香棒虫草中甘露醇含量的检测方法

摘要

本发明公开了香棒虫草中甘露醇含量的检测方法，属于中药成分含量测定技术领域，利用气相色谱法测定香棒虫草中甘露醇的含量，以达到高效准确的测定出山西特有的香棒虫草中甘露醇的含量。包括以下步骤：对照品溶液的制备；供试品溶液的制备；采用气相色谱仪进行测定，色谱条件为：柱温的起始温度为220℃，保持1min.以10℃/min的速率升至220℃-230℃，保持26min，气化室和氢火焰离子化检测器温度为300℃，H

说明书

技术领域

本发明属于中药成分含量测定技术领域，特别涉及一种香棒虫草中甘露醇含量的检测方法。

背景技术

中药标准现代化是中医药现代化的重要组成部分，中药材标准现代化是中药标准现代化的基础。选择中成药的主要药味中具有标志性的化学成分为指标成分，测定其含量，是化学法测定中成药含量的主要手段；发明与通用的药品标准（特别是《中国药典》）收载的中药材所含指标成分的含量测定方法具有一致性的中成药含量测定方法，是化学法测定中成药含量的主流方向之一。

目前，对香棒虫草中甘露醇含量的检测方法主要有以下几种：

1.容量法：用高碘酸将甘露醇氧化成甲醛，产生的碘酸和过量的高碘酸对碘化钾作用，游离出来的单质碘用硫代硫酸钠滴定，和空白试验值之差求出含量；

2.比色法：高碘酸钠与甘露醇反应产生黄色的3，5—二乙酰—1，4脱氢二甲基吡啶，此化合物在412nm时吸收作用最大，故可用比色法测；

3.薄层扫描法：汪宝琪等将样品用95%乙醇回流提取后用无水乙醇溶解过滤作为供试品溶液，用1号展开剂—2号展开剂—冰醋酸（60：40：1）上行展开[1号为二氧六环—乙酸异戊酯—异丙醇—水（5：15：5：2），2号为异丙醇—乙酸乙酯—水（54：7：8）]，展开后用0.015mol/L的高碘酸钾的0.12mol/L盐酸溶液和0.5%联苯胺乙醇溶液，在λs=295nm, λR=370nm条件下测定；

对甘露醇的测定，常用方法有容量法和比色法，但容量法的弊端是仅限于纯品测定，若是制剂或多种化合物的集合体，则组分中还原性物质也可被高碘酸氧化，结果使测得的含量比实际值偏高；而比色法的缺点是专属性差，易产生误差；由于各地香棒虫草中甘露醇的含量均有所不同，所以用薄层扫描法进行测定，误差较大。

由于各地香棒虫草中甘露醇的含量均有所不同，对于山西特有的香棒虫草，以上几种方法均不能高效准确的测定出其甘露醇的含量，为了解决这一问题，本发明用气相色谱法测定山西特有香棒虫草含有的甘露醇。

发明内容

本发明的目的是提供一种香棒虫草中甘露醇含量的检测方法，本发明是利用气相色谱法测定香棒虫草中甘露醇的含量，以达到高效准确的测定出山西特有的香棒虫草中甘露醇的含量。

本发明香棒虫草中甘露醇含量的检测方法，包括以下步骤：

（1）对照品溶液的制备：精密称取100℃干燥至恒重的甘露醇对照品30mg于10ml容量瓶中，加体积比为1：1的吡啶—醋酐5ml，于100℃水浴中乙酰化反应40min，放冷后用吡啶定容至刻度，摇匀，即得对照品溶液；

（2）供试品溶液的制备：将香棒虫草粉碎过筛，精密称取1g于索氏提取器中加无水乙醇提取5.5-6.5小时至近无色，提取液回收至干，残渣加体积比为1：1的吡啶—醋酐40ml，于100℃水浴中乙酰化40min，放冷后移至50ml容量瓶中用吡啶定容至刻度，摇匀，即得供试品溶液；

（3）采用气相色谱仪进行测定，色谱条件为：柱温的起始温度为220℃，保持1min.以10℃/min的速率升至220℃-230℃，保持26min，气化室和氢火焰离子化检测器温度为300℃，H₂流速34-40ml/min，空气流速350-400ml/min，N₂流速30-35/ min,分流比50：1。

