治疗青光眼和其他RHO激酶-介导疾病的氨基吡嗪类似物

摘要

公开了使用氨基吡嗪类似物治疗rho激酶-介导疾病或rho激酶-介导病症的方法，包括控制眼内压和治疗青光眼。也公开了可用于治疗眼疾病、例如青光眼和另外可用于控制眼内压的眼科药物组合物，该组合物包含有效量的氨基吡嗪类似物。

说明书

相关申请的交叉参照

本申请根据35U.S.C.§119要求2004年12月27日提交的美国临时专利申请No.60/639,389的优先权，其完整内容引用在此作为参考。

发明的技术领域

本发明涉及氨基吡嗪类似于治疗rho激酶-介导疾病和病症的用途。本发明确切地涉及降低和/或控制正常或升高的眼内压(IOP)和治疗青光眼。

发明背景

被称为青光眼的疾病状态以视觉功能的永久丧失为特征，其原因是对视神经的不可逆损伤。若干形态上或功能上不同的青光眼类型通常以升高的IOP为特征，这被认为在原因上涉及该疾病的病理过程。眼高压是这样一种病症，其中眼内压升高，但是没有发生明显的视觉功能丧失；这类患者被认为面临很高的最终形成与青光眼有关的视觉丧失的危险。有些青光眼性视野丧失的患者具有相对低的眼内压。这些常压或低压青光眼患者也能够受益于降低和控制IOP的药物。如果青光眼或眼高压被早期检测和用有效降低升高的眼内压的药物疗法积极治疗，那么一般能够改善视觉功能的丧失或其进行性恶化。

已被证实有效降低眼内压的药物疗法包括减少水状液产生的药物和增加外流容易性的药物。这类疗法一般借助两种可能的途径之一给药，局部(直接施用于眼)或者口服。不过，眼药用抗高血压手段已经表现各种不可取的副作用。例如，诸如毛果芸香碱等缩瞳剂能够导致视力模糊、头痛和其他消极的视觉副作用。全身给药的碳酸酐酶抑制剂也能够导致恶心、消化不良、疲劳和代谢性酸中毒。某些前列腺素导致充血、眼瘙痒和睫毛与眼眶周围皮肤暗淡。进而，某些β-阻滞剂逐渐变得与严重的肺副作用有关，这可归因于它们对肺组织中β-2受体的效应。拟交感剂导致心动过速、心律失常和高血压。这类消极的副作用可以引起患者顺应性的降低或者疗法的终止，以致正常的视觉继续恶化。另外，也存在这样的个体，他们仅对某些现有的青光眼疗法处置没有良好的响应。因此，需要其他控制IOP的治疗剂。

小型GTP酶Rho参与很多细胞功能，包括细胞粘连、细胞运动、细胞移行和细胞收缩。这类细胞功能的主要效应器之一是rho-缔合性卷曲螺旋-形成性蛋白激酶(rho激酶)，它似乎在平滑肌收缩力量与速度的调节、肿瘤细胞转移和轴突向外生长的抑制中扮演重要角色。Rho激酶是一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，存在两种同工型：ROCK1(ROKβ)和ROCK2(ROKα)[N.Wettschureck，S.Offersmanns，Journalof MolecularMedicine 80：629-638，2002；M.Uehata et al.，Nature389：990-994，1997；T.Ishizaki et al.，Molecular Pharmacology57：976-983，2000，C.Loge et al.，Journal of Enzyme Inhibitionand Medicinal Chemistry17：381-390，2002]。

现已发现，某些rho激酶抑制剂有效降低和控制正常和升高的IOP[M.Honjo，et al.，Investigative Ophthalmology and VisualScience 42：137-144，2001；M.Honjo et al.，Archives ofOphthalmology 119：1171-1178，2001；P.V.Rao et.al.，Investigative Ophthalmology and Visual Science 42：10291690，2001；M.Waki，Current Eye Research 22：47-474，2001；B.Tianet al.，Archives of Ophthalmology 122：1171-1177，2004]。诸如H-7和Y-27632等Rho激酶抑制剂抑制睫状肌收缩和小梁细胞收缩，效应可能涉及这类化合物的眼降压效应[H.Thieme et al.，Investigative Ophthalmology and Visual Science 41：4240-4246，2001；C.Fukiage et al.，Biochemical and Biophysical ResearchCommunications 288：296-300，2001]。

充当rho激酶抑制剂的化合物是熟知的，已经显示有多种应用。Takami et al.，Biorganic and Medicinal Chemistry12：2115-2137，2004描述了具有rho激酶活性的吡啶、吲唑和异喹啉化合物。美国专利No.6,218,410和6,451,825公开了rho激酶抑制剂治疗高血压、视网膜病、脑血管收缩、哮喘、炎症、心绞痛、外周循环疾患、早产、骨质疏松、癌症、炎症、免疫疾病、自体免疫疾病等的用途。美国专利No.6,794,398公开了具有rho激酶活性的化合物预防或治疗肝疾病的用途。美国专利No.6,720,341公开了具有rho激酶活性的化合物治疗肾疾病的用途。WO 99/23113公开了rho激酶抑制剂阻滞轴突向外生长抑制的用途。WO 03/062227公开了作为rho激酶抑制剂的2，4-二氨基嘧啶衍生物。WO 03/059913公开了作为rho激酶抑制剂的二环4-氨基嘧啶类似物。WO 02/100833公开了作为rho激酶抑制剂的杂环化合物。WO 01/68607公开了作为rho激酶抑制剂的酰胺衍生物。WO04/024717公开了作为rho激酶抑制剂的氨基异喹啉衍生物。WO04/009555公开了作为rho激酶抑制剂的5-取代的异喹啉衍生物，可用于治疗青光眼、支气管哮喘和慢性阻塞性肺疾病。EP 1034793公开了rho激酶抑制剂治疗青光眼的用途。

美国专利No.6,503,924、6,649,625和6,673,812公开了酰胺衍生物治疗青光眼的用途，它们是rho激酶抑制剂。美国专利No.5,798,380和6,110,912公开了使用丝氨酸/苏氨酸激酶抑制剂治疗青光眼的方法。美国专利No.6,586,425公开了使用丝氨酸/苏氨酸激酶抑制剂治疗青光眼的方法。美国专利申请公报No.20020045585公开了使用丝氨酸/苏氨酸激酶抑制剂治疗青光眼的方法。

下列参考文献公开了异喹啉磺酰胺类似物作为rho激酶抑制剂的活性：Y.Sasaki，Cellular Biology Molecular Letters 6：506，2001；S.Satoh et al.，Life Sciences 69：1441-1453，2001；Y.Sasaki，Pharmacology and Therapeutics93：225-232，2002；C.Loge et al.，Journal of Enzyme Inhibition and Medicinal Chemistry18：127-138。美国专利No.6,271,224和6,403,590公开了某些异喹啉磺酰基化合物治疗青光眼的用途。而且，WO 04/000318公开了氨基-取代的单环作为AKT-1激酶调控剂的用途。

若干出版物已经描述过吡嗪的合成。WO 04/084824描述了联芳取代的6-元杂环的制备，它们用作钠通道阻滞剂。WO 04/085409描述了包括吡嗪在内的化合物库的制备，它们能够与蛋白激酶的活性位点结合。其他吡嗪合成的出版物包括：Sato et al.，Journal of ChemicalResearch7：250-1，1997；Satoetal.，Synthesis9：931-4，1994；Sato，Journal of the Chemical Society 7：885-8，1994；Sato，Journal of Organic Chemistry43(2)：341-3，1978；Adachi，J etal.，Journal of Organic Chemistry 37(2)：221-5，1972。

发明概述

本发明涉及氨基吡嗪类似物的用途，例如2-氨基吡嗪和5-取代的2，3-二氨基吡嗪和本文所述衍生物，用于治疗rho激酶-介导的疾病和病症。下述式(I)化合物能够用于降低和/或控制温血动物、包括人的与常压青光眼、眼高压和青光眼有关的IOP。在某些实施方式中，在用于治疗常压青光眼或眼高压时，这些化合物可以被配制在药学上可接受的组合物中，适合于局部递送至眼。

在其他实施方式中，所述式(I)rho激酶抑制剂能够用于治疗青光眼，降低眼内压，和/或控制眼内压。

本发明的一种实施方式涵盖可用于治疗青光眼和控制眼内压的眼科药物组合物，包含有效量的根据下述式(I)的化合物。

本发明的另一种实施方式包含控制眼内压的方法，包括向人或其他哺乳动物的病眼施用治疗有效量的可用于青光眼和控制眼内压的眼科药物组合物，其中该组合物包含有效量的根据下述式(I)的化合物。

本发明的其他实施方式包含治疗rho激酶-介导疾病或rho激酶-介导病症的方法，包括对人或其他哺乳动物给予治疗有效量的根据下述式(I)的一种或几种化合物。

本文所用的术语“rho激酶-介导的疾病”或“rho激酶-介导的病症”表示任何已知rho激酶在其中扮演角色的疾病或其他有害病症。这类病症非限制性地包括高血压、青光眼、视网膜病、脑血管收缩、眼高压、常压青光眼、慢性阻塞性肺疾病、哮喘、炎症、心绞痛、外周循环疾患、早产、骨质疏松、癌症、炎症、免疫疾病、自体免疫疾病。

上述简要概括广泛描述了本发明某些实施方式的特性和技术优点。在下列详细的发明说明中将描述其他特性和技术优点。在结合附图或表格考虑详细的发明说明时，将更好地理解被相信是发明特征的新特性。不过，本文所提供的图表旨在帮助阐述发明或者有助于形成对发明的理解，不打算限定发明的范围。

详细的发明说明

在本发明实施方式中公开和采用的化合物具有下式：

式(I)

其中Y选自下列基团：

或

其中：

X＝OR¹、NR²R³；

z＝H、OR⁶、卤素、CF₃或C₁-C₄烷基；

R是OH、OR⁴或S(O)_nR⁶；

n是0、1或2；

R¹、R²、R³独立地＝H，可选地被NR⁴R⁵、OH、OR⁶、芳基、杂环基或杂芳基取代的C₁-C₆烷基，可选地被NR⁴R⁵、OH、OR⁶、芳基、杂环基或杂芳基取代的C₃-C₈环烷基，和杂环基；

R²和R³一起可以构成杂环的环；

R⁴、R⁵独立地＝H，可选地被OH、OR⁶、芳基、杂环基或杂芳基取代的C₁-C₆烷基；

R⁶＝C₁-C₆烷基、芳基或CF₃；

B＝NR⁷R⁸；

R⁷、R⁸独立地＝H，可选地被NR⁴R⁵、OH、OR⁶或杂环基取代的C₁-C₆烷基，可选地被NR⁴R⁵、OH、OR⁶或杂环基取代的C₃-C₈环烷基，和杂环基；和

R⁷和R⁸一起可以构成杂环的环。

在优选的实施方式中采用的化合物是根据式(I)的那些结构，其中Y选自下列基团：

其中：

z＝H、C₁烷基；

X＝OR¹、NR²R³；

R¹＝可选地被NR⁴R⁵、OH、OR⁶或杂环基取代的C₁-C₆烷基，可选地被NR⁴R⁵、OH、OR⁶或杂环基取代的C₃-C₈环烷基，或者4-8元杂环的环；

R²＝H，C₂-C₄烷基，可选地被NR⁴R⁵、OH、OR⁶取代；

R³＝C₂-C₄烷基，可选地被NR⁴R⁵、OH、OR⁶取代，C₃-C₈环烷基，可选地被NR⁴R⁵、OH、OR⁶取代，或者4-8元杂环的环；

R²和R³一起可以构成4-8元杂环的环；

R⁴、R⁵独立地＝H，C₁-C₄烷基，可选地被OH、OR⁶取代；

R⁶＝C₁-C₄烷基；

B＝NR⁷R⁸；

R⁷、R⁸独立地＝H，C₁-C₄烷基，可选地被NR⁴R⁵、OH、OR⁶或杂环基取代，可选地被NR⁴R⁵、OH、OR⁶或杂环基取代的C₃-C₈环烷基，或者杂环基；

R⁷和R⁸一起可以构成4-7元杂环的环。

公认式(I)化合物可以含有一个或多个手性中心。本发明涵盖其全部的对映体、非对映体和混合物。此外，本发明的某些实施方式包含根据式(I)的化合物的药学上可接受的盐。

本文所用的术语“芳基”表示单环、二环或三环的环系，具有总计五至十四个环成员，其中该系统中至少一个环是芳族的，并且其中该系统中每个环含有3至7个环成员。术语“芳基”可以与术语“芳基环”互换使用。

本文所用的术语“杂环”、“杂环基”或“杂环的”表示非芳族单环、二环或三环的环系，具有三至十四个环成员，其中一个或多个环成员是杂原子，并且其中该系统中每个环含有3至7个环成员。

术语“杂芳基”表示单环、二环或三环的环系，具有三至十四个环成员，其中该系统中至少一个环是芳族的，该系统中至少一个环含有一个或多个杂原子，并且其中该系统中每个环含有3至7个环成员。

在上述定义中，取代基中碳原子的总数用C_i-j前缀表示，其中数字i和j定义碳原子的数量；这种定义包括直链、支链和环烷基或(环烷基)烷基。

重要的是公认取代基在结合到所示结构单元中时可以出现单次或多次。例如，取代基卤素表示氟、氯、溴或碘，将表明它所连接的单元可以被一个或多个卤原子取代，它们可以是相同或不同的。

合成：

根据式(I)的化合物可以利用下述一般和具体实施例加以合成。

实验介绍：

除非另有注释，从供应商收到的试剂和溶剂直接使用。“柱”纯化是在自动化Combiflash单元上进行的，其由梯度混合系统、Foxy200级分收集器和UV/可见光检测器组成。质子和碳核磁共振光谱是在Bruker AC 300或Bruker AV 300光谱仪上进行的，质子为300MHz，碳为75MHz，或者是在Bruker AMX 500光谱仪上进行的，质子为500MHz，碳为125MHz。光谱是以ppm(δ)给出的，偶合常数J是以赫兹报告的。使用四甲基硅烷作为质子光谱的内标，使用溶剂峰作为碳光谱的参照峰。质谱是在Finnigan LCQ Duo LCMS离子捕集电喷雾电离(ESI)质谱仪上获得的。薄层色谱(TLC)是利用Analtech硅胶平板进行的，用紫外(UV)光可视化，另有规定除外。HPLC分析是利用Luna C18(2)柱(250×4.6mm，Phenonemex)获得的，在254nm下UV检测，采用标准溶剂梯度程序(表1)。液相色谱-质谱是在Varian1200L单一四极质谱仪上获得的，利用ESI和Luna C18(2)柱(50×4.6mm，Phenonemex)，在254nm下UV检测，采用标准溶剂梯度程序(表2)。

