一种中药菝葜组合物的化学成分分离方法及其临床应用

摘要

本发明涉及一种中药菝葜组合物的化学成分分离方法及其临床应用。包括中药菝葜组合物水提浸膏制备，菝葜组合物水提浸膏的乙酸乙酯提取和对乙酸乙酯提取物的硅胶柱色谱法分离、测定。本分离方法获得二氢山柰酚，二氢山柰酚3－O－α－L－鼠李糖苷，3，3，5，5，7－五羟基二氢黄酮3－O－α－L－鼠李糖苷。其中3，3，5，5，7－五羟基二氢黄酮3－O－α－L－鼠李糖苷首次从菝葜组合物中分离得到。

说明书

技术领域

本发明属于药用植物化学成分的分离方法，具体涉及一种中药菝葜组合物的化学成分分离方法及其临床应用。

背景技术

菝葜组合物主要由中药材菝葜和土茯苓经水提醇沉制的浸膏加适量辅料制得。临床主要用于治疗银屑病；虽然临床应用多年，疗效较好，但对其药物成分一直不甚明确。

菝葜(Smilax china L.)为百合科菝葜属菝葜.的根状茎；(菝葜叶也入药)。

现有技术报道，菝葜根含菝葜素(Smilaxin)，异内杞甙(Isoengeletin)，齐墩果酸(Oleanolic acid)，山柰素(Kaempferide)，二氢山柰素(Dihydrokaempferide)，β-谷甾醇(β-Sitosterol)，β-谷甾醇葡萄糖甙(β-Sitosteroylglucoside)，薯蓣皂甙的原皂甙元A(Prosapogenin A of dioscin)，薯蓣皂甙(Dioscin)，纤细薯蓣皂甙(Gracillin)，甲基原纤细薯蓣皂甙(Methylprotogracillin)，甲基原薯蓣皂甙(Methylprotodioscin)等。

其性味甘，温；归足厥阴、少阴经。其药理作用有利尿、解毒和抗锥虫作用。功用主治，祛风利湿，解毒消肿。根状茎：治风湿关节痛，跌打损伤，胃肠炎，痢疾，消化不良，糖尿病，乳糜尿，白带，癌症；叶：外用治痈疖疔疮，烫伤。

土茯苓(RHIZOMA SMILACIS GLABRAE)为百合科植物光叶菝葜Smilax glabra Roxb.的干燥根茎。

现有技术报道，土茯苓含菝葜皂甙类(Smilax saponins)，尚含提果皂甙元(Tigogenin)和鞣质等。其性味甘、淡，平，归肝、胃经；功能与主治除湿，解毒，通利关节。用于湿热淋浊，带下，痈肿，瘰疬，疥癣，梅毒及汞中毒所致的肢体拘挛，筋骨疼痛。

发明内容

本发明的目的，是通过研究中药菝葜组合物水提浸膏的乙酸乙酯提取和对乙酸乙酯提取物的硅胶柱色谱法分离、测定；探索菝葜组合物的化学活性成分。

本发明是通过如下技术方案实施的：

研究一种中药菝葜组合物的化学成分分离方法，其特征是主要包括中药菝葜组合物水提浸膏制备，菝葜组合物水提浸膏的乙酸乙酯提取和对乙酸乙酯提取物的硅胶柱色谱法分离、测定：

(1)菝葜组合物水提浸膏制备

中药材菝葜与土茯苓，按1∶1重量比混合，加煎煮量水煎煮三次，第一次3h，第二、三次各2h，合并煎煮液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.16～1.20/60℃，加入乙醇至含醇量为55～60％，静置，滤过，回收乙醇，浓缩成相对密度为1.27～1.30/60℃的菝葜组合物浸膏，备用；

