促性腺激素释放激素受体拮抗剂及其相关方法

摘要

本发明公开了GnRH受体拮抗剂，其具有治疗男性与女性的多种性激素相关疾病状态的效用。本发明的化合物具有以下结构，其中R

说明书

发明背景

技术领域

本发明总体上涉及促性腺激素释放激素(GnRH)受体拮抗剂，并涉 及通过将这样的拮抗剂给予有需要的温血动物治疗病症的方法。

相关领域描述

促性腺激素释放激素(GnRH)也称为黄体生成素释放激素 (LHRH)，其为在人类繁殖中起重要作用的十肽 (pGlu-His-Trp-Ser-Tyr-Gly-Leu-Arg-Pro-Gly-NH₂)。GnRH从下丘脑释放 并作用于垂体以刺激黄体生成素(LH)和卵泡刺激素(FSH)的生物合成 与释放。从垂体释放的LH负责男性与女性中性类固醇产生的调节，而 FSH调节男性精子发生以及女性的卵泡发育。

由于其生物学重要性，GnRH的合成拮抗剂与激动剂受到相当的关 注，尤其是在前列腺癌、乳腺癌、子宫内膜异位症、子宫平滑肌瘤(纤 维瘤)、卵巢癌、前列腺肥大、辅助的生殖治疗和性早熟领域(The Lancet 358：1793-1803，2001；Mol.Cell.Endo.166：9-14，2000)。举例而言，已 使用诸如亮丙瑞林(leuprorelin)(pGlu-His-Trp-Ser-Tyr-d-Leu-Leu-Arg- Pro-NHEt)的肽类GnRH激动剂治疗这些疾病状态。这种激动剂通过结 合垂体促性腺激素中的GnRH受体来发挥功能，从而诱导促性腺激素的 合成与释放。长期给予GnRH激动剂可耗尽促性腺激素并随后下调该受 体，一段时间后导致类固醇激素的抑制(例如，长期给药起始后2-3周)。

与此相反，认为GnRH拮抗剂能够抑制促性腺激素的作用，并因此 在过去的20年来受到极大的关注。迄今为止，临床使用这种拮抗剂的 主要障碍是其相对较低的生物利用度与组胺释放引起的副作用。然而， 已报道了数种具有低组胺释放特性的肽拮抗剂，尽管由于生物利用度 有限，它们仍需要通过缓释途径来进行递送(诸如皮下注射或鼻内喷 雾)。

鉴于与肽GnRH拮抗剂相关的限制，已提出许多非肽化合物。近期 公布的公开了化合物及其作为GnRH拮抗剂的用途的PCT申请的公开 号包括WO 00/69859、WO 01/29044、WO 01/55119、WO 03/013528、 WO 03/011870、WO 03/011841、WO 03/011839、WO 03/011293、WO 05/007164、WO 05/007165及WO 05/007633。

尽管已在该领域中取得显著进步，但该领域仍需要有效的小分子 GnRH受体拮抗剂。同时也需要含有此GnRH受体拮抗剂的药物组合 物，以及关于其用于治疗诸如性激素相关疾病状态的方法。本发明满 足了这些需要，并提供了其它相关的优点。

概述

简而言之，本发明总体上涉及促性腺激素释放激素(GnRH)受体拮 抗剂，同时还涉及它们的制备方法和用途，以及含有其的药物组合物。 更具体地，本发明的GnRH受体拮抗剂为具有以下通式结构(I)的化合 物，并包括其立体异构体、酯、溶剂化物和药物可接受的盐：

其中R_1a、R_1b、R_1c、R_1d、R₂、R_2a及A的定义如下文所述。

本发明的GnRH受体拮抗剂可应用于广泛的治疗用途，并可用来治 疗男性和女性以及一般哺乳动物(本文中也称为“个体”)的多种性激素 相关的疾病状态。例如，这样的治疗用途包括子宫内膜异位症、子宫 平滑肌瘤、多囊性卵巢病、痛经、性交疼痛、月经过多、非月经期骨 盆疼痛、骨盆触痛、硬结、月经周期的常见病症、归因于化学疗法或 早期绝经期的卵巢功能早衰、多毛症、性早熟，诸如前列腺癌、乳腺 癌和卵巢癌的性腺类固醇依赖的肿瘤形成，垂体促性腺激素细胞腺瘤、 子宫腺肌病、睡眠呼吸暂停、肠道易激综合征、经期前综合征、良 性前列腺肥大、下尿路症状(LUTS)、避孕及不育症(例如，诸如体外受 精的辅助生殖治疗)。本发明的化合物也可用于辅助治疗生长激素缺乏 及身材矮小，并可用于治疗全身性红斑狼疮。所述化合物还可与雄激 素、雌激素、黄体酮、抗雌激素、抗黄体酮、血管紧张素转换酶抑制 剂、血管紧张素II受体拮抗剂、肾素抑制剂、双膦酸盐及其它用于治 疗和/或预防钙、磷酸盐及骨代谢失调的药剂，芳香酶抑制剂、诸如非 甾体抗炎药(NSAIDS)的止痛剂、其它COX抑制剂及抗NGF药剂组合。

本发明的方法包括优选以药物组合物的形式将有效量的GnRH受 体拮抗剂给予有需要的哺乳动物。因此，在另一实施方案中，公开了 含有一种或多种本发明的GnRH受体拮抗剂及药物可接受的载体和/或 稀释剂的药物组合物。

参考以下详细描述，本发明的这些以及其它方面将是显而易见的。 为此，在本文中列出各种参考文献，其更详细地描述某些背景信息、 方法、化合物和/或组合物，本发明将其中每一篇都全部引入作为参考。

发明详述

如上所述，本发明总体上涉及用作促性腺激素释放激素(GnRH)受 体拮抗剂的化合物。本发明化合物具有以下结构(I)及其立体异构体、 酯、溶剂化物和药物可接受的盐：

其中：

A为吡啶基、苯基、喹啉基、萘啶基、噻吩并嘧啶基或2-氧代-嘧 啶基，其中该吡啶基、苯基、喹啉基、噻吩并嘧啶基或2-氧代-嘧啶基 被0至5个R₄取代；

R_1a为H、卤素、C_1-4烃基、烃氧基或三氟甲基；

R_1b及R_1c相同或不同，且独立地为H、卤素、羟基、卤代C_1-4烃基、 -C_1-6烃基-(R₅)_p、-O-C_1-6烃基-(R₅)_p、-C_1-6烃基-O-C_1-6烃基-(R₅)_p、-NR₇-C_1-6烃基-(R₅)_p或-S(O)_m-C_1-6烃基-(R₅)_p；

R_1d为Cl、F、甲基、CF₃或氰基；

R₂为-C_1-4烃基-(R₅)_P；

R_2a为被0至4个R₃取代的苯基、被0至4个R₃取代的杂芳基、被0至4 个R₃取代的C_1-6烃基、被0至4个R₃取代的芳基-C_1-4烃基或被0至4个R₃取代的杂芳基-C_1-4烃基；

R₃在各次出现时独立地为卤素、氰基、卤代-C_1-4烃基、R₅、-C_1-6烃基-(R₅)_p、-C_1-6烃基-O-C_1-6烃基-(R₅)_p、-O-C_1-6烃基-(R₅)_p、-NR₇-C_1-6烃基-(R₅)_p、-S(O)_m-C_1-6烃基-(R₅)_p、-O-C_1-6烃基-NR₇-C_1-6烃基-(R₅)_p、杂 环-(R₅)_p；

R₄在各次出现时独立地为卤素、C_1-6烃基、卤代C_1-4烃基、C_1-6烃 氧基、羟基、氰基、硫代C_1-6烃基、-C(O)NR₇R₈或5元杂芳基；

R₅在各次出现时独立地为H、羟基、-OC(O)-C_1-6烃基、-OC(O)O-C_1-6烃基、-OC(O)-C_1-6烃基-NR₇R₈、-COOR₆、-C(O)NR₇R₈、-NR₇C(O)NR₇R₈、 -S(O)₂NR₉R₉、-S(O)_m-C_1-4烃基、-NR₇R₈、C_1-6烃氧基、-O-杂环或杂环， 其中所述杂环及所述-O-杂环被0至4个选自卤素、C_1-6烃基、C_1-4卤代烃 基、羟基、氧代、硫代、-NH₂、-S(O)₂C_1-4烃基和-COOH的基团取代；

R₆在各次出现时独立地为H、C_1-4烃基、C_1-4烃基-O-C(O)-C_1-6烃基 或C_1-4烃基-O-C(O)-O-C_1-6烃基；

R₇在各次出现时独立地为H、C_1-4烃基、羟基或杂环，其中所述杂 环被0至4个选自卤素、C_1-6烃基、羟基、酮基、-NH₂和-COOH的基团 取代；

R₈在各次出现时独立地为H、C_1-4烃基、卤代C_1-4烃基、-C(O)-C_1-4烃基、-C(O)-卤代C_1-4烃基、-S(O)_m-卤代C_1-4烃基或-S(O)_m-C_1-4烃基；

R₉在各次出现时独立地为H、C_1-4烃基或-C(O)C_1-4烃基；

m为0-2；且

p在各次出现时独立地为1-3。

本文所用的上述术语具有以下含义：

“烃基”是指含有1至10个碳原子的直链或支链、非环状或环状、不 饱和或饱和脂肪烃。术语“C_1-4烃基”具有与烃基相同的含义，但含有1 至4个碳原子，而术语“C_1-6烃基”具有与烃基相同的含义，但含有1至6 个碳原子。代表性饱和直链烃基包括甲基、乙基、正丙基、正丁基、 正戊基、正己基等；而饱和支链烃基包括异丙基、仲丁基、异丁基、 叔丁基、异戊基等。代表性饱和环烃基包括环丙基、环丁基、环戊基、 环己基、-CH₂-环丙基、-CH₂-环丁基、-CH₂-环戊基、-CH₂-环己基等； 而不饱和环烃基包括环戊烯基和环己烯基等。环烃基也称为“同素环” 且包括二同素环和多同素环，例如十氢化萘和金刚烷基。不饱和烃基 在相邻的碳原子之间含有至少一个双键或三键(分别称为“烯基”或“炔 基”)。代表性直链和支链烯基包括乙烯基、丙烯基、1-丁烯基、2-丁烯 基、异丁烯基、1-戊烯基、2-戊烯基、3-甲基-1-丁烯基、2-甲基-2-丁 烯基、2，3-二甲基-2-丁烯基等；而代表性直链和支链炔基包括乙炔基、 丙炔基、1-丁炔基、2-丁炔基、1-戊炔基、2-戊炔基、3-甲基-1-丁炔基 等。

“芳基”是指诸如苯基或萘基的芳族碳环部分。

“芳基烃基”是指至少一个烃基氢原子被芳基部分取代的烃基，例 如-CH₂-苯基等。

“杂芳基”是指具有至少一个选自氮、氧和硫的杂原子且其中氮和 硫杂原子可任选被氧化且含有至少1个碳原子的5至10元芳族杂环，包 括单环及双环体系。代表性杂芳基包括(但不限于)呋喃基、苯并呋喃 基、噻吩基、苯并噻吩基、吡咯基、吲哚基、异吲哚基、氮杂吲哚基、 吡啶基、喹啉基、异喹啉基、噁唑基、异噁唑基、噁二唑基、噻二唑 基、苯并噁唑基、吡唑基、咪唑基、苯并咪唑基、噻唑基、苯并噻唑 基、异噻唑基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、三嗪基、噌啉基、酞嗪基 及喹唑啉基。

“杂芳基烃基”是指至少一个烃基氢原子被杂芳基部分取代的烃 基，例如-CH₂吡啶基、-CH₂嘧啶基等。

“杂环”(本文中也称为“杂环环”)是指饱和、不饱和或芳族且含有1 至4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子且其中氮和硫杂原子可任选被氧 化且氮杂原子可任选被季铵化的5至7元单环或7至14元多环杂环环，包 括上述任一杂环与苯环稠合的双环以及三环(和更高环数)杂环环。杂 环可通过任意杂原子或碳原子连接。杂环包括如以上所定义的杂芳基。 因此，除上文所列的芳族杂芳基外，杂环还包括(但不限于)吗啉基、 吡咯烷酮基、吡咯烷基、哌嗪基、哌啶基、乙内酰脲基、戊内酰胺基、 环氧乙烷基、氧杂环丁烷基、四氢呋喃基、四氢吡喃基、四氢吡啶基、 四氢嘧啶基、四氢噻吩基、四氢噻喃基、四氢嘧啶基、四氢噻吩基、 四氢噻喃基等。

“卤代烃基”是指至少一个氢原子被卤素取代的烃基，例如三氟甲 基等。

“卤素”是指氟、氯、溴或碘，通常指氟或氯。

“羟基”是指-OH。

“氧代”是指与碳以双键连接的氧(是指C＝O)。

“硫代”是指与碳以双键连接的硫(是指C＝S)。

“烃氧基”是指通过氧桥连接的烃基部分(即-O-烃基)且包括诸如甲 氧基及乙氧基的基团。

“烃硫基”是指通过硫桥连接的烃基部分(即-S-烃基)且包括诸如甲 硫基及乙硫基的基团。

在本发明的一实施方案中，如结构(Ia)中所示，R_2a为被n个R₃基团 取代的苯基：

在本发明的实施例中，如结构(II)中所示，结构(I)的A可为被R₄基 团取代的2-吡啶基，且R_2a可为被n个R₃基团取代的苯基，且如结构(III) 中所示，结构(I)的A可为在4和6位上被R₄取代的3-吡啶基，且R_2a为被n 个R₃基团取代的苯基。

在一实施方案中，结构(I)的A为如结构(IV)中所示的可被两个R₄取代的喹啉-2-基，如结构(V)中所示的噻吩并嘧啶基，例如噻吩并 [2，3-d]嘧啶-4-基，或如结构(VI)中所示的2-氧代-嘧啶基。

在一实施方案中，如结构(VII)所示，结构(I)的R_2a被R₃取代，其中 R₃为-O-C_1-4烃基-(R₅)_p。结构(VIII)显示结构(I)的R_2a为苯基，n为1且R₃为-O-烃基-(R₅)_p，其中烃基具有3个碳且p为2。两个R₅可以相同或不同。 结构(IX)显示结构(I)的实施方案，其中R_1a和R_1c为H、R_1d为Cl，且R_1b为-O-烃基-(R₅)_p。

在一实施方案中，结构(I)的A为被0至4个R₄取代的2-吡啶基。

在一实施方案中，结构(I)的A为在3位和5位上被2个R₄基团取代的 2-吡啶基。

在一实施方案中，结构(I)的A为被0至4个R₄取代的3-吡啶基。

在一实施方案中，结构(I)的A为在4位和6位上被2个R₄基团取代的 3-吡啶基。

在另一实施方案中，结构(I)的A为4-氰基-6-三氟甲基吡啶-3-基。

在一实施方案中，结构(I)的A为3-氰基-5-氟-喹啉-2-基。

在一实施方案中，结构(I)的A为3-氰基-5-三氟甲基-喹啉-2-基。

在一实施方案中，结构(I)的A为3-氰基-[1，5]萘啶-2-基。

在一实施方案中，结构(I)的A为被0至4个R₄取代的苯基。

在一实施方案中，R₄选自卤素、卤代烃基、烃基和氰基。

在一实施方案中，A被2个R₄基团取代，其中每一R₄独立地选自卤 素、氰基及三氟甲基。

在一实施方案中，R_1a和R_1c均为H。

在一实施方案中，R_1d为Cl、F、CF₃或甲基。

在一实施方案中，R_1d为Cl。

在一实施方案中，R_1b为H、羟基、-C_1-6烃基(R₅)_p或-O-C_1-6烃基 -(R₅)_P。

在一实施方案中，R_1b为H、羟基或-O-C_1-6烃基-(R₅)_p，其中R₅在各 次出现时为H。

在一实施方案中，R_1b为-O-C_1-6烃基(R₅)_p。

在一实施方案中，R_1b为-O-C_1-6烃基-(R₅)_p，其中-C_1-6烃基-为-C_2-4烃基-。

在一实施方案中，R_1b为-O-C_1-6烃基-(R₅)_p，其中-C_1-6烃基-为 -CH₂CH₂CH₂-。

在一实施方案中，R_1b为-O-C_1-6烃基-(R₅)_p，其中R₅为羟基或COOH。

在一实施方案中，R_1b为-O-C_1-6烃基-(R₅)_p，其中R₅为H且p为1。

在一实施方案中，R₂为-C_1-4烃基-(R₅)_P，其中R₅在各次出现时为H。

在一实施方案中，R_2a为被0至4个R₃取代的苯基、被0至4个R₃取代 的杂芳基、被0至4个R₃取代的芳基-C_1-4烃基或被0至4个R₃取代的杂芳 基-C_1-4烃基。

在一实施方案中，R_2a为被0至4个R₃取代的苯基或被0至4个R₃取代 的杂芳基。

在一实施方案中，R_2a为被0至4个R₃取代的苯基，其中R₃选自卤素、 氰基、卤代-C_1-4烃基、R₅、-C_1-6烃基-(R₅)_p、-C_1-6烃基-O-C_1-6烃基-(R₅)_p、 -O-C_1-6烃基-(R₅)_p、-NR₇-C_1-6烃基-(R₅)_p、-S(O)_m-C_1-6烃基-(R₅)_p、-O-C_1-6烃基-NR₇-C_1-6烃基-(R₅)_P、杂环-(R₅)_p。

在一实施方案中，R_2a为被0至4个R₃取代的杂芳基，其中R₃选自卤 素、氰基、卤代-C_1-4烃基、R₅、-C_1-6烃基-(R₅)_p、-C_1-6烃基-O-C_1-6烃基 -(R₅)_P、-O-C_1-6烃基-(R₅)_p、-NR₇-C_1-6烃基-(R₅)_p、-S(O)_m-C_1-6烃基-(R₅)_p、 -O-C_1-6烃基-NR₇-C_1-6烃基(R₅)_p、杂环-(R₅)_p。

在一实施方案中，R_2a为被0至4个R₃取代的吡啶基，其中R₃选自卤 素、氰基、卤代-C_1-4烃基、R₅、-C_1-6烃基-(R₅)_p、-C_1-6烃基-O-C_1-6烃基 -(R₅)_p、-O-C_1-6烃基-(R₅)_p、-NR₇-C_1-6烃基-(R₅)_p、-S(O)_m-C_1-6烃基-(R₅)_p、 -O-C_1-6烃基-NR₇-C_1-6烃基(R₅)_p、杂环-(R₅)_p。

在一实施方案中，R_2a为被0至4个R₃取代的苯并噁唑或苯并咪唑或 苯并噻唑，其中R₃选自卤素、氰基、卤代-C_1-4烃基、R₅、-C_1-6烃基-(R₅)_P、 -C_1-6烃基-O-C_1-6烃基-(R₅)_p、-O-C_1-6烃基-(R₅)_p、-NR₇-C_1-6烃基-(R₅)_p、 -S(O)_m-C_1-6烃基-(R₅)_p、-O-C_1-6烃基-NR₇-C_1-6烃基-(R₅)_p、杂环-(R₅)_p。

在一实施方案中，R₃为卤素、氰基、卤代-C_1-4烃基、-O-C_1-6烃基 -(R₅)_P或杂环-(R₅)_p。

在一实施方案中，R₃为卤素、氰基、-O-C_1-6烃基-(R₅)_p或杂环-(R₅)_p。

在一实施方案中，R₃在一次出现时为-O-C_1-6烃基-(R₅)_p，其中R₅为 H、羟基、-COOH或杂环，其中所述杂环被0至4个选自以下的基团取 代：卤素、C_1-4烃基、C_1-4卤代烃基、羟基、氧代、硫代、-NH₂、-S(O)₂C_1-4烃基和-COOH。

在一实施方案中，R₃在一次出现时为-O-C_1-6烃基-(R₅)_p，其中R₅为 OH或-COOH。

在一实施方案中，R₃在一次出现时为-O-C_1-6烃基(R₅)_p，其中-C_1-6烃基-为-C_2-3烃基-。

在一实施方案中，R₃在一次出现时为-O-C_1-6烃基-(R₅)_p，其中-C_1-6烃基-为-CH₂CH₂-。

在一实施方案中，R_1b和R₃之一为-O-C_1-6烃基-(R₅)_p，其中R₅为OH、 -COOR₆或杂环，其中所述杂环被0至4个选自以下的基团取代：卤素、 C_1-4烃基、C_1-4卤代烃基、羟基、氧代、硫代、-NH₂、-S(O)₂C_1-4烃基和 -COOH。

在一实施方案中，R_1b和R₃之一为-O-C_1-6烃基-(R₅)_p，其中R₅为OH 或-COOH。

在一实施方案中，R_1b为-O-C_1-6烃基-(R₅)_p，其中R₅为OH或-COOH； 且R_2a为被1-4个R₃取代的苯基，其中R₃选自卤素、氰基、CF₃、甲氧基、 甲基或CO₂R₆。

在一实施方案中，R_1b为氢且R_2a为被1-2个R₃取代的苯基，其中一 个R₃选自O-C_1-6烃基-(R₅)_p且另一R₃选自氢、卤素、氰基、CF₃、甲氧基 或甲基。

在一实施方案中，R_1b为-O-CH₃且R_2a为被1-2个R₃取代的苯基，其 中一个R₃选自O-C_1-6烃基-(R₅)_p且另一R₃选自氢、卤素、氰基、CF₃、甲 氧基或甲基。

在一实施方案中，R₅为杂环且可为：

本发明的代表性化合物包括：

4-氯-3-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-N-(2-甲烷磺酰基-苯基)-N- 甲基-苯甲酰胺；

4-氯-3-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-N-(2-羟基-6-甲基-苯基)-N- 甲基-苯甲酰胺；

4-氯-3-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-N-[2-(2-羟基-乙氧基)-6-甲 基-苯基]-N-甲基-苯甲酰胺；

4-氯-3-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-N-[2-(2-甲氧基-乙氧基)-6- 甲基-苯基]-N-甲基-苯甲酰胺；

4-(2-{[4-氯-3-(3-氰基-6-氟-喹啉-2-基)-苯甲酰基]-甲基-氨基}-苯 氧基)-丁酸；

乙酸2-(2-{[4-氯-3-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰基]-甲 基-氨基}-3-甲基-苯氧基)-乙酯；

3-(5-氯-2-{[4-氯-3-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰基]-甲 基-氨基}-3-甲基-苯氧基)-丙酸；

4-(2-{[4-氯-3-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰基]-甲基-氨 基}-3-甲氧基-苯基)-丁酸甲酯；

4-(2-{[4-氯-3-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰基]-甲基-氨 基}-3-甲氧基-苯基)-丁酸；

4-(2-{[4-氯-3-(4-甲基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰基]-甲基-氨 基}-3-甲氧基-苯基)-丁酸；

4-氯-2-(3-二甲基氨基-丙氧基)-N-(2-甲氧基-6-甲基-苯基)-N-甲基 -5-(4-甲基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰胺；

4-[5-氯-2-[(2-甲氧基-6-甲基-苯基)-甲基-氨基甲酰基]-4-(4-甲基 -6-三氟甲基-吡啶-3-基)-苯氧基]-丁酸乙酯；

4-{5-氯-4-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-2-[(2-甲氧基-苯基)-甲 基-氨基甲酰基]-苯氧基}-丁酸；

3-{5-氯-4-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-2-[(2-甲氧基-苯基)-甲 基-氨基甲酰基]-苯氧基}-丙酸；

{5-氯-4-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-2-[(2-甲氧基-苯基)-甲基- 氨基甲酰基]-苯氧基}-乙酸；

4-氯-5-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-2-(4-羟基-丁氧基)-N-(2-甲 氧基-苯基)-N-甲基-苯甲酰胺；

4-氯-5-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-2-(3-羟基-丙氧基)-N-(2-甲 氧基-苯基)-N-甲基-苯甲酰胺；

4-氯-5-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-2-(2-羟基-乙氧基)-N-(2-甲 氧基-苯基)-N-甲基-苯甲酰胺；

4-氯-5-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-2-(3-羟基-丙基)-N-(2-甲氧 基-苯基)-N-甲基-苯甲酰胺；

4-氯-5-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-2-(3-羟基-丙基)-N-(2-甲氧 基-6-甲基-苯基)-N-甲基-苯甲酰胺；

3-{5-氯-4-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-2-[(2-甲氧基-苯基)-甲 基-氨基甲酰基]-苯基}-丙酸；

3-{5-氯-4-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-2-[(2-甲氧基-6-甲基-苯 基)-甲基-氨基甲酰基]-苯基}-丙酸；

4-氯-5-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-2-(2-羟基-乙基硫烷基 (sulfanyl))-N-(2-甲氧基-苯基)-N-甲基-苯甲酰胺；

4-氯-5-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-2-(2-羟基-乙基硫烷 基)-N-(2-甲氧基-6-甲基-苯基)-N-甲基-苯甲酰胺；

{5-氯-4-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-2-[(2-甲氧基-苯基)-甲基- 氨基甲酰基]-苯基硫烷基}-乙酸；

{5-氯-4-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-2-[(2-甲氧基-6-甲基-苯 基)-甲基-氨基甲酰基]-苯基硫烷基}-乙酸；

4-氯-5-(4，6-二氰基-吡啶-3-基)-2-(2-羟基-乙氧基)-N-(2-甲氧基-苯 基)-N-甲基-苯甲酰胺；

4-氯-5-(4，6-二氰基-吡啶-3-基)-2-(2-羟基-乙氧基)-N-(2-甲氧基-6- 甲基-苯基)-N-甲基-苯甲酰胺；

4-氯-5-(4，6-二氰基-吡啶-3-基)-2-(3-羟基-丙氧基)-N-(2-甲氧基-苯 基)-N-甲基-苯甲酰胺；

4-氯-5-(4，6-二氰基-吡啶-3-基)-2-(3-羟基-丙氧基)-N-(2-甲氧基-6- 甲基-苯基)-N-甲基-苯甲酰胺；

4-{5-氯-4-(4，6-二氰基-吡啶-3-基)-2-[(2-甲氧基-苯基)-甲基-氨基 甲酰基]-苯氧基}-丁酸；

4-{5-氯-4-(4，6-二氰基-吡啶-3-基)-2-[(2-甲氧基-6-甲基-苯基)-甲基 -氨基甲酰基]-苯氧基}-丁酸；

[5-氯-2-[(2-甲氧基-苯基)-甲基-氨基甲酰基]-4-(4-丙-1-炔基-6-三 氟甲基-吡啶-3-基)-苯氧基]-乙酸；

3-[5-氯-2-[(2-甲氧基-苯基)-甲基-氨基甲酰基]-4-(4-丙-1-炔基-6- 三氟甲基-吡啶-3-基)-苯氧基]-丙酸；

4-[5-氯-2-[(2-甲氧基-苯基)-甲基-氨基甲酰基]-4-(4-丙-1-炔基-6- 三氟甲基-吡啶-3-基)-苯氧基]-丁酸；

3-(2-{[4-氯-3-(4-丙-1-炔基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰基]-甲 基-氨基}-苯氧基)-丙酸；

4-(2-{[4-氯-3-(4-乙炔基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰基]-甲基- 氨基}-苯氧基)-丁酸；

4-(2-{[4-氯-3-(4-丙-1-炔基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰基]-甲 基-氨基}-苯氧基)-丁酸；

4-(2-{[4-氯-3-(4-乙炔基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰基]-甲基- 氨基}-苯氧基)-丁酸；

3-(2-{[4-氯-3-(4，6-二氰基-吡啶-3-基)-苯甲酰基]-甲基-氨基}-苯氧 基)-丙酸；

3-(2-{[4-氯-3-(4-乙炔基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰基]-甲基- 氨基}-苯氧基)-丙酸；

3-(2-{[4-氯-3-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰基]-甲基-氨 基}-苯基氨基)-丙酸；

4-(2-{[4-氯-3-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰基]-甲基-氨 基}-苯基氨基)-丁酸；

3-(2-{[4-氯-3-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰基]-甲基-氨 基}-苯氧基)-丙酸1-异丙氧基羰基氧基-乙酯；

3-(2-{[4-氯-5-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-2-甲氧基-苯甲酰 基]-甲基-氨基}-苯氧基)-丙酸；

3-(2-{[4-氯-3-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰基]-甲基-氨 基}-3-氟-苯氧基)-丙酸；

3-(2-{[4-氯-5-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-2-甲氧基-苯甲酰 基]-甲基-氨基}-3-氟-苯氧基)-丙酸；

3-(3-氯-2-{[4-氯-3-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰基]-甲 基-氨基}-苯氧基)-丙酸；

3-(3-氯-2-{[4-氯-5-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-2-甲氧基-苯甲 酰基]-甲基-氨基}-苯氧基)-丙酸；

3-(2-{[4-氯-3-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰基]-甲基-氨 基}-3-氰基-苯氧基)-丙酸；

3-(2-{[4-氯-5-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-2-甲氧基-苯甲酰 基]-甲基-氨基}-3-氰基-苯氧基)-丙酸；

4-氯-3-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-N-{2-氟-6-[2-(5-氧代-4，5- 二氢-[1，3，4]噁二唑-2-基)-乙氧基]-苯基}-N-甲基-苯甲酰胺；

4-氯-5-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-N-{2-氟-6-[2-(5-氧代-4，5- 二氢-[1，3，4]噁二唑-2-基)-乙氧基]-苯基}-2-甲氧基-N-甲基-苯甲酰胺；

4-氯-N-{2-氯-6-[2-(5-氧代-4，5-二氢-[1，3，4]噁二唑-2-基)-乙氧基]- 苯基}-3-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-N-甲基-苯甲酰胺；

4-氯-N-{2-氯-6-[2-(5-氧代-4，5-二氢-[1，3，4]噁二唑-2-基)-乙氧基]- 苯基}-5-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-2-甲氧基-N-甲基-苯甲酰胺；

4-氯-N-{2-氰基-6-[2-(5-氧代-4，5-二氢-[1，3，4]噁二唑-2-基)-乙氧 基]-苯基}-3-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-N-甲基-苯甲酰胺；

4-氯-N-{2-氰基-6-[2-(5-氧代-4，5-二氢-[1，3，4]噁二唑-2-基)-乙氧 基]-苯基}-5-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-2-甲氧基-N-甲基-苯甲酰 胺；

4-氯-N-{2-氯-6-[2-(1H-四唑-5-基)-乙氧基]-苯基}-3-(4-氰基-6-三 氟甲基-吡啶-3-基)-N-甲基-苯甲酰胺；

4-氯-N-{2-氯-6-[2-(1H-四唑-5-基)-乙氧基]-苯基}-5-(4-氰基-6-三 氟甲基-吡啶-3-基)-2-甲氧基-N-甲基-苯甲酰胺；

4-氯-N-{2-氰基-6-[2-(1H-四唑-5-基)-乙氧基]-苯基}-3-(4-氰基-6- 三氟甲基-吡啶-3-基)-N-甲基-苯甲酰胺；

4-氯-N-{2-氰基-6-[2-(1H-四唑-5-基)-乙氧基]-苯基}-5-(4-氰基-6- 三氟甲基-吡啶-3-基)-2-甲氧基-N-甲基-苯甲酰胺；

4-氯-3-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-N-{2-氟-6-[2-(5-氧代-4，5- 二氢-1H-[1，2，4]三唑-3-基)-乙氧基]-苯基}-N-甲基-苯甲酰胺；

4-氯-5-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-N-{2-氟-6-[2-(5-氧代-4，5- 二氢-1H-[1，2，4]三唑-3-基)-乙氧基]-苯基}-2-甲氧基-N-甲基-苯甲酰胺；

4-氯-N-{2-氯-6-[2-(5-氧代-4，5-二氢-1H-[1，2，4]三唑-3-基)-乙氧 基]-苯基}-3-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-N-甲基-苯甲酰胺；

4-氯-N-{2-氯-6-[2-(5-氧代-4，5-二氢-1H-[1，2，4]三唑-3-基)-乙氧 基]-苯基}-5-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-2-甲氧基-N-甲基-苯甲酰 胺；