A＝100％水与0.025％或0.05％v/v三氟乙酸

B＝100％乙腈，0.025％或0.05％v/v三氟乙酸

一般合成方案：

向搅拌着的胺1(1.0mmol)的无水DMF(3mL)溶液中加入氢化钠(60％矿物油分散体，2.2mmol)和烷基碘(4.0mmol)。将所得混合物在室温氮气下搅拌25分钟。然后将反应混合物用水(6mL)淬灭，用乙醚萃取(2×12mL)，合并有机相，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，浓缩。Biorg.Med.Chem.2001，9，1149-1154。

一般工艺2：从氯吡嗪3制备氨基吡嗪4

在密封的试管中，将氯吡嗪3(5.0mmol)与HNR₁R₂(10.0mmol)的混合物在100℃下加热15h。将反应混合物冷却至室温，用二氯甲烷(50mL)稀释，用饱和碳酸氢钠溶液(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥，浓缩，得到产物4，可以经过柱色谱纯化，但是通常无需纯化即可用于下一步。

一般工艺3：从氨基吡嗪4制备3，5-二溴吡嗪-2-胺2

在10℃下，向搅拌着的氨基吡嗪4(5.0mmol)的二甲亚砜(10mL)/水(0.20mL)溶液逐份加入N-溴代琥珀酰亚胺(10mmol)。然后使反应混合物缓慢升温至室温，在该温度下搅拌过夜。然后在室温下加入另外一份N-溴代琥珀酰亚胺(10mmol)。搅拌6.5h后，将反应混合物倒在冰(30g)上。收集沉淀物，用冷水洗涤(2×10mL)，干燥，得到产物2，可以经过柱色谱纯化，但是通常无需纯化即可用于下一步。

一般工艺4：2-氨基-3，5-二溴吡嗪的胺化

方法1

将胺(1mL)加入到2-氨基-3，5-二溴吡嗪2(0.791mmol)中，在密封的试管中将混合物加热至120℃。使反应进行18h。将溶液冷却，在二氯甲烷与水(1∶1，200mL)之间分配，除去有机相。水相用二氯甲烷(50mL)萃取，合并有机层，经Na₂SO₄干燥，浓缩，得到产物5。

方法2

将胺(1.58mmoll)加入到2-氨基-3，5-二溴吡嗪2(0.791mmol)的DMSO或乙醇(0.5mL)溶液中，在密封的试管中将混合物加热至120℃。如果胺的供应短缺，使用一当量胺和一当量iPr₂NEt。使反应进行18h。将溶液冷却，在二氯甲烷与水(1∶1，200mL)之间分配，除去有机相。水相用二氯甲烷(50mL)萃取，合并有机层，经Na₂SO₄干燥，浓缩，得到产物5。

一般工艺5：从3，5-二溴吡嗪-2-胺2制备5-溴-3-烷氧基吡嗪-2-胺6

在室温下，向搅拌着的醇ROH(1.80mmol)的四氢呋喃(3mL)溶液中加入氢化钠(60％矿物油分散体；1.80mmol)。将混合物在环境温度下搅拌30min。然后加入3，5-二溴吡嗪-2-胺2(0.59mmol)，将反应混合物在回流下加热过夜，冷却至室温，用水(3mL)淬灭，用乙酸乙酯萃取(3×5mL)。合并萃取液，用盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥，浓缩，得到产物6，可以经过柱色谱纯化，但是通常无需纯化即可用于下一步。

一般工艺6：2，3-二氨基-5-溴吡嗪/2-氨基-3-烷氧基-5-溴吡嗪5和6与代硼酸(boronic acid)的Suzuki偶联

方法1

向搅拌着的芳基溴5/6(0.699mmol)的无水DMSO(2mL)溶液中加入代硼酸(2.10mmol，3eq.)、K₂CO₃(3.50mmol，5eq.)和Pd(dppf)Cl₂(0.07mmol，0.1eq.)。将所得混合物在高真空下脱气10min，然后用氮气冲洗。这种过程再重复两次。然后将反应混合物加热至100℃，保持2h或者直至全部起始溴化物已被消耗。将混合物冷却，用水(100mL)淬灭，用乙酸乙酯萃取(2×100mL)。合并有机相，用饱和NaCl洗涤(2×100mL)，经Na₂SO₄干燥，浓缩，得到偶联产物7/8。

方法2

将芳基溴5/6(0.699mmol)、代硼酸(2.10mmol，3eq.)和K₂CO₃(3.50mmol，5eq.)在DMF(7mL)和水(3mL)中搅拌，所得混合物用氮气流脱气，随之温度增加至100℃。在这种温度下脱气10min后，加入Pd(dppf)Cl₂(0.07mmol，0.1equiv.)，将反应在100℃氮气氛下搅拌18h。一旦冷却，将混合物倒入水(100mL)中，搅拌10min。将混合物用乙酸乙酯萃取，合并有机萃取液，用5％氯化锂洗涤(5×)，经硫酸钠干燥，浓缩，得到偶联产物7/8。

一般工艺7：从芳基溴5/6制备芳基锡烷9/10

将芳基溴5/6(2.0mmol)和六甲基二锡(3.0mmol)在无水甲苯(10mL)中搅拌，用氮气流脱气，随之温度增加至100℃。加入四(三苯膦)钯(0.2mmol)，使反应维持在100℃氮气氛下达2-16h。一旦冷却，将混合物浓缩，纯化，无需处理，得到所需锡烷。

一般工艺8：锡烷9/10与芳基溴的Stille偶联，得到联芳11/12

将锡烷9/10(2.0mmol)和芳基溴(3.0mmol，1.5equiv.)在无水甲苯(10mL)中搅拌，用氮气流脱气，随之温度增加至100℃。加入四(三苯膦)钯(0.2mmol)，使反应维持在100℃氮气氛下达16h。一旦冷却，将混合物浓缩，纯化，无需处理，得到偶联产物。

具体实施例：

实施例1

3-(4-甲基-1，4-二氮杂环庚烷-1-基)-5-(吡啶-4-基)吡嗪-2-胺

步骤A：5-溴-3-(4-甲基-1，4-二氮杂环庚烷-1-基)吡嗪-2-胺

从商业上可获得的2-氨基-3，5-二溴吡嗪和1-甲基高哌嗪开始，按照一般工艺4(方法1)制备，得到二氨基吡嗪(204mg，90％)，为深色的油；¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ7.65(s，1H)，4.49(brs，2H)，3.51-3.48(m，4H)，2.74-2.73(m，2H)，2.71-2.67(m，2H)，2.41(s，3H)，2.00-1.93(m，2H)；ES-MS：(M+H)＝286，288m/z。

步骤B：从步骤A产物和4-吡啶基代硼酸开始，按照一般工艺6(方法1)制备。经过柱色谱纯化(12g ISCO柱，洗脱用二氯甲烷和10∶1甲醇/氢氧化铵混合物；梯度100％二氯甲烷至95％然后90％最后85％二氯甲烷)，得到标题化合物(123mg，62％)，为浅绿色固体；¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ8.63-8.62(d，J＝5.4Hz，2H)，8.17(s，1H)，7.80-7.79(d，J＝5.3Hz，2H)，4.83(brs，2H)，3.61-3.57(m，4H)，2.80-2.78(m，2H)，2.74-2.72(m，2H)，2.44(s，3H)，2.03-2.01(m，2H)；¹³C NMR(125MHz，CDCl₃)δ150.2，147.8，146.9，144.8，136.8，131.6，119.5，58.8，57.5，50.2，49.4，47.2，28.4；HPLC t_R＝3.57min(洗脱剂90∶10至10∶90水/乙腈历经20min然后保持10min)，100％；ES-MS：(M+H)＝285m/z。

实施例2

3-(4-甲基-1，4-二氮杂环庚烷-1-基)-5-(3-甲基吡啶-4-基)吡嗪-2-胺盐酸盐

从实施例1步骤A产物和3-甲基-4-吡啶基代硼酸开始，在相似条件下制备。经过柱色谱纯化(12g ISCO柱，洗脱用二氯甲烷和甲醇/氨混合物(10∶1)；梯度100％二氯甲烷至80％二氯甲烷历经30min，流速25mL/mi n)，继之以用2N HCl的二乙醚溶液转化为盐酸盐，得到标题化合物(41mg，34％)，为褐色固体；¹H NMR(500MHz，CD₃OD)δ8.51(s，1H)，8.47-8.46(d，J＝5.4Hz，1H)，8.07(s，1H)，7.76-7.75(d，J＝5.5Hz，1H)，3.78-3.76(t，J＝4.7Hz，2H)，3.55(brs，6H)，2.97(s，3H)，2.55(s，3H)，2.28-2.23(qui，J＝5.9Hz，2H)；¹³C NMR(125MHz，CD₃OD)δ150.2，149.7，149.2，146.8，145.0，137.9，137.8，134.1，125.2，58.1，57.0，50.6，47.1，45.1，26.1，18.6；HPLC t_R＝7.2min，＞99％；ES-MS：(M+H)＝299m/z。

实施例3

3-(4-甲基-1，4-二氮杂环庚烷-1-基)-5-(1H-吡唑-3-基)吡嗪-2-胺

步骤A：4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑

将4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(348mg，1.8mmol)溶于DMF(5mL)，加入氢化钠(60％分散体，86mg，2.15mmol)。将混合物加热至60℃达5min。一旦冷却和搅拌另外15min，历经5min滴加三甲基甲硅烷基乙氧基甲基氯(35 8mg，2.15mmol，381μL)，将混合物搅拌16h。将反应混合物用乙酸乙酯(25mL)稀释，用5％氯化锂洗涤(5×)，经硫酸钠干燥，浓缩。残余物经过柱色谱纯化(40g ISCO柱，洗脱用己烷和乙酸乙酯；梯度100％己烷至50％己烷历经30min，流速30mL/min)，得到SEM-保护的吡唑(360mg，61％)，为无色的油；¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ7.84(s，1H)，7.80(s，1H)，5.42(s，2H)，3.56-3.53(t，J＝8.3Hz，2H)，1.31(s，12H)，0.91-0.87(t，J＝8.3Hz，2H)，-0.03(s，9H)。

步骤B：3-(4-甲基-1，4-二氮杂环庚烷-1-基)-5-(1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-3-基)吡嗪-2-胺

使步骤A产物与实施例1步骤A产物反应，按照一般工艺6(方法2)制备，产物经过柱色谱纯化(12g ISCO柱，洗脱用二氯甲烷和甲醇/氨混合物(10∶1)；梯度100％二氯甲烷至80％二氯甲烷历经30min，流速25mL/min)制备，得到偶联产物(137mg，81％)，为褐色的油；¹HNMR(500MHz，CDCl₃)δ7.94(s，1H)，7.91(s，1H)，7.84(s，1H)，5.46(s，2H)，4.50-4.49(m，2H)，3.62-3.53(m，6H)，2.79-2.72(m，4H)，2.45(s，3H)，2.02-1.99(m，2H)，0.95-0.92(t，J＝8.2Hz，2H)，-0.03(s，9H)。

步骤C：将步骤B产物(137mg，0.34mmol)在TFA(5mL)与水(1mL)的混合物中加热至60℃达1h。一旦冷却，将反应混合物浓缩，在乙酸乙酯与饱和碳酸钠溶液之间分配，除去有机层，浓缩。经过柱色谱纯化(12g ISCO柱，洗脱用二氯甲烷和甲醇/氨混合物(10∶1)；梯度100％二氯甲烷至80％二氯甲烷历经30min，流速25mL/mi n)，得到标题化合物(37mg，27％)，为绿色固体；¹H NMR(300MHz，CD₃OD)δ7.96(s，2H)，7.79(s，1H)，3.60-3.51(m，4H)，2.84-2.75(m，4H)，2.42(s，3H)，2.03-1.99(m，2H)；¹³C NMR(75MHz，CD₃OD)δ148.4，147.7，135.9，129.9，122.0，59.2，58.3，50.7，50.3，47.0，28.8(由于重叠丢失两个芳族信号)；HPLC t_R＝6.3min，＞99％；ES-MS：(M+H)＝274m/z。

实施例4

3-(4-甲基-1，4-二氮杂环庚烷-1-基)-5-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)吡嗪-2-胺

步骤A：3-(4-甲基-1，4-二氮杂环庚烷-1-基)-5-(三甲基锡烷基)吡嗪-2-胺

从实施例1步骤A产物和六甲基二锡开始，按照一般工艺7制备。经过柱色谱纯化(12g ISCO柱，洗脱用二氯甲烷和甲醇/氨混合物(10∶1)；梯度100％二氯甲烷至80％二氯甲烷历经30min，流速25mL/min)，得到芳基锡烷(500mg，77％)，为黄色固体；¹H NMR(500MHz，CD₃OD)δ7.46(s，1H)，3.54-3.51(m，2H)，3.47-3.44(t，J＝6.1Hz，2H)，2.87-2.82(m，4H)，2.64(s，3H)，2.02-1.97(qui，J＝5.8Hz，2H)，0.26(s，9H)。

