作为选择性活性的雌激素的8β－取代的雌三烯

摘要

本发明涉及通式(I)的8β－取代的雌－1，3，5(10)－三烯衍生物、它们作为药物活性成分的用途、它们的制备、它们的治疗用途和包含所述新型化合物的药物分配形式，所述药物活性成分在体外与来自大鼠前列腺的雌激素受体制剂的亲和力高于与来自大鼠子宫的雌激素受体制剂的亲和力，并且在体内，与在子宫中相比，在卵巢中具有优先的作用。

说明书

发明领域

本发明涉及以下通式的新型8β-取代的雌-1，3，5(10)-三烯衍生物

其中基团R³、R⁸、R¹³、R¹⁶以及R¹⁷和R¹⁷′相互独立地具有以下含义：

R³表示氢原子或基团R¹⁸，其中

R¹⁸表示直链或支链的、饱和或不饱和的C₁-C₆烷基基团、三氟甲基、 任选地被至少一个独立地选自作为取代基的甲基、乙基、三氟 甲基、五氟乙基、三氟甲硫基、甲氧基、乙氧基、硝基、氰基、 卤代-、羟基、氨基、单(C₁-C₈烷基)氨基、或者其中两个烷基相 同或不同的双(C₁-C₈烷基)氨基、其中两个芳烷基相同或不同的 双(芳烷基)氨基、羧基、羧基烷氧基、C₁-C₂₀酰基或C₁-C₂₀酰氧 基的基团取代的芳基、杂芳基或芳烷基基团；

酰基基团-C(＝O)R¹⁹，其中R¹⁹是C₁-C₁₀烷基基团的直链或支链， 其是饱和的或至多在三个位置不饱和，并且被部分地或完全地 卤代，或者

R¹⁸表示基团R²⁰SO₂，其中

R²⁰是R²¹R²²N基团，其中R²¹和R²²相互独立地表示氢原子、 C₁-C₅烷基基团、其中R²³表示未取代的或取代的、直链或支 链的、饱和的或至多在三个位置不饱和、并且被部分地或完 全地卤代的C₁-C₁₀烷基基团的基团-C(＝O)R²³、环丙基、环 丁基、环戊基、环己基或环庚基、其中在环烷基部分含有3-7 个碳原子并且在烷基部分含有至多8个碳原子的C₄-C₁₅环烷 基烷基基团、或者任选地被至少一个独立地选自作为取代基 的甲基、乙基、三氟甲基、五氟乙基、三氟甲硫基、甲氧基、 乙氧基、硝基、氰基、卤代-、羟基、氨基、单(C₁-C₈烷基) 氨基、或者其中两个烷基相同或不同的双(C₁-C₈烷基)氨基、 其中两个芳烷基相同或不同的双(芳烷基)氨基、羧基、羧基 烷氧基、C₁-C₂₀酰基或C₁-C₂₀酰氧基的基团取代的芳基、杂 芳基或芳烷基基团；或者R²¹和R²²与N原子一起是含有4-6 个碳原子的聚亚甲基亚胺基(polymethylenimino)、或吗啉代 基团，

R⁸是含有2-6个碳原子的直链或支链的烯基或炔基基团，其任选地可 被部分地或完全地氟化，

R¹³是甲基或乙基，

R¹⁶是氟原子，

R¹⁷和R¹⁷′各自相互独立地是氢原子和羟基；或者是氢原子和基团 R¹⁸O-、R²⁰SO₂-或OC(O)R²³，其中R¹⁸、R²⁰和R²³各自是在R³下所示的含 义。

本发明还涉及所述新型8β-取代的雌-1，3，5(10)-三烯作为药物活性成分 的用途、它们的制备、它们的治疗用途和包含所述新型化合物的药物分配 形式，所述药物活性成分在体外与来自大鼠前列腺的雌激素受体制剂的亲 和力高于与来自大鼠子宫的雌激素受体制剂的亲和力，并且在体内，与在 子宫中相比，在卵巢中具有优先的作用。

本发明的8β-取代的雌-1，3，5(10)-三烯衍生物是新型的、甾体的、雌激 素受体亚型选择性的雌三烯，其具有提高的效力和代谢稳定性。

发明背景

雌三烯在激素缺乏诱导的症状例如潮热、雌激素靶器官萎缩和失禁的 治疗中的有效性，以及雌激素疗法成功地用于预防围绝经期和绝经后妇女 的骨量丢失已被充分地证明并被普遍认可(Grady等，1992，Ann Intern Med 117：1016-1037)。也已充分地证明，与未用雌激素治疗的妇女相比，在绝经 后妇女或患有以某些其他方式造成的卵巢功能不全的妇女中，雌激素替代 疗法降低心血管疾病的风险(Grady等，在上述引文中)。

在常规的雌激素或激素替代疗法(＝HRT)中，天然雌激素例如雌二醇和 由马尿组成的结合型雌激素，或者独自使用，或者与促孕激素联合使用。 也可以使用通过酯化得到的衍生物例如戊酸17β-雌二醇酯替代所述天然雌 激素。

因为用在子宫内膜上的雌激素的刺激作用导致子宫内膜癌的风险增加 (Harlap，S.1992，Am J Obstet Gynecol 166：1986-1992)，在激素替代疗法中优 选使用雌激素/促孕激素联合制剂。雌激素/促孕激素联合中的促孕激素组分 避免了子宫内膜的肥大，但是不期望的周期内(intracyclic)经血的发生也与 含促孕激素的联合有关。

选择性雌激素代表了所述雌激素/促孕激素联合制剂的更新的替代。到 目前为止，选择性雌激素已被定义为这样的化合物：由于它们的抗亲子宫 的(antiuterotropic)(即抗雌激素)局部作用，它们对脑、骨和血管系统具有雌 激素样效力，但是它们对子宫内膜没有增生效力。

一类部分地满足选择性雌激素的理想特征的物质，是所谓的“选择性雌 激素受体调节剂”(SERM)(R.F.Kauffman，H.U.Bryant 1995，DNAP 8(9)： 531-539)。在这种情况下，这些是雌激素受体亚型“ERα”的部分激动剂。但 是，这一物质类型在治疗急性绝经后症状例如潮热方面是无效的。可以提 及最近介绍用于骨质疏松的适应症的雷诺昔芬作为SERM的实例。

