大麻中主要大麻酚类化合物的鉴定方法

摘要

本发明公开一种大麻中主要大麻酚类化合物的鉴定方法，包括将供试品溶液和对照品溶液点于薄层板上，以展开剂展开，其特征在于，显色剂为香草醛－浓硫酸溶液。该方法简便，快速，灵敏度高。

说明书

技术领域

本发明涉及一种植物中的化学成分鉴定方法，具体说，涉及大麻中主要大麻酚类化合物的鉴定方法。

背景技术

大麻提取物具有抑止肿瘤，治疗癌痛和多发性硬化症的功效，越来越受到科学工作者的重视。现已证明大麻酚类化合物是其中的活性成分，而又以四氢大麻酚(THC)，大麻二酚(CBD)，大麻酚(CBN)三种成分为主，其中四氢大麻酚为成瘾性成分，需加以控制。虽然现在有很多方法可以检测其中的大麻酚类化学成分，但方法较复杂或难以快速的检测。

国外文献中曾用快速蓝盐B(Fast Blue Salt B)试剂作为薄层层析显色剂，但由于快速蓝盐B试剂对其他酚类化合物以及胺盐类化合物具有同样得显色现象，因此以快速蓝盐作为显色剂的方法对大麻中CBD，THC，CBN不具有专属性，而且快速蓝盐B试剂在每次用时需要新鲜配制。

发明内容

为解决上述的技术问题，本发明提供一种大麻中主要大麻酚类化合物的鉴定方法，包括将供试品溶液和对照品溶液点于薄层板上，以展开剂展开，其特征在于，显色剂为香草醛-浓硫酸溶液。

所述展开剂为石油醚-乙酸乙酯、石油醚-丙酮、石油醚-氯仿、正己烷-乙酸乙酯或正己烷-丙酮，其体积比为15∶1-25∶1。

本发明的大麻中主要大麻酚类化合物的鉴定方法具体包括如下操作步骤：

取0.5g大麻提取物，加甲醇5ml，超声10-20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加2ml甲醇使溶解，作为供试品溶液；另分别取四氢大麻酚，大麻二酚，大麻酚对照品，加甲醇制成每1ml含0.3mg的溶液，作为对照品溶液；薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VB)试验，吸取上述供试品和对照品溶液各4-6μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚-乙酸乙酯15∶1为展开剂(或石油醚-丙酮，石油醚-氯仿，正己烷-乙酸乙酯，正己烷-丙酮)(体积比15∶1-25∶1)，连续将点有样品和对照品的硅胶薄层展开3-5次，取出薄层板，挥尽展开剂，放入碘缸中，取出，喷香草醛-浓硫酸溶液，加热。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显示相同颜色的蓝色斑点。

在本发明的显色条件下，其他的化合物与我们所要检测的大麻酚类化合物显不同的颜色，易于同其他化合物区别，因此该方法专属性强，而且显色剂也无需用时新鲜配制。

本发明方法简便，快速，灵敏度高，可以对大麻提取物及其相关产品进行有效的质量控制。

附图说明

图1为根据实施例1用香草醛-浓硫酸作显色剂显色的大麻提取物和标准品CBD、THC和CBN的薄层色谱图；

图2为根据对比例1用快速蓝盐B试剂作显色剂显色的大麻提取物和标准品CBD、THC和CBN的薄层色谱图。

具体实施方式

实施例1

取0.5g大麻提取物，加甲醇5ml，超声10分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加2ml甲醇使溶解，作为供试品溶液；另分别取四氢大麻酚，大麻二酚，大麻酚对照品，加甲醇制成每1ml含0.3mg的溶液，作为对照品溶液；薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VB)试验，吸取上述供试品和对照品溶液各4μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚-乙酸乙酯15∶1为展开剂，连续将点有样品和对照品的硅胶薄层展开3次，取出薄层板，挥尽展开剂，放入碘缸中，取出，喷香草醛-浓硫酸溶液，加热。得到的色谱图见图1。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显示相同颜色的蓝色斑点。