步骤B：从步骤A产物和4-溴吖吲哚(C.Thibault et.al.Org.Lett.2003，5(26)，5023-5025)开始，按照一般工艺8制备。经过半制备型HPLC纯化(洗脱用乙腈(0.05％TFA)/水(0.05％TFA)；5％乙腈(0.05％TFA)至90％乙腈(0.05％TFA)历经40分钟)，得到标题化合物(35mg，26％)，为黄色固体；¹H NMR(500MHz，CD₃OD)δ8.25(s，1H)，8.19-8.18(d，J＝5.2Hz，1H)，7.54-7.53(d，J＝5.1Hz，1H)，7.43-7.42(d，J＝4.5Hz，1H)，7.02-7.01(d，J＝3.6Hz，1H)，3.67-3.65(t，J＝5.2Hz，2H)，3.62-3.60(t，J＝6.0Hz，2H)，2.89-2.87(t，J＝5.0Hz，2H)，2.82-2.80(t，J＝5.7Hz，2H)，2.45(s，3H)，2.06-2.04(m，2H)；¹³C NMR(125MHz，CD₃OD)δ149.2，148.3，147.2，142.0，138.4，137.7，133.1，125.8，117.6，112.5，101.2，57.8，57.4，49.8，49.3，45.9，27.6；HPLCt_R＝7.1min，98.5％；ES-MS：(M+H)＝324m/z。

实施例5

5-(1H-吲唑-4-基)-3-(4-甲基-1，4-二氮杂环庚烷-1-基)吡嗪-2-胺二盐酸盐

从步骤A(实施例4)产物和4-溴吲唑开始，按照一般工艺8制备。经过柱色谱纯化(12g ISCO柱，洗脱用二氯甲烷和甲醇/氨混合物(10∶1)；梯度100％二氯甲烷至75％二氯甲烷历经30min，流速25mL/min，继之以半制备型HPLC(洗脱用乙腈(0.05％TFA)/水(0.05％TFA)；5％乙腈(0.05％TFA)至90％乙腈(0.05％TFA)历经40分钟)，得到黄色的油，用2N HCl的二乙醚溶液处理，得到标题化合物(12mg，8％)，为黄色固体；¹H NMR(500MHz，CD₃OD)δ8.62(s，1H)，8.02(s，1H)，7.6 7-7.66(d，J＝7.5Hz，2H)，7.57-7.54(t，J＝7.9Hz，1H)，4.12-4.02(m，2H)，3.91-3.86(m，1H)，3.82-3.74(m，2H)，3.70-3.61(m，2H)，3.46-3.41(m，1H)，2.98(s，3H)，2.41-2.30(m，2H)；¹³C NMR(125MHz，CD₃OD)δ150.8，144.0，139.9，134.2，129.9，128.91，121.0，118.4，112.6，57.5，57.0，50.4，46.8，44.9，25.5(由于重叠丢失两个芳族信号)；HPLC t_R＝9.9min，＞100％；ES-MS：(M+H)＝324m/z。

实施例6

5-(1H-吲唑-6-基)-3-(4-甲基-1，4-二氮杂环庚烷-1-基)吡嗪-2-胺二盐酸盐

步骤A：6-溴-1H-吲唑：

将6-氨基吲唑(1.33g，10mmol)溶于4 8％氢溴酸(5mL)和水(16mL)。在0℃下向所得溶液滴加亚硝酸钠(0.77g，11mmol)的水(9mL)溶液。将混合物在0℃下搅拌15min。加入脲(0.40g)以除去过量亚硝酸。搅拌10min后，在室温下将这种溶液滴加到搅拌着的溴化铜(I)(4.3g，30mmol)、48％氢溴酸(10mL)与水(24mL)的混合物中。将反应混合物在75-80℃下加热1.5h，冷却至室温，用浓氢氧化铵碱化，用氯仿萃取(4×30mL)。合并萃取液，经硫酸钠干燥，浓缩，得到溴吲唑(0.96g，48％)，为绿黄色固体；¹H NMR(500MHz，DMSO-d₆)δ13.16(s，1H)，8.09(s，1H)，7.67(s，1H)，7.74-7.72(d，J＝8.5Hz，1H)，7.25-7.23(dd，J＝8.5，1.4Hz，1H)。

步骤B：6-溴-2-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-2H-吲唑和6-溴-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑：

在室温下，向搅拌着的步骤A产物(0.48g，2.4mmol)的N，N-二甲基甲酰胺(4mL)溶液中加入氢化钠(60％矿物油分散体，96mg，2.4mmol)。搅拌45min后，滴加2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基氯(0.51mL，2.9mmol)。继续搅拌18h。将反应用水(10mL)淬灭，用乙酸乙酯萃取(4×10mL)。合并萃取液，用5％氯化锂(15mL)洗涤，经硫酸钠干燥，浓缩。残余物经过柱色谱纯化(12g ISCO柱，洗脱用己烷和乙酸乙酯；梯度100％己烷至85％己烷)，得到6-溴-2-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-2H-吲唑(0.45g，56％)，为黄色的油和6-溴-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑(0.21g，27％)，为黄色的油。

6-溴-2-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-2H-吲唑：¹H NMR(500MHz，DMSO-d₆)δ8.16(d，J＝0.8Hz，1H)，8.06(s，1H)，7.77-7.75(d，J＝8.5Hz，1H)，7.34-7.31(dd，J＝8.5，1.6Hz，1H)，5.75(s，2H)，3.51-3.48(t，J＝8.0Hz，2H)，0.80-0.77(t，J＝8.0Hz，2H)，-0.11(s，9H)。

6-溴-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-2H-吲唑：¹H NMR(500MHz，DMSO-d₆)δ8.58(d，J＝0.8Hz，1H)，7.91(s，1H)，7.75-7.73(d，J＝8.8Hz，1H)，7.17-7.15(dd，J＝8.8，1.6Hz，1H)，5.71(s，2H)，3.61-3.58(t，J＝8.0Hz，2H)，0.86-0.83(t，J＝8.0Hz，2H)，-0.06(s，9H)。

步骤C：3-(4-甲基-1，4-二氮杂环庚烷-1-基)-5-(2-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-2H-吲唑-6-基)吡嗪-2-胺：

从步骤A(实施例4)和步骤B产物开始，按照一般工艺8制备。经过柱色谱纯化(12g ISCO柱，洗脱用二氯甲烷和甲醇/浓氢氧化铵(10∶1)；梯度100％二氯甲烷至90％二氯甲烷)，得到偶联产物(0.34g，96％)，为黄褐色固体：¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ8.24(s，1H)，8.05(d，J ＝ 0.7Hz，1H)，8.00(d，J ＝0.7Hz，1H)，7.78-7.76(dd，J＝8.5，0.7Hz，1H)，7.74-7.72(dd，J＝8.5，0.7Hz，1H)，4.95(brs，2H)，3.81(brs，2H)，3.59-3.56(m，4H)，3.15(brs，4H)，2.71(brs，4H)，2.40(s，3H)，0.90-0.87(t，J＝8.2Hz，2H)，-0.07(s，9H)；ES-MS：(M+H)＝454m/z。

步骤D：将步骤C产物(0.34g，0.75mmol)的6N HCl(20mL)/乙醇(20mL)溶液在回流下加热3h，冷却至室温，用水(20mL)稀释，用碳酸钾中和，浓缩至干。残余物经过柱色谱纯化(12g ISCO柱，洗脱用二氯甲烷和甲醇/浓氢氧化铵(10∶1)；梯度100％二氯甲烷至85％二氯甲烷)，得到黄色固体。经过制备型TLC再次纯化，得到粘性的油，使用2M HCl的二乙醚溶液转化为双HCl盐，得到标题化合物(25mg，8％)，为黄色固体；¹H NMR(500MHz，CD₃OD)δ8.15(brs，2H)，8.01(s，1H)，7.90-7.88(d，J＝8.5Hz，1H)，7.74-7.72(d，J＝8.4Hz，1H)，4.14-4.10(dd，J＝16.2，5.4Hz，1H)，4.02-3.98(dd，J＝15.2，8.5Hz，1H)，3.90-3.87(m，1H)，3.82-3.79(m，2H)，3.69-3.68(m，2H)，3.44-3.40(t，J＝10.6Hz，1H)，3.00(s，3H)，2.38-2.35(m，2H)；¹³C NMR(125MHz，CD₃OD)δ150.3，144.0，141.8，139.1，137.4，133.5，123.4，121.4，117.2，109.0，57.4，57.0，50.1，46.6，45.0，25.5(由于重叠丢失一个芳族信号)；HPLCt_R＝9.80min，＞99％；ES-MS：(M+H)＝324m/z。

实施例7

5-(1H-吲唑-5-基)-3-(4-甲基-1，4-二氮杂环庚烷-1-基)吡嗪-2-胺二盐酸盐

步骤A：5-溴-1H-吲唑

从5-氨基吲唑开始按照与步骤A(实施例6)所述相似的方式制备，得到溴吲唑(1.32g，66％)，为橙色-黄色固体；¹H NMR(500MHz，DMSO-d₆)δ13.24(s，1H)，8.05(s，1H)，8.00(s，1H)，7.53-7.51(d，J＝8.7Hz，1H)，7.45-7.43(d，J＝8.8Hz，1H)。

步骤B：5-溴-2-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-2H-吲唑和5-溴-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑

从步骤A产物开始按照与步骤B(实施例6)所述相似的方式制备，得到SEM-保护的吲唑的混合物(0.56g，85％)，为黄色的油；¹H NMR(500MHz，DMSO-d₆)δ主要异构体：8.12(d，J＝0.6Hz，1H)，8.04-8.03(d，J＝1.6Hz，1H)，7.74-7.73(d，J＝8.9Hz，1H)，7.57-7.55(dd，J＝8.8，1.8Hz，1H)，5.75(s，2H)，3.51-3.48(t，J＝8.0Hz，2H)，0.80-0.77(t，J＝8.0Hz，2H)，-0.11(s，9H)；次要异构体：8.52-8.51(d，J＝0.7Hz，1H)，8.01(d，J＝1.5Hz，1H)，7.64-7.62(d，J＝9.1Hz，1H)，7.35-7.33(dd，J＝9.1，1.9Hz，1H)，5.72(s，2H)，3.61-3.58(t，J＝8.0Hz，2H)，0.86-0.83(t，J＝8.0Hz，2H)，-0.06(s，9H)；ES-MS：(M+H)＝328m/z。

步骤C：3-(4-甲基-1，4-二氮杂环庚烷-1-基)-5-(1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-5-基)吡嗪-2-胺和3-(4-甲基-1，4-二氮杂环庚烷-1-基)-5-(2-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-2H-吲唑-5-基)吡嗪-2-胺

从步骤B产物开始按照与步骤C(实施例6)所述相似的方式制备，得到偶联吲唑的混合物(0.22g，68％)，为黄褐色固体。

步骤D：从步骤C产物开始按照与步骤D(实施例6)所述相似的方式制备。经过柱色谱纯化(12g ISCO柱，洗脱用二氯甲烷和甲醇/浓氢氧化铵(10∶1)；梯度100％二氯甲烷至85％二氯甲烷)，得到黄色固体。经过制备型TLC再次纯化，得到黄色粘性的油，使用2M HCl的二乙醚溶液转化为双-HCl盐，得到标题化合物(13mg，7％)，为黄色固体：¹H NMR(500 MHz，CD₃OD)δ8.45(s，1H)，8.34(s，1H)，8.07-8.05(d，J＝8.9Hz，1H)，7.96(s，1H)，7.71-7.69(d，J＝8.8Hz，1H)，4.14-4.10(dd，J＝16.1，5.3Hz，1H)，4.04-4.00(dd，J＝15.8，8.4Hz，1H)，3.91-3.87(m，1H)，3.83-3.77(m，2H)，3.69-3.65(m，2H)，3.46-3.39(t，J＝11.3Hz，1H)，3.00(s，3H)，2.44-2.40(m，1H)，2.33-2.30(m，1H)；¹³C NMR(125MHz，CD₃OD)δ150.4，143.5，141.7，140.2，134.8，130.4，127.8，124.1，120.1，116.0，112.4，57.5，57.2，50.2，46.7，45.1，25.7；HPLC t_R＝9.14min，＞99％；ES-MS：(M+H)＝324m/z。

实施例8

5-(2-氨基吡啶-4-基)-3-(4-甲基-1，4-二氮杂环庚烷-1-基)吡嗪-2-胺三盐酸盐

步骤A：甲基4-(5-氨基-6-(4-甲基-1，4-二氮杂环庚烷-1-基)吡嗪-2-基)吡啶甲酸酯

从步骤A(实施例4)产物和4-氯吡啶-2-羧酸甲基酯开始，按照一般工艺8制备。经过柱色谱纯化(12g ISCO柱，洗脱用二氯甲烷和甲醇/氨混合物(10∶1)；梯度100％二氯甲烷至80％二氯甲烷历经30min，流速25mL/min)，得到偶联产物(150mg，45％)，为黄色的油；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ8.74-8.73(d，J＝4.8Hz，1H)，8.62(s，1H)，8.24(s，1H)，8.00-7.99(dd，J＝4.8，1.5Hz，1H)，4.91(brs，2H)，4.04(s，3H)，3.62-3.58(m，4H)，2.82-2.75(m，4H)，2.46(s，3H)，2.05-2.00(m，2H)。

步骤B：4-(5-氨基-6-(4-甲基-1，4-二氮杂环庚烷-1-基)吡嗪-2-基)吡啶甲酸

将步骤A产物(150mg，0.44mmol)和氢氧化锂一水合物(52mg，2.2mmol)在THF(3mL)与水(1mL)的混合物中搅拌16h。将溶液浓缩，然后溶于甲醇(2mL)，装上Isolute SCX-2(5g)柱。用甲醇洗脱，浓缩洗脱剂，得到羧酸(122mg，84％)，为黄色的油；¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ8.58-8.57(d，J＝1.5Hz，1H)，8.53-8.52(d，J＝5.2Hz，1H)，8.22(s，1H)，7.96-7.95(dd，J＝5.2，1.8Hz，1H)，3.67-3.59(m，4H)，2.90-2.88(m，2H)，2.82-2.80(m，2H)，2.45(s，3H)，2.06-2.03(m，2H)。

