一种枸杞多糖提取物及其药用用途

摘要

本发明公开了一种枸杞多糖提取物，其特征在于酸性多糖含量为85％－95％，中性多糖为1％－5％。本发明采用水提醇沉、超滤和离子交换有机结合的方法，提取得到枸杞多糖提取物；药理实验表明，本发明枸杞多糖具有很好的治疗肿瘤的作用。

说明书

技术领域

本发明涉及医药技术领域，具体涉及枸杞多糖及其药用用途。

背景技术

对中药多糖的研究始于50年代末，经过近年来对多糖不断的深入研究，对其作用又有了新的认识，它参与细胞的各种生命现象的调节，如免疫细胞间信息的传递和感受，与细胞表面的多糖体的介导密切相关，大量的药理和临床研究表明，多糖类化合物是一种免疫调节剂，它能激活免疫细胞，提高机体的免疫功能，而对正常细胞没有毒副作用，还具有抗肿瘤、降血糖、降血脂、抗炎、抗凝血、抗辐射、抗病毒等多方面的活性。多糖的免疫调节多糖对抗体的免疫调节作用，主要通过以下几种方式和途径，(1)激活巨噬细胞；(2)激活网状内皮系统(RES)；(3)激活T和B淋巴细胞；(4)激活补体许多植物多糖有激活补体的作用，补体蛋白上存在的识别点可识别多糖的结构。抗癌活性，抗癌活性是多糖类化合物所显示的重要生物活性。(1)增强机体免疫功能而发挥抗肿瘤作用；(2)诱生肿瘤坏死因子(TNF)；(3)改变细胞膜的生化特性；(4)抗自由基作用。(河北职工医学院学报第15卷第3期《植物多糖的药理研究概况》李建恒郑富稳)。大量的文献和专利报道枸杞多糖都具有很好的抗癌活性，作为中药的有效部位不应舍弃。但现有技术中保留的枸杞多糖是多糖中的全部，没有针对多糖进行深入的研究，特别是药效作用不是很好或很弱的部分进行深入的研究。

现有文献记载了多糖的提取分离和纯化方法，但大多数采用的柱层析的方法，而这种方法是无法工业化生产的，造成资源的巨大浪费。

发明内容

基于上述原因，我们通过科学的实验，确定枸杞多糖中酸性多糖和中性多糖是其药效活性较好的部分，将药效作用不好的碱性多糖去除，在尽量保留有效部位的基础上，将无效部位尽量去除，同时根据保留的有效部位的物质基础，采用超滤和离子交换有机结合的方法，得到枸杞多糖有效提取物。

本发明通过以下技术方案实现的。

一种枸杞子多糖提取物，其中酸性多糖含量为85％-95％，中性多糖为1％-5％。

其中优选的枸杞多糖提取物为酸性多糖90％-95％，中性多糖1％-3％。

一种枸杞子多糖提取物为活性成分制备的药物制剂。

一种枸杞子多糖提取物在制备治疗抗肿瘤药物中的应用。

一种枸杞子多糖提取物，其制备方法为：

(1)取枸杞子，加水提取，提取液浓缩，浓缩液加乙醇使含醇量达到40％-60％，静置，沉淀物加水溶解完全，过滤，滤液加乙醇使含醇量达到70％-80％，静置，沉淀物加水溶解完全，过滤，滤液加乙醇使含醇量达到80％-90％，静置，沉淀物，干燥，得到干燥物；

(2)取干燥物，用水溶解完全，用截取分子量为10000的超滤装置进行超滤，保留大于分子量10000的溶液，将溶液浓缩，浓缩液上阴离子交换树脂，保留洗脱液；

(3)洗脱液用截取分子量为500000的超滤装置进行草绿，保留小于分子量500000的溶液，浓缩，干燥，得到枸杞子多糖提取物。

注：上述离子交换树脂按照现有技术进行选择。

一、检测分析

多糖的检测分析

运用高效液相色谱法进行检测分析。

各种单糖标准品均为生化试剂，其它为分析试剂。

仪器：Beckman-332型高效液相色谱仪，岛津RID-6A示差折光检测器，色谱柱MICROSORB-MVTM86-700-C5NH25μm。

方法：取样品加乙醇沉淀，用高速离心仪进行离心，离心沉淀物用蒸馏水溶解后，进样20ul。

结果：见表1：

表1制剂中有效成分含量比较

结论：通过以上检测分析实验表明，本发明工艺具有实际意义。

二、药理实施例

实施例1

对气虚型大鼠肝肿瘤抑制作用

实验动物：大鼠，150g～180g，雌雄不分。(由沈阳药科大学中药药理教研室根据文献造成气虚模型)

