复方南星止痛膏巴布剂组合物及其制备方法

摘要

复方南星止痛膏巴布剂组合物，原料药重量是：生天南星267g，生川乌200g，丁香167g，肉桂167g，白芷300g，细辛1250g，川芎200g，徐长卿125g，制乳香83g，制没药83g，樟脑63g，冰片63g；辅料重量：NP－700，1.5kg，甘羟铝60g，酒石酸60g，EDTA15g，甘油6kg，交联聚维酮362g，纯化水11kg，明胶100g，氮酮100g，丙二醇200g，水杨酸甲酯160g，制成1000片巴布剂药膏。其中樟脑、冰片为粉末，其余药物为醇提液浸膏。本发明还提供了该组合物的制备方法。本发明载药量大、保水、保湿、透气性、透皮性好、重复揭帖性好；无过敏、无刺激等副作用。

说明书

技术领域

本发明涉及一种中药组合物，具体涉及一种复方南星止痛膏巴布剂组合物，以及这种中药组合物的制备方法。

背景技术

外用止痛贴膏剂是一种常用药物。据调查，关节肌肉疼痛发病率较高，严重影响了人们的工作和学习，治疗此类疾病的口服、注射的中西药虽然很多，但大多数存在着不同程度的副作用，所以外用贴敷治疗筋骨疼痛仍是最简便、最受欢迎的方法。目前外用贴膏剂占有越来越大的市场份额。其中，除了传统的黑膏药外，涂药胶布(橡胶膏剂)是一种使用量很大的剂型。例如，复方南星止痛膏(药物组合物)是1998年3月开始生产的中药三类新药，该药物组合物的构成是：

    生天南星    267g    生川乌      200g

    丁香        167g    肉桂        167g

    白芷        300g    细辛        125g

    川芎        200g    徐长卿      125g

    乳香(制)    83g     没药(制)    83g

    樟脑        63g     冰片        63g

辅料

    松香        267g    石蜡        1330g

    凡士林      800g    液体石蜡    223g

水杨酸甲酯    160g

该药物组合物的制备方法是：

以上十二味药物，除樟脑、冰片外，取天南星等十味，低温干燥，粉碎成细粉，过筛，混合均匀，备用。另取松香267g、石蜡1330g、凡士林800g、液体石蜡223g，加热至约100℃，熔融，待温度降至60℃时，依次加入水杨酸甲酯160g，樟脑、冰片及上述药粉混匀，制成涂料，进行涂膏、切段、盖衬、切片，制成1000片，即得。

由于疗效显著，近年来这种复方南星止痛膏药物组合物的产值和经济效益均有较大幅度的上升。但是，该复方南星止痛膏也存在诸多不足，主要有以下问题存在：(1)粘性较强时撕拉疼痛，或贴敷不牢时容易移位；(2)临床使用过敏率较高，刺激性较强，少数病人产生较为严重的过敏反应。(3)油性基质易污染皮肤与衣物。

发明内容

针对现有技术的上述不足，本发明的目的是对现有的复方南星止痛膏药物组合物进行改进，提供一种新的复方南星止痛膏组合物，该组合物的药物包容量将成倍的提高，以加大外用给药量；并提高对皮肤层的渗透力，加强药物治疗效果；还将大幅度降低药物的刺激性，明显降低临床过敏率，消除严重的过敏反应；并同时解决膏药的贴敷粘度问题和油性基质污染皮肤与衣物的问题。本发明还将提供这种复方南星止痛膏组合物的制备方法。