新型的选择性雌激素的使用，也为经常由(由手术、药物疗法等导致的) 卵巢功能不全导致的女性不孕症的治疗提供了新的可能的疗法。体外不孕 症治疗是已建立20多年的方法。用外原的促性腺素治疗卵巢诱导的不孕症 的很多方法是已知的。通过给药促性腺素例如FSH(FSH＝促卵泡激素)， 会产生卵巢的刺激，该刺激使卵泡健康的成熟成为可能。

卵泡是卵巢的功能单位，具有两种用途：它调节卵母细胞并且为后者 提供生长和成熟的可能。卵泡发育(Folliculogenesis)包括卵泡由原始阶段向 持续增大的、代表排卵前的最后阶段的囊状卵泡的发育。只有最佳地发育 的囊状卵泡才可通过排卵释放出成熟的卵母细胞。

患有卵巢诱导的不孕症(PCOS＝多囊卵巢综合征)的患者的卵泡成熟 受到干扰(disrupted)，其与激素和排卵干扰(disruptions)以及卵母细胞成熟不 充分有关。此时，初级和次级卵泡的数量约是正常卵巢的两倍高(Hughesden 等，Obstet.Gynecol.Survey 37，1982，pp.59-77)。

有指示表明，卵泡发育的早期发育阶段(其与原始卵泡向囊状卵泡的发 育有关)是非促性腺素依赖性的。尚未清楚地解释已知的旁分泌和自分泌因 子对早期卵泡发育的影响有多大(Elvin等，Mol.Cell Endocrinol.13，1999，pp. 1035-1048；McNatty et al.，J.Reprod.Fertil.Suppl.54，1999，pp.3-16)。

促性腺素例如FSH主要参与卵泡成熟过程中卵泡发育的最后发育阶 段，即，早期囊状卵泡向可以经历排卵的成熟卵泡的发育。

体内和体外不孕症优选用促性腺素(FSH和抗雌激素)治疗(White等，J. Clin.Endocrinol.Metab.81，1996，pp.3821-3824)。在体外受精治疗中，卵母 细胞被从排卵前的囊状卵泡中取出，从而能够在体外成熟为可以被受精的 卵母细胞。受精和早期胚胎发育之后，一至三个胚胎被植入到女性的子宫 中。

在许多方面，用外原的促性腺素的治疗伴有各种风险和副作用。最大 的风险在于卵巢的过度刺激，其在严重的情况下可以对生命造成严重的危 险(OHSS＝卵巢过度刺激综合征)。其他副作用是必须由夫妇支付的昂贵的 体外受精治疗花费。负面的副作用例如体重增加、腹胀(bloatedness)、恶心、 呕吐和尚未知的形成癌症的长期风险都是由于促性腺素治疗。

避免上述缺点和风险的一个方法是，在卵巢诱导的不孕症的情况下， 在用外原的促性腺素开始治疗前，用适当的活性成分保证卵泡生长的体内 成熟和刺激。

雌激素受体β(ERβ)

几年前，发现雌激素受体β(ERβ)是雌激素受体的另一亚型(Kuiper等 (1996)，Proc.Natl.Acad.Sci.93：5925-5930；Mosselman，Dijkema(1996)Febs Letters 392：49-53；Tremblay等(1997)，Molecular Endocrinology 11：353-365)。 ERβ的表达模式不同于ERα(Kuiper等(1996)，Endocrinology 138：863-870)。 因此，在大鼠前列腺中ERβ比ERα有优势，而在大鼠子宫中ERα比ERβ 有优势。ERβ和mRNA的最高浓度见于卵巢中(Couse等，Endocrinology 138， 1997，pp.4612-4613)。

具有比较高的ERβ表达的其他器官系统包括骨(Onoe，Y.等，1997， Endocrinology 138：4509-4512)、血管系统(Register，T.C.，Adams，M.R.1998， J.Steroid Molec Biol 64：187-191)、泌尿生殖道(Kuiper，G.J.M.等，1997， Endocrinology 138：863-870)、胃肠道(Campbell-Thopson 1997，BBRC 240： 478-483)，以及睾丸(Mosselmann，S.等，1996FEBS Lett.392，49-53)，包括精 细胞(Shugrue等，1998，Steroids 63：498-504)。该组织分布表明器官功能经 ERβ的雌激素调节是高度相关的。ERβ具有这方面的功能的事实也由在 ERα-敲除小鼠(ERKO)或ERβ-敲除小鼠(βERKO)中的研究证明：卵巢切除 导致ERKO小鼠骨量丢失，该骨量丢失可以通过雌激素替代来消除(Kimbro 等，1998，Abstract OR7-4，Endocrine Society Meeting，New Orleans)。雌性 ERKO小鼠血管中的雌二醇也抑制血管中膜和平滑肌细胞的增生(Iafrati，M. D.等，1997，Nature Medicine 3：545-548)。雌二醇的这些保护作用被假设经 ERβ在ERKO小鼠中进行。

在成功产生ERKO小鼠和βERKO小鼠之后，证实了ERα和ERβ具有 功能上不同的作用的事实。因此，ERα在成体子宫、乳腺组织、促性腺素 活性的负调节中起重要作用，而ERβ主要与卵巢生理、特别是卵泡发育和 排卵的过程有关(Couse等，Endocrine Reviews 20，1999，pp.358-417)。

对βERKO小鼠的观察提供了ERβ在前列腺和膀胱中的功能的指示： 在老年雄性小鼠的情况下，出现前列腺和膀胱增生的症状(Krege，J.H.等， 1998，Proc Natl Acad Sci 95：15677-15682)。此外，雌性ERKO小鼠(Lubahn， D.B.等，1993，Proc Natl Acad Sci 90：11162-11166)和雄性ERKO小鼠(Hess， R.A.等，1997，Nature 390：509-512)以及雌性βERKO小鼠(Krege，J.H.，1998， Proc Natl Acad Sci 95：15677-15682)患有不育症。因此，证实了雌激素在维 持睾丸和卵巢功能以及生育力方面的重要功能。

根据该两种亚型的ER不同的组织或器官分布，可能通过亚型特异性 配体实现对特定靶器官的选择性雌激素作用。在体外受体结合试验中，与 ERα相比，对ERβ具有优先性的物质由Kuiper等(Kuiper等，(1996)， Endocrinology 138：863-870)描述。以前未证明在体内雌激素受体的亚型特 异性配体对雌激素敏感性参数的选择性作用。