实验药物：本发明各组枸杞多糖提取物(多糖类有效部位制备而成，北京药物药物开发有限公司实验室提供)；黄芪多糖粉针剂(山西中医研究院提供)；枸杞碱性多糖；生理盐水。

实验方法：取大鼠作W256的肝内接种，接种7天后，用戊巴比妥钠按35mg/kg的剂量腹腔注射麻醉，固定，剖腹暴露肝，测量肝上肿瘤表面最大径(a)和最小径(b)，按(a*b²)/2＝V(肿瘤体积)。分离胃、十二指肠动脉、肝总动脉和肝固有动脉，结扎胃、十二指肠动脉远端，以银夹阻断肝总动脉，于手术放大镜下在胃十二指肠动脉上切口并插入外径0.3mm导管后再送入肝固有动脉，然后按实验分组分别注入受试药物，给药剂量为12mg有效部位/kg，生理盐水等容不等量，术后拔管结扎胃十二指肠动脉，放开肝总动脉银夹，再缝合切口，将大鼠置于动物室待苏醒，继续饲养观察，手术后8天，按上法检测肿瘤体积，结果见表1：

表1本发明提取物对气虚型大鼠肝肿瘤抑制作用

与生理盐水组比较^*P＜0.05，^**P＜0.01

按上述方法，在进行实验，观察大鼠存活天数，见表2

表2大鼠存活天数比较

实施例2

物理、化学和生物因素均能诱发癌症，但人癌发病原因的80％-90％认为是环境化学物质引起的。

对二乙基亚硝胺(DENA)诱发大鼠肝癌的抑制

实验动物：大鼠30只，120g左右，雌雄不分。

实验药物：本本发明各组枸杞多糖提取物(多糖类有效部位制备而成，北京药物药物开发有限公司实验室提供)；黄芪多糖粉针剂(山西中医研究院提供)；枸杞碱性多糖；生理盐水。

实验方法：用含二乙基亚硝胺(DENA)的饮水喂养大鼠，36周得原发性肝癌，按照实施例1进行实验，实验结果见表3：

表3本发明提取物对肿瘤的抑制

与生理盐水组比较^*P＜0.05，^**P＜0.01

表4大鼠存活天数比较

三、制备实施例

实施例1

(1)取枸杞子，加水提取，提取液浓缩，浓缩液加乙醇使含醇量达到40％，静置，沉淀物加水溶解完全，过滤，滤液加乙醇使含醇量达到70％，静置，沉淀物加水溶解完全，过滤，滤液加乙醇使含醇量达到80％，静置，沉淀物，干燥，得到干燥物；

(2)取干燥物，用水溶解完全，用截取分子量为10000的超滤装置进行超滤，保留大于分子量10000的溶液，将溶液浓缩，浓缩液上阴离子交换树脂，保留洗脱液；

(3)洗脱液用截取分子量为500000的超滤装置进行草绿，保留小于分子量500000的溶液，浓缩，干燥，得到枸杞子多糖提取物。

注：上述离子交换树脂按照现有技术进行选择。

枸杞子多糖提取物，其特征在于酸性多糖含量为85％，中性多糖为5％。

枸杞子多糖提取物为活性成分制备的药物制剂。

枸杞子多糖提取物在制备治疗抗肿瘤药物中的应用。

实施例2

(1)取枸杞子，加水提取，提取液浓缩，浓缩液加乙醇使含醇量达到60％，静置，沉淀物加水溶解完全，过滤，滤液加乙醇使含醇量达到80％，静置，沉淀物加水溶解完全，过滤，滤液加乙醇使含醇量达到90％，静置，沉淀物，干燥，得到干燥物；

(2)取干燥物，用水溶解完全，用截取分子量为10000的超滤装置进行超滤，保留大于分子量10000的溶液，将溶液浓缩，浓缩液上阴离子交换树脂，保留洗脱液；

(3)洗脱液用截取分子量为500000的超滤装置进行草绿，保留小于分子量500000的溶液，浓缩，干燥，得到枸杞子多糖提取物。

注：上述离子交换树脂按照现有技术进行选择。

枸杞子多糖提取物，其特征在于酸性多糖含量为95％，中性多糖为1％。

枸杞子多糖提取物为活性成分制备的药物制剂。

枸杞子多糖提取物在制备治疗抗肿瘤药物中的应用。

实施例3

(1)取枸杞子，加水提取，提取液浓缩，浓缩液加乙醇使含醇量达到50％，静置，沉淀物加水溶解完全，过滤，滤液加乙醇使含醇量达到75％，静置，沉淀物加水溶解完全，过滤，滤液加乙醇使含醇量达到85％，静置，沉淀物，干燥，得到干燥物；

