大蝎子草的临床新用途

摘要

本发明公开的是大蝎子草的临床新用途，具体是指大蝎子草在制备治疗肝损伤、肾炎、前列腺肥大、肿瘤以及血管栓塞性疾病药物中的应用。本发明以大蝎子草为原料，按常规工艺经提取得到大蝎子草的提取物，再加入辅料制成适合于临床上使用的常规口服或非口服剂型，用于治疗肝损伤、肾炎、前列腺肥大、肿瘤以及血管栓塞性等心血管疾病。

说明书

技术领域

本发明涉及大蝎子草的临床新用途，特别是大蝎子草提取物在制备治疗肝损伤、肾炎、前列腺肥大、肿瘤以及血管栓塞性疾病等心血管疾病药物中的应用，属于药品的技术领域。

背景技术

大蝎子草Girardinia diversifolia(Link)Friis是荨麻科蝎子草属植物大蝎子草Girardinia diversifolia(Link)Friis的干燥全草，茎高大2米，具5棱，生刺毛和细糙毛或伸展的绒毛，多分枝。叶互生，叶片轮廓宽卵形、扁圆形或五角形，茎干的叶较大，分枝上的叶较小，长和宽均8～25cm，基部宽心形或近截形，具(3-)5-7深裂片，稀、不裂，边缘有不规则的牙齿或重牙齿，上面疏生刺毛和糙伏毛，下面生糙伏毛或短硬毛和在脉上疏生刺毛，基生脉3条；叶柄长3～15cm，毛被同茎上的；托叶大，长圆状卵形，长10～30mm，外面疏生细糙伏毛。大蝎子草，性凉、味苦、辛，有毒。具有祛痰，利湿，解毒的功效，在贵州苗族的部分区域被使用，用于咳嗽痰多，水肿。外用治疮毒。用量为10～50g，外用适量煎水洗。大蝎子草用于治疗肝损伤、肾炎、前列腺肥大、肿瘤以及血管栓塞性疾病，目前尚未见有报道。

发明内容

本发明的目的在于，提供大蝎子草的临床新用途。即大蝎子草在制备治疗肝损伤、肾炎、前列腺肥大、肿瘤以及血管栓塞性疾病药物中的应用。用大蝎子草为原料制成的药物制剂对肝损伤、肾炎、前列腺肥大、肿瘤以及血管栓塞性疾病等心血管疾病具有显著的治疗作用。

本发明的技术方案。大蝎子草的临床新用途，是将大蝎子草用在制备治疗肝损伤、肾炎、前列腺肥大、肿瘤以及血管栓塞性疾病药物中。

上述大蝎子草的临床新用途中，大蝎子草提取物应用于制备治疗肝损伤、肾炎、前列腺肥大、肿瘤以及血管栓塞性疾病的药物，可采用任何临床上允许的剂型。可以是口服药剂，如散剂、片剂、颗粒剂、胶囊剂、微囊剂、丸剂、滴丸、软胶囊、口服液、糖浆剂、分散片、喷雾剂或气雾剂等；也可以是非口服药剂，如栓剂、注射剂(包括静脉注射、肌肉注射)、软膏剂、吸入剂、凝胶剂等。

前述大蝎子草的临床新用途中，将大蝎子草用于制备治疗肝损伤、肾炎、前列腺肥大、肿瘤以及血管栓塞性疾病的药物，是以大蝎子草为原料，按常规工艺经提取得到大蝎子草总提取物，然后再加入相应辅料，制备成任何一种适合于临床上使用的口服或非口服剂型，如散剂、片剂、颗粒剂、胶囊剂、微囊剂、丸剂、滴丸、软胶囊、口服液、糖浆剂、分散片、喷雾剂或气雾剂、栓剂、注射剂(包括静脉注射、肌肉注射)、软膏剂、吸入剂、凝胶剂等。所用的辅料包括常规的溶剂、崩解剂、矫味剂、防腐剂、着色剂、粘合剂、润滑剂、润滑剂、湿润剂、增稠剂、增溶剂、基质等药物辅料。