专利申请WO 01/77139A1描述了作为药物活性成分的8β-取代的雌三 烯、它们的制备、它们的治疗用途和包含所述化合物的药物分配形式，所 述药物活性成分在体外与来自大鼠前列腺的雌激素受体制剂的亲和力高于 与大鼠子宫的雌激素受体制剂的亲和力，其中R⁸表示直链或支链的、任选 地部分地或完全地卤代的、含有至多5个碳原子的烷基或烯基基团、乙炔 基或丙-1-炔基基团。在WO01/77139中也描述化合物3-甲氧基-8-乙烯基- 雌-1，3，5(10)-三烯-17-酮(实施例6)。

在本技术领域，非常需要这样的用于制备药物的化合物，其具有有力 的雌激素活性，并且与大鼠前列腺的雌激素受体制剂的亲和力高于与大鼠 子宫的雌激素受体制剂的亲和力。

发明目的

因此，本发明的目的是制备在与来自大鼠前列腺和大鼠子宫的雌激素 受体制剂的结合方面在体外高度分离的化合物。所述化合物显示，其在体 外与来自大鼠前列腺的雌激素受体制剂的亲和力高于与来自大鼠子宫的雌 激素受体制剂的亲和力。

本发明的化合物具有强有力的雌激素活性和效力，即，就已知化合物 而言，本发明的化合物具有更高的与大鼠前列腺雌激素受体的亲合力和在 与大鼠前列腺雌激素受体的结合相较于与子宫雌激素受体的结合方面更好 的分离。

在卵巢相关的不孕症的情况下，本发明的化合物会产生增强的卵巢生 育力，而同时对子宫的影响非常小。

本发明化合物的有利特征是通过取代基R⁸、R¹³、R¹⁶、R¹⁷和R¹⁷’的特 定组合而实现的。

根据本发明，以上目的是通过提供通式I的8β-取代的雌-1，3，5(10)-三 烯衍生物而实现的

其中基团R³、R⁸、R¹³、R¹⁶以及R¹⁷和R¹⁷′相互独立地具有以下含义：

R³表示氢原子或基团R¹⁸，其中

R¹⁸表示直链或支链的、饱和或不饱和的C₁-C₆烷基基团、三氟甲基、 任选地被至少一个独立地选自作为取代基的甲基、乙基、三氟 甲基、五氟乙基、三氟甲硫基、甲氧基、乙氧基、硝基、氰基、 卤代-、羟基、氨基、单(C₁-C₈烷基)氨基、或者其中两个烷基相 同或不同的双(C₁-C₈烷基)氨基、其中两个芳烷基相同或不同的 双(芳烷基)氨基、羧基、羧基烷氧基、C₁-C₂₀酰基或C₁-C₂₀酰氧 基的基团取代的芳基、杂芳基或芳烷基基团；

酰基基团-C(＝O)R¹⁹，其中R¹⁹是C₁-C₁₀烷基基团的直链或支链， 其是饱和的或至多在三个位置不饱和，并且被部分地或完全地 卤代，或者

R¹⁸表示基团R²⁰SO₂，其中

R²⁰是R²¹R²²N基团，其中R²¹和R²²相互独立地表示氢原子、 C₁-C₅烷基基团、其中R²³表示未取代的或取代的、直链或支 链的、饱和的或至多在三个位置不饱和、并且被部分地或完 全地卤代的C₁-C₁₀烷基基团的基团-C(＝O)R²³、环丙基、环 丁基、环戊基、环己基或环庚基、其中在环烷基部分含有3-7 个碳原子并且在烷基部分含有至多8个碳原子的C₄-C₁₅环烷 基烷基基团、或者任选地被至少一个独立地选自作为取代基 的甲基、乙基、三氟甲基、五氟乙基、三氟甲硫基、甲氧基、 乙氧基、硝基、氰基、卤代-、羟基、氨基、单(C₁-C₈烷基) 氨基、或者其中两个烷基相同或不同的双(C₁-C₈烷基)氨基、 其中两个芳烷基相同或不同的双(芳烷基)氨基、羧基、羧基 烷氧基、C₁-C₂₀酰基或C₁-C₂₀酰氧基的基团取代的芳基、杂 芳基或芳烷基基团；或者R²¹和R²²与N原子一起是含有4-6 个碳原子的聚亚甲基亚胺基基团、或吗啉代基团，

R⁸是含有2-6个碳原子的直链或支链的烯基或炔基基团，其任选地可 被部分地或完全地氟化，

R¹³是甲基或乙基，

R¹⁶是氟原子，

R¹⁷和R¹⁷′各自相互独立地是氢原子和羟基；或者是氢原子和基团 R¹⁸O-、R²⁰SO₂-或OC(O)R²³，其中R¹⁸、R²⁰和R²³各自是在R³下所示的含 义。

本发明特别的实施方案是其中R³是氢原子的通式I的化合物。

根据本发明的另一个实施方案，通式I的化合物包含为乙烯基、乙炔 基或丙-1-炔基的R⁸。

本发明其他可能形式的实施方案由从属权利要求定义。

进一步地优选其中R¹⁷和R¹⁷′是氢原子和羟基原子的通式I的化合物。

其中R¹⁶在α-位的通式I的化合物或其中R¹⁶在β-位的通式I的化合物， 是本发明的实施方案的同样优选的形式。

此外，本发明的特别的实施方案是这样的通式I的化合物，其中R⁸是 乙烯基、乙炔基或丙-1-炔基，R¹⁶是氟原子，R¹⁷和R¹⁷′相互独立地是氢原 子和羟基原子。

本发明的另一个特别形式的实施方案是这样的通式I的化合物，其中 R¹⁷和/或R¹⁷′是氢原子和基团R¹⁸-O-或R¹⁹SO₂-O-，其中R¹⁸和R¹⁹各自是在 R³下所示的含义。