4-氯-N-{2-氰基-6-[2-(5-氧代-4，5-二氢-1H-[1，2，4]三唑-3-基)-乙氧 基]-苯基}-3-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-N-甲基-苯甲酰胺；

4-氯-N-{2-氰基-6-[2-(5-氧代-4，5-二氢-1H-[1，2，4]三唑-3-基)-乙氧 基]-苯基}-5-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-2-甲氧基-N-甲基-苯甲酰 胺；

4-[5-氯-2-[(2-氯-6-甲氧基-苯基)-甲基-氨基甲酰基]-4-(4-氰基-6- 三氟甲基-吡啶-3-基)-苯氧基]-丁酸；

4-[5-氯-2-[(2-氰基-6-甲氧基-苯基)-甲基-氨基甲酰基]-4-(4-氰基 -6-三氟甲基-吡啶-3-基)-苯氧基]-丁酸；

4-氯-5-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-N-(2-氟-6-甲氧基-苯基)-N- 甲基-2-[3-(1H-四唑-5-基)-丙氧基]-苯甲酰胺；

4-氯-N-(2-氯-6-甲氧基-苯基)-5-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-N- 甲基-2-[3-(1H-四唑-5-基)-丙氧基]-苯甲酰胺；

4-{5-氯-4-(3-氰基-5-三氟甲基-喹啉-2-基)-2-[(2-甲氧基-苯基)-甲 基-氨基甲酰基]-苯氧基}-丁酸；

4-{5-氯-4-(3-氰基-5-三氟甲基-喹啉-2-基)-2-[(2-氟-6-甲氧基-苯 基)-甲基-氨基甲酰基]-苯氧基}-丁酸；

4-[5-氯-2-[(2-氯-6-甲氧基-苯基)-甲基-氨基甲酰基]-4-(3-氰基-5- 三氟甲基-喹啉-2-基)-苯氧基]-丁酸；

3-(2-{[4-氯-5-(3-氰基-5-三氟甲基-喹啉-2-基)-2-甲氧基-苯甲酰 基]-甲基-氨基}-3-氟-苯氧基)-丙酸；

3-(3-氯-2-{[4-氯-5-(3-氰基-5-三氟甲基-喹啉-2-基)-2-甲氧基-苯甲 酰基]-甲基-氨基}-苯氧基)-丙酸；

3-(2-{[4-氯-5-(3-氰基-5-三氟甲基-喹啉-2-基)-2-甲氧基-苯甲酰 基]-甲基-氨基}-苯氧基)-丙酸；

3-(2-{[4-氯-3-(3-氰基-5-三氟甲基-喹啉-2-基)-苯甲酰基]-甲基-氨 基}-苯氧基)丙酸；

2-{[4-氯-3-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰基]-甲基-氨 基}-3-氟-苯甲酸甲酯；

2-{[4-氯-3-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰基]-甲基-氨 基}-3-氟-苯甲酸乙酯；

3-氯-2-{[4-氯-3-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰基]-甲基- 氨基}-苯甲酸甲酯；

3-氯-2-{[4-氯-3-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰基]-甲基- 氨基}-苯甲酸乙酯；

3-(2-{[4-氯-3-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰基]-甲基-氨 基}-苯氧基)-2-羟基-丙酸；

2-氨基-3-(2-{[4-氯-3-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰基]- 甲基-氨基}-苯氧基)-丙酸；

(7-{[4-氯-3-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰基]-甲基-氨 基}-苯并噁唑-2-基)-乙酸；

(7-{[4-氯-5-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-2-甲氧基-苯甲酰基]- 甲基-氨基}-苯并噁唑-2-基)-乙酸；

3-(7-{[4-氯-3-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰基]-甲基-氨 基}-苯并噁唑-2-基)-丙酸；

3-(7-{[4-氯-5-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-2-甲氧基-苯甲酰 基]-甲基-氨基}-苯并噁唑-2-基)-丙酸；

3-{5-氯-4-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-2-[(2-甲氧基-苯基)-甲 基-氨基甲酰基]-苯氧基}-2-羟基-丙酸；

2-氨基-3-{5-氯-4-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-2-[(2-甲氧基-苯 基)-甲基-氨基甲酰基]-苯氧基}-丙酸；和

4-{5-氯-4-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-2-[(2-甲氧基-苯基)-甲 基-氨基甲酰基]-苯氧基}-3-羟基-丁酸。

上文所列的代表性化合物也旨在包括所列化合物的药物可接受的 盐。

可通过公知的有机合成技术制备本发明的化合物，这些技术包括 在实施例中有更详细描述的方法。一般而言，可通过以下反应方案制 备上述结构(I)的化合物，其中除非另有说明，所有取代基如上文所定 义。

方案1

将3-溴苯甲酸(I)转化为相应的酰氯，然后与HN(R₂)R_2a(II)偶联以 形成酰胺(III)。或者，能够通过(I)与(II)在诸如HBTU的活化试剂存在 下的偶联反应制备(III)。如果(II)的R₂为氢，则可在DMF中用诸如氢化 钠的强碱和R₂X(X＝Br、I)进行另外N-烃基化步骤。然后通过钯(0)催化 反应将(III)转化成硼酸酯(IV)。(IV)与适当芳基或杂芳基卤化物(A-X) 的铃木反应(Suzuki reaction)产生期望产物(V)。在方案1中描述A的适当 芳基或杂芳基的实例。

方案2

此外，由方案1中所述的化学处理的改进制备本发明化合物。根据 方案2，可根据方案1制备一个R₃为甲氧基的酰胺(III)。甲氧基苯基的 去烃基化产生酚(VI)。由包括例如溴-烃基酯(Br(CH₂)_nCO₂R₆)的取代溴 代烃(Br-烃基-R₅)的烃基化得到取代的醚(VII)。然后通过钯(0)催化反 应将该中间体转化成硼酸酯(VIII)。随后(VIII)与适当芳基或杂芳基卤 化物的铃木反应产生(IX)。或者，可在铃木条件下将适当芳基或杂芳 基硼酸与(VII)偶联以得到(IX)。

方案3

在取代基R₅由羧酸酯(X)表示的情况下，如方案3所述使用酸或碱 条件的酯去保护用以产生游离羧酸(XI)。如果需要的话，可通过酸(XI) 的酯化相反地制备通式(X)化合物。

方案4

或者，还可由酚(VI)制备通式(IX)的化合物。如方案4所示，首先 进行钯(0)反应以产生硼酯(XII)。接着使该中间体与各种芳基溴处于铃 木条件下以得到酚(XIII)。随后酚基的烃基化得到通式结构(IX)化合 物。

方案5

方案5描述了式(IX)化合物的替代合成法。在该情形中，用3-溴丙 醇将酚(XIII)烃基化以得到(XIV)。醇的氧化得到羧酸(XV)。

方案6

或者，可如方案6中所述通过自酸(I)就地产生的酰氯与N-取代的羟 基苯胺反应获得(VI)。由诸如溴-烃基酯(Br-烃基-COOR₆))的相应的取 代的烃基溴将中间体(VI)烃基化以产生醚(VII)，可如先前在方案2中所 述将醚(VII)进一步精制为式(IX)化合物。在方案6中，可如所述制备酰 胺(VI)或由适当取代的2-氨基甲酚(R₂＝H)合成酰胺(VI)。可在反应顺序 的稍后阶段进行酰胺氮的烃基化。通常，对于R₂基团为氢的情况，在 完成反应顺序中的其它步骤之前，在DMF中用诸如氢化钠的强碱和 R₂X(X＝Br、I)对中间体(VII)进行另外的N-烃基化步骤。

方案7

用3-溴丙醇将中间体酚(VI)烃基化。将中间体溴化物(XVI)转化成 相应的硼酸酯(XVII)。与适当芳基或杂芳基卤化物的铃木反应得到醇 (XVIIa)。随后可将该衍生物氧化以得到酸(XVIII)。任选地，可将该酸 直接由酸转化成其烃基酯(XIX)。

方案8

在方案3的另一详细描述中，可使酯(其中R₆为例如甲基或乙基)发 生氨解以得到酰胺XX。

方案9

将α-四氢萘酮(XXI)转化为相应内酰胺(XXII)然后打开以形成苯胺 甲酯(XXIII)。使该苯胺与由酸(I，也参见方案1)形成的苯甲酰氯偶联 以产生酰胺(XXIV，R₂＝H)。随后在DMF中用诸如氢化钠的强碱和R₂X (X＝Br、I)进行N-烃基化步骤以得到完全取代的(XXIV，R₂＝烃基，R₆＝ 甲基)。然后通过钯(0)催化反应将溴化物(XXIV)转化成硼酸酯(XXV)。 与适当芳基或杂芳基卤化物的铃木反应得到酯(XXVI)。必要的话，可 将该酯转化成酸(XXVII)。在所引入的“A”基团对移除甲酯所必需的去 保护条件敏感的情况下，如果需要的话可改变酯取代R₆。在这方面， 在用适当醇再酯化之前，首先在碱水解条件下将酯(XXIV)去保护(以 R₆＝叔丁基例示)。方案9的最后步骤对两种中间体而言保持不变。

方案10

在方案1的变体中，可延迟酰胺氮的烃基化以促进该位置上取代的 多样化。因此，如方案10所述，可首先将酰胺(III)转化为硼酯(XXVIII)， 然后通过铃木方案转化为中间体(XIV)。通过在强碱存在下与适当亲电 子试剂反应来实现酰胺氮的烃基化以产生完全取代的产物(V)。

方案11

在方案1的改进中，可在反应顺序早期进行钯偶联反应。因此，首 先将苯甲酸(I)转化成其羧酸酯，然后转化成硼酯(XXX)。使该中间体 处于铃木偶联条件下，酯水解后得到化合物(XXXI)。或者，可使用市 售的(XXX.a)通过铃木偶联反应单步骤产生XXXI。将酸(XXXI)就地活 化为酰氯并与通式结构(II)的苯胺偶联以获得酰胺(V)。当R₂为氢时， 随后可在DMF中用诸如氢化钠的强碱和R₂X(X＝Br、I)进行N-烃基化步 骤以得到(V)。

方案12

可通过用诸如醛、酮或取代的缩酮的羰基等效物将伯苯胺(XXXII) 还原胺化直接实现适当取代的苯胺(II)的合成，或通过包括直接酰化的 2步骤途径实现。在这种情况下，用例如氢化锂铝使中间体(XXXIII， R为H、烃基或取代的烃基)还原以产生期望产物。

方案13

将4-取代的-2-氟-3-硝基-苯甲酸(XLI)转化为相应酰氯并与取代的 苯胺(II)偶联以形成酰胺(XLII)。或者，能够通过(XLI)与(II)在诸如 HBTU的活化试剂存在下的偶联反应制备(XLII)。当(II)的R₂基团为氢 时，在诸如于DMF中用诸如氢化钠的强碱的条件下使用烃基卤化物 [R₂X(X＝Br、I)]进行另外的N-烃基化。然后，通过硝基官能团的初始 还原，随后在溴化铜(II)存在下苯胺的重氮化将(XLII)转化成溴化物 (XLIII)。可以包括通过直接使用适当取代的醇插入烃基侧链取代 (XLIII)的氟基的若干方式制备(XLV)。或者，用甲醇钠进行取代以产 生甲氧基衍生物。通常用BBr₃实现这种甲氧基化合物的去甲基化以促 进酚的制备，所述酚随后可用取代的烃基溴(例如Br-烃基-R₅)烃基化以 产生中间体(XLV)。可将溴化物(XLV)用于钯(0)催化反应以得到硼酯 (XLVI)。在铃木条件下，该酯能够与适当芳基或杂芳基卤化物反应以 产生(XLVII)。可通过在酸性或碱性条件下将酯去保护，将通式结构 (XLVII，R₅为-COOR₆)的化合物转化成(XLVIII)。或者，相应醇(XLVII， R₅为羟基)的氧化也可产生结构(XLVIII)。在任何情况下，如果需要的 话能够如先前所述将酸再次转化成适当的酯。

方案14

当A为取代的吡啶时，多种其它合成转化是可能的并在此处示出 其中的一些。例如，使取代的吡啶(XLIX)氧化以产生作为产物的N-氧 化物(L)。另外，当吡啶环在活化位置(吡啶氮的邻位或对位)含有一个 或多个诸如氯的卤素时，(LI)中的卤素可被适当亲核试剂置换以产生 产物(LII)。这样的亲核试剂由硫醇或诸如吡唑或咪唑的亲核杂环表示。 还可根据连接于杂芳基或芳基环的官能团的修饰的已知通用程序修饰 吡啶内的其它取代模式。这例示于所述的腈(LIII)水解中，由此用碱水 溶液处理该通式结构的化合物可得到通式结构(LIV)的酰胺。

方案15

在碱性条件下将中间体酚(VI)烃基化以产生烃基腈(LV)。将该中 间体与活化叠氮化物偶联以允许四唑(LVI)合成。在这一阶段中，通过 与适当取代的烃基卤化物(例如三甲基硅烷基乙氧基甲基氯)反应保护 四唑部分可能得到异构体的混合物。然后，如先前所述将所得烃基四 唑(LVII)转化成硼酯(LVIII)，随后与适当芳基或杂芳基卤化物反应得 到受保护中间体(LIX)。随后将该物质去保护得到四唑(LX)。

方案16

在高温下，在乙酸中将氨基苯甲酸(LXI)与脲缩合。在强酸存在下， 使所得脲(LXII)与适当取代的1，3-二酮进行第二缩合以得到芳酯 (LXIII)。通过酸性水解实现酯官能团的移除以得到酸(LXIV)，随后使 酸(LXIV)与适当取代的苯胺(II)偶联以产生酰胺(LXV)。

方案17

作为方案13的变体，首先将溴化物XLIII转化成硼酸酯(LXVI)，接 着进行铃木偶联以产生LXVII。然后用醇(R₅-烃基-OH)置换LXVII上的 氟以得到最终化合物LXVIII。在置换反应期间可将R₅基团保护，因此 在产生LXVIII的最终结构之前，去保护可为必需的。

方案18

或者，能够选择性地将市售LXIX的酚及酸基团烃基化以形成 LXX。移除保护基(prot)后，能够形成酰胺以产生LXXI。在该过程中， 可保护R₅上的官能团，因此去保护可为必需的。

方案19

作为方案11的变体，使氨基酚LXXIII与丙烯腈反应以形成 LXXIV，能够将LXXIV转化成四唑中间体LXXV。随后通过将XXXI 转化成相应酰氯来活化XXXI，然后使酰氯与LXXV在水溶液中反应以 产生期望产物LXXVI。

方案20

在P₂O₅存在下，使5-溴-4-R_1d-2-羟基-苯甲酸与取代的苯胺(II)偶联 以形成酰胺(LXXVII)。或者，可通过在诸如HBTU的活化试剂存在下， 与(II)的偶联反应制备(LXXVII)。可将酰胺(LXXVII)用于钯(0)催化反 应以得到硼酯(LXXVIII)。在铃木条件下，该硼酸酯可与适当芳基或杂 芳基卤化物反应以产生(LXXIX)，可通过用烃基卤化物或甲磺酸酯烃 基化或通过与烃基醇的光延反应(Mitsunobu reaction)将(LXXIX)转化 成(LXXX)。

本发明化合物通常可以游离酸或游离碱的形式使用。或者，本发 明化合物可以酸或碱加成盐的形式使用。本发明的游离氨基化合物的 酸加成盐可通过本领域熟知的方法制备且可由形成无毒盐的有机酸和 无机酸形成。适当的有机酸包括顺丁烯二酸、反丁烯二酸、苯甲酸、 抗坏血酸、琥珀酸、甲磺酸、乙酸、三氟乙酸、草酸、丙酸、酒石酸、 水杨酸、柠檬酸、葡萄糖酸、乳酸、扁桃酸、肉桂酸、天冬氨酸、硬 脂酸、棕榈酸、乙二醇酸、谷氨酸和苯磺酸。适当的无机酸包括盐酸、 氢溴酸、硫酸、磷酸和硝酸。碱加成盐包括与羧酸根阴离子形成的盐， 并包括与诸如选自碱金属离子、碱土金属离子(例如锂、钠、钾、镁、 钡和钙)以及铵离子及其取代衍生物(例如二苄基铵、苄基铵、2-羟基乙 基铵等)的有机和无机阳离子形成的盐。因此，术语结构(I)的“药物可 接受的盐”旨在涵盖任何及所有可接受的盐形式。

另外，前药也包括在本发明的范围之中。前药是任何共价结合的 载体，当将该前药给予患者时其在活体内释放结构(I)的化合物。通常 通过以某种形式修饰官能团来制备前药，该方式使所述的修饰能够通 过常规操作或在体内裂解，产生母体化合物。前药包括例如羟基、胺 或酸基团结合至给予患者时裂解以形成羟基、胺或酸基团的任何基团 的本发明化合物。因此，前药的代表性实例包括(但不限于)结构(I)化 合物的醇和胺官能团的乙酸盐、甲酸盐和苯甲酸盐衍生物。另外，在 羧酸(-COOH)情况下，可采用酯，例如甲酯、乙酯等。

关于立体异构体，结构(I)的化合物可具有手性中心，并可以外消 旋体、外消旋混合物，以及单独的对映异构体或非对映异构体的形式 存在。所有这样的异构形式均包括在本发明之内，包括其混合物。

本发明化合物可以完全无定形至完全结晶态的一系列固态的形式 存在。此外，结构(I)化合物的某些结晶形式可以多晶型物形式存在， 其包括于本发明中。另外，某些结构(I)化合物还可与水或其它有机溶 剂形成溶剂化物。本文中使用术语溶剂化物描述包含本发明化合物和 一个或多个药物可接受的溶剂分子的分子配合物。这样的溶剂化物同 样包括在本发明的范围内。

本发明还包括所有药物可接受的同位素标记的结构(I)化合物，其 中一个或多个原子被具有相同原子序数但原子质量不同的原子置换。 实例包括对氢而言²H和³H；对碳而言¹¹C、¹³C和¹⁴C；对氯而言³⁶Cl； 对氟而言¹⁸F；对碘而言¹²³I和¹²⁵I；对氮而言¹³N和¹⁵N；及对硫而言³⁵S。

本发明化合物包括所定义的结构(I)化合物，包括其所有的多晶型 物、前药、异构体(包括光学异构、几何异构和互变异构)、盐、溶剂 化物和同位素。

可通过多种分析技术测定作为GnRH受体拮抗剂的化合物的效力。 如下所述，本领域公知的分析技术包括使用培养的垂体细胞测定GnRH 活性(Vale等人，Endocrinology 91：562-572，1972)，以及测定与大鼠垂 体膜(Perrin等人，Mol.Pharmacol.23：44-51，1983)或与来自表达所克隆 受体的细胞的膜结合的放射性配体。其它分析技术包括(但不限于)测 定GnRH受体拮抗剂对GnRH-刺激的钙通量的抑制、磷酸肌醇水解的调 节、ERK1/2的活化、肥大细胞组胺释放，以及去势动物中促性腺激素 的循环浓度的作用。以下对这些技术、放射性标记的配体的合成、放 射性标记的配体在放射免疫分析中的应用以及化合物作为GnRH受体 拮抗剂的效力的测定进行了描述。

GnRH受体的克隆和表达

将人类、恒河猴、兔、狗和大鼠GnRH受体的cDNA克隆至pcDNA3.1 (+)(Invitrogen)中。由DNA测序证实所有受体的全长序列。以人类、大 鼠或短尾猿GnRH受体将HEK 293、CHO、COS-7或大鼠嗜碱细胞性白 血病(RBL)细胞稳定转染，将高表达单细胞克隆(B_max≥0.4pMol/mg膜蛋 白)分离并维持于具有以下补充物的Dulbecco改进的Eagle培养基 (Dulbecco’s Modified Eagles Medium，DMEM)中：10mM HEPES；2mM L-谷酰胺；1mM丙酮酸钠；50U/ml青霉素、50μg/mL链霉素；10％热 钝化胎牛血清及200μg/mL遗传霉素(G-418硫酸盐)。RBL细胞培养基 中包括非必需氨基酸(0.1mM)(Irvine Scientific；Santa Ana，CA)。

通常，使用稳定转染的RBL细胞的膜进行初始肽放射性配体结合 分析。发现RBL稳定克隆更一致地表达高水平的GnRH受体并因此用于 后续结合研究以及Ca⁺⁺通量及磷酸肌醇积累分析。由于快速分析多种 受体的便利性，使用瞬时转染的COS-7细胞制备含有来自多个物种的 GnRH受体(以及用于其它研究的突变受体)的膜。将稳定转染的CHO细 胞用于ERK1/2刺激分析，这是由于在该分析中信号/噪音特征优良。

膜制备

使经人类GnRH受体稳定转染的HEK 293细胞在达成融合后生长2 天，然后通过用组织培养烧瓶敲击坚固表面来收集这些细胞。通过在 1000g下离心5分钟来收集细胞。将细胞沉淀再悬浮于5％蔗糖中，并使 用polytron匀浆器匀浆两个15秒的匀浆步骤。接着将细胞匀浆在3000g 下离心5分钟以移除核(nuclei)，且随后将上清液在44,000g下离心30分 钟以收集膜部分。将膜沉淀再悬浮于GnRH结合缓冲液(10mM HEPES，pH 7.5，150mM NaCl和0.1％BSA)中，立即将等分试样急速 冷冻于液氮中并储存在-80℃下。使用Bio-Rad蛋白分析套组(Bio-Rad) 测定膜悬浮液的蛋白含量。

收集前使经人类GnRH受体稳定转染的RBL细胞生长至80％融合。 将细胞在37℃下，在0.5mM EDTA/PBS(无Ca⁺⁺、Mg⁺⁺)中孵育10min， 并通过轻轻敲击烧瓶自板中取出。收集细胞并通过在1000g下离心5分 钟沉淀。将细胞沉淀再悬浮于缓冲液(DPBS，补充10mM MgCl₂、2mM EGTA，pH＝7.4)中，并在4℃下使用压力单元并施加压力为900psi的 N₂，进行细胞溶解，持续30min。通过在4℃下在1200g下离心10min 移除未破损细胞及较大碎片。然后将细胞膜上清液在45,000g下离心并 将所得膜沉淀再悬浮于分析缓冲液中，并在冰上使用组织匀浆器匀浆。 使用库马斯加蛋白质试剂(Coomassie Plus Protein Reagent)套组测定蛋 白质浓度。将膜制成等分试样并储存在-80℃下直至准备使用。

通过成批电穿孔(bulk electroporation)制备用来自不同物种(人类、 短尾猿、狗、兔、大鼠)的GnRH受体或突变GnRH受体瞬时转染的COS-7 细胞。自美国菌种保藏中心(American Type Cell Culture)(Manassas， VA)获得COS-7细胞，并将其维持于含有10％胎牛血清、10mM HEPES、 2mM L-谷酰胺、1mM丙酮酸钠、50U/ml青霉素、50μg/ml链霉素的 Dulbecco改进的Eagle培养基(DMEM)(MediaTech Inc.，Hemdon，VA) 中。将COS-7细胞接种于500cm²组织培养板中并在细胞转染之前使其 生长至融合。通过电穿孔在BTX ElectroCell操纵器ECM 600(Fisher Scientific，Pittsburgh，PA)中使用以下设定用50μg适当的GnRH受体 DNA构筑体(construct)转染5×10⁷个细胞：1000μF电容、48Ω电阻和300 V/cm充电电压。在膜制备之前将所转染细胞培养36-48h。将瞬时转染 的COS-7细胞收集、洗涤并再悬浮于膜缓冲液(20mM HEPES pH 7.2， 6mM MgCl₂，1mM EDTA)中。将细胞离心并将细胞沉淀再悬浮于少 量膜缓冲液中。在900psi下在4℃下于氮气室中孵育30分钟后通过减压 来溶解细胞。在4℃下将匀浆在1000g下离心10分钟以移除核和细胞碎 片。通过在4℃下在44,000g下离心45分钟自上清液收集膜。以1mg/mL 的浓度将膜再悬浮于膜缓冲液中、快速冷冻于液氮中并储存在-80℃下 直至使用。

放射性配体结合分析

在含有10mM HEPES、150mM NaCl和0.1％BSA的pH＝7.5的缓冲 液中使用肽放射性配体进行放射性配体结合置换分析。在含有50mM Tris、150mM NaCl、5mM MgCl₂、0.01％皂苷和0.5mM EDTA的pH＝7.5 的缓冲液中使用[³H]-1-(2，6-二氟苄基)-3-[(2R)-氨基-2-苯乙基]-5-(2-氟 -3-甲氧基苯基)-6-甲基尿嘧啶(此处3-甲氧基被氚化)进行放射性配体 结合分析。通过在室温下将放射性配体 ([¹²⁵I-Tyr⁵，DLeu⁶，NMeLeu⁷，Pro⁹-NEt]GnRH(0.1nM)、[His⁵， ¹²⁵I-DTyr⁶]GnRH(0.2nM)(31)或[³H]-1-(2，6-二氟苄基)-3-[(2R)-氨基-2- 苯乙基]-5-(2-氟-3-甲氧基苯基)-6-甲基尿嘧啶(1nM))，浓度为0.3pM至 10μM的未标记竞争剂和膜孵育2小时来进行放射性配体置换分析。对 于人类、猴和兔GnRH受体，使用来自膜制剂的10至20微克蛋白/孔。 对于大鼠和狗GnRH受体，分别使用5微克/孔和60微克/孔的膜。结合 分析在微孔96孔GF/C过滤板(对于 [¹²⁵I-Tyr⁵，DLeu⁶，NMeLeu⁷，Pro⁹-NEt]GnRH分析)或96孔低结合板(随后 过滤于GF/C Unifilter上)中进行。使用前用0.5％PEI将过滤器预处理30 min。通过快速真空过滤终止反应并用250μL pH＝7.4的冰冷PBS(对于 [His⁵，¹²⁵I-DTyr⁶]GnRH和[³H]-1-(2，6-二氟苄基)-3-[(2R)-氨基-2-苯乙 基]-5-(2-氟-3-甲氧基苯基)-6-甲基尿嘧啶放射性配体，洗涤培养基中包 含0.01％Tween-20)将过滤器洗涤两次。干燥过滤器，并使用Cobra IIγ 计数器(Perkin Elmer Life Sciences)监测微孔过滤器的放射能。对于过 滤于GF/C Unifilter板上的分析，将50μL闪烁流体添加至各过滤器，并 使用TopCount NXT监测放射能。对于碘化放射性配体，在γ计数器上 监测总放射性配体，并且对于氚化放射性配体，使用Perkin Elmer 1600TR液体闪烁计数器监测总放射性配体。所结合的总放射性配体不 超过所添加的总放射性配体的10％，其为不会明显地影响K_i的测量的 消耗水平。非特异性结合不超过任一置换分析中所添加的总放射性配 体的2％。将放射性配体结合的抑制拟合至单部位和两个部位竞争结合 方程式，并使用F检验确定最佳拟合。对于所有置换结合实验，单部位 结合模型最佳拟合(p＜0.05)。使用Cheng和Prusoff(Biochem. Pharmacol.22：3099，1973)的方法由IC₅₀值计算K_i值，且可将其转化成 pK_i值(K_i值的负对数)。

$K_i=\frac{{\mathrm{IC}}_{50}}{1+L/K_D}$

其中L＝放射性配体且KD＝放射性配体对受体的亲和力。本发明的 GnRH受体拮抗剂的K_i不大于10μM。在本发明的其它实施方案中， GnRH受体拮抗剂的K_i小于1μM，并在许多情况下K_i小于0.1μM(即100 nM)。

在一种或多种肽竞争人类受体结合分析中测试的如下文实施例2 至52中所示的本发明化合物(不包括化学中间体)展示具有不大于1μM 的K_i值。另外，在一种或多种肽竞争人类受体结合分析中测试的如下 文实施例2至52中所示的以下本发明化合物(不包括化学中间体)展示 具有不大于100nM的K_i值，而加下划线的化合物的K_i值不大于10nM： 2-1，2-2，2-3，2-6，2-8，2-9，2-10，2-11，2-12，2-13，2-14，2-15，2-16，2-18，2-19，2-21，2- 22，2-24，2-25，2-26，2-27，2-29，2-31，2-33，2-34，2-35，2-36，2-37，2-39，2-42，2-45，2- 46，2-48，2-49，2-50，2-53，2-54，2-55，2-57，2-58，2-59，2-60，2-61，2-62，2-63，2-64，2-65，2-66，2-67，2-68，2-69，2-70，2-71，2-72，2-75，2-76，2-77，2-79，2-80，2-81，3-1，3- 2，3-3，3-4，3-5，3-8，3-9，3-10，3-11，3-12，3-18，3-19，3-22，4-1，4-2，4-3，4-4，4-5，4-6， 4-7，4-8，4-9，4-10，4-11，4-12，5-1，5-2，5-3，5-4，5-5，5-6，6-1，7-1，8-7，9-5，10-1，10-2， 11-1，11-2，11-3，11-4，11-5，11-6，11-7，11-8，13-3，14-1，14-2，14-3，14-4，15-1，16-1， 16-2，17-2，18-1，19-1，19-2，19-3，19-5，19-6，19-7，19-8，19-9，19-10，20-1，20-2，20-3，21-1，21-2，21-3，21-4，21-5，21-6，21-7，21-8，22-1，22-2，22-3，22-4，22-6，22-7，22- 8，22-9，22-10，23-1，24-2，26-1，27-1，28-1，30-2，30-5，30-7，30-8，30-9，30-10，30-11， 30-12，30-13，30-14，30-15，30-16，30-17，31-1，33-1，33-2，33-3，34-1，34-2，34-3，34-4，34-5，34-6，34-7，34-8，34-9，34-10，34-11，34-12，34-13，34-15，34-16，34-17，34-18， 34-19，34-20，34-23，34-24，34-25，34-26，35-1，36-1，36-2，37-1，37-2，37-3，37-4，38-1，39-1，39-2，39-3，39-4，39-5，39-6，39-7，39-8，39-9，39-10，39-11，39-12，39-13，39-14，39-15，39-16，39-17，39-18，39-20，39-21，39-23，40-1，41-1，42-1，42-2，42-3，42-4， 42-5，42-6，42-7，42-8，42-9，42-10，42-11，42-12，42-13，42-14，42-15，42-16，42-17， 42-18，43-1，44-1，45-1，46-1，46-2，46-3，46-4，47-1，47-2，47-3，47-4，47-5，48-1，48-2，49-1，49-2，49-3，49-4，50-1，50-2，50-3，51-1，52-1，53-1，53-2.

