人干扰素α－2b重组卡介苗及其构建方法和鉴定方法

摘要

本发明涉及一种分泌人干扰素α－2b的重组卡介苗rBCG－IFNα－2b及其构建方法、鉴定方法，利用基因工程技术将起分泌作用的卡介苗Ag85B信号肽片段和人IFNα－2b的基因克隆至pMV261，得到卡介苗穿梭表达载体pMV261－Ag85B－IFNα－2b，然后采用电转化技术将该载体导入BCG中，构建重组卡介苗rBCG－IFNα－2b，依靠pMV261－Ag85B－IFNα－2b在BCG的复制和信号肽的分泌作用，能够高效分泌人IFNα－2b。本发明得到的重组卡介苗rBCG－IFNα－2b既保留了原有BCG的免疫原性，又能持续分泌细胞因子IFNα－2b，从而提高BCG的免疫活性；IFNα－2b能够直接作用于肿瘤细胞，抑制肿瘤细胞增殖和诱导分化，具有更好的抗肿瘤作用，可以减少使用剂量，降低BCG引起的毒副作用；避免了使用外源IFNα－2b所带来的应用剂量大、副作用发生率高、作用时间短暂和费用高昂的问题。