完成上述发明任务的技术方案是：一种复方南星止痛膏巴布剂组合物，其特征在于，该组合物原料药的组分及重量如下：

生天南星    260g～275g    生川乌    190g～210g

丁香          160g～175g      肉桂          160g～175g

白芷          285g～315g      细辛          120g～130g

川芎          190g～210g      徐长卿        120g～130g

乳香(制)      80g～86g        没药(制)      80g～86g

樟脑          60g～66g        冰片          60g～66g；

同时，该组合物辅料的组分及重量如下：

NP-700        1.4kg～1.6kg    甘羟铝        55g～65g

酒石酸        55g～65g        EDTA          12g～18g

甘油          5.5kg～6.5kg    交联聚维酮    350g～374g

纯化水        10kg～12kg      明胶          90g～110g

氮酮          90g～110g       丙二醇        190g～210g

水杨酸甲酯    150g～170g

共制成1000片巴布剂药膏。

本申请推荐以下优化比例，该组合物原料药的组分及重量如下：

生天南星    267g    生川乌      200g

丁香        167g    肉桂        167g

白芷        300g    细辛        125g

川芎        200g    徐长卿      125g

乳香(制)    83g     没药(制)    83g

樟脑        63g     冰片        63g

同时，该组合物辅料的组分及重量如下：

NP-700      1.5kg   甘羟铝      60g

酒石酸        60g     EDTA          15g

甘油          6kg     交联聚维酮    362g

纯化水        11kg    明胶          100g

氮酮          100g    丙二醇        200g

水杨酸甲酯    160g

共制成1000片巴布剂药膏。

本发明的进一步优化，有以下优化方案，

该组合物中，所述的各原料药组分是指：

天南星、川乌、白芷、川芎、肉桂、细辛、丁香、徐长卿、乳香和没药分别为，天南星、川乌、白芷、川芎、肉桂、细辛、丁香、徐长卿、乳香和没药的乙醇提取液的浓缩浸膏；

樟脑、冰片为，樟脑、冰片的粉末。

更优化和更具体地说，所述的各原料药组分是指：

天南星、川乌、白芷、川芎、肉桂、细辛、丁香、徐长卿、乳香和没药用6倍量85％乙醇回流提取2次，每次1.5小时，滤过，合并滤液，回收乙醇至密度为1.05～1.15左右的浸膏(50℃)；樟脑、冰片为：粉碎，过80目筛的粉末。

以上复方南星止痛膏巴布剂组合物的制备方法是：原料药与辅料分别按照上述比例备料，其特征在于，步骤如下：

天南星、川乌、白芷、川芎、肉桂、细辛、丁香、徐长卿、乳香、没药十味药材用6倍量85％乙醇回流提取2次，每次1.5小时；

回流液滤过，合并滤液，回收乙醇，至浸膏密度为1.05～1.15左右(50℃)，备用；

樟脑、冰片粉碎至80目，过筛，备用；

将甘羟铝加至甘油中，充分混匀，分别加入上述浸膏、EDTA、交联聚维酮、氮酮、丙二醇、樟脑、冰片、水杨酸甲酯，继续搅拌；

放入NP-700，搅拌均匀；

酒石酸、明胶用纯化水溶解后放入甘油相，连续抽真空搅拌约30min；

取出膏体、涂布、覆盖防粘层、切片，即得。

以上步骤中纯化水用量是11kg。

根据传统的理论，要改进药品的疗效或减少毒、副作用，主要应该考虑改变原料药的组分及重量比例。改变工艺、辅料(基质)在其中的作用是很次要的；只改变工艺、辅料无法达到改进药品的疗效或减少毒、副作用的目的。而本发明克服了上述传统偏见，本发明的方案是在吸收传统膏药精华的基础上，保持现有技术中复方南星止痛膏橡胶膏剂的原料药的组分及重量比例，利用现代贴布技术和促进透皮吸收技术，克服了传统膏药在基质配方、制备工艺、临床疗效、使用上的诸多缺点，具有载药量大、保水、保湿、透气性好、透皮性好、重复揭帖性好、可反复使用；无过敏、无刺激等副作用，是一种理想的中药外用制剂。具体优点有：

1、包容药量更大(40％)：巴布剂的基质厚度约2至5毫米，而一般的透气橡皮膏巴布剂基质和药物层仅0.1毫米左右厚度，相比增加了数十倍以上的基质和药物层的厚度，使容药量成倍的提高，加大了外用给药量，加强了药物治疗效果。(复方南星止痛膏处方药物总量为1843g/1000片)

2、透皮效果更强：巴布膏中含有水溶性大分子作为基质助渗促进剂，极大增强了透皮效果，实现了对皮肤层的强力渗透。

3、透气性更好：采用大网眼无纺布，透气性能更好。

4、不会产生刺激作用：巴布膏基质独特，对皮肤不产生刺激。而橡皮膏由于采用橡胶基质，长时间贴敷，对皮肤产生刺激，出现刺痒甚至红斑等。

5、可反复揭贴：一般外用贴剂的共同缺点是粘度过强且不可改变，使用时一旦揭下，不仅易粘带体毛，还难以保持和恢复粘度继续使用。而巴布剂的基质，可根据需要调节粘度，成品在使用时可以反复揭贴，不会粘带体毛，是贴用舒适的外用剂型。

