使用组胺H4拮抗剂治疗术后粘连

摘要

本发明包括用于抑制经过外科手术的体腔内的组织表面之间术后粘连形成的方法，所述方法涉及将组胺H4受体拮抗剂全身和/或直接施用到体腔内的组织表面，并且涉及递送载体和组合物，所述递送载体和所述组合物适用于将药物局部、非全身施用到体内和直接施用到经过外科手术的体腔内的组织。

说明书

技术领域

本发明涉及使用组胺H4受体拮抗剂抑制或预防在体腔中的组织表面之间形成术后粘连，以及涉及包含组胺H4受体拮抗剂的组合物，以便施用于身体，从而抑制或预防术后粘连。

背景技术

粘连形成(尤其是在例如腹膜、胸部、以及脊柱手术后)是术后并发症和死亡发生的一个主要根源。例如，阑尾切除术和妇科手术是最常见的外科手术，其涉及临床显著的粘连形成。腹膜内的粘连的最严重并发症是肠梗阻。此外，粘连与女性的慢性或复发性骨盆痛和不孕、脊椎中的神经压迫和疼痛、胸部手术后的术后并发症、以及重建手术后手丧失活动性有关。

粘连形成的发病机理是复杂的，并且没有被完全理解。据信，第一步涉及过量的纤维蛋白沉积从而形成一个支架。随后细胞组分(包括诸如成纤维细胞的细胞)对纤维蛋白支架进行组织。

已积极研究了预防粘连形成的各种方法(diZerega，G.S.& Rodgers，K.E.“Prevention of Postoperative Adhesions，”in“The Peritoneum，”diZerega，G.S.& Rodgers，K.E.，eds.，Springer-Verlag，New York，pp.307-369(1992)(diZerega，G.S.和Rodgers，K.E.，“预防术后粘连”，《腹膜》，diZerega，G.S.和Rodgers，K.E.编辑，Springer-Verlag，New York，第307-369页，1992年))。一般来讲，治疗属于以下若干类之一：限制组织对合(apposition)；减少局部组织发炎；预防纤维蛋白沉积和除去纤维蛋白沉积；减少细胞(例如成纤维细胞)增殖；以及抑制胶原。

例如，已使用物理屏障通过在康复的关键期限制组织对合来尝试预防粘连形成，从而最大程度地减少组织表面之间的纤维蛋白基质的发展。可采用的阻隔剂包括机械屏障和粘稠溶液。使用薄膜屏障(例如聚(四氟乙烯))已经获得了混合功效结果。此类薄膜也不太理想，因为它必须被缝合到位，并且是不可吸收的。可吸收屏障将是优选的，但一些研究已证实这些屏障的功效在预防粘连方面不太理想。液体屏障也已考虑用于预防粘连，例如，在动物模型中，硫酸软骨素和羧甲基纤维素已显示具有一些应用前景。

已研究的其他方法涉及去除纤维蛋白沉积。虽然蛋白水解酶(如胃蛋白酶，胰蛋白酶和木瓜蛋白酶)理论上应该扩充局部纤溶系统并限制粘连形成，但是这些酶被腹膜渗出物迅速中和，使它们对于粘连的预防几乎是无用的。虽然一直提倡使用各种纤溶剂(例如，纤溶酶、链激酶和尿激酶)，但是在术后治疗中临床使用这些酶的一个潜在并发症是由给药引起的出血过多。

另外，已经评估了胶原抑制剂。胶原的生物合成涉及独特的原α链的翻译后修饰。脯氨酰和赖氨酰残基的羟基化(即胶原形成的关键步骤)对于正常的三螺旋形成和分子间交联是至关重要的。当翻译后加工被抑制时，非螺旋原胶原形成，其随后被胞内蛋白酶降解，并且作为非功能蛋白质被低速分泌到胞外基质。已证明，脯氨酸类似物(例如顺式-4-羟基-L-脯氨酸(cHyp))掺入新生的原α链，减少了胶原在细胞外的积累。据信，此类介质通过抑制胶原合成，从而避免某些纤维变性的病理生理后遗症(例如动脉硬化症和高血压)而更普遍地起作用。通过由多肽链间的空间位阻引起的键角形变，cHyp抑制原α链折叠成稳定的三螺旋。其他脯氨酸类似物(例如顺式-4-氟脯氨酸、顺式-4-溴脯氨酸和3，4-脱氢脯氨酸)具有类似的效果，但是也能抑制其他翻译后步骤。化合物3，4-脱氢脯氨酸是也能够抑制其他翻译后步骤的脯氨酸类似物的一个例子。例如，3，4-脱氢脯氨酸抑制脯氨酰羟化酶活性。遗憾的是，也认识到，如果不正确地使用，特别是长期使用时，cHyp可是毒性的，因此其临床应用受到限制。

化合物N-(3，4-二甲氧基肉桂酰)邻氨基苯甲酸(通常称为曲尼司特)在大鼠中也已被检测作为防粘连剂，(Shinya，A.，et.al.(1999)，“The Prevention of Postoperative Intraperitoneal Adhesions by Tranilast：N-(3，4-dimethoxycinnamoyl)Anthranilic Acid，”Jpn J Surg.29：51-54(Shinya，A等人，“使用曲尼司特即N-(3，4-二甲氧基肉桂酰)邻氨基苯甲酸预防术后腹膜内的粘连”，《日本外科学杂志》，第29卷第51-54页，1999年))。在该研究中，Shinya等人在大鼠腹膜内的粘连模型中，在术前和术后使用口服、全身给药。然而，值得注意的是，该研究所用的模型中未进行通过手术部位擦伤造成的局部缺血。因此，据信，不存在这样的创伤类型，其对造成血流损耗和更精确地模拟人的临床表现是必要的。正是此类血流损耗对减少的组织纤溶酶原活性、纤维蛋白沉积和粘连形成的贡献较大。因此，据信，就全身施用曲尼司特在抑制或预防粘连形成方面的功效而言，此类研究的价值和有效性是值得怀疑的。

已经评估了抗炎药物对术后粘连形成的效应，因为它们在应答手术部位的炎症时可限制纤维蛋白渗出物的释放。已经测试了这些药物的两种一般类别：皮质类固醇和非甾体抗炎药物。在动物研究中使用皮质类固醇的结果总体上是令人鼓舞的，并且皮质类固醇的临床应用受到它们的其他药理学性质的限制。非甾体抗炎药物显示有望抑制术后粘连形成(Rodgers，K.E.，“Nonsteroidal anti-inflammatory drugs(NSAIDs)in the treatment of Postsurgical adhesion，”in“Treatment of Post-Surgical Adhesions，”diZerega，G.S.et al.，eds.，Wiley-Liss，New York，pp.119-129(1990)(Rodgers，K.E.，“术后粘连治疗中的非甾体抗炎药物(NSAID)”，《术后粘连治疗》，diZerega，G.S.等人编辑，Wiley-Liss，New York，第119-129页，1990年))然而，如本文所述，另一类抗炎化合物组胺H4受体拮抗剂，已经证明可有效性地抑制和预防体内模型中的术后粘连。