本发明另一个变形具体需要这样的化合物，其中R¹⁷代表基团R¹⁸O-或 R²⁰SO₂-O-，其中在R¹⁸和R²⁰各自是在R³下所示的含义。

本发明的化合物是：

8β-乙烯基-16α-氟-雌-1，3，5(10)-三烯-3，17α-二醇

8β-乙烯基-16α-氟-雌-1，3，5(10)-三烯-3，17β-二醇

8β-乙烯基-16β-氟-雌-1，3，5(10)-三烯-3，17β-二醇。

根据本发明，氟、氯、溴或碘原子意在作为卤代-或卤素。

由于烷基基团一般指(C₁-C₆)烷基基团，只要无不同说明，所述烷基基 团是饱和或不饱和的直链或支链。根据本发明，烷基基团的代表性基团是 甲基、乙基、正丙基、1-甲基乙基(异丙基)、正丁基、正戊基、1，1-二甲基 乙基(叔丁基)和正己基。所述C₁-C₆烷基基团可以被卤素原子、羟基或C₁-C₆烷氧基部分地或完全地取代。

根据以上定义，R¹⁸是例如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、 叔丁基、戊基、异戊基、新戊基或己基基团。

在各情况下，通式I的化合物中的烷氧基OR¹⁸可以包含根据上述定义 的烷基基团，其中甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基和叔丁氧基是优选 的烷氧基基团。

所述C₁-C₅烷基基团R²¹和R²²的代表是甲基、乙基、丙基、异丙基、 丁基、异丁基、叔丁基、戊基、异戊基和新戊基。

可以提及例如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、叔丁基、 戊基、异戊基、新戊基、庚基、己基和癸基作为直链或支链的C₁-C₁₀烷基 基团R²³的代表；优选甲基、乙基、丙基和异丙基。

可以提及环丙基、环丁基、环戊基、环己基或环庚基作为C₃-C₇环烷基。

C₄-C₁₅环烷基烷基基团在环烷基部分包含3-7个碳原子；典型代表是紧 上面提及的环烷基。烷基部分包含至多8个碳原子。

可以提及环丙基甲基、环丙基乙基、环戊基甲基、环戊基丙基等作为 C₄-C₁₅环烷基烷基基团的实例。

就本发明而言，芳基基团是苯基、1-或2-萘基基团；优选所述苯基基 团。

根据本发明，杂芳基基团的实例是2-、3-或4-吡啶基、2-或3-呋喃基、 2-或3-噻吩基、2-或3-吡咯基、2-、4-或5-咪唑基、吡嗪基、2-、4-或5-嘧 啶基、或者3-或4-哒嗪基基团。

可以存在于芳基或杂芳基基团上的取代基可以是例如甲基-、乙基-、三 氟甲基-、五氟乙基-、三氟甲硫基-、甲氧基-、乙氧基-、硝基-、氰基-、卤 素-(氟、氯、溴、碘)、羟基-、氨基-、单(C₁-C₈烷基)氨基、或者其中两个 烷基相同或不同的双(C₁-C₈烷基)氨基、其中两个芳烷基相同或不同的双(芳 烷基)氨基、羧基、羧基烷氧基、C₁-C₂₀酰基或C₁-C₂₀酰氧基；

芳烷基基团是在环中包含至多14个、优选6-10个C原子，并且在烷 基链中包含1-8个、优选1-4个C原子的基团。因此，例如苄基、苯基乙 基、萘基甲基、萘基乙基、呋喃基甲基、噻吩基乙基和吡啶基丙基适合作 为芳烷基基团。

所述烷基和烷基基团可以被1-5个卤素原子、羟基或C₁-C₄烷氧基部分 地或完全地取代。

乙烯基或烯丙基基团主要用C₂-C₆烯基基团定义。

C₂-C₆炔基基团优选定义为乙炔基基团或丙-1-炔基基团。

C_1-10酰基基团表示例如乙酰基、丙酰基、丁酰基、戊酰基、异戊酰基、 新戊酰基、己酰基、辛基、壬基或癸酰基。

C原子3和16处的一个或两个羟基可以用脂族的、直链或支链的、饱 和或不饱和的C₁-C₁₄-一元羧酸或多元羧酸、或者芳族羧酸酯化。

适合作为所述用于酯化的羧酸是例如：

-一元羧酸：甲酸、乙酸、丙酸、丁酸、异丁酸、戊酸、异戊酸、新 戊酸、月桂酸、肉豆蔻酸、丙烯酸、丙酸、甲基丙烯酸、巴豆酸、异巴豆 酸、油酸和反油酸。

优选用乙酸、戊酸或新戊酸酯化。

-二元羧酸：草酸、丙二酸、琥珀酸、戊二酸、己二酸、庚二酸、辛 二酸、壬二酸、癸二酸、马来酸、富马酸、粘康酸、柠康酸和甲基富马酸。

-芳族羧酸：苯甲酸、苯二甲酸、间苯二甲酸、对苯二甲酸、萘甲酸， 邻-、间-和对-甲苯甲酸、氢化阿托酸、阿托酸、肉桂酸、烟酸和异烟酸。

优选用苯甲酸酯化。

作为前药，与未酯化的活性成分相比，本发明的8β-取代的雌三烯的酯 在它们的给药方法、它们的作用类型、作用强度和持续时间方面具有优势。

特别地，本发明的8β-取代的雌三烯的氨基磺酸酯具有药代动力学和药 效学优势。相关效力已在其他甾体-氨基磺酸酯(J.Steroid Biochem.Molec. Biol，55，395-403(1995)；Exp.Opinion Invest.Drugs 7，575-589(1998))中有 描述。

在本申请中，基于8β-取代的雌-1，3，5(10)-三烯骨架的甾体被描述作为 选择性雌激素用于治疗雌激素受体β-介导的病症和病状，所述选择性雌激 素在它们与来自大鼠前列腺和大鼠子宫的雌激素受体制剂的结合方面具有 体外分离，并且优选在体内在卵巢作用相较于子宫作用方面是分离的。

本发明的ERβ-特异性化合物会在体内在卵巢中介导促生育力 (profertility)作用。同时，所述化合物会在卵巢作用相较于子宫作用方面显 示分离。

已发现，通式I的8β-取代的雌-1，3，5(10)-三烯适于作为用于治疗各种 病状和病症的选择性雌激素，所述病状和病症的特点是，在相应的靶组织 或靶器官中，雌激素受体β的含量高于雌激素受体α。所述化合物具有提高 的效力和代谢稳定性。