(2)菝葜组合物水提浸膏的乙酸乙酯提取

将菝葜组合物的水提浸膏分散在水中呈混悬态，进行乙酸乙酯提取，其重量配比是：

菝葜组合物浸膏∶乙酸乙酯＝1∶10；

水浴回流提取2次，每次1h，提取液浓缩至干，获得菝葜组合物的水提浸膏的乙酸乙酯提取物，备用；

(3)对菝葜组合物的水提浸膏的乙酸乙酯提取物的硅胶柱色谱法分离、测定分作如下步骤

①拌样

重量比：菝葜组合物浸膏乙酸乙酯提取物重量∶无水硅胶＝1∶3

无水硅胶加入到无水乙醇溶解的菝葜组合物浸膏乙酸乙酯提取物溶液中，水浴加热，挥干无水乙醇，使菝葜组合物浸膏乙酸乙酯提取物样品吸附在硅胶中，作为总样，备用；

②湿法上柱

初始流动相组成为容量比，乙酸乙酯∶环己烷＝1∶3；总样以湿润量的初始流动相拌匀，加入柱径100mm，柱高1000mm的玻璃层析柱中；

③室温下梯度洗脱

洗脱速度设置为250ml/0.5h，常压，室温下洗脱

开始使用初始流动相，收集洗脱液，分别标号存放；

每250ml收集一瓶，水浴回流浓缩，并点薄层板检查；

至59瓶后换1号流动相：组成为容量比，乙酸乙酯∶环己烷＝1∶2；

至133瓶后换2号流动相：组成为容量比，乙酸乙酯∶环己烷＝1∶1；

至216瓶后换3号流动相：组成为容量比，乙酸乙酯∶环己烷＝2∶1；

至248瓶后换4号流动相：组成为容量比，3号流动相∶95％乙醇＝10∶1；

至275瓶后换5号流动相：组成为容量比，3号流动相∶95％乙醇＝5∶1；

④结晶

通过薄层层析检测，将成分基本相同的成分合并，其中有41～68号，221～229号和230～238号；

静置后，41～46号洗脱液析出淡黄色晶体，抽滤将固体物质取出，命名为化合物I；

静置后，221～229号洗脱液析出白色粉末状物质，抽滤将固体物质取出，命名为化合物II；

静置后，230～238号析出白色粉末状物质，抽滤将固体物质取出，命名为化合物III；

⑤化合物鉴定

采用理化常数，紫外，红外，氢核磁共振光谱和碳核磁共振光谱，对分离所得化合物分别测定，确定结构，名称；

⑥综合化合物上述信息，本分离方法获得二氢山奈酚，二氢山柰酚3-O-α-L-鼠李糖苷，3，3，5，5，7-五羟基二氢黄酮3-O-α-L-鼠李糖苷。其中3，3，5，5，7-五羟基二氢黄酮3-O-α-L-鼠李糖苷首次从菝葜中分离得到。