前述大蝎子草的临床新用途中，将大蝎子草用于制备治疗肝损伤、肾炎、前列腺肥大、肿瘤以及血管栓塞性疾病的药物，还可以与解表药、清热药、泻下药、祛风湿药、化湿药、利水渗湿药、消食药、止血药、温里药、理气药、化瘀止血药、活血化瘀药、化痰止咳平喘药、安神药、平肝息风药、开窍药、补虚药中的一种或一种以上的药物组成复方药物。

前述大蝎子草的临床新用途中，将大蝎子草用于制备治疗肝损伤、肾炎、前列腺肥大、肿瘤以及血管栓塞性疾病药物，所述的解表药是桂枝、细辛、生姜、薄荷、葛根或升麻；所述的清热药是黄芩、黄连、黄柏、蒲公英或鱼腥草，所述的泻下药是大黄、番泻叶或巴豆，所述的祛风湿药是独活、川乌或雷公藤，所述的化湿药是苍术或厚朴，所述的利水渗湿药是茯苓、猪苓、泽泻或薏苡仁，所述的消食药是山楂或麦芽，所述的止血药是三七、蒲黄、茜草或白及，所述的温里药是附子、干姜、肉桂、吴茱萸、花椒或丁香；所述的理气药是陈皮、青皮、木香、香附、川楝子或乌药；所述的化瘀止血药是三七、蒲黄或茜草；所述的活血化瘀药是川芎、延胡索、郁金、姜黄、乳香、没药、丹参、牛膝、红花、桃仁、益母草、毛冬青、莪术、水蛭、血竭或马钱子；所述的化痰止咳平喘药是半夏、天南星、橘梗、川贝母、洋金花；安神药是酸枣仁或灵芝；平肝息风药是天麻、钩藤、羚羊角、全蝎、僵蚕、地龙或牛黄；所述的开窍药是麝香、冰片或苏合香；所述的补虚药是人参、西洋参、党参、黄芪、白术、山药、甘草或刺五加。

本发明应用大蝎子草制备治疗肝损伤、肾炎、前列腺肥大、肿瘤以及血管栓塞性疾病的药物，其药物疗效可通过大蝎子草提取物对肝损伤、肾炎、前列腺肥大、肿瘤及血管栓塞性疾病等实验动物模型的影响来表现。

以下是本发明的实验例：

实验例1：大蝎子草提取物对对大鼠实验性急性肝损伤的影响

1.实验材料

1.1材料：大蝎子草的二氧化碳超临界提取物，为灰褐色粉末。人用量为0.5～12g(提取物)/10～120g生药/60kg。

1.2实验动物：健康雄性SD大鼠，ICR小鼠，清洁级，体重为180～220g，贵阳医学院试验动物中心，合格证号SCXK(黔)2002-2001。动物饲以试验全价颗粒饲料(贵阳医学院试验动物中心提供)，自由饮水，室温22±2℃。

2.方法

2.1大蝎子草对D-Gal诱导急性肝损伤模型的影响：SD大鼠50只，体重为180～220g，随机分为5组，即：正常对照组(给予等容积蒸馏水)、模型组(给予等容积蒸馏水)、药物组分为三个剂量组：2.5g/kg、5g/kg、10g/kg，给药容积为10ml/kg；各组连续灌胃给药5d后，末次给药后除正常对照组外，其余各组腹腔注射D-Gal 800mg/kg，11h后，各组灌胃给予1次药物，1h后，经球后静脉丛取血，分析AST、ALT。

2.2大蝎子草对CCl₄诱导小鼠肝损伤模型的影响：ICR健康雄性小鼠50只随机分为5组，正常对照组(给予等容积蒸馏水)、模型组(给予等容积蒸馏水)、药物组分为三个剂量组：4g/kg、8g/kg、16g/kg，给药容积为20ml/kg；各组连续灌胃给药5d后，于给药后1h，除正常对照组外其余各组腹腔注射含0.5％CCl₄的橄榄油10ml/kg，造模后16h各组再给药1次，1h后小鼠球后静脉丛取血，1500转/min，分离血清，按市售试剂盒分析ALT、AST活力。

2.3大蝎子草对小鼠酒精性肝损伤的保护作用：将小鼠随机分为5组：空白对照组(给予等容积蒸馏水)、模型组(给予等容积蒸馏水)、药物组分为三个剂量组：4g/kg、8g/kg、16g/kg，给药容积为20ml/kg；各组连续灌胃给药30d。末次给药后60min，除空白对照组外其余各组经口1次灌胃酒精50％分析纯的乙醇12ml/kg(4.8g/kg)。空白对照组给予蒸馏水，禁食12h后取血进行生化分析，处死动物，取肝脏用生理盐水制成10％的肝脏匀浆，检测肝组织中MDA、GSH、TG的含量。