将小麦胚芽凝集素(WGA)偶联的聚苯乙烯(PS)成像珠粒 (Amersham Biosciences，Piscataway，NJ)用于闪烁亲近分析，从而允许 如Viewlux(PerkinElmeR Life Sciences，Boston，MA)所用的那样用CCD 成像体系使整个板光成像。通过在各时间点测量的饱和分析来监测受 体和放射性标记的完整性以确保一致的K_d。通常，GnRH SPA分析产 生长达16h孵育的可靠结合数据。测定每一膜制剂的最佳膜/SPA珠粒 比率且其通常为每孔40微克膜/0.5毫克珠粒。通常，将仪器设置为使用 613nm滤光片测量300秒发光以捕获成像珠粒的红移发射，并设置程序 以60min的时间间隔记录11h。

反应通常由50μL各种浓度的未标记化合物；50μL放射性标记的 [¹²⁵I]-His⁵、D-Tyr⁶GnRH配体(约300pM，2200Ci/mmol；PerkinElmer Life Sciences)；和100μL膜/SPA珠组成，将分析缓冲液(10mM HEPES、 150mM NaCl、0.1％牛血清白蛋白[BSA；V部分]，pH 7.5)中的这些物 质依次添加至低结合96孔板(Corning，Palo Alto，CA)。如先前所述制备 细胞膜部分并将其再悬浮于分析缓冲液中。

在添加化合物和放射性标记之前，将SPA珠和膜(稳定表达人类 GnRH-R的大鼠嗜碱细胞性白血病[RBL]细胞)预先孵育2h。将完全反 应物短暂震荡并使其于室温下在Viewlux仪器中沉淀。以指定时间间隔 测定所结合放射性配体的量。

如通过部分F检验(p＞0.05)所测定的那样，将单部位结合模型应用 于所有置换结合实验。将所有测试化合物的两个时间点的剂量-反应曲 线标准化至零和100％特异性结合，并使用Cheng-Prusoff方程式以S形 剂量-反应拟合使用Prism 4.0软件(GraphPad Software，San Diego，CA) 使用如由饱和结合实验所测定的对于[¹²⁵I]-His⁵、D-Tyr⁶GnRH而言为 0.2nM的K_d值计算K_i值。所有曲线的坡度通常为-0.8至-1.1。

可在不存在和存在一系列浓度的化合物情况下，通过将细胞膜添 加至含有适当量的经放射性标记的示踪剂的孔中来启动估算本发明化 合物的亲和力的放射性配体结合实验(Sullivan等人，Biochemical Pharmacology，72，2006，838-849)。在启始实验之前将所有缓冲液预热 至37℃，并在整个实验期间将分析板保持在该温度下。在37℃下将分 析混合物(总体积200μL)孵育1min至3h(15个时间点)，并通过经由细 胞收集器(UniFilter-96 Filtermate；Packard，PerkinElmer Life Sciences) 快速真空过滤于用含0.5％聚氮丙啶的蒸馏水预处理30min的Unifilter GF/B过滤板上来终止分析。过滤后，用400μL洗涤缓冲液(Dulbecco’s 磷酸缓冲盐，0.01％Tween-20，pH 7.5)将膜洗涤两次。干燥过滤板， 添加50μL闪烁流体(Microscint 20；PerkinElmer Life Sciences)，并使用 TopCount NXT(PerkinElmer Life Sciences)在30％效能下监测板的放射 能。使用1600TR液体闪烁计数器(PerkinElmer Life Sciences)在47％效能 下测量添加至分析的放射性配体的总量。使用Prism 4.1软件(GraphPad Software，San Diego，CA)进行分析。

Ca⁺⁺通量测定

为测定表达人类GnRH受体的细胞中GnRH刺激的钙通量的抑制， 以用人类GnRH受体稳定转染的RBL细胞以50,000个细胞/孔的密度接 种96孔板并使其附着过夜。在37℃下将细胞装载于以下培养基中历时1 小时：含有20mM HEPES、10％FBS、2μM Fluo-4、0.02％泊洛尼克 酸(pluronic acid)和2.5mM丙磺舒的DMEM。装载后用洗涤缓冲液 (Hanks平衡盐(Hanks balanced salt)，20mM HEPES、2.5mM丙磺舒) 将细胞洗涤4次，最终洗涤后在孔中留下150μL。将GnRH于含有0.1％ BSA的FLIPR缓冲液(Hanks平衡盐，20mM HEPES)中稀释至20nM的 浓度，并分配入低蛋白结合96孔板中。在第三个96孔板中于0.1％ BSA/FLIPR缓冲液中制备各种浓度的拮抗剂。将含有细胞、激动剂和 拮抗剂的板装载至萤光成像读板器(FLIPR)(Molecular Devices， FLIPR384 system，Sunnyvale，CA)中以根据制造商的说明书处理液体 并测量萤光。将仪器程式化以便将拮抗剂(50μL不同浓度)添加至细胞 板中并在添加激动剂(50μL或4nM最终浓度的GnRH)之前预培养1分 钟。

[³H]IP产生的测量

程序由公布的方案(Zhou等人，J Biol Chem 270：18853-7)改进。简 言之，以200,000个细胞/孔的密度将用人类GnRH受体稳定转染的RBL 细胞接种于24孔板中，历时24小时。将细胞用含有10％透析FBS无肌醇 的培养基洗涤一次然后用1μCi/ml的[myo-³H]肌醇标记。20-24小时后， 用缓冲液(140mM NaCl、4mM KCl、20mM Hepes、8.3mM葡萄糖、 1mM MgCl₂、1mM CaCl₂和0.1％BSA)洗涤细胞并在37℃下在存在或 不存在各种浓度的拮抗剂和10mM LiCl的情况下用原生GnRH肽在相 同缓冲液中处理1小时。用10mM甲酸在4℃下将细胞萃取30min，并 装载至Dowex AG1-X8柱，洗涤并用1M甲酸铵和0.1M甲酸洗脱。在 闪烁计数器中对洗脱物进行计数。使用非线性最小平方回归通过Prism 程序(GraphPad Software，San Diego，CA)将PI水解分析的数据制成曲 线，剂量比率也由其计算。由在4个独立实验中获得的剂量比率通过线 性回归产生Schild线性曲线，使用X截距确定拮抗剂的亲和力。

ERK1/2的活化

在37℃下使稳定表达GnRH受体的CHO细胞血清饥饿1小时，用各 种剂量的拮抗剂孵育5min，并用1nM GnRH刺激5min。将细胞用PBS 洗涤一次并直接收集于2X SDS样品缓冲液中。将细胞提取物超声处 理，在55℃下加热5min并进行SDS-PAGE。将所溶解的蛋白转移至硝 化纤维素膜上。使用以1∶3000稀释于含1％脱脂奶粉的TBST(20mM Tris-HCl，pH 7.4，137mM NaCl，0.1％Tween20)中的抗磷酸MAPK (antiphosphoMAPK)p42/44抗体(Cell Signaling Technology，Danvers， MA)检测活化磷酸化形式的ERK1/2。用抗ERK2抗体(K23，Santa Cruz Biotechnology，Santa Cruz，CA)检测总ERK1/2。用SuperSignal West Pico试剂(Pierce，Rockford，IL)进行化学发光检测并在VersaDoc3000 (Bio-Rad)成像体系上定量。将剂量-反应数据制成曲线且以GraphPad Prism软件分析。

组胺释放

根据当前关于实验动物和动物福利的人道和伦理使用的NIH准则 并按照IACUC批准的方案获得大鼠腹膜肥大细胞。先前已描述该方法 用于评估通过肽GnRH拮抗剂的肥大细胞组胺释放(Sundaram等人， Agents Actions 25：307-13)。简言之，通过CO₂窒息将6只240-300g的雄 性Sprague Dawley大鼠处死，并将40mL冷PIPES缓冲液(25mM PIPES、 110mM NaCl、5mM KCl、1mg/mL葡萄糖、1mg/mL BSA和20U/ml 肝素，pH 7.4)注入腹膜腔并轻轻按摩腹部。回收腹膜洗涤液并将其储 存在冰上。将来自腹膜洗涤液的细胞用5mL PIPES缓冲液洗涤3次，汇 集并用Percoll梯度(Wells及Mann，Biochem Pharmacol32：837-42)纯化。 对于刺激分析，将300μL PIPES缓冲液中的约2×10⁵个细胞置于1.5mL Eppendorf管中并将测试化合物(100μL)添加至细胞悬浮液。在37℃下 将管孵育15min并用600μl冰冷PIPES缓冲液终止反应。在4℃下离心 后，通过来自SPI-BIO的组胺EIA套组(Cayman Chemical，Ann Arbor， MI)按照制造商的说明书测定上清液中的组胺含量。

阉割短尾猿的LH抑制

根据当前对于实验动物和动物福利的人道和伦理使用的NIH准则 并按照IACUC批准的方案进行该短尾猿研究。在对约3.7至6.5岁(3.7至 4.8kg)的雄性猕猴第一次给药之前约4周进行完全睾丸切除术(两个睾 丸)。在手术之前，由睾丸体积和睾酮含量验证性成熟。在为期4周的 手术后恢复期过程中每周收集血样以量测睾酮、FSH和LH以验证促性 腺激素的上升。通过鼻饲法或通过静脉内输注(经约15分钟)将拮抗剂 给药至胃部。每次给药前后收集血样以分析血清LH和血浆拮抗剂浓 度。对于静脉内输注给药，在开始输注后0.25、0.33、0.5、1、1.5、4、 8和24小时收集样品。在口服给药后0.25、0.5、1、1.5、2、4、8和24 小时收集样品。在俄勒冈州区域灵长类动物中心(Oregon Regional Primate Center)(Beaverton，OR)或在埃默里大学(Emory University)的 耶基斯灵长类动物研究中心(Yerkes Primate Research Center)使用先前 报导的小鼠睾丸间质细胞(Leydig cell)生物分析测量血清样品中的生 物活性LH浓度，睾丸间质细胞生物分析使用猕猴LH RP-1作为参考制 剂检测少至3ng LH/mL(Ellenwood及Resko，Endocrinology 107：902-7)。

如上所述，本发明的GnRH受体拮抗剂可以用于广泛的治疗应用， 并可用于治疗男性和女性以及一般哺乳动物的多种性激素相关病状。 例如，这样的应用包括子宫内膜异位症、子宫平滑肌瘤、多囊性卵巢 病、痛经、性交疼痛、月经过多、非月经期骨盆疼痛、骨盆触痛、硬 结、月经周期的常见病症、归因于化学疗法或早期绝经期的卵巢功能 早衰、多毛症、性早熟，诸如前列腺癌、乳腺癌和卵巢癌的性腺类固 醇依赖的肿瘤形成，垂体促性腺激素细胞腺瘤、子宫腺肌病、睡眠呼 吸暂停、肠道易激综合征、经期前综合征、良性前列腺肥大、下尿路 症状(LUTS)、避孕及不育症(例如，诸如体外受精的辅助生殖治疗)。 本发明的化合物也可用于辅助治疗生长激素缺乏及身材矮小，并可用 于治疗全身性红斑狼疮。

另外，所述化合物可用于与雄激素、雌激素、黄体酮、抗雌激素、 抗黄体酮、血管紧张素转换酶抑制剂、血管紧张素II受体拮抗剂、肾 素抑制剂、双膦酸盐及其它用于治疗和/或预防钙、磷酸盐及骨代谢失 调的药剂，芳香酶抑制剂、诸如非甾体消炎药(NSAIDS)的止痛剂、其 它COX抑制剂及抗NGF药剂组合。

在本发明的另一实施方案中，公开了含有一种或多种GnRH受体拮 抗剂的药物组合物。为了给药的目的，可将本发明的化合物调配成药 物组合物。本发明的药物组合物包含本发明的GnRH受体拮抗剂和药物 可接受的载体和/或稀释剂。GnRH受体拮抗剂以有效治疗特定病症-即 以足以获得GnRH受体拮抗剂活性，并优选对患者具有可接受的毒性的 量存在于组合物中。本领域技术人员能够容易地确定适当浓度和剂量。

药物可接受的载体和/或稀释剂为本领域技术人员所熟知。对于调 配成液体溶液的组合物而言，可接受的载体和/或稀释剂包括生理食盐 水和无菌水，并可任选地包含抗氧化剂、缓冲液、抑菌剂及其它常用 添加剂。还能够将组合物调配成除GnRH受体拮抗剂之外还含有稀释 剂、分散剂和表面活性剂、粘合剂和润滑剂的丸剂、胶囊、颗粒或片 剂。本领域技术人员可进一步以适当方式并根据可接受的实践调配 GnRH受体拮抗剂，例如Remington’s Pharmaceutical Sciences(雷明顿 制药学)，Gennaro编，Mack Publishing Co.，Easton，PA 1990中所公开的 那些。

在另一实施方案中，本发明提供一种治疗如以上所讨论的性激素 相关疾病状态的方法。这样的方法包括以足以治疗疾病状态的量将本 发明的化合物给予温血动物。在该情形中，“治疗”包括预防性给药。 这样的方法包括优选以如以上所讨论的药物组合物形式全身性给予本 发明的GnRH受体拮抗剂。本文所用的全身性给药包括口服及肠胃外给 药方法。

对于口服给药而言，GnRH受体拮抗剂的适当药物组合物包括粉 末、颗粒、丸剂、片剂、锭剂、咀嚼剂、凝胶和胶囊以及液体、糖浆 剂、悬浮液、酏剂和乳液。本发明化合物还可用于快速溶解、快速崩 解的剂型中。这些组合物还可以包含抗氧化剂、食用香料、防腐剂、 悬浮剂、稠化剂和乳化剂，着色剂、调味剂及其它药物可接受的添加 剂。口服给药的制剂可经调配立即释放或改善释放，其中改善释放包 括延迟、持续、脉冲、受控、靶向和程序释放。

对于肠胃外给药而言，通过静脉内、动脉内、腹膜内、肌内、皮 下或其它注射或输注将本发明化合物直接给予血流、肌肉或内脏器官 中。可在注射水溶液中制备肠胃外制剂，所述制剂除GnRH受体拮抗剂 之外还可含有缓冲液、抗氧化剂、抑菌剂、盐、碳水化合物和通常用 于这样的溶液中的其它添加剂。肠胃外给药可为立即释放或改善释放 (诸如注入或植入储槽)。

还可将本发明化合物经局部、皮肤(内)或经皮给予皮肤或粘膜。 典型制剂包括凝胶、水凝胶、洗剂、溶液、乳膏、软膏、敷料、泡沫、 皮肤贴片、薄片、植入物及微乳液。还可通过吸入或鼻内给药，例如 以干粉、气雾剂喷雾或以滴剂形式给予本发明的化合物。本发明化合 物的其它给药途径包括叶鞘内和直肠给药(通过栓剂、子宫托或灌肠 剂)及经眼和经耳给药。

对于给予人类患者(或个体)而言，本发明化合物的总日剂量可为1 mg至500mg、通常5mg至300mg、更通常25mg至250mg，当然其依 赖于许多因素，包括个体的年龄、性别和体重且还依赖于给药模式。 总日剂量可单次或以分次剂量给予。

出于说明而非限制的目的提供以下实例。总而言之，可通过上文 公开的通用方法分析本发明的GnRH受体拮抗剂，而以下实施例公开了 本发明的代表性化合物的合成。

实施例

分析样品的HPLC方法

保留时间t_R，以分钟计

方法1：柱：Synergi 4μ，Max-RP 80A，50×2mm；梯度：95％H₂O+0.025％ TFA/MeCN至95％MeCN+0.025％TFA/H₂O，经3min；

流速：1mL/min；UV：222nM和254nM

方法2：柱：Synergi 4μ，Max-RP 80A，50×2mm；梯度：95％H₂O+0.025％ TFA/MeCN至95％MeCN+0.025％TFA/H₂O，经13min；

流速：1mL/min；UV：222nM和254nM

方法3：柱：Phenomenex 5μ，Gemini C18110A，150×4.6mm

梯度：95％H₂O+0.04％NH₄OH至90％MeCN+0.04％NH₄OH，经9.86 min。

流速：2.5mL/min。UV：222nM和254nM

方法4：柱：Phenomenex 4μ，RP 80A，50×2mm

梯度：95％[H₂O+10mM NH₄CHO]；5％[含25％MeCN的MeOH]至5％ [H₂O+10mM NH₄CHO]，经6.43min

流速：1mL/min。UV：222nM和254nM

方法5：柱：Waters Xterra RP，250×3mm

梯度：90％[H₂O+0.025％TFA]至95％[MeCN+0.025％TFA]，经46min

流速：0.8mL/min。UV：222nM和254nM

实施例1

5-溴-2-三氟甲基-异烟腈

步骤1A：5-溴-2-三氟甲基-异烟酸

将5g(22.1mmol)5-溴-2-三氟甲基吡啶加入具有橡胶隔片和氮入 口的100mL圆底烧瓶。在氮气氛下向固体中加入30mL无水THF。溶 液变均匀后，用-78℃干冰/丙酮浴将其冷却。向具有橡胶隔片和氮入 口的另一100mL圆底烧瓶中加入3.4mL(24.2mL，1.1当量)无水二异 丙胺。向该溶液中加入16.9mL无水THF，放置在氮气氛下并用冰浴冷 却。向该溶液中小心添加9.7mL(24.3mmol，1.1当量)含2.5M正丁基 锂的己烷。用-78℃干冰/丙酮浴冷却淡黄色LDA溶液。将具有橡胶隔 片、氮入口、搅拌棒、热电偶和双头套管针的100mL梨形烧瓶放置在 氮气氛下并用-78℃干冰/丙酮浴冷却。向具有橡胶隔片、CO₂入口、针 出口和搅拌棒的250mL圆底烧瓶中加入30mL无水THF。用-78℃干冰/ 丙酮浴冷却该溶液并使无水CO₂鼓泡通过该溶液持续10分钟。

向空100mL烧瓶中加入5mL LDA溶液。以保持溶液温度低于 -60℃的加入速率向其中加入5mL 5-溴-2-三氟甲基吡啶溶液。添加后， 将混合物搅拌1分钟，然后通过套管在正氮压力下转移至CO₂饱和溶 液。得到淡栗色溶液。重复该过程直至所有起始物质均转移至CO₂溶 液。用-78℃干冰/丙酮浴将CO₂溶液搅拌1小时。移除冷却浴并使溶液 升温至环境温度。

向反应混合物中小心添加150mL饱和氯化铵溶液。将混合物转移 至500mL分液漏斗。分离下层水相并用100mL 1N氢氧化钠溶液萃取 有机相。用100mL MTBE萃取经合并的水相。用浓盐酸将水相酸化至 pH约为1。用200mL MTBE将浑浊水性混合物萃取两次。将合并的有 机相用100mL盐水洗涤一次，用硫酸镁干燥，过滤并在真空中浓缩以 得到呈灰白色固体状、产率为78％的5-溴-2-三氟甲基-异烟酸(4.7g)。

步骤1B：5-溴-2-三氟甲基-异烟酰胺：

向具有搅拌棒、冷凝器和氮入口的500mL圆底烧瓶中加入38.9g (144mmol)5-溴-2-三氟甲基-异烟酸。向该固体中加入250mL无水二氯 甲烷，然后加入13.2mL(151mmol，1.05当量)乙二酰氯。向该混合物 中添加0.5mL无水二甲基甲酰胺并在环境温度下搅拌该混合物2h。通 过HPLC证明反应完全(等分试样的甲醇猝灭)。在真空中移除溶剂得到 琥珀色油状物。

向冰浴中的具有搅拌棒的1L锥形瓶中加入500mL氢氧化铵水溶 液。向冷却溶液中逐滴添加粗酰氯。用少量乙腈转移残余物。添加后 将该混合物搅拌20分钟。通过过滤收集所得沉淀并用水洗涤。在真空 中于45℃干燥滤饼，得到31.8g呈灰白色固体状、产率为82％的5-溴-2- 三氟甲基-异烟酰胺。还可使用乙醚浆料并收集固体来纯化该化合物。

步骤1C：5-溴-2-三氟甲基-异烟腈

向具有搅拌棒、冷凝器和氮入口的100mL圆底烧瓶中加入5.2g (19.3mmol)5-溴-2-三氟甲基-异烟酰胺。用12mL磷酰氯稀释固体。将 混合物在70℃下加热3小时。将混合物冷却至环境温度并倾于冰上。小 心添加50％氢氧化钠中和混合物。通过过滤收集所得灰白色固体，用 水洗涤并在真空中于50℃下干燥18h。得到4.5g呈灰白色固体状、产 率为94％的5-溴-2-三氟甲基-异烟腈1-1。¹H NMR(CDCl₃)，δ，9.03 (s，1H)，7.91(s，1H)。

5-溴-4-甲基-2-(三氟甲基)吡啶

步骤1E：5-溴-4-甲基-2-(三氟甲基)吡啶

在具有搅拌棒、温度计并用氮吹拂的干燥250mL 3颈圆底烧瓶中 放置无水THF(16mL，Aldrich，无抑制剂)，然后放置N，N-二异丙胺 (0.895g，8.85mmol，Aldrich，再蒸馏99.95％纯度)。将搅拌溶液冷却 至-70℃后，逐滴添加正丁基锂(3.54mL 2.5M的己烷溶液，8.85mmol)， 保持反应温度低于-60℃。在-70℃下将所得溶液再搅拌10min，然后 升温至-20℃，随后立即冷却至-90℃。逐滴添加5-溴-2-(三氟甲基)吡啶 (2g，8.85mmol)的无水THF(8mL，Aldrich，无抑制剂)溶液，保持反 应温度低于-85℃。将所得橙色溶液在-90℃下搅拌40分钟。

在具有搅拌棒、温度计并用氮吹拂的另一干燥250mL 3颈圆底烧 瓶中放置无水THF(5mL，Aldrich，无抑制剂)，然后放置碘甲烷(5mL， 80mmol)。将溶液冷却至-90℃。向其中添加(通过套管)预先形成的锂 化吡啶的溶液，控制速率以便将接收烧瓶的反应温度保持在低于 -80℃。将所得深色溶液在-90℃下再搅拌15min(LCMS指示反应完 全)。用饱和NH₄Cl水溶液(50mL)猝灭反应，然后使其缓慢升温至室温。 用EtOAc(2×50mL)萃取有机物，然后将合并的有机层用水(50mL)、 然后盐水(50mL)洗涤，分离、用MgSO₄干燥然后过滤。在真空中浓缩 得到1.68g棕色油状物，将该油状物通过短路径真空蒸馏(45℃至46℃， 约5mmHg)纯化以得到呈黄色油状的5-溴-4-甲基-2-(三氟甲基)吡啶1-2 (0.289g，14％)(＞97％纯度)。MS(M+H)⁺：241.8，t_R＝2.458min(方法1)； ¹H NMR(CDCl₃)δ8.74(1H，s)，7.56(1H，s)，2.50(3H，s)。

5-溴-2-氰基-4-甲基吡啶

步骤1F：2，5-二溴-4-甲基吡啶

将2-氨基-5-溴-4-甲基吡啶(2.0g，10.7mmol)溶于48％HBr水溶液 (14mL，123mmol)中并在盐/冰浴中冷却至2℃。逐滴添加溴(1.65mL， 32.1mmol)，保持内部温度低于2℃。添加亚硝酸钠(3.69g，53.5mmol) 的水溶液(5mL)，保持内部温度低于5℃并在0℃至5℃搅拌1小时。通 过在冷却下缓慢添加50％NaOH(水溶液)将pH值调整至约13。升温至 室温后，用乙醚萃取反应物，用MgSO₄干燥有机物并浓缩以得到棕色 油状物。用5％乙醚/己烷洗脱进行硅胶快速层析得到呈白色固体状的 产物(1.83g，7.29mmol，68％)。MS[M+H]⁺：251.9；t_R＝2.3min。(方法 1)

步骤1G：(5-溴-4-甲基吡啶-2-基)-N-叔丁基甲酰胺

将2，5-二溴-4-甲基吡啶(1.83g，7.29mmol)溶于甲苯(100mL)中， 冷却至-78℃并逐滴添加nBuLi(4.4mL，8.8mmol，2.0M于戊烷中)的 溶液并在-78℃下搅拌2h。逐滴添加tBuNCO(1.1mL，9.5mmol)的甲 苯(3mL)溶液，并在-78℃下搅拌1h，然后升温至-10℃并通过添加 NH₄Cl(水溶液)猝灭。升温至室温后，用乙醚萃取反应物并将有机物 用Na₂SO₄干燥并浓缩。在未进一步纯化的情况下使用产物。MS [M+H]⁺：271.0；t_R＝2.44min。(方法1)

步骤1H：5-溴-2-氰基-4-甲基吡啶

将该物质溶于甲苯(10mL)中。添加POCl₃(10mL)并使溶液回流5 h。冷却至室温后，在真空中移除溶剂，通过添加2M NaOH(水溶液) 使反应物碱化并用乙醚萃取。用盐水洗涤有机萃取物，用MgSO₄干燥 并浓缩。用20％EtOAc/己烷洗脱进行硅胶层析得到呈灰白色结晶固体 状的5-溴-2-氰基-4-甲基吡啶1-3(920mg，4.7mmol，64％，经2个步骤)。 ¹H NMR(300MHz，CDCl₃)8.73(1H，s)，7.56(1H，s)，2.46(3H，s)。MS [M+H]⁺：196.8.0；t_R＝2.04min。(方法1)

2-溴-3，5-二氯-6-甲基吡啶

步骤1I：2-溴-3，5-二氯-6-甲基吡啶

在室温下将2-氨基-3，5-二氯-6-甲基吡啶(3.54g，20mmol)悬浮于 48％HBr水溶液中，并将该混合物冷却至-20℃。将该悬浮液保持在 -20℃下，同时逐滴添加溴(2.87mL，56mmol)。在该温度下将所得糊 状物搅拌30分钟，然后逐滴添加亚硝酸钠(3.59g，52mmol)的冷却水 溶液(5mL)。此时，使反应混合物升温至室温。再搅拌60分钟后，将 混合物再次冷却至-20℃并用氢氧化钠(16g，0.4mol)的水溶液(20ml) 处理。用乙酸乙酯萃取该混合物，并先后用水和盐水溶液洗涤有机层。 用MgSO₄干燥有机溶液，过滤，并使用硅胶层析[洗脱剂：含10％乙酸 乙酯的己烷]纯化自溶剂蒸发获得的残余物。获得呈固体状的2-溴-3，5- 二氯-6-甲基吡啶1-4(2.14g，45％)。

5-溴-4-氯-2-甲基-吡啶

步骤1J：5-溴-2-甲基-4-硝基吡啶氧化物

将5-溴-2-甲基-吡啶(10.0g，58.0mmol)、过氧化氢(28mL，30％ 于水中)于乙酸(28mL)中的混合物加热至90℃，持续2天，然后添加额 外的过氧化氢(14mL)。将混合物再加热1天。冷却至室温后，用CHCl₃萃取3次。然后用MgSO₄干燥有机溶液，并浓缩以得到粗吡啶氧化物。 MS：187.7(M+H)⁺；t_R＝2.22min。(方法1)

在0℃下，将上述吡啶氧化物添加至HNO₃(18mL)与H₂SO₄(16ml) 的混合物中。然后将该混合物加热至90℃，持续48小时，使其冷却至 室温并倾入冰冻水中，引起沉淀。将固体过滤并干燥以得到5-溴-2-甲 基-4-硝基吡啶氧化物(7.32g)。MS：232.7(M+H)⁺；t_R＝1.94min。(方法 1)

步骤1K：5-溴-4-氯-2-甲基吡啶

使5-溴-2-甲基-4-硝基吡啶氧化物(7.0g，30mmol)在浓HCl(80 mL)中回流16小时。使混合物冷却至室温，部分浓缩然后用NaOH(10 N)中和至pH 7。将粗物质于CHCl₃与水之间分层。将有机溶液分离、 干燥并浓缩以得到呈白色固体状的5-溴-4-氯-2-甲基吡啶氧化物(6.71 g)。MS[M+H]⁺：223.7；t_R＝1.91min。(方法1)

在0℃下向CHCl₃(60mL)中的固体(6.71g，30mmol)中缓慢添加 POCl₃(7.85mL，90mmol)。将混合物加热至回流，持续3小时，并使 其冷却至室温。用CHCl₃萃取产物。将萃取的溶液用饱和NaHCO₃、水 洗涤并用MgSO₄干燥。然后浓缩滤液以得到呈黄色油状的5-溴-4-氯-2- 甲基吡啶1-5(5.9g)。MS[M+H-Cl]⁺：171.9；t_R＝2.13min。(方法1)

实施例2

4-氯-3-(6-氯-吡啶-3-基)-N-(2-甲氧基-苯基)-N-甲基-苯甲酰胺

步骤2A：3-溴-4-氯-苯甲酰氯

向无水DCM(100mL)中的3-溴-4-氯-苯甲酸(9.4g，40mmol)中缓 慢添加DMF(0.5mL)，然后缓慢添加乙二酰氯(22.5mL，55mmol，2M 于DCM中)。将混合物搅拌1小时，然后浓缩以得到呈灰白色固体状的 3-溴-4-氯-苯甲酰氯。

步骤2B：3-溴-4-氯-N-(2-甲氧基-苯基)-苯甲酰胺

在冰浴中冷却DCM(200mL)中的3-溴-4-氯-苯甲酰氯，并缓慢添 加三乙胺(11.1mol，80mmol)，然后逐滴添加DCM(50mL)中的邻氨 基苯甲醚(4.5mL，40mmol)。此时，移除冰浴并将混合物搅拌12小时， 然后在DCM与水之间分层。用1N HCl、饱和NaHCO₃、盐水洗涤有机 层并用MgSO₄干燥。浓缩滤液得到呈粉红色固体状的3-溴-4-氯-N-(2- 甲氧基-苯基)-苯甲酰胺(13.5g)。

步骤2C：3-溴-4-氯-N-(2-甲氧基-苯基)-N-甲基-苯甲酰胺

在0-5℃下向DMF(100mL)中的3-溴-4-氯-N-(2-甲氧基-苯基)-苯 甲酰胺(13.5g，39mmol)中分批添加NaH(1.9g，46.8mmol，60％于矿 物油中)，然后添加碘甲烷(3.15mL，50.7mmol)。将混合物在室温下 搅拌4小时并于乙酸乙酯与水之间分层。然后用1N HCl、饱和NaHCO₃、 盐水洗涤有机层并用MgSO₄干燥。经硅胶衬垫过滤然后浓缩并自乙醚/ 己烷结晶得到呈白色固体状的3-溴-4-氯-N-(2-甲氧基-苯基)-N-甲基-苯 甲酰胺(10.9g)。MS(M+H)⁺：353.9，t_R＝2.812min(方法1)；NMR (CDCl₃)，δ，7.62(1H，d，J＝1.5Hz)，7.23-7.09(3H，m)，7.06-7.00(1H，m)， 6.88-6.78(2H，m)，3.75(3H，s)，3.34(3H，s)。

步骤2C.1：3-溴-4-氯-N-(2-甲氧基-苯基)-N-甲基-苯甲酰胺(替代合成法)

向经冰浴冷却的于DCM(100mL)中的3-溴-4-氯-苯甲酰氯(5.4g， 21.4mmol)中缓慢添加甲氧基-N-甲基苯胺(3.2g，23.4mmol)，然后缓 慢添加三乙胺(5.9mL，42.5mmol)。添加完成后，移除冰浴并在室温 下将混合物搅拌12小时，然后在DCM与水之间分层。然后用1N HCl、 饱和NaHCO₃、盐水洗涤有机层并用MgSO₄干燥。浓缩并通过硅胶柱层 析用己烷/乙酸乙酯(4/1)洗脱纯化得到呈固体状的3-溴-4-氯-N-(2-甲氧 基-苯基)-N-甲基-苯甲酰胺(5.1g)。

步骤2D：4-氯-N-(2-甲氧基-苯基)-N-甲基-3-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼烷-2-基)-苯甲酰胺

向二噁烷(150mL)中的3-溴-4-氯-N-(2-甲氧基-苯基)-N-甲基-苯甲 酰胺(9.7g，27.4mmol)中添加双(频哪醇合)二硼(10.4g，41.1mol)、乙 酸钾(8.05g，82.2mmol)和Pd(dppf)₂Cl₂.CH₂Cl₂(1.1g，1.35mmol)。将 混合物以N₂鼓泡10分钟然后在N₂下于80℃加热24小时。将混合物冷却 至室温，通过硅胶衬垫过滤，然后浓缩。通过硅胶柱层析用含20％至 30％乙酸乙酯的己烷洗脱纯化所得油状物以得到4-氯-N-(2-甲氧基-苯 基)-N-甲基-3-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼烷-2-基)-苯甲酰胺(10.7g)。 NMR(CDCl₃)，δ，7.66(1H，d，J＝2.4Hz)，7.32-7.23(1H，m)，7.17-7.07 (2H，m)，7.02-6.95(1H，m)，6.82-6.74(2H，m)，3.74(3H，s)，3.33(3H，s)， 1.30(12H，s)。

步骤2E：4-氯-3-(6-氯-吡啶-3-基)-N-(2-甲氧基-苯基)-N-甲基-苯甲酰胺2-1

将含有4-氯-N-(2-甲氧基-苯基)-N-甲基-3-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2] 二氧硼烷-2-基)-苯甲酰胺(60mg，0.15mmol)、5-溴-2-氯-吡啶(29mg， 0.15mmol)、Pd(PPh₃)₄(12mg，0.01mmol)、Na₂CO₃(2N，0.15mL， 0.3mmol)的甲苯(1.5mL)与水(0.5mL)的混合物以N₂鼓泡5分钟，然后 在100℃下加热12小时。将混合物过滤并通过制备LCMS纯化以得到4- 氯-3-(6-氯-吡啶-3-基)-N-(2-甲氧基-苯基)-N-甲基-苯甲酰胺2-1(22.6 mg)。MS：386.7(M+H)⁺；t_R＝7.77min。(方法2)