一种中药菝葜组合物的应用，其特征是在制备治疗银屑病药物制剂中的应用，包括颗粒剂，片剂，胶囊剂或丸剂中的应用。

本发明的优点是：

菝葜组合物水提浸膏的乙酸乙酯提取和对乙酸乙酯提取物的硅胶柱色谱法分离、测定简捷易行，重显性好。

附图说明

图1是；化合物二氢山柰酚的红外图谱；

图2是；化合物二氢山柰酚的紫外图谱；

图3是化合物二氢山柰酚的¹H-NMR谱图；

图4是化合物二氢山柰酚的¹H-NMR谱图(局部放大)；

图5是化合物二氢山柰酚的¹H-NMR谱图(局部放大)；

图6是化合物二氢山柰酚的¹³C-NMR谱图；

图7是化合物二氢山柰酚的¹³C-NMR谱图(局部放大)；

图8是化合物二氢山柰酚的¹³C-NMR谱图(局部放大)；

图9是化合物二氢山柰酚3-O-α-L-鼠李糖苷的红外图谱；

图10是化合物二氢山柰酚3-O-α-L-鼠李糖苷的紫外图谱；

图11是化合物二氢山柰酚3-O-α-L-鼠李糖苷的¹H-NMR谱图；

图12是化合物二氢山柰酚3-O-α-L-鼠李糖苷的¹H-NMR谱图(局部放大)；

图13是化合物二氢山柰酚3-O-α-L-鼠李糖苷的¹H-NMR谱图(局部放大)；

图14是化合物二氢山柰酚3-O-α-L-鼠李糖苷的¹H-NMR谱图(局部放大)；

图15是化合物二氢山柰酚3-O-α-L-鼠李糖苷的¹³C-NMR谱图；

图16是化合物二氢山柰酚3-O-α-L-鼠李糖苷的¹³C-NMR谱图(局部放大)；

图17是化合物二氢山柰酚3-O-α-L-鼠李糖苷的¹³C-NMR谱图(局部放大)；

图18是化合物二氢山柰酚3-O-α-L-鼠李糖苷的¹³C-NMR谱图(局部放大)；

图19是化合物3，3，5，5，7-五羟基二氢黄酮3-O-α-L-鼠李糖苷的红外图谱；

图20是化合物3，3，5，5，7-五羟基二氢黄酮3-O-α-L-鼠李糖苷的紫外图谱；

图21是化合物3，3，5，5，7-五羟基二氢黄酮3-O-α-L-鼠李糖苷的¹H-NMR谱图；

图22是化合物3，3，5，5，7-五羟基二氢黄酮3-O-α-L-鼠李糖苷的¹H-NMR谱图(局部放大)；

图23是化合物3，3，5，5，7-五羟基二氢黄酮3-O-α-L-鼠李糖苷的¹H-NMR谱图(局部放大)；

图24是化合物3，3，5，5，7-五羟基二氢黄酮3-O-α-L-鼠李糖苷的¹³C-NMR谱图

图25是化合物3，3，5，5，7-五羟基二氢黄酮3-O-α-L-鼠李糖苷的¹³C-NMR谱图(局部放大)；

图26是化合物3，3，5，5，7-五羟基二氢黄酮3-O-α-L-鼠李糖苷的¹³C-NMR谱图(局部放大)；

图27是化合物3，3，5，5，7-五羟基二氢黄酮3-O-α-L-鼠李糖苷的¹³C-NMR谱图(局部放大)。

具体实施方式

以下结合附图和实施例，对本申请作进一步阐述：

图1是化合物二氢山柰酚的红外图谱；图中显示红外吸收峰。

图2是化合物二氢山柰酚的紫外图谱；图中显示紫外吸收谱带。

图3是化合物二氢山柰酚的¹H-NMR谱图；图中显示0～12ppm段的图谱。

图4是化合物二氢山柰酚的局部放大¹H-NMR谱图；图中显示4.5～7.5ppm段的图谱。.

图5是化合物二氢山柰酚的局部放大¹H-NMR谱图；图中显示9.0～12.5ppm段的图谱。

图6是化合物二氢山柰酚的¹³C-NMR谱图；图中显示10～210ppm段的图谱。

图7是化合物二氢山柰酚的局部放大¹³C-NMR谱图；图中显示130～220ppm段的图谱。

图8是化合物二氢山柰酚的局部放大¹³C-NMR谱图；图中显示65～135ppm段的图谱。.

图9是化合物二氢山柰酚3-O-α-L-鼠李糖苷的红外图谱；图中显示红外吸收峰。

图10是化合物二氢山柰酚3-O-α-L-鼠李糖苷的紫外图谱；图中显示紫外吸收谱带。

图11是化合物二氢山柰酚3-O-α-L-鼠李糖苷的¹H-NMR谱图；图中显示0～12ppm段的图谱。

图12是化合物二氢山柰酚3-O-α-L-鼠李糖苷的局部放大¹H-NMR谱图；图中显示0～3.7ppm段的图谱。.

图13是化合物二氢山柰酚3-O-α-L-鼠李糖苷的局部放大¹H-NMR谱图；图中显示4～7.5ppm段的图谱。

图14是化合物二氢山柰酚3-O-α-L-鼠李糖苷的局部放大¹H-NMR谱图；图中显示9.1～12.2ppm段的图谱。

图15是化合物二氢山柰酚3-O-α-L-鼠李糖苷的¹³C-NMR谱图；图中显示10～210ppm段的图谱。

图16是化合物二氢山柰酚3-O-α-L-鼠李糖苷的的局部放大¹³C-NMR谱图；图中显示67～82ppm段的图谱。.

图17是化合物二氢山柰酚3-O-α-L-鼠李糖苷的的局部放大¹³C-NMR谱图；图中显示92～132ppm段的图谱。

图18是化合物二氢山柰酚3-O-α-L-鼠李糖苷的的局部放大¹³C-NMR谱图；图中显示155～195ppm段的图谱。

图19是化合物3，3，5，5，7-五羟基二氢黄酮3-O-α-L-鼠李糖苷的红外图谱；图中显示红外吸收峰。

图20是化合物3，3，5，5，7-五羟基二氢黄酮3-O-α-L-鼠李糖苷的紫外图谱；图中显示紫外吸收谱带。

图21是化合物3，3，5，5，7-五羟基二氢黄酮3-O-α-L-鼠李糖苷的¹H-NMR谱图；图中显示0～12.5ppm段的图谱。

图22是化合物3，3，5，5，7-五羟基二氢黄酮3-O-α-L-鼠李糖苷的局部放大¹H-NMR谱图；图中显示4.1～7.0ppm段的图谱。

图23是化合物3，3，5，5，7-五羟基二氢黄酮3-O-α-L-鼠李糖苷的局部放大¹H-NMR谱图；图中显示0.6～3.6ppm段的图谱。

图24是化合物3，3，5，5，7-五羟基二氢黄酮3-O-α-L-鼠李糖苷的¹³C-NMR谱图；图中显示10～210ppm段的图谱。.

