1－(－D－吡喃葡萄糖基)－3－(4－环丙基苯基甲基)－4－卤代吲哚衍生物及其作为SGLT抑制剂的用途

摘要

本发明涉及式(I)的新颖吲哚衍生物或其药学上可接受的盐，其中，R

说明书

技术领域

本发明涉及新的吲哚衍生物，其具有作为在肠或肾脏中发现的钠依赖性葡萄糖转运子(sodium-dependent glucosetransporters)(SGLT)的抑制剂活性。

背景技术

膳食疗法与运动疗法在糖尿病的治疗中是必需的。当这些疗法不足以控制患者的病症时，使用胰岛素或抗糖尿病剂。  目前，所述抗糖尿病剂的实例包括双胍类、磺酰脲类、胰岛素敏化剂与α-葡萄糖苷酶抑制剂。然而，这些抗糖尿病剂具有各种副作用。例如：双胍类会引起乳酸酸中毒，磺酰脲类会引起严重低血糖，胰岛素敏化剂会造成水肿与心脏衰竭，及α-葡萄糖苷酶抑制剂会造成腹部胀气与下痢。在这些情形下，需要已排除这些副作用的新颖抗糖尿病剂。

近来，已有报告指出高血糖症出现在糖尿病初期与发展期中。此理论称为葡萄糖毒性理论。亦即，慢性高血糖症会降低胰岛素分泌与胰岛素敏感性，提高血浆中葡萄糖浓度，结果使得糖尿病自行恶化[参见Diabetologia，第28卷，第119页(1985)；Diabetes Care，第13卷，第610页(1990)，等等]。依据此理论，期望血浆中葡萄糖浓度的正常化中断上述自行恶化循环并可实现预防或治疗糖尿病。

考虑到其中一种治疗高血糖的方法为直接将过量葡萄糖排至尿中，以致能使血糖浓度正常化。例如，通过抑制出现在肾脏近曲小管中的钠依赖性葡萄糖转运子，可抑制在肾脏处的葡萄糖再吸收作用，从而促进排出葡萄糖至尿中并降低血糖浓度。事实上，  已证实，通过给糖尿病动物模型连续皮下注射SGLT抑制剂，根皮苷(phlorizin)，可恢复正常血糖浓度，且通过长期保持正常血糖浓度，即可改善胰岛素分泌与胰岛素抗性[参见Journal of Clinical Investigation，第79卷，第1510页(1987)；如上述文献，第80卷，第1037页(1987)；如上述文献，第87卷，第561页(1991)，等等]。

此外，通过长期以SGLT抑制剂治疗糖尿病动物模型，可改善该动物模型的胰岛素分泌应答与胰岛素敏感性而不会造成任何对肾脏的不良影响或血中电解质浓度不平衡，结果，预防糖尿病性肾脏病变及糖尿病性神经病变的发作与发展[参见Journal of Medicinal Chemistry，第42卷，第5311页(1999)；BritishJournal of Pharmacology，第132卷，第578页(2001)，等等]。

基于上述观点，期望SGLT抑制剂通过降低糖尿病患者血糖浓度而改善胰岛素分泌与胰岛素抗性，并预防糖尿病及糖尿病并发症的发作与发展。

WO 2006/035796揭示一种如下式的N-β-D-吡喃葡萄糖基含氮杂双环化合物：

上述化合物称为SGLT1和/或SGLT2抑制剂，且适用于预防和治疗糖尿病及相关疾病。

发明内容

本发明涉及式(I)的新吲哚衍生物或其药学上可接受的盐：

其中，R¹为氟或氯，且R²为氢或氟。

式(I的)化合物对哺乳动物肠与肾脏中所发现的SGLT具有抑制剂活性，且适用于治疗或预防糖尿病与糖尿病并发症，例如糖尿病性视网膜病变、糖尿病性神经病变、糖尿病性肾脏病变及伤口延迟愈合及相关疾病。

式(I的)化合物的药学上可接受的盐包括例如：与无机酸如：盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硫酸、硝酸、磷酸，等等形成的盐；或与有机酸如：  甲酸、乙酸、丙酸、草酸、丙二酸、琥珀酸、富马酸、马来酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸酸，等等形成的盐；或与酸性氨基酸如：天冬氨酸、谷氨酸，等等形成的盐。

此外，式(I的)化合物的药学上可接受的盐包括其分子内盐、水合物、溶剂合物或多晶型。

本发明的优选实施方案中，R²为氢。

优选吲哚部份为4-氟吲哚(即R¹为氟，且R²为氢)、4-氯吲哚(即R¹为氯，且R²为氢)、或4，6-二氟吲哚(即R¹与R²均为氟)。

本发明的优选化合物选自下列组：

4-氯-3-(4-环丙基苯基甲基)-1-(β-D-吡喃葡萄糖基)吲哚，

3-(4-环丙基苯基甲基)-4-氟-1-(β-D-吡喃葡萄糖基)吲哚，

4-氯-3-(4-环丙基苯基甲基)-6-氟-1-(β-D-吡喃葡萄糖基)吲哚，与

3-(4-环丙基苯基甲基)-4，6-二氟-1-(β-D-吡喃葡萄糖基)吲哚；

或其药学上可接受的盐。

该化合物特征为结合吲哚环上3-位的对环丙基苯基甲基与4-位的卤素原子(特别是氟或氯)。

本发明化合物具有作为钠依赖性葡萄糖转运子的抑制剂活性，并展现优异的降低血糖效果。

本发明化合物还在副作用和/或商业活力上展现有利特性。

期望本发明化合物适用于治疗、预防或延迟糖尿病(第1型与第2型糖尿病，等等)、糖尿病并发症(如：糖尿病性视网膜病变、糖尿病性神经病变、糖尿病性肾脏病变)、餐后高血糖、伤口延迟愈合、胰岛素抗性、高血糖、高胰岛素血症、血中脂肪酸浓度提高、血中甘油浓度提高、高血脂症、肥胖症、高三酸甘油酯血症、X症候群、动脉粥样硬化、或高血压的发展或发作。

具体实施方式

本发明化合物或其药学上可接受的盐可经口或经肠道外给药，且可以合适的药物制剂的形式来使用。  口服用的合适药物制剂包括例如：  固体制剂，如片剂、粒剂、胶囊剂与粉剂；或溶液制剂；悬浮液制剂；乳液制剂；等等。肠道外给药用的合适制剂包括例如：栓剂；使用注射用蒸馏水、生理盐水或葡萄糖水溶液的注射制剂或静脉滴注制剂；与吸入制剂。