H4受体的调节控制炎性介质的释放和抑制白细胞募集，从而提供预防和/或治疗H4介导的疾病和病症(包括炎症的有害作用)的能力。因为H₄受体优先在免疫活性细胞上表达，所以它与免疫应答期间组胺的调节功能密切相关。

在免疫学和自身免疫疾病中，组胺的生物活性与变应性应答及其有害作用如炎症密切相关。引起炎症应答的事件包括物理刺激(包括外伤)、化学刺激、感染和异物侵袭。炎症应答表征为疼痛、温度升高、发红、肿胀、功能减退或这些特征的组合。

肥大细胞脱粒作用(胞吐作用)释放组胺，导致炎症应答，其最初表征为组胺调节的风团和潮红反应。各种各样的免疫刺激(如变应原或抗体)和非免疫(如化学)刺激可导致肥大细胞的活化、募集和脱粒。肥大细胞活化启动过敏性炎症应答，继而引起进一步促成炎症应答的其他效应细胞的募集。也已显示组胺可诱导小鼠肥大细胞的趋化现象(Hofstra，et al.，2003)。采用源自H₄受体敲除小鼠的肥大细胞不会产生趋化现象。而且，该应答可被H₄-特异性拮抗剂，而不是H₁、H₂或H₃受体拮抗剂阻断(Hofstra，et al.，2003；Thurmond，R.L.，et al.，J.Pharmacol.Exp.Ther.2004，309(1)，404-413)。肥大细胞对组胺的趋化响应是由组胺H₄受体介导的(Thurmond，et al.，2004)。

还已显示嗜酸性粒细胞可向组胺趋化(O′Reilly，M.，et al.，J.Recept.Signal Transduction 2002，22(1-4)，431-448；Buckland，K.F.，et al.，Br.J.Pharmacol.2003，140(6)，1117-1127；Ling et al.，2004)。已经显示，使用H₄选择性配体，组胺诱导的嗜酸性粒细胞的趋化是经由H₄受体介导的(Buckland，et al.，2003；Ling et al.，2004)。组胺治疗后，粘连分子CD11b/CD18(LFA-1)和CD54(ICAM-1)在嗜酸性粒细胞的细胞表面表达量增加(Ling，et al.，2004)。该增加被H₄受体拮抗剂，而不被H₁、H₂、或H₃受体拮抗剂阻断。

组胺H4受体(H₄R)也在树突细胞和T细胞中起作用。在人单核细胞来源的树突细胞中，H₄R的刺激抑制IL-12p70产生，并驱动组胺介导的趋化性(Gutzmer，R.，et al.，J.Immunol.2005，174(9)，5224-5232)。也报道了H₄受体在CD8⁺ T细胞中的作用。Gantner等人(2002)显示H₄和H₂受体都控制组胺诱导的人CD8⁺ T细胞释放IL-16。IL-16可见于变应原或组胺激发性哮喘的支气管肺泡液中(Mashikian，V.M.，et al.，J.Allergy Clin.Immunol.1998，101(6，Part 1)，786-792；Krug，N.，et al.，Am.J.Resp.Crit.Care Med.2000，162(1)，105-111)并且被认为在CD4⁺细胞迁移中很重要。该受体在这些细胞类型中的活性表明了在适应性免疫应答(如在自身免疫疾病中活跃的那些)中的重要作用。

体内H₄受体拮抗剂能够在酵母聚糖诱导的腹膜炎或胸膜炎模型中阻断中性粒细胞增多症(Takeshita，K.，et al.，J.Pharmacol.Exp.Ther.2003，307(3)，1072-1078；Thurmond，et al.，2004)。此外，H₄受体拮抗剂在被广泛使用并被很好表征的结肠炎模型中具有活性(Varga，C.，et al.，Eur.J.Pharmacol.2005，522(1-3)，130-138)。这些结果支持H₄受体拮抗剂具有体内抗炎能力的结论。

本发明涉及使用组胺H4受体拮抗剂抑制或预防术后粘连的形成。可以将此类化合物及其组合物直接递送到手术部位或者进行全身给药，以抑制或预防术后粘连的形成。

发明内容

本发明涉及抑制体内经过外科手术的体腔中的组织表面之间形成术后粘连的方法，该方法包括向体腔中的组织表面施用有效量的至少一种组胺H4受体拮抗剂。在一些实施例中，非全身性地(如直接地)施用化合物。在其他实施例中，在术前或术后或者两种时间的组合，通过全身给药来施用化合物。在其他实施例中，通过非全身给药和全身给药来施用化合物。

在另一个一般性方面，本发明涉及适于局部、非全身给药的递送载体，该载体将药物直接递送到经过外科手术的体腔内的组织，并且包含有效量的至少一种组胺H4受体拮抗剂。

在另一个一般性方面，本发明涉及适用于局部、非全身给药的药物组合物，该药物组合物将药物直接递送到经过外科手术的体腔内的组织，并且包含有效量的至少一种组胺H4受体拮抗剂。该药物组合物还包含适于局部、非全身施用该至少一种组胺H4受体拮抗剂的载体。

本发明的目的是克服或改进常规方法和/或现有技术的至少一种缺点或者提供其有效的备选方法。

由以下具体实施方式和通过实施本发明，本发明的其他实施例、特征和优点将会是显而易见的。

具体实施方式

根据本发明，适用于全身或非全身施用此类化合物到身体组织的某些组胺H4受体拮抗剂和药物组合物的施用方法可用于抑制或预防组织和/或器官表面之间的粘连形成，其最常见的原因是之前的手术。虽然预防任何术后粘连形成将是优选的，但是抑制此类粘连形成是足够的，使得粘连形成的程度足够低，而不出现与粘连形成相关的严重问题，如本文所述。

已经显示本发明的方法和组合物在抑制术后腹膜内的粘连形成是尤其有效的。本发明在其他情况下也是实用的，例如，用于心血管、骨科、胸部、眼科、CNS、重建手术(如手)和其他用途，其中粘连的形成是一个重大问题。此外，还将期望的是，在化疗药的腹膜内给药期间抑制粘连形成或药物分室，或者在止痛药(例如吗啡)的给药期间抑制粘连形成或药物分室。因此，为了不仅提供由治疗剂所寻求的治疗效果，而且还抑制由于此类药物组合物的施用而导致的粘连的形成，组胺H4受体拮抗剂与含有化疗药或其他治疗剂的药物组合物的组合涵盖于本发明的范围内。