图25是化合物3，3，5，5，7-五羟基二氢黄酮3-O-α-L-鼠李糖苷的局部放大¹³C-NMR谱图；图中显示140～198ppm段的图谱。

图26是化合物3，3，5，5，7-五羟基二氢黄酮3-O-α-L-鼠李糖苷的局部放大¹³C-NMR谱图；图中显示77～120ppm段的图谱。

图27是化合物3，3，5，5，7-五羟基二氢黄酮3-O-α-L-鼠李糖苷的局部放大¹³C-NMR谱图；图中显示65～76ppm段的图谱。

实施例1

1试剂与仪器

试剂名称        生产商或规格型号

甲醇(分析纯)    天津市科密欧化学试剂有限公司

氯仿            莱阳市经济技术开发区精密化工厂

乙酸乙酯        烟台三和化学试剂有限公司

环己烷          天津市福晨化学试剂厂

无水乙醇        天津市福晨化学试剂厂

石油醚          天津市福晨化学试剂厂

冰醋酸          国药集团化学试剂有限公司

甲醇(色谱纯)

仪器名称                  生产商或规格型号

VARIAN型制备液相          美国瓦里安有限公司

AVANCE-400型核磁共振仪    瑞士布鲁克公司

ZF-I型紫外灯              上海顾村电光仪器厂

UV-2550型紫外分光光度计； 日本岛津公司

X-4型显微熔点测定仪       北京泰克仪器有限公司

DK-98-1型电热恒温氺浴锅   天津市泰斯特仪器有限公司

R-1002N型旋转蒸发仪       郑州长城科工贸有限公司

循环水式多用真空泵        郑州长城科工贸有限公司

PE FT1730红外色谱仪    Perkin-Elmer公司

硅胶柱层析             烟台化学工业研究所，200-300目；100-200目

硅胶薄层层析           烟台市化学工业研究所；

凝胶柱层析             Pharmacia公司

聚酰胺                 镇江市长江化工厂

电子天平AR2130         美国奥豪斯公司

2.展开剂的选择：

根据文献和经验选CHCl₃∶EtOAc∶MeOH∶H₂O＝15∶40∶15∶10。

将四种溶剂按上述比例混合，静止4h，取下层。

3.菝葜组合物水提浸膏制备

(1)菝葜组合物水提浸膏制备

中药材菝葜、土茯苓，按1∶1重量比混合，加常规量水煎煮三次，第一次3h，第二、三次各2h，合并煎煮液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.16～1.20(60℃)，加入乙醇至含醇量为55～60％，静置，滤过，回收乙醇，浓缩成相对密度为1.27～1.30(60℃)的浸膏，备用；

