％，更优选至少0.05重量％，更优选至少0.1重量％，更优选至少0.2重量％。AA存在于低LA含量的组合物中是有利的，因为它可补救LA不足。AA在待给予年龄在6个月以下的婴儿的营养物中——优选低含量——的存在是有利的，因为对于这些婴儿来说婴儿配方奶一般是营养的唯一来源。

优选地，除植物脂质之外，还存在选自鱼油(优选金枪鱼油)和单细胞油(如藻油、微生物油和真菌油)的脂质。这些油的来源适合作为LC-PUFA来源。优选地使用单细胞油(包括藻油(algal oil)和微生物油)作为n-3 LC-PUFA的来源，因为这些油来源具有低EPA/DHA比，这导致抗肥胖作用增加。更优选使用鱼油(甚至更优选金枪鱼油)作为n-3 LC-PUFA的来源，因为它们具有较高的EPA浓度，这是有利的，因为EPA是具有额外抗肥胖作用的花生酸前体。因此在一个实施方案中本发明还包括至少一种选自鱼油、海产油(marine oil)、藻油、真菌油和微生物油的脂质。

得到脂质小球的方法

本发明的组合物包括脂质小球。所述脂质小球的尺寸可通过调整用于制备本发明组合物的处理步骤来控制。得到较大脂质小球尺寸的合适且优选的方法是调整均质化的方法。在标准婴儿配方奶中，脂质级分(一般包括植物脂肪、少量极性脂质和脂溶性维生素)通过均质化混合到水性级分(一般包括水、脱脂乳、乳清、可消化的碳水化合物如乳糖、水溶性维生素和矿物质以及可选地不可消化的碳水化合物)中。如果无均质化发生，那么所述液体部分会迅速成奶油状(cream)，即从所述水性部分分离出来并聚积在顶部。均质化是将脂肪相破碎为较小尺寸从而使得其不再从所述水相中迅速分离出来而是保持为稳定乳液的过程。这是通过在高压下强行使所述乳通过小孔实现的。但是，本发明人发现在小于通常施加于婴儿配方奶制备方法中的压力的压力下进行均质化会产生本发明的较大脂质小球，同时保持了足够稳定的乳液。

所述方法包括以下步骤：

1.混合成分

将所述组合物的成分混合，例如优选通过搅拌。基本上将脂质相——包含所述植物脂质——和水相加在一起。所述水相的成分可包括水、脱脂乳(粉末)、乳清(粉末)、低脂乳、乳糖、水溶性维生素和矿物质。所述水相优选包含蛋白质、可消化的碳水化合物，以及极性脂质，更优选磷脂。所述水相优选包含不可消化的寡糖。优选将所述水相设置为pH 6.0至8.0，更优选pH 6.5至7.5。所述极性脂质特别是磷脂优选地来自乳。极性脂质的存在有利地形成更稳定的脂质小球。这对于较大脂质小球的情况尤其重要。有利地，在均质化之前使极性脂质存在于所述水性混合物中可导致所述脂质小球——主要由甘油三酯组成——被极性脂质层所包被。

所述脂质相优选包含以所述脂质相的总重量计50至100重量％的植物脂质。所述极性脂质(更优选所述磷脂)还可存在于脂质相而非水相中，或同时存在于水相和脂质相中。或者所述极性脂质可被分别加至水和脂质相中。磷脂与总脂质的重量比优选是0.2至20重量％，更优选0.5至10重量％，甚至更优选3至8重量％。

优选将所述水相和脂质相先加热，然后加在一起，优选在40℃至80℃，更优选55℃至70℃，甚至更优选55℃至60℃的温度下加热。将所述混合物仍保持在该温度下并搅拌。合适的搅拌方法是使用Ultra-Turrax T50以5000-10000rpm搅拌约30-60秒。随后可将除盐水(demi-water)加入该混合物中以得到所需的干物质百分比。合乎需要的干物质％是例如15％。或者在临均质化前将所述脂质相注射至所述水相。优选注射在临均质化前并在低压下进行注射以得到稳定的大脂质小球。

矿物质、维生素和稳定化树胶可根据它们对热的敏感性在所述方法的不同点加入。混合例如可用高剪应力搅拌器进行。在本发明的方法中，脱脂乳(酪蛋白)优选地不存在于该步骤中，而是在将所述脂肪部分均质化到所述水性级分(包含化合物例如乳清、乳清蛋白和乳糖)中之后再加至所述组合物中。

2.巴氏杀菌

然后优选对所述混合物进行巴氏杀菌。巴氏杀菌包括在微生物不能存活的受控条件下快速加热步骤。在60至80℃，更优选65至75℃的温度下保持至少15秒通常就足以使微生物的营养细胞减少。一些巴氏杀菌方法是已知并可商业化的。或者该步骤还可以在按步骤1所述混合前进行和/或被步骤1中加热至60℃的这一步骤代替。

