公开/公告号CN101119725A
专利类型发明专利
公开/公告日2008-02-06
原文格式PDF
申请/专利权人 千禧药品公司;
申请/专利号CN200580048117.6
申请日2005-12-19
分类号A61K31/451(20060101);A61K31/4741(20060101);A61P19/02(20060101);A61P19/04(20060101);
代理机构72002 永新专利商标代理有限公司;
代理人过晓东
地址 美国马萨诸塞州
入库时间 2023-12-17 19:41:21
法律状态公告日
法律状态信息
法律状态
2013-04-17
授权
授权
2008-04-02
实质审查的生效
实质审查的生效
2008-02-06
公开
公开
优先权信息
本申请要求按照35U.S.C.§119(e)要求2004年12月17日递交的题目为“化学趋化因子受体拮抗剂的固体形式和其使用方法”的美国临时申请第60/637,213号的优先权，其全部内容通过引证在此合并于本文。
技术领域
药物组合物的高-通量生产给化学家和化学工程师带来许多挑战。而许多这些挑战涉及大量药物的处理和对高-通量反应的控制，最后产物处理所显示的特别挑战与最后活性产物本身的自然性相关。产物不仅应具有高产量，稳定，及能够被分离的特性，产物还必须具备适合于最终使用的药物制备类型的特性。必须在生产过程中的每一步骤都考虑到药物制备物的活性成分的稳定性，包括合成，分离，原料储存药，药物形式和长-期形式。每一步骤可能受到不同环境条件如温度和湿度的影响。
用于制备药物组合物的药物活性物质必须尽可能纯并且其在不同环境条件下的长-期稳定性必须得到保证。很显然有必要防止药物成分中非期望降解产物的出现，其中该降解产物可能有潜在的毒性或造成减少组合物效价的结果。
制备高-通量药物化合物的首要关注点在于活性物质应具有稳定的晶体形态，以保证稳定的工艺参数和药物质量。如使用了不合适的晶体形式，晶体形态在生产和/或储存过程中将改变并造成质量控制问题的产生，及制剂的不均匀性。这种改变将影响制造过程的可重复性，从而导致最后产物不符合药物组合物制备的高质量和严格要求。
本发明涉及具有化学因子受体拮抗剂活性和具有用于特定药物制剂高度优化特征的药物活性化合物形式。
背景技术
趋化细胞因子，趋化细胞因子或趋化因子是由多种细胞分泌的，促进细胞如T和B淋巴细胞，嗜酸性粒细胞，嗜碱性细胞，和嗜中性粒细胞聚集和活性的促炎细胞因子中介家族。[Luster等，New Eng.J.Med，1998，338，436]。趋化因子的初级结构包括四个保守的半胱氨酸，形成二硫健。趋化因子家族包括C-X-C趋化因子(α-趋化因子)，和C-C趋化因子(β-趋化因子)，其中前两个保守半胱氨酸被干预残基所分离，或间隔开[Baggiolini，M.和Dahinden，C.A.，Immunology Today，1994，15127]。
趋化因子通过与属于G-蛋白-偶联的7重-跨膜-结构域蛋白家族的特异性细胞-表面受体结合而发挥其生物学活性[Horuk，Trends Pharm.Sci.1994，15159]，而其称为“趋化因子受体”。当结合其同源配体时，趋化因子受体转导对特定淋巴细胞亚类的发展和转运至关重要的信号[Baggiolini，等，Nature 1994，15365]。趋化因子和其同源受体被认为是引发炎症，和过敏性疾病，失调，和状况，如自身免疫疾病如风湿性关节炎和动脉粥样硬化的重要媒介[见，Carter，Current Opinion in Chemical Biology2002，6，510；Trivedi等，Ann.Reports Med.Chem.2000，35，191；Saunders等，Drug Disc.Today 1999，4，80；和Premack等，Nature Medicine，1996，2，1174]。趋化因子和其同源受体也涉及肿瘤的发生和溶骨性失调[见Leukemia 2003，17203；J.Bone Miner.Res.2002，19，2065；J.Cell.Biochem.2002，87，386；J.Cell.Physiol.2000，183，196；Exp.Hematol.2005，33272；J.Clin.Invest.2001，108，1833；Cancer 2003，97，813；Blood 2003，102311]。
相应的，阻止趋化因子和其同源受体相互反应的药物可用于治疗炎症，过敏，和自身免疫疾病，失调或状况，也可以用于治疗肿瘤和由异常活性白细胞或淋巴细胞引起的溶骨性失调。
美国专利申请US2002/0169155号和国际公开WO03/045942号，两者都命名为“趋化因子受体拮抗剂和其使用方法”，描述了抑制趋化因子受体CCR1活性的化合物。这些应用也描述了这些化合物，含有这些化合物的药物组合物的制备方法，预防和治疗与异常白细胞聚集和/或激活相关的疾病，失调或状况，包括但不局限于风湿性关节炎和多重硬化。
(S)-4-(4-氯-苯基)-1-(3-〔7-(1-羟基-1-甲基-乙基)-11H-10-氧杂-1-氮杂-苯并〔a，d〕环庚酮-5-亚基〕-丙基-3，3-二甲基-六氢吡啶-4-醇(II)特定地表述如下：
在US2002/0169155和WO03/045942的工程实例中提供了化合物的自由碱基非晶体形式的结构和合成，并仅仅对大量的盐类进行了一般性讨论说明。这些应用没有说明(S)-4-(4-氯-苯基)-1-(3-〔7-(1-羟基-1-甲基-乙基)-11H-10-氧杂-1-氮杂-苯并〔a，d〕环庚酮-5-亚基〕-丙基-3，3-二甲基-六氢吡啶-4-醇(II)的特定盐或结晶形式。
当化合物结晶来源于溶液或浆体时，其将以不同的空间晶格阵列形成结晶，该特性称为“多态性”。每一个晶体形式都是“多晶形物”。当给定物质的多晶形物具有相同的化学成分时，其可能在一种或多种物理特性上相互不同，如可溶性和解离性，真密度，熔点，晶体形状，压制行为，流动性，和/或固态稳定性。
如上通常所述，药物的多态性在药物学和药理学中是至关重要的。多晶形物表现出不同的物理特性将影响实际参数，如储存稳定性，可压缩性和密度(对制备和产品制造非常重要)，和溶解率(在生物有效性测定中作为一个重要因素)。不同的稳定性可以是化学反应性变化(例如，不同的氧化反应，如一种多晶形物计量形式要比另一种多晶形物具有更快的褪色效果)或机械变化(例如，对于存储中药片的破碎，其可以由有利于动力学的多晶形物转变为热力学更稳定的多晶形物)或其两者的结果(例如，某多晶形物的药片在高湿条件下更易破碎)。此外，晶体的物理特性对于制备可以是重要的：例如，一种多晶形物可以更易形成溶剂化物，从而造成固体形态聚集并增加固态处理的难度，或可能难以过滤和洗去杂质(例如，颗粒形状和大小分布可以在一种和另一种多晶形物之间是不同的)。
当期望找到具有改善化学和物理特性的药物配方时，并没有可预测的方法来制备具有符合该配方的分子的新药物制剂。这些新制剂在制造和化合物使用的众多条件下将具有稳定的物理特性。在速溶情况中，还没有文章对(S)-4-(4-氯-苯基)-1-(3-〔7-(1-羟基-1-甲基-乙基)-11H-10-氧杂-1-氮杂-苯并〔a，d〕环庚酮-5-亚基〕-丙基-3，3-二甲基-六氢吡啶-4-醇的柠檬酸盐，及其晶体形式进行说明。尤其是，没有文章对有利于高通量生产，药物剂型，和储存的具有未预料特性的(S)-4-(4-氯-苯基)-1-(3-〔7-(1-羟基-1-甲基-乙基)-11H-10-氧杂-1-氮杂-苯并〔a，d〕环庚酮-5-亚基〕-丙基-3，3-二甲基-六氢吡啶-4-醇的柠檬酸盐，及其晶体形式进行说明。
发明内容
本发明针对(S)-4-(4-氯-苯基)-1-(3-〔7-(1-羟基-1-甲基-乙基)-11H-10-氧杂-1-氮杂-苯并〔a，d〕环庚酮-5-亚基〕-丙基-3，3-二甲基-六氢吡啶-4-醇的柠檬酸盐，及其晶体形式。这些形式也具有未预料特性，有利于高通量生产，药物剂型，和储存。本发明也提供包括所述盐，和其晶体形式的药物组合物；制备所述柠檬酸盐和其晶体形式的方法；和使用这些盐和其晶体形式治疗这里描述的多种疾病，失调或状况的方法。
本发明将根据下列图表和细节描述进行完全的讨论。
附图说明
图1描述了使用CoKα1射线对一种形式A样本进行测定的X-射线粉末衍射图谱，与本发明的某一实施方案相符。
图2描述了根据本发明的某一实施方案，从-80℃至190℃，以10℃为间隔，使用C5Kα1(λ＝1.7890)和CoKα2(λ＝1.7929)射线对一种形式A样本进行测定的等温X-射线粉末衍射图谱。
图3描述了根据本发明的某一实施方案，以5℃/分钟的速率加温，对一种形式A样本进行测定的热失重分析结果。
图4描述了根据本发明的某一实施方案，以5℃/分钟的速率加温，对一种形式A样本进行测定的差示扫描量热结果。
图5描述了根据本发明的某一实施方案，对一种形式A样本在25℃进行测定的水吸附/解吸附等温线结果。
图6描述了使用CoKα1射线对一种形式B样本进行测定的X-射线粉末衍射图谱，与本发明的某一实施方案相符。
图7描述了根据本发明的某一实施方案，从-80℃至190℃，以10℃为间隔，使用CoKα1(λ＝1.7890)和CoKα2(λ＝1.7929)射线对一种形式B样本进行测定的等温X-射线粉末衍射图谱。
图8描述了根据本发明的某一实施方案，以5℃/分钟的速率加温，对一种形式B样本进行测定的热失重分析结果。
图9描述了根据本发明的某一实施方案，以5℃/分钟的速率加温，对一种形式B样本进行测定的差示扫描量热结果。
图10描述了根据本发明的某一实施方案，对一种形式B样本在25℃进行测定的水吸附/解吸附等温线结果。
图11描述了根据本发明的某一实施方案，使用CoKα1(λ＝1.7890)和CoKα2(λ＝1.7929)射线对一种形式A样本和两种含有形式A和形式C的样本进行测定的X-射线粉末衍射图谱。
图12描述了根据本发明的某一实施方案，以10℃为间隔，加温至210℃时，使用CoKα1(λ＝1.7890)和CoKα2(λ＝1.7929)射线对一种含有形式A和形式C的样本进行测定的等温X-射线粉末衍射图谱
图13描述了根据本发明的某一实施方案，以5℃/分钟的速率加温，对一种含有形式A和形式C的样本进行测定的热失重分析结果。
图14描述了根据本发明的某一实施方案，以5℃/分钟的速率加温，对一种含有形式A和形式C的样本进行测定的差示扫描量热结果。
图15描述了根据本发明的某一实施方案，对一种含有形式A和形式C的样本在25℃进行测定的水吸附/解吸附等温线结果。
图16描述了根据本发明的某一实施方案，使用CoKα1(λ＝1.7890)和CoKα2(λ＝1.7929)射线对一种形式A样本和一种含有形式A和形式C的样本，及一种含有形式A和形式D的样本进行测定的X-射线粉末衍射图谱。
图17描述了根据本发明的某一实施方案，以10℃为间隔，加温至210℃时，使用CoKα1(λ＝1.7890)和CoKα2(λ＝1.7929)射线对一种含有形式A和形式D的样本进行测定的等温X-射线粉末衍射图谱。
图18描述了根据本发明的某一实施方案，以5℃/分钟的速率加温，对一种含有形式A和形式D的样本进行测定的热失重分析结果。
图19描述了根据本发明的某一实施方案，以0.3℃/分钟的速率加温，对一种含有形式A和形式D的样本进行测定的差示扫描量热结果。
图20描述了根据本发明的某一实施方案，对一种含有形式A和形式D的样本在25℃进行测定的水吸附/解吸附等温线结果。
图21描述了使用CoKα1射线对一种形式E样本进行测定的X-射线粉末衍射图谱，与本发明的某一实施方案相符。
图22描述了根据本发明的某一实施方案，以10℃为间隔，加温至210℃时，使用CoKα1(λ＝1.7890)和CoKα2(λ＝1.7929)射线对一种形式E的样本进行测定的等温X-射线粉末衍射图谱。
图23描述了根据本发明的某一实施方案，以5℃/分钟的速率加温，对一种形式E的样本进行测定的热失重分析结果。
图24描述了根据本发明的某一实施方案，以5℃/分钟的速率加温，对一种形式E的样本进行测定的差示扫描量热结果。
图25描述了根据本发明的某一实施方案，对一种形式E的样本在25℃进行测定的水吸附/解吸附等温线结果。
图26描述了根据本发明的某一实施方案，使用CoKα1(λ＝1.7890)和CoKα2(λ＝1.7929)射线对一种形式E样本和一种含有E，F，形式G的样本进行测定的X-射线粉末衍射图谱。
图27描述了根据本发明的某一实施方案，以10℃为间隔，加温至210℃时，使用CoKα1(λ＝1.7890)和CoKα2(λ＝1.7929)射线对一种含有E，F，形式G的样本进行测定的等温X-射线粉末衍射图谱。
图28描述了根据本发明的某一实施方案，以5℃/分钟的速率加温，对一种含有E，F，形式G的样本进行测定的热失重分析结果。
图29描述了根据本发明的某一实施方案，以5℃/分钟的速率加温，对一种含有E，F，形式G的样本进行测定的差示扫描量热结果。