实施例2

取0.5g大麻提取物，加甲醇5ml，超声15分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加2ml甲醇使溶解，作为供试品溶液；另分别取四氢大麻酚，大麻二酚，大麻酚对照品，加甲醇制成每1ml含0.3mg的溶液，作为对照品溶液；薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VB)试验，吸取上述供试品和对照品溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚-丙酮16∶1为展开剂，连续将点有样品和对照品的硅胶薄层展开3次，取出薄层板，挥尽展开剂，放入碘缸中，取出，喷香草醛-浓硫酸溶液，加热。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显示相同颜色的蓝色斑点。

实施例3

取0.5g大麻提取物，加甲醇5ml，超声20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加2ml甲醇使溶解，作为供试品溶液；另分别取四氢大麻酚，大麻二酚，大麻酚对照品，加甲醇制成每1ml含0.3mg的溶液，作为对照品溶液；薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VB)试验，吸取上述供试品和对照品溶液各6μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚-氯仿18∶1为展开剂，连续将点有样品和对照品的硅胶薄层展开3次，取出薄层板，挥尽展开剂，放入碘缸中，取出，喷香草醛-浓硫酸溶液，加热。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显示相同颜色的蓝色斑点。

实施例4

取0.5g大麻提取物，加甲醇5ml，超声20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加2ml甲醇使溶解，作为供试品溶液；另分别取四氢大麻酚，大麻二酚，大麻酚对照品，加甲醇制成每1ml含0.3mg的溶液，作为对照品溶液；薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VB)试验，吸取上述供试品和对照品溶液各4μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯20∶1为展开剂，连续将点有样品和对照品的硅胶薄层展开4次，取出薄层板，挥尽展开剂，放入碘缸中，取出，喷香草醛-浓硫酸溶液，加热。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显示相同颜色的蓝色斑点。

实施例5

取0.5g大麻提取物，加甲醇5ml，超声20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加2ml甲醇使溶解，作为供试品溶液；另分别取四氢大麻酚，大麻二酚，大麻酚对照品，加甲醇制成每1ml含0.3mg的溶液，作为对照品溶液；薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VB)试验，吸取上述供试品和对照品溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-丙酮22∶1为展开剂，连续将点有样品和对照品的硅胶薄层展开4次，取出薄层板，挥尽展开剂，放入碘缸中，取出，喷香草醛-浓硫酸溶液，加热。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显示相同颜色的蓝色斑点。

实施例6

取0.5g大麻提取物，加甲醇5ml，超声20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加2ml甲醇使溶解，作为供试品溶液；另分别取四氢大麻酚，大麻二酚，大麻酚对照品，加甲醇制成每1ml含0.3mg的溶液，作为对照品溶液；薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VB)试验，吸取上述供试品和对照品溶液各6μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚-乙酸乙酯24∶1为展开剂，连续将点有样品和对照品的硅胶薄层展开5次，取出薄层板，挥尽展开剂，放入碘缸中，取出，喷香草醛-浓硫酸溶液，加热。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显示相同颜色的蓝色斑点。

实施例7

取0.5g大麻提取物，加甲醇5ml，超声20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加2ml甲醇使溶解，作为供试品溶液；另分别取四氢大麻酚，大麻二酚，大麻酚对照品，加甲醇制成每1ml含0.3mg的溶液，作为对照品溶液；薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VB)试验，吸取上述供试品和对照品溶液各4μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚-乙酸乙酯25∶1为展开剂，连续将点有样品和对照品的硅胶薄层展开5次，取出薄层板，挥尽展开剂，放入碘缸中，取出，喷香草醛-浓硫酸溶液，加热。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显示相同颜色的蓝色斑点。

对比例1

取0.5g大麻提取物，加甲醇5ml，超声10分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加2ml甲醇使溶解，作为供试品溶液；另分别取四氢大麻酚，大麻二酚，大麻酚对照品，加甲醇制成每1ml含0.3mg的溶液，作为对照品溶液；薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VB)试验，吸取上述供试品和对照品溶液各4μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚-乙酸乙酯15∶1为展开剂，连续将点有样品和对照品的硅胶薄层展开3次，取出薄层板，挥尽展开剂，喷新鲜配制的快速蓝盐B试剂，加热。得到得色谱图如图2。供试品色谱中，除在与对照品色谱相应的位置上显红色斑点外，在其他的位置上亦显红色斑点。