2.4数据分析与统计方法：所有数据以x±s表示，统计学分析采用student-T检验。

3.结果

3.1大蝎子草提取物对D氨基半乳糖所致大鼠急性肝损伤的影响：模型组腹腔注射D-Gal后，血中AST、ALT显著增加，而大蝎子草连续灌胃给药5d，显著降低血中AST、ALT。结果见表1。

表1  蝎子草提取物对D-Gal肝损伤大鼠血清ALT和AST活性的影响(x±s，n＝10)

与正常对照组比较^##P＜0.01，与模型组比较**P＜0.01，*P＜0.05

3.2大蝎子草提取物对CCl₄肝损伤小鼠血清ALT和AST活性的影响：小鼠注射CCl₄后16h，血清ALT、AST活力显著升高。与模型组比较，大蝎子草提取物可显著抑制ALT、AST活力的升高，表明大蝎子草可明显改善CCl₄所致小鼠急性肝损伤。结果见表2。

表2大蝎子草提取物对CCl₄肝损伤小鼠血清ALT和AST活性的影响(x±s，n＝10)

  组别  剂量(g生药/kg)  AST(U/L)  ALT(U/L)  对照组  45.6±13.5  188.7±28.6  模型组  108.6±43.7^##  298.3±65.3^##  大蝎子草  16  48.6±15.8**  206.3±50.7**  8  60.25±20.6*  235.6±60.3*  4  80.9±40.7  272.5±62.3

与正常对照组比较^##P＜0.01，与模型组比较**P＜0.01，*P＜0.05。

3.3大蝎子草对小鼠酒精性肝损伤的保护作用：乙醇肝损伤模型组小鼠肝组织中的丙二醛、三酰甘油均高于空白对照组，差异有显著性意义(P＜0.01)；乙醇肝损伤模型组小鼠肝组织中的还原型谷胱甘肽低于空白对照组，差异有显著性意义(P＜0.01)，说明模型建立成功。16g/kg大蝎子草组小鼠肝组织中还原型谷胱甘肽高于乙醇肝损伤模型组，差异有显著性意义(P＜0.05)；16g/kg大蝎子草组小鼠肝组织中的丙二醛、三酰甘油低于乙醇肝损伤模型组，差异有显著性意义(P＜0.05)，结果见表3。

表3大蝎子草提取物对酒精性肝损伤小鼠肝组织MDA、GSH、TG的影响(x±s，n＝10)

  组别  剂量  (g生药/kg)  MDA  (mmol/g)  GSH  (mmol/g)  TG  (mg/g)  空白对照组  87.0±18.7  6.6±0.9  2.81±0.92  模型组  160.3±29.6^##  3.1±0.7^##  11.38±4.21^##  大蝎子草  16  98.3±35.6**  5.6±1.3*  5.53±1.38*  8  136.7±38.6  4.5±1.9  6.98±2.97  4  160.5±42.7  5.6±1.2  8.12±3.96

与正常对照组比较^##P＜0.01，与模型组比较**P＜0.01，*P＜0.05。

实验例2：大蝎子草提取物对大鼠实验性肾炎的影响

1.实验材料

1.1材料：

大蝎子草的二氧化碳超临界提取物，人用量为0.5～12g(提取物)/10～120g生药/60kg。

牛血清白蛋白(BSA)           (Sino-American Biotec)

葡萄球菌肠毒素(SEB)         (解放军军事科学院)

弗氏完全佐剂和不完全佐剂    (Bio Basic)

1.2实验动物：健康SD大鼠，清洁级，贵阳医学院试验动物中心，合格证号SCXK(黔)2002-2001。动物经普通饲料适应性喂养1周后，选用尿红细胞、尿蛋白定性结果阴性者进入实验。动物饲以试验全价颗粒饲料(贵阳医学院试验动物中心提供)，自由饮水，室温22±2℃。