以下是本发明技术效果的大量对比试验数据。

一、处方

    生天南星      267g    生川乌        200g

    丁香          167g    肉桂          167g

    白芷          300g    细辛          125g

    川芎          200g    徐长卿        125g

    乳香(制)      83g     没药(制)      83g

    樟脑          63g     冰片          63g

基质：

    NP-700        1.5kg   甘羟铝        60g

    酒石酸        60g     EDTA          15g

    甘油          6kg     交联聚维酮    362g

    纯化水        11kg    明胶          100g

    氮酮          100g    丙二醇        200g

    水杨酸甲酯    160g    共制成        1000片

二、药材提取工艺

对于君药天南星、川乌，所含的生物碱为镇痛的主要有效成分，目前文献中所得到的信息主要以乌头碱类的成分为可测指标，而乌头碱类的成分确实具有镇痛的功效，因此发明人确定以乌头碱类为所测指标成分，根据文献初步以酸水(以盐酸调节PH值至1.5)、碱水(以氢氧化钠调节PH值至9)、低浓度乙醇(30％乙醇)、高浓度乙醇(85％乙醇)四种提取方案进行初步筛选。具体方法为取十分之一处方量的原药材(天南星26.7g、川乌20g)，分别以上述四种提取溶剂8倍量进行回流提取，提取时间1.5小时，提取次数3次，分别合并提取液，高速离心(5000r/m)，取上清液浓缩至200ml，分别取1ml高速离心(12000r/m)，以0.45um微孔滤膜滤过，进入高效液相色谱仪进行分析。

色谱条件：安捷伦1200高效液相色谱仪

色谱柱：大连依利特Hypersil BDS C18，4.6×250mm，5μm

流动相：甲醇∶水∶氯仿∶二乙胺(80∶38∶2∶0.1)

检测波长：232nm

柱温：35℃

流速：0.8ml/min

进样量：20μl。

供试品处理：分别取1ml样品浓缩液装于离心管，高速离心(12000r/min)5min，取上清液以0.45μm微孔滤膜滤过后直接进样。

对照品配制：精密称取乌头碱4.94mg、新乌头碱5.04mg、次乌头碱5.04mg，用甲醇定容于同一100ml容量瓶中，备用。

结果：经高效液相分析，虽然出现的杂质峰较多，对特征峰产生了较大影响，但是可以发现总乌头碱在酸水提取和高浓度醇提取中得率相对较高，与其他两种提取方法相比具有明显性差异。因此发明人对这两种提取溶剂再分别进行正交试验，使提取工艺的参数在今后大生产过程中更加合理经济化。

1、天南星、川乌酸水提取正交试验

取天南星26.7g、川乌20g(十分之一处方量)，平行称取9份按下面正交表中设计方案展开试验

附正交因素水平表：

  因素水平酸水(PH)提取时间(h)提取次数溶剂倍数  1  1.0  1  1  4  2  1.5  1.5  2  6  3  2.  2.5  3  8

色谱条件：

色谱条件：安捷伦1200高效液相色谱仪

色谱柱：大连依利特Hypersil BDS C18，4.6×250mm，5μm

流动相：甲醇∶水∶氯仿∶二乙胺(65∶38∶2∶0.1)

检测波长：232nm

柱温：35℃

流速：0.8ml/min

进样量：20μl。

供试品处理：将上述9种酸水提取液离心后取上清液分别进行加热，浓缩至体积为200ml，精密量取20ml，用水稀释至40ml后倒入分液漏斗中，用氯仿50ml、50ml、50ml进行3次萃取，合并氯仿层，以无水碳酸钠脱水，滤过，减压回收蒸干，用二氯甲烷定容至5ml容量瓶中，液相备用。

对照品制备：精密称取新乌头碱3.64mg、乌头碱3.88mg、次乌头碱3.66mg对照品，用二氯甲烷定容至25ml容量瓶中。精密量取1.5ml溶于5ml二氯甲烷中，配成浓度依次为0.04368mg/ml、0.04656mg/ml、0.04392mg/ml。实验数据(表中浓度为定容至5ml容量瓶计算所得)经正交统计分析，结果如下：

结果分析：

由R值直观分析及方差分析结果可知：各因素对提取的影响大小顺序为A＞C＞D＞B，A因素为第一因素，C因素为第二因素，D因素为第三因素，B因素为第四因素，但是各因素的R值之间无显著性差异，相互影响较小，有表可见，最优水平为A₁B₂C₃D₃。考虑到成本及其他因素，发明人对提取条件做了进一步的筛选。提取溶剂酸度越大，提取效果越好，故ph值以选1为宜；提取时间以1.5h最好；提取次数上以3次最好，但是2次提取效果与其相差不大；提取倍数上以8倍量效果最好，综合以上各方面因素最终选择了如下优水平：A₁B₂C₂D₃。

2、天南星、川乌醇提正交试验

取天南星26.7g、川乌20g(十分之一处方量)，平行称取9份按下面正交表中设计方案试验，具体情况如下：

附正交因素水平表：

  因素水平  乙醇浓度(％) 提取时间(h)  提取次数  溶剂倍数  1  75 1  1  4  2  85 1.5  2  6  3  95 2.5  3  8