本发明是基于这个发现，即当以有效抑制术后粘连形成的量和条件直接施用到组织和体腔时，H4受体拮抗剂化合物，例如(5-氯-1H-吲哚-3-基)-(4-甲基-哌嗪-1-基)甲酮和[5-(4，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-4-甲基-嘧啶-2-基]-[3-(1-甲基-哌啶-4-基)丙基]-胺(已知这些化合物对参与诸如炎症、过敏和哮喘等病症的H4受体具有活性)可用于在外科手术后减少或预防体腔内的组织表面之间的粘连形成。此外，当在术前和/或术后全身给药时，这些化合物是可用的。

参与粘连形成的过程包括(但不限于)：炎症反应、细胞生长和分化、血管生成、胞外基质代谢周转、组织重建和细胞凋亡(Chegini，N(2002)，“Peritoneal Molecular Environment，AdhesionFormation and Clinical Implication，”Frontiers in Bioscience 7，e91-115，April 1，2002(Chegini，N，2002年，“腹膜分子环境、粘连形成和临床意义”，《生物科学前沿》，第7卷第e91-115页，2002年4月1日))然而，这些可能的作用机制中，其本身没有一个可以足以使人预测组胺H4受体拮抗剂化合物在减少粘连形成中是否有用。

尽管本文所公开的具体实施例举例说明了(5-氯-1H-吲哚-3-基)-(4-甲基-哌嗪-1-基)甲酮和[5-(4，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-4-甲基-嘧啶-2-基]-[3-(1-甲基-哌啶-4-基)丙基]-胺对于抑制或预防术后粘连形成是可用的化合物，但应当理解，可设想适用于本发明的其他组胺H4受体拮抗剂。设想在本发明的方法和药物组合物中使用的合适的组胺H4受体拮抗剂包括：

a)苯并咪唑基酰胺和硫代酰胺以及苯并唑基酰胺和硫代酰胺，如

US 2003/0207893(2003年11月16日)中所述；

b)8元二环芳族酰胺和硫代酰胺，如US 2004/0048878(2004年3月11日)中所述；

c)9元二环芳族酰胺、硫代酰胺和酰亚胺，如US 2004/0058934(2004年3月25日)中所述；

b)氨基取代的喹喔啉，如US 2005/0070527(2005年3月31日)中所述；

d)2-芳基苯并咪唑醚化合物，如US 2005/0070550(2005年3月31日)中所述；

e)2-芳基咪唑醚化合物，如US 2005/0261309(2005年11月24日)中所述；

f)苯并咪唑-2-基吡啶，如US 2007/0232616(2007年10月4日)中所述；

g)吲哚基和苯并咪唑基吡咯烷基酰胺，如US 2007/0238771(2007年10月11日)中所述；

h)苯并咪唑-2-基嘧啶和吡嗪，如US 2007/0244126(2007年10月18日)中所述；

i)苯并呋喃并-和苯并噻吩并嘧啶，如US 2008/0015200(2008年1月17日)中所述；

j)2-氨基嘧啶，如美国专利申请12/070,051(2008年2月14日)中所述；

k)芳基取代的吡啶和三嗪，如美国临时专利申请60/971,676(2007年9月12日)中所述；

1)噻吩并-和呋喃并嘧啶，如美国临时专利申请60/972,589(2007年9月14日)中所述；以及

m)二环杂芳基取代的咪唑，如61/014,572(2007年12月18日)中所述；

此类化合物的可药用的盐、水合物、溶剂化物和混合物。

在上述a)-m)中所列的所有专利公开全文以引用方式并入本文中。

在一些实施例中，合适的组胺H4受体拮抗剂是以下物质中的任何一种：苯并咪唑基酰胺和硫代酰胺以及苯并唑基酰胺和硫代酰胺，如US 2003/0207893(2003年11月16日)中所述；苯并咪唑-2-基嘧啶和吡嗪，如US 2007/0244126(2007年10月18)中所述；此类化合物的可药用的盐、水合物、溶剂化物和混合物。在其他实施例中，合适的组胺H4受体拮抗剂是以下物质中的任何一种：(5-氯-1H-吲哚-3-基)-(4-甲基-哌嗪-1-基)甲酮；[5-(4，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-4-甲基-嘧啶-2-基]-[3-(1-甲基-哌啶-4-基)丙基]-胺；它们的可药用的盐、水合物、溶剂化物和混合物。

“可药用盐”旨在表示组胺H4受体拮抗剂的游离酸或碱的盐，其是无毒的、生物学耐受的或换句话说是在生物学上适于施用给受试者。一般参见S.M.Berge，et al.，“Pharmaceutical Salts”，J.Pharm.Sci.，1977，66：1-19(S.M.Berge等人，“药用盐”，《药物科学杂志》，1977年，第66卷第1-19页)和Handbook of Pharmaceutical Salts，Properties，Selection，and Use，Stahl and Wermuth，Eds.，Wiley-VCH and VHCA，Zurich，2002(《药用盐、性质、选择和应用手册》，Stahl和Wermuth编辑，Wiley-VCH和VHCA，Zurich，2002年)。优选的可药用盐是那些药理学上有效且适于与患者的组织接触而不会有不当毒性、刺激或变应性应答的盐。组胺H4受体拮抗剂可以具有足够酸性的基团、足够碱性的基团或同时具有这两种类型的官能团，从而可与多种无机碱或有机碱以及无机酸和有机酸反应，形成可药用盐。可药用盐的例子包括硫酸盐、焦硫酸盐、硫酸氢盐、亚硫酸盐、亚硫酸氢盐、磷酸盐、磷酸一氢盐、磷酸二氢盐、偏磷酸盐、焦磷酸盐、氯化物、溴化物、碘化物、乙酸盐、丙酸盐、癸酸盐、辛酸盐、丙烯酸盐、甲酸盐、异丁酸盐、己酸盐、庚酸盐、丙炔酸盐、草酸盐、丙二酸盐、琥珀酸盐、辛二酸盐、癸二酸盐、延胡索酸盐、马来酸盐、丁炔-1，4-二酸盐、己炔-1，6-二酸盐、苯甲酸盐、氯代苯甲酸盐、甲基苯甲酸盐、二硝基苯甲酸盐、羟基苯甲酸盐、甲氧基苯甲酸盐、邻苯二甲酸盐、磺酸盐、二甲苯磺酸盐、苯乙酸盐、苯丙酸盐、苯丁酸盐、柠檬酸盐、乳酸盐、γ-羟丁酸盐、乙醇酸盐、酒石酸盐、甲磺酸盐、丙磺酸盐、萘-1-磺酸盐、萘-2-磺酸盐和扁桃酸盐。