本发明还涉及包含至少一种通式I的化合物(或其生理上可接受的与 有机或无机酸的加成盐)的药物制剂和通式I的化合物用于制备特别用于 下述适应症的药剂的用途。

本文描述的新型选择性雌激素可用作药物制剂的单独组分、或特别地 与促孕激素联用。部分的本发明是选择性雌激素与ERα-选择性抗雌激素(其 为周围选择性活性的，即不通过血脑屏障)的联合，以及与选择性雌激素受 体调节剂(SERM)的联合。

本发明的ERβ-选择性化合物可以具体地用于制备用于治疗生育力病 症的药剂、用于预防和治疗前列腺增生的药剂、用于预防和治疗女性和男 性的激素缺乏诱导的心境不稳的药剂、和用于男性和女性的激素替代疗法 (HRT)的药剂。

此外，本发明的化合物在结肠和小肠增生模型中具有抗增生效力，因 此可以被给药用于预防和治疗与结肠和小肠上皮增生相关的疾病，例如用 于治疗和预防癌症。

本发明的ERβ-特异性化合物可有利地用于选择性地刺激毛发生长。

已在EP-A 0346014中描述了这样的治疗产品，其包含用于同时、连续 或分开地用于围绝经期或绝经后病状的选择性雌激素治疗的雌激素和纯粹 的抗雌激素。

因为所述物质在卵巢中作用相较于子宫作用的分离，所以它们和包含 它们的药剂特别适用于在由手术、药物疗法等导致的卵巢功能不全的情况 下治疗例如女性不孕症，以刺激卵泡发育，通过其自身以提高生育力的方 式治疗，用于与体内治疗相结合支持体外受精治疗，和用于治疗高龄者(later age)(“晚育者”)的卵巢诱导的病症，以及用于治疗激素缺乏诱导的症状。

本发明的化合物也适用于治疗卵巢疾病，例如多囊卵巢综合征、POF (卵巢功能早衰)综合征和排卵障碍。

最后，通式I的化合物可与选择性雌激素受体调节剂(SERM)或雷诺昔 芬结合使用，具体用于激素替代疗法(HRT)和用于治疗妇科病症。

本发明的8β-取代的雌三烯也适合作为单独组分，用于治疗围绝经期和 绝经后症状，特别是潮热、睡眠障碍、易怒、心境不稳、失禁、阴道萎缩 和激素缺乏诱导的精神障碍。以上8β-取代的雌三烯也适用于激素替代和治 疗由手术、药物疗法等导致的卵巢功能不全的激素缺乏诱导的症状。

而且，本发明的8β-取代的雌三烯也用于预防心血管疾病，特别是血管 疾病例如动脉粥样硬化、高血压、高血压心脏病，和预防激素缺乏诱导的 神经退行性疾病例如阿尔兹海默氏病以及激素缺乏诱导的记忆和学习能力 的损害。

而且，本发明的化合物可在制剂中用作活性成分，用于治疗炎性疾病 和免疫系统疾病，特别是自身免疫疾病，例如类风湿性关节炎、多发性硬 化、狼疮、克罗恩病和其他炎性肠病、皮肤的炎性疾病例如银屑病，以及 用于治疗子宫内膜异位症。根据来自人类炎性疾病的临床前模型的证据， 所述ERβ-特异性化合物因此可以用于预防和治疗上述疾病(Heather，H.A.； Mol Endocrinol.2007Jan；21(1)：1-13.Epub 2006Mar 23.Review)。

而且，所述化合物有效地对抗呼吸系统、肺和支气管的炎性疾病，例 如哮喘。

所述药物适用于治疗和预防女性和男性的雌激素缺乏诱导的疾病。

本发明的化合物也适用于预防和治疗前列腺增生。

所述化合物还可以用于预防和治疗人类年龄相关性功能不全或疾病。 特别地，它们可用于预防和治疗雄激素例如睾酮和DHEA以及生长激素的 年龄相关性下降。

待给药的通式I的化合物的量在很宽的范围内变化，而且可以覆盖任 意有效量。根据待治疗的病状和给药的类型，所述化合物的给药量可以是 0.01μg/kg-100mg/kg体重/天，优选0.04μg/kg-1mg/kg体重/天。

在人类，这相当于0.8μg-8g/天的剂量，优选3.2μg-80mg/天的剂量。

根据本发明，剂量单位包含1.6μg-2000mg的一种或多种通式I的化合 物。

本发明的化合物和所述酸加成盐适用于制备药物组合物和制剂。所述 药物组合物或药剂包含一种或多种本发明的化合物或它们的酸加成盐作为 活性成分，并任选地与其他药理学或药学活性物质混合。以已知方式制备 所述药剂，其中可以使用已知的和常用的药学辅剂以及其他常用的载体和 稀释剂。

例如，在以下参考文献中被推荐或指示作为药物、化妆品和相关领域 的辅剂的那些，适合作为所述载体和辅剂：Ullmansder technischen Chemie[Ullman′s Encyclopedia of Technical Chemistry]，第4卷 (1953)，第1-39页；Journal of Pharmaceutical Sciences，第52卷(1963)，第 918页以及以下各页，由Czetsch-Lindenwald、Hilfsstoffe für Pharmazie和 angrenzende Gebiete发表，[Adjuvants for Pharmaceutics and Related Fields]； Pharm.Ind.，第2期，1961，第72页及以下各页：Dr.H.P.Fiedler，Lexikon der Hilfsstoffe für Pharmazie，Kosmetik和angrenzende Gebiete[Dictionary of Adjuvants for Pharmaceutics，Cosmetics and Related Fields]，Cantor KG， Aulendorf in Württemberg 1971。

所述化合物可以口服或肠胃外给药，例如腹膜内、肌内、皮下或经皮 给药。也可以将所述化合物植入到组织中。

对于口服给药，适合的是胶囊、丸剂、片剂、包衣片剂等。除所述活 性成分外，所述剂量单位可以包含药学上相容的载体，例如淀粉、糖、山 梨糖醇、明胶、润滑剂、硅酸、滑石等。

为了肠胃外给药，可以将所述活性成分溶于或悬浮于生理上相容的稀 释剂中。使用很平常的油类作为稀释剂，添加或不添加助溶剂、表面活性 剂、助悬剂或乳化剂。使用的油类的实例是橄榄油、花生油、棉籽油、大 豆油、蓖麻油和芝麻油。