图30描述了根据本发明的某一实施方案，对一种含有E，F，形式G的样本在25℃进行测定的水吸附/解吸附等温线结果。
具体实施方式
上述使用的，以及本发明中描述的术语，除非另有定义，将按下列意义理解。
“柠檬酸盐”表示(S)-4-(4-氯-苯基)-1-(3-〔7-(1-羟基-1-甲基-乙基)-11H-10-氧杂-1-氮杂-苯并〔a，d〕环庚酮-5-亚基〕-丙基-3，3-二甲基-六氢吡啶-4-醇的柠檬酸盐，并具有结构式III的结构。
这里使用的“晶体”指具有高度规则化学结构的固体。特别的，一种晶体柠檬酸盐可以制备成一种或多种单一的柠檬酸盐晶体形式。为了本申请，术语“单一的晶体形式”和“多晶形物”是同义的；术语区分了具有不同特性(例如，不同XRP形式D，不同DSC扫描结果)的晶体。伪多晶形物是典型的一种物质的溶剂化物，因此其特征相互不同。这样，这里每一个不同的柠檬酸盐多晶形物和伪多晶形物被认为是不同的单一晶体形式。
“实质晶体”指至少具有一定总量百分比晶体的柠檬酸盐。一定的总量百分比可以是10％，20％，30％，40％，50％，60％，70％，80％，85％，87％，88％，89％，90％，91％，92％，93％，94％，95％，96％，97％，98％，99％，99.5％，99.9％，或介于10％至100％之间的任何百分数。在某些实施方案中，实质晶体指至少为70％晶体的柠檬酸盐。在另一实施方案中，实质晶体指至少为90％晶体的柠檬酸盐。
“形式A”指结构式III的化合物的一种晶体形式，其可以用判定数据表征。示范性数据见图1，2，3，4，5，和表1和2。
“形式B”指结构式III的化合物的一种晶体形式，其可以用判定数据表征。示范性数据见图6，7，8，12，13，和表3和4。
术语“溶剂化物或溶剂化”指带有一种或多种溶剂分子的本发明化合物的物理缔合。物理缔合包括氢键。特定情况下溶剂化物是可分离的，例如当一种或多种溶剂分子与晶体固体的晶体结构相组合。“溶剂化物或溶剂化”包括溶液-相和分离溶剂。代表性的溶剂化物包括，例如，水合物，乙醇合物，甲醇合物。
术语“水合”是一种溶剂化，其中溶剂分子是一定化学计量的H2O，并且可以包括半水合物，单水合物，二水合物，或三水合物。
术语“混合”指混合物的组合成分，而不考虑组合的相态(例如，液相或液相/晶体)。
术语“种子”指加入的起启动结晶的晶体材料。
“主体”指鸟类或拨入动物，如人类，但也可以是一种需要兽医照料的动物，例如家畜(如，狗，猫，和类似物)，农场动物(如，牛，绵阳，家禽，猪，马，和类似物)和试验动物(如，大鼠，小鼠，豚鼠，和类似物)。
柠檬酸盐的“有效剂量”是在患有异常白细胞产生和/或激活疾病的病人中，获得抑制一种或多种由趋化因子与受体结合介导的进程的结果的剂量。这些进程的示范例包括白细胞迁移，粘合素激活，细胞内自由钙〔Ca2+〕i的暂时性身高和促炎症因子介导子微粒的释放。选择性的，柠檬酸盐的“有效剂量”是足以获得期望治疗和/或预防效果的剂量，如防止或减少异常白细胞产生和/或激活相关疾病症状结果的剂量。
这里使用的，“促-炎症细胞”包括但不局限于白细胞，因为趋化因子受体可以在其他细胞类型中表达，如神经和上皮细胞。
某一方面，本发明针对化合物(S)-4-(4-氯-苯基)-1-(3-〔7-(1-羟基-1-甲基-乙基)-11H-10-氧杂-1-氮杂-苯并〔a，d〕环庚酮-5-亚基〕-丙基-3，3-二甲基-六氢吡啶-4-醇的柠檬酸盐。因此，本发明提供了具有结构式(III)的化合物。
这里提供了描述(S)-4-(4-氯-苯基)-1-(3-〔7-(1-羟基-1-甲基-乙基)-11H-10-氧杂-1-氮杂-苯并〔a，d〕环庚酮-5-亚基〕-丙基-3，3-二甲基-六氢吡啶-4-醇的柠檬酸盐形式的分类特征信息。应当理解，然而，本领域的普通技术人员不需要掌握所有判定给定组合物中存在这些特定形式，但是本领域的普通技术人员知道使用任何部分特征信息对特定形式进行判定从而确定特定形式的存在，例如，一个单一的判别峰足以使本领域的普通技术人员判定这些特定形式的存在。
某些实施方案中，完全为晶体。晶体柠檬酸盐的非-限制性实施例包括柠檬酸盐的单体晶体形式(例如，形式A)；不同单一晶体形式的混合物(例如，形式A和B的混合物，形式A，C，D的任何组合的混合物，形式B，E，F，G，H任何组合的混合物)；除去一种或多种特定单一晶体形式的一种或多种单一晶体形式混合物(例如，除去形式A的柠檬酸盐晶体形式混合物)。本发明的一个实施方案也针对除去一种或多种特定单一晶体形式的柠檬酸盐，其以特定重量百分数在柠檬酸盐中存在。特定的重量百分数可以是10％，20％，30％，40％，50％，60％，70％，75％，80％，85％，87％，88％，89％，90％，91％，92％，93％，94％，95％，96％，97％，98％，99％，99.5％，或介于10％至100％的任何百分数。
选择性地，本发明的实施方案针对一种晶体柠檬酸盐，其中特定的单一晶体形式，特定晶体形式的组合物，或除去一种或多种特定晶体形式至少占晶体柠檬酸盐的特定百分数含量。特定的重量百分数可以是10％，20％，30％，40％，50％，60％，70％，75％，80％，85％，87％，88％，89％，90％，91％，92％，93％，94％，95％，96％，97％，98％，99％，99.5％，或介于10％至100％的任何百分数。
本发明的另一实施方案针对一种单一晶体形式，或充分地为特定单一晶体形式的晶体柠檬酸盐。单一晶体形式以特定重量百分数在柠檬酸盐中存在。特定的重量百分数可以是10％，20％，30％，40％，50％，60％，70％，75％，80％，85％，87％，88％，89％，90％，91％，92％，93％，94％，95％，96％，97％，98％，99％，99.5％，或介于10％至100％的任何百分数。当占柠檬酸盐重量特定百分数的是一种单一晶体形式时，柠檬酸盐的其余成分是柠檬酸盐无定型形式的组合物，并且柠檬酸盐的一种或多种晶体形式包括单一晶体形式。
单一晶体形式的实施例包括柠檬酸盐A，B，C，D，E，F，G，H形式，以及对这里论述的一种或多种特征所表征的单一晶体形式的描述。表征单一晶体形式的描述也可以用于描述晶体柠檬酸盐中存在的不同形式的混合物。
以下对(S)-4-(4-氯-苯基)-1-(3-〔7-(1-羟基-1-甲基-乙基)-11H-10-氧杂-1-氮杂-苯并〔a，d〕环庚酮-5-亚基〕-丙基-3，3-二甲基-六氢吡啶-4-醇的柠檬酸盐的特定多形体的描述中，本发明的一个实施方案描述了相关的一种柠檬酸盐特定晶体形式(如，形式B)。但是，柠檬酸盐特定晶体形式也可以由这里所述的一种或多种多形体的特征进行表征，考虑或不考虑相关的特定“形式”。
形式A
本发明的一个实施方案针对(S)-4-(4-氯-苯基)-1-(3-〔7-(1-羟基-1-甲基-乙基)-11H-10-氧杂-1-氮杂-苯并〔a，d〕环庚酮-5-亚基〕-丙基-3，3-二甲基-六氢吡啶-4-醇的柠檬酸盐的形式A单一晶体形式。本发明的一个特定实施方案中，柠檬酸盐的单一晶体形式由图1中充分相似的X-射线粉末衍射图谱所表征，该图谱通常使用CoKα1射线。选择性地，柠檬酸盐的单一晶体形式可以由来源于图1图谱峰形拟合的线性进行表征，如表1所列。
多样性 2-θ
h k l J d-间隔()
1.54184
0 1 0 2 15.1877 5.8191
1 0 0 2 14.0302 6.2996
1 1 0 2 12.3910 7.1340
-1 1 0 2 9.0102 9.8165
0 0 1 2 8.4624 10.4538
0 -1 1 2 8.2004 10.7887
1 2 0 2 7.7576 11.4064
0 2 0 2 7.5939 11.6533
-1 -1 1 2 7.4446 11.8878
1 0 1 2 7.4434 11.8897
2 1 0 2 7.2834 12.1519
-1 0 1 2 7.0641 12.5305
2 0 0 2 7.0151 12.6184
0 1 1 2 6.7840 13.0501
1 -1 1 2 6.7639 13.0892
1 1 1 2 6.6066 13.4022
0 -2 1 2 6.3956 13.8465
-1 -2 1 2 6.3605 13.9232
2 2 0 2 6.1955 14.2959
-1 2 0 2 5.9522 14.8835
-2 1 0 2 5.7297 15.4649
-1 1 1 2 5.7068 15.5275
-2 -1 1 2 5.6454 15.6972
2 0 1 2 5.5646 15.9267
2 1 1 2 5.4031 16.4060
1- 2 1 2 5.3966 16.4261
-2 -2 1 2 5.3339 16.6204
1 3 0 2 5.3156 16.6778
-2 0 1 2 5.2505 16.8863
1 2 1 2 5.2383 16.9259
0 2 1 2 5.1189 17.3236
2 -1 1 2 5.0633 17.5153
0 3 0 2 5.0626 17.5180
-1 -3 1 2 4.9960 17.7531
3 1 0 2 4.9178 18.0380
2 3 0 2 4.8839 18.1641
0 -3 1 2 4.8396 18.3318
2 2 1 2 4.7201 18.8000
3 2 0 2 4.6805 18.9608
3 0 0 2 4.6767 18.9760
-2 -3 1 2 4.5839 19.3641
-2 2 0 2 4.5051 19.7060
-2 1 1 2 4.4792 19.8213
-1 2 1 2 4.4702 19.8613
-1 3 0 2 4.3518 20.4077
0 -1 2 2 4.3301 20.5110
2 -2 1 2 4.2880 20.7147
-3 -1 1 2 4.2691 20.8073
1 -3 1 2 4.2453 20.9254
-3 -2 1 2 4.2356 20.9735
3 1 1 2 4.2350 20.9768
0 0 2 2 4.2312 20.9958
3 0 1 2 4.1996 21.1555
-1 -1 2 2 4.1702 21.3064
3 3 0 2 4.1303 21.5144
1 3 1 2 4.1293 21.5197
-3 1 0 2 4.1252 21.5414
1 0 2 2 4.1188 21.5755
1 -1 2 2 4.1056 21.6458
0 -2 2 2 4.1002 21.6746
-1 -2 2 2 4.0573 21.9067
-3 0 1 2 3.9946 22.2548
1 4 0 2 3.9893 22.2845
-1 0 2 2 3.9864 22.3010
0 3 1 2 3.9757 22.3621
3 2 1 2 3.9689 22.4009
-1 -4 1 2 3.9504 22.5069
2 3 1 2 3.9472 22.5256
-3 -3 1 2 3.9139 22.7197
3 -1 1 2 3.8833 22.9011
2 4 0 2 3.8788 22.9279
0 1 2 2 3.8619 23.0297
1 1 2 2 3.8565 23.0623
1 -2 2 2 3.8242 23.2597
-2 -4 1 2 3.8151 23.3162
0 4 0 2 3.7969 23.4293
0 -4 1 2 3.7901 23.4720
-2 -1 2 2 3.7312 23.8482
-2 2 1 2 3.7247 23.8906
-2 -2 2 2 3.7223 23.9060
2 0 2 2 3.7217 23.9099
-1 -3 2 2 3.7097 23.9884
4 1 0 2 3.6759 24.2123
0 -3 2 2 3.6686 24.2611
4 2 0 2 3.6417 24.4431
2 -1 2 2 3.6399 24.4556
-2 3 0 2 3.6096 24.6640
-1 1 2 2 3.6032 24.7081
2 1 2 2 3.5901 24.7997
-1 3 1 2 3.5794 24.8750
2 -3 1 2 3.5705 24.9380
-3 1 1 2 3.5547 25.0511
3 3 1 2 3.5381 25.1702
-2 0 2 2 3.5321 25.2141
3 4 0 2 3.5299 25.2301
-3 2 0 2 3.5251 25.2649
-2 -3 2 2 3.5096 25.3784
4 0 0 2 3.5076 25.3932
-3 -4 1 2 3.4608 25.7420
1 2 2 2 3.4463 25.8526
3 -2 1 2 3.4381 25.9148
1 -4 1 2 3.4238 26.0253
4 3 0 2 3.4205 26.0507