如果组胺H4受体拮抗剂包含碱性氮，则理想的可药用盐可以通过本领域可用的任何合适方法制备，例如，用下述酸处理游离碱：无机酸，如盐酸、氢溴酸、硫酸、氨基磺酸、硝酸、硼酸、磷酸等；或者有机酸，如乙酸、苯乙酸、丙酸、硬脂酸、乳酸、抗坏血酸、马来酸、羟基马来酸、羟乙磺酸、琥珀酸、戊酸、延胡索酸、丙二酸、丙酮酸、草酸、乙醇酸、水杨酸、油酸、棕桐酸、月桂酸、吡喃糖苷酸(如葡萄糖醛酸或半乳糖醛酸)、α-羟基酸(如扁桃酸、柠檬酸或酒石酸)、氨基酸(如天冬氨酸或谷氨酸)、芳族酸(如苯甲酸、2-乙酰氧基苯甲酸、萘甲酸或肉桂酸)、磺酸(如月桂基磺酸、对甲苯磺酸、甲磺酸、乙磺酸)、诸如本文作为例子给出的那些酸的任何相容混合物，以及本领域普通技术人员视为等同物或可接受替代物的任何其他酸及其混合物。

如果组胺H4受体拮抗剂是酸如羧酸或磺酸，则所需的可药用的盐可通过任何合适的方法制备，例如用诸如以下的无机碱或有机碱处理该游离酸：胺(伯胺、仲胺或叔胺)、碱金属氢氧化物、碱土金属氢氧化物、诸如本文作为例子给出的那些碱的任何相容混合物，以及根据本技术领域的普通技能水平被认为等同物或可接受替代物的任何其他碱及其混合物。合适的盐的示例性例子包括衍生自氨基酸(例如甘氨酸和精氨酸)、氨、碳酸盐、碳酸氢盐、伯胺、仲胺和叔胺以及环胺(例如苄胺、吡咯烷、哌啶、吗啉和哌嗪)的有机盐，以及衍生自钠、钙、钾、镁、锰、铁、铜、锌、铝和锂的无机盐。

优选的组胺H4受体拮抗剂(包括它们的可药用的盐、水合物、溶剂化物以及它们的混合物)是在局部和全身水平显示具有很少或没有毒性并且适于在动物(包括人类)中使用的那些。一旦受益于本发明，本领域技术人员将能够易于辨识那些类似物。

在本发明的方法中，组胺H4受体拮抗剂用于抑制术后粘连的形成。如本文所用，术语“抑制”旨在意指将本发明的活性剂或组合物施用到体腔，从而通过调节组胺H₄受体活性达到影响治疗或预防有益效果的目的。抑制包括逆转、改善、减轻术后粘连、抑制术后粘连进展、减少术后粘连严重度、或预防术后粘连。

根据本发明，在潜在粘连形成部位，合适的组胺H4受体拮抗剂被施用和维持在有效浓度一段时间，以足以预防粘连形成。组胺H4受体拮抗剂通常在术后间隔时间内被全身施用或非全身施用(例如直接递送到体腔)或二者，直到伤口部位完全愈合。在一些实施例中，组胺H4受体拮抗剂可以单剂量递送并保持与体腔内的组织接触，如本文所述。在其他实施例中，组胺H4受体拮抗剂可以一系列剂量递送，定时连续给药一段时间，以足以抑制粘连形成，即通过持续释放。

“有效量”是在有效提供体腔内的术后粘连的抑制的条件下，在施用组胺H4受体拮抗剂到组织时，有效抑制术后粘连形成的量。组胺H4受体拮抗剂的治疗学上有效浓度是当施用到体腔内的组织时，抑制或预防经过手术的体腔内的组织表面间术后粘连形成的浓度。可以被施用的组胺H4受体拮抗剂的最小量必须有效抑制术后粘连形成，如本文所述。可以被施用的组胺H4受体拮抗剂的最小量受限于该化合物的毒性。本发明活性剂的有效量或剂量可通过常规方法如建模、剂量递增研究或临床试验进行确定，和通过考虑例如以下的常规因素进行确定：给药或药物递送的方式或途径，活性剂的药代动力学，疾病、障碍或病症的严重程度和进程，受试者之前进行的或正在进行的疗法，受试者的健康状况和对药物的反应，以及主治医师的判断。示例性的剂量在约0.001至约200mg组胺H4受体拮抗剂/kg受试者体重/天的范围内，优选约0.05至100mg/kg/天，或者约1至35mg/kg/天，或者约0.1至10mg/kg/天，单个剂量单位或分剂量单位(例如每天两次、每天三次、每天四次)。对于70kg的人，合适剂量的示例性范围是约1至200mg/天，或约5至50mg/天。

一旦发生术后粘连的改善，可以将剂量调整以进行预防性或维持性治疗。例如，给药的剂量或频率或者这两方面可根据症状而定降低到能维持所需的治疗或预防作用的水平。当然，如果症状已减轻到适当的水平，治疗可停止。但是，患者可能需要长期地在症状出现任何复发时进行间歇性治疗。

本发明涉及药物组合物，其包含一种如上所述的组胺H4受体拮抗剂。在一些实施例中，该药物组合物还包含一种药用赋形剂。

在一些实施例中，该组胺H4受体拮抗剂被非全身性施用，例如直接递送到进行手术的体腔。在其他实施例中，组胺H4受体拮抗剂通过合适的给药途径全身施用，例如，通过口服途径、肠胃外途径、直肠途径、局部途径或眼部途径施用，或通过吸入施用。此外，组胺H4受体拮抗剂可以结合组胺H4受体拮抗剂的局部、非全身性施用进行全身施用。

在本发明的一个实施例中，组胺H4受体拮抗剂被直接施用到目标损伤部位在其进行外科手术后，该施用通过适于局部、非全身性施用治疗剂到组织表面的递送载体，例如聚(乙二醇)/羧甲基纤维素钠含水凝胶进行，以便在术后降低、或抑制、或预防该部位的粘连形成。优选地，在术后的皮肤闭合前，使用递送载体以单剂量施用至少一种组胺H4受体拮抗剂，该递送载体能够维持该化合物的必要的有效浓度一段时间，以足以预防在该部位愈合期间的粘连形成。合适的递送载体本身基本上应该是非炎性的和非致免疫的，并且应允许组胺H4受体拮抗剂的释放以在所需的时间段内保持它们的有效水平。

当含有组胺H4受体拮抗剂的治疗学上有效量时，用于施用组胺H4受体拮抗剂的多种可选的持续释放递送载体也设想在本发明的范围内。合适的递送载体包括(但不限于)：至少一种纳米颗粒、微胶囊或微球体；脂质体和其他脂质类释放系统；可吸收的和/或可生物降解的机械屏障；聚合递送材料，例如(但不限于)：至少一种聚环氧乙烷/聚环氧丙烷嵌段共聚物(即泊洛沙姆)、聚(原酸酯)、聚(乙烯醇)、聚(酸酐)、聚(甲基丙烯酸酯)、聚(甲基丙烯酰胺)、阴离子碳水化合物聚合物、聚(羟基丁酸)和聚缩醛。最优选地，可达到组胺H4受体拮抗剂最期望的接近假零级的释药规律的合适制剂包含由可生物降解的聚合物制备的可注射微胶囊或微球体，可生物降解的聚合物例如(但不限于)：聚(l-丙交酯)、聚(dl-丙交酯)、dl-丙交酯-乙交酯共聚物、l-丙交酯-乙交酯共聚物、聚(e-己内酯)、聚乙交酯、聚(对-二氧环己酮)、聚(三亚甲基碳酸酯)、聚(亚烷基二乙醇酸酯)、聚(含氧酸酯)、聚(含氧酰胺)、以及它们的共聚物或共混物。其他所需的释药规律，例如首先产生组胺H4受体拮抗剂的突释，随后产生零级持续释放(突释/持续释放)的释药规律，可以通过将封装和非封装药物混合成制剂而建立。

