一种用于评价HCV NS3/4A丝氨酸蛋白酶抑制剂的融合蛋白及其应用

摘要

本发明公开了用于评价HCV NS3/4A丝氨酸蛋白酶活性的融合蛋白及其应用，具体的融合蛋白EGFP－NS4A/4B－SEAP是融合基因EGFP－NS4A/4B－SEAP插入真核表达载体PCIneo形成指示载体EGFP(Δ4AB)SEAP后表达产生。融合蛋白EGFP－NS4A/4B－SEAP依靠EGFP在细胞内定位，在细胞内有NS3/4A丝氨酸蛋白酶共表达的情况下，在NS4A/4B处发生切割作用，使得SEAP游离出来并通过其自身的信号肽分泌到细胞外，通过测定胞外SEAP活性便可反映出HCV NS3/4A丝氨酸蛋白酶的活性。利用本发明可以简单、快速、灵敏而且可以定量指示丝氨酸蛋白酶活性，具有较高的实际应用价值，在医学领域具有广阔的应用前景。