色谱条件：同前。

样品处理：将上述9种提取液分别进行减压回收乙醇，浓缩至体积为100ml，精密量取25ml后倒入分液漏斗中，用氯仿30ml、30ml、30ml进行3次萃取，合并氯仿层，以无水碳酸钠脱水，滤过，减压回收蒸干，以二氯甲烷定容至5ml容量瓶中，液相备用。在萃取过程中发现，因为仍然存在部分乙醇，考虑到该溶剂既溶于氯仿也可能有部分溶于水中，所以剩下的溶液浓缩到25ml，取5ml用水稀释至10ml后，用氯仿15、15、15ml萃取3次，收集氯仿液，用无水碳酸钠脱水，过滤，所得氯仿液减压回收至蒸干，冷却后用二氯甲烷定容至5ml容量瓶，液相备用。

对照品配制：精密称取新乌头碱3.64mg、乌头碱3.88mg、次乌头碱3.66mg对照品，用二氯甲烷定容至25ml容量瓶中。取精密量取1.5ml溶于5ml二氯甲烷中，配成浓度依次为0.04368mg/ml、0.04656mg/ml、0.04392mg/ml。

实验数据(表中浓度为定容至5ml容量瓶计算所得)经正统计分析后，结果如下：

结果分析：

由R值直观分析及方差分析结果可知：各因素对提取的影响大小顺序为B＞D＞A＞C，B因素有非常显著性差异，D也有显著性差异。由表可见，最优水平为A₃B₁C₂D₂。考虑到成本及其他因素，我们对提取条件做了进一步的筛选。提取溶剂的三个水平之间综合分析后以95％醇提效果最好，但是85％醇提与其相差不大选择后者无论从经济上还是安全性方面考虑都比较适宜；提取时间上，以1h最好；提取次数上以2次最好，但是差异性不大；提取倍数上以6倍量最好，所以最终的优化水平为A₂B₁C₂D₂。

3、两种药材正交实验分析与讨论

高浓度醇提与酸水提取两种工艺的比较中，从总乌头碱的提取得率来看，酸水提取比高浓度醇提的略高。但是发明人发现高浓度醇提所得的提取液比较澄清，酸水所得提取液中淀粉与粘液质的量比较多，导致提取液很难离心，且放置过夜后仍有沉淀析出，对于今后的生产可能产生较大影响。

4、八味药材正交实验：

药材取量(处方十分之一)：白芷30g、川芎20g、肉桂16.7g、丁香16.7g、细辛12.5g、徐长卿12.5g，乳香8.3g、没药8.3g  总重：125g

附正交因素水平表：

  因素水平乙醇浓度(％)提取时间(h/次)提取次数溶剂倍数  1  65  1  1  6  2  75  1.5  2  8  3  85  2.5  3  10

色谱条件：安捷伦1200高效液相色谱仪

色谱柱：phenomenex.C18，4.6×150mm，5μm

流动相：甲醇∶水∶磷酸(50∶50∶0.2)

检测波长：276nm

柱温：30℃

流速：1.0ml/min

进样量：5μl

供试液配制：将上述9种提取液分别减压回收乙醇，浓缩至体积为100ml，精密量取1ml，用50％乙醇定容至5ml，取其中部分样品放置于离心管内高速离心(12000r/min)5min，运转结束取上清液，液相备用。

对照品配制：取丹皮酚、丁香酚对照品，用甲醇分别配制成浓度为0.019mg/ml、0.221mg/ml。

(1)丹皮酚实验数据(表中浓度为定容至5ml容量瓶计算所得)经过正交统计分析，结果如下：

由R值直观分析及方差分析结果可知：各因素对提取的影响大小顺序为A＞D＞C＞B，A因素的三水平之间有显著性差异，其他因素显著性不大，从数据分析最终的优水平A₃B₃C₃D₁。从表中可见采用85％乙醇提取效果最好；提取时间上采用2.5小时最好，但1.5小时提取与其相差不大，宜选用1.5小时。同样提取次数选用2次最好；提取溶剂用量方面，考虑到提取效果及成本问题，采用六倍量比较适宜，综合以上各方面因素最终选定的优水平为A₃B₂C₂D₁。

(2)丁香酚实验数据(表中浓度为定容至5ml容量瓶计算所得)经过正交统计分析，结果如下：

由R值直观分析及方差分析结果可知：各因素对提取的影响大小顺序为A＞D＞C＞B，A因素的三水平之间有显著性差异，其他因素之间差异性较小，从表中数据直观分析，最优水平为A₃B₃C₃D₁。提取溶剂采用85％乙醇效果最好；提取时间上采用2.5小时最好，但1.5小时提取与其相差不大，宜选用1.5小时；同样提取次数宜选用2次；提取溶剂用量方面，考虑到有效成分含量提出率并结合成本，采用6倍量比较适宜，综合以上各方面因素最终选定的优水平为A₃B₂C₂D₁。