甘油酯，可用的长链羧酸酯包括(但不限于)来自以下组中的至少一种：甘油单硬脂酸酯；甘油一棕榈酸酯；甘油单硬脂酸酯和甘油一棕榈酸酯的混合物(Myvaplex 600，可得自Eastman Fine Chemical Company (Rochester，N.Y.))；甘油一亚油酸酯；甘油一油酸酯；甘油一棕榈酸酯、甘油单硬脂酸酯、一油酸酯和甘油一亚油酸酯的混合物(Myverol Eastman Fine Chemical Company)；甘油一亚麻酸酯；甘油一鳕烯酸酯；甘油一棕榈酸酯、甘油单硬脂酸酯、甘油一油酸酯、甘油一亚油酸酯、甘油一亚麻酸酯和甘油一鳕烯酸酯的混合物(Myverol 18-99，Eastman Fine Chemical Company)；乙酰化甘油酯，例如蒸馏的乙酰化单甘油酯(Myvacet 5-07、7-07和9-45，Eastman Fine Chemical Company)；丙二醇单酯、蒸馏的单甘油酯、硬脂酰乳酸钠和二氧化硅的混合物(Myvatex TL，Eastman Fine Chemical Company)；丙二醇单酯、蒸馏的单甘油酯、硬脂酰乳酸钠和二氧化硅的混合物(Myvatex TL，Eastman Fine Chemical Company)；d-α生育酚琥珀酸聚乙二醇1000酯(维生素E TPGS，Eastman Fine Chemical Company)；单甘油酯和二甘油酯的混合物；硬酯酰乳酸钙；乙氧基单甘油酯和二甘油酯；乳酸单甘油酯和二甘油酯；甘油和丙二醇的羧酸酯酰乳酸酯；长链羧酸的乳酸酯；长链羧酸的聚甘油酯；长链羧酸的丙二醇单酯和二酯；硬酯酰乳酸钠；山梨糖醇酐单硬脂酸酯；山梨糖醇酐单油酸酯；长链羧酸的其他山梨糖醇酐酯；琥珀酰单甘油酯、柠檬酸硬酯酰甘油单酯；硬酯酰庚酸酯；蜡十六烷基酯；硬脂酰辛酸酯；C10-C30胆固醇/羊毛甾醇酯；以及蔗糖长链羧酸酯。甘油酯也包括(但不限于)以下至少一种：三甘油酯(例如甘油二硬脂酸酯、甘油三硬脂酸酯、甘油单硬脂酸酯、甘油二棕榈酸酯、甘油三棕榈酸酯、甘油一月桂酸酯、甘油二山嵛酸酯、甘油三山嵛酸酯、甘油单山嵛酸酯、甘油单癸酸酯、甘油二癸酸酯、甘油三癸酸酯、甘油一肉豆蔻酸酯、甘油二肉豆蔻酸酯、甘油三肉豆蔻酸酯、甘油单癸烯酸酯、甘油二癸烯酸酯和甘油三癸烯酸酯。甘油酯材料可以单独使用或者与其他此类试剂结合使用。

包含直径大约为约0.001μm至约1000μm的纳米颗粒、微胶囊或微球体的可注射系统相比其他递送系统更具优势，因为通过选择微胶囊大小、载药量和给药剂量，此类系统在设计药物单独释放的持续时间和速率方面具有内在灵活性。此外，可以通过诸如γ辐射或环氧乙烷的方法顺利地完成对这些微胶囊的消毒。

微球体和微胶囊是包括包封液体或实芯的聚合物壁的载体或系统。微球体的壁一般不与芯材料反应；但是，它被设计成提供足够的强度以使得正常抓握不致破裂，同时足够薄以允许高的芯/壁容量比。球体/胶囊内容物留在壁内，直至通过扩散或其他溶解、熔融、破碎、破裂或移除包含在球体/胶囊内的材料的方式被释放。优选地，球体/胶囊壁可以做成在合适的环境下降解和分解，从而允许芯材料透过胶囊壁扩散以提供其缓慢而持续的递送。

在可生物降解的微球体内的释放机制是药物扩散和聚合物生物降解的组合。因此，释放的速率和持续时间取决于微球体大小、药物含量和质量、以及聚合物参数(例如结晶度、分子量和组成)。具体地讲，通常通过更改壁厚度、直径、或二者来实现药物释放量的调整。

此外，当含有组胺H4受体拮抗剂的有效量时，基于可生物降解的聚合物和适于根据本发明使用的可供选择的递送系统(例如，包含活性剂的纤维或细丝)，也设想为在本发明的范围内。

用于单剂量递送组胺H4受体拮抗剂的可选方法涉及以薄膜形式使用可生物降解的聚合物(例如上文描述的聚合物)。可以通过从加压容器把在合适载体内的含有生物聚合物和组胺H4受体拮抗剂的分散液滴喷涂或排出到目标部位上来生产此类薄膜。

可以通过本领域的技术人员已知的多种方法来制备这些薄膜、纤维和颗粒。此类方法包括(但不限于)：旋转盘、溶液/沉淀法、和超临界流体法。

根据本发明，用于单剂量递送组胺H4受体拮抗剂的另一方法涉及使用脂质体和其他脂质类递送系统将活性剂封装在多室脂质体(或脂质体)内。在典型工序中，将形成粉末状脂质混合物的脂质体加到所需量活性剂的水溶液中(例如，磷酸盐缓冲液)中，以形成悬浮液。然后在适当的水合作用期后，将水合悬浮液高压蒸气灭菌以提供脂质体-活性剂制剂。

脂质体组合物通常是磷脂的组合物(尤其是高相变温度的磷脂)，其通常与甾体化合物(特别是胆固醇)结合。也可以使用其他磷脂或其他脂质。脂质体的物理性质取决于pH、离子强度和二价阳离子的存在。用于脂质体生产的脂质的例子包括磷脂酰基化合物，例如磷脂酰甘油、磷脂酰胆碱、磷脂酰丝氨酸、磷酸酰乙醇胺、神经鞘脂类、脑苷脂类和神经节苷脂类。尤其可用的是二酰基磷脂酰甘油，其中脂质部分含有14-18个碳原子，尤其是16-18个碳原子，并且是饱和的。示例性的磷脂包括蛋黄磷脂酰胆碱、二棕榈酰磷脂酰胆碱和二硬酯酰磷脂酰胆碱。