所述化合物已可以积存(depot)注射液或植入制剂的形式使用，可以配 制所述形式，使得能够延迟释放活性成分。

移植物可以包含例如生物可降解聚合物或合成聚硅氧烷例如硅橡胶作 为惰性材料。此外，为了经皮给药，可以将所述活性成分添加到例如贴剂 中。

各种聚合物例如聚硅氧烷聚合物、乙烯醋酸乙烯酯、聚乙烯或聚丙烯， 适于制备用于局部给药的装载通式I的活性化合物的阴道内系统(例如阴 道环)或子宫内系统(例如子宫托(pessaries)、子宫环(coils)、IUD和 Mirena^(R))。

为了获得所述活性成分的更好的生物利用度，也可以将所述化合物配 制成环糊精包合物。为此目的，使所述化合物与α-、β-或γ-环糊精或后者 的衍生物反应(PCT/EP95/02656)。

根据本发明，也可以用脂质体包封通式I的化合物。

方法

雌激素受体结合研究

在竞争性实验中，用³H-雌二醇作为来自大鼠前列腺和大鼠子宫的雌激 素受体制剂的配体，测试了所述新型选择性雌激素的亲合力。如Testas等 (1981)(Testas，J.等，1981，Endocrinology 109：1287-1289)所述，制备前列腺 细胞溶胶，并用前列腺细胞溶胶进行雌激素受体试验。

基本上如Stack和Gorski，(1985)(Stack，Gorski 1985，Endocrinology 117， 2024-2032)所述，并如Fuhrmann等(1995)(Fuhrmann，U.等，1995， Contraception 51：45-52)所述加上一些修改，制备大鼠子宫细胞溶胶，并用 含ER的细胞溶胶进行所述受体试验。

本文描述的物质与来自大鼠前列腺的雌激素受体的亲合力高于与来自 大鼠子宫的雌激素受体的亲合力。在这种情况下，假定在大鼠前列腺中ERβ 比ERα有优势，而在大鼠子宫中ERα比ERβ有优势。表1显示，与前列 腺和子宫受体结合的比率定性上符合与大鼠的人类ERβ和ERα的相对亲合 力(RBA)的商(根据Kuiper等(1996)，Endocrinology 138：863-870)(表1)。

表1

^*引自：Kuiper等(1996)，Endocrinology 138：863-870

表2显示本发明的8β-乙烯基-雌-1，3，5(10)-三烯-3，17-二醇衍生物之一 (化合物1)的结果。显示化合物2(8β-乙烯基-雌-1，3，5(10)-三烯-3，17-二 醇)作为参照。

表2

  化合物   大鼠子宫   ER(RBA)   大鼠前列腺   ER(RBA)   前列腺ER/   子宫ER   8β-乙烯基-雌-1，3，5(10)-16α-氟   -3，17β-二醇(1)   1.7   167   98   8β-乙烯基-雌-1，3，5(10)-3，17β-二醇   (2)   0.7   63   90

本发明的化合物1和化合物2显示与来自大鼠前列腺的雌激素受体的 亲合力高于与来自大鼠子宫的雌激素受体的亲合力。化合物1优于化合物 2，表现在与大鼠前列腺雌激素受体的亲合力更高，和就与大鼠前列腺雌激 素受体相较于与大鼠子宫雌激素受体的结合而言的分离更好。

此外，通过体内研究证实了前列腺ER相较于子宫ER试验体系在组织 选择性作用方面的可预测性。对前列腺ER具有优先性的物质就卵巢和子 宫作用以及脑垂体作用而言在体内优选地分离，有利于对卵巢的作用。

研究子宫和脑垂体的作用的分离

在成体雌性大鼠(体重220-250g)上进行对子宫生长和排卵的作用方 面的研究。将物质在连续四天内皮下给药四次。第一次给药在动情后期内 进行。最后一次给药一天后，进行尸体解剖。测定输卵管中的卵母细胞的 数量(对排卵的作用)以及子宫重量。

雌二醇产生剂量依赖性的排卵抑制和增加子宫重量，ED₅₀为0.004 mg/kg体重，而本发明的物质对脑垂体和子宫重量不发挥任何作用。

卵巢研究：

在体内在切除垂体的幼体大鼠上试验化合物。在该操作方法的修改中， 向动物给药GnRH拮抗剂(西曲瑞克)。检验这些物质是否刺激卵巢的卵泡 增生(成熟)。卵巢重量是测量参数。

在各情况下，随机分配五只动物(体重40-50g)到治疗组。在空调房 间内，在照明程序(12小时黑暗，12小时明亮)下，动物在Makrolon笼 中随意饲喂标准饮食(altromin)。为了皮下给药，将试验物质和对照物质 (雌二醇E2)溶于苯甲酸苄酯/蓖麻油(1+4v/v)。

幼体雌性大鼠，或在第0天被切除垂体并在第1天至第4天用雌二醇、 本发明的化合物皮下治疗(给药1次×每天)，或用载体(蓖麻油/苯甲酸苄 酯)皮下治疗(给药1次×每天)。在该方法的修改版本中，在四天的治疗 中，将0.5mg/动物/天的西曲瑞克同时和本发明的化合物或者所述载体和对 照物质雌二醇给药于动物。在这两种情况下，均在最后一次给药24h后处 死动物，测定卵巢重量和卵泡阶段。

由此，本发明的化合物显示在卵巢中作用相较于子宫作用和脑垂体作 用的明显分离，并且由于它的卵泡刺激作用而极为适用于治疗女性不孕症。

本发明化合物的制备

如实施例中所述，制备本发明的通式I的化合物。通过类似的方法， 使用与实施例中描述的试剂类似的试剂，可以得到通式I的其他化合物。

按照本领域技术人员通用的方法，进行游离羟基的醚化和/或酯化。

本发明的化合物可在碳原子16和17上存在α，β-立体异构体。在按照 所述方法制备化合物时，所述化合物在大多数情况下累积为相应的α，β-异 构体的混合物。所述混合物可以通过例如色谱方法分离。