-1 4 0 2 3.4089 26.1408
1 -3 2 2 3.4080 26.1478
-4 -2 1 2 3.4003 26.2083
0 2 2 2 3.3920 26.2734
4 1 1 2 3.3822 26.3513
2 -2 2 2 3.3819 26.3532
-4 -1 1 2 3.3610 26.5200
1 4 1 2 3.3423 26.6716
4 0 1 2 3.3101 26.9353
2 2 2 2 3.3033 26.9922
2 4 1 2 3.2941 27.0688
4 2 1 2 3.2925 27.0823
-4 -3 1 2 3.2769 27.2141
-1 -4 2 2 3.2747 27.2324
-3 -2 2 2 3.2658 27.3079
3 0 2 2 3.2341 27.5810
-3 -1 2 2 3.2221 27.6853
-1 -5 1 2 3.2147 27.7508
0 4 1 2 3.2101 27.7914
-2 1 2 2 3.2083 27.8076
-4 1 0 2 3.2071 27.8180
0- 4 2 2 3.1978 27.9004
3 1 2 2 3.1929 27.9444
-2 -5 1 2 3.1864 28.0019
-2 -4 2 2 3.1803 28.0575
1 5 0 2 3.1790 28.0687
-4 0 1 2 3.1746 28.1085
2 5 0 2 3.1674 28.1740
-1 2 2 2 3.1656 28.1896
-3 -3 2 2 3.1643 28.2017
3 -1 2 2 3.1343 28.4773
-2 3 1 2 3.1160 28.6482
4 -1 1 2 3.1041 28.7601
4 4 0 2 3.0978 28.8205
-3 2 1 2 3.0967 28.8309
3 4 1 2 3.0868 28.9253
0 -5 1 2 3.0831 28.9605
4 3 1 2 3.0752 29.0364
-3 0 2 2 3.0493 29.2887
2 -3 2 2 3.0421 29.3594
0 5 0 2 3.0375 29.4047
-4 -4 1 2 3.0368 29.4125
3 2 2 2 3.0254 29.5249
1 3 2 2 3.0174 29.6049
-3 -5 1 2 3.0100 29.6798
3 5 0 2 3.0074 29.7065
-3 3 0 2 3.0034 29.7464
2 -4 1 2 2.9993 29.7881
3 -3 1 2 2.9941 29.8414
1 -4 2 2 2.9816 29.9696
-2 4 0 2 2.9761 30.0258
表1：图1中XRPD图谱索引
柠檬酸盐的单一晶体形式也可以通过XRPD图谱中一个或多个峰进行表征。例如，本发明的一个实施方案通过相对于图1中XRPD图谱主要峰的一条线性表征了一个单一的柠檬酸盐晶体形式。图1中主要峰以A-M标记。该主峰，由其表1中相应的2
θ位置所定义，分别是：5.8，9.8，11.7，12.6，15.5，15.7，15.9，17.3，17.5，17.8，18.2，19.3，19.7。2θ位置的误差一般为±0.1。其他表征单一晶体形式的实施例将利用任何所列的主要峰(例如，1，2，3，4，5，6，7，8，9，10，11，12，或13)，或利用一组不跨越一种或多种其他多形体峰的主要峰(例如，利用一种，两种，三种，四种，五种，六种，七种或更多上述所列的，但不跨越形式B峰的主要峰)。本发明的一个选择性的特别实施方案中，柠檬酸盐单一晶体形式由表2中的一种或多种计算细胞参数而表征。计算细胞参数基于对相应的XRPD测定值的分析。根据分析结果，晶体结构也被表征为三斜晶系P1(Z＝1，Z’＝2)。
表2：形式A的XRPD扫描细胞参数
本发明的另一实施方案中，根据调控温度X-射线粉末衍射中观察到的，柠檬酸盐的单一晶体形式以150℃至160℃范围内的稳定转变为表征。图2中显示了，从-80℃至190℃，以10℃为间隔，使用CoKα1(λ＝1.7890)和CoKα2(λ＝1.7929)射线对一种形式A样本进行测定的一系列XRPD扫描的结果。应当注意，从-80℃至150℃，除了由于温度变化导致的典型的膨胀以外，XRPD图没有显示任何可评估的变化，图2中显示了扫描210的150℃测定值。150℃以上，然而，随着升高的温度，扫描显示了不断的变化，在150℃至160℃间对应于稳定晶体形式的改变。
本发明的另一实施方案中，以调控温度X-射线粉末衍射中观察到的高于170℃时的分解/熔解现象对形式A进行表征。图2中180℃和190℃时的测定(分别以扫描220，230显示)并没有充分的结构特点，对应于分解/熔解柠檬酸盐晶体。
本发明的另一实施方案中，形式A也可以由TGA测定表征。如图3所示，作为温度的函数，图310对应于样品315的重量，而作为温度的函数，图320对应于325重量损失的导出率，测定在5℃/分钟的温度变化率下进行。该多态性是无水的；图3显示从室温至100℃，具有非常少的重量损失311，约0.23％(重量/重量)。多形体也可以由重量损失变化而表征312，对应于164℃时27.5％(重量/重量)重量损失，如源于重量损失率320导出率的插入326。重量损失变化312的拐点，在180℃对应于重量损失最大速率327，也可以表征重量损失变化。TGA扫描中所有温度的精确度为规定温度的±3℃。
本发明的实施方案中，可以对形式A样品进行DSC测定表征柠檬酸盐单一晶体形式。图4描述了以5℃/分钟速率加温的对形式A样品进行DSC测定的结果。曲线410表明作为温度函数流入样品中的热量。图4中，本发明的一个特别实施方案通过曲线410的吸热转变411对形式A进行表征，转变插入412位于169℃。转变中热损失的最大率413发生在176℃，该温度定义为Tmax，也可以表征该转变。吸热转变对应于晶体样品的熔解/分解。DSC扫描中所有温度的精确度为规定温度的±3℃。
根据本发明的实施方案，可以按1℃/分钟的加热速率对形式A样品进行DSC测定表征柠檬酸盐单一晶体形式。在该测定中，通过164℃时的吸热转变表征DSC扫描；Tmax＝167℃也用于表征吸热转变。
本发明的特别实施方案中，参照水吸附/解吸附循环结果表征形式A。图5显示了在25℃对形式A样品进行的两个连续水吸附/解吸附循环结果。曲线显示了作为相对湿度的函数，样品中干燥晶体数的百分数含量变化。
交迭曲线表明吸附现象的可逆性。相应的，可以在循环之前和之后进行XRPD测定，以样品中没有结构变化的显示结果表征形式A。
如图5所示，本发明的一个实施方案中，相应于相对湿度从0％至90％的变化，形式A质量以约1.9％的变化作为表征。质量的％变化在±0.1％以内。选择性地，实施方案可以根据当相对湿度从0％变化至90％时，每摩尔无水晶体中带有0.8摩尔水变化而表征。
本发明的实施方案也根据XRPD测定中显示，当置于相对湿度97.5％和室温1星期时，晶体没有变化，而对形式A表征。
形式B
与本发明的特定实施方案一致，形式B是组合物中的柠檬酸盐单一晶体形式。本发明的特定实施方案针对与图6中显示的XRP形式D充分相似的形式B。使用CoKα1射线获得图6中的模式。选择性地，形式B可以由来源于图6图谱峰形拟合的线性进行表征，如表3所列。
多样性 2-θ
h k l J d-间隔()
1.54184
0 2 0 2 15.2730 5.7866
1 1 0 4 13.2774 6.6572
1 2 0 4 10.6073 8.3357
1 3 0 4 8.3781 10.5592
0 1 1 4 8.2924 10.6686
0 4 0 2 7.6365 11.5880
0 2 1 4 7.5043 11.7929
1 0 1 4 7.4388 11.8970
2 0 0 2 7.3715 12.0061
1 1 1 8 7.2276 12.2460
2 1 0 4 7.1658 12.3520
1 4 0 4 6.7808 13.0562
1 2 1 8 6.6877 13.2388
2 2 0 4 6.6387 13.3370
0 3 1 4 6.5772 13.4624
1 3 1 8 6.0066 14.7481
2 3 0 4 5.9710 14.8365
0 4 1 4 5.7149 15.5053
1 5 0 4 5.6438 15.7017
2 0 1 4 5.6012 15.8219
2 1 1 8 5.5094 16.0874
1 4 1 8 5.3286 16.6372
2 4 0 4 5.3036 16.7159
2 2 1 8 5.2587 16.8596
0 6 0 2 5.0910 17.4194
0 5 1 4 4.9836 17.7979
2 3 1 8 4.9077 18.0755
3 1 0 4 4.8519 18.2848
1 6 0 4 4.8122 18.4373
1 5 1 8 4.7211 18.7960
2 5 0 4 4.7038 18.8659
3 2 0 4 4.6781 18.9704
2 4 1 8 4.5165 19.6556
3 3 0 4 4.4258 20.0628
0 6 1 4 4.3830 20.2606
0 0 2 2 4.3080 20.6173
3 0 1 4 4.2688 20.8088
0 1 2 4 4.2658 20.8236
3 1 1 8 4.2277 21.0133
1 6 1 8 4.2013 21.1469
2 6 0 4 4.1891 21.2094
1 7 0 4 4.1843 21.2339
0 2 2 4 4.1462 21.4311
1 0 2 4 4.1351 21.4895
3 4 0 4 4.1326 21.5028
2 5 1 8 4.1286 21.5237
3 2 1 8 4.1112 21.6158
1 1 2 8 4.0977 21.6879
1 2 2 8 3.9914 22.2729
0 3 2 4 3.9675 22.4087
3 3 1 8 3.9368 22.5858
0 7 1 4 3.8929 22.8438
1 3 2 8 3.8312 23.2169
3 5 0 4 3.8292 23.2292
0 8 0 2 3.8182 23.2966
2 6 1 8 3.7674 23.6157
1 7 1 8 3.7639 23.6379
2 7 0 4 3.7551 23.6941
0 4 2 4 3.7521 23.7131
3 4 1 8 3.7261 23.8810
2 0 2 4 3.7194 23.9248
1 8 0 4 3.6963 24.0766
2 1 2 8 3.6921 24.1041
4 0 0 2 3.6858 24.1465
4 1 0 4 3.6592 24.3243
1 4 2 8 3.6362 24.4805
2 2 2 8 3.6138 24.6348
4 2 0 4 3.5829 24.8506
3 6 0 4 3.5358 25.1873
0 5 2 4 3.5207 25.2969
3 5 1 8 3.4992 25.4550
2 3 2 8 3.4936 25.4962
0 8 1 4 3.4908 25.5170
4 3 0 4 3.4657 25.7053
2 7 1 8 3.4424 25.8824
1 5 2 8 3.4244 26.0205
1 8 1 8 3.3969 26.2349
2 8 0 4 3.3904 26.2859
4 0 1 4 3.3887 26.2995
4 1 1 8 3.3680 26.4637
2 4 2 8 3.3439 26.6586
4 4 0 4 3.3194 26.8592
4 2 1 8 3.3083 26.9509
1 9 0 4 3.3075 26.9573
0 6 2 4 3.2886 27.1151
3 6 1 8 3.2710 27.2634
3 7 0 4 3.2630 27.3320
3 0 2 4 3.2395 27.5341
3 1 2 8 3.2214 27.6916
4 3 1 8 3.2153 27.7454
1 6 2 8 3.2097 27.7947
2 5 2 8 3.1769 28.0873
3 2 2 8 3.1690 28.1592
0 9 1 4 3.1578 28.2608
4 5 0 4 3.1559 28.2786
2 8 1 8 3.1549 28.2872
4 4 1 8 3.0974 28.8236
1 9 1 8 3.0878 28.9156
3 3 2 8 3.0870 28.9230
2 9 0 4 3.0829 28.9623
0 7 2 4 3.0657 29.1283
0 10 0 2 3.0546 29.2368