3.均质化

随后将任选地巴氏杀菌的混合物均质化。均质化是通过减小所述配方奶中的脂质小球尺寸来增加乳液均一性和稳定性的方法。该处理步骤可用多种混合装置进行，所述混合装置对所述产品施加高剪应力。此类型的混合将所述脂质小球破碎为较小球体。所得到的混合物优选在高温高压(例如于60℃下分别在30至100和5至50bar下，总压力为35至150bar)的条件下分两步均质化。或者，所得到的混合物优选于较低温度(15至40℃、优选约20℃)下分别在5至50和5至50bar下，总压力为5至100bar的条件下分两步均质化。在一个实施方案中，所得到的混合物在第一步中在30-100bar下均质化。在另一个实施方案中，所得到的混合物在第一步中在5-50bar下均质化。

这显著低于标准压力，所述标准压力一般分别为250至50bar，因此总压力为300bar。

施加哪种压力取决于使用的具体均化器。一种合适的方法是在60℃下在Niro Suavi NS 2006 H均化器中第一步使用100bar的压力而第二步使用50bar的压力。一种合适的方法是在20℃下在Niro Suavi NS2006 H均化器中第一步使用5bar的压力而第二步使用20bar的压力。随后可任选地加入其它非脂质成分。

4.灭菌

随后，优选地将在步骤3中得到的乳液灭菌。灭菌优选在超高温度(UHT)下在线(in-line)进行和/或在合适容器中进行以得到无菌液体形式的配方奶。UHT处理的合适方法是在120-130℃下处理至少20秒。或者通过蒸发将步骤3中得到的乳液浓缩，然后在超高温度下灭菌并且随后喷雾干燥以得到装入合适容器中的喷雾干燥粉末。

或者在所述均质化步骤前进行该灭菌步骤。优选随后将由上述方法得到的组合物喷雾干燥。

所述脂质小球包被层的差异还可以源自ζ电势。ζ电势测量围绕所述表面的紧密结合层与电中性的远距离区域之间以毫伏(mV)为单位的电动学电位差异，并且是分散液中颗粒之间排斥或吸引大小的度量。其值还涉及胶体分散液的稳定性。高绝对ζ电势会赋予稳定性，即所述溶液或分散液会抵抗聚集。

可消化的碳水化合物组分

所述组合物优选包含可消化的碳水化合物。所述可消化的碳水化合物优选提供所述组合物总热量的30至80％。所述可消化的碳水化合物优选提供总热量的40至60％。当所述组合物是液体形式例如是即食液体时，优选每100ml包含3.0至30g，更优选6.0至20，甚至更优选7.0至10.0g可消化的碳水化合物。以干重计，本发明的组合物优选包含20至80重量％，更优选40至65重量％的可消化的糖。

优选的可消化的糖来源是乳糖、葡萄糖、蔗糖、果糖、半乳糖、麦芽糖、淀粉和麦芽糖糊精。乳糖是人乳中的主要可消化的碳水化合物。本发明的组合物优选包含乳糖。本发明的组合物优选包含可消化的碳水化合物，其中所述可消化的碳水化合物的至少35重量％、更优选至少50重量％，更优选至少75重量％，甚至更优选至少90重量％，最优选至少95重量％是乳糖。以干重计，本发明的组合物优选包含至少25重量％，优选至少40重量％的乳糖。

不可消化的寡糖

本发明的组合物优选包含聚合度(DP)为2至250，更优选3至60的不可消化的寡糖。所述不可消化的寡糖有利地防止胰岛素抵抗的发生，其还会在以后的生活中导致肥胖降低和/或脂肪量减少。此外，不可消化的寡糖的存在有利地导致肠道微生物中丛硬壁菌门(Firmicutes)少而拟杆菌(Bacteroidete)多，这导致肥胖降低。因此推测所述不可消化的寡糖能增强本发明组合物的较大脂质小球的抗肥胖作用。

所述不可消化的寡糖优选地选自包括低聚果糖(如菊粉)、低聚半乳糖(如反式低聚半乳糖或β-低聚半乳糖)、低聚葡萄糖(如龙胆寡糖(gentio-oligosaccharide)、黑曲霉寡糖(nigero-oligosaccharide)和环糊精寡糖(cyclodextrin-oligosaccharide))、低聚阿拉伯糖、低聚甘露糖(mannan-oligosaccharide)、低聚木糖、低聚岩藻糖、阿拉伯半乳寡糖(arabinogalacto-oligosaccharide)、葡糖甘露寡糖(glucomanno-oligosaccharide)、半乳甘露寡糖(galactomanno-oligosaccharide)、含唾液酸寡糖和糖醛酸寡糖。本发明的组合物优选包含与不可消化的寡糖结合的阿拉伯树胶。

本发明的组合物优选包含低聚果糖、低聚半乳糖和/或半乳糖醛酸寡糖(galacturonic acid oligosaccharide)，更优选低聚半乳糖，最优选反式低聚半乳糖。在一个优选实施方案中，所述组合物包含反式低聚半乳糖和低聚果糖的混合物。本发明的组合物优选包含DP为2-10的低聚半乳糖和/或DP为2-60的低聚果糖。所述低聚半乳糖优选地选自反式低聚半乳糖、乳糖-N-四糖(lacto-N-tetraose(LNT))、乳糖-N-新四糖(neo-LNT)、岩藻糖基乳糖(fucosyl-lactose)、岩藻糖基化LNT(fucosylated LNT)和岩藻糖基化新-LNT(fucosylated neo-LNT)。在一个特别优选的实施方案中，本发明的方法包括给予反式低聚半乳糖([半乳糖]_n-葡萄糖；其中n是1至60之间的整数，即2、3、4、5、6、......、59、60；n优选选自2、3、4、5、6、7、8、9或10)。反式低聚半乳糖(TOS)例如以Vivinal^TM(Borculo Domo Ingredients，Netherlands)的商标出售。所述反式低聚半乳糖的糖是β-连接的。