本文的药物组合物将包含约0.01毫克/千克至约100毫克/千克体重(优选为约0.01毫克/千克至约50毫克/千克，更优选约0.01毫克/千克至约30毫克/千克)活性成份每剂量单位，例如：片剂、胶囊剂、粉剂、注射剂、栓剂、茶匙剂(teaspoonful)，等等，且投药剂量可为约0.01毫克/千克/天至约100毫克/千克/天(优选为约0.01毫克/千克/天至约50毫克/千克/天，且更优选为约0.01毫克/千克/天至约30毫克/千克/天)。治疗本文所说明病变的方法还可使用包含本文所定义的任何化合物和药学上可接受的载体的药物组合物来进行。该剂型将包含约0.01毫克/千克至约100毫克/千克(优选约0.01毫克/千克至约50毫克/千克，及更优选约0.01毫克/千克至约30毫克/千克)活性成份，且可制成适用于所选择给药模式的任何形式。然而，该剂量可依给药途径、个体需求、所治疗病症严重性及所使用化合物等因素而变化。可采用每日给药法或定期投药法(post periodic dosing)。

若需要时，式(I的)化合物可与一种或多种其他抗糖尿病剂、抗高血糖剂和/或治疗其他疾病用制剂组合使用。该化合物与这些其他制剂可以相同剂型给药或以分开的口服剂型或经注射给药。

其他抗糖尿病剂与抗高血糖剂的实例包括胰岛素、促胰岛素分泌素、胰岛素敏化剂或其他具有不同于SGLT抑制机制的抗糖尿病剂。具体地，这些制剂的实例为双胍类、磺酰脲类、α-葡萄糖苷酶抑制剂、PPARγ激动剂(例如噻唑烷二酮化合物)、PPARα/γ双重激动剂、PPARpan激动剂、二肽基肽酶IV(DPP4)抑制剂、米格列奈(mitiglinide)、那格列奈(nateglinide)、瑞格列奈(repaglinide)、胰岛素、胰高血糖素样肽-1(GLP-1)及其受体激动剂、PTP1B抑制剂、肝醣磷酸化酶抑制剂、RXR调节剂、葡萄糖6-磷酸酯酶抑制剂、GPR40激动剂/拮抗剂、GPR119激动剂、GPR120激动剂、葡萄糖激酶(GK)活化剂与果糖1，6-双磷酸酯酶(FBPase)抑制剂。

治疗其他疾病用制剂的实例包括抗肥胖剂、抗高血压剂、抗血小板剂、抗动脉粥样硬化剂与降血脂剂。

可与本发明化合物任意组合使用的抗肥胖剂包括β₃肾上腺素激动剂、脂酶抑制剂、血清素(与多巴胺)再吸收抑制剂、甲状腺激素受体-β药物、减食欲剂、NPY拮抗剂、瘦素类似物、MC4激动剂与CB1拮抗剂。

可与本发明化合物任意组合使用的抗血小板剂包括阿昔单抗(abciximab)、噻氯匹定(ticlopidine)、埃替非巴(eptifibatide)、双嘧达莫(dipyridamole)、  阿斯匹林(aspirin)、  阿那格雷(anagrelide)、替罗非班(tirofiban)与氯吡格雷(clopidogrel)。

可与本发明化合物任意组合使用的抗高血压剂包括ACE抑制剂、钙拮抗剂、α-阻断剂、利尿剂、中枢作用剂、血管紧张素-II拮抗剂、β-阻断剂、肾素抑制剂与血管肽酶抑制剂。

可与本发明化合物任意组合使用的降血脂剂包括MTP抑制剂、HMG CoA还原酶抑制剂、鲨烯合成酶抑制剂、鲨烯环氧化酶抑制剂、纤维酸衍生物、ACAT抑制剂、脂氧化酶抑制剂、胆固醇吸收抑制剂、回肠Na⁺/胆酸共转运子抑制剂、LDL受体活性上调节剂、胆酸螯合剂、烟碱酸及其衍生物、CETP抑制剂与ABC A1上调节剂。

若需要时，式(I的)化合物可与用于治疗糖尿病并发症的制剂组合使用。这些制剂包括例如：PKC抑制剂、醛糖还原酶抑制剂和/或ACE抑制剂。

如本领域公知，在剂量和方案上，上述各种制剂可以与式(I的)化合物相同剂型或不同剂型使用。

这些制剂的剂量可依例如年龄、体重、患者病症、给药途径与剂型变化。

这些药物组合物可以例如片剂、胶囊剂、粒剂或粉剂的剂型口服给药，或以注射制剂的形式肠道外给药，或鼻内给药，或为透皮贴剂的形式给药给包括人类、猿和狗的哺乳动物。

本发明式(I的)化合物或其药学上可接受的盐可由下式(II)的化合物去保护而制备：

其中，R³为羟基的保护基，且其他符号则如上述相同定义，若需要时，接着可将所得化合物转化成药学上可接受的盐。

相信式(II)的化合物为新颖的且形成本发明另一方面。

式(II)的化合物中，羟基的保护基可选自羟基常用的保护基，这些保护基的实例包括苄基、烷酰基如乙酰基、以及烷基甲硅烷基如三甲基甲硅烷基、三乙基甲硅烷基与叔丁基二甲基甲硅烷基。此外，羟基的保护基可与相邻的羟基一起形成缩醛或甲硅烷基缩醛。这些保护基的实例包括亚烷基如：亚异丙基与亚仲丁基、亚苄基与二烷基亚甲硅基如二叔丁基亚甲硅基。优选地，R³为烷酰基，如乙酰基。

去保护的方法可依据要除去的保护基的种类进行，且可采用常用的方法去保护，如还原法、水解法、酸处理法与氟化物处理法。

例如，当要除去苄基时，该去保护可通过下列方法进行(1)使用钯催化剂(例如钯/碳与氢氧化钯)，于氢气氛下，于合适惰性溶剂(例如甲醇、乙醇与乙酸乙酯)中进行催化还原；(2)以脱烷基化剂如三溴化硼、三氯化硼、三氯化硼-二甲基硫配合物或碘三甲基硅烷，于惰性溶剂(例如二氯甲烷)中处理；或(3)以烷基硫醇如乙硫醇，于路易士酸(例如三氟化硼·二乙醚配合物)的存在下，于合适的惰性溶剂(例如二氯甲烷)中处理。

当利用水解脱除保护基时，可通过使用碱(例如氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化锂、甲醇钠与乙醇钠)，于合适惰性溶剂(例如四氢呋喃、二恶烷、甲醇、乙醇与水)中处理式(II)的化合物来进行水解。

可通过使用酸(例如盐酸、对甲苯磺酸、甲磺酸与三氟乙酸)，于合适溶剂(例如：甲醇与乙醇)中处理式(II)的化合物来进行酸处理。

在氟化物处理的情况下，可通过使用氟化物(例如氟化氢、氟化氢-吡啶、四丁基氟化铵，等等)，于合适惰性溶剂(例如乙酸、醇类(甲醇、  乙醇，等等)、乙腈与四氢呋喃)中处理式(II)的化合物来进行。