根据通式I，可能的取代基可早已存在于最终形式中，或存在于前体的 形式中，甚至是存在于起始产物(早已对应期望的终产物的取代的雌酮) 中

还按照已知的方法，通过期望的取代基或其反应性前体的亲核加成反 应，引入17-取代基，并任选地进一步增加(built up)。

类似于亦已公知的方法(参见例如Pharmazeutische Wirkstoffe， Synthesen，Patente，Anwendungen  [Pharmaceutical Active Ingredients， Syntheses，Patents，Applications]；A.Kleemann，J.Engel′，Georg Thieme Verlag Stuttgart 1978，Arzneimittel，Fortschritte[Pharmaceutical Agents， Improvements]1972-1985；A.Kleemann，E.Lindner，J.Engel(Editors)，VCH 1987，pp.773-814)，由相应的羟基甾体，制备本发明的8β-取代的雌三烯- 羧酸酯。

以本领域已知的方法，在碱的存在下，由相应的羟基甾体，通过用氨 磺酰氯酯化，得到本发明的雌三烯-氨基磺酸酯。

然后酰化磺酰胺基团，得到本发明的(N-酰基)氨基磺酸酯，其药代动力 学优势已在不存在8-取代基的情况下测出(参见DE 19540233A1)。

按照部分地保护那些保持未酯化的羟基，用N-取代的和N-未取代的氨 磺酰氯位置选择性地酯化多羟基化的甾体。已证明，甲硅烷基醚是具有适 合此目的的选择性反应性的保护基，因为这些甲硅烷基醚在氨基磺酸酯形 成的条件下是稳定的，并且当这些甲硅烷基醚被再次裂解以恢复仍包含在 分子中的剩余羟基时，所述氨基磺酸酯基团仍保持完整(Steroids 61，710-717 (1996))。也可能制备分子中含有一个或多个附加的羟基的本发明的氨基磺 酸酯，因为该原料是适合的羟基甾体酮。首先，根据目标，使存在的一个 或多个羟基进行氨磺酰化(sulfamoylation)。然后，任选地，可以在碱的存 在下，用期望的酰氯将所述氨基磺酰酯基团转化为所讨论的(N-酰基)氨基磺 酰酯。通过还原，将当下存在的氧代氨基磺酸酯或氧代-(N酰基)氨基磺酰 酯转化为相应的羟基氨基磺酸酯或羟基-(N-酰基)氨基磺酰酯(Steroids 61， 710-717(1996))。硼氢化钠和硼烷-二甲硫复合物适于作为合适的还原剂。

基本上按照本领域技术人员已知的化学教导，可以在雌三烯骨架的环 D中引入各种取代基，特别是在C原子16处引入卤素原子(例如氟原子)， 由此制备相应的未在8-位取代的雌三烯(参见例如Steroide[Steroids]，L.F. Fieser，M.Fieser，Verlag Chemie，Weinheim/Bergstr.，1961；Organic Reactions in Steroid Chemistry，J.Fried，J.A.Edwards，Van Nostrand Reinhold Company， New York，Cincinnati，Toronto，London，Melbourne，1972；Medicinal Chemistry of Steroids，F.J.Zeelen，Elsevier，Amsterdam，Oxford，New York， Tokyo，1990)。

按照本领域已知的方法，在已在8-位被取代的雌三烯阶段，也可以引 入通式I的取代基。特别是在期望的最终化合物有多重取代的情况下，这 可能是有用的或必需的。

特征性但非限制性的合成方法，亦与若干取代基结合，用于在雌酮骨 架上提供代表性的取代模式，所述合成方法参见例如：C(1)J.Chem.Soc.(C) 1968，2915；C(7)Steroids 54，1989，71；C(8α)Tetrahedron Letters 1991，743； C(8β)Tetrahedron Letters 1964，1763；J.Org.Chem.1970，35，468；C(11)J. Steroid Biochem.31，1988，549；Tetrahedron 33，1977，609and J.Org.Chem. 60，1995，5316；C(9)DE-OS 2035879；J.Chem.Soc.Perk.11973，2095；C(15) J.Chem.Soc.Perk.11996，1269.)；C(13α)Mendeleev Commun.1994，187； C(14β)Z.Chem.23，1983，410。

以下实施例用于更详细地解释本发明。

与8β-乙烯基的降解类似地，使用与实施例中描述的试剂类似的试剂， 可以得到通式I的其他化合物。

按照本领域技术人员通用的方法，进行游离羟基的醚化和/或酯化。

实施例1

8β-乙烯基-16α-氟-雌-1，3，5(10)-三烯-3，17-二醇

3-甲氧基-16α-氟-8-乙烯基-雌-1，3，5(10)-三烯-17-酮

在氩气下，将7,3g(23,5mmol)3-甲氧基-8-乙烯基-雌-1，3，5(10)-三烯 -17-酮在65m1THF中的溶液滴加至30ml 2M二异丙基氨基锂(60,0mmol) 在THF/庚烷/乙苯中的溶液中，在-78℃冷却，然后相继加入16ml(115,4 mmol)三乙胺和7,6ml(59,9mmol)三甲基氯硅烷。然后，在1,5h内将反应 混合物温热至室温，用碳酸氢钠溶液洗涤，然后用正己烷萃取。收集的有 机相用水洗涤，经硫酸钠干燥，然后在真空中蒸发浓缩。

所得的(3-甲氧基-8-乙烯基-雌-1，3，5(10)，16-三烯-17-基氧基)-三甲基甲 硅烷粗产物(12g浅黄色液态剩余物)不经进一步纯化，用于下一步骤。

R_f＝0,54(环己烷/乙酸乙酯＝8/2)

将6,8g(3-甲氧基-8-乙烯基-雌-1，3，5(10)，16-四烯-17-基氧基)-三甲基甲 硅烷粗产物溶于50ml二氯甲烷，与5g(15,9mmol)N-氟代双苯磺酰胺 (N-fluordibenzensulfonimide)合并，并在无光线的条件下，在室温下搅拌16 小时。加入25ml 2N盐酸，分离有机相并用氯甲烷萃取若干次。相继用碳 酸氢钠溶液、水和饱和氯化钠溶液洗涤收集的有机相，经硫酸镁干燥，真 空浓缩。所得粗产物(8.43黄褐色油)通过硅胶色谱法纯化(19/1环己烷/乙酸 乙酯)。以这种方法，得到1.65g(38％，无色泡沫)3-甲氧基-16α-氟-8-乙烯 基-雌-1，3，5(10)-三烯-17-酮和2,08g(51％无色泡沫)3-甲氧基-8-乙烯基-雌 -1，3，5(10)-三烯-17-酮。