步骤2E.1：4-氯-3-(6-氯-吡啶-3-基)-N-(2-甲氧基-苯基)-N-甲基-苯甲酰胺(替代合成法)

在100℃下将4-氯-N-(2-甲氧基-苯基)-N-甲基-3-(4，4，5，5-四甲基 -[1，3，2]二氧硼烷-2-基)-苯甲酰胺(60mg，0.15mmol)、5-溴-2-氯-吡啶 (29mg，0.15mmol)、Pd(PPh₃)₄(12mg，0.01mmol)、K₂CO₃(41mg， 0.3mmol)于二噁烷(1mL)中的混合物加热12小时。将混合物过滤并通 过制备LCMS纯化以得到4-氯-3-(6-氯-吡啶-3-基)-N-(2-甲氧基-苯 基)-N-甲基-苯甲酰胺2-1。

根据上述程序制备以下化合物。

  实施例   A   MS(M+H)⁺  t_R(min)   HPLC方法   2-1   6-甲基-吡啶-3-基   366.8   4.45   2   2-2   6-氰基-吡啶-3-基   377.7   7.32   2   2-3   4，6-二氯-吡啶-3-基   422.9   8.32   2   2-4   2-氯-6-甲基-吡啶-3-基   400.7   7.47   2

  2-5   2，6-二甲基-吡啶-3-基   380.8   4.30   2   2-6   2，6-二氯-吡啶-3-基   420.7   8.43   2   2-7   6-甲氧基-4-甲基-吡啶-3-基   397.0   7.38   2   2-8   4-氯-6-甲基-吡啶-3-基   401.0   6.31   2   2-9   4，6-二甲基-吡啶-3-基   380.8   4.23   2   2-10   6-氰基-4-甲基-吡啶-3-基   392.0   7.38   2   2-11   6-三氟甲基-吡啶-3-基   420.7   9.63   3   2-12   4-甲基-6-三氟甲基-吡啶-3-基   434.9   9.81   3   2-13   6-氯-4-甲基-吡啶-3-基   410.5   8.32   2   2-14   4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基   446.0   8.26   2

相似地，使用3-溴-4-氟-苯甲酸作为起始物质，制备3-(4-氰基-6- 三氟甲基-吡啶-3-基)-4-氟-N-(2-甲氧基-苯基)-N-甲基苯甲酰胺2-82。 MS：430.0(M+H)⁺；t_R＝5.73min。(方法2)

实施例3

(2-{[4-氯-3-(6-氯-4-甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰基]-甲基-氨基}-苯氧基)- 乙酸甲酯

步骤3A：3-溴-4-氯-N-(2-甲氧基-苯基)-N-甲基-苯甲酰胺(替代合成法)

向经冰浴冷却的于DCM(70mL)中的3-溴-4-氯-苯甲酰氯(步骤 2A，14.4mmol)中缓慢添加于DCM(10mL)中的甲氧基-N-甲基苯胺(2 g，14.6mmol)，然后缓慢添加二异丙基乙胺(3.4mL，18.95mmol)。添 加完成后，移除冰浴并将混合物在室温下搅拌48小时。用1N HCl、饱 和NaHCO₃和盐水洗涤混合物，用Na₂SO₄干燥，过滤并在真空中浓缩 以得到呈固体状的3-溴-4-氯-N-(2-甲氧基-苯基)-N-甲基-苯甲酰胺(5.1 g，96％)。MS[M+H]⁺：355.7；t_R＝2.89min。(方法1)

相似地，由2-甲氧基-6-甲基-苯胺(4.2g，30.3mmol)制备9.2g (88％)3-溴-4-氯-N-(2-甲氧基-6-甲基-苯基)-苯甲酰胺。MS[M+H]⁺： 355.9；t_R＝2.80min。(方法1)

相似地，由3-氟-2-甲氧基-苯胺(1g，7.08mmol)制备2.35g(93％)3- 溴-4-氯-N-(3-氟-2-甲氧基-苯基)-苯甲酰胺，不同之处在于使用硅胶柱 层析(洗脱剂：EtOAc/己烷＝1/4)纯化。MS[M+H]⁺：359.9；t_R＝2.56min。 (方法1)

步骤3A.1：3-溴-4-氯-N-(2-甲氧基-6-甲基-苯基)-N-甲基-苯甲酰胺

该步骤仅在步骤3A中使用的苯胺未经N-甲基化的情况下使用。

使用步骤2C的程序由3-溴-4-氯-N-(2-甲氧基-6-甲基-苯基)-苯甲酰 胺(4g，11.3mmol)制备3-溴-4-氯-N-(2-甲氧基-6-甲基-苯基)-N-甲基- 苯甲酰胺(4.2g)。MS[M+H]⁺：369.9；t_R＝2.89min。(方法1)

相似地，由3-溴-4-氯-N-(3-氟-2-甲氧基-苯基)-苯甲酰胺(2.3g，6.4 mmol)制备2.3g(98％)3-溴-4-氯-N-(3-氟-2-甲氧基-苯基)-N-甲基-苯甲 酰胺。使用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：EtOAc/己烷＝1/4梯度至2/3)。MS [M+H]⁺：373.9；t_R＝2.44min。(方法1)

步骤3B：3-溴-4-氯-N-(2-羟基-苯基)-N-甲基-苯甲酰胺

在20分钟时间内向3-溴-4-氯-N-(2-甲氧基-苯基)-N-甲基-苯甲酰胺 (2g，5.64mmol)于DCM(20mL)中的冷却溶液(-70℃)中逐滴添加BBr₃(1.7mL，18mmol)。使反应温度经12小时增加至室温，直至反应完成。 在真空中浓缩后，将混合物于DCM与水之间分层。添加1N NaOH以将 pH值增加至约5。将有机层分离并用盐水洗涤，用Na₂SO₄干燥。浓缩 并通过硅胶柱层析用己烷/乙酸乙酯(4/1梯度至3/2)洗脱纯化得到3-溴 -4-氯-N-(2-羟基-苯基)-N-甲基-苯甲酰胺(1.78g，93％)。MS[M+H]⁺： 341.9；t_R＝2.56min。(方法1)

相似地，由3-溴-4-氯-N-(2-甲氧基-6-甲基-苯基)-N-甲基-苯甲酰胺 (2g，5.4mmol)制备1.9g(100％)3-溴-4-氯-N-(2-羟基-6-甲基-苯基)-N- 甲基-苯甲酰胺。MS[M+H]⁺：355.9；t_R＝2.60min。(方法1)

相似地，由3-溴-4-氯-N-(3-氟-2-甲氧基-苯基)-N-甲基-苯甲酰胺 (1.9g，5.1mmol)制备1.65g(90％)3-溴-4-氯-N-(3-氟-2-羟基-苯基)-N- 甲基-苯甲酰胺。MS[M+H]⁺：359.9；t_R＝2.22min。(方法1)

步骤3C：{2-[(3-溴-4-氯-苯甲酰基)-甲基-氨基]-苯氧基}乙酸甲酯

在80℃下在DMF(8mL)中将3-溴-4-氯-N-(2-羟基-苯基)-N-甲基- 苯甲酰胺(442mg，1.3mmol)、溴乙酸甲酯(0.247mL，2.6mmol)和 K₂CO₃(717mg，5.2mmol)的混合物加热5小时。冷却至室温后，将混 合物于乙酸乙酯与水之间分层。将有机层分离并用盐水洗涤，用Na₂SO₄干燥，然后通过硅胶柱层析用乙酸乙酯/己烷(1/4)洗脱纯化以得到 {2-[(3-溴-4-氯-苯甲酰基)-甲基-氨基]-苯氧基}-乙酸甲酯(495mg)。MS [M+H]⁺：413.9；t_R＝2.75min。(方法1)

相似地制备产率为72％的4-{2-[(3-溴-4-氯-苯甲酰基)-甲基-氨基]- 苯氧基}-丁酸甲酯(0.41g)。MS[M+H]⁺：441.9；t_R＝2.87min。(方法1)

相似地制备产率为99％的5-{2-[(3-溴-4-氯-苯甲酰基)-甲基-氨基]- 苯氧基}-戊酸甲酯(0.53g)。MS[M+H]⁺：456.0；t_R＝2.94min。(方法1)

相似地制备产率为85％的4-{2-[(3-溴-4-氯-苯甲酰基)-甲基-氨 基]-3-甲基-苯氧基}-丁酸甲酯(0.54g)。MS[M+H]⁺：456.0；t_R＝2.94min。 (方法1)

相似地制备产率为93％的4-{2-[(3-溴-4-氯-苯甲酰基)-甲基-氨 基]-6-氟-苯氧基}-丁酸甲酯(0.93g)。MS[M+H]⁺：460.0；t_R＝2.45min。 (方法1)

相似地制备产率为79％的4-{2-[(3-溴-4-氯-苯甲酰基)-甲基-氨 基]-3-甲基-苯氧基}-丁酸叔丁酯(0.78g)。MS[M+H]⁺：498.1；t_R＝2.75 min。(方法1)

步骤3D：(2-{[4-氯-3-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼烷-2-基)-苯甲酰基]-甲基-氨基)-苯氧基)-乙酸甲酯

通过将N₂鼓泡使{2-[(3-溴-4-氯-苯甲酰基)-甲基-氨基]-苯氧基}-乙 酸甲酯(495mg，1.2mmol)、双(频哪醇合)二硼(457mg，1.8mmol)、 Pd(dppf)₂Cl₂(70mg，2.4mmol)、乙酸钾(352mg，3.6mmol)于二噁烷 (10mL)中的混合物脱气5分钟，然后在密封条件下加热至95℃，持续 14小时。冷却至室温后，将混合物用乙酸乙酯稀释，用水和盐水洗涤 并用Na₂SO₄干燥。浓缩并通过硅胶柱层析用乙酸乙酯/己烷(3/7)洗脱纯 化得到(2-{[4-氯-3-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼烷-2-基)-苯甲酰基]-甲 基-氨基}-苯氧基)-乙酸甲酯(0.61g，100％产率)。MS[M+H]⁺：460.1； t_R＝2.56min。(方法1)

相似地，由相应芳基溴制备以下化合物：

4-(2-{[4-氯-3-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼烷-2-基)-苯甲酰基]-甲 基-氨基}-苯氧基)-丁酸甲酯(0.47g，100％产率)MS[M+H]⁺：488； t_R＝2.99min。(方法1)

4-(2-{[4-氯-3-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼烷-2-基)-苯甲酰基]-甲 基-氨基}-3-甲基-苯氧基)-丁酸甲酯(0.6g，100％产率)MS[M+H]⁺： 502.0；t_R＝2.74min。(方法1)

4-(2-{[4-氯-3-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼烷-2-基)-苯甲酰基]-甲 基-氨基}-6-氟-苯氧基)-丁酸甲酯(0.6g，100％产率)MS[M+H]⁺：506.2； t_R＝2.59min。(方法1)

4-(2-{[4-氯-3-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼烷-2-基)-苯甲酰基]-甲 基-氨基}-3-甲基-苯氧基)-丁酸叔丁酯(0.39g，91％产率)MS[M+H]⁺： 544.2；t_R＝2.81min。(方法1)

步骤3D.1：4-(2-{[4-氯-3-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼烷-2-基)-苯甲酰基]-甲基-氨基}-3-甲基-苯氧基)-丁酸叔丁酯的替代合成

在剧烈搅拌下将2-氨基-间-甲酚(4.9g，40mmol)溶于含有NaHCO₃(6.7g，80mmol)的乙腈(90mL)与水(80mL)的混合物中。分批添加3- 溴-4-氯-苯甲酰氯(10.1g，40mmol，步骤2A)并在室温下将混合物搅拌 3小时。将所得沉淀物过滤、用水和叔丁基甲基醚洗涤，然后干燥以得 到3-溴-4-氯-N-(2-羟基-6-甲基-苯基)-苯甲酰胺(11.3g)。MS(M+H)⁺： 339.7/341.7；t_R＝2.36min。(方法1)

在60℃下将3-溴-4-氯-N-(2-羟基-6-甲基-苯基)-苯甲酰胺(11.3g， 33.2mmol)、4-溴丁酸叔丁酯(8.2g，36.6mmol)和K₂CO₃(9.2g，66.5 mmol)的混合物于DMF(100mL)中加热14小时。然后将混合物浓缩以 移除DMF并在乙酸乙酯与水之间分层。将有机层分离并用水和盐水洗 涤，用MgSO₄干燥，然后通过硅胶柱层析用乙酸乙酯/己烷(1/4)洗脱纯 化以得到红色固体，将该固体用乙醚进一步洗涤以产生呈白色粉末状 的4-[2-(3-溴-4-氯-苯甲酰基氨基)-3-甲基-苯氧基]-丁酸叔丁酯(10.2g)。 MS[M-(t-Bu)+H]⁺：425.8/427.8；t_R＝2.79min。(方法1)

在搅拌下，于0℃在N₂下向4-[2-(3-溴-4-氯-苯甲酰基氨基)-3-甲基- 苯氧基]-丁酸叔丁酯(10.2g，21.3mmol)的无水DMF(100mL)溶液中分 批添加NaH(60％于矿物油中，1.7g，42.6mmol)。10分钟后，添加碘 甲烷(2.0mL，32.1mmol)。通过移除冰浴使混合物升温至室温并持续 搅拌1小时。然后添加水(10mL)，并用乙酸乙酯萃取有机物，然后用 水和盐水洗涤并用MgSO₄干燥。浓缩后，通过硅胶层析用乙酸乙酯/ 己烷(1/4)洗脱纯化粗产物以得到4-{2-[(3-溴-4-氯-苯甲酰基)-甲基-氨 基]-3-甲基-苯氧基}-丁酸叔丁酯(9.5g)。

通过将N₂鼓泡使4-{2-[(3-溴-4-氯-苯甲酰基)-甲基-氨基]-3-甲基- 苯氧基}-丁酸叔丁酯(6.1g，12.3mmol)、双(频哪醇合)二硼(4.7g，18.5 mmol)、Pd(dppf)₂Cl₂(0.73g，1.0mmol)和乙酸钾(3.6g，36.9mmol)于 二噁烷(80mL)中的混合物脱气5分钟，然后在密封条件下加热至95℃， 持续14小时。冷却至室温后，使混合物通过硅藻土衬垫。用乙酸乙酯 进一步洗涤硅藻土。将合并的溶液用水和盐水洗涤，并用MgSO₄干燥。 浓缩并通过硅胶柱层析用乙酸乙酯/己烷(1/4)洗脱纯化得到呈淡黄色 油状的4-(2-{[4-氯-3-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼烷-2-基)-苯甲酰基]- 甲基-氨基}-3-甲基-苯氧基)-丁酸叔丁酯(6.5g)。

相似地制备4-(2-{[4-氯-3-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼烷-2-基)- 苯甲酰基]-甲基-氨基-苯氧基)-丁酸叔丁酯。MS[M+H-异丁烯]⁺：474.2； t_R＝2.72min。(方法1)

步骤3E：(2-{[4-氯-3-(6-氯-4-甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰基]-甲基-氨基}-苯氧基)乙酸甲酯

在95℃下将(2-{[4-氯-3-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼烷-2-基)-苯 甲酰基]-甲基-氨基}-苯氧基)-乙酸甲酯(45mg，0.11mmol)、5-溴-2-氯 -4-甲基-吡啶(25mg，0.12mmol)、Pd(PPh₃)₄(6.5mg，0.0056mmol)和 K₂CO₃(38mg，0.28mmol)于二噁烷(600μL)中的混合物加热12小时。 过滤后，通过制备LCMS纯化混合物以得到(2-{[4-氯-3-(6-氯-4-甲基- 吡啶-3-基)-苯甲酰基]-甲基-氨基}-苯氧基)-乙酸甲酯3-1。MS[M+H]⁺： 459.0；t_R＝7.70min。(方法2)

根据上述程序制备以下化合物。

实施例4

(2-{[4-氯-3-(6-氯-4-甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰基]-甲基-氨基}-苯氧基)-

乙酸

步骤4A：(2-{[4-氯-3-(6-氯-4-甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰基]-甲基-氨基}-苯氧基)乙酸

将(2-{[4-氯-3-(6-氯-4-甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰基]-甲基-氨基}-苯 氧基)-乙酸甲酯(10mg，0.02mmol)溶于THF(300μL)中并添加1M LiOH(100μL)。在室温下搅拌混合物直至LCMS指示起始物质完全消 耗。将混合物用EtOAc稀释并用1N HCl酸化。将有机层浓缩、溶于 MeOH中并通过制备LCMS纯化以得到(2-{[4-氯-3-(6-氯-4-甲基-吡啶 -3-基)-苯甲酰基]-甲基-氨基}-苯氧基)-乙酸4-1。MS[M+H]⁺：445.0； t_R＝6.75min。(方法2)

根据上述程序制备以下化合物。在分子被氰基取代的情况下，应 注意在90分钟内分3批添加氢氧化锂。通常在于200μL THF中的0.04 mmol的起始酯下，以每30分钟20μL，分3批添加1N LiOH溶液(60μL)。 使反应进行4小时。

实施例5

4-(2-{[4-氯-3-(6-氰基-4-甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰基]-甲基-氨基}-苯氧 基)-丁酸

步骤5A：4-(2-{[4-氯-3-(6-氰基-4-甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰基]-甲基-氨基}-苯氧基)-丁酸

在DCM(400μL)与TFA(400μL)的混合物中将4-(2-{[4-氯-3-(6-氰 基-4-甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰基]-甲基-氨基}-苯氧基)-丁酸叔丁酯(60 mg，0.12mmol)搅拌1小时。将混合物浓缩、溶于MeOH中并通过制备 LCMS纯化以得到4-(2-{[4-氯-3-(6-氰基-4-甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰基]- 甲基-氨基}-苯氧基)-丁酸5-1。MS[M+H]⁺：463.7；t_R＝3.46min。(方法 2)

根据上述程序制备以下化合物。

实施例6

N-(2-氨基甲酰基甲氧基-苯基)-4-氯-3-(6-氯-4-甲基-吡啶-3-基)-N-甲基 -苯甲酰胺

步骤6A：N-(2-氨基甲酰基甲氧基-苯基)-4-氯-3-(6-氯-4-甲基-吡啶-3-基)-N-甲基-苯甲酰胺

将(2-{[4-氯-3-(6-氯-4-甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰基]-甲基-氨基}-苯 氧基)-乙酸甲酯(28mg，0.06mmol)溶于MeOH(1mL)中的7N氨中，并 在室温下搅拌直至起始物质被消耗。将混合物浓缩并溶于MeOH中， 过滤并用甲醇洗涤以得到N-(2-氨基甲酰基甲氧基-苯基)-4-氯-3-(6-氯 -4-甲基-吡啶-3-基)-N-甲基-苯甲酰胺6-1。MS[M+H]⁺：444.0；t_R＝6.25 min。(方法2)

相似地，制备N-[2-(3-氨基甲酰基-丙氧基)-苯基]-4-氯-3-(6-氯-4- 甲基-吡啶-3-基)-N-甲基-苯甲酰胺6-2，MS[M+H]⁺：472.0；t_R＝6.51min (方法2)；和

N-[2-(4-氨基甲酰基-丁氧基)-苯基]-4-氯-3-(6-氯-4-甲基-吡啶-3- 基)-N-甲基-苯甲酰胺6-3，MS[M+H]⁺：485.9；t_R＝6.87min。(方法2)

实施例7

4-氯-3-(4，6-二氯-吡啶-3-基)-N-[2-(2-二甲基氨基-乙氧基)-苯基]-N-甲 基-苯甲酰胺

步骤7A：3-溴-4-氯-N-[2-(2-二甲基氨基-乙氧基)-苯基]-N-甲基-苯甲酰胺

在80℃下在DMF(7mL)中将3-溴-4-氯-N-(2-羟基-苯基)-N-甲基- 苯甲酰胺(404mg，1.18mmol，步骤3B)、β-二甲基氨基溴氢溴酸盐(553 mg，2.38mmol)和K₂CO₃(655mg，4.75mmol)的混合物加热14小时。 然后用乙酸乙酯和水稀释混合物。将有机层分离并用水和盐水洗涤， 用Na₂SO₄干燥，然后通过硅胶柱层析用DCM/MeOH(95/5，梯度至9/1) 洗脱纯化以得到3-溴-4-氯-N-[2-(2-二甲基氨基-乙氧基)-苯基]-N-甲基- 苯甲酰胺(97mg)。MS[M+H]⁺：412.7；t_R＝2.24min。(方法1)

步骤7B：4-氯-3-(4，6-二氯-吡啶-3-基)-N-[2-(2-二甲基氨基-乙氧基)-苯基]-N-甲基苯甲酰胺

通过将N₂鼓泡使含有3-溴-4-氯-N-[2-(2-二甲基氨基-乙氧基)-苯 基]-N-甲基-苯甲酰胺(44.0mg，0.11mmol)、Pd₂(dba)₃(10mg，0.01 mmol)、P(t-Bu)₃HBF₄(7mg，0.022mmol)、KF(22mg，0.38mmol)和 2，4-二氯吡啶-5-硼酸(21mg，0.11mmol)的二噁烷(1.0mL)的混合物脱 气5分钟，然后密封并在110℃下加热过夜。将混合物过滤并通过制备 LCMS纯化以得到4-氯-3-(4，6-二氯-吡啶-3-基)-N-[2-(2-二甲基氨基-乙 氧基)-苯基]-N-甲基苯甲酰胺7-1。MS[M+H]⁺：478.0；t_R＝5.26min。(方 法2)

实施例8

4-氯-3-(6-氰基-4-甲基-吡啶-3-基)-N-(2-羟基-苯基)-N-甲基-苯甲酰胺

步骤8A：4-氯-N-(2-羟基-苯基)-N-甲基-3-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼烷-2-基)-苯甲酰胺

通过将N₂鼓泡使3-溴-4-氯-N-(2-羟基-苯基)-N-甲基-苯甲酰胺(485 mg，1.42mmol，步骤3B)、双(频哪醇合)二硼(0.543g，2.1mmol)、 Pd(dppf)₂Cl₂(83mg，0.11mmol)和乙酸钾(419mg，4.3mmol)于二噁烷 (10mL)中的混合物脱气5分钟，然后在密封条件下加热至95℃，持续 14小时。冷却至室温后，将混合物用乙酸乙酯稀释，并用水和盐水洗 涤，然后用Na₂SO₄干燥。浓缩然后通过硅胶柱层析用乙酸乙酯/己烷(1/4 至2/3)洗脱纯化得到4-氯-N-(2-羟基-苯基)-N-甲基-3-(4，4，5，5-四甲基 -[1，3，2]二氧硼烷-2-基)-苯甲酰胺(540mg)。MS[M+H]⁺：388.1；t_R＝2.74 min。(方法1)

步骤8B：4-氯-3-(6-氰基-4-甲基-吡啶-3-基)-N-(2-羟基-苯基)-N-甲基-苯甲酰胺

在95℃下将4-氯-N-(2-羟基-苯基)-N-甲基-3-(4，4，5，5-四甲基 -[1，3，2]二氧硼烷-2-基)-苯甲酰胺(100mg，0.26mmol)、5-溴-4-甲基- 吡啶-2-腈(61mg，0.31mmol)、Pd(PPh₃)₄(15mg，0.013mmol)、K₂CO₃(90mg，0.65mmol)于二噁烷(1.2mL)中的混合物加热12小时。将混合 物用EtOAc稀释，用水和盐水洗涤，干燥(Na₂SO₄)并在真空中浓缩。硅 胶柱层析(洗脱剂：乙酸乙酯/己烷(1/4至4/1))得到4-氯-3-(6-氰基-4-甲 基-吡啶-3-基)-N-(2-羟基-苯基)-N-甲基-苯甲酰胺8-1(68mg)。

根据上述程序制备以下化合物。

实施例9

4-氯-3-(6-氰基-4-甲基-吡啶-3-基)-N-[2-(3-羟基-丙氧基)-苯基]-N-甲基- 苯甲酰胺

步骤9A：4-氯-3-(6-氰基-4-甲基-吡啶-3-基)-N-[2-(3-羟基-丙氧基)-苯基]-N-甲基-苯甲酰胺

在室温下将4-氯-3-(6-氰基-4-甲基-吡啶-3-基)-N-(2-羟基-苯基)-N- 甲基-苯甲酰胺8-1(50mg，0.13mmol)、4-溴丙醇(18μL，0.2mmol)和 K₂CO₃(55mg，0.40mmol)于DMF(0.4mL)中的混合物搅拌14小时。添 加乙酸乙酯并用水洗涤合并的有机层，用Na₂SO₄干燥，然后通过硅胶 柱层析用乙酸乙酯/己烷(2/3)至100％EtOAc洗脱纯化以得到4-氯-3-(6- 氰基-4-甲基-吡啶-3-基)-N-[2-(3-羟基-丙氧基)-苯基]-N-甲基-苯甲酰胺 (30mg)。实施例1。MS[M+H]⁺：436.1；t_R＝2.19min。(方法1)

根据上述程序制备以下化合物。

实施例10

4-氯-3-(2-氰基-4-三氟甲基-苯基)-N-[2-(3-羟基-丙氧基)-6-甲基-苯 基]-N-甲基-苯甲酰胺

步骤10A：3-溴-4-氯-N-[2-(3-羟基-丙氧基)-6-甲基-苯基]-N-甲基-苯甲酰胺

将3-溴-1-丙醇(2.48mL，27.3mmol)添加至3-溴-4-氯-N-(2-羟基-6- 甲基-苯基)-N-甲基-苯甲酰胺(6.47g，18.3mmol，步骤3B)的DMF(80 mL)溶液中。向其中添加K₂CO₃(3.3g，24mmol)并在室温下将混合物 搅拌约16小时。此时，用1N盐酸中和反应物并用乙酸乙酯萃取混合物。 首先用水然后用盐水溶液洗涤有机层。蒸发有机滤液，并使用柱层析 用含50％乙酸乙酯至60％乙酸乙酯的己烷的梯度纯化残余物，得到3- 溴-4-氯-N-[2-(3-羟基-丙氧基)-6-甲基-苯基]-N-甲基-苯甲酰胺(5.7g， 76％)。MS[M+H]⁺：413.9；t_R＝2.29min。(方法1)

相似地，由相应3-溴-4-氯-N-(2-羟基-苯基)-N-甲基-苯甲酰胺制备 3-溴-4-氯-N-[2-(3-羟基-丙氧基)-苯基]-N-甲基-苯甲酰胺(步骤3B)。MS [M+H]⁺：399.6；t_R＝2.21min。(方法1)

步骤10B：4-氯-N-[2-(3-羟基-丙氧基)-6-甲基-苯基]-N-甲基-3-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼烷-2-基)-苯甲酰胺

以氮气流将溶剂脱气后，在95℃下将3-溴-4-氯-N-[2-(3-羟基-丙氧 基)-6-甲基-苯基]-N-甲基-苯甲酰胺(5.5g，13.4mmol)、双(频哪醇合) 二硼(5.1g，20.0mmol)、PdCl₂(dpPf)₂(781.7mg，1.1mmol)和KOAc (3.92g，40.1mmol)于二噁烷(70mL)中的混合物加热约16小时。使混 合物冷却至室温然后经硅藻土衬垫过滤。用EtOAc进一步洗涤衬垫。 用水和盐水洗涤合并的有机物，并用MgSO₄干燥。在真空中浓缩由此 得到的滤液，并通过硅胶柱层析(洗脱剂：含20％乙酸乙酯的己烷)纯化 残余物以得到4-氯-N-[2-(3-羟基-丙氧基)-6-甲基-苯基]-N-甲基 -3-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼烷-2-基)-苯甲酰胺(5.5g)。MS[M+H]⁺： 460.1；t_R＝2.47min。(方法1)

相似地制备4-氯-N-[2-(3-羟基-丙氧基)-苯基]-N-甲基-3-(4，4，5，5-四 甲基-[1，3，2]二氧硼烷-2-基)-苯甲酰胺。MS[M+H]⁺：446.0；t_R＝2.42min。 (方法1)

步骤10C：4-氯-3-(2-氰基-4-三氟甲基-苯基)-N-[2-(3-羟基-丙氧基)-6-甲基-苯基]-N-甲基-苯甲酰胺

用氮气流将溶剂脱气后，在95℃下将4-氯-N-[2-(3-羟基-丙氧基)-6- 甲基-苯基]-N-甲基-3-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼烷-2-基)-苯甲酰胺 (206mg，0.45mmol)、2-溴-5-(三氟甲基)-苄腈(75mg，0.3mmol)、 Pd(PPh₃)₄(34.7mg，0.03mmol)、Na₂CO₃(190.8mg，1.8mmol)于二噁 烷/水(9/1，1.5mL)中的混合物加热约16小时。使反应物冷却至室温。 将混合物用水稀释并用乙酸乙酯萃取。将有机层进一步用盐水洗涤并 用MgSO₄干燥。蒸发滤液并通过制备TLC[洗脱剂：含40％丙酮的己烷] 纯化残余物以得到4-氯-3-(2-氰基-4-三氟甲基-苯基)-N-[2-(3-羟基-丙 氧基)-6-甲基-苯基]-N-甲基-苯甲酰胺10-1(120mg)。MS[M+H]⁺： 502.9；t_R＝8.15min。(方法2)

相似地制备4-氯-3-(3-氰基-喹啉-2-基)-N-[2-(3-羟基-丙氧基)-苯 基]-N-甲基-苯甲酰胺10-2。MS[M+H]⁺：471.9；t_R＝6.89min。(方法2)

实施例11

3-(2-{[4-氯-3-(6-氰基-4-甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰基]-甲基-氨基}-苯氧 基)-丙酸

步骤11A：3-(2-{[4-氯-3-(6-氰基-4-甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰基]-甲基-氨基}-苯氧基)-丙酸

向4-氯-3-(6-氰基-4-甲基-吡啶-3-基)-N-[2-(3-羟基-丙氧基)-苯 基]-N-甲基-苯甲酰胺9-1(30mg，0.07mmol)于乙腈(0.25mL)和二氯甲 烷(0.25mL)中的混合物中添加过碘酸钠(40mg，0.19mmol)的水(0.4 mL)溶液，然后添加氯化钌(III)(2mg，0.0096mmol)。将混合物搅拌 15分钟，用MeOH稀释，搅拌15min并过滤。通过制备LCMS纯化滤液 以得到3-(2-{[4-氯-3-(6-氰基-4-甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰基]-甲基-氨 基}-苯氧基)-丙酸11-1。MS[M+H]⁺：449.8；t_R＝6.76min。(方法2)

根据上述程序制备以下化合物。

实施例12

5-(2-{[4-氯-3-(6-氯-4-甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰基]-甲基-氨基}-苯氧基)- 戊酸甲酯

步骤12A：4-氯-3-(6-氯-4-甲基-吡啶-3-基)-N-(2-羟基-苯基)-N-甲基-苯甲酰胺

在100℃下将4-氯-N-(2-羟基-苯基)-N-甲基-3-(4，4，5，5-四甲基 -[1，3，2]二氧硼烷-2-基)-苯甲酰胺(100mg，0.26mmol，步骤8A)、5-溴 -2-氯-4-甲基-吡啶(200mg，0.52mmol)、Pd(PPh₃)₄(30mg，0.026mmol)、 K₂CO₃(180mg，1.3mmol)于二噁烷(2.5mL)中的混合物加热12小时。 将该混合物在真空中在硅胶存在下干燥，并直接进行硅胶层析(洗脱 剂：乙酸乙酯/己烷(1/4至2/3))以得到4-氯-3-(6-氯-4-甲基-吡啶-3- 基)-N-(2-羟基-苯基)-N-甲基-苯甲酰胺(120mg)。MS[M+H]⁺：387.0； t_R＝2.27min。(方法1)