去保护反应优选在降温、周围温度或升温下进行，例如为0℃至50℃，优选为0℃至室温。

所得本发明化合物可采用有机合成化学已知常规方法分离及纯化，如：重结晶、柱层析、薄层层析等等。

式(II)的化合物可依据反应图1或反应图2的步骤制备。

在本发明化合物的任何制备过程期间，可能有必要和/或需要保护任何相关分子的敏感或反应性基团。此点可利用常用的保护基达成。有关保护基及其用法的一般说明参见T.W.Greene等人的″有机合成法的保护基(Protecting Groups in OrganicSynthesis)″，John Wiley & Sons，New York，1999。所述保护基可在随后步骤中采用本领域技术人员已知的方法脱除。

反应图1

(上述反应图中，符号均如上述相同定义)

步骤1：

式(IV)的化合物可由式(V)的化合物以威斯迈(Vilsmeier)试剂或α，α-二氯甲基甲基醚/四氯化钛经甲酰化而制得。

该威斯迈试剂可依本领域已知传统方法制备，例如：由二甲基甲酰胺或N-甲基甲酰苯胺/磷酰氯、亚硫酰氯或草酰氯制备。

该反应典型地在合适的溶剂中，如二甲基甲酰胺或二氯乙烷，于周围温度或升温下，例如25℃至80℃下进行。

步骤2：

式(III)的化合物可由式(IV)的化合物与ArLi、ArMgBr、ArZnBr、Ar(Me)₂LiZn或ArB(OH)₂经偶合制成，其中，Ar如下式：

化合物(IV)与ArLi、ArMgBr、ArZnBr或Ar(Me)₂LiZn的偶合反应典型地在为惰性有机溶剂的合适溶剂中(如二乙醚、四氢呋喃或1，4-二恶烷)中，于周围温度或降温(例如-78℃至25℃)下进行。

化合物(IV)与ArB(OH)₂的偶合反应典型地可于催化剂存在下，如(乙酰基丙酮酰基)二羰基铑(I)或羟基-(1，5-环辛二烯)铑(I)二聚物与配位体，如1，1’-双(二苯基膦基)二茂铁或三-叔丁基膦，于为惰性溶剂的合适溶剂中，如四氢呋喃、二甲氧乙烷与1，4-二恶烷，于周围温度或升温下，例如25℃至100℃下进行。

步骤3：

式(II)的化合物可由式(III)的化合物还原制得。

化合物(III)的还原可使用硅烷试剂或氢硼化物，于酸的存在下，于合适溶剂中或不使用溶剂下进行。

该酸的实例包括路易士酸，如三氟化硼-二乙醚配合物与四氯化钛；及强有机酸，如三氟乙酸与甲磺酸。

该硅烷试剂的实例包括三烷基硅烷，如三乙基硅烷、三异丙基硅烷。

该氢硼化物的实例包括氢硼化钠与三乙酰氧基氢硼化钠。

该溶剂可选自任何一种不干扰反应的溶剂，且其溶剂的实例包括乙腈、卤代烷类(例如二氯甲烷、氯仿与二氯乙烷)、及这些溶剂的混合物。

该还原可在降温或周围温度下，例如-30℃至25℃下进行。

反应图2：

(上述反应图中，R⁴为溴或碘，且其他符号如上述相同定义)。

步骤1：

式(VIII)的化合物可由式(V)的化合物与R⁴-C₆H₄-COCl(其中，R⁴如上述相同定义)缩合制得。

该缩合反应可依本领域已知的弗里德-克拉夫茨(Friedel-Crafts)酰化法，于合适溶剂中，于路易士酸的存在下进行。

该路易士酸的实例包括氯化铝、三氟化硼-二乙醚配合物、氯化锡(IV)与四氯化钛。

该溶剂可选自任何一种不干扰弗里德-克拉夫茨反应的溶剂，该溶剂的实例包括卤代烷类，如二氯甲烷、氯仿、四氯甲烷与二氯乙烷。

该反应可在降温、周围温度或升温下进行，例如-30℃至60℃。

步骤2：

式(VII)的化合物可由式(VIII)的化合物还原制得。

可使用还原剂、于合适溶剂中处理化合物(VIII)来进行该反应。

该还原剂的实例包括氢硼化物(例如含或不含氯化铈(III)七水合物的氢硼化钠、三乙酰氧基氢硼化钠)与氢化铝(例如氢化锂铝、与二异丁基氢化铝)。

该溶剂可选自任何一种不干扰反应的溶剂，该溶剂的实例包括醚类(例如四氢呋喃、二乙醚、二甲氧乙烷、与二恶烷)、醇类(例如甲醇、乙醇与2-丙醇)及这些溶剂的混合物。

该还原反应可在降温或周围温度下进行，例如-30℃至25℃。

步骤3：

式(VI)的化合物可由式(VII)的化合物还原制得。

化合物(VII)的还原可依据反应图1步骤3进行。

步骤4：

式(II)的化合物可由式(VI)的化合物与环丙基-B(OH)₂偶合制得。

该偶合反应可通过传统芳基偶合法进行，例如铃木(Suzuki)偶合法(参见Suzuki等人的Synth.Commun.11：513(1981)；Suzuki的Pure and Appl.Chem.57：1749-1758(1985)；Suzuki等人的Chem.Rev.95：2457-2483(1995)；Shieh等人的J.Org.Chem.57：379-381(1992)；Martin等人的Acta ChemicaScandinavica 47：221-230(1993)；Wallace等人的TetrahedronLett.43：6987-6990(2002)与Molander等人的J.Org.Chem.68：4302-4314(2003))。

该偶合反应可于Pd催化剂与碱的存在下，在使用或不使用配位体与添加剂下，于合适溶剂中进行。

该Pd催化剂的实例为四(三苯基膦)钯(0)、乙酸钯(II)、双(乙腈)二氯钯(II)、二氯双(三苯基膦)钯(II)、[1，1’-双(二苯基膦基)-二茂铁]二氯钯(II)与二氯甲烷的配合物、三(二亚苄基-丙酮)二钯(0)-氯仿加成物和氯化钯(II)。该碱的实例包括碱金属碳酸盐(例如碳酸钾、碳酸钠与碳酸氢钠)、碱金属磷酸盐(例如磷酸钾、磷酸钠与磷酸氢钠)、有机碱类(例如N，N-二异丙基乙胺)与碱金属氟化物(例如氟化铯与氟化钾)。该配位体的实例包括三环己基膦与三(邻甲苯基)膦。该添加剂的实例包括碘化亚铜(I)。

该溶剂可选自任何一种不干扰偶合反应的溶剂，且其溶剂的实例为芳香烃(例如苯与甲苯)、醚类(例如四氢呋喃、1，2-二甲氧乙烷与1，4-二恶烷)、酰胺类(例如二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺、1，3-二甲基-2-咪唑啉二酮与N-甲基吡咯烷酮)、醇类(甲醇、乙醇与2-丙醇)、水及这些溶剂的混合物。