4.提取：

将菝葜组合物浸膏加入2000ml圆底烧瓶中，加配量乙酸乙酯，在水浴100℃下回流提取两次，分别将提取液在旋转蒸发仪上浓缩至完全干燥，分别称重。

a..拌样

用无水乙醇溶解样品20g，剩余约1g做对照品。

以重量比(样品总重∶硅胶)1∶3拌样，即称取100～200目无水硅胶61g，加入到溶解的样品中，水浴加热，挥干无水乙醇，使样品成粉末状，作为总样。

b.湿法上柱：

称取200～300目无水硅胶343g，以乙酸乙酯∶环己烷＝1∶3作为初始流动相。加入总样，应慢慢加入，再放一层脱脂棉来保护柱面。

c.梯度洗脱：

洗脱速度约250ml/30min，常压，室温下洗脱(约20-25℃)。

开始使用初始流动相，收集洗脱液，分别标号存放；

每250ml收集一瓶，水浴回流浓缩，并点薄层板检查；

至59瓶后换1号流动相：组成为容量比，乙酸乙酯∶环己烷＝1∶2；

至133瓶后换2号流动相：组成为容量比，乙酸乙酯∶环己烷＝1∶1；

至216瓶后换3号流动相：组成为容量比，乙酸乙酯∶环己烷＝2∶1；

至248瓶后换4号流动相：组成为容量比，3号流动相∶95％乙醇＝10∶1；

至275瓶后换5号流动相：组成为容量比，3号流动相∶95％乙醇＝5∶1；

d.结晶

通过薄层层析检测，将成分基本相同的成分合并，其中有41～68号，221～229号和230～238号；

静置后，41～46号洗脱液析出淡黄色晶体，抽滤将固体物质取出，命名为化合物I；

静置后，221～229号洗脱液析出白色粉末状物质，抽滤将固体物质取出，命名为化合物II；

静置后，230～238号析出白色粉末状物质，抽滤将固体物质取出，命名为化合物III；

e.化合物鉴定

采用理化常数，紫外，红外，氢核磁共振光谱和碳核磁共振光谱，对分离所得化合物分别测定，确定结构，名称；

①.化合物I的结构鉴定

淡黄色粉末状结晶，mp257-260℃，易溶于甲醇，乙醇等溶剂。在365nm波长的紫外光下有淡绿色荧光。

UV显示该化合物有两个吸收带，吸收带I最大吸收波长291.5nm，吸收带II最大吸收波长216.5nm，由图谱形状可初步推断其为黄酮类化合物。

IR显示该化合物给出了3432，1635，1517，1450cm^-1等吸收峰，由此可以推断该化合物中含羟基(形成氢键)，羰基(共轭)，苯环(共轭)等基团。

在¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)图谱中，可以观察到：一个形成氢键的羟基质子信号，δ：11.91(1H，s，C₅-OH)；三个酚羟基质子信号δ：10.83(1H，s，C₇-OH)，9.57(1H，s，C_4′-OH)，5.77(1H，d，C₃-OH)；一套形成A₂B₂耦合系统的芳香氢质子信号，δ：7.31(2H，d，J＝8.5Hz，H-2′and H-6′)，6.78(2H，d，J＝8.5Hz，H-3′and H-5′)；两个间位的芳香氢质子信号，δ：5.91(1H，d，J＝2.04Hz，H-8)，5.85(1H，d，J＝2.04Hz，H-6)；另外可以观察到的氢质子信号：δ：5.75(1H，d，J＝11.44Hz，H-2)，4.58(1H，dd，J₁＝5.92Hz，J₂＝11.44Hz，3-H)。

在C-NMR(400MHz，DMSO-d6)图谱中，可以观察到以下碳信号，

δ：82.85(C-2)，71.43(C-3)，197.86(C-4)，163.28(C-5)，95.99(C-6)，166.76C-7)，94.97(C-8)，162.55(C-9)，100.44(C-1O)，129.42(C-1′)，127.53(C-2′C-6′)，157.71(C-4′)，114.87(C-3′and C-5′)。

以上光谱数据与文献^[15]报道的二氢山柰酚数据一致，故化合物II为二氢山柰酚

综合化合物上述图谱信息可以判断该化合物为二氢山柰酚，光谱数据与文献^[15]报道二氢山柰酚的NMR数据一致。其结构式为：

二氢山柰酚

②.化合物II的结构鉴定

白色粉末状固体，mp323-325℃，溶于甲醇，DMSO，不溶于丙酮，氯仿，乙酸乙酯。在365nm波长的紫外光下有淡蓝色荧光。

UV显示该化合物有两个吸收带，吸收带I最大吸收波长295.5nm，吸收带II最大吸收波长217.5nm，由图谱形状可初步推断其为黄酮类化合物。

IR显示该化合物给出了3426，1625，1520，1465cm^-1等吸收峰，由此可以推断该化合物中含羟基(形成氢键)，羰基(共轭)，苯环(共轭)等基团。

在¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)图谱中，可以观察到：一个形成氢键的羟基质子信号，δ：11.77(1H，s，C₅-OH)；两个酚羟基质子信号δ：10.97(1H，s，C₇-OH)，9.45(1H，s，C_4′-OH)；一套形成A₂B₂耦合系统的芳香氢质子信号，δ：7.31(2H，d，J＝8.5Hz，H-2′and H-6′)6.77(2H，d，J＝8.5Hz，H-3′and H-5′)；两个间位的芳香氢质子信号，δ：5.91(1H，d，J＝2.04Hz，H-8)，5.85(1H，d，J＝2.04Hz，H-6)；另外可以观察到的氢质子信号，δ：5.61(1H，d，J＝11.44Hz，2-H)，4.80(1H，d，，J＝11.44Hz，3-H)，与二氢山柰酚的氢谱数据基本相符，其中2-H的共振信号与二氢山柰酚相比，向低场位移了0.14ppm，说明在3位成醇苷，偶合常数为11.4Hz，表明两个质子为双直立反向偶合。¹H-NMRδ4.59(1H，br.s，1″-H)，1.09(3H，d，J＝6.1Hz，6-H)和¹³C-NMRδ17.63(6-C)的甲基信号为鼠李糖特征信号。以上光谱数据与文献^[15]报道的二氢山柰酚3-O-α-L-鼠李糖苷数据一致，故化合物II为二氢山柰酚3-O-α-L-鼠李糖苷，即黄杞苷。