2.方法

2.1大蝎子草提取物对大鼠系膜增生性肾炎的防治作用：SD大鼠80只，随机选择10只作为正常对照组，其他大鼠自实验第1d起，以BSA 20mg配成水溶液隔日灌胃1次(约1ml/100g体重)，至实验结束。实验的第1天经皮下分点注射完全弗氏完全佐剂0.2ml(含BSA 2mg)，第8天注射弗氏不完全佐剂0.2ml(含BSA 2mg)，实验第8、15d尾静脉注射SEB(0.4mg/kg)各1次，其中30只，与模型复制同日灌胃给予不同剂量的大蝎子草。每周收集尿液作常规检查RBC、WBC，以出现尿蛋白(定性：1+)提示动物模型成功，继续灌胃BSA至14周末，将大鼠再随机分为模型组、大蝎子草提取物2.5、5.0、10g(生药)/kg等剂量组。每日灌胃1次，模型组给予等容积的蒸馏水，各组给药容积为10ml/kg，至第18周末处死动物。代谢笼收集0、2、6、10、14及18周末大鼠24H的尿液，尿沉渣作常规镜检分析RBC、WBC及尿蛋白。球后静脉丛取血，分离血清，分析肌酐、尿素氮、总蛋白、白蛋白及ALT。

2.2大蝎子草提取物对大鼠Heymann肾炎模型的影响：取150～200g左右大鼠，雌雄兼用，处死后取出肾脏插入导管，用生理盐水反复冲洗后，取肾皮质5g研成匀浆，与弗氏完全佐剂混匀成10ml，加生理盐水20ml，给同种雄性大鼠ip，两周1次，每次1.5～2ml，共8次，直至出现蛋白尿。将形成模型的雄性SD大鼠40只，平分为4组，即模型对照组、大蝎子草提取物2.5、5.0、10g(生药)/kg等剂量组，并取正常雄性大鼠10只设为正常对照组，给药容积为10ml/kg，每日1次，正常对照组与模型对照组给予等容积蒸馏水。连续给药30d，并于大鼠注射肾匀浆弗氏完全佐剂混悬液前、给药前及给药后，测定家兔的Cr、Bun以及Uricprotein。

2.3数据分析与统计方法：所有数据以x±s表示，统计学分析采用student-T检验。

3.结果

3.1大蝎子草对大鼠系膜增生性肾炎的防治作用

3.1.1对尿蛋白的影响：大鼠实验前尿检RBC、WBC均为阴性，自实验第2周起造模组可见RBC0～3个/HP，但结果不稳定。实验至第6周，造模组出现不同程度的蛋白尿，第11周定性达1+，第14、18周末时24h尿蛋白定量与正常对照组差异显著，而且逐渐加重。预防组中高剂量组，防治作用明显，14周尿蛋白与模型组比较显著降低；治疗组治疗4周后尿蛋白显著降低，与治疗前比较差异也有显著性。结果见表4。

表4大蝎子草提取物对大鼠系膜增生性肾炎尿蛋白的影响(x±s，n＝10)

与正常对照组比较^##P＜0.01，与模型组比较**P＜0.01，*P＜0.05。

3.1.2对大鼠血Cr、Bun、TP、Alb、ALT的影响：18周末，模型组Cr、Bun以及ALT显著增高，而ALB与TP明显降低，各指标与正常对照组比较具有显著性差异(P＜0.05，P＜0.01)；给药组无论预防还是治疗组，大蝎子草提取物明显降低血Cr、Bun、ALT，升高血TP、Alb，与模型组比较差异具有显著性(P＜0.05sP＜0.01)，预防给药组与治疗给药组之间未间显著性差异(P＞0.05)，但是数值上预防组比治疗组的作用趋势明显。结果见表5。

表5大蝎子草提取物对大鼠系膜增生性肾炎血液生化指标的影响(x±s，n＝10)

与正常对照组比较^##P＜0.01，与模型组比较**P＜0.01，*P＜0.05。

3.2大蝎子草提取物大鼠Heymann肾炎模型的影响：由实验结果可知，模型组在模型复制30d后，尿蛋白、血中Cr和Bun的含量显著增加，与正常对照组比较，差异显著(P＜0.05，P＜0.01)；而连续给予大蝎子草提取物30d后，显著降低24h尿蛋白的量和血中Cr、Bun的含量，与模型组比较，差异显著(P＜0.05，P＜0.01)。结果见表6、表7。