步骤12B：5-(2-{[4-氯-3-(6-氯-4-甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰基]-甲基-氨基}-苯氧基)-戊酸甲酯

在室温下将4-氯-3-(6-氯-4-甲基-吡啶-3-基)-N-(2-羟基-苯基)-N-甲 基-苯甲酰胺(108mg，0.28mmol)、戊酸溴甲酯(60μl，0.42mmol)和 K₂CO₃(116mg，0.84mmol)于DMF(1mL)中的混合物搅拌14小时。添 加乙酸乙酯并用水洗涤合并的有机层，用MgSO₄干燥，然后通过硅胶 柱层析用乙酸乙酯/己烷(1/4至1/3)洗脱纯化以得到5-(2-{[4-氯-3-(6-氯 -4-甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰基]-甲基-氨基}-苯氧基)-戊酸甲酯12-1(50 mg)。MS[M+H]⁺：501；t_R＝8.52min。(方法1)

实施例13

4-(2-{[4-氯-3-(6-氯-4-甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰基]-甲基-氨基}-苯基)-丁 酸甲酯

步骤13A：1，3，4，5-四氢苯并[b]氮杂卓-2-酮

向α-四氢萘酮(10g，68.5mmol)的无水MeOH(175mL)溶液中添加 盐酸羟胺(7.6g，109.6mmol)和三乙胺(15.3mL，109.6mmol)。在室温 下将混合物搅拌16小时，然后在真空中移除溶剂。将残余物溶于DCM 中，用水和盐水洗涤，干燥(Na₂SO₄)，过滤并在真空中浓缩以得到粗 3，4-二氢-2H-萘-1-酮肟(12g)。MS[M+H]⁺：162.1；t_R＝2.03min。(方法1)

向3，4-二氢-2H-萘-1-酮肟(5g，31mmol)中添加PPA(50g)，并在 120℃下将混合物加热4.5小时。将混合物趁热在冰与水的浆料中猝灭 并剧烈搅拌直至沉淀形成。将沉淀过滤并用水冲洗以得到1，3，4，5-四氢 苯并[b]氮杂卓-2-酮(3.1g)。MS[M+H]⁺：162.0；t_R＝1.76min。(方法1)

步骤13B：4-(2-氨基-苯基)-丁酸甲酯

向MeOH(8mL)中的1，3，4，5-四氢-苯并[b]氮杂卓-2-酮(1g，6.2 mmol)中添加浓硫酸(0.5mL)，并将混合物在室温下搅拌2小时并在 70℃下再搅拌1小时。移除溶剂并添加DCM和水。移除有机层，用饱 和NaHCO₃碱化水层并用EtOAc萃取(三次)。将合并的有机层以盐水洗 涤，干燥(Na₂SO₄)并在真空中浓缩以得到4-(2-氨基-苯基)-丁酸甲酯 (0.93g)。MS[M+H]⁺：194.1；t_R＝1.49min。(方法1)

步骤13C：4-[2-(3-溴-4-氯-苯甲酰基氨基)-苯基]-丁酸甲酯

向经冰浴冷却的于DCM(30mL)中的3-溴-4-氯-苯甲酰氯(1.09g， 4.3mmol)中缓慢添加4-(2-氨基-苯基)-丁酸甲酯(0.85g，4.4mmol)，然 后缓慢添加二异丙基乙胺(1mL，5.6mmol)。添加完成后，移除冰浴 并将混合物在室温下搅拌12小时。将混合物用DCM进一步稀释，用饱 和NaHCO₃、1N HCl、盐水洗涤并用Na₂SO₄干燥，浓缩以得到4-[2-(3- 溴-4-氯-苯甲酰基氨基)-苯基]-丁酸甲酯(1.8g)。MS[M+H]⁺：411.7； t_R＝2.45min。(方法1)

步骤13D：4-{2-[(3-溴-4-氯-苯甲酰基)-甲基-氨基]-苯基}-丁酸甲酯

在0-5℃下向DMF(10mL)中的4-[2-(3-溴-4-氯-苯甲酰基氨基)-苯 基]-丁酸甲酯(1.04g，2.54mmol)中分两批添加NaH(152mg，3.81 mmol，60％于矿物油中)。将混合物在0℃下搅拌15min并在室温下搅 拌15min。添加碘甲烷(316μl，5.08mmol)后，将混合物在室温下搅拌 12小时并在乙酸乙酯与柠檬酸之间分层。然后用盐水洗涤所分离的有 机层并用Na₂SO₄干燥。浓缩并通过硅胶柱层析用己烷/乙酸乙酯(4/1) 至己烷/乙酸乙酯(3/2)洗脱纯化得到4-{2-[(3-溴-4-氯-苯甲酰基)-甲基- 氨基]-苯基}-丁酸甲酯(1.0g)。MS[M+H]⁺：426.0；t_R＝2.46min。(方法 1)

步骤13E：4-(2-{[4-氯-3-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼烷-2-基)-苯甲酰基]-甲基-氨基}-苯基)-丁酸甲酯

通过将N₂鼓泡使4-{2-[(3-溴-4-氯-苯甲酰基)-甲基-氨基]-苯基}-丁 酸甲酯(500mg，1.18mmol)、双(频哪醇合)二硼(448mg，1.76mmol)、 Pd(dppf)₂Cl₂(69mg，0.094mmol)和乙酸钾(347mg，3.54mmol)于二噁 烷(10mL)中的混合物脱气5分钟，然后在密封条件下加热至95℃，持 续14小时。冷却至室温后，用乙酸乙酯稀释混合物，并用水和盐水洗 涤，然后用Na₂SO₄干燥。浓缩并通过硅胶柱层析用乙酸乙酯/己烷(1/4 至2/3)洗脱纯化得到呈油状的4-(2-{[4-氯-3-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧 硼烷-2-基)-苯甲酰基]-甲基-氨基}-苯基)-丁酸甲酯(601mg)。MS [M+H]⁺：472.2；t_R＝2.57min。(方法1)

步骤13F：4-(2-{[4-氯-3-(6-氯-4-甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰基]-甲基-氨基}-苯基)-丁酸甲酯

在100℃下将4-(2-{[4-氯-3-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼烷-2-基)- 苯甲酰基]-甲基-氨基}-苯基)-丁酸甲酯(50mg，0.11mmol)、5-溴-2-氯- 吡啶(26mg，0.13mmol)、Pd(PPh₃)₄(6mg，0.005mmol)、K₂CO₃(36mg， 0.18mmol)于二噁烷(0.6mL)中的混合物加热12小时。过滤后通过制备 LCMS纯化混合物以得到4-(2-{[4-氯-3-(6-氯-4-甲基-吡啶-3-基)-苯甲 酰基]-甲基-氨基}-苯基)-丁酸甲酯13-1。MS[M+H]⁺：470.9；t_R＝8.41 min。(方法2)

根据上述程序制备以下化合物。

  实施   例   A   MS(M+H)⁺  t_R(min)   HPLC方法   13-1   6-氯-4-甲基-吡啶-3-基   470.9   8.41   2   13-2   6-氰基-4-甲基-吡啶-3-基   461.9   7.95   2   13-3   4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基   516.2   8.86   2   13-4   4-甲基-6-三氟甲基-吡啶-3-基   504.9   8.92   2

实施例14

4-(2-{[4-氯-3-(6-氯-4-甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰基]-甲基-氨基}-苯基)-丁 酸

步骤14A：4-(2-{[4-氯-3-(6-氯-4-甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰基]-甲基-氨基}-苯基)-丁酸

将4-(2-{[4-氯-3-(6-氯-4-甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰基]-甲基-氨基}- 苯基)-丁酸甲酯13-1(9mg，0.019mmol)溶于THF(0.2mL)中并添加1 M LiOH(0.15mL)。1小时后，额外添加1N LiOH(0.15mL)并在室温 下搅拌混合物直至LCMS指示起始物质完全消耗。用1N HCl将混合物 酸化直至pH值约为5，添加MeOH并通过制备LCMS纯化以得到 4-(2-{[4-氯-3-(6-氯-4-甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰基]-甲基-氨基}-苯基)-丁 酸14-1。MS[M+H]⁺：456.9；t_R＝7.33min。(方法2)

根据上述程序制备以下化合物。

  实施例   A   MS(M+H)⁺  t_R(min)   HPLC方法   14-1   6-氯-4-甲基-吡啶-3-基   456.9   7.33   2   14-2   4-甲基-6-三氟甲基-吡啶-3-基   491.1   7.82   2   14-3   6-氰基-4-甲基-吡啶-3-基   448.2   6.97   2   14-4   4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基   502.1   7.77   2

实施例15

4-(2-{[4-氯-3-(3-氰基-喹啉-2-基)-苯甲酰基]-甲基-氨基}-苯基)-丁酸

步骤15A：4-{2-[(3-溴-4-氯-苯甲酰基)-甲基-氨基]-苯基}-丁酸

向4-{2-[(3-溴-4-氯-苯甲酰基)-甲基-氨基]-苯基}-丁酸甲酯(1.11g， 2.6mmol，步骤13D)的THF(8mL)溶液中添加2N LiOH(6.5mL)，并 在室温下将混合物搅拌2小时。将1N HCl添加至反应混合物中以得到 约2的pH值，然后用EtOAc萃取(两次)。用水和盐水洗涤合并的有机层， 干燥(Na₂SO₄)并在真空中浓缩以得到1.1g呈白色固体状的4-{2-[(3-溴 -4-氯-苯甲酰基)-甲基-氨基]-苯基}-丁酸。MS[M+H]⁺：411.7；t_R＝2.57 min。(方法1)

步骤15B：4-{2-[(3-溴-4-氯-苯甲酰基)-甲基-氨基]-苯基}-丁酸叔丁酯

向4-{2-[(3-溴-4-氯-苯甲酰基)-甲基-氨基]-苯基}-丁酸(1.07g，2.60 mmol)的无水DCM(10mL)的冷却溶液(0℃)中逐滴添加乙二酰氯(0.34 mL，3.90mmol)。在室温下将混合物搅拌4小时，在真空中浓缩并再溶 于无水二氯甲烷(5mL)中。添加叔丁醇(960mg，13mmol)的无水DCM (5mL)溶液并在室温下将混合物搅拌过夜。用DCM稀释后，用饱和 NaHCO₃和盐水洗涤混合物，用Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。通过硅胶 柱层析(EtOAc/己烷：1/4梯度至EtOAc/己烷1/3)纯化得到1.1g呈无色油 状的4-{2-[(3-溴-4-氯-苯甲酰基)-甲基-氨基]-苯基}-丁酸叔丁酯。MS [M+H]⁺(片段)：411.7(f；t_R＝3.10min。(方法1)

步骤15C：4-(2-{[4-氯-3-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼烷-2-基)-苯甲酰基]-甲基-氨基}-苯基)-丁酸叔丁酯

通过将N₂鼓泡使4-{2-[(3-溴-4-氯-苯甲酰基)-甲基-氨基]-苯基}-丁 酸叔丁酯(1.0g，2.14mmol)、双(频哪醇合)二硼(816mg，3.21mmol)、 Pd(dppf)₂Cl₂(125mg，0.1117mmol)和乙酸钾(629mg，6.42mmol)于二 噁烷(20mL)中的混合物脱气5分钟，然后在密封条件下加热至95℃， 持续14小时。冷却至室温后，用乙酸乙酯稀释混合物，用水和盐水洗 涤并用Na₂SO₄干燥。然后，将滤液浓缩并通过硅胶柱层析用乙酸乙酯/ 己烷(1/4)洗脱纯化以得到4-(2-{[4-氯-3-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼 烷-2-基)-苯甲酰基]-甲基-氨基}-苯基)-丁酸叔丁酯(1.1g)。MS[M+H]⁺： 514.0；t_R＝3.24min。(方法1)

步骤15D：4-(2-{[4-氯-3-(3-氰基-喹啉-2-基)-苯甲酰基]-甲基-氨基}-苯基)-丁酸叔丁酯

将含有4-(2-{[4-氯-3-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼烷-2-基)-苯甲 酰基]-甲基-氨基}-苯基)-丁酸叔丁酯(70mg，0.14mmol)、2-氯-3-甲基 喹啉(24mg，0.125mmol)、Pd₂(dba)₃(11mg，0.012mmol)、P(t-Bu)₃HBF₄(7mg，0.024mmol)和KOH(28mg，0.5mmol)的THF(0.5mL)与水 (0.133mL)的混合物用N₂鼓泡5分钟，然后在70℃下加热6小时。用 EtOAc稀释混合物，用水和盐水洗涤，干燥(Na₂SO₄)，过滤并在真空中 浓缩。通过硅胶柱层析(洗脱剂EtOAc/己烷：1/4，梯度至EtOAc/己烷： 1/1)纯化得到20mg 4-(2-{[4-氯-3-(3-氰基-喹啉-2-基)-苯甲酰基]-甲基- 氨基}-苯基)-丁酸叔丁酯。MS：539.9(M+H)⁺；t_R＝2.99min。(方法1)

步骤15E：4-(2-{[4-氯-3-(3-氰基-喹啉-2-基)-苯甲酰基]-甲基-氨基}-苯基)-丁酸

在DCM(0.2mL)与TFA(0.2mL)的混合物中将4-(2-{[4-氯-3-(3-氰 基-喹啉-2-基)-苯甲酰基]-甲基-氨基}-苯基)-丁酸叔丁酯(20mg，0.037 mmol)搅拌1小时。将混合物浓缩、溶于MeOH中并通过制备LCMS纯 化以得到4-(2-{[4-氯-3-(3-氰基-喹啉-2-基)-苯甲酰基]-甲基-氨基}-苯 基)-丁酸15-1。MS[M+H]⁺：483.9；t_R＝7.05min。(方法2)

实施例16

3-(2-{[4-氯-3-(6-氰基-4-甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰基]-甲基-氨基}-6-甲 基-苯氧基)-丙酸乙酯

步骤16A：3-(2-{[4-氯-3-(6-氰基-4-甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰基]-甲基-氨基}-6-甲基-苯氧基)-丙酸乙酯

向3-(2-{[4-氯-3-(6-氰基-4-甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰基]-甲基-氨 基}-6-甲基-苯氧基)-丙酸(160mg，0.35mmol)的DCM(15mL)溶液中添 加乙二酰氯(45.2μL，0.52mmol)和1滴DMF。添加乙醇(5mL)前，将 溶液搅拌30分钟。将溶液进一步搅拌30分钟，此时，蒸发溶剂并通过 制备TLC[洗脱剂：含50％乙酸乙酯的己烷]纯化残余物以得到3-(2-{[4- 氯-3-(6-氰基-4-甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰基]-甲基-氨基}-6-甲基-苯氧 基)-丙酸乙酯16-1(125mg)。MS[M+H]⁺：492.4；t_R＝5.45min。(方法4)

相似地制备3-(2-{[4-氯-3-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰 基]-甲基-氨基}-苯氧基)-丙酸乙酯16-2。MS[M+H]⁺：532.2；t_R＝30.78 min。(方法5)

实施例17

[[4-氯-3-(3，5-二氯-吡啶-2-基)-苯甲酰基]-(2-甲氧基-苯基)-氨基]-乙酸 甲酯

步骤17A：4-氯-N-(2-甲氧基-苯基)-3-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼烷-2-基)-苯甲酰胺

通过用N₂鼓泡使3-溴-4-氯-N-(2-甲氧基-苯基)-苯甲酰胺(2g，5.85 mmol，步骤2B)、双(频哪醇合)二硼(2.23g，8.78mmol)、Pd(dppf)₂Cl₂(342mg，0.47mmol)和乙酸钾(1.72g，17.6mmol)于二噁烷(40mL)中 的混合物脱气5分钟，然后在密封条件下加热至95℃，持续14小时。冷 却至室温后，用乙酸乙酯稀释混合物，用水和盐水洗涤，并用Na₂SO₄干燥。浓缩并通过硅胶柱层析用乙酸乙酯/己烷(2/3)洗脱纯化得到4-氯 -N-(2-甲氧基-苯基)-3-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼烷-2-基)-苯甲酰胺 (2.3g)。MS[M+H]⁺：387.8；t_R＝3.15min。(方法1)

步骤17B：4-氯-3-(3，5-二氯-吡啶-2-基)-N-(2-甲氧基-苯基)-苯甲酰胺

将2N Na₂CO₃(5.85mL)和Pd(PPh₃)₄(340mg，0.29mmol)的溶液添 加至4-氯-N-(2-甲氧基-苯基)-3-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼烷-2-基)- 苯甲酰胺(2.2g，5.85mmol)与2-溴-3，5-二氯-吡啶(1.47g，6.44mmol) 于甲苯(30mL)和EtOH(6mL)中的脱气混合物中。将混合物在100℃下 加热12小时。冷却至室温后，用乙酸乙酯稀释混合物，用水和盐水洗 涤，并用Na₂SO₄干燥。过滤并浓缩后，将混合物溶于EtOAc中，过滤， 用EtOAc(三次)、MeOH和乙醚洗涤以得到1.6g 4-氯-3-(3，5-二氯-吡啶 -2-基)-N-(2-甲氧基-苯基)-苯甲酰胺。MS[M+H]⁺：406.9；t_R＝3.03min。 (方法1)

步骤17C：[[4-氯-3-(3，5-二氯-吡啶-2-基)-苯甲酰基]-(2-甲氧基-苯基)-氨基]-乙酸甲酯

在0-5℃下，向DMF(0.6mL)中的4-氯-3-(3，5-二氯-吡啶-2- 基)-N-(2-甲氧基-苯基)-苯甲酰胺(40mg，0.1mmol)中添加NaH(8mg， 0.2mmol，60％于矿物油中)并在室温下将混合物搅拌25min。添加乙 酸溴甲酯(21μL，0.2mmol)后，在室温下将混合物搅拌12小时。添加 MeOH(0.3mL)后，过滤并在制备HPLC上纯化以得到[[4-氯-3-(3，5-二 氯-吡啶-2-基)-苯甲酰基]-(2-甲氧基-苯基)-氨基]-乙酸甲酯17-1。

根据上述程序制备以下化合物。

  实施例   R₂  MS(M+H)⁺  t_R(min)   方法2   17-1   乙酸甲酯   478.6   9.92   17-2   乙基   434.7   8.73   17-3   4-丁酸甲酯   506.7   8.68

实施例18

4-氯-N-环丙基-3-(3，5-二氯-吡啶-2-基)-N-(2-甲氧基-苯基)-苯甲酰胺

步骤18A：3-溴-4-氯-苯甲酸甲酯

向3-溴-4-氯-苯甲酸(10g，42.6mmol)于MeOH(100mL)中的经冰 浴冷却的悬浮液中逐滴添加乙酰氯(30.4mL，0.43mol)。然后将混合 物在室温下搅拌12小时并浓缩以得到呈黄色固体状的3-溴-4-氯-苯甲 酸甲酯(10.6g)。NMR(CDCl₃)，δ，8.28(1H，s)，7.91(1H，brs)，7.52(1H， brs)，3.92(3H，s)。

步骤18B：4-氯-3-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼烷-2-基)-苯甲酸甲酯

将3-溴-4-氯-苯甲酸甲酯(3.13g，12.6mmol)、双(频哪醇合)二硼 (4.79g，18.8mmol)、PdCl₂(dppf)₂(0.74g，1.0mmol)、KOAc(3.69g， 37.7mmol)于DMF(50mL)中的混合物密封并在95℃下加热12小时。使 混合物在乙酸乙酯与水之间分层。分离有机层，用水、盐水洗涤，用 MgSO₄干燥。过滤并浓缩后，通过硅胶层析用乙酸乙酯/己烷(1/9)洗脱 纯化得到4-氯-3-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼烷-2-基)-苯甲酸甲酯(3.5 g)。NMR(DMSO-d₆)，δ，8.19(1H，d，J＝2.1Hz)，7.99(1H，dd，J＝2.1，8.4 Hz)，7.58(1H，d，J＝8.4Hz)，3.85(3H，s)，1.31(12H，s)。

步骤18C：4-氯-3-(3，5-二氯-吡啶-2-基)-苯甲酸甲酯

将2-溴-3，5-二氯吡啶(2.72g，12mmol)、4-氯-3-(4，4，5，5-四甲基 -[1，3，2]二氧硼烷-2-基)-苯甲酸甲酯(1.78g，6mmol)、2N Na₂CO₃(9.0 mL，18mmol)、Pd(PPh₃)₄(0.35g，0.3mmol)于甲苯/乙醇(30mL/6mL) 中的混合物密封并在90℃下加热12小时。将混合物浓缩并在乙酸乙酯 与水之间分层。用水和盐水洗涤乙酸乙酯层并用MgSO₄干燥。过滤并 浓缩后，通过硅胶层析用乙酸乙酯/己烷(5/95)洗脱纯化得到4-氯 -3-(3，5-二氯-吡啶-2-基)-苯甲酸甲酯(1.8g)。MS(M+H)⁺：315.6， t_R＝8.505min。(方法2)

步骤18D：4-氯-3-(3，5-二氯-吡啶-2-基)-苯甲酸

在室温下将含有4-氯-3-(3，5-二氯-吡啶-2-基)-苯甲酸甲酯(1.7g， 5.4mmol)和LiOH.H₂O(0.68g，16.1mmol)的THF(15mL)与水(1mL) 的混合物搅拌12小时。将混合物酸化并用乙酸乙酯萃取。用盐水和水 洗涤有机层并干燥。过滤并浓缩得到呈白色固体状的4-氯-3-(3，5-二氯- 吡啶-2-基)-苯甲酸(1.4g)。MS(M+H)⁺：301.6，t_R＝7.048min。(方法2)

步骤18E：环丙基-(2-甲氧基-苯基)-胺

在室温下向2-甲氧基苯胺(3g，24.3mmol)、HOAc(100mL)和 MeOH(50mL)的混合物中逐滴添加[(1-乙氧基环-丙基)氧基]-三甲基 硅烷(5.6mL，28.0mmol)。使混合物在65℃下回流3小时然后在真空中 浓缩。

将NaBH₄(1.84g，48.6mmol)于无水THF(25mL)中的混合物冷却 至5℃并在N₂气氛下逐滴添加BF₃.Et₂O(6.1mL，50mmol)。将混合物 在5℃下搅拌1小时，然后在5-10℃下在20min的时间段内逐滴添加溶 于THF(12mL)中的来自先前步骤的粗油状物。将混合物在室温下搅拌 过夜，并回流2小时，用水(100mL)猝灭并用乙醚萃取(三次)。用水洗 涤合并的有机层，干燥(Na₂SO₄)、过滤并浓缩以得到4.1g呈油状的环 丙基-(2-甲氧基-苯基)-胺，该物质未经进一步纯化即使用。MS[M+H]⁺： 164.0；t_R＝2.46min。(方法1)

步骤18F：4-氯-N-环丙基-3-(3，5-二氯-吡啶-2-基)-N-(2-甲氧基-苯基)-苯甲酰胺

向无水DCM(0.6mL)中的4-氯-3-(3，5-二氯-吡啶-2-基)-苯甲酸(60 mg，0.2mmol)中添加DMF(1滴)，然后缓慢添加乙二酰氯(30μL，0.34 mmol)。将混合物搅拌2.5小时，然后浓缩以得到相应4-氯-3-(3，5-二氯- 吡啶-2-基)-苯甲酰氯，将其溶于DCM(1mL)中。缓慢添加环丙基-(2- 甲氧基-苯基)-胺(55mg，0.34mmol)，然后缓慢添加二异丙基乙胺(71 μL，0.4mmol)。将混合物在室温下搅拌12小时，浓缩并通过制备LCMS 纯化以得到4-氯-N-环丙基-3-(3，5-二氯-吡啶-2-基)-N-(2-甲氧基-苯基)- 苯甲酰胺18-1。MS(M+H)⁺：446.9，t_R＝8.59min。(方法2)

实施例19

4-氯-3-(3，5-二氯-吡啶-2-基)-N-(2-羟基-苯基)-N-甲基-苯甲酰胺

步骤19A：4-氯-3-(3，5-二氯-吡啶-2-基)-N-(2-羟基-苯基)-N-甲基-苯甲酰胺

向无水DCM(1mL)中的4-氯-3-(3，5-二氯-吡啶-2-基)-苯甲酸(100 mg，0.33mmol)中添加DMF(1滴)，然后缓慢添加乙二酰氯(35μL，0.40 mmol)。将混合物搅拌2.5小时，然后浓缩以得到4-氯-3-(3，5-二氯-吡啶 -2-基)-苯甲酰氯，将其溶于DCM(1mL)中。添加2-甲基氨基-酚(45mg， 0.36mmol)，然后缓慢添加二异丙基乙胺(88μL，0.5mmol)。将混合 物在室温下搅拌12小时，浓缩并通过制备TLC(DCM/MeOH＝9/1)然后 通过制备LCMS纯化以得到4-氯-3-(3，5-二氯-吡啶-2-基)-N-(2-羟基-苯 基)-N-甲基-苯甲酰胺19-1。MS(M+H)⁺：409.0，t_R＝7.55min。(方法2) 根据上述程序制备以下化合物。

实施例20

4-[5-氯-4-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-2-(甲基-邻-甲苯基-氨基甲酰 基)-苯氧基]-丁酸

步骤20A：4-氯-2-氟-3-硝基-苯甲酰氯

向悬浮于无水DCM(60mL)中的4-氯-2-氟-3-硝基-苯甲酸(5.0g， 22.8mmol)中添加DMF(0.5mL)，然后缓慢添加乙二酰氯(2.4mL，27.3 mmol，2M于DCM中)。将混合物搅拌2小时，然后浓缩以得到呈黄色 固体状的4-氯-2-氟-3-硝基-苯甲酰氯。

步骤20B：4-氯-2-氟-N-甲基-5-硝基-N-邻-甲苯基-苯甲酰胺

向经冰浴冷却的DCM(60mL)中的4-氯-2-氟-3-硝基-苯甲酰氯中 缓慢添加三乙胺(6.3mol，45.5mmol)，然后逐滴添加N-甲基-邻-甲苯 胺(3.8mL，27.3mmol)。移除冰浴并将混合物搅拌12小时，然后在DCM 与水之间分层。然后用1N HCl、饱和NaHCO₃和盐水洗涤有机层并用 MgSO₄干燥。浓缩得到呈黄色固体状的4-氯-2-氟-N-甲基-5-硝基-N-邻- 甲苯基-苯甲酰胺(6.6g)。MS：322.8(M+H)⁺；t_R＝2.42min。(方法1)

步骤20C：5-氨基-4-氯-2-氟-N-甲基-N-邻-甲苯基-苯甲酰胺

在含有Na₂S₂O₄(17.6g，101.2mmol)的水(30mL)与THF(30mL) 的混合物中将4-氯-2-氟-N-甲基-5-硝基-N-邻-甲苯基-苯甲酰胺(6.6g， 20.3mmol)剧烈搅拌12小时。然后分离有机层并用乙酸乙酯进一步萃 取水层。用盐水洗涤合并的有机溶液并用MgSO₄干燥。浓缩得到呈粗 固体状的5-氨基-4-氯-2-氟-N-甲基-N-邻-甲苯基-苯甲酰胺，将其用乙 醚洗涤以得到淡黄色产物(3.3g)。MS：292.9(M+H)⁺；t_R＝1.90min。(方 法1)

步骤20D：5-溴-4-氯-2-氟-N-甲基-N-邻-甲苯基-苯甲酰胺

在搅拌下向在65℃下加热的含有CuBr₂(3.2g，14.3mmol)和亚硝 酸正丁酯(1.7mL，14.3mmol)的乙腈(45.0mL)的溶液中逐滴添加乙腈 (10.0mL)中的5-氨基-4-氯-2-氟-N-甲基-N-邻-甲苯基-苯甲酰胺(3.2g， 11.0mmol)。2小时后，将混合物冷却至室温并在乙酸乙酯与水之间分 层。分离有机层，用1N HCl、饱和NaHCO₃和盐水洗涤，用MgSO₄干 燥并过滤。浓缩得到油状物，将该油状物通过硅胶柱层析用乙酸乙酯∶ 己烷(1/5)洗脱纯化以得到呈淡黄色油状的5-溴-4-氯-2-氟-N-甲基-N-邻 -甲苯基-苯甲酰胺(3.1g)。MS：355.8(M+H)⁺；t_R＝2.61min。(方法1)

步骤20E：5-溴-4-氯-2-甲氢基-N-甲基-N-邻-甲苯基-苯甲酰胺

在MeONa/MeOH(20mL，25％)中在55℃下将5-溴-4-氯-2-氟-N- 甲基-N-邻-甲苯基-苯甲酰胺(2.5g，7.0mmol)的混合物加热12小时， 然后浓缩并在DCM与水之间分层。然后分离有机层，用3N HCl、饱 和NaHCO₃和盐水洗涤，用MgSO₄干燥并浓缩。通过硅胶柱层析用乙酸 乙酯∶己烷(1/4)洗脱纯化得到5-溴-4-氯-2-甲氧基-N-甲基-N-邻-甲苯基 -苯甲酰胺(2.75g)。MS：367.8(M+H)⁺；t_R＝2.51min。(方法1)

步骤20F：5-溴-4-氯-2-羟基-N-甲基-N-邻-甲苯基-苯甲酰胺

在-78℃下向含有5-溴-4-氯-2-甲氧基-N-甲基-N-邻-甲苯基-苯甲酰 胺(2.75g，7.5mmol)的DCM(15.0mL)的溶液中逐滴添加BBr₃(38.0 mL，1M于DCM中)。使混合物逐渐升温至室温并搅拌12小时。浓缩混 合物以得到固体，将该固体用乙醚洗涤以得到5-溴-4-氯-2-羟基-N-甲基 -N-邻-甲苯基-苯甲酰胺(2.6g)。MS：353.8(M+H)⁺；t_R＝2.50min。(方法 1)

步骤20G：4-[4-溴-5-氯-2-(甲基-邻-甲苯基-氨基甲酰基)-苯氧基]-丁酸叔丁酯

向无水DMF(30mL)中的5-溴-4-氯-2-羟基-N-甲基-N-邻-甲苯基- 苯甲酰胺(2.6g，7.3mmol)中添加K₂CO₃(2.0g，7.6mmol)，然后添加 4-溴丁酸叔丁酯(2.0g，8.8mmol)。将混合物在60℃下加热12小时并在 乙酸乙酯与水之间分层。分离有机层，用水和盐水洗涤，并用MgSO₄干燥。过滤后，浓缩并通过硅胶柱层析用乙酸乙酯∶己烷(3/7)洗脱纯 化得到4-[4-溴-5-氯-2-(甲基-邻-甲苯基-氨基甲酰基)-苯氧基]-丁酸叔 丁酯(3.0g)。MS：496.3(M+H)⁺；t_R＝2.81min。(方法1)

步骤20H：4-[5-氯-2-(甲基-邻-甲苯基-氨基甲酰基)-4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼烷-2-基)-苯氧基]-丁酸叔丁酯

用N₂脱气5min后，将4-[4-溴-5-氯-2-(甲基-邻-甲苯基-氨基甲酰 基)-苯氧基]-丁酸叔丁酯(3.0g，6.1mmol)、双(频哪醇合)二硼(2.3g， 9.1mmol)、PdCl₂(dppf)₂(354.0mg，0.48mmol)和乙酸钾(1.78g，18.2 mmol)于二噁烷(30mL)中的混合物密封，并在95℃下加热12小时。将 混合物通过硅藻土过滤以移除固体。通过乙酸乙酯将硅藻土洗涤数次。 用水和盐水洗涤合并的溶液，用MgSO₄干燥并过滤。浓缩并通过硅胶 柱层析用乙酸乙酯∶己烷(1/5)洗脱纯化得到4-[5-氯-2-(甲基-邻-甲苯基 -氨基甲酰基)-4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼烷-2-基)-苯氧基]-丁酸叔 丁酯(3.0g)。MS：544.0(M+H)⁺；t_R＝2.90min。(方法1)

步骤20I：4-[5-氯-4-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-2-(甲基-邻-甲苯基-氨基甲酰基)-苯氧基]-丁酸叔丁酯