可以用溶于氯仿(其中加入α生育酚)的L-α-二硬酯酰磷脂酰胆碱和胆固醇来制备适于形成脂质体的脂质混合物。用于形成脂质体的其他组合物和方法也可用于此目的，并且对于本领域的技术人员而言，一旦受益于本发明，其将是显而易见的。

其他脂质类递送系统也设想用于本发明中。可用的系统包括脂质泡沫，例如可以商品名DEPOFOAM(SkyPharama，Inc.，San Diego，CA)获得的那些，其是包含由单个双层脂质膜限定的球形颗粒的缓释制剂，每种制剂含有多个非同心的封装活性成分的含水室。此类脂质颗粒是由与存在于细胞膜中的脂质一样的无毒脂质制成。

根据本发明，用于单剂量递送组胺H4受体拮抗剂的另一个合适的方法涉及使用类晶体和所谓的粘稠滴注液。类晶体是本领域已知的水溶性结晶物质，例如氯化钠，其能够通过半透膜扩散。类晶体的溶液(例如盐水)是已知的类晶体、类晶体溶液或类晶体滴注液。类晶体滴注液包括(但不限于)乳酸林格氏溶液、盐水和磷酸盐缓冲液。在粘稠滴注液的情况下，用于与活性剂混合的高分子量载体包括(但不限于)葡聚糖和环状糊精；水凝胶；交联的粘稠材料，包括粘弹性的和交联粘弹性的；羧甲基纤维素；聚(糖类)；透明质酸；交联的透明质酸和与原酸酯化合的透明质酸。

此外，本发明的方法还包括以一定量共同施用至少一种组胺H4受体拮抗剂和用于治疗术后粘连或用于治疗相关疾病的另外的治疗剂(例如作为化疗药的助剂)，该量能有效提供由施用第二治疗剂而预期的治疗效果。该另外的治疗剂可以与至少一种组胺H4受体拮抗剂独立共同施用，或者混合成根据本发明的药物组合物。在一个示例性实施例中，另外的治疗剂是已知或发现在术后粘连或炎症的治疗中有效的那些，例如有效针对与该病症相关的另一目标的另一种组胺H₄受体调节剂或化合物。这种组合可有助于提高功效(例如通过在该组合中包括能加强组胺H4受体拮抗剂的效价或有效性的化合物)，降低一种或多种副作用，或者降低根据本发明的活性剂的所需剂量。

所述可以与组胺H4受体拮抗剂结合使用的另外的治疗剂可以分成以下一般类别：抗血小板剂、抗纤维化剂、抗炎剂、抗增殖剂、和/或胶原合成抑制剂。这些治疗剂包括(但不限于)：尿激酶、组织纤溶酶原活化剂的非糖基化缺失突变蛋白质(可以商品名RETAVASE(Boehringer Manheim，Indianapolis，IN)获得)、用于预防和治疗循环系统疾病的含有阿昔单抗的药物制剂(可以商品名REOPRO(Eli Lilly and Company，Indianapolis IN)获得)、氯吡格雷硫酸氢盐(可以商品名PLAVIX(Sanofi-Synthelabo，Paris，France)获得)、用于癌症领域的含有甲磺酸伊马替尼的药物制剂(可以商品名GLEEVEC (Novartis AG，Basel Switzerland)获得)、曲安奈德、替泊沙林、吡非尼酮、胶原酶、抗CTGF、酪氨酸激酶抑制剂、脯氨酰羟化酶抑制剂、赖氨酰氧化酶抑制剂、C端蛋白酶抑制剂、N端蛋白酶抑制剂、TGFβ抑制剂(例如三苯氧胺)、HMG-CoA还原酶抑制剂(例如洛伐他汀)、COX-1和/或COX-2抑制剂(例如布洛芬、尼美舒利)、用于治疗关节炎的含有罗非昔布的药物制剂(可以商品名VIOXX (Merck & Co.，Inc.Whitehouse Station NJ)获得)，含有塞来昔布的具有抗炎镇痛药性质的药物(可以商品名CELEBREX(G.D.Searle & Co.，Skokie IL)获得)、含有伐地昔布的药物制剂(可以商品名BEXTRA(Pharmacia & Upjohn Co.，North Peapackn NJ)获得)、钙离子抑制剂(例如氨氯地平、硝苯地平)、用于治疗高血压的药物(例如维拉帕米)、铁螯合剂(例如去铁胺，可以商品名DESFERAL(Novartis AG，Basel Switzerland)获得)、抗生素(例如克拉霉素和环丙沙星)、类视色素(例如维甲酸和视黄酸)、糜酶抑制剂、以及9-甲基-3-(1H-四唑-5-基)-4H-吡啶并[1，2-α]嘧啶-4-酮钾(也称为吡嘧司特)。当这些治疗剂或药物与组胺H4受体拮抗剂结合使用时，这些治疗剂或药物的含量能有效提供由施用治疗剂而预期的治疗效果。

例如，如果在手术时或手术前与其他药物结合使用，屏障形式的递送载体和组胺H4受体拮抗剂可以显示更大的功效。例如，抗纤维化剂(例如重组纤溶酶原活化剂化合物，可以商品名RETAVASE(Boehringer Mannheim Corp.，Indianapolis，IN)获得)将在手术时被递送到部位，然后屏障/胶原合成抑制剂(例如组胺H4受体拮抗剂)将被置于该部位上。限制手术部位的血小板凝聚的纤溶酶原活化剂化合物、限制组织表面对合的屏障和抑制胶原合成的组胺H4受体拮抗剂的组合功效可显著降低粘连。也可以通过各种方法，在手术前、手术期间或手术后全身施用另外的治疗剂，同时在手术后结合进行局部、非全身施用。

在本发明的一个实施例中，组胺H4受体拮抗剂与物理屏障结合使用。据信，由于合适的物理屏障和组胺H4受体拮抗剂的结合使用，可以得到意想不到的协同增强效应，其得到优于单独使用组胺H4受体拮抗剂或屏障的结果。例如，含有聚乙二醇的屏障(其表面特性是抗凝血的，因此可以预防血小板粘附)可以预防一些纤维蛋白凝聚的发生。同时，影响粘连序列的后期事件(例如胶原合成)的组胺H4受体拮抗剂可以被递送到该部位一段延长的时间。从而，通过影响一种以上粘连生成事件，组胺H4受体拮抗剂/屏障组合将具有大于组胺H4受体拮抗剂和屏障的总和的功效。与组胺H4受体拮抗剂结合使用时，其他屏障也可以展示此类效果。