表6  大蝎子草提取物对大鼠Heymann肾炎尿蛋白含量的影响(x±s，n＝10)

与正常对照组比较^##P＜0.01，与模型组比较**P＜0.01，*P＜0.05。

表7大蝎子草提取物对大鼠Heymann肾炎Cr和Bun的影响(x±s，n＝10)

与正常对照组比较^##P＜0.01，与模型组比较**P＜0.01，*P＜0.05。

实验例3大蝎子草提取物对实验性前列腺肥大模型的影响

1.实验材料

1.1材料：大蝎子草的二氧化碳超临界提取物，人用量为0.5～12g(提取物)/10～120g生药/60kg。

1.2实验动物：健康SD大鼠、ICR小鼠，清洁级，贵阳医学院试验动物中心，合格证号SCXK(黔)2002-2001。动物经普通饲料适应性喂养1周后，选用尿红细胞、尿蛋白定性结果阴性者进入实验。动物饲以试验全价颗粒饲料(贵阳医学院试验动物中心提供)，自由饮水，室温22±2℃。

2.方法

2.1大蝎子草提取物对大鼠前列腺增生模型影响：按丙酸睾酮引起大鼠前列腺增生法，即手术切除大鼠双侧睾丸，1周后，每只大鼠sc丙酸睾酮0.5mg/d，连续4周，同时进行药物处理。大鼠分5组，每组10只。假手术对照组：进行手术切除大鼠双侧睾丸的全过程，但并不切除睾丸，皮下注射丙酸睾酮的溶剂枛橄榄油；增生模型组：手术后第2周开始sc丙酸睾酮0.5mg/d，连续4周；大蝎子草提取物3个剂量组：2.5、5、10g生药/kg，sc丙酸睾酮的同时，分别ig给予大蝎子草提取物，1次/日，连续4周。于末次给药24h后处死动物，剖取前列腺各叶，测量前列腺体积，各叶湿重。

2.2大蝎子草提取物对小鼠前列腺增生模型影响：体重20～25g的健康雄性小鼠，随机分为正常对照组、模型组、大蝎子草提取物16、8、4g生药/kg 3个剂量组，各组灌胃给药，给药容积为20ml/kg，正常对照组与模型组灌胃给予等容积的蒸馏水。除正常对照组外，其余各组动物给药后40min皮下注射丙酸睾酮5mg/kg，连续注射给药7d，7天后各组随机处死动物2～3只，剖取前列腺称湿重，计算前列腺指数＝前列腺重量/鼠重(mg/g)，结果提示模型复制成功。从第8d开始，灌胃给予药物处理，同时继续皮下注射给予丙酸睾酮5mg/kg，连续3周。

2.3数据分析与统计方法：所有数据以x±s表示，统计学分析采用student-T检验。

3.结果

3.1大蝎子草提取物对大鼠前列腺增生的影响：切除睾丸，连续皮下注射丙酸睾酮4周后，模型组前列腺体积增大，前列腺各叶湿重明显大于假手术对照组，差异显著，(P＜0.01)。大蝎子草提取物10、5g生药/kg剂量组，显著降低前列腺容积和各叶重量的增加(P＜0.05，P＜0.01)。结果见表8。

表8大蝎子草提取物对大鼠前列腺增生的影响(x±s，n＝10)

与正常对照组比较^##P＜0.01，与模型组比较**P＜0.01，*P＜0.05

3.2大蝎子草提取物对小鼠前列腺增生的影响：与正常对照组比较，模型组前列腺湿重、湿重指数均增高(P＜0.01)。大蝎子草提取物10、5g生药/kg剂量组，显著降低前列腺湿重和湿重指数(P＜0.05，P＜0.01)。结果见表9。

表9大蝎子草提取物对小鼠前列腺增生的影响(x±s，n＝10)

与正常对照组比较^##P＜0.01，与模型组比较**P＜0.01，*P＜0.05

实验例4大蝎子草提取物对小鼠实验性肿瘤模型的影响

1.实验材料

1.1材料：大蝎子草的二氧化碳超临界提取物，人用量为0.5～12g(提取物)/10～120g生药/60kg。

1.2实验动物：健康昆明种小鼠，清洁级，体重18～22g，均由贵阳医学院实验动物中心提供，动物合格证号：SCXK(黔)2002-0001。动物饲以试验全价颗粒饲料(贵阳医学院试验动物中心提供)，自由饮水，室温22±2℃。