低聚果糖是不可消化的寡糖，其包含DP或者平均DP为2至250，更优选10至100的β-连接的果糖单元链。低聚果糖包括菊粉、果聚糖和/或混合型的多聚果聚糖(polyfructan)。一种特别优选的低聚果糖是菊粉。适用于所述组合物的低聚果糖已可市购，例如RaftilineHP(Orafti)。

糖醛酸寡糖优选是通过果胶降解得到的。糖醛酸寡糖优选是半乳糖醛酸寡糖。因此本发明的组合物优选包含DP为2至100的果胶降解产物。所述果胶降解产物优选是用苹果果胶、甜菜果胶和/或柑橘果胶(citrus pectin)制备。所述组合物优选包含反式低聚半乳糖、低聚果糖和果胶降解产物。反式低聚半乳糖∶低聚果糖∶果胶降解产物的重量比优选是(20至2)∶1∶(1至3)，更优选是(12至7)∶1∶(1至2)。

所述组合物优选每100ml包含80mg至2g，更优选150mg至1.50g，甚至更优选300mg至1g的不可消化的寡糖。以干重计，所述组合物优选包含0.25重量％至20重量％，更优选0.5重量％至10重量％，甚至更优选1.5重量％至7.5重量％的不可消化的寡糖。更少量的不可消化的寡糖预防肥胖的作用较小，而过高含量将导致胃气胀和腹部不适的副作用。

蛋白质组分

本发明的组合物优选包含蛋白质。所述蛋白质成分优选提供总热量的5至15％。本发明的组合物优选包含提供总热量的6至12％的蛋白质组分。更优选地所述组合物包含以热量计低于9％的蛋白质，更优选地所述组合物包含以总热量计7.2至8.0％，甚至更优选以总热量计7.3至7.7％的蛋白质。低蛋白质浓度有利地确保了较低的胰岛素应答，从而防止婴儿中脂肪细胞的增殖。以总热量计，人乳的蛋白质含量低于牛乳。营养组合物中的蛋白质浓度由蛋白质、肽和游离氨基酸的总和确定。以干重计，所述组合物包含少于12重量％，更优选9.6至12重量％，甚至更优选10至11重量％的蛋白质。以即饮液体产品计，所述组合物每100ml优选包含少于1.5g，更优选1.2至1.5g，甚至更优选1.25至1.35g的蛋白质。

应这样的方式选择蛋白质的来源，即满足对必需氨基酸含量的最低要求并且确保令人满意的生长。因此优选基于牛乳蛋白(如乳清、酪蛋白及其混合物)的蛋白质来源和基于大豆、马铃薯或豌豆的蛋白质来源。在使用乳清蛋白的情况下，所述蛋白质来源优选地为基于酸乳清或甜乳清、乳清蛋白分离物或其混合物，并且可包括α-乳清蛋白和β-乳球蛋白。所述蛋白质来源更优选地为基于已除去酪蛋白-甘油-巨肽(caseino-glyco-macropeptide，CGMP)的酸乳清或甜乳清。从甜乳清蛋白中除去CGMP有利地降低所述甜乳清蛋白的苏氨酸含量。苏氨酸含量的减少还可有利地通过使用酸乳清实现。任选地，所述蛋白质来源可用游离氨基酸(如甲硫氨酸、组氨酸、酪氨酸、精氨酸和/或色氨酸)进行补充以改善氨基酸组成。优选地使用富含α-乳清蛋白的乳清蛋白以优化所述氨基酸组成。使用具有更接近于人乳的最优化氨基酸组成的蛋白质来源，使得能够以低蛋白质浓度——以热量计低于9％，优选7.2至8.0％——提供所有必需氨基酸并仍确保令人满意的生长。如果将已除去CGMP的甜乳清用作蛋白质来源，那么优选地补充以总蛋白计0.1至3重量％的量的游离精氨酸和/或0.1至1.5重量％的量的游离组氨酸。

所述组合物优选包含以干重计至少3重量％的酪蛋白。所述酪蛋白优选是完整的和/或未水解的。

营养组合物

本发明的组合物优选地特别适用于为年龄在36个月以下的人，特别是年龄在24个月以下的婴儿，甚至更优选年龄在18个月以下，最优选年龄在12个月以下的婴儿提供每日营养需求。因此，所述营养组合物是为了或者用于喂养人受试者。本发明的组合物包含脂质，并优选地包含蛋白质并且优选地包含可消化的碳水化合物组分，其中所述脂质组分优选提供总热量的30至60％，所述蛋白质组分优选地提供总热量的5至20％，更优选5至15％，所述可消化的碳水化合物组分优选地提供总热量的25至75％。本发明的组合物优选地包含提供总热量的35至50％的脂质组分，提供总热量的6至12％的蛋白质组分和提供总热量的40至60％的可消化碳水化合物。总热量的量由蛋白质、脂质和可消化的碳水化合物所产生的热量总和确定。