该偶合反应可于周围温度或升温下进行，例如25℃至150℃，优选80℃至150℃。

式(V)的起始化合物可依据下列反应图制备：

(上述反应图中，符号如上述相同定义)

步骤1：

式(XI)的化合物可由式(XII)的化合物与D-葡萄糖缩合制得。该缩合反应典型在合适溶剂如乙腈、水与醇类(例如甲醇、乙醇与1-丙醇)中，使用或不使用催化剂(如氯化铵)与乙酸下，于周围温度或升温下进行。

步骤2：

式(IX)的化合物可由式(XI)的化合物氧化制得。该氧化反应典型的在氧化剂(如披钯木炭、四氯-1，4-苯醌(氯醌(chloranil))、2，3-二氯-5，6-二氰基-1，4-苯醌(DDQ)或亚乙基双(柳亚胺)钴(II)盐存在下，于合适溶剂，如醚类(例如二乙醚、四氢呋喃与1，4-二恶烷)、卤代烷类(例如二氯甲烷、氯仿与1，2-二氯乙烷)、水及这些溶剂的混合物，于周围温度或降温下进行。

步骤3：

式(V)的化合物可通过保护式(IX)的化合物的羟基制得。该羟基的保护基可选自那些常用于保护羟基的基团。该羟基的保护基的实例包括烷酰基(例如乙酰基)、芳烷基(例如苄基、甲苯基、与茴香基)、烷基甲硅烷基(例如三甲基甲硅烷基、叔丁基二甲基甲硅烷基与三乙基甲硅烷基)。该保护可通过本领域技术人员已知的传统方法进行。有关保护基及其用法的一般说明参见T.W.Greene等人的″有机合成法中的保护基(ProtectingGroups in Organic Synthesis)″，John Wiley & Sons，New York，1999。

步骤4：

式(X)的化合物可依据步骤3，通过保护式(XI)化合物的羟基制得。

步骤5：

式(V)的化合物也可由式(X)的化合物根据步骤2氧化制得。

式(XII)的化合物可根据下列反应图制备：

(上述反应图中，R⁵为烷基，且其他符号如上述相同定义)。

步骤1：

式(XV)的化合物可由式(XVI)的化合物环化制得。该环化反应可依本领域已知的费歇尔(Fischer)吲哚合成制备(参见：Chem.Rev.，63，373，1963)。此反应典型在合适溶剂中，如醇类(例如甲醇与乙醇)与烃类(例如甲苯、硝基苯)或不使用溶剂下，使用酸如路易士酸(例如氯化锌)、无机酸(例如盐酸与多磷酸)及有机酸(例如乙酸与三氟乙酸)，于升温下进行。

步骤2：

式(XIV)的化合物可由式(XV)的化合物水解制得。该水解反应典型地在合适溶剂如水、醇类(例如甲醇与乙醇)与醚类(例如二恶烷与四氢呋喃)中，使用碱，如碱金属氢氧化物(例如氢氧化锂、氢氧化钾与氢氧化钠)，于降温、周围温度或升温下进行。

步骤3：

式(XIII)的化合物可由式(XIV)的化合物去羧基制得。该去羧基反应典型地在合适溶剂中，如喹啉，使用催化剂，如铜，于升温下制得。

步骤4：

式(XII)的化合物可由式(XIII)的化合物还原制得。该还原反应典型地在合适溶剂，如乙腈、卤代烷类(例如二氯甲烷与二氯乙烷)及醚类(例如二乙醚、四氢呋喃与二恶烷)中，使用还原剂，如三乙基甲硅烷、氢硼化锌、甲硼烷-三甲胺配合物、甲硼烷-吗啉配合物及氰基氢硼化钠，于酸(包括路易士酸，如三氟乙酸、三氟化硼-二乙醚配合物、盐酸与乙酸)的存在下，于周围温度或升温下进行。

式(XVI)的化合物可由下式(XVII)的化合物与CH₃COCO₂R⁵缩合制得：

其中，符号如上述相同定义，并且R⁵如上述定义。该缩合反应典型地在合适溶剂，如乙腈、卤代烷类(例如二氯甲烷与氯仿)与醚类(例如二恶烷)、水与醇类(例如甲醇、  乙醇与1-丙醇)中，使用或不使用碱(例如乙酸钠与乙酸钾)，或酸(例如盐酸与乙酸)，于周围温度或升温下进行。

作为选择，式(XVI)的化合物可通过以下制备：(1)将下式(XVIII)的化合物

(其中，符号如上述相同定义)，用亚硝酸钠，于酸如盐酸的存在下，于合适溶剂如水与醇类(例如甲醇与乙醇)中，于周围温度或升温下反应，制得相应的芳基重氮盐，与(2)由该芳基重氮盐与CH₃COCH(CH₃)CO₂R⁵，其中，R⁵如上述定义，于碱如乙酸钠、氢氧化钾的存在下，于合适溶剂如水与醇类(例如甲醇与乙醇)中，于降温或周围温度下缩合。

其他起始化合物可商业上获得或很容易通过本领域技术人员已知的传统方法制得。

下文中，将利用实施例与参考例说明本发明，但本发明的范围不因此而受限制。

(实施例)

实施例1：

3-(4-环丙基苯基甲基)-4-氟-1-(β-D-吡喃葡萄糖基)吲哚

(1)取4-氟吲哚啉(185mg)与D-葡萄糖(267mg)在于水(0.74ml)-乙醇(9ml)中的混合物在氩气下回流24小时。减压蒸发溶剂，制得粗产物4-氟-1-(β-D-吡喃葡萄糖基)吲哚啉，其未再纯化即用于下一个步骤。

(2)取上述化合物悬浮于氯仿(8ml)，依次于其内添加吡啶(0.873ml)、乙酸酐(1.02ml)与4-(二甲基胺基)吡啶(催化剂量)。于室温下搅拌21小时后，减压蒸发反应溶剂。残留物溶于乙酸乙酯，溶液经10％硫酸铜(II)水溶液洗涤2次，再以饱和碳酸氢钠水溶液洗涤，及经硫酸镁干燥。滤出不可溶物，滤液减压蒸发。残留物经硅胶柱层析纯化(己烷:乙酸乙酯＝90:10-60:40)，制得4-氟-1-(2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃葡萄糖基)吲哚啉(365mg)的无色非晶形体。  APCI-质谱m/Z 468(M+H)。¹H-NMR(DMSO-d₆)δ 1.93(s，3H)，1.96(s，3H)，1.97(s，3H)，2.00(s，3H)，2.83(ddd，J＝15.5，10.5与10.3Hz，1H)，2.99-3.05(m，1H)，3.49-3.57(m，2H)，3.95-3.99(m，1H)，4.07-4.11(m，2H)，4.95(t，J＝9.5Hz，1H)，5.15(t，J＝9.4Hz，1H)，5.42(t，J＝9.6Hz，1H)，5.49(d，J＝9.3Hz，1H)，6.48(t，J＝8.6Hz，1H)，6.60(d，J＝8.0Hz，1H)，7.05-7.10(m，1H)。