正交总结：

八味药材的提取最终选定了如下的提取方案：白芷、川芎、肉桂、细辛、丁香、徐长卿、乳香、没药用6倍量85％乙醇回流提取2次，每次1.5小时，收集提取药液，减压回收乙醇至浓缩液密度为1.05-1.15左右(50℃)。

两味药材的醇提考虑到成本问题所以选定优水平为A₂B₁C₁D₁，但根据数据分析，发明人也可以考虑按照八味药材提取方法进行。上述十种药材是否考虑混合一同进行醇提：十味药材用6倍量85％乙醇回流提取2次，每次1.5小时，收集提取药液，减压回收乙醇至浓缩液密度为1.05-1.15左右(50℃)。

综合以上正交结果，将天南星、川乌、白芷、川芎、肉桂、细辛、丁香、徐长卿、乳香、没药十味药材用6倍量85％乙醇回流提取2次，每次1.5小时，滤过，合并滤液，回收乙醇至浸膏密度为1.05-1.15左右(50℃)，备用；既能兼顾十味主药的有效成分的提出，又能节约能源、资源以及提高生产效率。

我们选择了以下几种提取组合方案来制成透皮吸收及药理试验样品以验证工艺的合理性：

1、全浸膏(十味药材醇提浸膏)：

药材处理：以上天南星、川乌、白芷、川芎、肉桂、细辛、丁香、徐长卿、乳香、没药十味药材用6倍量85％乙醇回流提取2次，每次1.5小时，滤过，合并滤液，回收乙醇至浸膏密度为1.05-1.15左右(50℃)，备用；樟脑、冰片粉碎至80目，过筛，备用。

成型处理：将甘羟铝加至甘油中，充分混匀，分别加入上述浸膏、EDTA、交联聚维酮、丙二醇、樟脑、冰片、水杨酸甲酯，继续搅拌，最后放入NP-700，搅拌均匀。酒石酸、明胶用纯化水溶解后放入甘油相，连续抽真空搅拌约30min后，取出、涂布、覆盖防粘层、切片，即得。

按此工艺在成型过程中加入透皮吸收剂氮酮，准备一份样品进行试验。2、粉末、四味药材浸膏、挥发油包合物

药材处理：天南星、川乌低温粉碎，过120目筛，备用。白芷、川芎、肉桂、细辛、丁香、徐长卿进行CO₂超临界萃取法提取挥发性成分，并将挥发性成分进行环糊精包合，包合温度50～60℃，时间为4～5h，所得包合物备用。白芷、川芎、乳香、没药用80％乙醇提取，回收乙醇，浸膏浓缩成密度为1.10～1.2(25℃)，备用。

成型处理：将甘羟铝加至甘油中，充分混匀，分别加入上述药粉及浸膏、EDTA、交联聚维酮、氮酮、丙二醇、樟脑、冰片、水杨酸甲酯，继续搅拌，最后放入NP-700，搅拌均匀。酒石酸、明胶用纯化水溶解后放入甘油相，连续抽真空搅拌约30min后，取出、涂布、覆盖防粘层、切片，即得。

3、药粉及八种药材提取浸膏

药材处理：天南星、川乌粉碎，过120目筛，备用。白芷、川芎、细辛、徐长卿、丁香、肉桂、乳香、没药八味药材用85％乙醇回流提取2次，每次1.5h，回收乙醇，浸膏浓缩成密度为1.10～1.20(25℃)，备用。

成型处理：将甘羟铝加至甘油中，充分混匀，分别加入上述药粉及浸膏、EDTA、交联聚维酮、丙二醇、樟脑、冰片、水杨酸甲酯，继续搅拌，最后放入NP-700，搅拌均匀。酒石酸、明胶用纯化水溶解后放入甘油相，连续抽真空搅拌约30min后，取出、涂布、覆盖防粘层、切片，即得。

按此工艺在成型过程中加入透皮吸收剂氮酮，准备一份样品进行试验。

三、透皮吸收实验

实验仪器：TP-5智能透皮吸收仪

试验方法：将大鼠皮固定扩散池的给药室和接受池之间，将巴布膏剂样品贴于离体皮肤的角质层表面，使之与皮肤密切接触。真皮一侧与接受液接触，排净气泡。水浴温度为(37±0.5)℃，转速为300r/min，接受池体积为15.5ml，每次取样为1ml。所配接受液如下：

接受液一：含40％乙醇的生理盐水；

接受液二：0.9％的生理盐水；

接受液三：0.9％生理盐水∶10％聚乙二醇400＝1∶1(含40％乙醇)；

接受液四：0.9％生理盐水∶10％聚乙二醇400＝1∶1

  接受液  取样量g  峰面积  透过转移率％  接受液一  0.3307  161063  44.8  接受液二  0.2573  62928.5  24.9  接受液三  0.3074  341635.81  58.41  接受液四  0.2769  145604  24.27