步骤C：叔丁基4-(5-氨基-6-(4-甲基-1，4-二氮杂环庚烷-1-基)吡嗪-2-基)吡啶-2-基氨基甲酸酯

将步骤B产物(122mg，0.37mmol)、三乙胺(41mg，0.45mmol，57μL)和二苯基phorazide(122mg，0.45mmol)在DMF(1mL)与叔丁醇(1mL)的混合物中加热至90℃达16h。将混合物用乙酸乙酯稀释，用5％氯化锂洗涤(5×)，经硫酸钠干燥，浓缩，得到黄色的油。经过制备型TLC纯化，用二氯甲烷/甲醇/氨(160∶18∶2)洗脱，得到氨基甲酸酯(26mg，17％)，为无色的油；¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ8.47(s，1H)，8.28(s，1H)，8.25-8.24(d，J＝5.4Hz，1H)，7.49(s，1H)，7.42-7.40(dd，J＝5.4，1.3Hz，1H)，5.15(brs，2H)，3.59-3.26(brm，8H)，2.90(s，3H)，1.57-1.45(m，2H)，1.53(s，9H)。

步骤D：将步骤C产物(26mg，0.065mmol)在TFA(2mL)中搅拌2h，然后浓缩。将残余物溶于甲醇，装上Isolute SCX-2(5g)柱。用7N NH₃的甲醇溶液洗脱，浓缩洗脱剂，得到游离碱，随后用2N HCl的二乙醚溶液转化为三盐酸盐，得到标题化合物(7mg，26％)，为橙色固体；¹HNMR(500MHz，CDCl₃)δ8.23(s，1H)，7.88-7.86(d，J＝6.9Hz，1H)，7.66-7.65(d，J＝1.1Hz，1H)，7.42-7.40(dd，J＝6.9，1.7Hz，1H)，4.09-3.96(m，2H)，3.89-3.83(m，1H)，3.81-3.73(m，2H)，3.68-3.61(m，2H)，3.45-3.40(m，1H)，2.99(s，3H)，2.40-2.28(m，2H)；¹³C NMR(125MHz，CD₃OD)δ156.1，151.4，149.5，146.9，136.7，133.7，123.0，109.9，109.5，57.3，57.1，50.0，46.5，45.0，25.6；HPLC t_R＝7.9min，96.2％；ES-MS：(M+H)＝300m/z。

实施例9

2，2′-(3-氨基-6-(吡啶-4-基)吡嗪-2-基氮烷二基)二乙醇

步骤A：2，2′-(3-氨基-6-溴吡嗪-2-基氮烷二基)二乙醇

从2-氨基-3，5-二溴吡嗪和二乙醇胺开始，按照一般工艺4(方法1)制备，得到二氨基吡嗪(121mg，55％)，为黄色固体；¹H NMR(500MHz，CD₃OD)δ7.51(s，1H)，3.72-3.78(t，J＝5.3Hz，4H)，3.43-3.41(t，J＝5.4Hz，4H)；ES-MS：(M+H)＝277，279m/z。

步骤B：从步骤A产物和4-吡啶基代硼酸开始，按照一般工艺6(方法1)制备。经过柱色谱纯化(12g ISCO柱，洗脱用二氯甲烷和10∶1甲醇/氢氧化铵混合物；梯度100％二氯甲烷至95％然后90％最后85％二氯甲烷)，得到标题化合物(40mg，37％)，为绿色固体；¹H NMR(500MHz，CD₃OD)δ8.50-8.49(dd，J＝4.7，1.5Hz，2H)，8.19(s，1H)，7.93-7.92(dd，J＝4.7，1.6Hz，2H)，3.80-3.78(t，J＝5.4Hz，4H)，3.53-3.51(t，J＝5.4Hz，4H)；¹³C NMR(75MHz，CD₃OD)δ151.2，150.7，147.9，146.7，135.6，133.2，121.1，60.6，52.7；HPLC t_R＝6.40min，100％(洗脱剂90∶10至10∶90水/乙腈历经20min然后保持10min)；ES-MS：(M+H)＝276m/z。

实施例10

3-(哌啶-1-基)-5-(吡啶-4-基)吡嗪-2-胺

步骤A：5-溴-3-(哌啶-1-基)吡嗪-2-胺

从2-氨基-3，5-二溴吡嗪和哌啶开始，按照一般工艺4(方法2)制备，得到二氨基吡嗪(199mg，97％)，为黄色固体；¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ7.72(s，1H)，4.53(s，2H)，3.12-3.10(t，J＝5.3Hz，4H)，1.71-1.67(m，4H)，1.65-1.61(m，2H)。

步骤B：从步骤A产物和4-吡啶基代硼酸开始，按照一般工艺6(方法2)制备。用甲醇研制纯化，得到标题化合物(89mg，45％)，为黄色-褐色固体；¹H NMR(500MHz，DMSO-d₆)δ8.56-8.54(m，2H)，8.36(s，1H)，7.89-7.87(m，2H)，6.35(s，2H)，3.13-3.11(m，4H)，1.71-1.70(m，4H)，1.59-1.58(m，2H)；¹³C NMR(75MHz，DMSO-d₆)δ149.6，148.9，145.47，144.2，133.3，132.8，118.4，48.4，24.7，23.7；HPLC t_R＝11.1min，＞99％；ES-MS：(M+H)＝256m/z。

实施例11

(1-(3-氨基-6-(吡啶-4-基)吡嗪-2-基)哌啶-4-基)甲醇

步骤A：(1-(3-氨基-6-溴吡嗪-2-基)哌啶-4-基)甲醇

从2-氨基-3，5-二溴吡嗪和4-羟甲基哌啶开始，按照一般工艺4(方法2)制备。用二氯甲烷/己烷研制纯化，得到二氨基吡嗪(185mg，79％)，为浅黄色固体；¹H NMR(500MHz，DMSO-d₆)δ7.73(s，1H)，4.53(s，2H)，3.60-3.57(m，4H)，2.80-2.74(m，2H)，1.89-1.87(d，J＝11.1Hz，2H)，1.72(m，1H)，1.40-1.37(m，2H)，1.33-1.31(m，1H)。

步骤B：从步骤A产物和4-吡啶基代硼酸开始，按照一般工艺6(方法2)。用二氯甲烷/己烷研制纯化，得到标题化合物(102mg，56％)，为浅黄色固体；¹H NMR(500MHz，DMSO-d₆)δ8.55-8.54(m，2H)，8.36(s，1H)，7.89-7.87(m，2H)，6.34(s，1H)，4.51-4.49(t，J＝5.3Hz，1H)，3.63-3.60(d，J＝12.5Hz，2H)，3.32-3.26(m，2H，被溶剂部分掩蔽)，2.72-2.67(m，2H)，1.78-1.75(m，2H)，1.57-1.56(m，1H)，1.45-1.39(m，2H)；¹³C NMR(75MHz，DMSO-d₆)δ149.9，149.2，145.6，144.4，133.6，133.0，118.7，65.9，47.8，28.2(一个脂族信号被溶剂掩蔽)；HPLC t_R＝9.16min，＞99％；ES-MS：(M+H)＝286m/z。

实施例12

1-(3-氨基-6-(吡啶-4-基)吡嗪-2-基)哌啶-4-醇

步骤A：1-(3-氨基-6-溴吡嗪-2-基)哌啶-4-醇

从2-氨基-3，5-二溴吡嗪和哌啶-4-醇开始，按照一般工艺4(方法2)制备，得到二氨基吡嗪(185mg，79％)，为淡黄色固体；¹H NMR(500MHz，DMSO-d₆)δ7.75(s，1H)，4.53(s，2H)，3.91-3.88(m，1H)，3.51-3.47(m，2H)，2.95-2.90(m，2H)，2.06-2.01(m，2H)，1.70-1.66(m，2H)，1.50-1.49(m，1H)。

步骤B：从步骤A产物和4-吡啶基代硼酸开始，按照一般工艺6(方法2)。用二氯甲烷/己烷研制纯化，得到标题化合物(39mg，19％)，为淡黄色固体；¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ8.56-8.54(m，2H)，8.37(s，1H)，7.89-7.88(m，2H)，6.39(s，2H)，4.71-4.70(m，1H)，3.68-3.65(m，1H)，3.50-3.46(m，2H)，2.90-2.83(m，2H)，1.90-1.86(m，2H)，1.68-1.62(m，2H)；¹³C NMR(75MHz，DMSO-d₆)δ149.9，149.1，145.4，144.4，133.6，133.0，118.7，66.1，45.5，33.8；HPLC t_R＝8.48min，98％；ES-MS：(M+H)＝272m/z。

实施例13

3-(4-(二甲氨基)哌啶-1-基)-5-(吡啶-4-基)吡嗪-2-胺

步骤A：5-溴-3-(4-(二甲氨基)哌啶-1-基)吡嗪-2-胺

从2-氨基-3，5-二溴吡嗪和N，N-二甲基哌啶-4-胺开始，按照一般工艺4(方法2)制备。经过柱色谱纯化(12g ISCO柱，洗脱用二氯甲烷和甲醇；梯度100％二氯甲烷至90％二氯甲烷)，得到二氨基吡嗪(203mg，83％)，为白色固体；¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ7.74(s，1H)，4.53(s，2H)，3.63-3.60(d，J＝13.1Hz，2H)，2.78-2.72(m，2H)，2.33(s，6H)，2.28(m，1H)，1.99-1.97(d，J＝12.6Hz，2H)，1.61-1.54(m，2H，被溶剂部分掩蔽)。

步骤B：从步骤A产物和4-吡啶基代硼酸开始，按照一般工艺6(方法2)制备。经过柱色谱纯化(12g ISCO柱，洗脱用二氯甲烷和甲醇；梯度100％二氯甲烷至70％二氯甲烷)，继之以二氯甲烷/己烷研制，得到标题化合物(69mg，34％)，为灰白色固体；¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ8.56-8.54(d，J＝5.9Hz，2H)，8.37(s，1H)，7.89-7.87(d，J＝6.1Hz，2H)，6.41(s，2H)，3.65-3.61(d，J＝12.2Hz，2H)，2.74-2.66(t，J＝11.6Hz，2H)，2.25-2.21(m，7H)，1.86-1.82(m，2H)，1.72-1.61(m，2H)；¹³C NMR(75MHz，DMSO-d₆)δ150.1，149.4，145.5，144.7，133.8，133.4，118.9，61.7，47.7，41.7，27.8；HPLC t_R＝8.5min，98.1％；ES-MS：(M+H)＝299m/z

实施例14

N，N-(1-甲基哌啶-4-基)-6-(吡啶-4-基)吡嗪-2，3-二胺

步骤A：6-溴-N²-(1-甲基哌啶-4-基)吡嗪-2，3-二胺

从2-氨基-3，5-二溴吡嗪和N，N-二甲基哌啶-4-胺开始，按照一般工艺4(方法2)。用乙酸乙酯/己烷研制纯化，得到二氨基吡嗪(127mg，83％)，为灰白色固体；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.45(s，1H)，4.03(br，2H)，3.93-3.88(m，2H)，2.84-2.79(m，2H)，2.30(s，3H)，2.21-2.08(m，4H)，1.57-1.52(m，2H，被溶剂部分掩蔽)。

步骤B：从步骤A产物和4-吡啶基代硼酸开始，按照一般工艺6(方法2)制备。穿过二氧化硅塞纯化(用二氯甲烷和甲醇洗脱；梯度90％二氯甲烷至45％二氯甲烷)，继之以乙酸乙酯/己烷研制，得到标题化合物(59mg，46％)，为浅褐色固体；¹H NMR(500MHz，DMSO-d₆)δ8.52-8.51(d，J＝4.1Hz，2H)，7.95(s，1H)，7.82-7.81(d，J＝4.1Hz，2H)，6.19-6.18(m，1H)，6.48(s，2H)，3.91-3.90(m，1H)，2.80-2.78(d，J＝10.0Hz，2H)，2.20(s，3H)，2.08-2.00(m，4H)，1.54-1.50(m，2H)；¹³C NMR(75MHz，DMSO-d₆)δ150.0，145.4，145.0，141.6，133.2，126.7，118.8，54.6，47.6，46.2，31.7；HPLC t_R＝10.1min，＞99％；ES-MS：(M+H)＝285m/z。

实施例15

N，N-(1-甲基哌啶-3-基)-6-(吡啶-4-基)吡嗪-2，3-二胺

步骤A：6-溴-N²-(1-甲基哌啶-3-基)吡嗪-2，3-二胺

从2-氨基-3，5-二溴吡嗪和3-氨基-1-甲基哌啶二盐酸盐开始，按照一般工艺4(方法2)制备。经过柱色谱纯化(12g ISCO柱，洗脱用二氯甲烷和甲醇；梯度100％二氯甲烷至75％二氯甲烷)，得到二氨基吡嗪(85mg，25％)，为黄色-褐色固体；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.60(s，1H)，5.25-5.22(m，1H)，4.40-4.30(m，3H)，2.69-2.67(m，2H)，2.47-2.44(m，1H)，2.29(s+m，4H)，2.16-2.14(m，1H)，1.63-1.54(m，3H)。

步骤B：从步骤A产物和4-吡啶基代硼酸开始，按照一般工艺6(方法2)制备。经过柱色谱纯化(40g ISCO柱，洗脱用二氯甲烷和甲醇；梯度100％二氯甲烷至65％二氯甲烷)，得到标题化合物(57mg，43％)，为褐色固体；¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ8.53-8.51(d，J＝4.7Hz，2H)，7.97(s，1H)，7.84-7.82(d，J＝5.1Hz，2H)，6.52(s，2H)，6.17-6.15(d，J＝6.7Hz，1H)，4.19(br，1H)，2.99-2.95(d，J＝8.1Hz，1H)，2.70-2.61(m，1H)，2.19(s，3H)，2.00-1.89(m，3H)，1.72-1.59(m，2H)，1.34-1.31(m，1H)；¹³C NMR(75MHz，DMSO-d₆)δ150.0，145.0，141.5，126.8，118.8，60.6，55.5，47.1，46.4，29.6，23.8(由于重叠丢失两个芳族信号)；HPLC t_R＝10.9min，＞99％；ES-MS：(M+H)＝285m/z。

实施例16

N，N-2-(哌啶-4-基)-6-(吡啶-4-基)吡嗪-2，3-二胺

步骤A：乙基4-(3-氨基-6-溴吡嗪-2-基氨基)哌啶-1-羧酸酯

从2-氨基-3，5-二溴吡嗪和乙基-4-氨基-1-哌啶-羧酸酯开始，按照一般工艺4(方法2)制备。用二氯甲烷研制纯化，得到二氨基吡嗪(140mg，100％)，为灰白色固体；¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ7.17(s，1H)，6.32-6.30(d，J＝7.1Hz，1H)，6.19(br，2H)，4.08-4.01(m，2H)，3.95-3.90(m，3H)，3.05-2.85(m，2H)，1.95-1.90(m，2H)，1.38-1.25(m，2H)，1.21-1.18(m，3H)。