(3)取上述化合物(348mg)溶于1，4-二恶烷(14ml)，并于其内添加2，3-二氯-5，6-二氰基-1，4-苯醌(306mg)。于室温下搅拌33小时后，于其内添加饱和碳酸氢钠水溶液(20ml)，及减压蒸发有机溶剂。残留物经乙酸乙酯萃取2次，合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸镁干燥，再以活性碳处理。滤出不可溶物，滤液减压蒸发。残留物经硅胶柱层析纯化(己烷:乙酸乙酯＝90:10-60:40)，并自乙醇中重结晶，制得4-氟-1-(2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃葡萄糖基)-吲哚(313mg)的无色结晶，mp 132-135℃。APCI-质谱m/z 483(M+NH₄)。¹H-NMR(DMSO-d₆)δ 1.64(s，3H)，1.97(s，3H)，1.99(s，3H)，2.04(s，3H)，4.10(ABX，J＝12.4，2.7Hz，1H)，4.14(ABX，J＝12.4，5.2Hz，1H)，4.31(ddd，J＝10.0，5.2与2.7Hz，1H)，5.25(t，J＝9.7Hz，1H)，5.53(t，J＝9.5Hz，1H)，5.61(t，J＝9.3Hz，1H)，6.22(d，J＝9.0Hz，1H)，6.58(d，J＝3.4Hz，1H)，6.88(dd，J＝10.8，7.9Hz，1H)，7.19(td，J＝8.1，5.3Hz，1H)，7.51(d，J＝8.5Hz，1H)，7.53(d，J＝3.4Hz，1H)。

(4)将上述化合物(3.50g)与N，N-二甲基甲酰胺(3.49ml)溶于1，2-二氯乙烷(70ml)，并于其内滴加三氯氧磷(III)(2.10ml)。混合物于70℃下搅拌1小时，于0℃下于其内添加水(100ml)。所得混合物经乙酸乙酯(200ml)萃取2次，合并的有机层经盐水(40ml)洗涤，再经硫酸镁干燥。滤出不可溶物，滤液减压蒸发。残留物经硅胶柱层析纯化(己烷:乙酸乙酯＝90:10-50:50)，并自乙醇(20ml)中重结晶，制得4-氟-1-(2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃葡萄糖基)-吲哚-3-甲醛(2.93g)的无色结晶。mp 190℃-192℃。APCI-质谱m/Z 511(M+NH₄)。¹H-NMR(DMSO-d₆)δ 1.64(s，3H)，1.98(s，3H)，2.00(s，3H)，2.05(s，3H)，4.12(ABX的A部份，J＝12.4，2.5Hz，1H)，4.17(ABX的B部份，J＝12.4，5.5Hz，1H)，4.33(ddd，J＝10.0，5.5与2.5Hz，1H)，5.32(t，J＝9.8Hz，1H)，5.56(t，J＝9.6Hz，1H)，5.66(t，J＝9.3Hz，1H)，6.36(d，J＝9.0Hz，1H)，7.11(dd，J＝10.6，8.0Hz，1H)，7.38(td，J＝8.1，5.1HZ，1H)，7.65(d，J＝8.3Hz，1H)，8.53(s，1H)，10.0(d，J＝2.9Hz，1H)。

(5)向镁屑(664mg)与1，2-二溴乙烷(一滴)在四氢呋喃(40ml)中的混合物中，在激烈搅拌下滴加1-溴-4-环丙基苯(参见WO96/07657)(5.21g)的四氢呋喃(12ml)溶液超过25分钟，并于室温下激烈搅拌混合物30分钟。再在-78℃在氩气下，滴加所得混合物至上述4-氟-1-(2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃葡萄糖基)吲哚-3-甲醛(4.35g)的四氢呋喃(130ml)溶液超过15分钟。在相同温度下搅拌混合物30分钟，且于其内添加饱和氯化铵水溶液(200ml)。所得混合物经乙酸乙酯(150ml)萃取2次，且合并的有机层经硫酸镁干燥。滤出不可溶物，滤液减压蒸发，制得粗产物4-环丙基苯基4-氟-1-(2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃葡萄糖基)吲哚-3-基甲醇，其未再纯化即用于下一个步骤。

(6)在0℃在氩气下，在上述化合物与三乙基硅烷(2.11ml)于二氯甲烷(44ml)-乙腈(87ml)的搅拌溶液中添加三氟化硼-二乙醚配合物(1.34ml)。于相同温度下搅拌混合物20分钟，并于其内添加饱和碳酸氢钠水溶液(200ml)。将有机溶剂减压蒸发，残留物经乙酸乙酯(150ml)萃取2次。经硫酸镁干燥后，滤出不可溶物，且滤液减压蒸发。残留物经硅胶柱层析纯化(己烷:乙酸乙酯＝90:10-50:50)，再用乙醇(40ml)研磨，制得3-(4-环丙基苯基甲基)-4-氟-1-(2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃葡萄糖基)吲哚(4.71g)的无色结晶，mp 190-192℃。APCI-质谱m/Z613(M+NH₄)。¹H-NMR(DMSO-d₆)δ 0.60(ddd，J＝6.6，4.7与4.3Hz，2H)，0.88(ddd，J＝8.3，6.3与4.0Hz，2H)，1.63(s，3H)，1.81-1.87(m，1H)，1.96(s，3H)，1.99(s，3H)，2.04(s，3H)，4.00(s，2H)，4.09(ABX的A部份，J＝12.2，2.4Hz，1H).4.13(ABX的B部份，J＝12.3，5.5Hz，1H)，4.28(ddd，J＝10.0，5.3与2.7Hz，1H)，5.23(t，J＝9.6Hz，1H)，5.49-5.56(m，2H)，6.15(d，J＝8.7Hz，1H)，6.77(dd，J＝11.0，7.9Hz，1H)，6.95(d，J＝8.2Hz，2H)，7.05(d，J＝8.0Hz，2H)，7.14(td，J＝8.0，5.1Hz，1H)，7.23(s，1H)，7.46(d，J＝8.3Hz，1H)。