3 7 1 8 3.0515 29.2672
3 8 0 4 3.0151 29.6282
2 6 2 8 3.0033 29.7478
1 7 2 8 3.0015 29.7657
1 10 0 4 2.9911 29.8720
4 6 0 4 2.9855 29.9293
3 4 2 8 2.9823 29.9624
4 5 1 8 2.9634 30.1581
表3：图6中XRPD图谱索引
形式B也可以通过XRPD图谱中一个或多个峰进行表征。例如，本发明的一个实施方案通过相对于图6中XRPD图谱主要峰的至少一条线性表征了一个单一的柠檬酸盐晶体形式。图6中主要峰以A-M标记。该主峰，由其表1中相应的2θ位置所定义，分别是：5.8，10.6，11.6，12.3，14.8，15.8，16.1，16.7，17.8，18.8，20.6，21.7，24.5。2θ位置的误差一般为±0.1。其他表征单一晶体形式的实施例将利用任何所列的主要峰(例如，1，2，3，4，5，6，7，8，9，10，11，12，或13)，或利用一组不跨越一种或多种其他多形体峰的主要峰(例如，利用一种，两种，三种，四种，五种，六种，七种或更多上述所列的，但不跨越形式A峰的主要峰)。本发明的一个选择性的特别实施方案中，形式B由表4中的一种或多种计算细胞参数而表征，其来源于对XRPD测定值的分析。晶体结构也被表征为斜方晶系P212121(Z＝4，Z’＝2)。
表4：形式B的XRPD扫描细胞参数
本发明的另一实施方案中，根据调控温度X-射线粉末衍射中观察到的，形式B以170℃至180℃范围内的稳定转变为表征。图7中显示了使用CoKα1(λ＝1.7890)和CoKα2(λ＝1.7929)射线对一种形式B样本进行测定的一系列XRPD扫描的结果。每次扫描显示了样品的等温测定，温度变化范围为-80℃至190℃，以10℃为间隔。直到170℃时，由于典型的热-介导膨胀，不同温度的XRPD扫描仅显示了轻微的不同(例如，扫描710相应于170℃的测定)。高于170℃的扫描显示了对应于稳定晶体形式转变的光谱特征变化。
本发明的另一实施方案中，跟等温XRPD测定观察，形式B以在180℃至190℃间的分解/熔解为表征。190℃的测定显示(扫描720显示)形式B的充分无特征并对应于分解/熔解。
本发明的一个特别实施方案中，形式A以图8中的TGA测定的一种或多种特征进行表征。曲线810描绘了作为温度函数测定的形式B样品重量815；相应曲线820描绘了作为温度函数的重量损失导出率825。测定在5℃/分钟的温度变化率下进行。该多态性是无水的。图8显示从室温至100℃，没有重量损失。单一晶体形式也可以由重量损失变化而表征811，对应于180℃开始的27.5％(重量/重量)重量损失，如源于重量损失率820导出率的插入826。重量损失变化的拐点811，在192℃对应于重量损失最大速率811，也可以表征重量损失变化。
本发明的其他特殊实施方案中，如图12所示，可以通过一种或多种DSC测定特征对形式B样品进行表征。以5℃/分钟速率加温，曲线1210表明作为温度函数的样品中的热流。曲线1210的吸热转变(或热流转变)1211也可以用于表征晶体形式。该转变以184℃开始的插入1212为表征，转变中在Tmax＝189℃时，热损失具有最大速率1213。吸热转变对应于形式B样品的熔解/分解。
在本发明的相关实施方案中，可以按1℃/分钟的加热速率进行DSC测定对形式B样品表征。在该测定中，通过174℃时的吸热转变表征DSC扫描；Tmax＝179℃也用于表征吸热转变。
相应于图13，本发明的其他特别实施方案中，参照水吸附/解吸附循环结果利用形式B表征多形体。图13显示了在25℃对形式B样品进行的两个连续水吸附/解吸附循环结果，显示了作为相对湿度的函数，样品中干燥晶体数的百分数含量变化。
交迭曲线表明吸附现象的可逆性。相应的，可以在循环之前和之后进行XRPD测定，以样品中没有结构变化的显示结果表征形式B。
如图13所示，本发明的一个实施方案中，相应于相对湿度从0％至90％的变化，形式B质量以约0.9％的变化作为表征。质量的％变化在±0.1％以内。选择性地，实施方案可以根据当相对湿度从0％变化至90％时，每摩尔无水晶体中带有0.4摩尔水变化而表征。
本发明的实施方案也根据XRPD测定中显示，当置于相对湿度97.5％和室温1个月时，晶体没有变化，而对形式B表征。此外，形式B以被水冲淋时仍保持其稳定性为表征，如对冲淋之前和之后XRPD所进行的观察；这表明单一晶体形式以在100％相对湿度和室温下保持稳定为表征。
形式C
本发明的一种实施方案中，柠檬酸盐单一晶体形式以具有形式C为表征。特别地，如图11所示，单一晶体形式可以通过使用CoKα1(λ＝1.7890)和CoKα2(λ＝1.7929)射线进行XRPD测定而对其特定特征进行表征。图11对扫描1110，1120，1130间作为2θ的函数的相对密度进行了比较。扫描1110和1130对应于对包括形式A和形式C的混合物样品的测定。对应于单纯形式A样品的扫描1120，其特征与对于柠檬酸盐形式C具有唯一性的XRPD扫描1110，1130不同。图11显示柠檬酸盐形式C的特定扫描1110至少具有四个为一峰。这样，柠檬酸盐单一晶体形式以任何这四个峰为表征。
本发明的另一实施方案中，根据温度依赖的XRPD测定，形式C以150℃至160℃范围内的稳定性损失为表征。图12中显示了使用CoKα1(λ＝1.7890)和CoKα2(λ＝1.7929)射线对同一种样本进行测定，生成图11中的扫描1110。每条曲线显示了在干燥氮气环境下样品的等温扫描，温度变化范围为室温至210℃，以10℃为间隔。当温度升高时，2θ～6.35的峰开始损失强度，连续的扫描发展为类似与形式A。对应于T＝160℃的扫描1220，形式C的特征峰不存在；该样品对应于晶体形式A。增高温度甚至使晶体形式A分解/熔解(例如，扫描1230对应于T＝180℃)。这样，XRPD测定表明形式C在150℃至160℃间转变为形式A。
形式C以图13中的TGA测定的一种或多种特征进行表征。曲线1310描绘了作为温度的函数，包括形式A和形式C的测定样品的重量1315；相应曲线1320描绘了作为温度函数的重量损失导出率1325。
特别的，形式C可以由重量损失1312表征，以157℃开始插入1321并且在162℃具有最大重量损失率1322。该重量损失约为8.22％(重量/重量)，对应于形式C的转变。这样，根据TGA，形式C以可转化为形式A的柠檬酸盐晶体为表征，其在157℃开始并在162℃具有最大重量损失。同时使用TGA和DSC测定，及TGA联用质谱分析，都验证了该结果。
重量损失1313对应于随后的形式A晶体的分解/熔解；在183℃时第三次重量损失21.9％(重量/重量)具有最大重量损失率，其在168℃开始。
图14的DSC测定也表征了形式C。以5℃/分钟速率加温，对包括形式A和C的样品测定生成的曲线1410，显示了两个强烈的吸热转变。特别是，形式C以第一个吸热转变1411为表征，其开始于161℃并具有Tmax＝166℃。此对应于晶体形式C向形式A的转变。第二次吸热转变1412，其开始于173℃并具有Tmax＝178℃，对应于形式A的熔解/分解。
选择性地，以20℃/分钟速率加温对样品进行DSC测定表征形式C。特别地，对应于形式C和形式A之间转变的吸热转变开始与165℃，并在171℃为Tmax。
本发明的特别实施方案中，图15的曲线表征柠檬酸盐的单一晶体形式，对应于在25℃对包括形式A和C的样品进行的两个连续水吸附/解吸附循环结果。图像显示了作为相对湿度的函数，样品中干燥晶体数的百分数含量变化。交迭曲线表明，形式C在相对湿度为0％变化至90％的范围内，保持其稳定性为表征(例如，关于样品的吸附现象是可逆的)。在吸附/解吸附循环之前和之后进行XRPD测定，样品中没有结构变化(例如，形式A和形式C的比例被认为是恒定的)。这样，XRPD扫描相对于相对湿度试验，可以进一步表征形式C的稳定性。
形式D
本发明的某些实施方案针对包括形式D的柠檬酸盐单一晶体。特别地，如图16所示，形式D可以通过使用CoKα1(λ＝1.7890)和CoKα2(λ＝1.7929)射线进行XRPD测定而对其特定特征进行表征。扫描1610，1620，1630描绘了三个样品作为2θ的函数的相对密度。扫描1610对应于形式A和D样品。对应于形式A和形式C组合物和纯化形式A的扫描1620，1630，被用于推出对应于形式D的扫描1610的为一特征。某一实施方案中，形式D以图16中扫描1610的任何数量特定峰为表征。
根据温度依赖的XRPD测定，形式D以40℃至50℃范围内的稳定性损失为表征。图17中显示了以10℃为间隔，温度变化范围为室温至210℃，在干燥氮气环境下对含有形式A和D的样品进行测定。对于40℃和更低温度的扫描(图17中扫描1705对应于T＝40℃)，至少具有仪表特征线1770表明形式D的存在。代表T＝50℃的扫描1710显示了线1770的衰减。在T＝60℃，扫描1720不显示形式D的线1770特征。在该点，样品具有相似于形式A的XRPD扫描。这样，形式D以低于60℃时转变为形式A，并在低于50℃时损失其稳定性为表征。其余扫描显示了指示形式A的不同温度下的特征。
形式D以图18中的TGA测定的一种或多种特征进行表征；以5℃/分钟的加热速率对含有形式A和D的样品进行测定。特别地，根据温度控制XRPD测定，由于在形式D晶体与形式A相互转换的温度之上，形式D才开始第一次重量损失转变1811，表明形式D以无水为其表征。第一次重量损失对应于样品晶体的THF的损失；同时使用DSC及TGA联用质谱分析验证了该结果。第二次重量损失转变1812开始于164℃，并在180℃具有最大重量损失率。这与对形式A进行TGA测定所观察到的转变类似。这样，该结果验证了在高温下晶体形式D部分转变为形式A的温度-依赖的XRPD结果。
如图19所示，DSC测定也用于表征形式D。以0.3℃/分钟的加热速度对形式A和D的混合物进行DSC测定。曲线1910表明在大约47℃开始并具有Tmax＝52℃的吸热转变1911；该转变对应于晶体形式D向形式A的转变。该转变也以综合焓3.7J/g为表征。如TGA分析中讨论的，对应于THF释放的吸热转变1912在约60℃开始并具有Tmax＝77℃。转变的焓为18.1J/g。吸热转变1913，对应于形式A的熔解/分解，在大约160℃开始并具有Tmax＝166℃。
形式D以在变化的相对湿度条件下，损失其稳定性，并与形式A相互转换为表征。图20显示了在25℃下对含有形式A和D的样品进行的四次连续水吸附/解吸附循环对应曲线。曲线表明作为相对湿度的函数，干燥晶体质量百分数的变化。吸附在相对湿度40％时开始，并在相对湿度100％至相对湿度0％之间是连续循环的。在每个潮湿循环中观察到滞后效应，对应于4个循环后14.3％(重量/重量)的总重量损失。
循环之前和之后进行的XRPD测定显示了结构改变，其中循环后形式D已经消失；仅有形式A存留。
形式E和H
根据本发明的实施方案，形式E是一种柠檬酸盐的单一晶体形式。本发明的特定实施方案针对与图21所示的XRP形式D充分相似的单一晶体形式。CoKα1射线被用于生成XRP形式D。如表5所示(d间隔值以埃表示)，单一晶体形式选择性地被XRP形式D的前30条线所表征。
2θ
h k l d-间隔
1,54184
1 0 0 13.522 6.54
0 0 1 12.464 7.09
-1 0 1 11.619 7.61
-1 1 0 8.256 10.72
0 1 1 7.997 11.06
1 0 1 7.808 11.33
-1 1 1 7.759 11.40
-2 0 1 7.195 12.30
-2 0 0 6.761 13.10
-1 0 2 8.709 13.20
1 1 1 6.249 14.17
0 0 2 6.232 14.21
-2 1 1 5.922 14.96
-2 0 2 5.809 15.25
-2 1 0 5.673 15.62
-1 1 2 5.641 15.71
0 1 2 5.349 16.57
0 2 0 5.213 17.01
2 0 1 5.177 17.13
-2 1 2 5.075 17.48
1 0 2 4.987 17.79
-3 0 1 4.870 18.22
-1 2 0 4.864 18.24
0 2 1 4.809 18.45
-1 2 1 4.756 18.66
2 1 1 4.637 19.14
-3 0 2 4.565 19.44
3 0 0 4.507 19.70
1 1 2 4.499 19.74
-1 0 3 4.476 19.83
表5：图21中XRPD图谱索引
形式E也可以由表5中的一个或多个峰进行表征。本发明的实施方案可利用表5中任何数量的峰，包括选择使用其全部。本发明的另一实施方案中，对XRPD测定进行分析，获得表6中的一种或多种计算细胞参数对形式E进行表征。晶体结构也以斜方晶系P21(Z＝2，Z’＝1)为表征.