步骤B：从步骤A产物和4-吡啶基代硼酸开始，按照一般工艺6(方法2)制备。在回流下与氢氧化钾(18equiv.)在乙醇/水(1.5mL，6∶2)中加热26h，从偶联产物中除去保护基团。经过柱色谱纯化(12g ISCO柱，洗脱用二氯甲烷和甲醇；梯度100％二氯甲烷至85％二氯甲烷)，得到标题化合物(19mg，18％历经2步)，为黄色固体；¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ8.52-8.51(d，J＝4.4Hz，2H)，7.95(s，1H)，7.84-7.82(d，J＝4.5Hz，2H)，6.50(s，2H)，6.23-6.21(d，J＝6.2Hz，1H)，4.03(br，2H)，3.07-3.02(d，J＝12.0Hz，2H)，2.71-2.63(t，J＝11.2Hz，2H)，2.02-1.99(m，2H)，1.42-1.38(m，2H)；¹³C NMR(75MHz，DMSO-d₆)δ149.7，144.7，141.1，126.4，118.5，47.8，44.8，32.2(由于重叠丢失两个芳族信号)；HPLC t_R＝10.6min，＞99％；ES-MS：(M+H)＝271m/z。

实施例17

N，N-(哌啶-3-基)-6-(吡啶-4-基)吡嗪-2，3-二胺

步骤A：叔丁基3-(3-氨基-6-溴吡嗪-2-基氨基)哌啶-1-羧酸酯

从2-氨基-3，5-二溴吡嗪和3-氨基-1-boc-哌啶开始，按照一般工艺4(方法2)制备。经过柱色谱纯化(12g ISCO柱，洗脱用二氯甲烷和甲醇；梯度100％二氯甲烷至85％二氯甲烷)，得到二氨基吡嗪(230mg，58％)，为褐色固体；¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ7.20(s，1H)，6.36-6.21(m，3H)，3.76-3.69(m，3H)，1.99-1.93(m，2H)，1.79-1.75(m，2H)，1.55-1.38(m，2H，被溶剂部分掩蔽)，1.29(br，9H)。

步骤B：从步骤A产物和4-吡啶基代硼酸开始，按照一般工艺6(方法2)制备。如下实现保护基团的除去，将偶联产物溶于4mL甲醇，在0℃下加入2M HCl的二乙醚溶液(5mL)，然后在室温下搅拌24h。将反应混合物浓缩，用水稀释，用碳酸氢钠中和，用氯仿萃取。将有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，浓缩。经过柱色谱纯化(12g ISCO柱，洗脱用二氯甲烷和10％氢氧化铵的甲醇溶液；梯度100％二氯甲烷至50％二氯甲烷)，得到标题化合物(107mg，67％)，为黄色固体；¹H NMR(500MHz，CD₃OD)δ8.49-8.48，(d，J＝5.7Hz，2H)，7.98-7.97(d，J＝5.7Hz，2H)，7.90(s，1H)，4.24-4.22(m，1H)，3.44-3.42(d，J＝11.5Hz，1H)，3.02-3.00(d，J＝12.4Hz，1H)，2.68-2.64(t，J＝10.3Hz，1H)，2.54-2.50(t，J＝10.5Hz，1H)，2.17-2.15(m，1H)，1.87-1.86(m，1H)，1.74-1.63(m，1H)，1.61-1.57(m，1H)；¹³C NMR(75MHz，CD₃OD)δ150.4，148.4，143.8，136.0，127.4，121.1，52.1，31.9，26.3(由于重叠丢失两个芳族信号；一个脂族信号被溶剂掩蔽)；HPLC t_R＝ 10.8min，＞99％；ES-MS：(M+H)＝271m/z。

实施例18

N，N-甲基-N，N-(1-甲基哌啶-4-基)-6-(吡啶-4-基)吡嗪-2，3-二胺

步骤A：6-溴-N²-甲基-N²-(1-甲基哌啶-4-基)吡嗪-2，3-二胺

从2-氨基-3，5-二溴吡嗪和1-甲基-4-(甲基氨基)哌啶开始，按照一般工艺4(方法2)制备。经过柱色谱纯化(12g ISCO柱，洗脱用二氯甲烷和甲醇；梯度100％二氯甲烷至90％二氯甲烷)，得到二氨基吡嗪(130mg，51％)，为黄色固体；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.73(s，1H)，4.54(s，2H)，3.37(m，1H)，2.92-2.89(m，2H)，2.74(s，3H)，2.28(s，3H)，2.06-1.86(m，4H)，1.70-1.61(m，2H，被溶剂部分掩蔽)。

步骤B：从步骤A产物和4-吡啶基代硼酸开始，按照一般工艺6(方法2)制备。经过柱色谱纯化(12g ISCO柱，洗脱用二氯甲烷和甲醇；梯度100％二氯甲烷至85％二氯甲烷)，得到标题化合物(90mg，61％)，为褐色固体；¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ8.56-8.54(m，2H)，8.37(s，1H)，7.88-7.86(m，2H)，6.39(s，2H)，3.52-3.50(m，2H)，2.96(m，2H)，2.71(s，3H)，2.31(br，4H)，1.79(m，4H)；¹³C NMR(75MHz，DMSO-d₆)δ150.2，150.0，145.6，144.7，133.8，133.4，118.9，54.5，54.2，44.9，32.5，27.6；HPLC t_R＝11.5min，＞99％；ES-MS：(M+H)＝299m/z。

实施例19

6-(吡啶-4-基)-N²-(吡咯烷-3-基)吡嗪-2，3-二胺

步骤A：叔丁基3-(3-氨基-6-溴吡嗪-2-基氨基)吡咯烷基-1-羧酸酯

从2-氨基-3，5-二溴吡嗪和3-氨基-1-boc-吡咯烷开始，按照一般工艺4(方法2)制备。经过Combiflash色谱纯化(12g ISCO柱，洗脱用二氯甲烷和甲醇；梯度100％二氯甲烷至85％二氯甲烷)，得到二氨基吡嗪(475mg，52％)，为黄色固体；¹H NMR(500MHz，CDCl₃/CD₃OD)δ7.25(s，1H)，4.56-4.51(m，1H)，3.76-3.73(dd，J＝6.4，11.3Hz，1H)，3.52-3.43(m，2H)，3.28-3.22(m，1H)，2.30-2.22(m，1H)，1.97-1.95(m，1H)，1.47(s，9H)。

步骤B：从步骤A产物和4-吡啶基代硼酸开始，按照一般工艺6(方法2)制备。经过Combiflash色谱纯化(12g ISCO柱，洗脱用二氯甲烷和10％氢氧化铵的甲醇溶液；梯度100％二氯甲烷至80％二氯甲烷)，得到标题化合物(114mg，63％)，为橙色的油；¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ8.63-8.61(d，J＝6.0Hz，2H)，8.01(s，1H)，7.80-7.78(d，J＝6.0Hz，2H)，4.89-4.69(m，1H)，3.77-3.66(m，1H)，3.48-3.38(m，3H)，2.28-2.77(m，1H)，2.06-2.02(m，1H)，1.48(s，9H)。

步骤C：将步骤B产物在TFA(2mL)中搅拌2h，反应混合物浓缩，在二氯甲烷与饱和碳酸钠溶液之间分配。除去有机层，经硫酸钠干燥，浓缩，得到黄色的油。经过Combiflash色谱纯化(12g ISCO柱，洗脱用二氯甲烷和/10％氢氧化铵的甲醇溶液；梯度100％二氯甲烷至80％二氯甲烷)，继之以转化为双-HCl盐，得到标题化合物(69mg，65％)，为黄色固体；¹H NMR(500MHz，CD₃OD)δ8.61-8.59，(d，J＝6.7Hz，2H)，8.34-8.32(d，J＝6.7Hz，2H)，8.10(s，1H)，4.81-4.78(m，1H)，3.80-3.76(dd，J＝6.2，12.2Hz，1H)，3.62-3.57(m，1H)，3.52-3.46(m，1H)，3.45-3.41(m，1H)，2.54-2.47(m，1H)，2.30-2.24(m，1H)；¹³C NMR(125MHz，CD₃OD)δ153.5，148.0，144.7，143.4，133.13，131.9，121.6，52.26，51.86，31.11，25.29；HPLC t_R＝7.21min，＞99％；ES-MS：(M+H)＝257m/z。

实施例20

3-(1-甲基哌啶-4-基氧基)-5-(吡啶-4-基)吡嗪-2-胺

步骤A：5-溴-3-(1-甲基哌啶-4-基氧基)吡嗪-2-胺：

从2-氨基-3，5-二溴吡嗪和1-甲基-4-羟基哌啶开始，按照一般工艺5制备。经过柱色谱纯化(12g ISCO柱，洗脱用二氯甲烷和甲醇/浓氢氧化铵(10∶1)；梯度100％二氯甲烷至90％二氯甲烷)，得到烷氧基吡嗪(0.21g，64％)，为黄褐色固体；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.61(s，1H)，5.11-5.07(m，1H)，4.75(brs，2H)，2.76-2.65(m，2H)，2.36-2.31(m，2H)，2.31(s，3H)，2.06-2.05(m，2H)，1.90-1.79(m，2H)；ES-MS：(M+H)＝288m/z。

步骤B：从步骤A产物和4-吡啶基代硼酸开始，按照一般工艺6(方法2)制备，经过柱色谱纯化(12g ISCO柱，洗脱用二氯甲烷和甲醇/浓氢氧化铵(10∶1)；梯度100％二氯甲烷至90％二氯甲烷)，得到标题化合物(0.11g，54％)，为浅褐色固体；¹H NMR(500MHz，DMSO-d₆)δ8.55-8.54(dd，J＝4.6，1.5Hz，2H)，8.28(s，1H)，7.84-7.83(dd，J＝4.6，1.5Hz，2H)，6.75(brs，2H)，5.17-5.12(m，1H)，2.69-2.63(m，2H)，2.25-2.17(m，2H)，2.20(s，3H)，2.07-2.01(m，2H)，1.81-1.75(m，2H)；¹³C NMR(125MHz，CD₃OD)δ149.9，147.0，145.9，144.1，131.6，131.5，118.5，70.9，52.3，45.8，30.0；HPLC t_R＝7.36min，＞99％；ES-MS：(M+H)＝286m/z。

实施例21

3-(1-甲基哌啶-3-基氧基)-5-(吡啶-4-基)吡嗪-2-胺

步骤A：5-溴-3-(1-甲基哌啶-3-基氧基)吡嗪-2-胺：

从2-氨基-3，5-二溴吡嗪和1-甲基-3-羟基哌啶开始，按照一般工艺5制备，无需纯化即可用于下一步。

步骤B：从步骤A产物和4-吡啶基代硼酸开始，按照一般工艺6(方法2)制备，经过柱色谱纯化(12g ISCO柱，洗脱用二氯甲烷和甲醇/浓氢氧化铵(10∶1)；梯度100％二氯甲烷至90％二氯甲烷)，得到标题化合物(0.16g，57％)，为浅褐色固体；¹H NMR(500MHz，DMSO-d₆)δ8.56-8.54(dd，J＝6.1，1.3Hz，2H)，8.28(s，1H)，7.84-7.83(dd，J＝6.2，1.4Hz，2H)，6.70(brs，2H)，5.23-5.19(m，1H)，2.88-2.86(d，J＝9.1Hz，1H)，2.50(m，1H，被溶剂掩蔽)，2.32-2.26(t，J＝8.9Hz，1H)，2.19(s，3H)，2.14-2.11(t，J＝8.6Hz，1H)，1.99-1.97(m，1H)，1.83-1.81(dd，J＝9.5，3.2Hz，1H)，1.63-1.50(m，2H)；¹³C NMR(125MHz，CD₃OD)δ150.0，147.1，145.9，144.1，131.8，131.5，118.6，70.5，58.7，54.9，46.1，28.5，22.3；HPLC t_R＝7.54min，97.9％；ES-MS：(M+H)＝286m/z。

实施例22

3-(哌啶-4-基氧基)-5-(吡啶-4-基)吡嗪-2-胺

步骤A：叔丁基4-(3-氨基-6-溴吡嗪-2-基氧基)哌啶-1-羧酸酯

从2-氨基-3，5-二溴吡嗪和叔丁基4-羟基哌啶-1-羧酸酯开始，按照一般工艺5制备，无需纯化即可用于下一步。

步骤B：叔丁基4-(3-氨基-6-(吡啶-4-基)吡嗪-2-基氧基)哌啶-1-羧酸酯

从步骤A产物和4-吡啶基代硼酸开始，按照一般工艺6(方法2)制备，经过柱色谱纯化(12g ISCO柱，洗脱用二氯甲烷和甲醇/浓氢氧化铵(10∶1)；梯度100％二氯甲烷至90％二氯甲烷)，得到偶联产物(0.24g，66％)，为黄色固体；¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ8.63-8.62(d，J＝5.9Hz，2H)，8.5 (s，1H)，7.73-7.72(d，J＝5.9Hz，2H)，5.42-5.38(m，1H)，4.99(s，2H)，3.85-3.79(m，2H)，3.38-3.33(m，2H)，2.11-2.05(m，2H)，1.84-1.82(m，2H)，1.48(s，9H)。

步骤C：在室温下，向搅拌着的步骤B产物(0.24g，0.66mmol)的甲醇(4mL)溶液中加入2M HCl的二乙醚溶液(2.0mL)。将反应混合物搅拌过夜，浓缩。残余物经过柱色谱纯化(12g ISCO柱，洗脱用二氯甲烷和甲醇/浓氢氧化铵(10∶1)；梯度100％二氯甲烷至90％二氯甲烷)，得到标题化合物(0.12g，68％)，为灰白色固体；¹H NMR(500MHz，DMSO-d₆)δ8.55-8.54(dd，J＝4.6，1.6Hz，2H)，8.27(s，1H)，7.84-7.83(dd，J＝4.6，1.6Hz，2H)，6.68(s，2H)，5.25-5.20(m，1H)，3.10-2.89(m，3H)，2.69-2.64(m，2H)，2.02-1.98(m，2H)，1.66-1.60(m，2H)；¹³C NMR(125MHz，DMSO-d₆)δ149.9，147.1，145.8，144.1，131.6，131.5，118.5，72.0，43.3，31.6；HPLC t_R＝7.41min，96.8％；ES-MS：(M+H)＝272m/z。

