促红细胞生成蛋白的重组生产方法

摘要

本发明涉及用于生产高度糖基化形式(相对于天然EPO中3个N连接的糖基化，总共5个N连接的糖基化)的促红细胞生成素的重组方法。所增加的糖基化位点将产生更多数目的糖链，以及比人EPO更高的唾液酸含量，这将使得该重组分子的半衰期更长。本发明还涉及包含编码高度糖基化形式的促红细胞生成素的核酸序列表达盒的构建，以及在宿主细胞中的稳定表达。本发明还涉及用于纯化促红细胞生成蛋白的优化方法。本发明的重组EPO及其盐和功能衍生物，可以包含药物组合物中用于增加血细胞比容的活性成分，因此可用于治疗贫血症以及恢复患者的健康状况和生活质量。