表6：形式E的XRPD扫描细胞参数
图22显示了在干燥氮气环境下，使用CoKα1(λ＝1.7890)和CoKα2(λ＝1.7929)射线对形式E样本进行等温XRPD测定。温度范围为以10℃为间隔从室温上升至190℃。
本发明的一个实施方案中，形式E以在50℃至60℃间稳定性的损失为表征。扫描2210，对应于40℃的XRPD，显示了特定的开始消失的线条(例如，线条2270)，而其他线条(例如，线条2280)开始生成。在60℃(扫描2220)，形式E的结构特征已经消失。柠檬酸盐的新的晶体形式，称为形式H，已经出现。120℃的扫描2230显示晶体形式H扰动的开始。140℃的扫描2240显示样品已经熔解。
这样，本发明的另一实施方案中，形式H由图22中对应与60℃至130℃温度的扫描2290所表征，并且/或者在130℃至140℃之间损失其稳定性。也可以由形式E和形式H之间的转变作为其表征。
图23显示对晶体形式E进行的TGA测定的结果。曲线2310描绘了作为温度函数的样品的重量；对应的曲线2320描绘了作为温度函数的重量损失的导出率。
根据开始温度为52℃，重量变化最大率时的温度为64℃，并且/或者与转变相关的重量损失为6.14％(重量/重量)，形式E以重量损失转变2311为表征。转变2311，如上所述，也可以表征形式E。
根据开始温度为172℃，重量变化最大率时的温度为142℃，并且/或者与转变相关的重量损失为20.10％(重量/重量)，形式H以重量损失转变2312为表征。转变2311，如上所述，也可以表征形式H。
图24显示了以5℃/分钟加热，对柠檬酸盐形式E进行DSC测定的结果。曲线2410描绘了作为温度函数的样品热流。
形式E以曲线2410的吸热转变2411为表征。转变2411以45℃开始，在Tmax＝67℃具有最大热损失率为表征；综合焓变化为178.3J/g。转变2411对应于样品中水的损失，及形式E到形式H的转变(例如，形式E稳定性的损失)。
形式H以曲线2410的另一个吸热转变2412为表征。转变2412以131℃开始，在Tmax＝141℃具有最大热损失率为表征。转变2412对应于形式H中水的损失，及晶体的分解/熔解。转变2411也表征形式H。
图25显示的曲线对应于在25℃对形式E样品进行的两次连续水吸附/解吸附循环。该曲线，表明作为相对湿度的函数，干燥晶体质量百分数在每轮后的改变。这表明吸附现象是可逆的。曲线表明当相对湿度从0％增加到10％时样品增加了5.13％(重量/重量)。XRPD测定显示晶体具有对应于吸附/解吸附循环之前的形式E的结构，以及对应于循环之后的形式H的结构。
室温下，形式E在10至90％相对湿度时是稳定的。小于10％相对湿度时，及在相对湿度0％时的试验观察，形式E转变为形式H。吸附/解吸附曲线表明，当暴露于10％相对湿度或更高相对湿度时，形式H可逆地转变为形式E。
形式F和G
本发明的一个实施方案中，由图26中的XRP形式D定义的任何数量的曲线对含有形式F和G混合物的晶体进行表征。图26显示了在干燥氮气和室温下，使用CoKα1(λ＝1.7890)和CoKα2(λ＝1.7929)射线，作为2θ函数的扫描3110，3120的相对强度。扫描2610对应于含有形式E，F，G的样品。扫描2620对应于纯形式E，区分于形式F和G唯一的扫描2610峰。
图27显示了在干燥氮气环境下，以10℃为间隔从室温上升至190℃，使用CoKα1(λ＝1.7890)和CoKα2(λ＝1.7929)射线对含有形式E，F，G的样本进行等温XRPD测定。每条曲线表示干燥氮气环境下样品的等温扫描。
形式E以高于50℃时的稳定性损失为表征。扫描2710，显示了50℃的测定情况，表明形式E的唯一线2711已经在50℃或更高温度时消失。110℃或更高温度的扫描显示形式F的唯一线(例如，线2721)已经消失。这样，形式F以在高于110℃时(扫描2710显示在110℃进行测定)损失其稳定性作为表征。形式G以在130℃或更高温度时损失其稳定性作为表征；在130℃或更高温度时对应于形式G的扫描线2730已经消失(例如，线2731)。
通过从室温增至130℃的测定，对应于形式B的曲线在多用扫描中都连续增长。在130℃或更高温度时，扫描充分对应于形式B的曲线。这样，这些扫描的数据表明当温度上升时，形式E，F，G都转变为形式B。
图28显示了对含有形式E，F，G的样品进行的TGA测定。曲线2810纪录了作为温度函数的样品重量。曲线2820纪录了以5℃/分钟对样品加热时作为温度函数的重量损失导出率。图28提供了四种重量损失；表7给出相关的数据概要。
表7：对含有形式E，F和G的样品进行TGA测定的重量变化数据
形式E以重量损失2811为表征，其对应于形式E的转变。形式F以重量损失2812为表征，其对应于形式F的转变。形式G以重量损失2813为表征，其对应于形式G的转变。第四个重量损失2814是晶体形式B的分解/熔解，和相应的柠檬酸盐的损失。
图29显示了对含有形式E，F，G的样品以5℃/分钟速度加热进行的DSC测定。曲线2910显示四种吸热转变，表8概述了量化数据。
表8：对含有形式E，F和G的样品进行DSC测定的热流转变数据
第一个吸热转变2911表征形式E转变为形式B。第二个吸热转变2912表征形式F转变为形式B。第三个吸热转变2913表征形式G转变为形式B。第四个吸热转变2914表征晶体形式B的分解/熔解。
图30显示的曲线对应于对含有形式E，F和G的样品在25℃进行的四次连续水吸附/解吸附循环。图形显示了作为相对湿度的函数，干燥晶体重量百分数的变化。第一次吸附开始于40％相对湿度，并且在相对湿度100％至相对湿度0％之间为连续循环。在第一次吸附/解吸附循环中观察到滞后效应；剩余的3次循环是可逆的并且不显示滞后。吸附/解吸附循环后样品中水分损失的净重约为7.5％(重量/重量)，其与图28中以更低温度进行的TGA分析中观察到的三次重量转变总和相似。这样，对循环样品加热至131℃或更高温度将使样品转变为形式B。
将相对湿度从0％变化至10％时，样品中的水分增加了3.76％(重量/重量)。将相对湿度从10％变化至90％时，样品中的水分增加了2.10％(重量/重量)。相对湿度从90％变化至100％时，水分增加了0.82％(重量/重量)至0.93％(重量/重量)。这些转变都是可逆的。
以相对湿度40％，在吸附/解吸附之前和之后对样品进行的XRPD测定显示，在循环进行之后，形式F消失，形式G的曲线已经消失，而形式E曲线出现增长。相对湿度在10％至90％之间的吸附/解吸附重量变化形式E所表明的于相似(图25)。这样，潮湿循环造成形式F和G转变为形式E。
将样品置于相对湿度97.5％一个月之前和之后，或将样品用水冲淋之前和之后的F1批次的XRPD比较结果验证了相同的变化，即形式F曲线的消失和形式G曲线的减弱，以及形式E曲线的增长。
将样品置于相对湿度为0％大约一个月左右，对F1批次的样品进行XRPD测定，测定结果显示为形式E和形式B的混合物；没有观察到全部为形式B的转化。
本发明的其他实施方案针对柠檬酸盐单一晶体形式，其以联合了任何这里讨论的单一晶体形式的特征为表征。特定多形体中论述的一种或多种XRPD，TGA，DSC，和水吸附/解吸附测定的联合可以作为表征。例如，柠檬酸盐的单一晶体形式可以通过对XRPD扫描中关于主要峰的2θ位置的XRPD结果进行任意联合；源于XRPD扫描的一种或多种细胞参数的任何联合；及在不同温度下对晶体样品进行XRPD扫描确定的晶体形式开始破坏，或分解/熔解的任何温度进行表征。柠檬酸盐单一晶体形式可以在样品开始重量损失转变的温度和/或对应于最大重量变化率的温度下，由TGA测定进行表征。Tmax和/或样品开始热流转变的温度下进行的DSC测定也可以表征晶体形式。样品的重量改变和/或在一定相对湿度范围内(例如，0％至90％)进行的水吸附/解吸附测试中测定的，每摩尔无水柠檬酸盐中水吸附/解吸附的变化，也可以表征柠檬酸盐单一晶体形式。
使用多种分析技术联合表征单一晶体形式的实施例包括，XRPD扫描中至少一个主要峰的2θ位置和相应DSC测定中观察到的热流转变/吸热转变Tmax；XRPD扫描中至少一个主要峰的2θ位置和相应DSC测定中重量损失转变最大率的温度；RPD扫描中至少一个主要峰的2θ位置，相应DSC测定中观察到的热流转变/吸热转变和相应DSC测定中重量损失转变最大率的温度；RPD扫描中至少一个主要峰的2θ位置，相应DSC测定中观察到的热流转变/吸热转变Tmax，和相应DSC测定中重量损失转变最大率的温度，和在一定相对湿度范围内进行的水吸附/解吸附测试中测定的，每摩尔无水盐中水吸附/解吸附的变化。然而，根据本发明的实施方案，每一个前述的示范例都可以将RPD扫描中至少一个主要峰的2θ位置的使用替换为XRPD扫描中测定的一种或多种单一晶体形式的细胞参数。
上述讨论的表征的联合可以用于描述任何这里讨论的柠檬酸盐多形体(例如，形式A，B，C，D，E，F，G，H)。本发明的选择性实施方案中，柠檬酸盐，或柠檬酸盐的单一晶体形式，以缺失一种或多种特定多形体相关的特征为表征(例如，非形式A，以1℃/分钟的速度加热进行DSC测定时不具有Tmax＝167℃，XRPD测定时没有形式A的主要峰)。本发明的另一选择性实施方案中，联合使用不同多形体(例如，包括形式A和形式B的晶体，以至少具有XRPD测定中形式A和形式B的一个主要峰为表征的晶体形式，晶体形式是无水的)的单一晶体形式特点表征柠檬酸盐晶体。本发明的其它选择性实施方案中，涉及的晶体柠檬酸盐不具有不同多形体的单一晶体形式的联合特征(例如，不具有形式A，C，D的XRP形式D主要峰的晶体柠檬酸盐)。
以下描述了特定的其它示范性实施方案。
一些实施方案中，(S)-4-(4-氯-苯基)-1-(3-〔7-(1-羟基-1-甲基-乙基)-11H-10-氧杂-1-氮杂-苯并〔a，d〕环庚酮-5-亚基〕-丙基-3，3-二甲基-六氢吡啶-4-醇(“柠檬酸盐”)的至少10％重量为晶体。其它实施方案中，柠檬酸盐的至少70％重量为晶体。而其它实施方案中，柠檬酸盐的至少90％重量为晶体。
其它实施方案中，柠檬酸盐的至少10％重量为单一晶体形式。而其它实施方案中，柠檬酸盐的至少70％重量为单一晶体形式。而其它实施方案中，柠檬酸盐的至少90％重量为单一晶体形式。
其它实施方案中，柠檬酸盐的至少10％重量为非形式A。而其它实施方案中，柠檬酸盐的至少70％重量为非形式A。而其它实施方案中，柠檬酸盐的至少90％重量为非形式A。
其它实施方案中，提供了(S)-4-(4-氯-苯基)-1-(3-〔7-(1-羟基-1-甲基-乙基)-11H-10-氧杂-1-氮杂-苯并〔a，d〕环庚酮-5-亚基〕-丙基-3，3-二甲基-六氢吡啶-4-醇柠檬酸盐，该柠檬酸盐充分地为形式A。而其它实施方案中，提供的(S)-4-(4-氯-苯基)-1-(3-〔7-(1-羟基-1-甲基-乙基)-11H-10-氧杂-1-氮杂-苯并〔a，d〕环庚酮-5-亚基〕-丙基-3，3-二甲基-六氢吡啶-4-醇柠檬酸盐，该柠檬酸盐重量的至少10％为形式A。而其它实施方案中，提供的(S)-4-(4-氯-苯基)-1-(3-〔7-(1-羟基-1-甲基-乙基)-11H-10-氧杂-1-氮杂-苯并〔a，d〕环庚酮-5-亚基〕-丙基-3，3-二甲基-六氢吡啶-4-醇柠檬酸盐，该柠檬酸盐重量的至少70％为形式A。
而其它实施方案中，柠檬酸盐的至少70％重量为单一晶体形式，并且当使用CoKα1射线测定时，晶体形式以在9.8，11.7，12.6，15.5，15.7，15.9，17.3，17.5，18.2，19.0，19.7的2θ角至少具有一个X-射线粉末衍射峰为表征。其它实施方案中，柠檬酸盐的至少70％重量为单一晶体形式，并且当使用CoKα1射线测定时，晶体形式以在9.8，11.7，12.6，15.5，15.7，15.9，17.3，17.5，18.2，19.0，19.7的2θ角具有X-射线粉末衍射峰为表征。而其它实施方案中，当使用CoKα1射线测定时，晶体形式以与图1中充分相似的X-射线粉末衍射模式为表征。而其它实施方案中，晶体形式以在温度控制X-射线粉末衍射中观察到的，在150℃至160℃范围间具有稳定转变为表征。