作为另一个例子，已经指出透明质酸可以降低细胞增殖(抗增殖)，同时是优异的涂层，可在对合的组织表面之间提供润滑表面。身体正是基于这样的目的(即连接表面和关节)而分泌透明质酸。此类屏障可以是(例如)亲水的聚合羧甲基纤维素凝胶，以使得其粘附到该部位的组织，并且具有优异的生物相容性，以使得其不造成可引发胶原合成的炎性反应。与组胺H4受体拮抗剂结合使用时，透明质酸屏障可以比组胺H4受体拮抗剂或其本身更有效。

其他屏障包括(但不限于)：各种透明质酸的衍生物(盐，例如铁盐、钠盐；酯，例如苄酯)；纤维素衍生物(氧化再生的；甲基的；乙基的；羟丙基的)；胶原；聚乙二醇(包括原位交联的)；普流罗尼；甲壳质；脱乙酰壳多糖；葡聚糖；葡萄糖；碳水化合物；明胶；糖胺聚糖；聚丙烯酰胺；聚乙烯基吡咯烷酮；聚乙烯醇；聚甲基丙烯酸；藻酸盐；淀粉；多肽；以及它们的任何其他水溶性聚合物和共混物。此类聚合物也可以与可水解的或可酶降解的聚合物(例如聚内酯、聚氧杂酯、聚亚烷基二乙醇酸酯和含有甘油酯的聚合物，以及它们的共聚物和共混物)共聚或共混。屏障也可以是不可吸收的屏障，例如聚四氟乙烯。组胺H4受体拮抗剂和/或本发明的其他治疗剂可以共价或非共价(即离子化)结合到此屏障上，或者它可以简单地分散于其中。

应该知道，本文所述的递送载体不仅可以包括屏障(例如可以局部递送药物的凝胶)，也可以包括通过其他局部给药方法(例如渗透泵)进行的药物递送。

“药用赋形剂”指无毒的、生物学上可耐受的或另外来讲在生物学上适于给予受试者的物质，如惰性物质，其被加到药理组合物或另外来讲用作介质、载体或稀释剂以促进药剂的给予，且其与该药剂相容。赋形剂的例子包括碳酸钙、磷酸钙、各种糖类和各种类型的淀粉、纤维素衍生物、明胶、植物油和聚乙二醇。

含有一个或多个剂量单位的活性剂的药物组合物的递送形式，可用本领域技术人员知道的或者可利用的合适药物赋形剂和配混技术进行制备。所述组合物在本发明方法中可通过合适的递送途径施用，如通过口服途径、胃肠外途径、直肠途径、局部途径或眼部途径施用，或者通过吸入施用。

制剂可为片剂、胶囊剂、小药囊剂(sachet)、糖衣丸剂、散剂、颗粒剂、锭剂、重构用散剂、液体制剂或栓剂的形式。优选地，所述组合物配制成供静脉输注、局部施用或口服施用。

对于口服施用，本发明的活性剂可以片剂或胶囊剂的形式提供，或者作为溶液剂、乳剂或混悬剂提供。为制备口服组合物，可将活性剂配制成产生例如约0.05至约50mg/kg/天、或者约0.05至约20mg/kg/天、或者约0.1至约10mg/kg/天的剂量。

口服片剂可包括与相容的药用赋形剂如稀释剂、崩解剂、粘合剂、润滑剂、甜味剂、矫味剂、着色剂和防腐剂混合在一起的活性成分。合适的惰性填充剂包括碳酸钠和碳酸钙、磷酸钠和磷酸钙、乳糖、淀粉、糖、葡萄糖、甲基纤维素、硬脂酸镁、甘露糖醇、山梨糖醇等。示例性的液体口服赋形剂包括乙醇、甘油、水等。淀粉、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、羟乙酸淀粉钠、微晶纤维素和藻酸是示例性的崩解剂。粘合剂可包括淀粉和明胶。润滑剂如果存在的话可以是硬脂酸镁、硬脂酸或滑石粉。如果需要，片剂可用诸如甘油单硬脂酸酯或甘油二硬脂酸酯的材料进行包衣，以延迟在胃肠道中的吸收，或者可用肠溶衣进行包衣。

用于口服施用的胶囊剂包括硬明胶胶囊剂或软明胶胶囊剂。为制备硬明胶胶囊剂，可将活性成分与固体、半固体或液体稀释剂混合。软明胶胶囊剂可通过将活性成分与水、油(如花生油或橄榄油)、液体石蜡、短链脂肪酸的单甘油酯和二甘油酯的混合物、聚乙二醇400或丙二醇混合来制备。

口服施用的液体剂可以为混悬剂、溶液剂、乳剂或糖浆剂的形式，或者可冻干或作为干燥制品呈现，供临用前用水或其他合适的介质进行重构。这种液体组合物可任选含有：药用赋形剂如助悬剂(例如山梨糖醇、甲基纤维素、藻酸钠、明胶、羟乙基纤维素、羧甲基纤维素、硬脂酸铝凝胶等)；非含水介质，例如油(例如杏仁油或分馏椰子油)、丙二醇、乙醇或水；防腐剂(例如对羟基苯甲酸甲酯或丙酯，或者山梨酸)、湿润剂如卵磷脂；和如果需要的话，还有矫味剂或着色剂。

本发明的活性剂还可通过非口服途径全身施用。例如，组合物可配制成栓剂供直肠施用。对于胃肠外使用，包括静脉内、肌肉内、腹膜内或皮下途径，本发明的活性剂可提供在无菌水溶液剂或混悬剂中，缓冲至适当的pH和等渗性，或者在胃肠外可接受的油中。合适的含水介质包括林格溶液和等渗氯化钠。这类形式可以单位剂量形式(如安瓿或一次性注射装置)呈现，以可从中抽取适当剂量的多剂量形式(如小瓶)呈现，或者以可用来制备可注射制剂的固体形式或预浓缩物呈现。示例性的输注剂量范围为约1至1000μg/kg/分钟的与药用载体混合的活性剂，时间为几分钟到几天。

对于局部施用，可将活性剂与药用载体混合成药物-介质比为约0.1％至约10％的浓度。另一种施用本发明活性剂的方式可利用贴剂来影响透皮递送。

或者，在本发明方法中活性剂可以通过鼻内或口服途径经由吸入来施用，例如在还含有合适的载体的喷雾制剂中。

结合所附实例，可以更好地理解本发明，这些实例仅旨在示例说明，在任何意义上都不应视为对在以下所附权利要求中定义的本发明范围的限制。

实例

使用侧壁粘连模型进行了多种研究，以证明组胺H4受体拮抗剂在降低或抑制腹膜手术后粘连形成的功效。

腹膜侧壁模型

动物：二十八只雌性新西兰白兔，2.4-2.7kg，购自Irish Farms，并且在使用之前隔离至少2天。将兔子在12∶12的光∶暗周期下圈养，食物和水可供自由采食。