进一步地，所述的H₂流速34.3ml/min,N₂流速33ml/min,空气流速351.9ml/min。

分别精密吸取对照品溶液0.5，1，1.5，2，2.5ml于5ml容量瓶中，用吡啶定容至刻度，摇匀，上气相色谱仪测定，进样量1μl，以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标绘制标准曲线，结果见表1和图1，

表1

甘露醇的量（μg）  A0.3377902890.67541696551.01312630841.35083529231.6885450137

表明甘露醇在0.3377～１.6885μg之间有良好的线性关系。

分别选择甲醇，乙醇、氺和无水乙醇作为溶媒，提取后甘露醇含量如表2所示，

表2 不同提取溶媒对甘露醇含量的影响

提取溶媒甘露醇含量（mg/g）50%甲醇38.250%乙醇40.8水16.2无水乙醇56.7

结果表明无水乙醇提取效率最高，最终确定为以无水乙醇作为提取溶媒。

依据本发明方法进行准确度试验，采用加样回收法，结果如表3所示，

表3

从上表可得，本发明方法准确度良好。

本发明的优点是简便、快速、准确，重现性好，可更科学、准确地测定山西特有的香棒虫草中甘露醇含量,有效地提高产品的质量。

附图说明

图1为甘露醇标准曲线图。

具体实施方式

实施例1

香棒虫草中甘露醇含量的检测方法，包括以下步骤：

（1）对照品溶液的制备：精密称取100℃干燥至恒重的甘露醇对照品30mg于10ml容量瓶中，加体积比为1：1的吡啶—醋酐5ml，于100℃水浴中乙酰化反应40min，放冷后用吡啶定容至刻度，摇匀，即得对照品溶液；

（2）供试品溶液的制备：将香棒虫草粉碎过筛，精密称取1g于索氏提取器中加无水乙醇提取5.5小时至近无色，提取液回收至干，残渣加体积比为1：1的吡啶—醋酐40ml，于100℃水浴中乙酰化40min，放冷后移至50ml容量瓶中用吡啶定容至刻度，摇匀，即得供试品溶液；

（3）采用气相色谱仪进行测定，色谱条件为：柱温的起始温度为220℃，保持1min.以10℃/min的速率升至220℃℃，保持26min，气化室和氢火焰离子化检测器温度为300℃，H₂流速40ml/min，空气流速350ml/min，N₂流速30/ min,分流比50：1。

实施例2

香棒虫草中甘露醇含量的检测方法，包括以下步骤：

（1）对照品溶液的制备：精密称取100℃干燥至恒重的甘露醇对照品30mg于10ml容量瓶中，加体积比为1：1的吡啶—醋酐5ml，于100℃水浴中乙酰化反应40min，放冷后用吡啶定容至刻度，摇匀，即得对照品溶液；

（2）供试品溶液的制备：将香棒虫草粉碎过筛，精密称取1g于索氏提取器中加无水乙醇提取6.5小时至近无色，提取液回收至干，残渣加体积比为1：1的吡啶—醋酐40ml，于100℃水浴中乙酰化40min，放冷后移至50ml容量瓶中用吡啶定容至刻度，摇匀，即得供试品溶液；

（3）采用气相色谱仪进行测定，色谱条件为：柱温的起始温度为220℃，保持1min.以10℃/min的速率升至230℃℃，保持26min，气化室和氢火焰离子化检测器温度为300℃，H₂流速34ml/min，空气流速400ml/min，N₂流速35/ min,分流比50：1。

实施例3

香棒虫草中甘露醇含量的检测方法，包括以下步骤：

（1）对照品溶液的制备：精密称取100℃干燥至恒重的甘露醇对照品30mg于10ml容量瓶中，加体积比为1：1的吡啶—醋酐5ml，于100℃水浴中乙酰化反应40min，放冷后用吡啶定容至刻度，摇匀，即得对照品溶液；

（2）供试品溶液的制备：将香棒虫草粉碎过筛，精密称取1g于索氏提取器中加无水乙醇提取6小时至近无色，提取液回收至干，残渣加体积比为1：1的吡啶—醋酐40ml，于100℃水浴中乙酰化40min，放冷后移至50ml容量瓶中用吡啶定容至刻度，摇匀，即得供试品溶液；

（3）采用气相色谱仪进行测定，色谱条件为：柱温的起始温度为220℃，保持1min.以10℃/min的速率升至225℃℃，保持26min，气化室和氢火焰离子化检测器温度为300℃，H₂流速34.3ml/min,N₂流速33ml/min,空气流速351.9ml/min,分流比50：1。