本发明的组合物不是人乳。本发明的组合物包含植物脂质。本发明的组合物优选包含其他级分，例如符合婴儿配方奶国际标准的维生素、矿物质。

在一个实施方案中，本发明的组合物是适于制备用水性溶液(优选用水)复原后的液体组合物的粉末。本发明的组合物优选是待用水复原的粉末。发明人惊讶地发现所述脂质小球的尺寸和极性脂质包衣在干燥步骤和随后的复原中保持不变。较大脂质小球的存在可能会对所述液体组合物的长期稳定性有轻微的负面影响。但是，在48h——这比将粉末复原为即饮液体与饮用所述液体之间的时间(少于24小时，一般是1小时内)长很多——内未观察到脂质和水层的分离。因此粉末形式的所述组合物和大脂质小球在本发明中额外益处。

为了满足婴儿的热量需求，本发明组合物优选含有50至200kcal/100ml液体，更优选60至90kcal/100ml液体，甚至更优选60至75kcal/100ml液体。这种热量密度确保水与热量消耗之间的最佳比例。本发明组合物的摩尔渗透压浓度优选地为150至420mOsmol/l，更优选260至320mOsmol/l。低摩尔渗透压浓度旨在减小胃肠道压力。压力可诱导脂肪细胞形成。

所述组合物优选是液体形式，在布氏粘度计(Brookfield viscometer)中于20℃下以100s^-1的剪切速率测量的粘度低于35mPa.s，更优选低于6mPa.s。所述组合物合适地为以可用水复原形成液体的粉末形式，或者为以应用水稀释的液体浓缩物形式。当所述组合物是液体形式时，优选的每日给予体积是约80至2500ml，更优选每日约450至1000ml。

婴儿

脂肪细胞在生命的最初36个月中增殖，而在青春期以更有限的方式增殖。脂肪细胞的量对于以后生活中的脂肪量、脂肪组织和/或肥胖程度是重要的决定因素。因此，本发明的组合物优选在生命的最初3年中给予人受试者。在本发明用途的一个实施方案中，所述营养组合物用于喂养年龄为0至36个月的人受试者。已发现在生命最初12个月中脂肪细胞增殖显著，并且产期脂肪细胞增殖最适度。因此，特别优选将本发明的组合物给予处于该生命时期的人受试者。因此本发明的组合物优选给予0-24月龄的人，更优选给予0-18月龄的人，最优选给予0-12月龄的人。本发明尤其旨在在以后的生活中防止肥胖，并且优选并非肥胖治疗。因此，本发明的组合物优选给予不肥胖或未超重的婴儿和/或幼儿。在本发明用途的一个实施方案中，所述营养组合物用于喂养不肥胖的人受试者。本发明的组合物优选用于具有与胎龄相称的重量的婴儿。尽管脂肪细胞增殖在生命的最初36个月中和青春期最显著，然而在36个月和青春期之间也形成较少数量的脂肪细胞。因此在本发明的一个实施方案中，优选将本发明组合物给予年龄最大为5岁，更优选最大为10岁，更优选最大为13岁的受试者。

本发明的组合物优选地用于早产或者相对胎龄身材较小的婴儿。这些婴儿在出生后经历追赶式生长，这是在以后的生活中形成肥胖和/或过多脂肪量的额外风险。所述组合物优选用于相对胎龄身材较大的婴儿。这些婴儿在以后的生活中形成肥胖和/或过多脂肪量的风险增加。所述组合物优选用于由患有肥胖和/或糖尿病的母亲生产的婴儿。这些婴儿在以后的生活中形成肥胖和/或过多脂肪量的风险增加。

应用

本发明的组合物优选经口给予婴儿。本发明的组合物还旨在在年龄超过36个月时防止肥胖的发生和/或降低脂肪量。在一个实施方案中，本发明的方法用于在受试者年龄大于36个月时，优选在受试者年龄大于5岁，特别是大于13岁，更特别是大于18岁时防止肥胖，减少肥胖风险和/或改善所述人受试者的身体成分。在一个实施方案中，本发明的方法或本发明的营养组合物用于喂养年龄为0至36个月的人受试者，并且用于在所述受试者年龄大于36个月时防止肥胖，减少肥胖风险和/或改善身体成分，优选在所述受试者年龄大于5岁、特别是大于13岁、更特别是大于18岁时防止肥胖，减少肥胖风险和/或改善身体成分。在一个实施方案中，所述肥胖的预防、肥胖风险的减少和/或身体成分的改善发生在以后的生活中。所谓以后的生活是指晚于食用所述饮食时年龄的年龄，优选晚于所述年龄至少1年。在一个实施方案中，本发明的方法或本发明的营养组合物用于预防内脏肥胖和/或用于减少内脏脂肪和皮下脂肪的比例。