将二噁烷(9mL)和水(1mL)中的4-[5-氯-2-(甲基-邻-甲苯基-氨基 甲酰基)-4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼烷-2-基)-苯氧基]-丁酸叔丁酯 (444.0mg，0.8mmol)、5-溴-2-三氟甲基-异烟腈(171.0mg，0.7mmol)、 Pd(Ph₃P)₄(78.6mg，0.07mmol)、Na₂CO₃(432.0mg，4.1mmol)用N₂脱 气5min，密封并在100℃下加热12小时。然后，将混合物在乙酸乙酯 与水之间分层。用水和盐水洗涤有机层，用MgSO₄干燥并过滤。浓缩 并通过TLC板用乙酸乙酯∶己烷(2/3)洗脱纯化并再次用TLC板用乙腈/ 二氯甲烷(1/9)洗脱纯化得到4-[5-氯-4-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3- 基)-2-(甲基-邻-甲苯基-氨基甲酰基)-苯氧基]-丁酸叔丁酯(410mg)。 MS：588.7(M+H)⁺；t_R＝11.05min。(方法3)

步骤20J：4-[5-氯-4-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-2-(甲基-邻-甲苯基-氨基甲酰基)-苯氧基]-丁酸

在三氟乙酸与DCM的混合物(1/1，3mL)中将4-[5-氯-4-(4-氰基-6- 三氟甲基-吡啶-3-基)-2-(甲基-邻-甲苯基-氨基甲酰基)-苯氧基]-丁酸叔 丁酯(410mg，0.7mmol)搅拌2小时。浓缩然后通过HPLC纯化得到4-[5- 氯-4-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-2-(甲基-邻-甲苯基-氨基甲酰基)- 苯氧基]-丁酸20-1(62mg)。MS：532.6(M+H)⁺；t_R＝5.29min(方法3)。 NMR(CDCl₃，报导为顺-反酰胺旋转异构体的主要异构体)，δ，8.54(1H， s)，7.94(1H，s)，7.34-7.25(1H，m)，7.18-7.14(2H，m)，7.14-7.04(1H，m)， 7.02(1H，s)，6.92(1H，s)，4.08(2H，t，J＝6.3Hz)，3.40(3H，s)，2.62(2H，t， J＝6.3Hz)，2.30-2.18(2H，m)，2.57(3H，s)。

类似于实施例20-1相似地制备以下化合物：

  实施   例   A   烃基   MS(M+H)⁺  t_R(min)   HPLC方法   20-1   4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-   基   -(CH₂)₃-   532.6   5.29   3   20-2   4，6-二氯-吡啶-3-基   -(CH₂)₃-   506.8   4.95   2   20-3   3-氰基-喹啉-2-基   -(CH₂)₃-   513.9   4.60   2

实施例21-1

4-氯-5-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-2-(4-羟基-丁氧基)-N-(2-甲氧基 -6-甲基-苯基)-N-甲基-苯甲酰胺

步骤21A：5-氨基-4-氯-2-氟-苯甲酸甲酯

将SOCl₂(10.0mL，137.0mmol)缓慢添加至4-氯-2-氟-3-硝基-苯甲 酸(25.0g，114.2mmol)于MeOH(200mL)中的冰浴冷却混合物中。将 混合物在70℃下加热16小时，然后浓缩以得到4-氯-2-氟-5-硝基-苯甲 酸甲酯(24.9g，0.11mmol)，将其再悬浮于THF(200mL)与水(200mL) 的混合物中。在剧烈搅拌下添加Na₂S₂O₄(139.4g，0.80mol)。搅拌2 小时后，用乙酸乙酯萃取混合物，用水洗涤有机层并用Na₂SO₄干燥。 将滤液浓缩以得到5-氨基-4-氯-2-氟-苯甲酸甲酯(15.1g)。MS：203.9 (M+H)⁺；t_R＝1.67min。(方法1)

步骤21B：5-溴-4-氯-2-氟-苯甲酸甲酯

将亚硝酸异戊酯(12.7mL，94.8mmol)添加至乙腈(280mL)中的5- 氨基-4-氯-2-氟-苯甲酸甲酯(14.8g，72.9mmol)中，然后添加CuBr₂(21.1 g，94.8mmol)。然后将混合物在搅拌下于65℃加热2小时，然后在乙 酸乙酯与水之间分层。然后用饱和NaHCO₃和盐水洗涤有机层，并用 Na₂SO₄干燥。将滤液浓缩并通过硅胶层析用乙酸乙酯/己烷(1/1)洗脱纯 化以得到5-溴-4-氯-2-氟-苯甲酸甲酯(14.0g)。MS：268.0(M⁺)自GC-MS； t_R＝2.53min。(方法1)

步骤21C：5-溴-4-氯-2-氟-苯甲酸

在THF(250ml)与1N NaOH(200ml)的混合物中将5-溴-4-氯-2-氟 -苯甲酸甲酯(14.0g，52.4mmol)剧烈搅拌16小时。将混合物用6N HCl 酸化至pH 3，部分浓缩以移除THF然后用乙酸乙酯萃取。用水和盐水 洗涤有机相并用Na₂SO₄干燥。将滤液浓缩以得到5-溴-4-氯-2-氟-苯甲 酸(13.3g)。

步骤21D：5-溴-4-氯-2-氟-苯甲酰氯

使用步骤2A的程序将5-溴-4-氯-2-氟-苯甲酸(13.3g，52.6mmol) 转化成5-溴-4-氯-2-氟-苯甲酰氯(14.0g)。

步骤21E：5-溴-4-氯-2-氟-N-(2-甲氧基-6-甲基-苯基)-苯甲酰胺

使用步骤2B的程序，自相应5-溴-4-氯-2-氟-苯甲酰氯(7.0g，25.8 mmol)获得呈白色固体状的5-溴-4-氯-2-氟-N-(2-甲氧基-6-甲基-苯基)- 苯甲酰胺(9.1g)。MS：373.8(M+H)⁺，t_R＝2.54min。(方法1)

步骤21F：5-溴-4-氯-2-氟-N-(2-甲氧基-6-甲基-苯基)-N-甲基-苯甲酰胺

使用步骤2C的程序，自相应5-溴-4-氯-2-氟-N-(2-甲氧基-6-甲基- 苯基)-苯甲酰胺(9.1g，24.5mmol)获得5-溴-4-氯-2-氟-N-(2-甲氧基-6- 甲基-苯基)-N-甲基-苯甲酰胺(9.0g)。MS：387.8(M+H)⁺，t_R＝2.60min。 (方法1)

步骤21G：5-溴-4-氯-2-(4-羟基-丁氧基)-N-(2-甲氧基-6-甲基-苯基)-N-甲基-苯甲酰胺

将NaH(373mg，9.3mmol，60％于矿物油中)添加至无水DMF(50 mL)中的1，4-丁二醇(3.5g，38.9mmol)中。将混合物在室温下搅拌15 分钟。缓慢添加DMF(25mL)中的5-溴-4-氯-2-氟-N-(2-甲氧基-6-甲基- 苯基)-苯甲酰胺(3.0g，7.8mmol)。然后，将混合物在50℃下加热2小 时，冷却至室温并在DCM与水之间分层。分离有机层，用1H HCl、 饱和NaHCO₃和盐水洗涤，然后用Na₂SO₄干燥。浓缩滤液，并使用柱 层析用含50％乙酸乙酯至100％乙酸乙酯的己烷的梯度纯化残余物，以 得到5-溴-4-氯-2-(4-羟基-丁氧基)-N-(2-甲氧基-6-甲基-苯基)-N-甲基- 苯甲酰胺(2.3g)。MS：457.9(M+H)⁺，t_R＝2.38min。(方法1)

步骤21H：4-氯-2-(4-羟基-丁氧基)-N-(2-甲氧基-6-甲基-苯基)-N-甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼烷-2-基)-苯甲酰胺

使用步骤2D的程序由相应5-溴-4-氯-2-(4-羟基-丁氧基)-N-(2-甲氧 基-6-甲基-苯基)-N-甲基-苯甲酰胺(2.3g，5.0mmol)获得4-氯-2-(4-羟基 -丁氧基)-N-(2-甲氧基-6-甲基-苯基)-N-甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2] 二氧硼烷-2-基)-苯甲酰胺(2.0g)。MS：504.1(M+H)⁺，t_R＝2.54min。(方 法1)

步骤21I：4-氯-5-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-2-(4-羟基-丁氧基)-N-(2-甲氧基-6-甲基-苯基)-N-甲基-苯甲酰胺

使用步骤2E1的铃木程序由4-氯-2-(4-羟基-丁氧基)-N-(2-甲氧基 -6-甲基-苯基)-N-甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼烷-2-基)-苯甲酰 胺获得4-氯-5-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-2-(4-羟基-丁氧基)-N-(2- 甲氧基-6-甲基-苯基)-N-甲基-苯甲酰胺21-1。MS：548.0(M+H)⁺， t_R＝2.46min。(方法1)

根据上述程序制备以下实施例。

  实施   例   A   R₃  烃基   MS   (M+H)⁺  t_R(min)   HPLC   方法   21-1   4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-   基   甲氧基   -(CH₂)₄-   548.0   5.95   4   21-2   6-氰基-4-甲基-吡啶-3-基   甲氧基   -(CH₂)₄-   493.9   7.08   2   21-3   3-氰基-喹啉-2-基   甲氧基   -(CH₂)₄-   529.9   7.33   2   21-4   4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-   基   甲基   -(CH₂)₄-   532.2   5.78   4   21-5   6-氰基-4-甲基-吡啶-3-基   甲基   -(CH₂)₄-   478.2   5.38   4   21-6   3-氰基-喹啉-2-基   甲基   -(CH₂)₄-   514.2   5.54   4   21-7   4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-   基   甲氧基   -(CH₂)₂-   520.1   4.11   4   21-8   4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-   基   甲氧基   -(CH₂)₃-   534.1   7.62   2

实施例22

4-{5-氯-4-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-2-[(2-甲氧基-6-甲基-苯基)- 甲基-氨基甲酰基]-苯氧基}-丁酸

步骤22A：4-{5-氯-4-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-2-[(2-甲氧基-6-甲基-苯基)甲基-氨基甲酰基]-苯氧基}-丁酸

根据步骤11A中提供的程序由4-氯-5-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3- 基)-2-(4-羟基-丁氧基)-N-(2-甲氧基-6-甲基-苯基)-N-甲基-苯甲酰胺 22-1(40.0mg，0.07mmol)的氧化作用获得4-{5-氯-4-(4-氰基-6-三氟甲 基-吡啶-3-基)-2-[(2-甲氧基-6-甲基-苯基)甲基-氨基甲酰基]-苯氧基}- 丁酸(12.6mg)。MS：561.9(M+H)⁺，t_R＝7.84min。(方法2)

根据上述程序制备以下实施例。

  实施   例   A   R₃  烃基   MS   (M+H)⁺  t_R(min)   HPLC   方法   22-1   4-氰基-6-三氟甲基-吡   啶-3-基   甲氧基   -(CH₂)₃-   561.9   7.84   2   22-2   6-氰基-4-甲基-吡啶-3-   基   甲氧基   -(CH₂)₃-   507.9   7.17   2   22-3   3-氰基-喹啉-2-基   甲氧基   -(CH₂)₃-   543.9   7.41   2   22-4   4-氰基-6-三氟甲基-吡   啶-3-基   甲基   -(CH₂)₃-   546.1   4.73   4   22-5   6-氰基-4-甲基-吡啶-3-   基   甲基   -(CH₂)₃-   492.2   3.93   4   22-6   3-氰基-喹啉-2-基   甲基   -(CH₂)₃-   528.2   4.42   4   22-7   4-氰基-6-三氟甲基-吡   啶-3-基   甲基   -(CH₂)₃-   546.1   4.73   4   22-8   6-氰基-4-甲基-吡啶-3-   甲基   -(CH₂)₃-   492.2   3.93   4

  实施   例   A   R₃  烃基   MS   (M+H)⁺ t_R(min)   HPLC   方法   基   22-9   4-氰基-6-三氟甲基-吡   啶-3-基   甲氧基   -CH₂-   533.9   4.95   4   22-10   4-氰基-6-三氟甲基-吡   啶-3-基   甲氧基   -(CH₂)₂-   548.1   2.66   2

实施例23

2-(3-氨基-丙氧基)-4-氯-5-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-N-(2-甲氧基 -6-甲基-苯基)-N-甲基-苯甲酰胺

步骤23A：2-(3-氨基-丙氧基)-4-氯-5-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-N-(2-甲氧基-6-甲基-苯基)-N-甲基-苯甲酰胺

将三乙胺(22μL，0.157mmol)和二磷酰基叠氮化物(33.9μL，0.157 mmol)添加至二噁烷(2mL)中的4-{5-氯-4-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3- 基)-2-[(2-甲氧基-6-甲基-苯基)甲基-氨基甲酰基]-苯氧基}-丁酸22-1 (80mg，0.157mmol)。将混合物在100℃下加热16小时，然后冷却至 室温并与6N HCl(1mL)一起搅拌1小时。分离DCM层、浓缩，并将残 余物溶于MeOH中并通过HPLC-MS纯化以得到呈TFA盐形式的2-(3-氨 基-丙氧基)-4-氯-5-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-N-(2-甲氧基-6-甲基 -苯基)-N-甲基-苯甲酰胺23-1(40mg)。MS：533.0(M+H)⁺，t_R＝5.38min。 (方法4)

实施例24

5-{2-氯-5-[(2-甲氧基-苯基)-甲基-氨基甲酰基]-苯基}-吡啶-2-甲酰胺

步骤24A：5-{2-氯-5-[(2-甲氧基-苯基)-甲基-氨基甲酰基]-苯基}-吡啶-2-甲酰胺

向4-氯-3-(6-氰基-吡啶-3-基)-N-(2-甲氧基-苯基)-N-甲基-苯甲酰胺 2-2(29mg，0.077mmol)的THF(0.5mL)溶液中添加1N LiOH(0.5mL) 和K₂CO₃(10mg，0.073mmol)。在室温下搅拌48小时后，添加EtOAc 和水。移除水层并将有机层浓缩、溶于MeOH中并进行制备LCMS以得 到5-{2-氯-5-[(2-甲氧基-苯基)-甲基-氨基甲酰基]-苯基}-吡啶-2-甲酰胺 24-1。MS(M+H)⁺：396.0，t_R＝5.93min。(方法2)

相似地，由相应4-氯-3-(6-氰基-4-甲基-吡啶-3-基)-N-(2-甲氧基-苯 基)-N-甲基-苯甲酰胺2-10制备5-{2-氯-5-[(2-甲氧基-苯基)-甲基-氨基 甲酰基]-苯基}-4-甲基-吡啶-2-甲酰胺24-2。MS(M+H)⁺：410.0，t_R＝6.12 min。(方法2)

实施例25

4-氯-N-(2-甲氧基-6-甲基-苯基)-N-甲基-3-(4-甲基-6-吡唑-1-基-吡啶3- 基)-苯甲酰胺

步骤25A：4-氯-N-(2-甲氧基-6-甲基-苯基)-N-甲基-3-(4-甲基-6-吡唑-1-基-吡啶-3-基)-苯甲酰胺

将4-氯-3-(6-氯-4-甲基-吡啶-3-基)-N-(2-甲氧基-6-甲基-苯基)-N-甲 基-苯甲酰胺2-31(66.0mg，0.16mmol)与吡唑(12.9mg，0.19mmol)的 混合物添加至二噁烷(1mL)中的CuI(6.0mg，0.032mmol)、K₂CO₃(43.9 mg，0.32mmol)和N，N′-二甲基乙二胺(1.4mg，0.016mmol)中。将反应 容器密封并在130℃下加热24小时。然后，将混合物过滤并通过HPLC 纯化，得到4-氯-N-(2-甲氧基-6-甲基-苯基)-N-甲基-3-(4-甲基-6-吡唑-1- 基-吡啶-3-基)-苯甲酰胺25-1(4.5mg)。MS(M+H)⁺：446.8，t_R＝8.60min。 (方法2)

相似地制备4-氯-3-(6-咪唑-1-基-4-甲基-吡啶-3-基)-N-(2-甲氧基 -6-甲基-苯基)-N-甲基-苯甲酰胺25-2。MS(M+H)⁺：446.8，t_R＝5.24min。 (方法2)

实施例26

4-氯-N-(2-甲氧基-6-甲基-苯基)-N-甲基-3-(4-甲基-6-甲基-硫烷基吡啶 -3-基)-苯甲酰胺

步骤26A：4-氯-N-(2-甲氧基-6-甲基-苯基)-N-甲基-3-(4-甲基-6-甲基-硫烷基吡啶-3-基)-苯甲酰胺

在80℃下，将4-氯-3-(6-氯-4-甲基-吡啶-3-基)-N-(2-甲氧基-6-甲基- 苯基)-N-甲基-苯甲酰胺2-31(20.0mg，0.048mmol)与甲硫醇钠(3.3 mg，0.048mmol)于DMSO(1mL)中的混合物加热1小时。将混合物在 乙酸乙酯与水之间分层。分离有机层并通过HPLC纯化，得到4-氯-N-(2- 甲氧基-6-甲基-苯基)-N-甲基-3-(4-甲基-6-甲基-硫烷基吡啶-3-基)-苯甲 酰胺(4.3mg)。MS(M+H)⁺：426.9；t_R＝7.92min。(方法2)

实施例27

4-氯-3-(3，5-二氯-1-氧基-吡啶-2-基)-N-(2-甲氧基-苯基)-N-甲基-苯甲酰 胺

步骤27A：4-氯-3-(3，5-二氯-1-氧基-吡啶-2-基)-N-(2-甲氧基-苯基)-N-甲基-苯甲酰胺

在回流下将4-氯-3-(3，5-二氯-吡啶-2-基)-N-(2-甲氧基-苯基)-N-甲 基-苯甲酰胺19-2(30.0mg，0.066mmol)、过氧化氢(10μL，33％于水 中)和乙酸(0.2mL)的混合物加热48小时，然后添加更多过氧化氢(10 μL，33％于水中)。然后使混合物再回流24小时。通过HPLC纯化混合 物，得到4-氯-3-(3，5-二氯-1-氧基-吡啶-2-基)-N-(2-甲氧基-苯基)-N-甲 基-苯甲酰胺(12.3mg)。MS(M+H)⁺：436.6；t_R＝6.52min。(方法2)

实施例28

4-氯-3-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-N-甲基-N-{2-[3-(1H-四唑-5- 基)-丙氧基]-苯基}-苯甲酰胺

步骤28A：3-溴-4-氯-N-[2-(3-氰基-丙氧基)-苯基]-N-甲基-苯甲酰胺

将CsCO₃(5.17g，15.87mmol)添加至4-溴-丁腈(0.63mL，6.35 mmol)和3-溴-4-氯-N-(2-羟基-苯基)-N-甲基-苯甲酰胺(1.80g，5.29 mmol，步骤3B)的DMF(20mL)溶液中。将混合物在室温下搅拌约16 小时并在乙酸乙酯与水之间分层。分离乙酸乙酯层，用水和盐水洗涤， 并用MgSO₄干燥。蒸发有机滤液以得到呈淡黄色固体状的3-溴-4-氯 -N-[2-(3-氰基-丙氧基)-苯基]-N-甲基-苯甲酰胺(2.0g)。MS[M+H]⁺： 408.9；t_R＝2.39min。(方法1)

步骤28B：3-溴-4-氯-N-甲基-N-{2-[3-(1H-四唑-5-基)-丙氧基]-苯基}-苯甲酰胺

在80℃下将3-溴-4-氯-N-[2-(3-氰基-丙氧基)-苯基]-N-甲基-苯甲酰 胺(2.0g，4.9mmol)、三丁基叠氮化锡(4.03mL，14.7mmol)和三乙基 铝(7.74mL，14.7mmol，25％于甲苯中)于甲苯(25mL)中的混合物加热 5小时。将混合物冷却至室温，并用1N HCl酸化。将混合物用DCM萃 取。用水和盐水洗涤有机层并干燥。在真空中浓缩滤液并通过硅胶柱 层析(洗脱剂：含3％MeOH的DCM)纯化残余物以得到3-溴-4-氯-N-甲 基-N-{2-[3-(1H-四唑-5-基)-丙氧基]-苯基}-苯甲酰胺(1.93g)。MS [M+H]⁺：451.9；t_R＝2.26min。(方法1)

步骤28C：3-溴-4-氯-N-甲基-N-(2-{3-[1-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-1H-四唑-5-基]-丙氧基}-苯基)-苯甲酰胺和3-溴-4-氯-N-甲基-N-(2-{3-[2-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-1H-四唑-5-基]-丙氧基}-苯基)-苯甲酰胺

向DMF(20mL)中的3-溴-4-氯-N-甲基-N-{2-[3-(1H-四唑-5-基)-丙 氧基]-苯基}-苯甲酰胺(1.90g，4.2mmol)中一次性添加2-(三甲基硅烷 基)乙氧基甲基氯(0.89mL，5.1mmol)，然后添加K₂CO₃(1.16g，8.4 mmol)。将混合物在室温下搅拌约16小时然后在乙酸乙酯与水之间分 层。分离有机层，用水和盐水洗涤，并用MgSO₄干燥。然后在真空中 浓缩滤液并通过硅胶柱层析(洗脱剂：含30％乙酸乙酯的己烷)纯化残余 物以得到呈两种区域异构体形式的3-溴-4-氯-N-甲基-N-(2-{3-[1-(2-三 甲基硅烷基-乙氧基甲基)-1H-四唑-5-基]-丙氧基}-苯基)-苯甲酰胺和3- 溴-4-氯-N-甲基-N-(2-{3-[2-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-1H-四唑-5- 基]-丙氧基}-苯基)-苯甲酰胺(上部斑点736mg和下部斑点785mg)。上 部斑点MS[M+H]⁺：582.0；t_R＝2.92min(方法1)和下部斑点MS[M+H]⁺： 582.0；t_R＝2.75min。(方法1)

步骤28D：4-氯-N-甲基-3-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼烷-2-基)-N-(2-{3-[1或2-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-1H-四唑-5-基]-丙氧基}-苯基)-苯甲酰胺

使用步骤2D的程序将步骤28C的对应于上部斑点的区域异构体 (736mg，1.27mmol)转化为相应4-氯-N-甲基-3-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2] 二氧硼烷-2-基)-N-(2-{3-[1或2-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-1H-四唑 -5-基]-丙氧基}-苯基)-苯甲酰胺(800mg)。MS[M+H]⁺：628.1；t_R＝2.98 min。(方法1)

步骤28E：4-氯-3-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-N-甲基-N-(2-{3-[1或2-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-2H-四唑-5-基]-丙氢基}-苯基)-苯甲酰胺

使用步骤2E1的铃木程序将4-氯-N-甲基-3-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2] 二氧硼烷-2-基)-N-(2-{3-[1或2-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-1H-四唑 -5-基]-丙氧基}-苯基)-苯甲酰胺(400mg)转化为4-氯-3-(4-氰基-6-三氟 甲基-吡啶-3-基)-N-甲基-N-(2-{3-[1或2-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲 基)-2H-四唑-5-基]-丙氧基}-苯基)-苯甲酰胺(278mg)。MS[M+H]⁺： 672.0；t_R＝2.90min。(方法1)

步骤28F：4-氯-3-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-N-甲基-N-{2-[3-(1H-四唑-5-基)-丙氧基]-苯基}-苯甲酰胺

在含有浓HCl(0.1mL)的乙醇(1.0mL)中将4-氯-3-(4-氰基-6-三氟 甲基-吡啶-3-基)-N-甲基-N-(2-{3-[1或2-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲 基)-2H-四唑-5-基]-丙氧基}-苯基)-苯甲酰胺(150mg，0.22mmol)加热 至70℃，持续30min。浓缩并通过HPLC纯化得到4-氯-3-(4-氰基-6-三 氟甲基-吡啶-3-基)-N-甲基-N-{2-[3-(1H-四唑-5-基)-丙氧基]-苯基}-苯 甲酰胺(72mg)。MS[M+H]⁺：542.0；t_R＝4.83min。(方法4)

实施例29

5-{2-氯-5-[(2-甲氧基-苯基)-甲基-氨基甲酰基]-苯基}-吡啶-2-甲酰胺

步骤29A：N-(2-氯-3-氟-苯基)-甲酰胺

将乙酸酐(10mL，106mmol)和甲酸(30mL，795mmol)的溶液在 室温下搅拌10分钟。添加2-氯-3-氟苯胺(2.9g，20mmol)并在60℃下将 反应混合物搅拌1.5h。冷却至室温后，在真空中移除溶剂并将残余物 再溶于DCM(100mL)中并用饱和NaHCO₃水溶液洗涤直至水相的pH 测量值为8。将有机层用水进一步洗涤(2×100mL)，分离并用MgSO₄干燥。过滤并在真空中浓缩得到呈无色固体状的N-(2-氯-3-氟-苯基)- 甲酰胺(3.3g，95％)，该物质无需进一步纯化。MS(M+H)⁺：173.9， t_R＝2.04min。(方法1)

步骤29B：N-甲基-2-氯-3-氟苯胺

在0℃下，向95％氢化锂铝(2.19g，58mmol)于无水THF(10mL) 中的搅拌悬浮液中逐滴添加N-(2-氯-3-氟苯基)-甲酰胺(2.3g，13.2 mmol)的无水THF(20mL)溶液。将反应混合物缓慢升温至室温并另外 搅拌40分钟。将混合物冷却至0℃，并通过依次添加水(4mL)、15％ NaOH水溶液(2mL)、然后水(4mL)来猝灭反应。将有机物萃取至3∶1 DCM∶IPA(100mL)的混合物中并用水(50mL)洗涤。分离有机层并用 MgSO₄干燥。过滤，然后在真空中浓缩得到呈黄色油状的N-甲基-2-氯 -3-氟苯胺29-1(2.07g，99％)。MS(M+H)⁺：160.1，t_R＝2.21min。(方法 1)

使用相应市售苯胺，根据上述两步程序制备以下化合物。

  实施例   MS(M+H)⁺  t_R(min)   HPLC方法   29-1   (2-氯-3-氟-苯基)-甲基-胺   160.1   2.21   1   29-2   (3-氯-5-氟-苯基)-甲基-胺   159.1   2.43   1   29-3   (4-氟-2-甲基-苯基)-甲基-胺   140.1   0.98   1   29-4   (3，4-二氟-苯基)-甲基-胺   144.0   1.59   1   29-5   (3，5-二氟-苯基)-甲基-胺   144.0   2.29   1   29-6   (3-氯-4-氟-苯基)-甲基-胺   158.0   0.88   1   29-7   (3-氟-2-甲基-苯基)-甲基-胺   140.1   1.93   1   29-8   (3-氟-2-甲氧基-苯基)-甲基-胺   155.9   1.97   1   29-9   (2-氯-5-氟-苯基)-甲基-胺   159.9   2.79   1   29-10   (2-甲氧基-6-甲基-苯基)-甲基-胺   152.1   1.07   1   29-11   (2，6-二甲基-苯基)-甲基-胺   136.1   0.65   1   29-12   (3-氯-2-甲基-苯基)-甲基-胺   155.9   2.45   1   29-13   (2，3-二氟-苯基)-甲基-胺   144.0   2.53   1

实施例30

4-氯-N-(2-氯-3-氟-苯基)-N-甲基-3-(6-甲基-2-氧代-4-三氟甲基-2H-嘧 啶-1-基)-苯甲酰胺

步骤30A：4-氯-3-脲基-苯甲酸

在100℃下将3-氨基-4-氯苯甲酸(34.2g，200mmol)和尿素(24g， 400mmol)于冰乙酸(200mL)中的搅拌溶液加热24h。使混合物冷却至 室温并通过过滤分离所得沉淀，用水(2×100mL)和乙醚(2×100mL)洗 涤，然后风干以得到35g呈灰色固体状的4-氯-3-脲基-苯甲酸，其未进 一步纯化继续使用。

步骤30B：4-氯-3-(6-甲基-2-氧代-4-三氟甲基-2H-嘧啶-1-基)-苯甲酸乙酯

向4-氯-3-脲基-苯甲酸(26g，121mmol)于乙醇(375mL)中的搅拌 悬浮液中添加1，1，1-三氟-2，4-戊二酮(28g，182mmol)和浓(95％)硫酸 (50mL)。将反应混合物在85℃下加热6h。冷却至室温后，将混合物 在水(500mL)与DCM(1L)之间分层并向其中添加6N NaOH水溶液， 直至pH为9-10。分离DCM层并用MgSO₄干燥并过滤。在真空中浓缩得 到橙色油状物，将该油状物通过硅胶快速层析(用含10％至25％EtOAc 的己烷的梯度洗脱)纯化。将所得橙色固体用乙醚进一步研制以得到呈 无色固体状的4-氯-3-(6-甲基-2-氧代-4-三氟甲基-2H-嘧啶-1-基)-苯甲 酸乙酯(3.77g，9％)。MS(M+H)⁺：360.8，t_R＝2.670min(方法1)；¹H NMR (CDCl₃)δ8.16(1H，dd，J＝8.4，2.1Hz)，8.00(1H，d，J＝1.8Hz)，7.70(1H， d，J＝8.4Hz)，6.63(1H，s)，4.39(2H，q，J＝6.9Hz)，2.15(3H，s)，1.39(3H， t，J＝6.9Hz)。

步骤30C：4-氯-3-(6-甲基-2-氧代-4-三氟甲基-2H-嘧啶-1-基)-苯甲酸

在85℃下将4-氯-3-(6-甲基-2-氧代-4-三氟甲基-2H-嘧啶-1-基)-苯 甲酸乙酯(3.34g，9.26mmol)于12N HCl水溶液(10mL)中的搅拌悬浮 液加热1小时。冷却至室温后，将有机物萃取至DCM(3×100mL)中。 将合并的有机层用MgSO₄干燥并过滤。在真空中浓缩得到黄色固体， 将该固体通过硅胶快速层析(用含5％至10％MeOH的DCM的梯度，然 后含9％MeOH和1％AcOH的DCM洗脱)纯化以得到呈乳膏固体状的4- 氯-3-(6-甲基-2-氧代-4-三氟甲基-2H-嘧啶-1-基)-苯甲酸(1.0g，33％)。 MS(M+H)⁺：332.8，t_R＝2.364min(方法1)；¹H NMR(CDCl₃)δ8.17(1H， dd，J＝8.4，2.4Hz)，8.04(1H，d，J＝1.5Hz)，7.72(1H，d，J＝8.4Hz)，6.72 (1H，s)，2.17(3H，s)。

步骤30D：4-氯-N-(2-氯-3-氟-苯基)-N-甲基-3-(6-甲基-2-氧代-4-三氟甲基-2H-嘧啶-1-基)-苯甲酰胺

在室温下，向4-氯-3-(6-甲基-2-氧代-4-三氟甲基-2H-嘧啶-1-基)- 苯甲酸(50mg，0.151mmol)于无水1，2-二氯乙烷(0.5mL)中的搅拌溶液 中添加乙二酰氯(23mg，0.181mmol)，然后添加催化量的DMF。搅拌 40分钟后，添加N-甲基-2-氯-3-氟苯胺29-1(30mg，0.188mmol)的1，2- 二氯乙烷(0.5mL)溶液，然后添加4-(二甲基氨基)吡啶(22mg，0.179 mmol)，并将混合物搅拌12h。通过反相制备LCMS直接纯化得到呈无 色固体状的4-氯-N-(2-氯-3-氟-苯基)-N-甲基-3-(6-甲基-2-氧代-4-三氟 甲基-2H-嘧啶-1-基)-苯甲酰胺30-1(18mg，25％)。MS：350.5，t^R＝8.75 min(方法3)；¹H NMR(CDCl₃)δ7.50(1H，m)，7.44(1H，dd，J＝8.4，1.8 Hz)，7.31(1H，m)，7.26(1H，s)，6.95(1H，dd，J＝9，2.1Hz)，6.79(1H，m)， 6.55(1H，s)，3.46(3H，s)，1.93(3H，s)。