其它实施方案中，柠檬酸盐的至少70％重量为单一晶体形式，其中单一晶体形式以使用1℃/分钟的扫描速度，在差异扫描热量测定中观察到，吸热转变的Tmax为167±3℃为表征。而其它实施方案中，柠檬酸盐的至少70％重量为单一晶体形式，其中单一晶体形式以对应于164±3℃开始的柠檬酸盐分解的热失重分析中观察到的重量损失作为表征。而其它实施方案中，柠檬酸盐的至少70％重量为单一晶体形式，其中单一晶体形式在25℃，相对湿度从0％变化至90％时，每摩尔柠檬酸盐中增加约0.8摩尔水分。
其它实施方案中，提供的(S)-4-(4-氯-苯基)-1-(3-〔7-(1-羟基-1-甲基-乙基)-11H-10-氧杂-1-氮杂-苯并〔a，d〕环庚酮-5-亚基〕-丙基-3，3-二甲基-六氢吡啶-4-醇柠檬酸盐，该柠檬酸盐充分地为形式B。而其它实施方案中，提供的(S)-4-(4-氯-苯基)-1-(3-〔7-(1-羟基-1-甲基-乙基)-11H-10-氧杂-1-氮杂-苯并〔a，d〕环庚酮-5-亚基〕-丙基-3，3-二甲基-六氢吡啶-4-醇柠檬酸盐，该柠檬酸盐重量的至少10％为形式B。而其它实施方案中，柠檬酸盐的至少70％重量为单一晶体形式，其中单一晶体形式是形式B。而其它实施方案中，至少70％重量的柠檬酸盐为单一晶体形式，其中当使用CoKα1射线测定时，单一晶体形式以在10.6，11.6，12.3，14.8，15.8，16.1，16.7，1.8，20.6，21.7，24.5的2θ角至少具有一个X-射线粉末衍射峰为表征。而其它实施方案中，至少70％重量的柠檬酸盐为单一晶体形式，其中当使用CoKα1射线测定时，单一晶体形式以在10.6，11.6，12.3，14.8，15.8，16.1，16.7，1.8，20.6，21.7，24.5的2θ角具有X-射线粉末衍射峰为表征。而其它实施方案中，当使用CoKα1射线测定时，晶体形式以与图6中充分相似的X-射线粉末衍射模式为表征。而其它实施方案中，晶体形式以在温度控制X-射线粉末衍射中观察到的，在170℃至180℃范围间具有稳定转变为表征。
其它实施方案中，柠檬酸盐的至少70％重量为单一晶体形式，其中单一晶体形式以使用1℃/分钟的扫描速度，在差异扫描热量测定中观察到，吸热转变的Tmax为179±3℃为表征。而其它实施方案中，柠檬酸盐的至少70％重量为单一晶体形式，其中单一晶体形式以对应于180±3℃开始的柠檬酸盐分解的热失重分析中观察到的重量损失作为表征。而其它实施方案中，柠檬酸盐的至少70％重量为单一晶体形式，其中单一晶体形式在25℃，相对湿度从0％变化至90％时，每摩尔柠檬酸盐中增加约0.4摩尔水分。
药物组合物
另一方面，本发明提供了包括药物可接受载体或稀释液的药物组合物；及这里讨论的(S)-4-(4-氯-苯基)-1-(3-〔7-(1-羟基-1-甲基-乙基)-11H-10-氧杂-1-氮杂-苯并〔a，d〕环庚酮-5-亚基〕-丙基-3，3-二甲基-六氢吡啶-4-醇柠檬酸盐。一些实施方案中，柠檬酸盐充分地为晶体。
本发明也提供了包括药物可接受载体或稀释液的药物组合物；及(S)-4-(4-氯-苯基)-1-(3-〔7-(1-羟基-1-甲基-乙基)-11H-10-氧杂-1-氮杂-苯并〔a，d〕环庚酮-5-亚基〕-丙基-3，3-二甲基-六氢吡啶-4-醇柠檬酸盐，其中至少10％重量的柠檬酸盐是晶体。一些实施方案中，至少10％重量的柠檬酸盐是单一晶体形式。而其它实施方案中，至少10％重量的柠檬酸盐是非形式A。
本发明进一步提供了包括药物可接受载体或稀释液的药物组合物；及(S)-4-(4-氯-苯基)-1-(3-〔7-(1-羟基-1-甲基-乙基)-11H-10-氧杂-1-氮杂-苯并〔a，d〕环庚酮-5-亚基〕-丙基-3，3-二甲基-六氢吡啶-4-醇柠檬酸盐，其中至少70％重量的柠檬酸盐是晶体。一些实施方案中，至少70％重量的柠檬酸盐是单一晶体形式。而其它实施方案中，至少70％重量的柠檬酸盐是非形式A。而其它实施方案中，当使用CoKα1射线测定时，晶体形式以在9.8，11.7，12.6，15.5，15.7，15.9，17.3，17.5，18.2，19.0，19.7的2θ角至少具有一个X-射线粉末衍射峰为表征。其它实施方案中，当使用CoKα1射线测定时，晶体形式以在9.8，11.7，12.6，15.5，15.7，15.9，17.3，17.5，18.2，19.0，19.7的2θ角具有X-射线粉末衍射峰为表征。而其它实施方案中，当使用CoKα1射线测定时，单一晶体形式以与图1中充分相似的X-射线粉末衍射模式为表征。而其它实施方案中，晶体形式以在温度控制X-射线粉末衍射中观察到的，在150℃至160℃范围间具有稳定转变为表征。其它实施方案中，单一晶体形式以使用1℃/分钟的扫描速度，在差异扫描热量测定中观察到，吸热转变的Tmax为167±3℃为表征。而其它实施方案中，单一晶体形式以对应于164±3℃开始的柠檬酸盐分解的热失重分析中观察到的重量损失作为表征。而其它实施方案中，单一晶体形式在25℃，相对湿度从0％变化至90％时，每摩尔柠檬酸盐中增加约0.8摩尔水分。而其它实施方案中，单一晶体形式是形式B。而其它实施方案中，单一晶体形式以在10.6，11.6，12.3，14.8，15.8，16.1，16.7，1.8，20.6，21.7，24.5的2θ角至少具有一个X-射线粉末衍射峰为表征。而其它实施方案中，当使用CoKα1射线测定时，单一晶体形式以在10.6，11.6，12.3，14.8，15.8，16.1，16.7，1.8，20.6，21.7，24.5的2θ角具有X-射线粉末衍射峰为表征。而其它实施方案中，当使用CoKα1射线测定时，晶体形式以与图6中充分相似的X-射线粉末衍射模式为表征。而其它实施方案中，晶体形式以在温度控制X-射线粉末衍射中观察到的，在170℃至180℃范围间具有稳定转变为表征。其它实施方案中，单一晶体形式以使用1℃/分钟的扫描速度，在差异扫描热量测定中观察到，吸热转变的Tmax为179±3℃为表征。而其它实施方案中单一晶体形式以对应于180±3℃开始的柠檬酸盐分解的热失重分析中观察到的重量损失作为表征。而其它实施方案中，单一晶体形式在25℃，相对湿度从0％变化至90％时，每摩尔柠檬酸盐中增加约0.4摩尔水分。
本发明也提供了包括药物可接受载体或稀释液的药物组合物；及(S)-4-(4-氯-苯基)-1-(3-〔7-(1-羟基-1-甲基-乙基)-11H-10-氧杂-1-氮杂-苯并〔a，d〕环庚酮-5-亚基〕-丙基-3，3-二甲基-六氢吡啶-4-醇柠檬酸盐，其中至少90％重量的柠檬酸盐是晶体。一些实施方案中，至少90％重量的柠檬酸盐是单一晶体形式。而其它实施方案中，至少90％重量的柠檬酸盐是非形式A。
本发明进一步提供了包括药物可接受载体或稀释液的药物组合物；及(S)-4-(4-氯-苯基)-1-(3-〔7-(1-羟基-1-甲基-乙基)-11H-10-氧杂-1-氮杂-苯并〔a，d〕环庚酮-5-亚基〕-丙基-3，3-二甲基-六氢吡啶-4-醇柠檬酸盐，该柠檬酸盐充分地为形式A。
而其它实施方案中，本发明也提供了包括药物可接受载体或稀释液的药物组合物；及(S)-4-(4-氯-苯基)-1-(3-〔7-(1-羟基-1-甲基-乙基)-11H-10-氧杂-1-氮杂-苯并〔a，d〕环庚酮-5-亚基〕-丙基-3，3-二甲基-六氢吡啶-4-醇柠檬酸盐，其中至少10％重量的柠檬酸盐是形式A。
而其它实施方案中，本发明也提供了包括药物可接受载体或稀释液的药物组合物；及(S)-4-(4-氯-苯基)-1-(3-〔7-(1-羟基-1-甲基-乙基)-11H-10-氧杂-1-氮杂-苯并〔a，d〕环庚酮-5-亚基〕-丙基-3，3-二甲基-六氢吡啶-4-醇柠檬酸盐，该柠檬酸盐充分地为形式B。而其它实施方案中，本发明也提供了包括药物可接受载体或稀释液的药物组合物；及(S)-4-(4-氯-苯基)-1-(3-〔7-(1-羟基-1-甲基-乙基)-11H-10-氧杂-1-氮杂-苯并〔a，d〕环庚酮-5-亚基〕-丙基-3，3-二甲基-六氢吡啶-4-醇柠檬酸盐，其中至少10％重量的柠檬酸盐是形式B。
如上所述，本发明的药物组合物进一步包括药物可接受载体，其中，如这里使用的，适合于期望的特定剂量形式的，包括任何以及所有溶剂，稀释液，或其它液体媒介，分散或悬浮剂，表明活性剂，等渗剂，增稠或乳化剂，防腐剂，固体结合物，润滑剂和类似物。Remington’s药物科学，Mack出版公司，本领域的表征参考治疗，阐明了用于制备药物组合物的多种载体和其制备的已知技术。除了与柠檬酸盐不相容的常规载体媒介之外，如可产生任何非期望生物学效应或有害干扰任何其它药物组合物成分，其使用在本发明的范围内是预期的。
本发明的药物组合物可以由本领域已知的方法制备，其中如常规颗粒化，混合，溶解，装入胶囊，冻干，或乳化过程。组合物可以制备沉不同形式，包括颗粒，沉淀物，或微粒，粉末，包括冻干，旋转干燥或喷雾干燥粉末，非晶粉末，药片，胶囊，糖浆，栓剂，注射剂，乳化剂，表面活性剂，生物增效剂和其组合。
组合物中活性成分的数量可以从占重量的大约0.1％至大约99.9％，或占重量的大约20％至80％。单位剂量制备物可以包括1mg至1000mg活性成分，优选地为大约10mg至100mg活性成分。如果期望，组合物可以包括其它相容的治疗药物，包括但不局限于，茶碱，β-肾上腺素支气管扩张剂，皮质类固醇，抗组胺药，抗过敏药，免疫抑制剂(例如，环胞霉素A，FK-506，强的松，甲基强的松龙)，激素(例如，促肾上腺皮质激素(ACTH))，细胞因子(例如，干扰素(例如，INFβ-1a，INFβ-1b))和类似物。
柠檬酸盐和其晶体形式的治疗
本发明的另一方面涉及对异常白细胞聚集和/或激活相关的或细胞因子或细胞因子受体功能介导的疾病治疗的方法，包括预防和治疗处理，疾病包括以RANTES，MIP-1α，MCP-2，MCP-3和/或MCP-4应答T细胞，单核细胞和/或嗜曙红细胞的存在为特征的慢性炎症失调，包括但不局限于下列疾病，如关节炎(例如，风湿性关节炎)，动脉粥样硬化，动脉硬化，再狭窄，缺血/灌流损伤，糖尿病(例如，1型糖尿病)，牛皮癣，多重硬化，炎症性肠炎如溃疡性结肠炎和Crohn’s疾病，器官和组织移植排斥(例如，急性同种异体移植物排斥，慢性同种异体移植物排斥)，移植物抗宿主病，慢性阻塞性肺部失调(COPD)，以及过敏和哮喘。可以由这里所述的方法治疗(包括预防治疗)的异常白细胞聚集和/或激活相关的其它疾病是人类免疫缺陷病毒(HIV)感染相关的炎症疾病。而可以由这里所述的方法治疗(包括预防治疗)的异常白细胞聚集和/或激活相关的其它疾病是癌症和溶骨失调。如这里讨论，该方法包括对需要治疗的主体施用有效剂量的(S)-4-(4-氯-苯基)-1-(3-〔7-(1-羟基-1-甲基-乙基)-11H-10-氧杂-1-氮杂-苯并〔a，d〕环庚酮-5-亚基〕-丙基-3，3-二甲基-六氢吡啶-4-醇柠檬酸盐。一些实施方案中，柠檬酸盐充分地为晶体。其它实施方案中，至少10％重量的柠檬酸盐是晶体。而其它实施方案中，至少70％重量的柠檬酸盐是晶体。而其它实施方案中，至少70％重量的柠檬酸盐是单一形式晶体。其它实施方案中，单一形式晶体是形式A。而其它实施方案中，单一形式晶体是形式B。而其它实施方案中，至少70％重量的柠檬酸盐是非形式A。
其它实施方案中，该方法有效地治疗风湿性关节炎，多重硬化，动脉硬化症，炎症性肠炎，或牛皮癣。而其它实施方案中，该方法有效地治疗动脉硬化，再狭窄，糖尿病，肠炎，或Crohn’s疾病。而其它实施方案中，该方法有效地治疗器官移植排斥，移植物抗宿主病，过敏，哮喘，或人类免疫缺陷病毒感染相关的炎症疾病。而其它实施方案中，该方法有效地治疗慢性阻塞性肺部失调(COPD)
本发明的其它实施方案提供了包括对有需要的主体施用有效剂量的(S)-4-(4-氯-苯基)-1-(3-〔7-(1-羟基-1-甲基-乙基)-11H-10-氧杂-1-氮杂-苯并〔a，d〕环庚酮-5-亚基〕-丙基-3，3-二甲基-六氢吡啶-4-醇柠檬酸盐治疗风湿性关节炎的方法。一些实施方案中，用于治疗风湿性关节炎的柠檬酸盐具有以上和此处描述的柠檬酸盐的任何或多种特征。其它实施方案中，用于治疗风湿性关节炎的柠檬酸盐具有一种或几种下列特征：