肌内注射55mg/kg开他敏盐酸盐和5mg/kg隆朋的混合物使兔子麻醉。无菌手术准备后，进行中线剖腹手术。将聚乙烯导管(Clay Adams聚乙烯管PE-60，内径0.76mm(0.030″)，外径1.22mm(0.048″))引入腹膜腔，并用5-0爱惜良尼龙缝线缝合于侧壁。对于局部给药，将填充有一种剂量水平或者安慰剂(注射用水)对照的Alzet微量渗透泵(10μl/小时，2ml，型号2ML1，购自Durect)置于皮下间隙，以10μl/小时的速度，从手术当天开始给药7天。然后将导管附接到泵，并且将中线肌肉切口沿导管封闭。将盲肠和肠从腹中取出，并进行数字加压以在所有表面上造成浆膜下出血。用4″×4″的4层消毒纱布轻轻擦磨受损的肠，直到观察到点状出血。然后将盲肠和肠放回其正常的解剖位置。在右侧腹壁上去除5×3cm面积的腹膜和腹横肌。用3-0薇乔缝线(Ethicon，Somerville，NJ)将切口封闭在两个层内。在第7天将泵取回。

手术二十一天后，通过静脉注射EuthaSol将兔子处死。通过检测确定与粘连相关的侧壁受损的面积百分比来评估侧壁受损部位的粘连形成。下表列出了参与对各种器官的粘连的侧壁表面的百分比，以定量总粘连分数。此外，使用如下系统对形成的粘连的韧度进行评分：

0＝无粘连；

1＝轻微的、容易分割的粘连；

2＝中等粘连；不易分割、不撕裂器官；

3＝致密粘连；不易分割、移除时撕裂。

通过Student t检验分析对照组和处理组之间粘连形成的差异。粘连面积和韧度的降低视为有益的和有效的。

为了评价药动学，放置泵后，在第0天(手术前)和第7天从每只动物抽取1ml血样。将血收集在肝素化的管中，离心以沉淀细胞，并且将上清液(血浆)保存在-80℃。

在进行研究之前和验尸当天对每只动物进行总体观察(外观、行为、临床征象、症状、濒死期、死亡期、以及体格检查)。在验尸当天，记录数据和观察结果，尤其要注意在处理部位的炎症、肉芽肿物质和粘连形成。记录所有生物相容性结果，并记下反应水平(无、轻微、中等、严重)。

(5-氯-1H-吲哚-3-基)-(4-甲基-哌嗪-1-基)-甲酮的非全身给药。

将本研究中所用的28只兔子分成以下处理组：

组1：无处理

组2：载体对照

组3：5mg/ml的(5-氯-1H-吲哚-3-基)-(4-甲基-哌嗪-1-基)-甲酮

一只对照组动物由于腹膜炎在第10天死亡。其他兔子未显示任何临床征象。在腹膜腔未注意到炎性或肉芽肿反应。与手术对照(表1)相比，安慰剂(表2)没有显著影响粘连形成的面积或韧度。(5-氯-1H-吲哚-3-基)-(4-甲基-哌嗪-1-基)-甲酮显著降低了粘连的面积和韧度(表3)。

表1.手术对照动物中的粘连分数

  动物数目  粘连面积  粘连韧度  1  100  3  2  100  3  3  90  2  4  100  2  5  100  2  6  100  3  平均值/标准差  98.3±1.7  19.75±1.9^*

^*此值是韧度等级的平均值(非参数量度)。

表2.安慰剂对照动物中的粘连分数

  动物数目  粘连面积  粘连韧度  1  100  3  2  100  3  3  100  2  4  100  1  5  100  1  6  100  2  7  100  3  平均值/标准差  100±0  16.29±3.1^*

^*此值是韧度等级的平均值(非参数量度)。

表3.用5mg/ml(5-氯-1H-吲哚-3-基)-(4-甲基-哌嗪-1-基)-甲酮处理的动物中的粘连分数

  动物数目  粘连面积  粘连韧度  1  80  1  2  50  1  3  100  1  4  100  2  5  60  1  6  70  1  7  40  1  平均值/标准差  71.4±8.8  6.93±1.4

^*此值是韧度等级的平均值(非参数量度)。

在另一组实验中的测试化合物是[5-(4，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-4-甲基-嘧啶-2-基]-[3-(1-甲基-哌啶-4-基)-丙基]-胺，以下列剂量给药。将本研究中所用的35只动物分成以下处理组：

组1：手术对照

非全身给药(泵)：

组2：0.1mg/ml测试化合物

组3：1mg/ml测试化合物

组4：10mg/ml测试化合物

全身给药(通过在手术当天和另外四天用管饲法经口递送)：

组5：经口服的30mg/kg测试化合物

该实验中的组1至组5各自对应于下述表4至表8。除了一只对照(在第12天死亡)，所有动物在验尸之前都是存活的。另外，在一些动物中，在管子末端观察到白色沉淀。在通过Alzet泵给药的动物中，在管子末端周围观察到此功效。在每组低剂量动物和中剂量动物观察到1只出现这样的现象，在高剂量动物观察到3只。虽然在通过泵给药的中剂量组出现了粘连面积和韧度的降低，但只有粘连面积降低具有统计意义上的显著性。

表4.安慰剂对照动物中的粘连分数

  动物数目  粘连面积  粘连韧度  1  100  2  2  100  1  3  100  2  4  100  3  5  100  2  6  100  2  7  80  2  平均值/标准差  97.1±2.86  20.1±3.37^*

^*此值是韧度等级的平均值(非参数量度)。

表5.0.1mg/ml测试化合物中的粘连分数

  动物数目  粘连面积  粘连韧度  1  70  2  2  70  1  3  100  2  4  100  2

  5  80  2  6  80  2  7  100  3  平均值/标准差  85.7±5.28  20.1±3.37^*

^*此值是韧度等级的平均值(非参数量度)。

表6.1mg/ml测试化合物中的粘连分数

  动物数目  粘连面积  粘连韧度  1  60  2  2  60  1  3  80  2  4  60  1  5  80  2  6  80  2  7  70  1  平均值/标准差  70±10  13.9±3.38^*

^*此值是韧度等级的平均值(非参数量度)。

表7.10mg/ml测试化合物中的粘连分数

  动物数目  粘连面积  粘连韧度  1  80  2  2  80  2  3  60  2  4  100  2  5  90  2

  6  100  2  7  60  1  平均值/标准差  81.4±6.34  18.3±1.43^*

^*此值是韧度等级的平均值(非参数量度)。

表8.30mg/kg测试化合物中的粘连分数

  动物数目  粘连面积  粘连韧度  1  40  1  2  70  2  3  80  1  4  100  2  5  60  1  6  100  3  7  100  3  平均值/标准差  78.6±8.85  17.6±5.27^*

^*此值是韧度等级的平均值(非参数量度)。

虽然已经显示和描述了本发明的基本新型特征，但应当理解，在不脱离本发明的精神的情况下，本领域的技术人员可以对所描述的形式和细节进行各种省略、替代和改变。因此只意图如以下权利要求书中的范围所指出的那样进行限制。