积累井冈霉亚基胺A的基因工程菌株及其构建方法

摘要

一种生物医药技术领域的积累井冈霉亚基胺A的基因工程菌株及其构建方法。本发明涉及的工程菌株是在染色体上引入基因突变，从而导致井冈霉素生物合成途径中的糖基转移酶基因valG发生突变。该菌株的构建方法具体为：设计并构建用于对糖基转移酶基因valG进行突变的同源重组质粒载体pJTU609；把质粒pJTU609接合转移导入到受体链霉菌5008细胞中进行同源重组；先通过突变株的筛选和验证硫链丝菌素抗性影印筛选，进而通过PCR产物片段大小的差异最终筛选到LL－1突变株。本发明积累井冈霉素前体物质井冈霉亚基胺A的基因工程菌株，其产量为野生菌株的5倍。通过该工程菌可以大规模生产高纯度的井冈霉亚基胺A。