根据上述程序制备以下化合物。

实施例31

4-氯-3-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-N-甲基-N-{2-[2-(5-氧代-4，5-二 氢-[1，3，4]噁二唑-2-基)-乙氧基]-苯基}-苯甲酰胺

步骤31A：N′-[3-(2-{[4-氯-3-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰基]-甲基-氨基}-苯氧基)-丙酰基]-肼甲酸叔丁酯

将EDCl(19.9mg，0.104mmol)添加至3-(2-{[4-氯-3-(4-氰基-6-三氟 甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰基]-甲基-氨基}-苯氧基)-丙酸11-4(36.3mg， 0.069mmol)、肼甲酸叔丁酯(13.7mg，0.104mmol)、HOBt(14.0mg， 0.104mmol)和Na₂CO₃(8.7mg，0.104mmol)在DMF(1mL)与二氯甲烷 (4mL)的混合物中的溶液中。将混合物在室温下搅拌约16小时并在乙 酸乙酯与水之间分层。分离乙酸乙酯层，用水和盐水洗涤，并用MgSO₄干燥。将有机滤液蒸发并通过制备TLC板用己烷和乙酸乙酯(1/1)洗脱 纯化以得到N′-[3-(2-{[4-氯-3-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰 基]-甲基-氨基}-苯氧基)-丙酰基]-肼甲酸叔丁酯(40.1mg，94％)。MS [M+H]⁺：619.0；t_R＝2.40min。(方法1)

步骤31B：4-氯-3-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-N-甲基-N-{2-[2-(5-氧代-4，5-二氢-[1，3，4]噁二唑-2-基)-乙氧基]-苯基}-苯甲酰胺

在二噁烷(5mL)中的4N HCl中将N′-[3-(2-{[4-氯-3-(4-氰基-6-三氟 甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰基]-甲基-氨基}-苯氧基)-丙酰基]-肼甲酸叔丁 酯(40.1mg，0.065mmol)搅拌2小时并浓缩。将残余物悬浮于含有 DIPEA(25.2mg，0.19mmol)的甲苯(5mL)中。添加碳酰氯(20％于甲苯 中，8.2μL，0.077mmol)并将混合物在室温下搅拌24小时。将混合物 浓缩并通过反相制备LCMS纯化以得到4-氯-3-(4-氰基-6-三氟甲基-吡 啶-3-基)-N-甲基-N-{2-[2-(5-氧代-4，5-二氢-[1，3，4]噁二唑-2-基)-乙氧 基]-苯基}-苯甲酰胺31-1(17mg)。MS[M+H]⁺：544.1；t_R＝5.11min。(方 法3)

实施例32

2-氯-5-氟-喹啉-3-腈

步骤32A：(2-氨基-6-氟-苯基)-甲醇

在0℃下，将LAH(987mg，26mmol)缓慢添加至2-氨基-6-氟-苯甲 酸(2.69g，17.3mmol)的无水THF(20mL)溶液中。将混合物在室温下 搅拌约1小时并再次冷却至0℃。在搅拌下缓慢添加Na₂SO₄·10H₂O(10 g)持续20分钟。过滤混合物，用THF洗涤固体。浓缩溶液以得到黄色 固体状的(2-氨基-6-氟-苯基)-甲醇(2.49g)。MS[M-OH]⁺：124.1；t_R＝0.57 min。(方法1)

步骤32B：2-氨基-6-氟-苯甲醛

向二氯甲烷(30mL)中的(2-氨基-6-氟-苯基)-甲醇(2.49g，17.3 mmol)中添加MnO₂(3.01g，34.7mmol，活性)。使混合物回流3小时然 后经硅藻土过滤。将混合物浓缩并通过硅胶快速层析(用含30％乙酸乙 酯的己烷洗脱)纯化以得到呈黄色固体状的2-氨基-6-氟-苯甲醛(1.23 g)。t_R＝2.20min。(方法1)

步骤32C：5-氟-2-氧代-1，2-二氢-喹啉-3-腈

向含有2-氨基-6-氟-苯甲醛(1.19g，8.6mmol)和氰基乙酸甲酯(0.91 mL，10.3mmol)的MeOH(60mL)溶液中添加甲醇钠(2.93mL，12.8 mmol，25％于MeOH中)。将混合物在室温下搅拌16小时。将所得黄色 沉淀过滤，用MeOH洗涤然后在室温下于1N HCl(75mL)中搅拌2小 时。将固体过滤，用水洗涤并在真空中干燥以得到呈白色固体状的5- 氟-2-氧代-1，2-二氢-喹啉-3-腈(1.2g)。MS[M+H]⁺：189.1；t_R＝2.00min。 (方法1)

步骤32D：2-氯-5-氟-喹啉-3-腈

在POCl₃(10mL)中将5-氟-2-氧代-1，2-二氢-喹啉-3-腈(0.80g，4.3 mmol)加热3小时。将混合物浓缩并在乙酸乙酯与水之间分层。分离有 机层，用NaHCO₃洗涤、干燥并浓缩。将残余物自己烷与乙酸乙酯的混 合物结晶以得到呈白色固体状的2-氯-5-氟-喹啉-3-腈32-1(0.83g)。¹H NMR(CDCl₃)，δ，8.82(1H，s)，7.83-7.92(2H，m)，7.33-7.41(1H，m)。

根据上述程序制备以下化合物。

  实施例   MS(M+H)⁺  t_R(min)   HPLC方法   32-1   2-氯-5-氟-喹啉-3-腈   207.0   2.40   1   32-2   2-氯-8-氟-喹啉-3-腈   207.2   2.38   1   32-3   2-氯-5，6，7，8-四氟-喹啉-3-腈   -   2.56   1

实施例33

4-(2-{[4-氯-3-(3-氰基-5-氟-喹啉-2-基)-苯甲酰基]-甲基-氨基}-苯氧基)- 丁酸

步骤33A：3-溴-4-氯-N-(2-羟基-苯基)-N-甲基-苯甲酰胺(步骤3B的替代合成法)

在30分钟内将乙腈(300mL)中的3-溴-4-氯-苯甲酰氯(步骤2A， 106.9mmol)逐滴添加至2-甲基氨基-酚(15.1g，122.9mmol)和NaHCO₃(18.0g，213.7mmol)于乙腈(200mL)和水(200mL)中的剧烈搅拌溶液 中。将混合物再搅拌1小时然后浓缩以移除乙腈。将固体过滤，用HCl (1N，600mL)和水(500mL)洗涤并干燥。将固体溶于二氯甲烷(500mL) 中并添加正丁基胺(20mL)。将混合物在室温下搅拌16小时并浓缩。将 残余物通过硅胶快速层析(用含20％至35％乙酸乙酯的己烷洗脱)部分 纯化然后自己烷/乙酸乙酯(75/25)结晶以得到呈白色固体状的3-溴-4- 氯-N-(2-羟基-苯基)-N-甲基-苯甲酰胺(20.5g)。MS[M+H]⁺： 339.7/341.8；t_R＝2.19min。(方法1)

步骤33B：4-{2-[(3-溴-4-氯-苯甲酰基)-甲基-氨基]-苯氧基}-丁酸叔丁酯

由3-溴-4-氯-N-(2-羟基-苯基)-N-甲基-苯甲酰胺(7.9g，23.2mmol) 根据步骤3C相似地制备呈淡黄色固体状的4-{2-[(3-溴-4-氯-苯甲酰基)- 甲基-氨基]-苯氧基}-丁酸叔丁酯(6.24g)。MS[M-叔丁基]⁺： 426.0/428.0；t_R＝2.69min。(方法1)

步骤33C：4-(2-{[4-氯-3-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼烷-2-基)-苯甲酰基]-甲基-氨基}-苯氧基)-丁酸叔丁酯

由4-{2-[(3-溴-4-氯-苯甲酰基)-甲基-氨基]-苯氧基}-丁酸叔丁酯 (6.23g，12.9mmol)根据步骤2D相似地制备4-(2-{[4-氯-3-(4，4，5，5-四甲 基-[1，3，2]二氧硼烷-2-基)-苯甲酰基]-甲基-氨基}-苯氧基)-丁酸叔丁酯 (5.36g)。MS[M+H]⁺：530.2；t_R＝2.72min。(方法1)

步骤33D：4-(2-{[4-氯-3-(3-氰基-5-氟-喹啉-2-基)-苯甲酰基]-甲基-氨基}-苯氧基)-丁酸叔丁酯

由4-{2-[(3-溴-4-氯-苯甲酰基)-甲基-氨基]-苯氧基}-丁酸叔丁酯 (106.4mg，0.2mmol)和2-氯-5-氟-喹啉-3-腈32-1(41.5mg，0.2mmol) 根据步骤15D相似地制备4-(2-{[4-氯-3-(3-氰基-5-氟-喹啉-2-基)-苯甲 酰基]-甲基-氨基}-苯氧基)-丁酸叔丁酯(80.2mg)。MS[M+H]⁺：574.3； t_R＝2.97min。(方法1)

步骤33E：4-(2-{[4-氯-3-(3-氰基-5-氟-喹啉-2-基)-苯甲酰基]-甲基-氨基}-苯氧基)-丁酸

在二氯甲烷(2mL)中的50％三氟乙酸中将4-(2-{[4-氯-3-(3-氰基-5- 氟-喹啉-2-基)-苯甲酰基]-甲基-氨基}-苯氧基)-丁酸叔丁酯(80.2mg)搅 拌2小时并通过反相制备LCMS纯化以得到4-(2-{[4-氯-3-(3-氰基-5-氟- 喹啉-2-基)-苯甲酰基]-甲基-氨基}-苯氧基)-丁酸33-1(22.9mg)。MS [M+H]⁺：518.4；t_R＝3.47min。(方法3)

根据上述程序制备以下化合物。

  实施例   R₄  MS(M+H)⁺  t_R(min)   HPLC方法   33-1   5-氟   518.4   3.47   3   33-2   8-氟   518.3   3.41   3   33-3   5，6，7，8-四氟   572.4   3.72   3

实施例34

4-{5-氯-4-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-2-[(2-甲氧基-苯基)-甲基-氨 基甲酰基]苯氧基}-丁酸

步骤34A：5-溴-2-(3-叔丁氧基羰基-丙氧基)-4-氯-苯甲酸3-叔丁氧基羰基-丙酯

在80℃下，将5-溴-4-氯-2-羟基-苯甲酸(5g，19.9mmol)、4-溴-丁 酸叔丁酯(13.2g，59.7mmol)和K₂CO₃(11.1g，79.6mmol)于DMF(100 mL)中的混合物加热2天。滤出固体。将溶液浓缩并通过硅胶快速层析 (用含20％乙酸乙酯的己烷洗脱)纯化以得到5-溴-2-(3-叔丁氧基羰基-丙 氧基)-4-氯-苯甲酸3-叔丁氧基羰基-丙酯(8.2g)。MS[M-异丁烯+H]⁺： 480.9；t_R＝3.32min。(方法1)

步骤34B：5-溴-2-(3-叔丁氧基羰基-丙氧基)-4-氯-苯甲酸

在室温下，将5-溴-2-(3-叔丁氧基羰基-丙氧基)-4-氯-苯甲酸3-叔丁 氧基羰基-丙酯(8.2g，15.3mmol)与LiOH(19.1mL，4N，76.6mmol) 于THF(150mL)中的混合物搅拌16小时。将混合物用饱和NaHSO₄(50 mL)酸化并用乙酸乙酯萃取。用Na₂SO₄干燥乙酸乙酯层，过滤并浓缩。 将残余物通过硅胶快速层析(用含50％乙酸乙酯的己烷洗脱)纯化，然后 在己烷/乙酸乙酯(10/1)中结晶以得到呈白色晶体状的5-溴-2-(3-叔丁氧 基羰基-丙氧基)-4-氯-苯甲酸(2.5g)。MS[M-(异丁烯+OH)]⁺：320.8； t_R＝2.38min。(方法1)

步骤34C：5-溴-2-(3-叔丁氢基羰基-丙氢基)-4-氯-苯甲酸2-三甲基硅烷基-乙酯

向含有5-溴-2-(3-叔丁氧基羰基-丙氧基)-4-氯-苯甲酸(2.3g，5.9 mmol)与2-(三甲基硅烷基)-乙醇(1.8g，8.9mmol)的搅拌二氯甲烷溶液 (40mL)中添加二环己基-碳化二酰亚胺(1.83g，8.9mmol)和DMAP (108mg，0.9mmol)。将混合物在室温下搅拌16小时并浓缩。将残余物 通过硅胶快速层析(用含20％乙酸乙酯的己烷洗脱)纯化以得到5-溴 -2-(3-叔丁氧基羰基-丙氧基)-4-氯-苯甲酸2-三甲基硅烷基-乙酯(3.2g)。 MS离子(APCI)：482.0，441.0，410.9.t_R＝3.61min。(方法1)

步骤34D：2-(3-叔丁氧基羰基-丙氧基)-4-氯-5-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼烷-2-基)-苯甲酸-2-三甲基硅烷基-乙酯

由5-溴-2-(3-叔丁氧基羰基-丙氧基)-4-氯-苯甲酸2-三甲基硅烷基- 乙酯(3.2g)根据步骤2D相似地制备2-(3-叔丁氧基羰基-丙氧基)-4-氯 -5-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼烷-2-基-苯甲酸-2-三甲基硅烷基-乙酯 (2.7g)。MS离子(APCI)：513.2，459.1；t_R＝3.62min。(方法1)

步骤34E：2-(3-叔丁氧基羰基-丙氧基)-4-氯-5-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-苯甲酸2-三甲基硅烷基-乙酯

由5-溴-2-(3-叔丁氧基羰基-丙氧基)-4-氯-苯甲酸2-三甲基硅烷基- 乙酯(2.2g)根据步骤2E.1或步骤3E相似地制备2-(3-叔丁氧基羰基-丙氧 基)-4-氯-5-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-苯甲酸2-三甲基硅烷基-乙 酯(1.3g)。MS离子(APCI)：501.1；t_R＝3.59min。(方法1)

步骤34F：2-(3-叔丁氧基羰基-丙氧基)-4-氯-5-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-苯甲酸

在室温下，将2-(3-叔丁氧基羰基-丙氧基)-4-氯-5-(4-氰基-6-三氟甲 基-吡啶-3-基)-苯甲酸2-三甲基硅烷基-乙酯(1.3g，2.2mmol)与四丁基 氟化铵(6.6mL，6.6mmol，1M于THF中)于THF(20mL)中的混合物搅 拌30分钟。然后将混合物浓缩并用乙醚稀释。用水洗涤乙醚层，干燥 并浓缩以得到2-(3-叔丁氧基羰基-丙氧基)-4-氯-5-(4-氰基-6-三氟甲基- 吡啶-3-基)-苯甲酸(0.8g)。MS[M+H]⁺：485.1；t_R＝2.96min。(方法1)

步骤34G：4-{5-氯-4-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-2-[(2-甲氧基-苯基)-甲基-氨基甲酰基]-苯氧基}-丁酸

在室温下将2-(3-叔丁氧基羰基-丙氧基)-4-氯-5-(4-氰基-6-三氟甲 基-吡啶-3-基)-苯甲酸(30mg，0.06mmol)、2-甲氧基-N-甲基苯胺(9.4 mg，0.07mmol)、三乙胺(12.5mg，0.12mmol)和2-(7-氮杂-1H-苯并三 唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基脲六氟磷酸酯(HATU，35mg，0.09mmL)于含 有DMF(0.1mL)的二氯甲烷(1mL)中的混合物搅拌16小时。然后，将 混合物在水和二氯甲烷中分层。用水洗涤有机层，干燥并浓缩以得到 粗4-{5-氯-4-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-2-[(2-甲氧基-苯基)-甲基- 氨基甲酰基]-苯氧基}-丁酸叔丁酯。

或者，使用2-甲氧基苯胺用于酰胺形成，然后根据步骤2C进行N- 甲基化以得到相同中间体。

在含50％三氟乙酸的二氯甲烷(1mL)中将上述粗物质搅拌2小时， 然后通过反相制备LCMS纯化以得到4-{5-氯-4-(4-氰基-6-三氟甲基-吡 啶-3-基)-2-[(2-甲氧基-苯基)-甲基-氨基甲酰基]-苯氧基}-丁酸34-1(4.5 mg)。

根据上述程序制备以下化合物：

  实施例   R_2a  MS(M+H)⁺  t_R(min)   HPLC方法   34-1   2-甲氧基-苯基   548.3   3.91   3   34-2   4-氯-2-甲氧基-苯基   582.3   4.06   3   34-3   2-三氟甲氧基-苯基   602.3   4.08   3   34-4   4-氟-2-甲氧基-苯基   566.3   3.70   3

  34-5   2-甲氧基甲基-苯基   562.2   3.49   3   34-6   3-氯-2-甲氧基-苯基   582.0   8.20   2   34-7   5-氯-2-甲氧基-苯基   582.0   8.10   2   34-8   苯基   518.3   3.81   3   34-9   4-氯-2-甲氧基甲基-苯基   596.1   3.82   3   34-10   2-甲氧基羰基-苯基   576.2   3.35   3   34-11   3-氟-2-甲氧基-苯基   566.8   3.70   3   34-12   5-甲基-2-甲氧基-苯基   562.4   3.74   3   34-13   2，5-二甲氧基-苯基   577.6   3.53   3   34-14   2，4-二甲氧基-苯基   577.6   3.67   3   34-15   2-噁唑-5-基-苯基   585.7   3.37   3   34-16   2-呋喃-2-基-苯基   584.4   3.83   3   34-17   苄基   523.3   3.90   3   34-18   2-吡啶基   519.3   3.51   3   34-19   6-甲氧基-吡啶-2-基   549.2   3.43   3   34-20   3-甲基-吡啶-2-基   532.8   3.39   3   34-21   6-甲基-吡啶-2-基   532.8   3.12   3   34-22   甲基   455.7   2.95   3   34-23   3-甲基-丁基   512.0   3.69   3   34-24   2-甲氧基-乙基   500.1   3.09   3   34-25   环丙基甲基   496.0   3.47   3   34-26   6-氟-2-甲氧基-苯基   566.1   3.73   3

实施例35

4-氯-5-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-N-(2-甲氧基-苯基)-N-甲基 -2-[3-(1H-四唑-5-基)-丙氧基]-苯甲酰胺

步骤35A：5-溴-4-氯-2-羟基-N-(2-甲氧基-苯基)-N-甲基-苯甲酰胺

向含有5-溴-4-氯-2-羟基苯甲酸(2.0g，8.0mmol)的搅拌二氯甲烷 (40mL)溶液中添加三乙胺(2.2mL，16.0mmol)、HATU(4.5g，12mmol) 和2-甲氧基-N-甲基苯胺(1.19g，8.7mmol)。将混合物在室温下搅拌16 小时并添加水。分离有机层，用NaHCO₃洗涤，用Na₂SO₄干燥，过滤 并浓缩。通过硅胶快速柱层析用含20％乙酸乙酯的己烷洗脱纯化残余 物以得到5-溴-4-氯-2-羟基-N-(2-甲氧基-苯基)-N-甲基-苯甲酰胺(300 mg)。MS[M+H]⁺：371.9；t_R＝2.60min。(方法1)

或者，在60℃下将5-溴-4-氯-2-羟基苯甲酸(5g，19.9mmol)、2- 甲氧基-N-甲基苯胺(3.13g，22.9mmol)和P₂O₅(5.36g，37.8mmol)于无 水二甲苯中的混合物加热2小时，然后回流17小时。将混合物浓缩并通 过硅胶快速柱层析用含乙酸乙酯(20％)的己烷洗脱纯化以得到5-溴-4- 氯-2-羟基-N-(2-甲氧基-苯基)-N-甲基-苯甲酰胺(3.3g)。

步骤35B：5-溴-4-氯-2-(3-氰基-丙氧基)-N-(2-甲氧基-苯基)-N-甲基-苯甲酰胺

向含有5-溴-4-氯-2-羟基-N-(2-甲氧基-苯基)-N-甲基-苯甲酰胺(300 mg，0.81mmol)的搅拌DMF溶液(6mL)中添加4-溴-丁腈(0.096mL，0.97 mmol)和K₂CO₃(223mg，1.62mmol)。将混合物在50℃下加热8小时。 额外添加0.5当量4-溴丁腈和0.5当量K₂CO₃，并将混合物再加热8小时。 用二氯甲烷稀释混合物，用盐水洗涤，用Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。 通过硅胶快速柱层析纯化残余物以得到5-溴-4-氯-2-(3-氰基-丙氧 基)-N-(2-甲氧基-苯基)-N-甲基-苯甲酰胺(241mg)。MS[M+H]⁺：439.1； t_R＝2.62min。(方法1)

步骤35C：5-溴-4-氯-N-(2-甲氧基-苯基)-N-甲基-2-[3-(1H-四唑-5-基)-丙氧基]-苯甲酰胺

由相应5-溴-4-氯-2-(3-氰基-丙氧基)-N-(2-甲氧基-苯基)-N-甲基-苯 甲酰胺(241mg)根据步骤28B相似地制备5-溴-4-氯-N-(2-甲氧基-苯 基)-N-甲基-2-[3-(1H-四唑-5-基)-丙氧基]-苯甲酰胺(226mg)。MS [M+H]⁺：482.1；t_R＝2.48min。(方法1)

步骤35D：4-氯-5-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-N-(2-甲氧基-苯基)-N-甲基-2-[3-(1H-四唑-5-基)-丙氧基]-苯甲酰胺

由5-溴-4-氯-N-(2-甲氧基-苯基)-N-甲基-2-[3-(1H-四唑-5-基)-丙氧 基]-苯甲酰胺通过步骤28C、D、E和F的逐步反应制备4-氯-5-(4-氰基-6- 三氟甲基-吡啶-3-基)-N-(2-甲氧基-苯基)-N-甲基-2-[3-(1H-四唑-5-基)- 丙氧基]-苯甲酰胺35-1。MS[M+H]⁺：572.2；t_R＝7.48min。(方法2)

实施例36

2，2-二甲基-丙酸3-(2-{[4-氯-3-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰 基]-甲基-氨基}-苯氧基)-丙酰氧基甲酯

步骤36A：2，2-二甲基-丙酸3-(2-{[4-氯-3-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰基]-甲基-氨基}-苯氧基)-丙酰氧基甲酯

在室温下，将3-(2-{[4-氯-3-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰 基]-甲基-氨基}-苯氧基)-丙酸11-4(500mg，0.95mmol)、特戊酸氯甲 酯(276.4μL，1.9mmol)、三乙胺(399μL，2.85mmol)、NaI(142.5mg， 0.95mmol)于DMF(5mL)中的混合物搅拌2天。添加乙酸乙酯并用水和 盐水洗涤混合物，用MgSO₄干燥、过滤并浓缩。通过硅胶快速柱层析 用含20％乙酸乙酯的己烷洗脱纯化残余物以得到呈白色泡沫状的2，2- 二甲基-丙酸3-(2-{[4-氯-3-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰基]- 甲基-氨基}-苯氧基)-丙酰氧基甲酯36-1。MS[M+H]⁺：618.2；t_R＝32.7 min。(方法5)

相似地，由34-1制备4-{5-氯-4-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3- 基)-2-[(2-甲氧基-苯基)-甲基-氨基甲酰基]-苯氧基}-丁酸2，2-二甲基-丙 酰氧基甲酯36-2。MS[M+H]⁺：662.2；t_R＝6.87min。(方法3)

实施例37

3-(2-{[4-氯-3-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰基]-甲基-氨基}- 苯氧基)-丙酸1-环己基氧基羰氧基-乙酯

步骤37A：3-(2-{[4-氯-3-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰基]-甲基-氨基}-苯氧基)-丙酸1-环己基氧基羰氧基-乙酯

在60℃下，将3-(2-{[4-氯-3-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰 基]-甲基-氨基}-苯氧基)-丙酸11-4(500mg，0.95mmol)、碳酸1-氯乙基 环己酯(393mg，1.9mmol)、三乙胺(399μL，2.85mmol)和NaI(142.5 mg，0.95mmol)于DMF(5mL)中的混合物搅拌1天。添加乙酸乙酯并 用水和盐水洗涤混合物，用MgSO₄干燥、过滤并浓缩。通过硅胶快速 柱层析用含20％乙酸乙酯的己烷洗脱纯化残余物以得到3-(2-{[4-氯 -3-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰基]-甲基-氨基}-苯氧基)-丙 酸1-环己基氧基羰氧基-乙酯37-1。MS[M+H]⁺：674.2；t_R＝35.7min。(方 法5)

相似地，由11-4和碳酸1-氯乙基异丙酯制备3-(2-{[4-氯-3-(4-氰基 -6-三氟甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰基]-甲基-氨基}-苯氧基)-丙酸1-异丙氧 基羰氧基-乙酯37-2。MS[M+H]⁺：634.2；t_R＝32.5min。(方法5)

相似地，由34-1制备4-{5-氯-4-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3- 基)-2-[(2-甲氧基-苯基)-甲基-氨基甲酰基]-苯氧基}-丁酸1-环己基氧基 羰氧基-乙酯37-3。MS[M+H]⁺：718.3；t_R＝7.23min。(方法3)

相似地，由34-1制备4-{5-氯-4-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3- 基)-2-[(2-甲氧基-苯基)-甲基-氨基甲酰基]-苯氧基}-丁酸1-异丙氧基羰 氧基-乙酯37-4。MS[M+H]⁺：678.3；t_R＝6.73min。(方法3)

实施例38

4-氯-5-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-2-甲氧基-N-(2-甲氧基-苯基)-N- 甲基-苯甲酰胺

步骤38A：4-氯-2-甲氧基-5-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼烷-2-基)-苯甲酸甲酯

由5-溴-4-氯-2-甲氧基苯甲酸甲酯(10.0g)根据步骤2D的程序制备 4-氯-2-甲氧基-5-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼烷-2-基)-苯甲酸甲酯 (9.8g)。MS[M+H]⁺：327.1；t_R＝2.96min。(方法1)

步骤38B：4-氯-5-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-2-甲氧基-苯甲酸甲酯

由4-氯-2-甲氧基-5-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼烷-2-基)-苯甲酸 甲酯(9.8g)和5-溴-2-三氟甲基-异烟腈1-1(7.6g)根据步骤2E.1制备4-氯 -5-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-2-甲氧基-苯甲酸甲酯(5.5g)。MS [M+H]⁺：371.0；t_R＝2.83min。(方法1)

步骤38C：4-氯-5-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-2-甲氧基-苯甲酸

在密封管中将4-氯-5-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-2-甲氧基-苯 甲酸甲酯(1.2g，3.2mmol)与盐酸三甲基锡(1.75g，9.7mmol)于1，2-二 氯乙烷(50mL)中的混合物加热至80℃，持续4小时。额外添加5.0当量 的盐酸三甲基锡并将混合物加热总计48小时。然后将混合物冷却至室 温，用HCl(2N，40mL)猝灭并用1，2-二氯乙烷稀释。分离有机层，用 Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。通过硅胶快速柱层析用二氯甲烷∶甲醇(9∶1) 洗脱纯化残余物以得到4-氯-5-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-2-甲氧 基-苯甲酸(723mg)。NMR(CDCl₃)，δ，8.82(1H，s)，7.94(1H，s)，7.81 (1H，s)，7.20(1H，s)，3.90(3H，s)。

步骤38C.1：4-氯-5-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-2-甲氧基-苯甲酸(替代合成法)

将N₂鼓泡通过含有5-羧基-2-氯-4-甲氧基-苯基硼酸(460.8mg，2.0 mmol)和5-溴-2-三氟甲基-异烟腈1-1(478mg，1.9mmol)的THF(8mL) 和水(2mL)的溶液，持续10分钟。在N₂气氛下添加K₃PO₄(1.2g，5.7 mmol)、t-Bu₃P.HBF₄(82.7mg，0.28mmol)和Pd₂dba₃(91.0mg，0.1 mmol)。将混合物密封，在室温下搅拌3小时并用乙酸乙酯稀释。分离 有机层，用盐水洗涤，用MgSO₄干燥，过滤并浓缩。通过硅胶快速柱 层析用含10％MeOH的二氯甲烷洗脱纯化残余物以得到4-氯-5-(4-氰基 -6-三氟甲基-吡啶-3-基)-2-甲氧基-苯甲酸(301mg)。

相似地，由5-羧基-2-氯-苯基硼酸和5-溴-2-三氟甲基-异烟腈1-1根 据上述程序制备4-氯-5-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-苯甲酸。

步骤38D：4-氯-5-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-2-甲氧基-N-(2-甲氧基-苯基)-N-甲基-苯甲酰胺

向2-甲氧基-N-甲基苯胺(27.7mg，0.2mmol)与Et₃Al(196μL，1.9 M于甲苯中，0.2mmol)于1，2-二氯乙烷(1mL)中的混合物(在N₂气氛下 于50℃预热10分钟)中添加4-氯-5-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-2-甲 氧基-苯甲酸甲酯(50mg，0.14mmol)。将混合物密封于N₂气氛中并在 80℃下加热16小时。冷却至室温后，将混合物用2N HCl(5mL)猝灭并 用1，2-二氯乙烷稀释。分离有机层并浓缩。将残余物通过反相制备 LCMS纯化以得到4-氯-5-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-2-甲氧基 -N-(2-甲氧基-苯基)-N-甲基-苯甲酰胺38-1(4.9mg)。MS[M+H]⁺475.9； t_R＝5.91min。(方法3)

实施例39

4-氯-5-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-N-(2，6-二甲基-苯基)-2-甲氧基 -N-甲基-苯甲酰胺

步骤39A：4-氯-2-甲氧基-5-(6-三氟甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰氯

在N₂下，向含有4-氯-5-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-2-甲氧基- 苯甲酸(步骤38C或38C.1，436mg，1.2mmol)的搅拌二氯甲烷溶液(5 mL)中添加2滴DMF然后添加乙二酰氯(128μL，1.5mmol)。在室温下 将混合物搅拌2小时并浓缩以得到呈固体状的4-氯-2-甲氧基-5-(6-三氟 甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰氯，该物质未经进一步纯化即用于下一步骤。

相似地，由4-氯-5-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-苯甲酸(步骤 38C.1)制备4-氯-5-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰氯。

步骤39B：4-氯-5-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-N-(2，6-二甲基-苯基)-2-甲氧基-苯甲酰胺

向DCM(0.5mL)中的4-氯-2-甲氧基-5-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶 -3-基)-苯甲酰氯(70mg，0.19mmol)中添加三乙胺(39μL，0.28mmmol) 和2，6-二甲基苯胺(28μL，0.22mmol)。将混合物在室温下搅拌12小时 并通过制备TLC板用含乙酸乙酯(30％)的己烷洗脱纯化以得到4-氯 -5-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-N-(2，6-二甲基-苯基)-2-甲氧基-苯甲 酰胺(55.0mg)。MS[M+H]⁺460.2；t_R＝2.85min。(方法1)

步骤39C：4-氯-5-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-N-(2，6-二甲基-苯基)-2-甲氢基-N-甲基-苯甲酰胺

向无水DMF(0.5mL)中的4-氯-5-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3- 基)-N-(2，6-二甲基-苯基)-2-甲氧基-苯甲酰胺(55.0mg，0.12mmol)中添 加NaH(9.6mg，0.32mmol)和碘甲烷(0.15mL，0.24mmol)。将混合物 在室温下搅拌过夜，用0.5mL MeOH和2滴三氟乙酸猝灭，并通过反相 制备LCMS纯化以得到4-氯-5-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-N-(2，6- 二甲基-苯基)-2-甲氧基-N-甲基-苯甲酰胺39-1(8.3mg)。MS[M+H]⁺471.1；t_R＝6.25min。(方法3)

根据上述程序制备以下化合物，其中在某些情况下，由于可使用 N-甲基胺故不需步骤39C。

  实施例   R   MS(M+H)⁺  t_R(min)   HPLC方法   39-1   2，6-二甲基-苯基   474.1   6.25   3   39-2   2-甲氧基羰基-苯基   504.2   5.82   3   39-3   2，6-二甲氧基-苯基   506.1   5.81   3   39-4   2-氟-6-甲氧基-苯基   494.2   6.03   3   39-5   5-氟-2-甲氧基-苯基   494.2   6.02   3