(7)取上述化合物(4.67g)溶于甲醇(47ml)-四氢呋喃(93ml)，并于其内添加甲醇钠(28％甲醇溶液，1滴)。于室温下搅拌1小时后，减压蒸发反应溶剂。残留物经硅胶柱层析纯化(氯仿:甲醇＝99:1-90:10)，制得标题化合物3-(4-环丙基苯基甲基)-4-氟-1-(β-D-吡喃葡糖基)吲哚(3.23g)的无色泡沫状物。此泡沫状物自乙醇-H₂O中结晶，制得标题化合物的半水合物的无色结晶。mp  110-112℃。APCI-质谱m/Z 445(M+NH₄)，428(M+H)。¹H-NMR(DMSO-d₆)δ 0.60(m，2H)，0.88(ddd，J＝8.3，6.3与4.1Hz，2H)，1.82-1.87(m，1H)，3.23(td，J＝9.0，5.4Hz，1H)，3.39(td，J＝8.9，5.1Hz，1H)，3.42-3.46(m，2H)，3.63-3.68(m，2H)，4.02(s，2H)，4.53(t，J＝5.6Hz，1H)，5.10(d，J＝5.3Hz，1H)，5.17(d，J＝5.0Hz，1H)，5.21(d，J＝5.9Hz，1H)，5.37(d，J＝9.2Hz，1H)，6.74(dd，J＝11.1，7.9Hz，1H)，6.96(d，J＝8.2Hz，2H)，7.07(td，J＝8.1，5.2Hz，1H)，7.13(d，J＝8.2Hz，2H)，7.21(s，1H)，7.35(d，J＝8.3Hz，1H)。分析：计算值C₂₄H₂₆FNO₅·0.5H₂O：C，66.04，H，6.23；F，4.35；N，3.21。实测值：C，65.62；H，6.27；F，4.32；N，3.11。

实施例2：4-氯-3-(4-环丙基苯基-甲基)-1-(B-D-吡喃葡萄糖基)吲哚

(1)取4-氯吲哚啉(2.88g)与D-葡萄糖(3.38g)于乙醇(150ml)-H₂O(10ml)的混合物在氩气下回流一夜。减压蒸发溶剂，且残留物经硅胶柱层析纯化(氯仿:甲醇＝100:0-88:12)，制得4-氯-1-(β-D-吡喃葡萄糖基)吲哚啉(3.35g)的无色泡沫状物。APCI-质谱m/Z 316/318(M+H)。¹H-NMR(DMSO-d₆)δ 2.87-3.02(m，2H)，3.07-3.12(m，1H)，3.20-3.32(m，2H)，3.38-3.47(m，2H)，3.51-3.60(m，2H)，3.68-3.73(m，1H)，4.34-4.37(m，1H)，4.63(d，J＝8.3Hz，1H)，4.93(d，J＝5.1Hz，1H)，5.03(d，J＝4.0Hz，1H)，5.06(d，J＝4.5Hz，1H)，6.53(d，J＝8.0Hz，1H)，6.60(d，J＝8.0Hz，1H)，6.99(t，J＝7.9Hz，1H)。

(2)取上述化合物(3.3g)溶于1，4-二恶烷(150ml)，并于其内添加2，3-二氯-5，6-二氰基-1，4-苯醌(2.85g)。于室温下搅拌混合物12小时。在反应混合物中添加饱和碳酸氢钠水溶液(300ml)，且混合物经乙酸乙酯萃取3次。合并的有机层经饱和碳酸氢钠水溶液洗涤，及经硫酸镁干燥。滤出不可溶物，滤液减压蒸发。残留物经硅胶柱层析纯化(氯仿:甲醇＝100:0-86:14)，制得4-氯-1-(β-D-吡喃葡萄糖基)吲哚(2.01g)的浅褐色结晶。APCI-质谱m/Z 314/316(M+H)。¹H-NMR(DMSO-d₆)δ 3.24-3.50(m，4H)，3.68-3.74(m，2H)，4.54(t，J＝5.5Hz，1H)，5.11(d，J＝5.3Hz，1H)，5.20(d，J＝4.8Hz，1H)，5.28(d，J＝5.8Hz，1H)，5.44(d，J＝9.2Hz，1H)，6.51(d，J＝3.4Hz，1H)，7.11-7.16(m，2H)，7.57-7.58(m，2H)。

(3)取上述化合物(2.01g)悬浮于二氯甲烷(100ml)，并于其内依次添加乙酸酐(4.24ml)、N，N-二异丙基乙胺(7.8ml)与4-(二甲基胺基)吡啶(78mg)。于室温下搅拌30分钟后，混合物依次经柠檬酸水溶液、水与饱和碳酸氢钠水溶液洗涤。有机层经硫酸镁干燥。滤出不可溶物，滤液减压蒸发。残留物自二乙醚-己烷中结晶，制得4-氯-1-(2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃葡萄糖基)-吲哚(2.94g)的无色结晶而纯化。APCI-质谱m/Z499/501(M+NH₄)。¹H-NMR(DMSO-d₆)δ 1.65(s，3H)，1.97(s，3H)，1.99(s，3H)，2.04(s，3H)，4.08-4.16(m，2H)，4.28-4.32(m，1H)，5.26(t，J＝9.8Hz，1H)，5.53(t，J＝9.5Hz，1H)，5.62(t，J＝9.3Hz，1H)，6.23(d，J＝9.2Hz，1H)，6.56(d，J＝3.4Hz，1H)，7.16(d，J＝8.2Hz，1H)，7.21(t，J＝7.9Hz，1H)，7.61(d，J＝3.5Hz，1H)，7.67(d，J＝8.2Hz，1H)。

(4)取上述化合物以类似实施例1-(4)的方法处理，制得4-氯-1-(2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃葡萄糖基)吲哚-3-甲醛的无色粉末。APCI-质谱m/Z  527/529(M+NH₄)。¹H-NMR(DMSO-d₆)δ 1.64(s，3H)，1.98(s，3H)，1.99(s，3H)，2.05(s，3H)，4.09-4.19(m，2H)，4.30(m，1H)，5.34(t，J＝9.8Hz，1H)，5.54(t，J＝9.5Hz，1H)，5.70(t，J＝9.3Hz，1H)，6.37(d，J＝9.0Hz，1H)，7.35-7.42(m，2H)，7.82(d，J＝7.5Hz，1H)，8.54(s，1H)，10.51(s，1H)。

(5)取上述化合物与1-溴-4-环丙基苯(参见WO96/07657)以类似实施例1-(5)的方法处理，制得粗产物4-氯-1-(2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃葡萄糖基)吲哚-3-基4-环丙基苯基甲醇，其未再纯化即用于下一个步骤。

(6)取上述化合物以类似实施例1-(6)的方法处理，制得4-氯-3-(4-环丙基苯基甲基)-1-(2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃葡萄糖基)吲哚的无色固体。APCI-质谱m/Z 629/631(M+NH₄)。¹H-NMR(DMSO-d₆)δ 0.58-0.62(m，2H)，0.88-0.92(m，2H)，1.65(s，3H)，1.82-1.88(m，1H)，1.96(s，3H)，1.99(s，3H)，2.03(s，3H)，4.07-4.13(m，2H)，4.15(ABq，J＝16.2Hz，1H)，4.19(ABq，J＝16.2Hz，1H)，4.28(m，1H)，5.24(t，J＝9.6Hz，1H)，5.50(t，J＝9.3Hz)，5.55(t，J＝9.2Hz，1H)，6.17(d，J＝8.7Hz，1H)，6.95(d，J＝8.0Hz，2H)，7.02(d，J＝8.0Hz，2H)，7.05(d，J＝7.7Hz，1H)，7.16(t，J＝7.9Hz，1H)，7.25(s，1H)，7.64(d，J＝8.3Hz，1H)。