结果：上述四种接受液经过预试比较，结果发现40％乙醇和0.9％生理盐水∶10％聚乙二醇400＝1∶1(含40％乙醇)两种接受液接受效果较好，结合考虑到模仿人体体液的粘稠相似度，选用0.9％生理盐水∶10％聚乙二醇400＝1∶1含40％乙醇这一接受液进行试验。

发明人共采用五种不同原辅料配比的巴布剂进行透过率试验，分别在1、3、5、8、10、12、24小时取样，以丹皮酚及水杨酸甲酯作为考察指标，以高效液相法测定其药物透过率，测定色谱条件如下：

流动相：甲醇∶水∶磷酸(50∶50∶0.2)，检测波长为276nm，柱温为30℃，流速为1.0ml/min。

透皮吸收试验数据汇总

  (0.9％生理盐水∶10％聚乙二醇400＝1∶1含40％乙醇)峰面积(dpf)含量(dpf)μg/g  透过转移率％  峰面积(sysjz) 含量(sysjz)mg/g  透过转移率％  成品1h(dz070330)  79506.5043.52  12.43  248389.50 1.81  5.23  成品3h(dz070329)  140503.4176.91  21.97  504080.47 3.67  10.62  成品5h(dz070327)  219591.77120.20  34.34  793871.31 5.79  16.72  成品8h(dz070327)  256536.45140.43  40.12  1023126.81 7.46  21.55  成品10h(dz070327)  288675.88158.02  45.15  1125219.00 8.20  23.70  成品12h(dz070326)  322797.84176.70  50.49  1292270.38 9.42  27.22  成品24h(dz070326)  464916.84254.49  72.71  1738799.38 12.67  36.63  全浸膏1h(dz070330)  17957.519.68  2.76  32462.10 0.23  0.67  全浸膏3h(dz070329)  23768.1013.05  3.73  68799.60 0.50  1.44  全浸膏5h(dz070329)  37533.7120.61  5.89  51558.20 0.37  1.08  全浸膏8h(dz070327)  45485.8424.84  7.10  84136.55 0.59  1.72  全浸膏10h(dz070327)  50498.7227.57  7.88  60077.40 0.42  1.23  全浸膏12h(dz070326)  60280.3032.87  9.39  46853.90 0.34  0.97  全浸膏24h(dz070326)  60204.2432.82  9.38  54912.64 0.39  1.14  全浸膏N1h(dz070329)  31275.4018.59  5.31  171075.70 1.34  3.89

  全浸膏N3h(dz070329)  63456.55  37.73  10.78  209295.33  1.64  4.75  全浸膏N5h(dz070329)  71536.66  42.53  12.15  238117.09  1.87  5.41  全浸膏N8h(dz070327)  92965.46  54.97  15.71  324541.78  2.48  7.17  全浸膏N10h(dz070327)  99854.10  59.04  16.87  319829.63  2.44  7.06  全浸膏N12h(dz070326)  111086.98  65.59  18.74  336836.91  2.62  7.56  全浸膏N24h(dz070326)  146964.27  86.77  24.79  368570.06  2.86  8.28  粉末及四味药材浸膏、挥发油包合物1h  17134.91  10.80  3.09  77032.20  0.65  1.87  粉末及四味药材浸膏、挥发油包合物3h  30245.60  19.42  5.55  100848.50  0.79  2.29  粉末及四味药材浸膏、挥发油包合物5h  43968.71  28.08  8.02  115133.20  0.88  2.54  粉末及四味药材浸膏、挥发油包合物8h  56323.87  35.98  10.28  120087.46  0.92  2.65  粉末及四味药材浸膏、挥发油包合物10h  63450.60  40.53  11.58  113228.30  0.87  2.50  粉末及四味药材浸膏、挥发油包合物12h  86865.54  55.48  15.85  148019.30  1.13  3.27  粉末及四味药材浸膏、挥发油包合物24h  91588.50  58.41  16.69  118163.40  0.92  2.65  粉末及八味药材浸膏1h  38380.41  22.39  6.40  114705.70  0.88  2.56  粉末及八味药材浸膏3h  66842.35  38.99  11.14  159965.67  1.23  3.57  粉末及八味药材浸膏5h  120821.11  70.47  20.14  215473.59  1.66  4.80  粉末及八味药材浸膏8h  180510.63  104.72  29.92  292596.13  2.19  6.34  粉末及八味药材浸膏10h  192796.77  111.85  31.96  300588.81  2.25  6.51  粉末及八味药材浸膏12h  239846.03  138.93  39.70  335984.75  2.56  7.40  粉末及八味药材浸膏24h  341635.81  198.20  56.63  404291.41  3.03  8.76  粉末及八味药材浸膏N1h  46483.50  27.51  7.86  87753.40  0.69  1.98  粉末及八味药材浸膏N3h  53131.18  31.27  8.93  199489.19  1.52  4.38  粉末及八味药材浸膏N5h  81120.43  48.00  13.72  213100.50  1.67  4.82  粉末及八味药材浸膏N8h  92821.78  54.63  15.61  255207.64  1.94  5.61  粉末及八味药材浸膏N10h  92701.38  54.56  15.59  249096.61  1.89  5.48  粉末及八味药材浸膏N12h  106043.06  62.32  17.81  281361.63  2.18  6.29  粉末及八味药材浸膏N24h  147114.36  86.46  24.70  296011.78  2.29  6.62