实施例23

3-(哌啶-3-基氧基)-5-(吡啶-4-基)吡嗪-2-胺

步骤A：叔丁基3-(3-氨基-6-溴吡嗪-2-基氧基)哌啶-1-羧酸酯

从2-氨基-3，5-二溴吡嗪和叔丁基3-羟基哌啶-1-羧酸酯开始，按照一般工艺5制备，无需纯化即可用于下一步。

步骤B：叔丁基3-(3-氨基-6-(吡啶-4-基)吡嗪-2-基氧基)哌啶-1-羧酸酯

从步骤A产物和4-吡啶基代硼酸开始，按照一般工艺6(方法2)制备，经过柱色谱纯化(12g ISCO柱，洗脱用二氯甲烷和甲醇/浓氢氧化铵(10∶1)；梯度100％二氯甲烷至90％二氯甲烷)，得到偶联产物(0.21g，56％)，为黄色固体；¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ8.63-8.61(d，J＝5.9Hz，2H)，8.15(s，1H)，7.76-7.75(d，J＝5.9Hz，2H)，5.25-5.22(m，1H)，5.00(s，2H)，4.18-3.06(m，5H)，2.06-1.73(m，3H)，1.26(s，9H)。

步骤C：从步骤B产物开始按照与步骤C(实施例22)所述相似的方式制备，经过柱色谱纯化(12g ISCO柱，洗脱用二氯甲烷和甲醇/浓氢氧化铵(10∶1)；梯度100％二氯甲烷至90％二氯甲烷)，得到标题化合物(0.11g，70％)，为灰白色固体；¹H NMR(500MHz，DMSO-d₆)δ8.55-8.54(dd，J＝4.6，1.5Hz，2H)，8.27(s，1H)，7.84-7.83(dd，J＝4.6，1.5Hz，2H)，6.79(s，2H)，5.11-5.07(m，1H)，3.30(m，1H，被溶剂掩蔽)，3.08-3.05(dd，J＝12.7，2.6Hz，1H)，2.77-2.62(m，3H)，2.00-1.96(m，1H)，1.83-1.77(m，1H)，1.74-1.65(m，1H)，1.47-1.37(m，1H)；¹³C NMR(125MHz，DMSO-d₆)δ149.9，147.2，145.9，144.2，131.6，131.4，118.5，70.4，49.7，45.5，28.8，23.5；HPLC t_R＝7.45min，97.1％；ES-MS：(M+H)＝272m/z。

实施例24

3-(4-(3-氨基-6-(吡啶-4-基)吡嗪-2-基)哌嗪-1-基)丙烷-1-醇

步骤A：叔丁基4-(3-氨基-6-溴吡嗪-2-基)哌嗪-1-羧酸酯

从2-氨基-3，5-二溴吡嗪和叔丁基哌嗪-1-羧酸酯开始，按照一般工艺4(方法2)制备。经过柱色谱纯化(12g ISCO柱，洗脱用己烷和乙酸乙酯；梯度100％己烷至70％己烷)，继之以用乙酸乙酯/己烷研制，得到二氨基吡嗪(406mg，57％)，为淡黄色固体；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.79(s，1H)，4.55(s，2H)，3.58-3.55(t，J＝5.1Hz，4H)，3.16-3.1.3(t，J＝5.1Hz，4H)，1.48(s，9H)。

步骤B：叔丁基4-(3-氨基-6-(吡啶-4-基)吡嗪-2-基)哌嗪-1-羧酸酯

从步骤A产物和4-吡啶基代硼酸开始，按照一般工艺6(方法2)制备。用乙酸乙酯/己烷研制纯化，得到偶联产物(394mg，97％)，为浅褐色固体；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ8.65-8.63(m，2H)，8.29(s，1H)，7.81-7.79(m，2H)，4.81(s，2H)，3.64-3.61(m，4H)，3.26-3.23(m，4H)，1.50(s，9H)。

步骤C：3-(哌嗪-1-基)-5-(吡啶-4-基)吡嗪-2-胺三氟乙酸酯

将三氟乙酸(2.5mL，0.324mmol)加入到冷却(0℃)的步骤B产物(393mg，1.10mmol)在二氯甲烷(5mL)中的混合物中。将混合物在室温下搅拌20h。浓缩反应混合物，得到去保护的哌嗪(879mg，quant.)，为绿色的油；¹H NMR(300MHz，CD₃OD)δ8.74-8.72(m，3H)，8.57-8.55(m，2H)，3.56-3.52(m，8H)。

步骤D：将步骤C产物(879mg，2.37mmol)、3-氯丙醇(224mg，2.37mmol)、碘化钾(788mg，4.75mmol)和碳酸钾(656mg，4.75mmol)在10mL乙腈中回流15h。一旦冷却，将混合物倒入饱和碳酸氢钠中，用乙酸乙酯萃取，将有机层用0.1N NaS₂O₃洗涤，经硫酸钠干燥，浓缩。用甲醇/己烷研制纯化，得到标题化合物(52mg，15％)，为淡黄色固体；¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ8.56-8.54(d，J＝5.7Hz，2H)，8.38(s，1H)，7.90-7.88(d，J＝5.7Hz，2H)，6.41(s，2H)，4.51(br，1H)，3.49-3.45(t，J＝6.1Hz，2H)，3.18(br，4H)，2.59(br，4H)，2.44-2.39(t，J＝7.0Hz，2H)，1.65-1.60(m，2H)；¹³C NMR(75MHz，DMSO-d₆)δ150.2，149.3，145.2，144.7，133.9，133.5，119.0，59.7，55.5，52.7，47.8，29.8；HPLC t_R＝11.6min，98.5％；ES-MS：(M+H)＝315m/z。

实施例25

N-甲基-3-(4-甲基-1，4-二氮杂环庚烷-1-基)-5-(吡啶-4-基)吡嗪-2-胺盐酸盐

步骤A：N-甲基吡嗪-2-胺

从2-氯吡嗪和二乙醇胺开始，按照一般工艺2制备，得到氨基吡嗪(700mg，quant.)，为油；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.80-7.99(dd，J＝2.7，1.5Hz，1H)，7.90-7.89(d，J＝1.5Hz，1H)，7.79-7.80(d，J＝2.8Hz，1H)，4.78(brs，1H)，2.80-2.79(d，J＝4.9Hz，3H)。

步骤B：3，5-二溴-N-甲基吡嗪-2-胺

从步骤A产物开始，按照一般工艺3制备，得到二溴吡嗪(700mg，44％)，为黄色固体；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ8.07(s，1H)，5.26(brs，1H)，3.03-3.01(d，J＝5.0Hz，3H)。

步骤C：5-溴-N-甲基-3-(4-甲基-1，4-二氮杂环庚烷-1-基)吡嗪-2-胺

从步骤B产物和1-甲基高哌嗪开始，按照一般工艺4(方法1)制备，得到二氨基吡嗪(374mg，95％)，为金色的油，含有一些未反应的1-甲基高哌嗪；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.74(s，1H)，4.82(brs，1H)，3.43-3.37(m，2H)，2.98-2.92(m，2H)，2.73-2.71(m，2H)，2.68-2.57(m，2H)，2.42(s，3H)，2.38(s，3H)，1.97-1.90(m，1H)，1.84-1.76(m，1H)。

步骤D：从步骤C产物和4-吡啶基代硼酸开始，按照一般工艺6(方法1)制备。经过柱色谱纯化(12g I SCO柱，洗脱用二氯甲烷和10∶1甲醇/氢氧化铵混合物；梯度100％二氯甲烷至95％然后90％最后85％二氯甲烷)，得到标题化合物的游离碱，为油。转化为HCl盐(2N HCl的乙醚溶液，lequiv.)，得到盐(325mg，78％)，为黄色固体；¹H NMR(500MHz，d₆-DMSO)δ10.76(brs，1H)，8.62-8.61(d，J＝6.2Hz，2H)，8.57(s，1H)，8.03-8.01(d，J＝6.3Hz，2H)，6.94-6.93(m，2H)，3.79-3.75(m，1H)，3.67-3.64(m，1H)，3.52-3.39(m，3H)，3.38-3.35(m，3H)，2.91-2.90(d，J＝4.6Hz，3H)，2.30-2.27(m，1H)，2.10-2.08(m，1H)；¹³C NMR(75MHz，d₆-DMSO)δ148.8，148.0，145.9，145.7，134.4，131.5，119.0，55.4，54.7，49.2，45.3，43.5，28.1，24.0；HPLC t_R＝7.80min，99.0％；ES-MS：(M+H)＝299m/z。

实施例26

N²-甲基-N³-(哌啶-3-基)-5-(吡啶-4-基)吡嗪-2，3-二胺盐酸盐

步骤A：叔丁基3-(6-溴-3-(甲基氨基)吡嗪-2-基氨基)哌啶-1-羧酸酯

从步骤B产物(实施例25)和3-氨基-1-boc-哌嗪开始，按照一般工艺4(方法2)制备。经过柱色谱纯化(12g ISCO柱，洗脱用己烷和乙酸乙酯；梯度100％己烷至80％己烷)，得到二氨基吡嗪(188mg，37％)，为灰白色泡沫状固体；¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ7.54(s，1H)，4.08-4.02(m，2H)，3.60-3.27(m，4H)，2.94-2.93(d，J＝3.9Hz，3H)，1.91-1.86(m，3H)，1.59-1.57(m，2H)，1.41(s，9H)。

步骤B：叔丁基3-(3-(甲基氨基)-6-(吡啶-4-基)吡嗪-2-基氨基)哌啶-1-羧酸酯

从步骤A产物和4-吡啶基代硼酸开始，按照一般工艺6(方法1)制备。经过柱色谱纯化(12g ISCO柱，洗脱用己烷和乙酸乙酯；梯度100％己烷至0％己烷)，得到偶联产物(75mg，41％)，为黄色固体；¹HNMR(300MHz，CDCl₃)δ8.61-8.60(dd，J＝4.6，1.6Hz，2H)，8.11(s，1H)，7.83-7.81(dd，J＝4.7，1.6Hz，2H)，4.44-4.42(m，1H)，4.21-4.20(m，1H)，3.73-3.62(m，1H)，3.61-3.51(m，2H)，3.41-3.35(m，1H)，3.05-3.03(d＝4.6Hz，3H)，3.02-3.01(m，1H)，1.95-1.94(m，2H)，1.77-1.76(m，2H)，1.26(s，9H)。

步骤C：将步骤B产物(75mg，0.195mmol)溶于甲醇(3mL)，加入2N HCl的乙醚溶液(10mL)。将混合物搅拌3h，此后生成黄色沉淀。将混合物浓缩，溶于10％氢氧化铵的甲醇溶液溶液(5mL)，再浓缩。经过柱色谱纯化(4g ISCO柱，洗脱用二氯甲烷和10∶1甲醇/氢氧化铵混合物；梯度100％二氯甲烷至90％然后85％二氯甲烷)，得到标题化合物的游离碱，为油。转化为HCl盐(2N HCl的乙醚溶液，lequiv.)，得到盐(50mg，80％)，为橙色固体；¹H NMR(500MHz，CD₃OD)δ8.74-8.72(d，J＝7.0Hz，2H)，8.67-8.66(d，J＝7.0Hz，2H)，8.35(s，1H)，4.68-4.64(m，1H)，3.73-3.70(dd，J＝12.3，3.6Hz，1H)，3.41-3.38(m，1H)，3.16(s，3H)，3.14-3.09(m，1H)，3.05-2.99(m，1H)，2.22-2.15(m，2H)，2.05-1.99(m，1H)，1.93-1.87(m，1H)；¹³C NMR(75MHz，CD₃OD)δ155.5，145.6，144.3，142.3，131.3，122.8，48.1，47.2，45.0，29.1，28.9，22.1(由于重叠丢失一个芳族信号)；HPLC t_R＝11.40min，97.7％；ES-MS：(M+H)＝285m/z。

实施例27

N-(2-甲氧基乙基)-3-(4-甲基-1，4-二氮杂环庚烷-1-基)-5-(吡啶-4-基)吡嗪-2-胺盐酸盐

步骤A：N-(2-甲氧基乙基)吡嗪-2-胺

步骤A：从2-氯吡嗪和1-甲氧基乙基胺开始，按照一般工艺2制备，得到氨基吡嗪(490mg，52％)，为油；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.98-7.97(dd，J＝2.6，1.5Hz，1H)，7.91-7.90(d，J＝1.4Hz，1H)，7.80-7.79(d，J＝2.7Hz，1H)，4.94(br s，1H)，3.60-3.55(m，4H)，3.40(s，3H)。

步骤B：3，5-二溴-N-(2-甲氧基乙基)吡嗪-2-胺

从步骤A产物开始，按照一般工艺3制备，得到二溴吡嗪(435mg，44％)，为灰白色固体；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ8.03(s，1H)，5.58(br s，1H)，3.63-3.56(m，4H)，3.41(s，3H)。

步骤C：5-溴-N-(2-甲氧基乙基)-3-(4-甲基-1，4-二氮杂环庚烷-1-基)吡嗪-2-胺

从步骤B产物和1-甲基高哌嗪开始，按照一般工艺4(方法1)制备，得到二氨基吡嗪(221mg，quant.)，为油；¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ7.68(s，1H)，5.08(br s，1H)，3.61-3.59(m，2H)，3.56-3.53(m，2H)，3.44-3.40(m，4H)，3.39(s，3H)，2.73-2.70(m，4H)，2.42(s，3H)，1.99-1.94(m，2H)。