在C-NMR(400MHz，DMSO-d6)图谱中，可以观察到以下碳信号，δ：80.04(C-2)，71.12(C-3)，192.86(C-4)，164.03(C-5)，96.21(C-6)，167.08C-7)，95.16(C-8)，162.58(C-9)，100.18(C-1O)，127.80(C-1′)，125.53(C-2′and C-6′)，157.25(C-4′)，114.83(C-3′and C-5′)。

综合化合物上述图谱信息可以判断该化合物为二氢山奈酚3-O-α-L-鼠李糖苷，光谱数据与文献^[15]报道二氢山柰酚3-O-α-L-鼠李糖苷的NMR数据一致。其结构式为：

二氢山柰酚3-O-α-L-鼠李糖苷

③.化合物III的结构鉴定

白色粉末状固体，mp294-298℃，溶于甲醇，DMSO，不溶于丙酮，氯仿，乙酸乙酯。在365nm波长的紫外光下有淡蓝色荧光。

UV显示该化合物有两个吸收带，吸收带I最大吸收波长293.5nm，吸收带II最大吸收波长217.5nm，由图谱形状可初步推断其为黄酮类化合物。

IR显示该化合物给出了3436，1622，1521，1461cm^-1等吸收峰，由此可以推断该化合物中含羟基(形成氢键)，羰基(共轭)，苯环(共轭)等基团。

在¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)图谱中，可以观察到：一个形成氢键的羟基质子信号，δ：11.77(1H，s，C₅-OH)；四个酚羟基质子信号δ：10.96，9.47，8.92，8.91；一套形成AB₂耦合系统的芳香氢质子信号，δ：6.49(2H，s，H-2′and H-6′)，6.85(1H，s，H-4′)；两个间位的芳香氢质子信号，δ：5.96(1H，d，J＝2.04，H-8)，5.92(1H，d，J＝2.04，H-6)；另外可以观察到氢质子信号，δ：5.61(1H，d，J＝11.44Hz，2-H)，4.80(1H，d，J＝11.44Hz，3-H)。其中2-H的共振信号与二氢山柰酚相比，向低场位移了0.14ppm，说明在3位成醇苷，偶合常数为11.4Hz，表明两个质子为双直立反向偶合。¹H-NMRδ4.59(1H，br.s，1″-H)，1.09(3H，d，J＝6.1Hz，6-H)和¹³C-NMRδ17.63(6-C)的甲基信号为鼠李糖特征信号。

在C-NMR(400MHz，DMSO-d6)图谱中，可以观察到以下碳信号，δ：

79.92(C-2)，71.20(C-3)，193.06(C-4)，163.94(C-5)，96.15(C-6)，167.01C-7)，95.15(C-8)，162.45(C-9)，100.28(C-1O)，126.34(C-1′)，114.5(C-2′and C-6′)，117.56(C-4′)，145.55(C-3′and C-5′)。

综合化合物上述图谱信息可以判断该化合物为3，3，5，5，7-五羟基二氢黄酮3-O-α-L-鼠李糖苷，其结构是为：

3，3，5，5，7-五羟基二氢黄酮3-O-α-L-鼠李糖苷

④综合化合物上述信息，本分离方法获得二氢山柰酚，二氢山柰酚3-O-α-L-鼠李糖苷，3，3，5，5，7-五羟基二氢黄酮3-O-α-L-鼠李糖苷。其中3，3，5，5，7-五羟基二氢黄酮3-O-α-L-鼠李糖苷首次从菝葜组合物中分离得到。

在制备治疗银屑病药物制剂中的应用，包括颗粒剂，片剂，胶囊剂或丸剂中的应用。

应用举例：制造颗粒剂

菝葜和土茯苓二味，加水煎煮三次，第一次3小时，第二、三次各2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度约为1.20，加入乙醇至含醇量为55～60％，静置，滤过，回收乙醇，浓缩成相对密度为1.24～126的浸膏。取浸膏0.8份、蔗糖粉3份、糊精1份，混匀，制成颗粒，干燥，即得。

其余剂型，按制剂常规方法即可。

在治疗时，根据病情，遵医嘱。