  实施例   R   MS(M+H)⁺  t_R(min)   HPLC方法   39-6   2，6-二氟-苯基   482.2   6.10   3   39-7   苯基   446.1   5.91   3   39-8   5-氯-2-甲氧基羰基-苯基-   538.1   6.24   3   39-9   2-(2，2，2-三氟-乙氧基)-苯基   544.2   6.18   3   39-10   2-甲氧基-6-甲基-苯基   490.2   6.10   3   39-11   5-氟-2-甲基-苯基   478.1   6.17   3   39-12   2-噁唑-5-基-苯基   513.1   5.53   3   39-13   3-甲氧基-吡啶-2-基   477.1   6.85   2   39-14   吡啶-2-基   447.2   5.33   3   39-15   苄基   460.3   6.11   3   39-16   2-氟-苄基   478.3   6.17   3   39-17   2-甲氧基-苄基   490.3   6.20   3   39-18   3-甲氧基-苄基   490.3   6.11   3   39-19   2-(2-二甲基氨基-乙氧基)-苄基   547.3   6.02   3   39-20   4-甲氧基-吡啶-3-基   477.3   5.01   3   39-21   3-甲基-吡啶-2-基   461.2   5.29   3   39-22   苯并噻唑-2-基   503.1   6.39   3   39-23   6-甲氧基-吡啶-2-基   477.1   5.98   3

实施例40

4-氯-3-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-N-甲基-N-{2-[2-(5-氧代-4，5-二 氢-1H-[1，2，4]三唑-3-基)-乙氧基]-苯基}-苯甲酰胺

步骤40A：4-氯-3-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-N-甲基-N-{2-[2-(5-氧代-4，5-二氢-1H-[1，2，4]三唑-3-基)-乙氧基]-苯基}-苯甲酰胺

向含有4-氯-3-(4-氰基-6-三氟甲基吡啶3-基)-N-[2-(3-羟基-丙氧 基)-苯基]-N-甲基-苯甲酰胺9-4(304.0mg，0.62mmol)的二氯甲烷(5.0 mL)的搅拌溶液中添加戴斯-马丁过碘烷(263.2mg，0.62mmol)。将混 合物在室温下搅拌2小时。将固体滤出并浓缩所得溶液以得到醛中间 体，将该醛中间体再溶于t-BuOH(9.0mL)中，然后在0℃-5℃下添加水 (3mL)和NH₂NH₂(20.5μL，0.65mmol)。在室温下再搅拌30分钟后， 在10℃下将混合物用NaOCN(64.5mg，0.99mmol)和乙酸(71.7μL， 1.24mmol)处理并在相同温度下再搅拌2小时。添加10％漂白剂溶液 (0.37mL，0.62mmol)并将混合物在室温下搅拌2天。用水稀释混合物， 用乙酸乙酯萃取并通过制备TLC板用含5％MeOH的二氯甲烷洗脱纯 化以得到4-氯-3-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-N-甲基-N-{2-[2-(5-氧 代-4，5-二氢-1H-[1，2，4]三唑-3-基)-乙氧基]-苯基}-苯甲酰胺40-1(63.4 mg)。MS[M+H]⁺543.2；t_R＝6.46min。(方法2)

实施例41

4-氯-3-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-N-{2-[2-(3-甲基磺酰基-脲基)- 乙氧基]-苯基}-N-甲基-苯甲酰胺

步骤41A：4-氯-3-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-N-{2-[2-(3-甲基磺酰基-脲基)-乙氧基]-苯基}-N-甲基-苯甲酰胺

向3-(2-{[4-氯-3-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰基]-甲基- 氨基}-苯氧基)-丙酸11-4(272.9mg，0.54mmol)、CH₃SO₂NH₂(51.5mg， 0.54mmol)和K₂CO₃(224.4mg，1.63mmol)于二噁烷(4.0mL)中的混合 物中添加二苯基磷酰基叠氮化物(141μL，0.65mmol)。在85℃下，将 混合物加热3小时，用水稀释，用NaHSO₄水溶液酸化至pH 3，然后用 乙酸乙酯萃取。然后，将有机溶液干燥，浓缩并通过制备TLC板用含 4％MeOH的二氯甲烷洗脱纯化以得到4-氯-3-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶 -3-基)-N-{2-[2-(3-甲基磺酰基-脲基)-乙氧基]-苯基}-N-甲基-苯甲酰胺 41-1(20.5mg)。MS[M+H]⁺596.3；t_R＝7.29min。(方法2)

实施例42

4-氯-5-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-N-(2-甲氧基-苯基)-N-甲基 -2-[2-(2-氧代-吡咯烷-1-基)-乙氧基]-苯甲酰胺

步骤42A：4-氯-5-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-N-(2-甲氧基-苯基)-N-甲基-2-[2-(2-氧代-吡咯烷-1-基)-乙氧基]-苯甲酰胺

根据实施例21的步骤21A至步骤21G制备4-氯-5-(4-氰基-6-三氟甲 基-吡啶-3-基)-N-(2-甲氧基-苯基)-N-甲基-2-[2-(2-氧代-吡咯烷-1-基)- 乙氧基]-苯甲酰胺42-1。MS：573.3(M+H)⁺，t_R＝5.36min。(方法3)

相似地制备以下化合物：

  实施例   -烃基-   -R₅  MS   (M+H)⁺  t_R(min)   HPLC   方法   42-1   -CH₂CH₂-   2-氧代-吡咯烷-1-基   573.3   5.36   3   42-2   -CH₂CH₂-   吗啉-4-基   575.1   9.00   3   42-3   -CH₂CH₂-   咪唑-1-基   556.0   5.25   3   42-4   -CH₂CH₂-   吡啶-2-基   568.7   5.84   3   42-5   -CH₂CH₂-   4-甲基-4，5-二氢噻唑-5-   基   587.4   5.94   3   42-6   -CH₂CH₂CH₂-   吡啶-2-基   581.6   8.38   3   42-7   -CH₂CH₂CH₂-   1H-吡唑-4-基   570.2   5.56   3   42-8   -CH₂CH₂O-   吡啶-2-基   583.2   6.32   3   42-9   -CH₂CH₂CH₂-   吡啶-4-基   581.5   5.96   3   42-10   -CH₂CH₂CH₂-   吡咯-1-基   569.4   6.92   3   42-11   -CH₂CH₂CH₂-   咪唑-1-基   570.2   5.61   3

  实施例   -烃基-   -R₅  MS   (M+H)⁺  t_R(min)   HPLC   方法   42-12   -CH₂CH₂CH₂-   吡唑-1-基   570.2   6.08   3   42-13   -CH₂CH₂CH₂-   1，2，4-三唑-1-基   571.2   5.65   3   42-14   -CH₂CH₂CH₂-   1-甲基-1H-吡唑-3-基   584.3   5.99   3   42-15   -CH₂CH₂CH₂O-   吡啶-2-基   597.1   8.67   2   42-16   -CH₂CH₂-   NH₂  505.3   5.77   3   42-17   -CH₂CH₂-   NHMe   519.3   5.58   3   42-18   -CH₂CH₂(NH₂)   CH₂-   OH   535.3   5.38   3

实施例43

4-{5-氯-4-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-2-[(2-甲氧基-苯基)-甲基-氨 基甲酰基]-苯氧基}-丁酸乙酯

步骤43A：4-{5-氯-4-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-2-[(2-甲氧基-苯基)-甲基-氨基甲酰基]-苯氧基}-丁酸乙酯

向乙醇(1mL)中的4-{5-氯-4-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-2-[(2- 甲氧基-苯基)-甲基-氨基甲酰基]-苯氧基}-丁酸中添加10滴SOCl₂。将混 合物在室温下搅拌24小时。通过反相制备LCMS纯化粗物质以得到 4-{5-氯-4-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-2-[(2-甲氧基-苯基)-甲基-氨 基甲酰基]-苯氧基}-丁酸乙酯43-1(12.2mg)。MS：[M+H]⁺576.3； t_R＝6.33min。(方法3)

实施例44

{5-氯-4-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-2-[(2-甲氧基-苯基)-甲基-氨基 甲酰基]-苯基}-乙酸

步骤44A：5-溴-4-氯-2-氟-N-(2-甲氧基-苯基)-N-甲基-苯甲酰胺

在0℃下，将2-甲氧基-N-甲基苯胺(7.4g，53.8mmol)和三乙胺(10.9 g，107.7mmol)添加至DCM(200mL)中的5-溴-4-氯-2-氟-苯甲酰氯(步 骤21D，11.7g，43.1mmol)中。然后使混合物升温至室温并浓缩。将 混合物在水和乙酸乙酯中分层。分离有机层，用NaHSO₄溶液、水和盐 水洗涤，并干燥。过滤并浓缩后，将残余物通过硅胶快速柱层析用含 乙酸乙酯(50％)的己烷洗脱纯化以得到5-溴-4-氯-2-氟-N-(2-甲氧基-苯 基)-N-甲基-苯甲酰胺(12.5g)。MS：[M+H]⁺374.0/372.0；t_R＝2.70min。 (方法1)

步骤44B：2-{4-溴-5-氯-2-[(2-甲氧基-苯基)-甲基-氨基甲酰基]-苯基}-丙二酸二甲酯

将t-BuOK(7.23g，64.5mmol)添加至无水DMF(60mL)中的丙二 酸二甲酯(8.52g，7.3mL，64.5mmol)中。将混合物在90℃下加热10 分钟以形成相应钠盐，在N₂下将该钠盐添加至含有5-溴-4-氯-2-氟 -N-(2-甲氧基-苯基)-N-甲基-苯甲酰胺(3.0g，8.1mmol)的DMF(40mL) 溶液中。在搅拌下于80℃将混合物加热16小时，用乙酸乙酯稀释，用 水和盐水洗涤并用MgSO₄干燥。将滤液浓缩并进行硅胶柱层析用含乙 酸乙酯(20％)的己烷洗脱以得到呈淡黄色油状的2-{4-溴-5-氯-2-[(2-甲 氧基-苯基)-甲基-氨基甲酰基]-苯基}-丙二酸二甲酯(1.4g)。MS： [M+H]⁺487.9/486.0；t_R＝2.82min。(方法1)

步骤44C：2-{4-溴-5-氯-2-[(2-甲氧基-苯基)-甲基-氨基甲酰基]-苯基}-乙酸

在60℃下在THF(20mL)与水(2mL)的混合物中将2-{4-溴-5-氯 -2-[(2-甲氧基-苯基)-甲基-氨基甲酰基]-苯基}-丙二酸二甲酯(1.4g，2.8 mmol)与LiOH.H₂O(0.7g，16.7mmol)的混合物搅拌24小时，然后用1N HCl酸化至pH 4。用乙酸乙酯萃取混合物。然后用水和盐水洗涤乙酸 乙酯层，并用MgSO₄干燥。然后浓缩滤液并通过硅胶快速柱层析用含 10％MeOH的DCM洗脱纯化以得到2-{4-溴-5-氯-2-[(2-甲氧基-苯基)- 甲基-氨基甲酰基]-苯基}-乙酸(427mg)。MS：[M+H]⁺413.9/412.0； t_R＝2.60min。(方法1)

步骤44D：{4-溴-5-氯-2-[(2-甲氧基-苯基)-甲基-氨基甲酰基]-苯基}-乙酸2-三甲基硅烷基-乙酯

向含有2-{4-溴-5-氯-2-[(2-甲氧基-苯基)-甲基-氨基甲酰基]-苯基}- 乙酸(427mg，1.0mmol)和2-三甲基硅烷基乙醇(183mg，1.5mmol)的 DCM(10mL)溶液中添加DMAP(18.9mg，0.15mmol)和DCC(320mg， 1.5mmol)。将混合物在室温下搅拌24小时，浓缩，然后通过硅胶柱层 析用含乙酸乙酯(20％)的己烷洗脱直接纯化以得到{4-溴-5-氯-2-[(2-甲 氧基-苯基)-甲基-氨基甲酰基]-苯基}-乙酸2-三甲基硅烷基-乙酯(520 mg)。MS：(M-CH₂CH₂)⁺487.9/486.0；t_R＝3.34min。(方法1)

步骤44E：[5-氯-2-[(2-甲氧基-苯基)-甲基-氨基甲酰基]-4-(4，4，5，5-四甲基[1，3，2]二氧硼烷-2-基)-苯基]-乙酸2-三甲基硅烷基-乙酯

根据实施例2的步骤2D由相应{4-溴-5-氯-2-[(2-甲氧基-苯基)-甲基 -氨基甲酰基]-苯基}-乙酸2-三甲基硅烷基-乙酯(520mg)获得[5-氯 -2-[(2-甲氧基-苯基)-甲基-氨基甲酰基]-4-(4，4，5，5-四甲基[1，3，2]二氧硼 烷-2-基)-苯基]-乙酸2-三甲基硅烷基-乙酯(570mg)。MS：[M+H]⁺560.2； t_R＝3.45min。(方法1)

步骤44F：{5-氯-4-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-2-[(2-甲氢基-苯基)-甲基-氨基甲酰基]-苯基}-乙酸

由[5-氯-2-[(2-甲氧基-苯基)-甲基-氨基甲酰基]-4-(4，4，5，5-四甲基 [1，3，2]二氧硼烷-2-基)-苯基]-乙酸2-三甲基硅烷基-乙酯(570mg)和5-溴 -2-三氟甲基-异烟腈1-1(305mg)根据实施例38的步骤38C.1获得{5-氯 -4-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-2-[(2-甲氧基-苯基)-甲基-氨基甲酰 基]-苯基}-乙酸2-三甲基硅烷基-乙酯(615mg)。将粗物质再溶于THF (10mL)中并添加四丁基氟化铵(1M于THF中，3mL)。将混合物在室 温下搅拌1小时，用1N HCl(2mL)酸化并用乙醚萃取。然后用水、盐 水洗涤乙醚层，并用MgSO₄干燥。将滤液浓缩并通过硅胶快速柱层析 用含10％MeOH的DCM洗脱纯化以得到{5-氯-4-(4-氰基-6-三氟甲基- 吡啶-3-基)-2-[(2-甲氧基-苯基)-甲基-氨基甲酰基]-苯基}-乙酸44-1(246 mg)。MS：[M+H]⁺504.0；t_R＝7.54min。(方法2)

实施例45

4-氯-3-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-N-甲基-N-{2-[2-(1H-四唑-5- 基)-乙氧基]-苯基}-苯甲酰胺

步骤45A：3-(2-甲基氨基-苯氧基)-丙腈

使2-甲基氨基酚(0.74g，6.0mmol)、Triton B(60μL，40％于水中) 和丙烯腈(4.0mL，60mmol)的溶液回流16小时。用乙酸乙酯稀释混合 物。然后用水和盐水洗涤有机层，并用MgSO₄干燥。过滤并浓缩后， 通过硅胶快速柱层析用含20％乙酸乙酯的己烷洗脱纯化残余物以得到 呈棕色油状的3-(2-甲基氨基-苯氧基)-丙腈(4.0g)。[M+H]⁺177.1； t_R＝0.715min。(方法1)

步骤45B：甲基-{2-[2-(1H-四唑-5-基)乙氧基]-苯基}-胺

向3-(2-甲基氨基-苯氧基)-丙腈(1.55g，8.8mmol)和三丁基叠氮化 锡(3.6mL，13.2mmol)的甲苯(30mL)溶液中添加三乙基铝(9.3mL， 17.6mmol，1.9M于甲苯中)。将混合物在80℃下加热16小时。用水(100 mL)和乙酸乙酯(200mL)稀释混合物。分离并移除乙酸乙酯层。所得甲 基-{2-[2-(1H-四唑-5-基)-乙氧基]-苯基}-胺留于水溶液中并未经纯化即 用于下一步骤。[M+H]⁺220.1；t_R＝0.388min。(方法1)

步骤45C：4-氯-3-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-N-甲基-N-{2-[2-(1H-四唑-5-基)-乙氧基]-苯基}-苯甲酰胺

将甲基-{2-[2-(1H-四唑-5-基)-乙氧基]-苯基}-胺的搅拌水溶液用饱 和NaHCO₃碱化并用乙腈(40mL)稀释。逐滴添加乙腈(20mL)中的4-氯 -5-(6-三氟甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰氯(步骤39A，2.9g，8.8mmol)。将 混合物搅拌2小时、酸化并浓缩以移除乙腈。用乙酸乙酯萃取经浓缩的 混合物。然后用水和盐水洗涤有机层，并用MgSO₄干燥。过滤并浓缩 后，通过硅胶快速柱层析用含2％MeOH的DCM洗脱纯化残余物，然后 通过硅胶快速柱层析用含50％乙酸乙酯的己烷洗脱进一步纯化，以产 生4-氯-3-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-N-甲基-N-{2-[2-(1H-四唑-5- 基)-乙氧基]-苯基}-苯甲酰胺45-1(3.2g)。[M+H]⁺528.2；t_R＝3.43min。 (方法3)

相似地，制备4-氯-5-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-2-甲氧基-N- 甲基-N-{2-[2-(1H-四唑-5-基)-乙氧基]-苯基}-苯甲酰胺45-2。[M+H]⁺558.1；t_R＝7.82min。(方法2)

实施例46

4-氯-5-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-2-(3-异噁唑-4-基-丙氧基)-N-(2- 甲氧基苯基)-N-甲基-苯甲酰胺

步骤46A：4-氯-5-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-2-(3-异噁唑-4-基-丙氧基)-N-(2-甲氧基苯基)-N-甲基-苯甲酰胺

向4-氯-5-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-2-羟基-N-(2-甲氧基-苯 基)-N-甲基-苯甲酰胺(30mg，0.065mmol)的THF(700μL)溶液中添加 3-异噁唑-4-基-丙-1-醇(9mg，0.071mmol)、三苯基膦(26mg，0.089 mmol)和DIAD(20μL，0.098mmol)。将混合物在室温下搅拌过夜，浓 缩，用1mL MeOH稀释并通过制备HPLC纯化以得到4-氯-5-(4-氰基-6- 三氟甲基-吡啶-3-基)-2-(3-异噁唑-4-基-丙氧基)-N-(2-甲氧基苯基)-N- 甲基-苯甲酰胺46-1。MS：571.2(M+H)⁺，t_R＝6.12min。(方法3)

相似地制备以下化合物。

  实施例   -烃基-   -R₅  MS   (M+H)⁺  t_R(min)   HPLC方法   46-1   -CH₂CH₂CH₂-   异噁唑-4-基   571.2   6.12   3   46-2   -CH₂CH₂-   2-甲氧基苯基   596.5   6.97   3   46-3   -CH₂CH₂-   吡嗪-2-基   568.4   5.71   3   46-4   -CH₂CH₂CH₂-   1，3-二氧代-1，3-二氢-   异吲哚-2-基   649.3   6.39   3

实施例47

2-(2-乙酰基氨基-乙氧基)-4-氯-5-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-N-(2- 甲氧基-苯基)-N-甲基-苯甲酰胺

步骤47A：2-(2-乙酰基氨基-乙氧基)-4-氯-5-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-N-(2-甲氧基-苯基)-N-甲基-苯甲酰胺

向2-(2-氨基-乙氧基)-4-氯-5-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-N-(2- 甲氧基-苯基)-N-甲基-苯甲酰胺(30mg，0.06mmol)的DCM(1mL)溶液 中添加乙酸酐(11μL，0.12mmol)和DIPEA(16μL，0.09mmol)。将混 合物在室温下搅拌过夜，浓缩，用1mL MeOH稀释并通过制备HPLC 纯化，得到2-(2-乙酰基氨基-乙氧基)-4-氯-5-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶 -3-基)-N-(2-甲氧基-苯基)-N-甲基-苯甲酰胺。MS：547.1(M+H)⁺， t_R＝7.48min。(方法2)

相似地制备以下化合物。

  实施   例   -烃基-   -R₅  MS(M+H)⁺  t_R(min)   HPLC方法   47-1   -CH₂CH₂-   -NHC(＝O)CH₃  547.1   7.48   2   47-2   -CH₂CH₂-   -N(CH₃)C(＝O)CH₃  561.0   7.19   2   47-3   -CH₂CH₂CH₂-   -NHC(＝O)CH₃  561.1   7.28   2   47-4   -CH₂CH₂-   -NHC(＝O)CF₃  601.1   8.54   2   47-5   -CH₂CH₂-   -N(CH₃)C(＝O)CF₃  615.0   8.78   2

实施例48

4-氯-5-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-2-(2-甲烷磺酰基氨基-乙氧 基)-N-(2-甲氧基-苯基)-N-甲基-苯甲酰胺

步骤48A：4-氯-5-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-2-(2-甲烷磺酰基氨基-乙氧基)-N-(2-甲氧基-苯基)-N-甲基-苯甲酰胺

向2-(2-氨基-乙氧基)-4-氯-5-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-N-(2- 甲氧基-苯基)-N-甲基-苯甲酰胺(30mg，0.06mmol)的DCM(1mL)溶液 中添加甲烷磺酰氯(7μL，0.09mmol)和DIPEA(16μL，0.09mmol)。将 混合物在室温下搅拌过夜，浓缩，用1mL MeOH稀释并通过制备HPLC 纯化，得到4-氯-5-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-2-(2-甲烷磺酰基氨 基-乙氧基)-N-(2-甲氧基-苯基)-N-甲基-苯甲酰胺48-1。MS：583.0 (M+H)⁺，t_R＝7.61min。(方法2)

相似地制备4-氯-5-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-2-[2-(甲烷磺酰 基-甲基-氨基)-乙氧基]-N-(2-甲氧基-苯基)-N-甲基-苯甲酰胺48-2。MS： 597.1(M+H)⁺，t_R＝7.91min。(方法2)

实施例49

(S)-1-(3-{5-氯-4-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-2-[(2-甲氧基-苯基)-甲 基-氨基甲酰基]-苯氧基}-丙基)-吡咯烷-2-甲酸

步骤49A：(S)-1-(3-羟基-丙基)-吡咯烷-2-甲酸叔丁酯

向(S)-吡咯烷-2-甲酸叔丁酯(350mg，2.04mmol)的CH₃CN(5mL) 溶液中添加3-溴-丙-1-醇(268μL，3.06mmol)和K₂CO₃(844mg，6.12 mmol)。将混合物在85℃下加热过夜，浓缩并通过硅胶柱层析 (DCM/MeOH＝95/5)纯化以得到444mg(S)-1-(3-羟基-丙基)-吡咯烷-2- 甲酸叔丁酯。MS：230.2(M+H)⁺，t_R＝0.99min。(方法1)

步骤49B：(S)-1-(3-{5-氯-4-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-2-[(2-甲氧基-苯基)-甲基-氨基甲酰基]-苯氧基}-丙基)-吡咯烷-2-甲酸

向溶于THF(700μL)中的4-氯-5-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3- 基)-2-羟基-N-(2-甲氧基-苯基)-N-甲基-苯甲酰胺醇(30mg，0.065mmol) 中添加(S)-1-(3-羟基-丙基)-吡咯烷-2-甲酸叔丁酯(18mg，0.078mmol)、 三苯基膦(26mg，0.1mmol)和DIAD(20μL，0.1mmol)。将混合物在 室温下搅拌过夜，浓缩，用1mL MeOH稀释并通过制备HPLC纯化。 将所得(S)-1-(2-{5-氯-4-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-2-[(2-甲氧基- 苯基)-甲基-氨基甲酰基]-苯氧基}-乙基)-吡咯烷-2-甲酸叔丁酯用含 50％TFA的DCM(2mL)处理，在室温下搅拌4小时并浓缩得到 (S)-1-(3-{5-氯-4-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-2-[(2-甲氧基-苯基)-甲 基-氨基甲酰基]-苯氧基}-丙基)-吡咯烷-2-甲酸48-1。MS：617.4(M+H)⁺， t_R＝4.44min。(方法3)

相似地制备以下化合物。

  实施   例   -烃基-   -R₅  MS(M+H)⁺  t_R(min)   HPLC方法   49-1   -CH₂CH₂CH₂-   (S)-吡咯烷1-基-2-甲酸   617.4   4.44   3   49-2   -CH₂CH₂-   (R)-吡咯烷1-基-2-甲酸   603.4   3.85   3   49-3   -CH₂CH₂-   (S)-吡咯烷1-基-2-甲酸   603.3   3.81   3   49-4   -CH₂CH₂CH₂-   (R)-吡咯烷1-基-2-甲酸   617.4   4.39   3

实施例50

(S)-1-[3-(2-{[4-氯-3-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰基]-甲 基-氨基}-苯氧基)-丙基]-吡咯烷-2-甲酸

步骤50A：(S)-1-[3-(2-{[4-氯-3-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰基]-甲基-氨基}-苯氧基)-丙基]-吡咯烷-2-甲酸

向溶于THF(700μL)中的4-氯-3-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3- 基)-N-(2-羟基-苯基)-N-甲基-苯甲酰胺(30mg，0.069mmol)中添加 (S)-1-(3-羟基-丙基)-吡咯烷-2-甲酸叔丁酯(18mg，0.078mmol)、三苯 基膦(26mg，0.1mmol)和DIAD(20μL，0.1mmol)。将混合物在室温下 搅拌过夜，浓缩，用1mL MeOH稀释并通过制备HPLC纯化。将所得 (S)-1-[3-(2-{[4-氯-3-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰基]-甲基- 氨基}-苯氧基)-丙基]-吡咯烷-2-甲酸叔丁酯用含50％TFA的DCM(2 mL)处理，在室温下搅拌4小时并浓缩，得到(S)-1-[3-(2-{[4-氯-3-(4-氰 基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰基]-甲基-氨基}-苯氧基)-丙基]-吡咯 烷-2-甲酸50-1。MS：587.4(M+H)⁺，t_R＝4.34min。(方法3)

相似地制备以下化合物。

  实施   例   -烃基-   -R₅  MS(M+H)⁺  t_R(min)   HPLC方法   50-1   -CH₂CH₂CH₂-   (S)-吡咯烷1-基-2-甲酸   587.4   4.34   3   50-2   -CH₂CH₂-   (R)-吡咯烷1-基-2-甲酸   573.1   5.92   2   50-3   -CH₂CH₂-   (S)-吡咯烷1-基-2-甲酸   573.1   5.93   2   50-4   -CH₂CH₂CH₂-   (R)-吡咯烷1-基-2-甲酸   587.4   4.33   3

实施例51

4-氯-3-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-N-甲基-N-{2-[2-(吡啶-2-基 氧基)-乙氧基]-苯基}-苯甲酰胺

步骤51A：甲烷磺酸2-(吡啶-2-基氧基)-乙酯

将2-(吡啶-2-基氧基)-乙醇(100mg，0.72mmol)溶于DCM(2mL) 中并添加MsCl(72μL，0.94mmol)和DIPEA(192μL，1.08mmol)。将 混合物在室温下搅拌过夜，用EtOAc稀释，用水、饱和NaHCO₃和盐水 洗涤，干燥(Na₂SO₄)，过滤并在真空中浓缩以得到114mg甲烷磺酸2-(吡 啶-2-基氧基)-乙酯，该物质未经进一步纯化即用于下一步骤。

步骤51B：4-氯-3-(4-氧基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-N-甲基-N-{2-[2-(吡啶-2-基氧基)-乙氧基]-苯基}-苯甲酰胺

向溶于DMF(500μL)中的4-氯-3-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3- 基)-N-(2-羟基-苯基)-N-甲基-苯甲酰胺(50mg，0.12mmol)中添加甲烷 磺酸2-(吡啶-2-基氧基)-乙酯(30mg，0.14mmol)和K₂CO₃(50mg，0.36 mmol)。将混合物在室温下搅拌过夜，然后在40℃下加热1小时。过滤 并用MeOH稀释后，通过制备HPLC纯化混合物，得到4-氯-3-(4-氰基-6- 三氟甲基-吡啶-3-基)-N-甲基-N-{2-[2-(吡啶-2-基氧基)-乙氧基]-苯基}- 苯甲酰胺51-1。MS：553.2(M+H)⁺，t_R＝5.2min。(方法3)

实施例52

3-(2-{[4-氯-3-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰基]-甲基-氨 基}-苯氧基)-2，2-二甲基-丙酸

步骤52A：4-氯-3-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-N-[2-(3-羟基-2，2-二甲基-丙氧基)-苯基]-N-甲基-苯甲酰胺

将4-氯-3-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-N-(2-羟基-苯基)-N-甲基 -苯甲酰胺(200mg，0.46mmol)溶于DMF(2mL)中并添加3-溴-2，2-二甲 基-丙-1-醇(72μL，0.94mmol)和K₂CO₃(192μL，1.08mmol)。将混合 物在65℃下搅拌24小时，冷却至室温，用EtOAc稀释，用水和盐水洗 涤，干燥(Na₂SO₄)、过滤并浓缩。硅胶柱层析(含1％MeOH的DCM， 梯度至含5％MeOH的DCM)，然后制备HPLC得到4-氯-3-(4-氰基-6-三 氟甲基-吡啶-3-基)-N-[2-(3-羟基-2，2-二甲基-丙氧基)-苯基]-N-甲基-苯 甲酰胺。MS：518.3(M+H)⁺，t_R＝6.16min。(方法3)

步骤52B：3-(2-{[4-氯-3-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰基]-甲基-氨基}-苯氧基)-2，2-二甲基-丙酸

在0℃下，向CH₃CN(200μL)中的过碘酸(68mg，0.30mmol)中添 加氧化铬(VI)(0.7mg，0.0073mmol)并将混合物在0℃下搅拌15分钟。 添加溶于CH₃CN(200μL)中的4-氯-3-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3- 基)-N-[2-(3-羟基-2，2-二甲基-丙氧基)-苯基]-N-甲基-苯甲酰胺(29mg， 0.056mmol)的溶液，并使混合物升温至室温。在室温下2小时后，将 混合物过滤，用CH₃CN冲洗，浓缩，溶于MeOH中并通过制备HPLC纯 化得到3-(2-{[4-氯-3-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰基]-甲基- 氨基}-苯氧基)-2，2-二甲基-丙酸52-1。MS：532.3(M+H)⁺，t_R＝3.65min。 (方法3)

实施例53

N-{2-[2-(2-氨基-乙基氨基甲酰基)-乙氧基]-苯基}-4-氯-3-(4-氰基 -6-三氟甲基-吡啶-3-基)-N-甲基苯甲酰胺

步骤52A：N-{2-[2-(2-氨基-乙基氨基甲酰基)-乙氧基]-苯基}-4-氯-3-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-N-甲基苯甲酰胺

向3-(2-{[4-氯-3-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-苯甲酰基]-甲基- 氨基}-苯氧基)-丙酸11-4(50mg，0.10mmol)与(2-氨基-乙基)-氨基甲酸 叔丁酯(51.5mg，0.54mmol)于DMF(500μL)中的混合物中添加EDC1 (22mg，0.12mmol)、HOBt(16mg，0.12mmol)和DIPEA(34μl，0.19 mmol)。将混合物在室温下搅拌48小时，用MeOH(500μL)稀释并通过 制备HPLC纯化以得到{2-[3-(2-{[4-氯-3-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3- 基)-苯甲酰基]-甲基-氨基}-苯氧基)-丙酰基氨基]-乙基}-氨基甲酸叔丁 酯。用含50％TFA的DCM(1mL)处理2小时后，然后在真空中浓缩， 获得N-{2-[2-(2-氨基-乙基氨基甲酰基)-乙氧基]-苯基}-4-氯-3-(4-氰基- 三氟甲基-吡啶-3-基)-N-甲基-苯甲酰胺53-1。MS[M+H]⁺546.1；t_R＝5.66 min。(方法2)

相似地制备4-氯-3-(4-氰基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-N-甲基 -N-[2-(3-氧代-3-哌嗪-1-基-丙氧基)-苯基]-苯甲酰胺53-2。MS[M+H]⁺572.1；t_R＝5.89min。(方法2)

应理解，尽管本文已出于说明目的描述了本发明的具体实施方案， 但可在不偏离本发明的精神和范围的情况下进行各种改进。因此，本 发明仅受所附权利要求书的限制。