步骤D：从步骤C产物和4-吡啶基代硼酸开始，按照一般工艺6(方法1)制备。经过柱色谱纯化(12g ISCO柱，洗脱用二氯甲烷和10∶1甲醇/氢氧化铵混合物；梯度100％二氯甲烷至90％最后80％二氯甲烷)，得到标题化合物的游离碱，为油。转化为HCl盐(2N HCl的乙醚溶液，lequiv.)制备，得到盐(170mg，70％)，为黄色固体，放置后变暗：¹H NMR(500MHz，CD₃OD)δ8.63-8.61(s+d，3H)，8.32-8.31(d，J＝6.7Hz，2H)，3.82-3.54(4xm，12H)，3.40(s，3H)，3.01(s，3H)，2.29-2.28(m，2H)；¹³C NMR(75MHz，CD₃OD)δ149.8，149.0，146.4，144.9，136.2，130.9，120.5，70.3，58.3，55.6，55.2，55.0，50.0，45.8，44.0，24.4；HPLC t_R＝8.33min，97.6％；ES-MS：(M+H)＝343m/z。

实施例28

2-(3-(4-甲基-1，4-二氮杂环庚烷-1-基)-5-(吡啶-4-基)吡嗪-2-基氨基)乙醇盐酸盐

步骤A：2-(吡嗪-2-基氨基)乙醇

从2-氯吡嗪和乙醇胺开始，按照一般工艺2制备，得到氨基吡嗪(800mg，94％)，为油；ES-MS：(M+H)＝140m/z。

步骤B：2-(3，5-二溴吡嗪-2-基氨基)乙醇

从步骤A产物开始，按照一般工艺3制备，除了使反应混合物在乙酸乙酯与水之间分配以外。然后将有机相经Na₂SO₄干燥，浓缩，得到二溴吡嗪(1.7g，quant.)，为油；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ8.02(s，1H)，5.69(br s，1H)，3.86-3.83(t，J＝5.2Hz，2H)，3.64-3.61(t，J＝5.3Hz，2H)，3.00(s，1H)。

步骤C：2-(5-溴-3-(4-甲基-1，4-二氮杂环庚烷-1-基)吡嗪-2-基氨基)乙醇

从步骤B产物和1-甲基高哌嗪开始，按照一般工艺4(方法1)制备，得到二氨基吡嗪(339mg，61％)，为深色的油；¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ7.67(s，1H)，5.31(br s，1H)，3.85-3.83(t，J＝5.1Hz，2H)，3.57-3.55(t，J＝5.2Hz，2H)，3.44-3.40(m，4H)，2.74-2.69(m，4H)，2.42(s，3H)，1.97-1.92(m，2H)。

步骤D：从步骤C产物和4-吡啶基代硼酸开始，按照一般工艺6(方法1)制备。经过柱色谱纯化(12g ISCO柱，洗脱用二氯甲烷和10∶1甲醇/氢氧化铵混合物；梯度100％二氯甲烷至95％然后90％最后85％二氯甲烷)，得到标题化合物的游离碱，为油。转化为HCl盐(2N HCl的乙醚溶液，lequiv.)制备，得到盐(209mg，56％)，为黄色固体；¹HNMR(500MHz，CD₃OD)δ8.58(br d，2H)，8.52(s，1H)，8.17-8.16(d，J＝3.7Hz，2H)，3.82-3.80(m，4H)，3.65-3.48(m，8H)，3.01(s，3H)，2.31-2.29(m，2H)；¹³C NMR(75MHz，CD₃OD)δ150.9，148.1，148.8，147.7，137.1，133.9，121.6，61.9，58.4，57.4，51.8，47.9，45.7，45.0，26.7；HPLC t_R＝7.40min，95.5％；ES-MS：(M+H)＝329m/z。

实施例29

N-(2-甲氧基乙基)-N-甲基-3-(4-甲基-1，4-二氮杂环庚烷-1-基)-5-(吡啶-4-基)吡嗪-2-胺盐酸盐

步骤A：3，5-二溴-N-(2-甲氧基乙基)-N-甲基吡嗪-2-胺

在室温氮气下，将氢化钠(60％矿物油分散体，35mg，0.89mmol)加入到步骤B产物(实施例15)(230mg，0.74mmol)的四氢呋喃(2mL)溶液中。搅拌5min后，加入甲基碘(115mg，0.81mmol)，混合物保持1h。LC-MS分析显示原料仍有剩余，因此加入另一份氢化钠继之以甲基碘。30min后没有原料剩余。将混合物用水(50mL)淬灭，用乙酸乙酯萃取(2×50mL)。合并有机层，经硫酸钠干燥，浓缩，得到取代的氨基吡嗪(233mg，97％)，为油；¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ8.09(s，1H)，3.70-3.68(m，2H)，3.65-3.62(m，2H)，3.33(s，3H)，3.12(s，3H)。

步骤B：5-溴-N-(2-甲氧基乙基)-N-甲基-3-(4-甲基-1，4-二氮杂环庚烷-1-基)吡嗪-2-胺

从步骤A产物和1-甲基高哌嗪开始，按照一般工艺4(方法1)制备。经过柱色谱纯化(12g ISCO柱，洗脱用二氯甲烷和10∶1甲醇/氢氧化铵混合物；梯度100％二氯甲烷至90％二氯甲烷)，得到二氨基吡嗪(101mg，40％)，为澄清的油；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.63(s，1H)，3.80-3.76(t，J＝4.7Hz，2H)，3.69-3.65(t，J＝6.0Hz，2H)，3.47-3.43(m，4H)，3.25(s，3H)，2.79(s，3H)，2.62-2.59(t，J＝4.7Hz，2H)，2.56-2.53(t，J＝5.6Hz，2H)，2.40(s，3H)，1.95-1.92(m，2H)。

步骤C：从步骤B产物和4-吡啶基代硼酸开始，按照一般工艺6(方法1)制备。经过柱色谱纯化(12g ISCO柱，洗脱用二氯甲烷和10∶1甲醇/氢氧化铵混合物；梯度100％二氯甲烷至95％然后90％最后85％二氯甲烷)，得到标题化合物的游离碱，为油。转化为HCl盐(2N HCl的乙醚溶液，lequiv.)制备，得到盐(96mg，86％)，为橙色固体，放置后变暗：¹H NMR(500MHz，CD₃OD)δ8.68(s，2H)，8.58(s，1H)，8.41-8.40(d，J＝5.4Hz，2H)，4.07-3.87(m，2H)，3.82-3.80(m，4H)，3.67-3.54(m，6H)，3.19(s，3H)，3.07(s，3H)，2.95(s，3H)，2.27-2.23(m，2H)；¹³C NMR(75MHz，CD₃OD)δ152.7，150.9，147.0，145.1，135.3，134.2，122.3，70.5，58.9，57.7，57.6，51.0，45.6，45.2，37.8，25.8(一个脂族信号被溶剂掩蔽)；HPLC t_R＝8.65min，96.0％；ES-MS：(M+H)＝357m/z。

实施例30

2-(4-(3-(二甲氨基)-6-(吡啶-4-基)吡嗪-2-基)哌嗪-1-基)乙醇盐酸盐

步骤A：3，5-二溴-N，N-二甲基吡嗪-2-胺

从2-氨基-3，5-二溴吡嗪和碘甲烷(568mg，4.00mmol)开始，按照一般工艺1制备。经过柱色谱纯化(12g ISCO柱，洗脱用己烷和乙酸乙酯；梯度100％己烷至70％己烷)，得到取代的氨基吡嗪(171mg，61％)，为黄色的油；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ8.11(s，1H)，3.07(s，6H)。

步骤B：2-(4-(6-溴-3-(二甲氨基)吡嗪-2-基)哌嗪-1-基)乙醇

从步骤A产物和2-(哌嗪-1-基)乙醇开始，按照一般工艺4(方法2)制备。经过柱色谱纯化(12g ISCO柱，洗脱用二氯甲烷和甲醇；梯度100％二氯甲烷至85％二氯甲烷)，得到二氨基吡嗪(121mg，63％)，为淡黄色油；¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ7.45(s，1H)，3.65(br，2H)，3.40(br，4H)，2.88(s，6H)，2.64-2.60(m，6H)。

步骤C：从步骤B产物和4-吡啶基代硼酸开始，按照一般工艺6(方法2)制备。经过柱色谱纯化(12g ISCO柱，洗脱用二氯甲烷和甲醇；梯度100％二氯甲烷至70％二氯甲烷)，继之以用2M HCl的二乙醚溶液转化为HCl盐，得到标题化合物(106mg，80％)，为橙色-黄色固体；¹H NMR(300MHz，CD₃OD)δ8.79-8.75(m，3H)，8.63-8.61(m，2H)，4.23-4.18(m，2H)，3.98-3.95(m，2H)，3.82-3.77(m，2H)，3.45-3.36(m，4H)，3.31-3.27(m，1H)，3.22(s，6H)；¹³C NMR(75MHz，CD₃OD)δ155.7，152.0，146.3，142.7，137.1，133.7，123.1，60.1，56.8，53.1，45.5，39.8；HPLC t_R＝12.9min，＞99％；ES-MS：(M+H)＝329m/z。

实施例31

2-(4-(3-二甲氨基)-6-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)吡嗪-2-基)哌嗪-1-基)乙醇

步骤A：2-(4-(3-(二甲氨基)-6-(三甲基锡烷基)吡嗪-2-基)哌嗪-1-基)乙醇

从步骤B产物(实施例30)和六甲基二锡开始，按照一般工艺7制备。经过柱色谱纯化(12g ISCO柱，洗脱用己烷和乙酸乙酯；梯度100％己烷至50％己烷)，得到锡烷(158mg，62％)，为澄清无色的油；¹HNMR(500MHz，CDCl₃)δ7.72(s，1H)，3.67-3.64(t，J＝5.3Hz，2H)，3.38(br，4H)，2.92(s，6H)，2.67-2.58(m，6H)，0.28(s，9H)。

步骤B：从步骤A产物和4-溴吲唑开始，按照一般工艺8。经过柱色谱纯化(12g ISCO柱，洗脱用二氯甲烷/10％氢氧化铵的甲醇溶液；梯度100％二氯甲烷至85％二氯甲烷)，得到标题化合物(63mg，45％)，为黄色固体；¹H NMR(500MHz，DMSO-d₆)δ11.71(s，1H)，8.49(s，1H)，8.26-8.25(d，J＝5.0Hz，1H)，7.57-7.56(d，J＝5.0Hz，1H)，7.53-7.52(t，J＝2.8Hz，1H)，7.05-7.04(m，1H)，4.57-4.56(br，1H)，3.60(br，3H)，3.50(m，2H，被溶剂掩蔽)，3.00(s，7H)，2.96-2.59(m，6H)；¹³C NMR(75MHz，DMSO-d₆)δ149.7，147.6，145.7，142.5，138.7，136.0，132.1，126.3，116.2，112.2，100.7，59.9，58.0，52.7，46.0(一个脂族信号被溶剂掩蔽)；HPLC t_R＝9.5min，98.5％；ES-MS：(M+H)＝368m/z。

实施例32

N，N-二甲基-3-(4-甲基-1，4-二氮杂环庚烷-1-基)-5-(吡啶-4-基)吡嗪-2-胺盐酸盐

步骤A：5-溴-N，N-二甲基-3-(4-甲基-1，4-二氮杂环庚烷-1-基)吡嗪-2-胺

从步骤A产物(实施例23)和1-甲基高哌嗪开始，按照一般工艺4(方法2)制备。经过柱色谱纯化(12g ISCO柱，洗脱用二氯甲烷和甲醇；梯度100％二氯甲烷至80％二氯甲烷)，得到二氨基吡嗪(245mg，76％)，为黄色的油；¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ7.63(s，1H)，3.78-3.76(m，2H)，3.68-3.66(t，J＝6.1Hz，2H)，2.75(s，6H)，2.62-2.60(m，2H)，2.55-2.53(t，J＝5.5Hz，2H)，2.36(s，3H)，1.94-1.91(m，2H)。

步骤B：从步骤A产物和4-吡啶基代硼酸开始，按照一般工艺6(方法2)制备。经过柱色谱纯化(12g ISCO柱，洗脱用二氯甲烷和甲醇；梯度100％二氯甲烷至85％二氯甲烷)，继之以用2M HCl的二乙醚溶液转化为HCl盐，得到标题化合物(78mg，61％)，为橙色固体；¹H NMR(300MHz，CD₃OD)δ8.53-8.43(m，2H)，8.38(s，1H)，8.18-8.16(m，2H)，4.23-4.06(m，1H)，3.81-3.72(m，3H)3.65-3.43(m，3H)，3.22-3.20(m，1H，被溶剂部分掩蔽)，2.89(s，6H)，2.85(s，3H)，2.21-2.13(m，2H)；¹³C NMR(75MHz，DMSO-d₆)δ151.3，151.1，147.3，147.0，136.5，133.7，122.4，58.0，57.9，45.7，45.4，39.8，26.1(一个脂族信号被溶剂掩蔽)；HPLC t_R＝8.9min，＞99％；ES-MS：(M+H)＝313m/z。

实施例33

N，N-二甲基-3-(4-甲基-1，4-二氮杂环庚烷-1-基)-5-(1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-基)吡嗪-2-胺二盐酸盐

步骤A：N，N-二甲基-3-(4-甲基-1，4-二氮杂环庚烷-1-基)-5-(三甲基锡烷基)吡嗪-2-胺

从实施例32中的步骤A产物和六甲基二锡开始，按照一般工艺7制备。经过Combiflash色谱纯化(40g ISCO柱，洗脱用二氯甲烷和甲醇；梯度100％二氯甲烷至85％二氯甲烷)，得到锡烷(577mg，72％)，为褐色的油；¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ7.61(s，1H)，3.76-3.73(m，2H)，3.68-3.62(m，2H)，2.76(s，6H)，2.63-2.56(m，2H)，2.52-2.46(m，2H)，2.32(s，3H)，1.96-1.87(m，2H)，0.29(s，9H)。

步骤B：2-氯-4-(5-(二甲氨基)-6-(4-甲基-1，4-二氮杂环庚烷-1-基)吡嗪-2-基)烟醛

从步骤A产物和2-氯-4-碘吡啶-3-甲醛开始，按照一般工艺8制备，经过柱色谱纯化(12g ISCO柱，洗脱用二氯甲烷和甲醇/氨混合物(10∶1)；梯度100％二氯甲烷至80％二氯甲烷历经30min，流速25mL/min)，得到偶联产物(76mg，61％)，为黄色的油；¹H NMR(500MHz，CD₃OD)δ10.31(s，1H)，8.46-8.44(d，J＝Hz，1H)，8.10(s，1H)，7.56-7.55(d，J＝5.2Hz，1H)，3.75-3.74(m，2H)，3.64-3.62(m，2H)，2.91(s，6H)，2.64-2.59(m，4H)，2.38(s，3H)，1.95-1.93(m，2H)。