四、复方南星止痛膏巴布剂药效试验——不同制备工艺抗炎止痛作用比较

1.实验目的

观察本发明复方南星止痛膏(巴布剂)不同制备工艺对大鼠足趾肿胀及压痛的影响。

2.实验材料

2.1药物：

2.1.1受试药：

(1)复方南星止痛膏：批号：051217，由江苏南星药业有限责任公司提供；(相当于含1.84克生药/片)。

(2)复方南星止痛膏(巴布剂)：编号：070501，由江苏南星药业有限责任公司提供；(相当于含1.84g生药/片；药粉及八种药材提取浸膏处方)。

(3)复方南星止痛膏(巴布剂)：编号：070502，由江苏南星药业有限责任公司提供；(相当于含1.84g生药/片；药粉及八种药材提取浸膏处方，同时基质中添加1％氮酮)。

(4)复方南星止痛膏(巴布剂)：编号：070503，由江苏南星药业有限责任公司提供；(相当于含1.84g生药/片；全浸膏处方)。

(5)复方南星止痛膏(巴布剂)：编号：070504，由江苏南星药业有限责任公司提供；(相当于含1.84g生药/片；全浸膏处方，同时基质中添加1％氮酮)。

(6)吲哚美辛肠溶片(消炎痛)：25mg/片，批号：0609018，由江苏亚邦爱普森药业有限公司生产。

2.1.2试剂：胰蛋白酶：25g/瓶，批号：1837A33，由Amresco公司生产

2.2仪器：YLS-3E电子压痛仪 由山东医学科学设备站生产

         YLS-7A足趾容积测量仪 由山东医学科学设备站生产

2.3实验动物：SD大鼠 雄性140-170g

由南京中医药大学实验动物中心提供

3.实验分组及给药剂量：

实验分为空白组6只，其余各组均为12只。

模型组：外贴膏药基质

阳性对照组：吲哚美辛肠溶片6.75mg/kg用蒸馏水配成0.675mg/ml溶液。

复方南星止痛膏组：0.1656g生药/kg

复方南星止痛膏(巴布剂)药粉组：0.1803g生药/kg

复方南星止痛膏(巴布剂)药粉组(N)：0.1803g生药/kg

复方南星止痛膏(巴布剂)浸膏组：0.1803g生药/kg

复方南星止痛膏(巴布剂)浸膏组(N)：0.1803g生药/kg

4.方法：

将大鼠分笼饲养，每笼6只，适应性喂养三天。致炎前测右后足正常痛阈值及足趾容积，并按痛阈值与足趾容积按上述分组随机分为八组后，除空白组不注射致炎，其余各组在每鼠右后足跖皮下注射0.25％胰蛋白酶0.1mL诱发局部炎症发生，受试药组注射后立即用胶布缠绕致炎部位粘贴给药，阳性组灌胃给药，分别于致炎后15min、30min、1h、1.5h(第3、4批大鼠于至炎后15min、30min、1h、1.5h、2h、3h、4h、6h)利用YLS-3E型电子压痛仪大鼠炎性足测定痛阈值，以大鼠炎性足受压后疼痛引起的嘶叫或挣扎时所给的重量作为痛阈值，并于致炎后1h、2h、3h、4h、6h，用YLS-7A足趾容积测量仪测量足趾容积计算肿胀率及肿胀抑制率。计算方法如下：

5.实验结果：

5.1复方南星止痛膏不同剂型对胰酶致大鼠足趾压痛的影响：消炎痛组、复方复方南星止痛膏组及浸膏(N)组显著升高15min、30min、1h、1.5h、2h、3h、4h的痛阈值，药粉组显著升高30min、1h、3h、4h的痛阈值，药粉(N)组显著升高30min、1h、1.5h、2h的痛阈值，浸膏组则显著升高30min、1.5h、3h的痛阈值，与模型组比较有显著性差异(表1)。消炎痛组、复方复方南星止痛膏组及浸膏(N)组显著增加15min、30min、1h、1.5h、2h、3h的压痛差值，药粉组显著增加15min、30min、1h、3h的压痛差值，药粉(N)组显著增加30min、1h、1.5h、2h的压痛差值，浸膏组则显著升高30min、3h的压痛差值，与模型组比较有显著性差异(表2)。