发明人惊讶地发现当小鼠在婴儿和儿童时期被喂养包含大脂肪小球的食物组合物时，与在婴儿和儿童时期被喂养具有类似脂肪酸组成但脂肪小球尺寸较小的食物组合物的小鼠相比，观察到对以后生活中身体成分的不同并且显著的影响。在第42天——其相当于人儿童期的时间点——没有观察到两组之间在生长(重量)上的差异，但是从第42天起给两组喂养高脂肪的西式饮食。令人惊讶地，在第126天——相当于人成人期的时间点——在转为所述西式饮食之前已食用本发明食物组合物的小鼠，与已接受对照组合物的小鼠相比，具有显著较低的脂肪量和较低的相对脂肪量。在进一步的实验中证明与没有包被层的大脂肪球相比，在这些饮食脂质小球周围存在极性脂质的包被层或外层甚至进一步降低了脂肪量和相对脂肪量。发明人还惊讶地发现与所述对照饮食相比，在婴儿期给予包含较大脂肪小球的饮食特别导致在以后生活中内脏脂肪量的减少，即导致在以后生活中内脏肥胖减少。这是有利的，因为内脏肥胖具体而言是与健康问题的相关程度最大。此外，还观察到脂肪细胞肥大下降。由脂肪细胞肥大引起的肥胖被认为指示以后生活中发生肥胖的指标，并且与脂肪细胞增生引起的肥胖相比与健康问题(例如胰岛素抵抗)的相关性更大。这进一步表明所述饮食对肥胖的治疗或预防(这在婴儿中是不合乎需要的)没有急性作用但是对预防在以后生活中发生肥胖具有预设设计作用。

在本说明书及其权利要求中，动词“包含”及其变化形式用于以其非限制性含义表示包括该词之后的项目，但也不排除未具体提到的项目。此外，由不定冠词“一个”或“一种”提及的元素并不排除存在多于一种所述元素的可能性，除非上下文明确规定有且仅有一种所述元素。因此不定冠词“一个”或“一种”一般指“至少一种”。

实施例

实施例1：制备具有较大脂质小球尺寸的IMF

实施例1A：

制备一种婴儿配方奶，每kg粉末含有4800kcal、248g脂质、540g可消化的碳水化合物、55g不可消化的碳水化合物和103g蛋白质。使用BAEF粉末(Corman，Goé，Belgium)、植物油混合物、脱矿物质乳清粉末、乳糖和不可消化的寡糖(重量比为9/1的低聚半乳糖和长链低聚果糖)制备所述组合物。还使用了本领域中已知的维生素、矿物质、微量元素。

BAEF的量为使得所述组合物中存在以总脂质计7.24重量％的磷脂(来自BAEF)。基于所述油混合物中的少量磷脂，磷脂的总量为以总脂质计7.39重量％。BAEF还提供少量的胆固醇(以所述婴儿配方奶的总脂质计约0.08重量％)和鞘糖脂(以所述婴儿配方奶的总脂质计约1.65重量％)。在室温下通过搅拌将所述BAEF粉末与低聚半乳糖、乳糖、维生素预混合物和矿物质预混合物在水中混合。使用氢氧化钾将pH调节至6.8-7.0。所述混合物的干重物质为约27％。将所述混合物加热至60℃。将所述植物油混合物也加热至60℃并加入到所述水相中，并且用Ultra-Turrax T50以5000-10000rpm搅拌约30-60秒。随后加入除盐水以达到约15％的干物质含量。

随后在Niro Suavi NS 2006 H均化器中以第一步100bar和第二步50bar的压力将所述油-水混合物均质化。温度是60℃。随后加入脱矿质的乳清粉末以达到18％的最终干物质含量。将所述产物在125℃下进行UHT处理30秒。通过喷雾干燥将所述产物干燥。将麦芽糖糊精连同长链菊粉干混入所述粉末中。用Mastersizer 20000(Malvern Instruments，Malvern UK)测量所述脂质小球的尺寸。所述体积众数直径是7.3μm。第二个小很多的峰位于0.52μm。以总脂质体积计，直径在2至12μm之间的脂质小球的体积％是71％。经激光共聚焦显微术检查发现，在喷雾干燥前和用水将所述经喷雾干燥的粉末复原后，本发明的较大脂质小球均被磷脂包被。两种情况下，所述脂质小球都被磷脂层覆盖。使用Annexin V Alexa Fluor 488(InVitrogen分子探针)作为荧光探针标记磷脂，并使用Nile Red(Sigma-Aldrich)作为荧光探针标记甘油三酯。在标记所述乳样本后，加入用于减少颗粒运动的Vectrahield封固剂(Vector laboratories inc.，Burliname USA)以及光漂白剂。使用激发波长为488/543/633nm的蔡斯激光扫描显微镜以及置于通带505-530和通带560-615的发射光滤光片进行观察。所述脂质小球的尺寸在干燥前和用水复原所述经喷雾干燥的粉末后也是相同的。