3-甲氧基-16α-氟-8-乙烯基-雌-1，3，5(10)-三烯-17-酮1H-NMR(CDCl3)：δ ＝0,96(s，3H；18-CH3)，3,76(s，3H；OMe)，5,01(d，1H；CH＝CH2)，5,05/5,18 (d，1H；16-H)，5,13(d，1H；CH＝CH2)，5,54(dd，1H；CH＝CH2)，6,59(d，1H； 4-H)，6,69(dd，1H；1-H，2-H)，7,15(d，1H；1-H，1-H)。

3-甲氧基-16α-氟-8-乙烯基-雌-1，3，5(10)-三烯-17α-醇和3-甲氧基-16α- 氟-8-乙烯基-雌-1，3，5(10)-三烯-17β-醇

将1,65g(5,0mmol)3-甲氧基-16α-氟-8-乙烯基-雌-1，3，5(10)-三烯-17-酮 溶于150ml THF和150ml甲醇的混合物，冷却至5℃，然后与1,9g(50,2 mmol)硼氢化钠合并。在1,5h内温热至室温，期间搅拌反应混合物，然后 加入10ml乙酸，最后真空干燥溶液。将剩余物再溶于水，用乙酸乙酯萃 取若干次。收集有机相，用硫酸镁干燥，然后真空浓缩。

所得粗产物通过硅胶色谱法(环己烷/甲基叔丁基醚＝13/1)分离。按照该 方法，得到无色泡沫形式的0,67g(40％)3-甲氧基-16α-氟-8-乙烯基-雌 -1，3，5(10)-三烯-17α-醇和1,00g(60％)3-甲氧基-16α-氟-8-乙烯基-雌 -1，3，5(10)-三烯-17β-醇。

3-甲氧基-16α-氟-8-乙烯基-雌-1，3，5(10)-三烯-17α-醇1H-NMR(CDCl3)： δ＝0,72(s，3H；18-CH3)，3,72(d，1H，17-H)，3,75(s，3H；OMe)，4,90(d，1H； CH＝CH2)，5,04(d，1H；CH＝CH2)，5,14/5,28(dd，1H；16-H)，5,51(dd，1H； CH＝CH2)，6,57(d，1H；4-H)，6,67(dd，1H；1-H，2-H)，7,16(d，1H；1-H，1-H)。

3-甲氧基-16α-氟-8-乙烯基-雌-1，3，5(10)-三烯-17β-醇

1H-NMR(CDCl3)：δ＝0,79(s，3H；18-CH3)，3,75(s，3H；OMe)，3,81(d， 1H，17-H)，4,82/4,95(dd，1H；16-H)，4,89(d，1H；CH＝CH2)，5,06(d，1H； CH＝CH2)，5,51(dd，1H；CH＝CH2)，6,57(d，1H；4-H)，6,68(dd，1H；1-H，2-H)， 7,15(d，1H；1-H，1-H)。

16α-氟-8-乙烯基-雌-1，3，5(10)-三烯-3，17β-二醇

在氩气下，将690mg(1,87mmol)碘化四丁基铵添加到70mg(0,21 mmol)3-甲氧基-16α-氟-8-乙烯基-雌-1，3，5(10)-三烯-17β-醇在9ml二氯甲烷 的溶液中。在-78℃冷却反应混合物，然后与1,9ml(1,9mmol)1M三氯化 硼(borotrichloride)的二氯甲烷溶液合并。在-78℃搅拌混合物0,5h，最 后在室温下温热并用水终止反应。分离有机相，用二氯甲烷萃取水相若干 次，然后收集有机相，用饱和氯化钠溶液洗涤，然后用硫酸镁干燥，真空 浓缩。

所得粗产物通过硅胶色谱法(环己烷/乙酸乙酯＝9/1)分离。按照该方法， 得到26mg(39％)16α-氟-8-乙烯基-雌-1，3，5(10)-三烯-3，17β-二醇。

16α-氟-8-乙烯基-雌-1，3，5(10)-三烯-3，17β-二醇1H-NMR(DMSO[D6])： δ＝0,64(s，3H；18-CH3)，3,49/3,57(t，1H，17-H)，4,70/4,84(dd，1H；16-H)， 4,85(d，1H；CH＝CH2)，4,98(d，1H；CH＝CH2)，5,19(d，1H，17-OH)，5,46(dd， 1H；CH＝CH2)，6,37(d，1H；4-H)，6,48(dd，1H；1-H，2-H)，6,99(d，1H；1-H， 1-H)，8,93(s，1H，3-OH)。

实施例2

16α-氟-8-乙烯基-雌-1，3，5(10)-三烯-3，17α-二醇

在氩气下，将295mg(0,80mmol)碘化四丁基铵添加到30mg(0,09 mmol)3-甲氧基-16α-氟-8-乙烯基-雌-1，3，5(10)-三烯-17α-醇在4ml二氯甲烷 的溶液中。在-78℃冷却反应混合物，然后与0,8ml(0,8mmol)1M三氯化 硼的二氯甲烷溶液合并。在-78℃搅拌混合物0,5h，最后在室温下温热并 用水终止反应。分离有机相，用二氯甲烷萃取水相若干次，然后收集有机 相，用饱和氯化钠溶液洗涤，然后用硫酸镁干燥，真空浓缩。

所得粗产物通过硅胶色谱法(环己烷/乙酸乙酯＝7/3)分离。按照该方法， 得到27mg(94％)16α-氟-8-乙烯基-雌-1，3，5(10)-三烯-3，17α-二醇。

16α-氟-8-乙烯基-雌-1，3，5(10)-三烯-3，17α-二醇1H-NMR(DMSO[D6])： δ＝0,63(s，3H；18-CH3)，3,51(t，1H，17-H)，4,82(d，1H，17-OH)，4,85(d，1H； CH＝CH2)，4,97(d，1H；CH＝CH2)，5,05/5,18(dd，1H；16-H)，5,47(dd，1H； CH＝CH2)，6,37(d，1H；4-H)，6,48(dd，1H；1-H，2-H)，6,99(d，1H；1-H，1-H)， 8,97(s，1H，3-OH)。