1.柠檬酸盐充分地为晶体；
2.至少柠檬酸盐70％的重量是单一晶体形式；
3.至少柠檬酸盐70％的重量是单一晶体形式而单一晶体形式是形式A和形式B；
4.至少柠檬酸盐70％的重量是非形式A。
其它实施方案中，本发明提供了包括对有需要的主体施用有效剂量的(S)-4-(4-氯-苯基)-1-(3-〔7-(1-羟基-1-甲基-乙基)-11H-10-氧杂-1-氮杂-苯并〔a，d〕环庚酮-5-亚基〕-丙基-3，3-二甲基-六氢吡啶-4-醇柠檬酸盐治疗多重硬化症的方法。一些实施方案中，用于治疗风湿性关节炎的柠檬酸盐具有以上和此处描述的柠檬酸盐的任何或多种特征。其它实施方案中，用于治疗多重硬化症的柠檬酸盐具有一种或几种下列特征：
1.柠檬酸盐充分地为晶体；
2.至少柠檬酸盐70％的重量是单一晶体形式；
3.至少柠檬酸盐70％的重量是单一晶体形式而单一晶体形式是形式A和形式B；
4.至少柠檬酸盐70％的重量是非形式A。
而其它实施方案中，本发明提供了包括对有需要的主体施用有效剂量的(S)-4-(4-氯-苯基)-1-(3-〔7-(1-羟基-1-甲基-乙基)-11H-10-氧杂-1-氮杂-苯并〔a，d〕环庚酮-5-亚基〕-丙基-3，3-二甲基-六氢吡啶-4-醇柠檬酸盐治疗慢性阻塞性肺部失调(COPD)的方法。一些实施方案中，用于治疗风湿性关节炎的柠檬酸盐具有以上和此处描述的柠檬酸盐的任何或多种特征。其它实施方案中，用于治疗慢性阻塞性肺部失调的柠檬酸盐具有一种或几种下列特征：
1.柠檬酸盐充分地为晶体；
2.至少柠檬酸盐70％的重量是单一晶体形式；
3.至少柠檬酸盐70％的重量是单一晶体形式而单一晶体形式是形式A和形式B；
4.至少柠檬酸盐70％的重量是非形式A。
本发明的其它实施方案涉及在主体中拮抗细胞因子受体如CCR1的方法，包括此处所述对哺乳动物施用柠檬酸盐。
根据本方法，细胞因子介导的促炎症细胞的细胞因子受体趋向性和/或活性可以被抑制。柠檬酸盐施用于个体的剂量将依赖于疾病的类型和严重程度和个体的特征，如通常健康状况，年龄，性别，体重和药物耐受性。其也依赖于疾病的程度，严重性和类型。技术人员可以依据这些和其它因素决定合适的剂量。典型地，化合物的有效剂量范围可以为在成年人中每天0.1mg至约100mg。更适宜地，剂量范可以为围每天1mg至约100mg。细胞因子受体功能拮抗剂也可以联合一种或多种辅助治疗药物施用，例如，茶碱，β-支气管扩张剂，皮质类固醇，抗组胺剂，抗过敏药物，免疫抑制药物(例如，环胞霉素A，FK-506，甲基强的松龙)，激素例如，促肾上腺皮质激素(ACTH)，细胞因子(例如，干扰素(例如，IFNβ-1a，IFN β-1b))和类似物。
柠檬酸盐可以通过任何合适的途径给药，包括，例如，口服胶囊，分散剂或药片或注射给药。注射给药可以包括，例如，系统给药，如通过肌肉内，静脉内，皮下，或腹膜内注射。依赖于治疗的疾病或状况，柠檬酸盐也可以由口服(例如，饮食)，透皮，局部，吸入(例如，心脏内，鼻内，口服吸入或滴鼻)，或直肠内给药。口服或注射给药是给药的合适方法。
柠檬酸盐也可以与药物或生理学可接受的载体联合对个体施用以治疗上述的疾病。施用的化合物的形式将根据所选施用途径(例如，溶液，乳液，胶囊)而多样化。
柠檬酸盐晶体形式的制备
本发明的一些实施方案针对制备(S)-4-(4-氯-苯基)-1-(3-〔7-(1-羟基-1-甲基-乙基)-11H-10-氧杂-1-氮杂-苯并〔a，d〕环庚酮-5-亚基〕-丙基-3，3-二甲基-六氢吡啶-4-醇的晶体柠檬酸盐的方法。一个实施方案中，柠檬酸与(S)-4-(4-氯-苯基)-1-(3-〔7-(1-羟基-1-甲基-乙基)-11H-10-氧杂-1-氮杂-苯并〔a，d〕环庚酮-5-亚基〕-丙基-3，3-二甲基-六氢吡啶-4-醇溶液在溶液共存以沉淀出晶体柠檬酸盐。施用本领域中已知的技术将晶体柠檬酸盐从混合物中分离出来(例如，过滤，蒸发，倾析，蒸馏(真空或在气压下))。
可用于沉淀晶体柠檬酸盐的溶液包括乙醇，丙酮，甲醇，庚烷，甲乙酮(MEK)，水，甲苯，异丙醇，n-丙醇，四氢呋喃(THF)，乙腈，二甲基亚砜(DMSO)，二氯甲烷，及上述一种或多种溶液的联合。最后的晶体柠檬酸盐可以包括一种或多种单一晶体形式。
特别实施方案中，如丙酮或甲苯可以用于柠檬酸盐形式A结晶。
其它特别实施方案中，溶液如乙醇，甲醇/庚烷，MEK/水，n-丙醇，异丙醇，异丙醇/水，乙腈/水，或甲醇可以用于柠檬酸盐形式B结晶。跟特别地，可以将形式A样品置于上述一种溶液系统中制备形式B。表9列出了特定的暴露条件。
本发明的另一特别实施方案中，可以将形式A样品在高温下溶于THF和水的混合物中，随后使混合形式结晶而制备形式A和C的混合物。选择性地，将形式A和B样品于室温暴露于THF，并使晶体成熟为形式A和C，制备形式A和C的混合物。
本发明的另一实施方案中，通过将形式A样品溶解于THF中并在室温和大气压下缓慢蒸发溶液而制备形式A和D的混合物。
本发明的特别实施方案针对通过形式E的制备，将形式A样品在室温溶解于水中，并使样品成熟为形式E。
本发明的一个可选实施方案针对包括形式E，F和G的晶体柠檬酸盐的制备。柠檬酸盐多形体样品在室温置于水中。样品随后成熟为包括形式E，F和G的混合物。
本发明的优选实施方案是制备(S)-4-(4-氯-苯基)-1-(3-〔7-(1-羟基-1-甲基-乙基)-11H-10-氧杂-1-氮杂-苯并〔a，d〕环庚酮-5-亚基〕-丙基-3，3-二甲基-六氢吡啶-4-醇的柠檬酸盐形式A的方法。方法包括将柠檬酸和(S)-4-(4-氯-苯基)-1-(3-〔7-(1-羟基-1-甲基-乙基)-11H-10-氧杂-1-氮杂-苯并〔a，d〕环庚酮-5-亚基〕-丙基-3，3-二甲基-六氢吡啶-4-醇溶液在丙酮中混合沉淀出晶体柠檬酸盐。盐随后从组合物中分离。沉淀过程中混合物典型地置于30℃至40℃之间，但其它合适的温度也可以使用。温度可以保持至少10分钟。典型地，至少每份(S)-4-(4-氯-苯基)-1-(3-〔7-(1-羟基-1-甲基-乙基)-11H-10-氧杂-1-氮杂-苯并〔a，d〕环庚酮-5-亚基〕-丙基-3，3-二甲基-六氢吡啶-4-醇需要使用一份柠檬酸；合适地1.0至1.5份柠檬酸被使用。
本发明的另一实施方案中，制备柠檬酸盐的形式B的方法包括将柠檬酸与(S)-4-(4-氯-苯基)-1-(3-〔7-(1-羟基-1-甲基-乙基)-11H-10-氧杂-1-氮杂-苯并〔a，d〕环庚酮-5-亚基〕-丙基-3，3-二甲基-六氢吡啶-4-醇混合入乙醇并沉淀柠檬酸盐，随后分离盐。本发明实施方案中的方法进一步包括将柠檬酸盐晶体播种于沉淀混合物中。相关优选实施方案中，晶体是柠檬酸盐的形式B。联合混合物元素的过程典型地在18℃至22；其它合适的温度也可以使用。晶体沉淀时该温度典型地保持至少2小时。典型地，至少每份(S)-4-(4-氯-苯基)-1-(3-〔7-(1-羟基-1-甲基-乙基)-11H-10-氧杂-1-氮杂-苯并〔a，d〕环庚酮-5-亚基〕-丙基-3，3-二甲基-六氢吡啶-4-醇需要使用一份柠檬酸。
本发明的一些实施方案针对使(S)-4-(4-氯-苯基)-1-(3-〔7-(1-羟基-1-甲基-乙基)-11H-10-氧杂-1-氮杂-苯并〔a，d〕环庚酮-5-亚基〕-丙基-3，3-二甲基-六氢吡啶-4-醇柠檬酸盐结晶的混合物。混合物包括柠檬酸；(S)-4-(4-氯-苯基)-1-(3-〔7-(1-羟基-1-甲基-乙基)-11H-10-氧杂-1-氮杂-苯并〔a，d〕环庚酮-5-亚基〕-丙基-3，3-二甲基-六氢吡啶-4-醇；和结晶媒介。
结晶媒介是一种溶液或溶液系统(例如，溶液组合物)，其中柠檬酸和(S)-4-(4-氯-苯基)-1-(3-〔7-(1-羟基-1-甲基-乙基)-11H-10-氧杂-1-氮杂-苯并〔a，d〕环庚酮-5-亚基〕-丙基-3，3-二甲基-六氢吡啶-4-醇是可溶的，但晶体柠檬酸盐是不可溶或至少是难溶的。柠檬酸盐和(S)-4-(4-氯-苯基)-1-(3-〔7-(1-羟基-1-甲基-乙基)-11H-10-氧杂-1-氮杂-苯并〔a，d〕环庚酮-5-亚基〕-丙基-3，3-二甲基-六氢吡啶-4-醇的可溶性依赖于混合物的温度(例如，在较高温度溶解性增加)。
结晶媒介的实施例包括乙醇，丙酮，甲醇，庚烷，甲乙酮(MEK)，水，甲苯，异丙醇，n-丙醇，四氢呋喃(THF)，乙腈，二甲基亚砜(DMSO)，二氯甲烷，及上述一种或多种溶液的联合。本发明的特征实施方案，结晶媒介是乙醇；丙酮；甲醇；MEK；n-丙醇；异丙醇，THF；甲苯；乙腈；水；庚烷；甲醇庚烷混合物；MEK和水混合物；乙腈和水混合物；异丙醇和水混合物；或THF和水混合物。本发明的了另一特别实施方案中，结晶媒介是丙酮。而另一实施方案中，结晶媒介是乙醇。而另一实施方案中，结晶媒介是表9中使用的任何溶液/溶液系统。
结晶柠檬酸盐的混合物可以包括一种或多种通常在媒介中为浆体的晶体种子；沉淀/结晶促进物；和/或在各种时间和各种温度测试以促进柠檬酸盐结晶。为领域中的技术人员所知的用于增加结晶速率的其它添加物，也在本领域的范围内。
虽然在此描述的本发明的实施方案特异针对(S)-4-(4-氯-苯基)-1-(3-〔7-(1-羟基-1-甲基-乙基)-11H-10-氧杂-1-氮杂-苯并〔a，d〕环庚酮-5-亚基〕-丙基-3，3-二甲基-六氢吡啶-4-醇化合物的(S)-对映结构体，本领域中的技术人员知道本发明相关实施方案包括(R)-对映结构体的使用，化合物的外消旋混合物，和任何(R)和(S)对映结构体的分段组合物。
试验
柠檬酸盐晶体形式样品的分析特征
以对柠檬酸盐样品进行一种或多种分析技术的结果作为柠檬酸盐晶体形式的特征。这些技术包括多种类型的X-射线粉末衍射(XRPD)，热失重分析(TGA)，差示扫描量热法(DSC)，动态蒸汽吸附测定(DVS)，和光学显微镜。对于柠檬酸盐的每种多形体，根据本发明的实施方案，一种或多种分析技术被用于表征多形体。以下描述了单独的技术。
X-射线粉末衍射(XRPD)利用三种设备中的一种测定柠檬酸盐的不同样品。设备I利用带有Bragg-Brentano(垂直θ-2θ结构)仲聚焦几何的Siemens-Bruker D5000 Matic粉末衍射计。以密封钴极在40KV和30mA释放X-射线。典型地释放出两条射线：CoKα1(λ＝1.7890)和CoKα2(λ＝1.7929)。铁-β过滤器限制了CoKβ射线(λ＝1.6208)至约为检测器分散波的1％。最初的波通过一个平行板瞄准仪(0.2mm soller狭缝)，然后通过一个分歧裂缝(0.2mm)。衍射的X-射线以2θ角中具有10°-宽度检测窗的Braun 50M多通道线性检测器测定，扫描时间为2θ中每度10至40秒。2θ定位的误差一般为±0.10度。
设备2中，利用Bragg-Brentano(垂直θ-2θ结构)仲聚焦几何和X’Celerator检测器，用ilips Analytical X’Pert Pro MPD粉末衍射计获得高精度的XRPD图。以45kV和40mA运行的密封钴极X-射线管，产生碰撞X-射线。发生波单色仪(Hohansson型：对称借个曲线锗(III)晶体)产生纯CoKα1(λ＝1.54060)。产物薄层被沉淀在根据Si(510)结晶定位切割的单晶硅晶片上，通过系统消光，阻止任何Bragg反射。为了在衍射位点带来更多晶体，使用样品的微调控制，从而减少测定中颗粒统计的影响。微调控制转速设定为每秒1转。2θ中角度范围在3°至40°或50°之间，2θ中步移大小为0.02°。每步使用1250至3500秒的计算时间。2θ定位的误差一般为±0.10度。
设备2进行的扫描可以用Bruker公司完成的Diffrac-AT程序“峰型拟合”模型分析测定每个可见线的2θ位置。比较模型提供的线形最大值一半位置的宽度分解峰重叠，并展现另一相的存在或缺失。由Accelrys公司“X-Cell”索引程序给出的最佳方法，最高品质的图，随后被Pawley refinement所优化。处理说明了图表的全部特征，而非简单的线形位置。通过利用可变的衍射强度，该方法尽可能地寻求重现试验图。
