脂氧素A4及脂氧素A4受体在慢性鼻-鼻窦炎上皮-间质转化中的作用

摘要

目的： 研究脂氧素A4（LXA4）及脂氧素A4受体（ALXR）在慢性鼻-鼻窦炎上皮-间质转化（EMT）中的作用，进一步探究慢性鼻-鼻窦炎黏膜组织重塑的发病机制。 方法： （1）免疫组化、RT-PCR及Western blot检测慢性鼻-鼻窦炎患者鼻黏膜中ALXR的表达变化。 （2）体外研究LXA4及ALXR在鼻黏膜上皮-间质转化中的作用。体外培养鼻黏膜上皮细胞（HNEpC），分别加入0、0.1、1、10、100 ng/mLTGF-β1，诱导上皮向间质转化；TGF-β1诱导30min后，分别加入0、1、10、100、200 nM的LXA4，显微镜下观察细胞的形态变化，RT-PCR、Western blot测细胞表面标志E-cadherin(上皮细胞标志)、α-SMA(肌成纤维细胞)的表达变化，ELISA检测细胞培养液中Ⅲ型胶原蛋白的含量；预先用ALXR拮抗剂BOC-2处理30min后，再依次加入LXA4及TGF-β1，观察LXA4对TGF-β1诱导的HNEpC发生EMT的影响。 结果： （1）免疫组化示ALXR表达于鼻黏膜上皮和腺上皮细胞，在慢性鼻-鼻窦炎患者中为强阳性。RT-PCR、Western blot示慢性鼻-鼻窦炎患者ALXR的表达均高于对照组患者，而在慢性鼻窦炎伴鼻息肉中却低于单纯鼻窦炎患者，均有统计学差异（P<0.05）。 (2)一定浓度的TGF-β1能够诱导鼻黏膜上皮细胞发生EMT，致细胞形态、功能及表面标志均发生变化；TGF-β1作用120h，细胞变得疏松，部分由扁平状变为长梭形，E-cadherin表达减少，α-SMA表达增加，且培养皿中Ⅲ型胶原蛋白的沉积量也随着观察时间的延长逐渐的增加。 (3)一定浓度的LXA4可抑制TGF-β1诱导的EMT，阻止细胞转化为梭形，抑制α-SMA的表达，而ALXR拮抗剂BOC-2可减弱LXA4的抑制作用，说明LXA4对TGF-β1诱导鼻黏膜上皮-间质转化的抑制作用至少有一部分是通过该受体实现的。 结论： （1）ALXR在慢性鼻-鼻窦炎患者中高表达。 （2）一定浓度的TGF-β1能够诱导鼻黏膜上皮细胞发生EMT，致细胞形态、功能及表面标志均发生变化。 （3）一定浓度的LXA4可通过ALXR抑制TGF-β1诱导的鼻黏膜上皮-间质转化。 （4）因此LXA4及ALXR可能参与黏膜组织的重塑，与慢性鼻-鼻窦炎的病理生理过程密切相关。

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前言

1 上皮-间质转化在慢性鼻-鼻窦炎组织重塑中的作用

2 脂氧素A4与脂氧素A4受体的生物学特性及作用

3 脂氧素A4与脂氧素A4受体在上皮-间质转化中的作用

第一部分 脂氧素A4受体（ALXR）在慢性鼻窦炎或鼻息肉中的表达及临床意义

材料及方法

1 材料

2 方法

3 统计学处理

结果

1 ALXR在慢性鼻-鼻窦炎患者中鼻甲黏膜中的表达

2 鼻黏膜组织中ALXR在mRNA和蛋白水平的表达

讨论

1 ALXR在慢性鼻-鼻窦炎黏膜中的表达

2 ALXR在慢性鼻窦炎或鼻息肉黏膜中高表达的临床意义

第二部分 体外研究脂氧素A4及脂氧素A4受体在鼻黏膜上皮-间质转化中的作用

材料及方法

1材料

2 方法

3 统计学处理

结果

1 不同浓度TGF-β1对HNEpC的影响

2 不同浓度LXA4对10ng/mLTGF-β1作用下鼻黏膜上皮间质转化的影响

3 ALXR受体参与TGF-β1诱导鼻黏膜上皮-间质转化

讨论

1 TGF-β1诱导鼻黏膜上皮细胞发生EMT

2 LXA4抑制TGF-β1诱导鼻黏膜上皮发生EMT

3 ALXR受体可能参与TGF-β1诱导鼻黏膜上皮-间质转化

4 LXA4及ALXR受体可能参与慢性鼻-鼻窦炎黏膜组织重塑

结论

参考文献

综述:脂氧素受体(ALXR/FPR2)与脂氧素A4在呼吸道疾病中的作用

致谢