一种用高效液相色谱法测定盐酸罗匹尼罗有关物质的方法

摘要

本发明公开了一种盐酸罗匹尼罗有关物质的分离与分析测定方法，采用苯基硅烷键合硅胶为填充剂色谱柱(250mm×4.6mm，5μm)，以阴离子对缓冲盐溶液-有机改性剂为流动相，用于分离分析盐酸罗匹尼罗的有关物质。

说明书

技术领域

本发明属涉及一种高效液相色谱分离分析方法，特别是一种用高效液相色谱法分离分析盐酸罗匹尼罗有关物质的方法。

背景技术

盐酸罗匹尼罗是一种治疗帕金森病的新型多巴胺激动剂，主要用于治疗帕金森病。化学名为4-(2-(dipropylamino)ethyl)indolin-2-onehydrochloride，其结构式：

分子式：C₁₆H₂₅ClN₂O，分子量：296.17

本法有效的对盐酸罗匹尼罗进行纯度分析，本试验采用普通的色谱柱(苯基色谱柱)快速准确的实现了盐酸罗匹尼罗有关物质的测定，从而实现了盐酸罗匹尼罗杂质的控制，保证了盐酸罗匹尼罗的质量可控，在的合成和制剂过程的质量控制方面具有重要的现实意义。

发明内容

本发明的目的在于提供一种分离分析盐酸罗匹尼罗有关物质的高效液相色谱方法，从而实现对盐酸罗匹尼罗的质量控制。

申请人发现，用苯基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，以阴离子对缓冲盐溶液-有机改性剂为流动相，可以实现盐酸罗匹尼罗与其中间体的分离与分析，从而可以准确控制盐酸罗匹尼罗及其制剂的质量。

本发明所说的用高效液相色谱法分离分析盐酸罗匹尼罗的方法，选用苯基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，以庚烷磺酸钠对磷酸二氢钾缓冲液(pH 5.0)-乙腈为流动相。

本发明采用的色谱柱为苯基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱(250mm×4.6mm，5μm)。

本发明采用的有机改性剂选自乙腈、甲醇，最优选的有机改性剂为乙腈。

本发明方法的流动相中，庚烷磺酸钠对磷酸二氢钾缓冲液(pH 5.0)-有机改性剂混合溶液的体积比为80∶20～75∶25。

本发明方法的庚烷磺酸钠对磷酸二氢钾缓冲液pH值为5.0。

本发明所述的分离分析方法，可按照以下方法实现：

(1)称取盐酸罗匹尼罗样品适量，用流动相溶解样品，配制成每1ml约含盐酸罗匹尼罗0.2mg～2mg的样品溶液。

(2)设置流动相流速为0.8～1.2ml/min，检测波长为250nm。

(3)取步骤(1)的样品溶液5-40μl注入液相色谱仪，完成盐酸罗匹尼罗的分离与分析。

其中：

高效液相色谱仪：岛津：LC-10ATvp，SPD-10Avp，SCL-10Avp，DGU-12A

色谱柱：苯基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱(250mm×4.6mm，5μm)

流动相：庚烷磺酸钠对磷酸二氢钾缓冲液(pH 5.0)-乙腈＝77∶23

流速：1.0ml/min

检测波长：250nm

柱温：室温

进样体积：10μl

本发明能够有效测定盐酸罗匹尼罗的有关物质，方法简单快捷，分析灵敏度高，结果准确可靠。可用于盐酸罗匹尼罗的质量控制，确保原料药和制剂的质量可控。

附图说明

图1实施例1，庚烷磺酸钠对磷酸二氢钾缓冲液(pH 5.0)-乙腈(77∶23)盐酸罗匹尼罗与中间体混合样品高效液相色谱图

图2实施例2，庚烷磺酸钠对磷酸二氢钾缓冲液(pH 5.0)-乙腈(77∶23)盐酸罗匹尼罗高效液相色谱图

图3实施例3，庚烷磺酸钠对磷酸二氢钾缓冲液(pH 5.0)-乙腈(80∶20)盐酸罗匹尼罗与中间体混合样品高效液相色谱图

具体实施方式：以下实施例用于进一步理解本发明，但不限于本实施的范围

实施例1

仪器与条件

高效液相色谱仪：日本岛津：LC-10ATvp，SPD-10Avp

色谱柱：苯基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱(250mm×4.6mm，5μm)

流动相：庚烷磺酸钠磷酸二氢钾缓冲液(pH 5.0)-乙腈(77∶23)

流速：1.0ml/min

检测波长：250nm

柱温：室温

进样体积：10μl

实验步骤

称取盐酸罗匹尼罗10mg，中间体I、II、III各2mg，置于10ml容量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。取供试品溶液，在上述色谱条件下进行高效液相色谱分析，记录色谱图，结果见附图1。

图1中保留时间为10.4分钟的色谱峰为盐酸罗匹尼罗的色谱峰，保留时间为6.9分钟、8.3分钟、20.6分钟，分别为中间体I、II、III的色谱峰。色谱图表明盐酸罗匹尼罗与其中间体及杂质可以在同一色谱条件下达到良好的分离。

实施例2

仪器与条件

高效液相色谱仪：日本岛津：LC-10TAvp，SPD-10Avp

色谱柱：苯基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱(250mm×4.6mm，5μm)

流动相：庚烷磺酸钠磷酸二氢钾缓冲液(pH 5.0)-乙腈(77∶23)

流速：1.0ml/min

检测波长：250nm

柱温：室温

进样体积：10μl

实验步骤

称取盐酸罗匹尼罗10mg，置于10ml容量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。取供试品溶液，在上述色谱条件下进行高效液相色谱分析，记录色谱图，结果见附图2。

实施例3

仪器与条件

高效液相色谱仪：日本岛津：LC-10ATvp，SPD-10Avp

色谱柱：苯基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱(250mm×4.6mm，5μm)

流动相：庚烷磺酸钠磷酸二氢钾缓冲液(pH 5.0)-乙腈(80∶20)

流速：1.0ml/min

检测波长：250nm

柱温：室温

进样体积：10μl

实验步骤

称取盐酸罗匹尼罗10mg，中间体I、II、III各2mg，置于10ml容量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。取供试品溶液，在上述色谱条件下进行高效液相色谱分析，记录色谱图，结果见附图3。