(7)取上述化合物以类似实施例1-(7)的方法处理，制得标题化合物4-氯-3-(4-环丙基-苯基甲基)-1-(β-D-吡喃葡萄糖基)吲哚的无色粉末。APCI-质谱m/Z 444/446(M+H)，461/463(M+NH₄)。¹H-NMR(DMSO-d₆)δ 0.59-0.62(m，2H)，0.87-0.92(m，2H)，1.82-1.89(m，1H)，3.20-3.48(m，4H)，3.60-3.70(m，2H)，4.21(s，2H)，4.54(t，J＝5.5Hz，1H)，5.10(d，J＝5.3Hz，1H)，5.17(d，J＝5.1Hz，1H)，5.21(d，J＝5.9Hz，1H)，5.39(d，J＝9.0Hz，1H)，6.96(d，J＝8.2Hz，2H)，7.02(d，J＝7.2Hz，1H)，7.09(d，J＝8.0Hz，2H)，7.09(t，J＝7.8Hz，1H)，7.22(s，1H)，7.53(d，J＝8.2Hz，1H)。

实施例3：

3-(4-环丙基苯基甲基)-4，6-二氟-1-(β-D-吡喃葡萄糖基)吲哚

以类似实施例1的方法，由4，6-二氟吲哚啉制得标题化合物的无色泡沫状物。APCI-质谱m/Z 463(M+NH₄)。¹H-NMR(DMSO-d₆)δ 0.58-0.62(m，2H)，0.88-0.91(m，2H)，1.82-1.88(m，1H)，3.20-3.50(m，4H)，3.59-3.70(m，2H)，3.99(s，2H)，4.54(t，J＝5.7Hz，1H)，5.10(d，J＝5.3Hz，1H)，5.19(d，J＝5.0Hz，1H)，5.22(d，J＝5.8Hz，1H)，5.35(d，J＝9.0Hz，1H)，6.78(t，J＝9.6Hz，1H)，6.96(d，J＝8.0Hz，2H)，7.11(d，J＝8.0Hz，2H)，7.22(s，1H)，7.30(dd，J＝10.0，1.7Hz，1H)。

实施例4：

4-氯-3-(4-环丙基苯基甲基)-6-氟-1-(β-D-吡喃葡萄糖基)吲哚

以类似实施例1的方法，由4-氯-6-氟吲哚啉制得标题化合物的无色泡沫状物。APCI-质谱m/Z 479/481(M+NH₄)。¹H-NMR(DMSO-d₆)δ 0.59-0.62(m，2H)，0.88-0.91(m，2H)，1.83-1.87(m，1H)，3.21-3.50(m，4H)，3.57-3.63(m，1H)，3.65-3.71(m，1H)，4.18(s，2H)，4.54(t，J＝5.5Hz，1H)，5.10(d，J＝5.3Hz，1H)，5.16(d，J＝5.0Hz，1H)，5.23(d，J＝5.8Hz，1H)，5.38(d，J＝9.0Hz，1H)，6.97(d，J＝8.2Hz，2H)，7.01(dd，J＝9.4，2.0Hz，1H)，7.08(d，J＝8.0Hz，2H)，7.22(s，1H)，7.47(dd，J＝10.1，2.1Hz，1H)。

参考例1：4-氟吲哚啉

在氢硼化钠(560mg)于二乙醚(6ml)的搅拌悬浮液中滴加氯化锌(1.0M二乙醚溶液，7.4ml)。在室温在氩气下搅拌混合物1天。在所得混合物中滴加4-氟吲哚(500mg)的二乙醚(5ml)溶液。在室温与氩气下搅拌12天后，于0℃下于其内添加冷的0.5N盐酸水溶液(30ml)。然后于0℃下，以冷的2N氢氧化钠水溶液碱化混合物，以乙酸乙酯萃取3次。合并的有机层经硫酸镁干燥，并滤出不可溶物，滤液减压蒸发。残留物经硅胶柱层析纯化(己烷:乙酸乙酯＝100:0-80:20)，制得标题化合物(351mg)的浅黄色油状物。APCI-质谱m/Z 138(M+H)。¹H-NMR(DMS O-d₆)δ 2.93(t，J＝8.6Hz，2H)，3.46(t，J＝8.6Hz，2H)，5.78(br-s，1H)，6.24-6.31(m，2H)，6.87-6.94(m，1H)。

参考例2：4-氯吲哚啉

使4-氯吲哚(3.15g)与三乙基硅烷(8.30ml)于三氟乙酸(32ml)的溶液于50℃下搅拌30分钟。减压蒸发溶剂，且残留物经饱和碳酸氢钠水溶液碱化。混合物经乙酸乙酯萃取2次，且合并的有机层经硫酸镁脱水。滤出不可溶物，且滤液减压蒸发。残留物经硅胶柱层析纯化(己烷:乙酸乙酯＝100:0-80:20)，制得标题化合物(2.89g)的无色油状物。APCI-质谱m/Z 154/156(M+H)。¹H-NMR(DMSO-d₆)δ 2.94(t，J＝8.7Hz，2H)，3.46(t，J＝8.7Hz，2H)，5.83(s，1H)，6.40(d，J＝7.7Hz，1H)，6.50(d，J＝8.0Hz，1H)，6.90(t，J＝7.9Hz，1H)。

参考例3：4，6-二氟吲哚啉

(1)使3，5-二氟苯基肼盐酸盐(5.0g)与丙酮酸乙酯(4.6ml)于乙醇(25ml)的混合物回流1小时，减压蒸发溶剂。残留的固体与己烷研磨，制得2-(3，5-二氟苯基肼基)丙酸乙酯(4.65g)的无色结晶，mp 139-141℃。APCI-质谱m/Z 243(M+H)。

(2)取上述化合物(4.65g)于甲苯(47ml)的悬浮液加至多磷酸(23g)中，且混合物于氩气下回流3小时。冷却至室温后，于其内添加水与乙酸乙酯，且所得混合物于室温下搅拌。滤出不可溶物，分离滤液。水层经乙酸乙酯萃取，且合并的有机层依次经水、饱和碳酸氢钠水溶液与盐水洗涤。经硫酸镁干燥及以活性碳处理后，滤出不可溶物，且滤液减压蒸发。残留固体与二异丙基醚-己烷(1:1)研磨，制得4，6-二氟吲哚-2-羧酸乙酯(3.48g)的浅黄色结晶。mp 153-154℃。ESI-质谱m/Z 224(M-H)。

