重组人α<,2b>干扰素高效表达载体的构建

摘要

通过ＰｓｔＩ－ＥｃｏＲＩ双酶切得α〈，２ｂ〉干扰素基因片断，Ｍｕｎｇ－ｂｅａｎ酶处理成平端；同时ＮｃｏＩ单酶切ＰＪＬＡ５０２载体，Ｍｕｎｇ－ｂｅａｎ酶处理成平端。用Ｔ〈，４〉ＤＮＡ连接酶进行平端连接，经转化大肠杆菌ＤＨＩ中，用微量细胞病变抑制试验进行筛选，获得２个具有抗病毒活性的阳性株，其中ＰＪＬＡ５０２－０４菌株经三次培养检测，其生物活性平均滴度为４＊１０〈’８〉ＩＵ／Ｌ。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析表达量占菌体总蛋白的４℅以上。