如用激光共聚焦扫描显微术所观察到的，标准婴儿配方奶(Nutrilon 1)的脂质小球作为对照没有显示出磷脂上的标记。相反，如用荧光蛋白染料Fast Green FCF所测定的，所述脂质小球被蛋白质所包被。在此标准婴儿乳配方奶中脂质小球的体积众数直径被测量为0.5μm。第二个小很多的峰位于8.1μm。以总脂质体积计，直径为2至12μm的脂质小球的体积％是34％。

表1：不同乳的脂质小球特征

同样分析了人乳，并且显示出所述脂质小球的体积众数直径为5.3μm。以总脂质体积计，大小为2至12μm的脂质小球的体积％为98％。所述脂质小球被磷脂层所包被。

还测量了所述ζ电势和体积加权平均直径。结果示于表1。

实施例1B：

类似于实施例1A制备婴儿配方奶。使用植物油、油溶性维生素和抗氧化剂制备了所述油混合物。在混合前将所述水相和所述油混合物都加热至65℃。将所述油混合物加入到所述水相中并且用Ultra-Turrax T50以5000-1000rpm搅拌30-60秒。该混合物的干重为约26％。在125℃下进行UHT处理30秒，随后冷却至20℃。

对于饮食2、3和4，在Niro Suavi NS 2006 H均化器中分别在5和20bar的压力下分两步将该混合物均质化。对于饮食1，在Niro Suavi NS 2006 H均化器中的均质化压力分别为200和50bar。通过喷雾干燥将所得产物干燥为粉末。将长链菊粉干混入所述粉末中。对于饮食1和2不加入极性脂质。对于饮食1和2，植物甘油磷脂的量为以总脂肪计0.2重量％。饮食1和2不包含鞘脂类和胆固醇。对于饮食3和4使用酪乳粉末。饮食3包含以总脂肪计1.83重量％的甘油磷脂，所述甘油磷脂的约90％来自所述酪乳粉末而已存在于标准IMF中的约10％来自植物油；饮食3还包含乳源鞘脂类，所述鞘脂类大部分(以总脂肪计约0.47重量％)是鞘磷脂，剩余的是鞘糖脂，所述鞘糖脂的大部分(多于60％)是浓度为以总脂肪计约0.13重量％的GD3。饮食3包含以总脂肪计约0.05重量％的乳源胆固醇。饮食4包含的乳源极性脂质量为以饮食3的总脂肪计的乳源极性脂质量的一半。

在饮食3中，在均质化、灭菌和喷雾干燥步骤后对包含这些极性脂质的酪乳粉末进行干混以防止所述脂质小球被包被。在饮食4中所述奶油极性脂质在均质化步骤中存在于水相中以包被所述脂质小球。

用Mastersizer 20000(Malvern Instruments，Malvern UK)测量所述脂质小球的尺寸并且示于表2。通过如上所述的激光共聚焦显微术方法确认饮食4中所述脂质小球的极性脂质包被以及饮食1、2和3中的无包衣情况。

表2：不同乳的脂质小球特征

在室温下储存5个月后，饮食1中脂质小球的尺寸没有改变，其体积众数直径为0.5。饮食2、3和4的体积众数直径也很稳定，分别为4.8μm、7.9μm和6.6μm。

实施例2：实施例2：脂质小球尺寸对成人身体成分的预设作用

将C57/BL6母兽的后代从第15日起断奶。一直给予实验性断奶饮食直至第42日。从第42日至第126日，所有的幼仔都被喂养基于AIN-93G饮食但调整了脂质级分(包含以总脂质计10重量％的脂质，所述脂质的50重量％是猪脂且1％是胆固醇)的相同饮食，所述饮食是典型西式饮食。

用于断奶的实验饮食是：

1)基于婴儿配方奶(IMF)的对照饮食。该饮食每kg包含282g标准IMF(Nutrilon 1)，脂质小球尺寸如实施例1A所述。所述饮食的剩余部分为AIN-93G蛋白质、碳水化合物和纤维。所述饮食中的全部脂质都来自IMF。

2)基于IMF的本发明的饮食。该饮食与饮食1的不同之处在于它含有282g实施例1的IMF，即包含较对照大的脂质小球。所述饮食中的所有脂质都来自IMF。

在第42天时，将所有的小鼠转为包含10重量％脂质的“西式饮食”直至第126天。所述饮食的组成在表3中给出。所述两种实验和自助饮食(cafeteria diet)的脂肪酸组成示于表4。所述两种实验饮食的脂肪酸组成很相似。

表3：每kg实验饮食的组成

n.d.＝未确定

将小鼠每周称重两次。在整个实验中每周确定一次进食情况。为确定身体成分(即脂肪量(FM)和无脂肪质量(FFM))，分别在6周龄、10周龄和14周龄，即出生后42天、70天、98天以及126天使用PIXImus成像器(PIXImus imager，GE Lunar，Madison，WI，USA)通过光密度法在全身麻醉的情况下进行DEXA扫描(双能X射线吸收生物测量法)。在第126天龄处死所述雄性小鼠，解剖并称重器官(即脂肪组织、肝脏和胫骨肌)。分析血液中的瘦素、抵抗素和(禁食)胰岛素。