1.1.3肿瘤细胞株：

小鼠肝癌H₂₂：华西医科大学肿瘤研究所；

小鼠S₁₈₀肉瘤：上海中科院细胞研究所；

以上瘤株低温冻存，试验时经复苏后按常规方法传代用于试验。

2.方法

2.1大蝎子草提取物对小鼠H₂₂实验性动物肿瘤模型的影响：取H₂₂肿瘤细胞株用培养液制成细胞悬液，取少许的细胞悬液加等量的0.4％台盼蓝染液，显微镜下用血细胞计数板计数活细胞，计数后将悬液移入到25ml培养瓶里，用含10％小牛血清的培养液按比例稀释至1×10⁷/ml。再将培养瓶放入温度37℃，相对湿度100％，含5％CO₂，95％空气的培养箱培养。每天给培养瓶内的细胞换液一次，2～3d传代一次，传代4次，将培养液离心得浓缩的肿瘤细胞，再稀释成浓度为1×10⁷/ml的细胞后，用无菌注射器接种到小鼠腹腔内，0.2ml/只。瘤珠在动物体内传代4次后，选择接种8天腹部明显膨大的动物，颈椎脱臼，固定于蜡板上，无菌操作，抽吸腹水，将6只动物的腹水混合。滴一滴腹水混合液于载玻片上，推片，瑞氏染色，镜下进行细胞分类记数，瘤细胞数＞95％。腹水用无菌PBS液稀释至1×10⁷个/ml，每鼠右腋下接种0.2ml细胞。24h后随机分组，即：正常对照组(等容积蒸馏水)，模型组(等容积蒸馏水)，大蝎子草提取物2.5、5.0、10g(生药)/kg等剂量组；每组10只。每天灌胃给药1次，连续给药7d。末次给药后1h球后静脉丛取血，处死小鼠，称体重并剥离皮下瘤块，称瘤重，计算抑瘤率。实验重复三批，每批实验采用同种性别动物。

2.2大蝎子草提取物对小鼠S₁₈₀肉瘤实验性动物肿瘤模型的影响：取S₁₈₀肿瘤细胞株用培养液制成细胞悬液，取少许的细胞悬液加等量的0.4％台盼蓝染液，显微镜下用血细胞计数板计数活细胞，计数后将悬液移入到25ml培养瓶里，用含10％小牛血清的培养液按比例稀释至1×10⁷/ml。再将培养瓶放入温度37℃，相对湿度100％，含5％CO₂，95％空气的培养箱培养。每天给培养瓶内的细胞换液一次，2～3d传代一次，传代4次，将培养液离心得浓缩的肿瘤细胞，再稀释成浓度为1×10⁷/ml的细胞后，用无菌注射器接种到小鼠腹腔内，0.2ml/只。瘤珠在动物体内传代4次后，选择接种8天腹部明显膨大的动物，颈椎脱臼，固定于蜡板上，无菌操作，抽吸腹水，将6只动物的腹水混合。滴一滴腹水混合液于载玻片上，推片，瑞氏染色，镜下进行细胞分类记数，瘤细胞数＞95％。腹水用无菌PBS液稀释至1×10⁷个/ml，每鼠右腋下接种0.2ml细胞。24h后随机分组，即：正常对照组(等容积蒸馏水)，模型组(等容积蒸馏水)，大蝎子草提取物2.5、5.0、10g(生药)/kg等剂量组；每组10只。每天灌胃给药1次，连续给药7d。末次给药后1h球后静脉丛取血，处死小鼠，称体重并剥离皮下瘤块，称瘤重，计算抑瘤率。实验重复三批，每批实验采用同种性别动物。

2.3数据分析与统计方法：所有数据以x±s表示，统计学分析采用student-T检验。

变化率计算：抑瘤率(％)＝(模型组给药组)/模型组×100％

3.结果

3.1大蝎子草提取物对小鼠H₂₂实验性动物肿瘤模型的影响：三批试验的结果提示，大蝎子草提取物高剂量抑瘤率均高于30％，且大蝎子草提取物显著的抑制H₂₂肿瘤生长作用，与模型组比较差异显著(p＜0.01)，并呈一定的量效关系，三批实验结果基本一致。结果见表10。

