玉米兼抗矮花叶病毒及粗缩病毒无选择标记siRNA复合表达载体及其构建方法

摘要

本发明公开了一种玉米兼抗矮花叶病毒及粗缩病毒无选择标记siRNA复合表达载体及其构建方法。RT-PCR分别扩增玉米矮花叶病毒及粗缩病毒外壳蛋白基因特异性片段，构建反向重复表达载体，利用中间载体分别将玉米矮花叶病毒外壳蛋白及粗缩病毒外壳蛋白两个反向重复片段串联在一起；将含双T的真核表达载体酶切，连入Ubiquitin启动子及Nos终止子，再将串联重复片段连入载体中，构建成兼抗玉米矮花叶病毒及粗缩病毒的无选择标记siRNA复合表达载体。本发明能够在转化后代中通过自交分离获得剔除选择标记的双抗性植株。本发明对开展抗病毒RNA干扰调控技术研究，创建高抗病毒玉米新种质具有重要的理论和实践意义。