设备3中，XRPD测定在不同温度下进行以说明伴随时间的晶体结构发展。试验用带有Bragg-Brentano仲聚焦(θ-θ)几何和Anton-Paar TTK温度舱的Siemens-Bruker D5000粉末衍射计进行。使用干燥氮气或具有特定湿度的氮气流进行测定。该设备的特点充分类似于上述的Siemens-Bruker D5000Matic粉末衍射计(设备1)。以0.05℃/秒的速度升温。在下列条件下纪录扫描：角2θ中以1.5至50.0度扫描，2θ中每度以10至20秒计算时间。当达到需要温度时在等温模式中获得数据。
在T.A.设备TGAQ500分析仪上进行热失重分析(TGA)测定。以10和100mg鉴定重量进行质量校准。用Alumel和nickel标准(分别为154℃和354℃的居里点)进行温度校准。样品置于60毫升/分钟的持续氮气流，温度以5℃/分钟的速度从室温上升至350℃。测试样品的重量在2至13毫克间。样品在开放铝样品盘中沉淀，其本身放置与铂金盘中。对特定样品进行TGA扫描的温度精度在±3℃内。
用T.A设备Q1000热量分析仪进行示扫描量热法(DSC)分析。以平均速度50毫升/分钟的净化氮气流进行分析。机械压缩机冷却该系统，并平衡在室温下使用的设备。热量计用铟和石墨(熔解温度分别为156.6℃和327.5℃)材料进行温度校准。以5℃/分钟加热，用鉴定的铟(熔解焓为28.45J/g)口径测量器进行能量校准。对特定样品进行DSC扫描的温度精度在±3℃内。
样品递交给下列的试验温度程序：样品平衡后为10℃，样品以1至50℃/分钟的速度从10℃加热至210℃(或250℃或260℃)。
全部热流在回动和非-回动热流中的去卷积使得转移容易被测定，从而使用调控温度温度调制式差示扫描量热法(MTDSC)。样品递交给同样的试验温度程序：样品平衡后为-5℃，通过调控程序，样品以1℃/分钟的速度从-5℃加热至210℃。基于经典的建议，选择分析所有样品的一套MTDSC数据为0.5℃振幅和80秒持续。
用波纹铝样品盘或在一些情况下用开放盘进行试验。测试样品的重量在2至13毫克间。
用Setaram公司的SETSYS热分析系统同时进行TGA和DSC测定。液氮冷却系统使得可以在低于20℃下工作。样品加热中的发射气体，通过转运毛细管运至Pfeiffer质谱分析仪，毛细管加热至150℃。质谱分析仪分析在1至200uma间的分子片断《m/e》比值。质量在1至27毫克间的样品置于开放凹面铝样品盘(75μl装量)，暴露于氮气流中。样品以1或5℃/分钟的速度加热。
水吸附测定以DVS-1自动重力蒸发吸附分析仪(表面测定系统有限公司，伦敦，英国)进行。使用质量分辨率为±0.1μg的Cahn D2000纪录超微量天平，DVS-1测定蒸发重量的吸收和丢失。通过使用质量流量控制器混合饱和湿度和干燥气流来控制样品周围的相对湿度。全部系统放入温度-控制容器中使温度维持在±0.1℃内。使用大小在15和20mg之间的样品。通常，试验样品以％(重量/重量)表示的的鉴定误差为±0.1％(重量/重量)。
两种方案用于执行DVS。一种方案，样品相对湿度(RH)干燥至0％以去除任何表面水分并建立干燥，基准重量。然后，样品暴露于下列相对湿度变化：0％，10％，20％，30％，40％，50％，60％，70％，80％，90％，80％，70％，60％，50％，40％，30％，20％，10％，0％。一些情况下，重复该变化，随RH上升和下降获得四组数据。另一方案，样品首先在40％RH平衡，然后暴露于下列相对湿度变化：40％，50％，60％，70％，80％，90％，100％，90％，80％，70％，60％，50％，40％，30％，20％，10％，0％，10％，20％，30％，40％。每一阶段，在相对湿度开始上升或下降前使样品质量达到平衡；30或60分钟时期内当质量改变时间速度不超过0.02％/分钟时达到平衡。如果平衡状态未达到，相对湿度的变化在360或600分钟后自动发生。从完全的潮湿吸附和解吸附变化中，使用DVS高级分析组v3.6计算等温线。所有试验在25℃进行。
本发明的一些实施方案特别地通过使用以下实施例进行描述，其并不意指限制本发明的范围。
实施例
实施例1：制备(S)-4-(4-氯-苯基)-1-(3-〔7-(1-羟基-1-甲基-乙基)-11H-10-氧杂-1-氮杂-苯并〔a，d〕环庚酮-5-亚基〕-丙基-3，3-二甲基-六氢吡啶-4-醇柠檬酸盐的不同多形体
在不同条件下对(S)-4-(4-氯-苯基)-1-(3-〔7-(1-羟基-1-甲基-乙基)-11H-10-氧杂-1-氮杂-苯并〔a，d〕环庚酮-5-亚基〕-丙基-3，3-二甲基-六氢吡啶-4-醇柠檬酸盐结晶制备八种不同晶体形式的柠檬酸盐。在每种情况中，柠檬酸盐形式A暴露于表9所列的特殊条件下的溶液或溶液系统以制备柠檬酸盐的特定形式或多形体。
表9：不同柠檬酸盐样品的结晶条件
实施例2：制备(S)-4-(4-氯-苯基)-1-(3-〔7-(1-羟基-1-甲基-乙基)-11H-10-氧杂-1-氮杂-苯并〔a，d〕环庚酮-5-亚基〕-丙基-3，3-二甲基-六氢吡啶-4-醇的形式A柠檬酸盐
(S)-4-(4-氯-苯基)-1-(3-〔7-(1-羟基-1-甲基-乙基)-11H-10-氧杂-1-氮杂-苯并〔a，d〕环庚酮-5-亚基〕-丙基-3，3-二甲基-六氢吡啶-4-醇的酒石酸盐(7.5千克)和乙腈(90升)置于250升玻璃-内衬反应器并充氮气。通过4-(4-氯-苯基)-3，3-二甲基哌啶-4-醇与过量的(R，S)-酒石酸混合沉淀(S)酒石酸盐而获得(S)-异构体。混合物以叶片搅动并冷却至0℃至5℃。
加入(23升)水至瓶中，随后加入碳酸钾(9.56)。溶液加热至20±5℃；温度维持至少3天。用HPLC追踪反应过程。
加入(45升)水至反应器中。在选定压力并保持温度低于40℃时，使用真空蒸馏浓缩全部内容物。当全部内容物体积约为60升时，停止蒸馏。内容物置于大气压和20℃至30℃之间。
随后，加入62升二氯甲烷至反应器中；反应器搅动15分钟。全部体积静置15分钟。水相随后被去除，有机相留在反应器中。有机相用水(45升每次)洗两次；每次洗都包括15分钟搅动，静置15分钟，并去除上层水相。
溶于二氯甲烷(4升)中的二-叔-丁基碳酸氢钠(0.12千克)被加入至反应器中。Doseur用4升二氯甲烷冲洗。溶液维持在20℃10-20分钟。分析溶液中4-(4-氯-苯基)-3，3-二甲基哌啶-4-醇酒石酸盐的存在。如果酒石酸盐仍存在，加入二-叔-丁基碳酸氢钠至与剩余酒石酸盐的摩尔比例为2：1。在这种特殊情况下，需要更多的二氯甲烷(4升)中的二-叔-丁基碳酸氢钠(0.12千克)。
反应器中的内容物再次通过真空蒸馏浓缩，维持在40℃或更低温度，直到剩余体积约为40升。剩余内容物置于20℃至30℃，和一个大气压下。
随后，加入丙酮(31升)至反应器中。反应器中的内容物通过真空蒸馏浓缩剩余体积约为40升，温度维持在40℃或更低。剩余内容物置于20℃至30℃，和一个大气压下。多再重复三次丙酮溶剂替换。
随后，反应器中加入丙酮(58升)和脱色碳丙酮浆体(L3S，0.38千克碳；2升丙酮)。混合物在20±5℃放置一小时。溶液由0.22μm solvex-型滤器过滤，滤液加入至160升反应器。
柠檬酸(3.68千克)和丙酮(24升)加入至250升反应器。混合物在20±5℃搅动直至形成溶液。内容物加热至35℃，并转移至160升反应器。转移过程中160升反应器的温度维持在35±5℃。转移过程中产物开始结晶。35±5℃的温度将维持10至20分钟直至转移完成。
晶体和溶液分散剂被过滤(过滤干燥器；滤饼：d＝55cm，h＝13cm；过滤时间4小时)。滤饼用丙酮洗两次(每次用34升丙酮；洗涤时间为总共10小时)。产物在过滤干燥器中干燥(40±5℃/-0.99bar，非-搅拌，ca.100小时)制备10.42千克产物(75％产量)，其经化验为99％(重量/重量)的(S)-4-(4-氯-苯基)-1-(3-〔7-(1-羟基-1-甲基-乙基)-11H-10-氧杂-1-氮杂-苯并〔a，d〕环庚酮-5-亚基〕-丙基-3，3-二甲基-六氢吡啶-4-醇柠檬酸盐。
实施例3：制备(S)-4-(4-氯-苯基)-1-(3-〔7-(1-羟基-1-甲基-乙基)-11H-10-氧杂-1-氮杂-苯并〔a，d〕环庚酮-5-亚基〕-丙基-3，3-二甲基-六氢吡啶-4-醇的形式B柠檬酸盐
(S)-4-(4-氯-苯基)-3，3-二甲基哌啶-4-醇的酒石酸盐(20千克)与2-〔5-(3-Bromo-亚丙基)-5，11-二氢-10-0-氧杂-1-氮杂-苯并〔a，d〕环庚酮-7-基〕-丙烷-2-醇(20千克)及乙腈(240升)置于250升玻璃-内衬反应器并充氮气。混合物以叶片搅动并冷却至0℃至5℃。
加入(60升)水至瓶中，随后加入碳酸钾25.5千克。溶液加热至20±5℃；温度维持至少4天。用HPLC追踪反应过程。
加入(120升)水至反应器中。在选定压力并保持温度低于40℃时，使用真空蒸馏浓缩全部内容物。当全部内容物体积约为90升时，停止蒸馏。内容物置于大气压和20℃至30℃之间。
随后，加入(165升)二氯甲烷至反应器中；反应器搅动15分钟。全部体积静置15分钟。水相被去除，有机相留在反应器中。有机相用水(120升每次)洗两次；每次洗都包括15分钟搅动，静置15分钟，并去除上层水相。
分析有机相中(S)-4-(4-氯-苯基)-3，3-二甲基哌啶-4-醇的酒石酸盐的存在。溶于二氯甲烷中的二-叔-丁基碳酸氢钠被加入至反应器中，合适的量为每摩尔剩余酒石酸盐2摩尔碳酸氢钠。在这种特别情况下，使用约5升二氯甲烷和0.3千克碳酸氢钠。Doseur用5升二氯甲烷冲洗。溶液维持在20℃ 10-20分钟。再次分析溶液中酒石酸盐的存在。如果酒石酸盐仍存在，加入二氯甲烷中的二-叔-丁基碳酸氢钠至碳酸氢钠与酒石酸盐的摩尔比例为2∶1。
反应器中的内容物再次通过真空蒸馏浓缩，维持在40℃或更低温度，直到剩余体积约为90升。剩余内容物置于20℃至30℃，和一个大气压下。
随后，加入乙醇(71升)至反应器中。反应器中的内容物通过真空蒸馏浓缩剩余体积约为90升，温度维持在40℃或更低。剩余内容物置于20℃至30℃，和一个大气压下。多再重复二次乙醇溶剂替换。
随后，反应器中加入乙醇(71升)和脱色碳乙醇浆体(L3S，1.15千克碳；乙醇，qsp)。混合物在20±5℃放置一小时。溶液由0.22μm solvex-型滤器过滤，滤液加入至400升反应器。
柠檬酸(9.85千克)和乙醇(37升)加入至100升镍基合金反应器。混合物在20±5℃搅动直至形成溶液，柠檬酸溶液随后转移至鼓室中。柠檬酸溶液(13千克)加入至400升含有滤器的反应器中，反应器温度维持在20±2℃。来源于溶液的一部分的柠檬酸盐形式B晶体浆体作为种子加入至400升反应器中。晶体用Thurrax-型混合器在400升反应器液体中混合30秒。种子结晶混合物维持30分钟。
剩余的柠檬酸溶液在2.5至3小时内转移至400升反应器，温度维持在20±2℃。转移过程中产物开始结晶。任何额外的柠檬酸溶液以5升乙醇冲洗入反应器中。
反应器在30分钟内冷却至0±2℃；此温度随后维持至少1小时。悬液随后过滤(Nutsch滤器，过滤时间1小时)制备滤饼。滤饼用乙醇冲洗两次(每次55升；冲洗时间～总共36小时)。滤饼在碟形干燥器中(40±5℃-0.99bar，非-搅拌，ca.48小时)干燥以制备27.3千克产物(73％产量)，经分析为97％(重量/重量)的(S)-4-(4-氯-苯基)-1-(3-〔7-(1-羟基-1-甲基-乙基)-11H-10-氧杂-1-氮杂-苯并〔a，d〕环庚酮-5-亚基〕-丙基-3，3-二甲基-六氢吡啶-4-醇的柠檬酸盐。
虽然本发明经优选实施方案引述已经进行了特定显示和描述，本领域的技术人员将意识到各种形式和细节的改变将不脱离附加权利要求包括的本发明的范围。
机译： 趋化因子受体拮抗剂的固体形式及其使用方法
机译： 趋化因子受体拮抗剂的固体形式及其使用方法
机译： 趋化因子受体拮抗剂的固体形式及其使用方法