表10大蝎子草提取物对小鼠H22的抑制作用(x±s，n＝10)

与正常对照组比较^##P＜0.01，与模型组比较**P＜0.01，*P＜0.05。

3.2大蝎子草提取物对小鼠S₁₈₀实验性动物肿瘤模型的影响：三批试验的结果提示，大蝎子草提取物高剂量抑瘤率均高于30％，且大蝎子草提取物显著的抑制S₁₈₀肿瘤生长作用，与模型组比较差异显著(p＜0.01)，并呈一定的量效关系，三批实验结果基本一致。结果见表11

表11大蝎子草提取物对小鼠H22的抑制作用(x±s，n＝10)

与正常对照组比较^##P＜0.01，与模型组比较**P＜0.01，*P＜0.05。

实验例5  大蝎子草提取物对血管栓塞性疾病动物模型的影响

1.实验材料

1.1材料：大蝎子草的二氧化碳超临界提取物，人用量为0.5～12g(提取物)/10～120g生药/60kg。

1.2实验动物：健康昆明种小鼠、SD大鼠，清洁级，均由贵阳医学院实验动物中心提供，动物合格证号：SCXK(黔)2002-0001。动物饲以试验全价颗粒饲料(贵阳医学院试验动物中心提供)，自由饮水，室温22±2℃。

2.方法

2.1大蝎子草提取物对大鼠静脉血栓形成的影响：将大鼠随机分成4组：即大蝎子草2.5、5和10g生药/kg3个剂量组和模型组。每组大鼠10只，各给药组大鼠按1ml/100g体重灌服相应的药物，模型组以等体积蒸馏水灌胃。连续给药7天后，于末次给药后1小时，以10％水合氯醛0.4ml/100g腹腔注射麻醉大鼠，仰卧位固定，打开腹腔，分离下腔静脉，并在下腔静脉下穿一丝线，于左肾静脉与下腔静脉交叉处结扎下腔静脉，然后缝合腹壁，4小时后重新打开腹腔，在结扎下方2厘米处用止血钳夹闭血管，剖开管腔，取出栓子，用滤纸吸去残余血液后称湿重，再将栓子放入70℃烘箱，4小时后称干重，按下列公式计算血栓形成抑制率：

血栓形成抑制率％＝(模型组血栓重量-给药组血栓重量)/模型组血栓重量×100％

2.2大蝎子草提取物对大鼠血小板聚集的影响：将大鼠随机分成4组：即大蝎子草2.5、5和10g生药/kg3个剂量组和空白对照组。给药组以1ml/100g体重灌胃，空白对照组给予等容积的蒸馏水，连续给药7天，于末次给药后1小时，0.64％戊巴比妥钠0.4ml/100g体重腹腔注射麻醉，腹主动脉取血，然后按9∶1(全血∶抗凝剂)分别放入3.8％枸橼酸钠抗凝管和2％EDTA-Na₂抗凝管中，500转/分离心5分钟后取出上层富血小板血浆(PRP)，将后者的PRP再以2000转/分离心5分钟，沉淀血小板，倾去血浆，然后将沉淀血小板用血小板洗涤液洗涤两次后，加入原血浆体积的改良台氏液(1000ml溶液中含KCl 195mg，MgCl₂·6H₂O 212.5mg，NaCl 8g，CaCl₂ 144mg，Tris 1.2g，葡萄糖1g，牛血清白蛋白2.5g，pH7.4)。以PPP或改良台氏液的透光率为100％，将200μLPRP或血小板悬液37℃温育5分钟后分别加入ADP(终浓度4μmol/L)、凝血酶(终浓度125U/L)和花生四烯酸(终浓度0.8mmol/L)，然后描记5分钟血小板聚集曲线，以最大聚集率、1分钟聚集率和解聚率为观察指标，血小板聚集抑制率按下列公式计算。