表4：实验饮食的脂肪酸组成

  饮食1，对照IMF  饮食2，本发明的IMF  西式饮食  C12:0  9.4  8.7  5.3  C14:0  4.4  5.3  2.7  C16:0  18.7  21.3  23.1  C18:0  3.5  5.2  9.0  C18:1 n-9  39.9  37.7  40.5  C18:2 n-6(LA)  15.7  12.6  11.9  C18:3 n-3(ALA)  2.4  2.1  1.3  其他  6.0  7.1  6.7

  n-6  16.0  12.9  11.9  n-3  2.4  2.1  1.3  n-6/n-3  6.58  6.12  9.1  LA/ALA  6.46  6.00  9.15  SFA  39.3  44.4  41.9  MFA  42.1  39.8  42.3  PUFA  18.3  14.9  13.2

结果：

在试验期间未在各组之间观察到对生长(体重)和进食的影响。此外，脂肪量的形成(通过DEXA确定的)在第42天没有显著不同(饮食干预时期的结束时)。

随后在第42天至第126天对所有组进行的西式饮食处理，导致在实验结束时(第126天)身体成分的明显差异，参见表5。与接受对照饮食的幼仔相比，在婴儿期和儿童期接受具有较大脂肪小球的饮食的幼仔在以后生活中形成的脂肪量和相对脂肪量降低。总体重在所述两组之间相当。实验组的瘦体重增加。

表5：体重、瘦体重、脂肪量和相对脂肪量

^*与对照组相比P＜0.05

在对照组中肝脏平均重量为157g(s.e.0.07)，而在实验饮食组中为1.44g(s.e.0.15)。这表明在实验组中脂肪肝减轻。在对照组中胫骨肌为95.3g(平均值，s.e.2.1)，而在实验组中为96.7g(s.e.3.2)。这符合对瘦体重的作用。对脂肪组织的作用示于表6。在实验组中，动物显示出较高量的棕脂肪组织(BAT)，但是白脂肪组织(WAT)如腹膜后(rp)脂肪、腹股沟(i)脂肪和附睾(e)脂肪的量较低。棕脂肪组织的存在对婴儿的隔热有利。白脂肪组织存在于成人及婴儿中并用于能量储存。较低的内脏脂肪量(即eWAT和rpWAT)也是有利的，因为它会减少胰岛素不敏感或胰岛素抵抗的风险。

表6：第126天小鼠中的脂肪组织量

  脂肪组织  饮食1，对照IMF  饮食2，本发明的IMF  BAT mg平均值(s.e.)  150.0(9.0)  180.4(16.5)  rpWAT mg平均值(s.e.)  379.0(31.6)  349.3(35.5)  iWAT mg平均值(s.e.)  772.3(43.9)  665.5(50.5)  eWAT mg平均值(s.e.)  1380(100)  1300(130)

禁食胰岛素水平在实验组(1200单位)中比在对照组(1470单位)中低。这是代表脂肪细胞减少的信号。瘦素水平在实验组(6000单位)中比在对照组(9500单位)中少。抵抗素在实验组(1350)中也比在对照组(1550)中少。这分别表明食欲正常和肥胖趋势(即脂肪量增加)下降。

这些结果证明以后生活中的脂肪量、相对脂肪量和/或肥胖可通过幼年时的脂质小球尺寸更大的饮食来明显地加以降低。结论是包含脂质构造改变的脂质小球的食物以这样的方式在幼年时预设和/或影响身体：即在以后的生活中形成更健康的身体成分，具有更少的脂肪量、相对脂肪量和/或具有增加的瘦体重。

实施例3：脂质小球尺寸对成人身体成分的预设作用

除实验在第98天而不是第128天结束外，使用与在实施例2中所用相同的实验动物模型和安排。

用于断奶的实验饮食是：

1)基于婴儿配方奶(IMF)的对照饮食。该饮食每kg包含282g标准IMF，实施例1B的IMF1，即小的脂质小球，并且未加入极性脂质。所述饮食的剩余部分是AIN-93G蛋白、碳水化合物和纤维。所述饮食中存在的所有脂质都来自IMF。

2)基于IMF的本发明饮食。该饮食与饮食1的不同之处在于它包含282g实施例1B的IMF 2，即包含比对照大的脂质小球并且未加入极性脂质。所述饮食中存在的所有脂质都来自IMF。

3)基于IMF并添加磷脂的本发明饮食。该饮食与饮食2的不同之处在于它包含282g实施例1B的IMF 3，即包含比对照大的脂质小球并且加入了极性脂质，所述极性脂质不是位于所述脂质小球的外表面处。所述饮食中存在的所有脂质都来自IMF。

4)基于IMF的本发明饮食。该饮食与饮食3的不同之处在于它包含282g实施例1B的IMF 4，即包含比对照大的脂质小球，所述脂质小球被乳源极性脂质所包被。所述饮食中存在的所有脂质都来自IMF。