表1.对胰酶致大鼠足趾压痛的影响(x±SD)

与模型对照组比，^*P＜0.05；^**P＜0.01(下同)

表2对胰酶致大鼠足趾压痛差值的影响(x±SD)

5.2复方南星止痛膏不同剂型对胰酶致大鼠足趾肿胀的影响：与空白对照组比较，模型组足趾容积显著增加。与模型组比较，消炎痛组在3h足趾容积显著降低，复方复方南星止痛膏组、浸膏(N)组、药粉(N)组在2h、3h足趾容积显著降低，并且药粉(N)组在4h、6h足趾容积也显著降低(表3)。与模型组比较，消炎痛组在2h、3h、4h、6h足趾差值显著降低，复方复方南星止痛膏组及浸膏(N)组在2h、3h、4h足趾差值显著降低，药粉(N)组在1h、3h、4h、6h趾差值显著降低，并且在相应的时间段中各组足趾肿胀率也较模型组显著降低(表4、表5)。

表3对大鼠胰酶致足趾容积的影响(x±SD)

表4对大鼠胰酶致足趾容积差值的影响(x±sD)

表5对大鼠胰酶致足趾肿胀率的影响(x±SD)

与模型对照组比，^*P＜0.05；^**P＜0.01

6.结论：

复方南星止痛膏、复方南星止痛膏(巴布剂)不同制备工艺均不同程度的提高胰蛋白酶所致大鼠足趾肿胀痛阈值，减轻胰蛋白酶所致足趾肿胀率，具有一定的抗炎止痛作用。其中对于止痛作用而，复方南星止痛膏组、复方南星止痛膏(巴布剂)浸膏组(N)、复方南星止痛膏(巴布剂)药粉组(N)作用相当；复方南星止痛膏(巴布剂)药粉组和复方南星止痛膏(巴布剂)浸膏组略差。对于抗炎作用复方南星止痛膏组、复方南星止痛膏(巴布剂)浸膏组(N)、复方南星止痛膏(巴布剂)药粉组(N)作用相差不大；而复方南星止痛膏(巴布剂)浸膏组和复方南星止痛膏(巴布剂)药粉组则未见明显抗炎作用。增加透皮吸收剂(N)抗炎止痛作用均优于未加入组。

具体实施方式

实施例1，每1000片巴布剂药膏原料药的组分及重量如下：

分别按照上述比例备料，制备步骤如下：

天南星、川乌、白芷、川芎、肉桂、细辛、丁香、徐长卿、乳香、没药十味药材用6倍量85％乙醇回流提取2次，每次1.5小时；

回流液滤过，合并滤液，回收乙醇，至浸膏密度为1.05～1.15左右，备用；

樟脑、冰片粉碎，过筛，备用；

将甘羟铝加至甘油中，充分混匀，分别加入上述浸膏、EDTA、交联聚维酮、氮酮、丙二醇、樟脑、冰片、水杨酸甲酯，继续搅拌；

放入NP-700，搅拌均匀；

酒石酸、明胶用纯化水溶解后放入甘油相，连续抽真空搅拌约30min；

取出膏体、涂布、覆盖防粘层、切片，即得。

实施例2，与实施例1基本相同，但有以下改变：

每1000片巴布剂药膏原料药的组分及重量如下：

生天南星    275g    生川乌    210g

丁香        175g    肉桂      175g

白芷        315g    细辛      130g

川芎        210g    徐长卿    130g

制乳香      86g     制没药    86g

樟脑        66g     冰片      66g；

同时，该组合物辅料的组分及重量如下：

NP-700      1.6kg    甘羟铝        65g

酒石酸      65g      EDTA          18g

甘油        6.5kg    交联聚维酮    374g

纯化水      12kg     明胶          110g

氮酮        110g     丙二醇        210g

水杨酸甲酯  170g。

实施例3，与实施例1基本相同，但有以下改变：

每1000片巴布剂药膏原料药的组分及重量如下：

生天南星    260g     生川乌        190g

丁香        160g     肉桂          160g

白芷        285g     细辛          120g

川芎        190g     徐长卿        120g

制乳香      80g      制没药        80g

樟脑        60g      冰片          60g；

同时，该组合物辅料的组分及重量如下：

NP-700      1.4kg    甘羟铝        55g

酒石酸      55g      EDTA          12g

甘油        5.5kg    交联聚维酮    350g

纯化水      10kg     明胶          90g

氮酮        90g      丙二醇        190g

水杨酸甲酯  150g。