3.结果

3.1大蝎子草提取物对大鼠静脉血栓形成的影响：大鼠连续7天给予大蝎子草提取物2.5、5和10g生药/kg后，其血栓湿重和干重与模型组相比呈剂量依赖性降低，血栓形成抑制率分别为30.4％，44.9％，50.7％和34.2％，47.4％，52.6％。结果表明祛栓灵胶囊对大鼠静脉血栓形成有明显的抑制作用，且有一定的量效关系。结果见表12。

表12祛栓灵胶囊对大鼠静脉血栓形成的影响(x±s，n＝10)

与模型组相比**P＜0.01。

3.2大蝎子草提取物对大鼠血小板聚集的影响：见表13、14、15。由表13可知，与空白对照组比较，大蝎子草提取物三剂量组能明显抑制ADP诱导的血小板最大聚集率(P＜0.05、P＜0.01)，3个给药剂量组大鼠血小板最大聚集抑制率分别为13.8％，16.7％和24.0％；10g/kg组也可以明显抑制血小板1分钟聚集率(P＜0.05)。给予5g/kg和10g/kg剂量的大蝎子草提取物也能明显增加血小板的解聚率(P＜0.05)。由表14可知，大蝎子草提取物对凝血酶诱导的大鼠血小板聚集，虽也有剂量依赖性抑制作用，但仅10g/kg组能显著性抑制血小板最大聚集率(P＜0.01)，其抑制率为35.3％。由表15可知，10g/kg大蝎子草提取物对花生四烯酸诱导的大鼠血小板最大聚集率具有明显的抑制作用。

表13大蝎子草提取物ADP诱导大鼠血小板聚集的影响(x±s，n＝10)

与空白对照组相比*P＜0.05，**P＜0.01。

表14大蝎子草提取物对凝血酶诱导大鼠血小板聚集的影响(x±s，n＝10)

与空白对照组相比*P＜0.05，**P＜0.01。

表15大蝎子草提取物对花生四烯酸诱导大鼠血小板聚集的影响(x±s，n＝10)

与空白对照组相比*P＜0.05，**P＜0.01。

具体实施方式

大蝎子草的临床新用途，是指大蝎子草在制备治疗肝损伤、肾炎、前列腺肥大、肿瘤以及血管栓塞性疾病药物中的应用。

实施例1：胶囊剂

取大蝎子草600～1200g，按常规制备工艺制成细粉或颗粒，混匀，装入0号胶囊1000粒。用于治疗肝损伤、肾炎、前列腺肥大、肿瘤以及血管栓塞性疾病，每次1-4粒，一日1-4次。

实施例2：注射剂

取大蝎子草600～1200g，按常规制备工艺制成注射剂1000支。用于治疗肝损伤、肾炎、前列腺肥大、肿瘤以及血管栓塞性疾病，每次一支，肌肉注射，一日1-4次。

实施例3：口崩片

取大蝎子草1200g，按常规制备工艺制成口崩片1000片。用于治疗肝损伤、肾炎、前列腺肥大、肿瘤以及血管栓塞性疾病，每次1-4片，一日1-4次。

实施例4：复方颗粒剂

取大蝎子草1500g、桂枝320g，按常规制备工艺制成200袋。用于治疗肝损伤、肾炎、前列腺肥大、肿瘤以及血管栓塞性疾病，每袋5克，每次0.5-3袋，一日1-4次。

实施例5：复方片剂

取大蝎子草1300g、薄荷150g，按常规制备工艺制成片剂1000片。用于治疗肝损伤、肾炎、前列腺肥大、肿瘤以及血管栓塞性疾病，每次1-4片，一日1-4次。

实施例6：复方滴丸

取大蝎子草400g、冰片20g，按常规制备工艺制成滴丸1000滴。用于治疗肝损伤、肾炎、前列腺肥大、肿瘤以及血管栓塞性疾病，每次1-8粒，一日1-4次。

实施例7：复方软胶囊

取大蝎子草1500g、黄芪800g，按常规制备工艺制成软胶囊1000粒。用于治疗肝损伤、肾炎、前列腺肥大、肿瘤以及血管栓塞性疾病，每次1-6粒，一日1-4次。

实施例8：复方口崩片

取大蝎子草1500g、丹参600g，延胡索600g，按常规制备工艺制成口崩片1000片。用于治疗肝损伤、肾炎、前列腺肥大、肿瘤以及血管栓塞性疾病，每次1-6片，一日1-4次。