脂氧素在制备女性避孕药物中的应用

摘要

本发明公开了脂氧素在制备女性避孕药物中的应用。研究发现将脂氧素应用在制备女性避孕的药物中，通过提高母体血液中脂氧素的浓度，抑制受精着床所需的子宫内膜炎性微环境，从而可阻断着床。即将脂氧素应用在制备女性避孕的药物中，不仅可有效避孕，而且对肝肾功能无毒副作用，并且可重新恢复怀孕并正常分娩，符合对避孕措施所要求的能同时满足有效、安全、费用低廉、使用方便、可逆性好等条件。通过采用含脂氧素的药物抑制炎症，干预胚胎着床，是一种新型的女性避孕药物。

说明书

技术领域

本发明涉及避孕药物，具体地说涉及脂氧素在制备女性避孕药物中的应用。

背景技术

目前常用的避孕措施包括：(1)激素类的避孕药；(2)子宫腔内放置避孕环；(3)结扎手术。尽管口服激素类避孕药较为方便，但对女性内分泌产生影响，容易导致内分泌紊乱，从而带来诸多副作用，且避孕效果并不十分理想；腔内放置避孕环可导致月经时出血量多，并容易引起感染；结扎手术虽然完全避孕，但绝育后不可能再进行生育。即上述避孕措施均不能同时满足有效、安全、费用低廉、使用方便、可逆性好等条件。

脂氧素是细胞内不饱和脂肪酸花生四烯酸代谢的衍生物，具有抑制炎性细胞的趋化与激活、拮抗白三烯类炎症信号通路、抑制血管生成等特性，从而能够对炎症的多个环节产生抑制作用，被认为是炎症的“刹车”信号，是调控炎症的关键因素(Br J Pharmacol.2009；158：947-59；Annu Rev Pathol.2008；3：279-312；Curr Opin Pharmacol.2006；6：414-20)。也正是脂氧素所具有的这些特性，人们正研究将其应用在制备用于治疗炎性或自体免疫疾病和肺与呼吸道疾病的药物中，如治疗银屑病、类风湿性关节炎和哮喘等疾病的药物中，也有将其应用在制备用于治疗肿瘤的药物中。

发明内容

本发明的目的是提供一种脂氧素在制备女性避孕药物中的应用。

本发明所述女性避孕药物为含有脂氧素和制药学上可接受的辅料制成的药物制剂。

上述药物制剂为口服制剂，具体地是胶囊剂、颗粒剂、片剂、软胶囊和滴丸。

上述药物制剂为针剂。

上述药物制剂的每制剂单位中的脂氧素含量为50ng-500ng。

上述含有脂氧素和制药学上可接受的辅料的药物制剂采用常规的制备方法制成所述各种剂型。

本发明药物制剂采用口服时，在女性性行为之后的48小时内口服。

受精怀孕是指精子和卵子细胞结合的过程，其中的着床过程的实质是胚胎对子宫内膜组织的侵袭、破坏而主动植入的过程。而子宫内膜组织的破坏损伤必然造成炎症。炎症是机体多种免疫细胞介导的对损伤的一种保护性机制，过强的炎症则会促进组织的损伤。但对胚胎着床而言，炎症则是必需的，并且母体子宫内膜在排卵期开始会诱导炎性细胞侵润，为着床所需炎症作准备。由此可知，抑制炎症可导致着床失败，从而使得胚胎发育终止。本发明正是据此发现，提出将脂氧素应用在制备女性避孕的药物中，通过提高母体血液中脂氧素的浓度，抑制受精着床所需的子宫内膜炎性微环境，从而可阻断着床。即将脂氧素应用在制备女性避孕的药物中，符合对避孕措施所要求的能同时满足有效、安全、费用低廉、使用方便、可逆性好等条件。因此，通过采用含脂氧素的药物抑制炎症，干预胚胎着床，是一种新型的女性避孕药物。

附图说明

图1脂氧素诱导雌性受孕小鼠避孕。

图2脂氧素对雌性受孕小鼠子宫内膜的影响，其中，图2a和图2b分别为生理盐水组和脂氧素组。

图3脂氧素抑制雌性受孕小鼠着床部位表达基质金属蛋白酶MMP9。

图4脂氧素抑制雌性受孕小鼠着床部位的炎性因子的表达。

图5脂氧素注射不影响雌性小鼠肝肾功能。

具体实施方式

为了证实脂氧素具有可抑制胚胎着床，有效避孕，并且对肝肾功能无毒副作用，而且可重新恢复怀孕并正常分娩的独有特性，下面结合附图和实施例进一步说明本发明。

实施例1：见图1，脂氧素诱导雌性受孕小鼠避孕。18g健康昆明雌性小鼠与雄性小鼠交配，通过取宫颈粘液涂片检测精子细胞，确定雌性小鼠受孕。对受孕小鼠分别在第24h，48h和72h给予腹腔注射20μg脂氧素一次。结果显示注射脂氧素的8只受孕小鼠均无新生胎鼠分娩，而对照生理盐水注射组的受孕小鼠均有7-12只胎鼠分娩。25天后，将脂氧素注射过的24只小鼠再与雄性小鼠交配，受孕后，发现这些小鼠均均有6-13只胎鼠分娩。