(2)取干燥物，用水溶解完全，用截取分子量为10000的超滤装置进行超滤，保留大于分子量10000的溶液，将溶液浓缩，浓缩液上阴离子交换树脂，保留洗脱液；

(3)洗脱液用截取分子量为500000的超滤装置进行草绿，保留小于分子量500000的溶液，浓缩，干燥，得到枸杞子多糖提取物。

注：上述离子交换树脂按照现有技术进行选择。

枸杞子多糖提取物，其特征在于酸性多糖含量为90％，中性多糖为1％。

枸杞子多糖提取物为活性成分制备的药物制剂。

枸杞子多糖提取物在制备治疗抗肿瘤药物中的应用。

实施例4

(1)取枸杞子，加水提取，提取液浓缩，浓缩液加乙醇使含醇量达到45％，静置，沉淀物加水溶解完全，过滤，滤液加乙醇使含醇量达到60％，静置，沉淀物加水溶解完全，过滤，滤液加乙醇使含醇量达到90％，静置，沉淀物，干燥，得到干燥物；

(2)取干燥物，用水溶解完全，用截取分子量为10000的超滤装置进行超滤，保留大于分子量10000的溶液，将溶液浓缩，浓缩液上阴离子交换树脂，保留洗脱液；

(3)洗脱液用截取分子量为500000的超滤装置进行草绿，保留小于分子量500000的溶液，浓缩，干燥，得到枸杞子多糖提取物。

注：上述离子交换树脂按照现有技术进行选择。

枸杞子多糖提取物，其特征在于酸性多糖含量为86％，中性多糖为4％。

枸杞子多糖提取物为活性成分制备的药物制剂。

枸杞子多糖提取物在制备治疗抗肿瘤药物中的应用。

实施例5

(1)取枸杞子，加水提取，提取液浓缩，浓缩液加乙醇使含醇量达到55％，静置，沉淀物加水溶解完全，过滤，滤液加乙醇使含醇量达到80％，静置，沉淀物加水溶解完全，过滤，滤液加乙醇使含醇量达到90％，静置，沉淀物，干燥，得到干燥物；

(2)取干燥物，用水溶解完全，用截取分子量为10000的超滤装置进行超滤，保留大于分子量10000的溶液，将溶液浓缩，浓缩液上阴离子交换树脂，保留洗脱液；

(3)洗脱液用截取分子量为500000的超滤装置进行草绿，保留小于分子量500000的溶液，浓缩，干燥，得到枸杞子多糖提取物。

注：上述离子交换树脂按照现有技术进行选择。

枸杞子多糖提取物，其特征在于酸性多糖含量为95％，中性多糖为3％。

枸杞子多糖提取物为活性成分制备的药物制剂。

枸杞子多糖提取物在制备治疗抗肿瘤药物中的应用。

实施例6

(1)取枸杞子，加水提取，提取液浓缩，浓缩液加乙醇使含醇量达到60％，静置，沉淀物加水溶解完全，过滤，滤液加乙醇使含醇量达到85％，静置，沉淀物加水溶解完全，过滤，滤液加乙醇使含醇量达到90％，静置，沉淀物，干燥，得到干燥物；

(2)取干燥物，用水溶解完全，用截取分子量为10000的超滤装置进行超滤，保留大于分子量10000的溶液，将溶液浓缩，浓缩液上阴离子交换树脂，保留洗脱液；

(3)洗脱液用截取分子量为500000的超滤装置进行草绿，保留小于分子量500000的溶液，浓缩，干燥，得到枸杞子多糖提取物。

注：上述离子交换树脂按照现有技术进行选择。

枸杞子多糖提取物，其特征在于酸性多糖含量为93％，中性多糖为2％。

枸杞子多糖提取物为活性成分制备的药物制剂。

枸杞子多糖提取物在制备治疗抗肿瘤药物中的应用。

实施例7

(1)取枸杞子，加水提取，提取液浓缩，浓缩液加乙醇使含醇量达到50％，静置，沉淀物加水溶解完全，过滤，滤液加乙醇使含醇量达到70％，静置，沉淀物加水溶解完全，过滤，滤液加乙醇使含醇量达到90％，静置，沉淀物，干燥，得到干燥物；

(2)取干燥物，用水溶解完全，用截取分子量为10000的超滤装置进行超滤，保留大于分子量10000的溶液，将溶液浓缩，浓缩液上阴离子交换树脂，保留洗脱液；

(3)洗脱液用截取分子量为500000的超滤装置进行草绿，保留小于分子量500000的溶液，浓缩，干燥，得到枸杞子多糖提取物。

注：上述离子交换树脂按照现有技术进行选择。

枸杞子多糖提取物，其特征在于酸性多糖含量为94％，中性多糖为1.5％。

枸杞子多糖提取物为活性成分制备的药物制剂。

枸杞子多糖提取物在制备治疗抗肿瘤药物中的应用。