所述饮食的组成与实施例2表3中的组成相似。所述两种实验和自助饮食(cafeteria diet)的脂肪酸组成与实施例2表4中的组成相似，计算出的亚油酸(LA)以总脂肪酸计在饮食1和2中为14％而在饮食3和4中为13.2％，α亚麻酸(ALA)以总脂质计在饮食1和2中为2.6％而在饮食3和4中为2.5％，并且LA/ALA分别在饮食1和2中为5.4而在饮食3和4中为5.3。DHA的量在所有4种饮食中都是0.2重量％，ARA的量在饮食1和2中为0.35重量％而在饮食3和4中为0.36重量％。

结果：

在实验期间未在各组之间观察到对生长(体重)和进食的影响。此外，体重和脂肪量的形成(通过DEXA确定的)在第42天(饮食干预时期结束时)时没有显著不同。随后在第42天至第98天对所有组的西式饮食处理，导致在实验结束时(第98天)身体成分的明显差异，参见表7。与接受对照饮食的小鼠相比，在婴儿期和儿童期接受具有较大脂肪小球的小鼠在以后生活中形成的脂肪量和相对脂肪量降低。

表7：脂肪量和相对脂肪量

^*P＜0.05

从上面的结果可推出脂质小球尺寸的增大导致脂肪量和相对脂肪量的降低(比较饮食1与饮食2)。当所述脂质小球被来自乳脂的极性脂质包被时，脂肪量和相对脂肪量降低得更多(对比饮食4与饮食1或饮食2)。发明人认为这种改善作用不仅是由于极性脂质本身，而且还可能是由于所述脂质小球的包衣，因为饮食4的作用比饮食3中的作用显著很多。

表8：第98天时小鼠的脂肪组织量

  脂肪组织 饮食1  饮食2 饮食3  饮食4  iWAT^*平均值(s.e.) 520(40)  550(40) 500(30)  410(30)  periWAT平均值(s.e.) 64(8)  41(5) 57(7)  47(6)  Rp WAT平均值(s.e.) 280(30)  280(20) 270(20)  230(30)  eWAT平均值(s.e.) 1070(110)  1010(70) 980(80)  870(110)  iWAT/(periWAT+rpWAT) 1.51  1.71 1.53  1.48

^*WAT：白脂肪组织

i：腹股沟的    peri：肾周围的

rp：腹膜后的 e：附睾的

对脂肪组织的影响示于表8。与皮下脂肪相比，较大的脂质小球尤其导致内脏脂肪(肾周围脂肪和附睾脂肪)的减少(比较饮食1和饮食2)。

白脂肪组织存在于成人及婴儿中并用于能量储存。较低的内脏脂肪量(即eWAT和rpWAT)是有利的，因为它会减少胰岛素不敏感或胰岛素抵抗的风险。

在第98天测定喂养饮食1和饮食4的小鼠的脂肪组织(eWAT和rpWAT)中的细胞尺寸。分离出脂肪细胞并且通过对显微照片的图像分析确定平均直径。体积被计算为V＝(π/6)(3σ²+X²)X，其中X和σ²是所述直径的平均值和方差(variance)。喂养饮食1的小鼠的eWAT(代表内脏脂肪)中脂肪细胞的平均体积是5.1×10⁶μm³(s.e.0.56×10⁶)而对于喂养饮食4的小鼠来说是4.3×10⁶μm³(s.e.0.52×10⁶)。iWAT(代表皮下脂肪)中脂肪细胞的平均体积更小。其在喂养饮食1的小鼠中是2.0×10⁶μm³(s.e.0.16×10⁶)而在喂养饮食4的小鼠中是1.7×10⁶μm³(s.e.0.1.4×10⁶)。在喂养饮食4的小鼠中细胞的数目略多。未观察到肥胖脂肪量的脂质含量百分比和脂质密度的差异。

这些结果证明以后生活中的脂肪量、相对脂肪量和/或肥胖可通过幼年时的脂质小球尺寸更大的来明显地加以降低。当所述较大脂质小球被极性脂质包被时，这些作用甚至更显著。此外，较大的脂质小球在降低内脏肥胖方面具有特别作用。结论是包含脂质构造改变的脂质小球的食物以这样的方式在幼年时预设和/或影响身体：即在相似的条件下生长的过程中，在以后的生活中形成更健康的身体成分，具有更少的脂肪量和/或相对脂肪量和/或具有更大的瘦体重。

实施例4 具有较大脂质小球尺寸的婴儿营养物

一种婴儿配方，每kg粉末含有4810kcal、255g脂质、533g可消化的碳水化合物、58g不可消化的碳水化合物(重量比为9/1的低聚半乳糖和长链低聚果糖)、96g蛋白质，以及本领域已知的维生素、矿物质和微量元素。

所述脂质组合物中，所述脂质的0.57重量％由磷脂组成。所述组合物包含以总脂质计约0.17重量％的鞘糖脂。所述组合物包含以总脂质计约0.006重量％的胆固醇。鞘糖脂和胆固醇SM-2粉末(Corman，Goé，Belgium)被用作磷脂来源。所述脂质的约97-98％是植物脂质，其余是乳脂、鱼油和微生物油。LC-PUFA的量为以总脂肪酸计约0.64重量％。LA/ALA比例为5.2。

类似于实施例1进行均质化。所述体积众数直径大于1μm。大小为2至12μm的脂质小球的体积％为以总脂质体积计大于45％。