实施例2：见图2a和图2b，脂氧素对雌性受孕小鼠子宫内膜的影响。18g健康昆明雌性小鼠与雄性小鼠交配，通过取宫颈粘液涂片检测精子细胞，确定雌性小鼠受孕。对受孕小鼠在第24h腹腔注射20μg脂氧素或生理盐水一次。48h后，取小鼠子宫组织进行组织切片、HE染色。图2a作为对照组的生理盐水组显示子宫内膜间质疏松水肿，呈典型受孕后子宫内膜形态，而图2b的脂氧素组显示子宫内膜非常致密、腺体活跃增生，表现为内膜增生期形态。

实施例3：见图3，脂氧素抑制雌性受孕小鼠着床部位表达基质金属蛋白酶MMP9。18g健康昆明雌性小鼠与雄性小鼠交配，通过取宫颈粘液涂片检测精子细胞，确定雌性小鼠受孕。对受孕小鼠在第24h腹腔注射20μg脂氧素或生理盐水一次。48h后，取孕鼠着床部位组织(包括子宫内膜以及胚胎)进行明胶酶谱实验(Gelatin Zymography)，检测基质金属蛋白酶MMP9和MMP2的前体(pro-MMP9)及活化形式(activ-MMP2)活性。图3结果显示，脂氧素有效抑制雌性受孕小鼠着床部位表达基质金属蛋白酶MMP9极其活性。

实施例4：见图4，脂氧素抑制雌性受孕小鼠着床部位的炎性因子的表达。18g健康昆明雌性小鼠与雄性小鼠交配，通过取宫颈粘液涂片检测精子细胞，确定雌性小鼠受孕。对受孕小鼠分别在第24h，48h和72h给予腹腔注射20μg脂氧素或者对照生理盐水一次。24h后，取孕鼠着床部位组织(包括子宫内膜以及胚胎)进行real time RT-PCR定量检测炎性因子的表达。图4显示腹腔注射脂氧素显著抑制炎性细胞因子IFN-γ、IL-6、TGF-β和趋化因子CCL2以及诱导性一氧化氮合成酶iNOS的表达(管家基因GAPDH的表达作为内参)，与相应对照组相比，p值均小于0.05，各组小鼠数量n＝6。

实施例5：见图5，脂氧素注射不影响雌性小鼠肝肾功能。取18g健康昆明雌性小鼠，给予腹腔注射20μg脂氧素或者对照生理盐水，每天一次，连续7天，检测小鼠血中谷丙转氨酶和肌酐含量。与对照组比较，脂氧素组血中谷丙转氨酶和肌酐含量没有变化。图5显示为第8天所检测结果，其中脂氧素组n＝10，对照组n＝10。

实施例6：药物制剂的制备，所用脂氧素可为商品购买或自行人工合成。

1、软胶囊的制备

①襄壳：原料包括胶料、增塑剂、水和防腐剂，其中，胶料可以是明胶、阿拉伯胶；增塑剂可以是甘油、山梨醇；防腐剂可以是对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯。

②分散介质：可选用食用油、大豆油、花生油、聚乙二醇中的一种或几种。

③其它辅料：润湿剂可为土温类、司盘类，助悬剂可为蜂蜜蜡、单硬脂酸铝、乙基纤维素等。

按照常规的制备方法制成软胶囊制剂。

2、滴丸的制备

采用PEG4000、PEG6000、聚醚(poloxamer)、甘油明胶、聚氧乙烯单硬脂酸脂(s-40)中的一种或几种作为基质，其中，PEG4000、PEG6000为聚乙二醇类聚合物，是一种水溶性基质；聚醚(poloxamer)是乙烯氧化物和丙烯氧化物的镶嵌聚合物，是一种非离子表面活性剂；甘油明胶由明胶、甘油和水制成；聚氧乙烯单硬脂酸脂(s-40)能增加水难溶性药物的溶解。

按照常规的制备方法制成滴丸制剂。

3、颗粒剂的制备

采用β-环糊精作为包裹物，并加入蔗糖或糊精。

按照常规的制备方法制粒即得颗粒剂制剂。

上述制得的药物制剂采用口服时，在女性性行为之后的48小时内口服，药物制剂的每制剂单位中的脂氧素含量为100ng。