(3)取上述化合物(3.48g)于4N氢氧化钠水溶液(7.73ml)与乙醇(35ml)的混合物回流15分钟后，减压蒸发有机溶剂。于其内加水，且混合物经乙醚洗涤后，接着以6N盐酸水溶液酸化。所得混合物经乙酸乙酯萃取，且有机层经盐水洗涤，经硫酸镁干燥及以活性碳处理。滤出不可溶物，且滤液减压蒸发，制得粗产物4，6-二氟-吲哚-2-羧酸(3.01g)的浅褐色固体，mp253-254(分解)。ESI-质谱m/Z 196(M-H)。

(4)将上述化合物(3.0g)与铜粉(2.9g)于喹啉(30ml)的混合物于200℃在氩气下搅拌5小时。冷却至室温后，滤出不可溶物，并以乙酸乙酯(100ml)洗涤。滤液经6N盐酸水溶液与盐水洗涤2次。各水层分别经乙酸乙酯萃取，且合并的有机层经硫酸镁干燥并以活性碳处理。滤出不可溶物，且滤液减压蒸发。残留的油状物经硅胶柱层析纯化(己烷:乙酸乙酯＝10:1-6:1)，制得4，6-二氟吲哚(2.60g)的浅黄色油状物。ESI-质谱m/Z 152(M-H)。

(5)取上述化合物(2.33g)溶于1，4-二恶烷(30.4ml)，并于室温下于其内添加吗啉甲硼烷(6.15g)与36％盐酸水溶液(2.64ml)。混合物回流2小时后，冷却至室温。于其内添加6N盐酸水溶液(12.2ml)，且所得混合物回流15分钟。混合物于0℃下经10％氢氧化钠水溶液碱化，并于其内添加水及以乙酸乙酯萃取2次。合并的有机层经盐水洗涤，及经硫酸镁干燥。滤出不可溶物，且滤液减压蒸发。残留的油状物经硅胶柱层析纯化(己烷:乙酸乙酯＝10:1-6:1)，制得标题化合物4，6-二氟吲哚啉(2.05g)的无色油状物。APCI-质谱m/Z 156(M+H)。¹H-NMR(DMSO-d₆)δ 2.90(t，J＝8.6Hz，2H)，3.52(td，J＝7.5，1.3Hz，2H)，6.08-6.14(m，2H)，6.17(td，J＝10.0，2.1Hz，1H)。

参考例4：4-氯-6-氟吲哚啉

(1)在3-氯-5-氟苯胺(8.0g)于6N盐酸水溶液(28ml)的悬浮液中在0℃下添加的亚硝酸钠(4.17g)于H₂O(5.2ml)的溶液，且混合物于0℃下搅拌30分钟。所得混合物于0℃加至氢氧化钾(17.0g)、乙酸钠(17.0g)与2-甲基乙酰乙酸乙酯(8.72g)于H₂O(80ml)与乙醇(64ml)的溶液中，且混合物于相同温度下搅拌2小时。反应混合物经乙酸乙酯萃取2次，且合并的有机层减压蒸发。残留物溶于水与乙酸乙酯中，并滤出不可溶物。分离滤液，且有机层经盐水洗涤及经硫酸镁干燥。滤出不可溶物，且滤液减压蒸发。残留的固体与己烷研磨，制得2-(3-氯-5-氟苯基肼基)丙酸乙酯(4.0g)的浅褐色固体。APCI-质谱m/Z 259/261(M+H)。

(2)取上述化合物以类似上述参考例3-(2)、(3)、(4)与(5)的方法处理，制得标题化合物4-氯-6-氟吲哚啉的无色油状物。APCI-质谱m/Z 172/174(M+H)。¹H-NMR(DMSO-d₆)δ 2.90(t，J＝9.3Hz，2H)，3.52(t，J＝8.7Hz，2H)，6.16(s，1H)，6.19(dd，J＝10.1，1.9Hz，1H)，6.35(dd，J＝9.5，1.9Hz，1H)。

药理实验：

1.SGLT2抑制作用的分析

试验化合物：

采用上述实施例描述的化合物进行S GLT2抑制作用分析。

方法：

接种表达人类SGLT2的CHOK1细胞至24-孔分析板的含10％胎牛血清、400μg/ml遗传霉素(Geneticin)、50单位/ml青霉素钠G(Gibco-BRL)与50μg/ml链霉素硫酸盐)的F-12营养素混合物(Ham′s F-12)中，密度400,000个细胞/孔。于37℃与含5％CO₂的潮湿空气中培养2天后，以分析缓冲液(137mM NaCl、5mMKC1、1mM CaCl₂、1mM MgCl₂、50mM Hepes与20mM Tris，pH7.4)洗涤细胞一次，再以250μl含试验化合物的缓冲液，于37℃下培养10分钟。将试验化合物溶于DMSO。DMSO的最终浓度为0.5％。通过添加50μl[¹⁴C]-甲基-α-D-吡喃葡萄糖苷(¹⁴C-AMG)溶液(最终浓度0.5mM)开始转运反应。于37℃下培养2小时后，吸出培养混合物来中止吸收反应，以冰冷PBS洗涤细胞3次。然后以0.3N NaOH溶解细胞，并取等份细胞利用液体闪烁计数器测定放射活性。非专一性AMG吸收性定义为在100μM根皮苷(phlorizin)(为钠依赖性的葡萄糖共转运子的特异性抑制剂)存在下的吸收性。依通过Bradford方法所测得的蛋白质浓度校正专一性吸收性。50％抑制浓度(IC₅₀)值由剂量-应答曲线利用最小平方法计算得到。

结果：

结果示于下表中。

表2

 

试验化合物(实施例编号)      (IC₅₀)(nM)      1                           1.9             2                           2.3             3                           2.8             4                           3.6             

2.大鼠的尿液葡萄糖排放试验

试验化合物：

采用上述实施例描述的化合物进行大鼠的尿液葡萄糖排放试验。

方法：

取6周龄雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠分置于代谢笼中，自由摄食与饮水2天后，才进行实验。实验当天早上，对大鼠经口灌食投予赋形剂(vehicle)(含0.2％ Tween 80的0.2％羧甲基纤维素溶液)或试验化合物(30毫克/千克)，体积10ml/kg。然后收集大鼠尿液24小时，并测量尿液体积。随后利用酶法分析试剂盒定量尿中葡萄糖浓度，及计算每只动物尿中葡萄糖的每日排放量。

结果：

尿糖量分成A、B与C三种范围。这些范围如下：A≥2400mg；2400mg>B≥2000mg；2000mg>C。

表3

 

试验化合物(实施例编号)      尿糖      1                           B         2                           A         3                           B         4                           C