步骤C：将步骤B产物(76mg，0.20mmol)溶于乙醇(2mL)，加入乙酰肼(74mg，1mmol)。将混合物搅拌24h，浓缩，加入一水合肼(3mL)和乙醇(1mL)，继续回流8h。将反应物浓缩，经过半制备型HPLC纯化(洗脱用乙腈(0.05％TFA)/水(0.05％TFA)；5％乙腈(0.05％TFA)至90％乙腈(0.05％TFA)历经40分钟)，得到黄色的油(41mg)。将这种油用2N HCl的Et₂O溶液转化为双盐酸盐，得到标题化合物(41mg，26％)，为红色固体；¹H NMR(500MHz，CD₃OD)δ9.20(s，1H)，8.79(s，1H)，9.73-8.72(d，J＝6.2Hz，1H)，8.10-8.09(d，J＝6.2Hz，1H)，4.27-4.23(dd，J＝16.1，6.0Hz，1H)，4.00-3.95(dd，J＝16.0，9.0Hz，1H)，3.85-3.83(t，J＝5.6Hz，2H)，3.75-3.71(dd，J＝14.0，6.2Hz，1H)，3.65-3.62(dd，J＝9.4，4.1Hz，1H)，3.55-3.51(dd，J＝13.4，9.4Hz，1H)，3.34(m，1H)，3.24(m，1H，被溶剂掩蔽)，3.18(s，6H)，2.95(s，3H)，2.29-2.09(t，J＝5.6Hz，2H)；¹³C NMR(125MHz，CD₃OD)δ152.3，151.1，148.3，147.1，143.3，136.5，134.7，132.6，115.5，112.3，57.8，57.0，45.8，45.0，39.6，25.3；HPLC t_R＝9.3min，98.5％；ES-MS：(M+H)＝353m/z。

实施例34

N，N-(哌啶-3-基)-6-(吡啶-4-基)吡嗪-2，3-二胺

步骤A：叔丁基3-(6-溴-3-(二甲氨基)吡嗪-2-基氨基)哌啶-1-羧酸酯

从步骤A产物(实施例30)和3-氨基-1-boc-哌啶开始，按照一般工艺4(方法2)制备。经过柱色谱纯化(12g ISCO柱，洗脱用二氯甲烷和甲醇；梯度100％二氯甲烷至85％二氯甲烷)，得到二氨基吡嗪(127mg，33％)，为褐色的油；¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ7.56(s，1H)，5.06-5.05(m，1H)，4.04(br，1H)，3.61-3.56(m，3H)，3.29(br，1H)，2.71(s，6H)，1.90-1.86(m，1H)，1.79-1.69(m，2H)，1.61-1.55(m，1H，被溶剂峰部分掩蔽)，1.41(9H)。

步骤B：从步骤A产物和4-吡啶基代硼酸开始，按照一般工艺6(方法2)制备。如下实现保护基团的除去，将偶联产物溶于甲醇(4mL)，在0℃下加入2M HCl的二乙醚溶液(10mL)；然后将混合物在室温下搅拌24h。将反应混合物浓缩，用水稀释，用碳酸氢钠中和，用氯仿萃取。将有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，浓缩。经过制备型薄层色谱纯化(Analtech No.21521平板，洗脱用90∶10∶1二氯甲烷/甲醇/氢氧化铵)，得到标题化合物(32mg，16％历经2步)，为黄色固体；¹HNMR(500MHz，DMSO-d₆)δ8.61-8.60，(d，J＝4.1Hz，2H)，8.17(s，1H)，7.93-7.92(d，J＝4.0Hz，2H)，6.05-6.04(d，J＝7.3Hz，1H)，4.09(s，1H)，3.09-3.07(d，J＝9.8Hz，1H)，2.80(s，5H)，2.59(s，3H，被溶剂峰部分掩蔽)，1.87(s，1H)，1.66(m，2H)，1.50(m，1H)；¹³C NMR(75MHz，DMSO-d₆)δ150.0，147.8，145.5，144.4，138.2，125.6，119.5，50.6，46.9，45.7，29.6，24.3(一个脂族信号被溶剂掩蔽)；HPLC t_R＝8.9min，＞99％；ES-MS：(M+H)＝299m/z。

实施例35

N，N-二甲基-3-(哌啶-4-基氧基)-5-(吡啶-4-基)吡嗪-2-胺盐酸盐

步骤A：叔丁基4-(6-溴-3-(二甲氨基)吡嗪-2-基氧基)哌啶-1-羧酸酯

从步骤A产物(实施例30)和4-羟基-N-Boc-哌啶开始，按照一般工艺5制备，无需纯化即可用于下一步。

步骤B：叔丁基4-(3-(二甲氨基)-6-(吡啶-4-基)吡嗪-2-基氧基)哌啶-1-羧酸酯：

从步骤A产物和4-吡啶基代硼酸开始，按照一般工艺6制备，无需纯化即可用于下一步。

步骤C：从步骤B产物开始按照与步骤C(实施例22)所述相似的方式制备，经过柱色谱纯化(12g ISCO柱，洗脱用二氯甲烷和甲醇/浓氢氧化铵(10∶1)；梯度100％二氯甲烷至90％二氯甲烷)，得到标题化合物的游离碱。使用1M HCl的乙醚溶液转化为HCl盐，得到盐(197mg，58％历经3步)，为黄色固体；¹H NMR(500MHz，CD₃OD)δ8.63-8.61(d，J＝6.8Hz，2H)，8.59(s，1H)，8.34-8.32(d，J＝6.8Hz，2H)，5.63-5.59(m，1H)，3.44-3.36(m，4H)，3.34(s，6H)，2.39-2.33(m，2H)，2.27-2.14(m，2H)；¹³C NMR(125MHz，CD₃OD)δ152.2，149.9，148.5，145.2，136.0，131.6，121.6，69.6，42.8，41.1，28.4；HPLC t_R＝8.85min，＞99％；ES-MS：(M+H)＝300m/z。

实施例36

3-(3-(二甲氨基)丙氧基)-N，N-二甲基-5-(吡啶-4-基)吡嗪-2-胺盐酸盐

步骤A：5-溴-3-(3-(二甲氨基)丙氧基)-N，N-二甲基吡嗪-2-胺：从步骤A产物(实施例30)和3-(N，N-二甲基)-丙烷-1-醇开始，按照一般工艺5制备，无需纯化即可用于下一步。

步骤B：从步骤A产物和4-吡啶基代硼酸开始，按照一般工艺6制备，经过柱色谱纯化(12g ISCO柱，洗脱用二氯甲烷和甲醇/浓氢氧化铵(10∶1)；梯度100％二氯甲烷至90％二氯甲烷)，得到标题化合物，为游离碱。使用1M HCl的乙醚溶液转化为HCl盐，得到盐(143mg，42％)，为黄色固体；¹H NMR(500MHz，CD₃OD)δ8.66-8.64(d，J＝7.0Hz，2H)，8.65(s，1H)，8.48-8.46(d，J＝7.0Hz，2H)，4.63-4.59(t，J＝6.0Hz，2H)，3.39-3.34(m，2H)，3.36(s，6H)，2.95(s，6H)，2.39-2.30(m，2H)；¹³C NMR(125MHz，CD₃OD)δ154.9，150.0，149.4，142.6，137.3，130.4，122.0，64.9，56.6，43.7，41.2，25.4；HPLC t_R＝9.02min，95.6％；ES-MS：(M+H)＝302m/z。

实施例37

N，N-二乙基-3-(4-甲基-1，4-二氮杂环庚烷-1-基)-5-(吡啶-4-基)吡嗪-2-胺盐酸盐

步骤A：3，5-二溴-N，N-二乙基吡嗪-2-胺

从2-氨基-3，5-二溴吡嗪和碘乙烷开始，按照一般工艺1制备。经过柱色谱纯化(12g ISCO柱，洗脱用己烷和乙酸乙酯；梯度100％己烷至50％己烷)，得到取代的氨基吡嗪(220mg，59％)，为黄色的油；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ8.09(s，1H)，3.52-3.45(q，J＝14.1Hz，J＝7.0Hz，4H)，1.21-1.17(t，J＝7.0Hz，6H)。

步骤B：5-溴-N，N-二乙基-3-(4-甲基-1，4-二氮杂环庚烷-1-基)吡嗪-2-胺

从步骤A产物和1-甲基高哌嗪开始，按照一般工艺4(方法2)制备。经过柱色谱纯化(12g ISCO柱，洗脱用二氯甲烷和甲醇；梯度100％二氯甲烷至80％二氯甲烷)，得到二氨基吡嗪(144mg，59％)，为黄色的油；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.65(s，1H)，3.79-3.78(m，2H)，3.71-3.67(t，J＝6.2Hz，2H)，3.26-3.19(q，J＝14.1Hz，J＝7.1Hz，4H)，2.59-2.52(m，2H)，2.51-2.49(m，2H)，2.36(s，3H)，1.94-1.92(m，2H)，1.00-0.95(t，J＝7.1Hz，6H)。

步骤C：从步骤B产物和4-吡啶基代硼酸开始，按照一般工艺6(方法2)制备。经过柱色谱纯化(12g ISCO柱，洗脱用二氯甲烷和甲醇；梯度100％二氯甲烷至70％二氯甲烷)，继之以用2M HCl的二乙醚溶液转化为HCl盐，得到标题化合物(154mg，98％)，为橙色固体；¹H NMR(300MHz，CD₃OD)δ8.73-8.71(d，J＝6.0Hz，2H)，8.66(s，1H)，8.48-8.46(d，J＝6.2Hz，2H)，4.27-3.33(m，12H，被溶剂部分掩蔽)，2.96(s，3H)，2.28-2.24(m，2H)，1.14-1.09(t，J＝6.9Hz，6H)；¹³C NMR(75MHz，CD₃OD)δ153.4，149.7，147.5，144.64，135.3，134.4，122.6，57.7，45.7，45.3，44.1，25.9，13.2(两个脂族信号被溶剂掩蔽)；HPLC t_R＝10.0min，＞99％；ES-MS：(M+H)＝341m/z。

实施例38

1-甲基-4-(6-(吡啶-4-基)-3-(吡咯烷-1-基)吡嗪-2-基)-1，4-二氮杂环庚烷盐酸盐

步骤A：2-(吡咯烷-1-基)吡嗪

从氯吡嗪和吡咯烷开始，按照一般工艺2制备，得到氨基吡嗪，为黄褐色固体(0.92g，粗产物)；¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ8.02-8.01(dd，J＝2.6，1.5Hz，1H)，7.87(d，J＝1.4Hz，1H)，7.75-7.76(d，J＝2.7Hz，1H)，3.51-3.47(m，4H)，2.07-2.00(m，4H)；ES-MS：(M+H)＝150m/z。

步骤B：3，5-二溴-2-(吡咯烷-1-基)吡嗪

从步骤A产物和N-溴代琥珀酰亚胺开始，按照一般工艺3制备，得到二溴吡嗪(0.46g，30％)，为黄褐色固体；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ8.01(s，1H)，3.71-3.67(m，4H)，1.98-1.94(m，4H)；ES-MS：(M+H)＝306m/z。

步骤C：1-(6-溴-3-(吡咯烷-1-基)吡嗪-2-基)-4-甲基-1，4-二氮杂环庚烷

从步骤B产物和1-甲基高哌嗪(0.20mL，1.5mmol)开始，按照一般工艺4(方法1)制备，得到二氨基吡嗪(400mg，quant.)，为褐色的油。

步骤D：从步骤C产物和4-吡啶基代硼酸开始，按照一般工艺6(方法2)制备，经过柱色谱纯化(12g ISCO柱，洗脱用二氯甲烷和甲醇/浓氢氧化铵(10∶1)；梯度100％二氯甲烷至90％二氯甲烷)制备，得到标题化合物的游离碱。使用2M HCl的乙醚溶液转化为HCl盐，得到盐(215mg，76％)，为橙色-红色固体；¹H NMR(500MHz，CD₃OD)δ8.61-8.60(dd，J＝5.2，1.4Hz，2H)，8.54(s，1H)，8.25-8.24(dd，J＝5.1，1.5Hz，2H)，4.13-3.89(m，2H)，3.63-3.44(m，10H)，2.96(s，3H)，2.23-2.19(m，2H)，2.00-1.95(m，4H)；¹³C NMR(125MHz，CD₃OD)δ151.2，150.4，146.9，146.5，135.6，134.3，121.6，57.8，57.6，50.3，50.2，46.4，45.2，26.3，25.7；HPLC t_R＝6.84min，95.2％；ES-MS：(M+H)＝339m/z。

实施例39

4-(6-(4-甲基-1，4-二氮杂环庚烷-1-基)-5-(吡咯烷-1-基)吡嗪-2-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶二盐酸盐

步骤A：1-甲基-4-(3-(吡咯烷-1-基)-6-(三甲基锡烷基)吡嗪-2-基)-1，4-二氮杂环庚烷

从步骤C产物(实施例38)和六甲基二锡开始，按照一般工艺7制备。经过柱色谱纯化(12g ISCO柱，洗脱用二氯甲烷和甲醇/氨混合物(10∶1)；梯度100％二氯甲烷至80％二氯甲烷历经30min，流速25mL/min)，得到芳基锡烷(180mg，33％)，为黄色的油；¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ7.74-7.73(t，J＝3.2Hz，1H)，3.97-3.95(t，J＝4.7Hz，2H)，3.71(brs，2H)，3.33-3.26(m，8H)，2.79(s，3H)，2.31(brs，2H)，1.93-1.89(m，4H)，0.28(s，9H)。

步骤B：从步骤A产物和4-溴吖吲哚开始，按照一般工艺8制备。经过柱色谱纯化(12g ISCO柱，洗脱用二氯甲烷和甲醇/氨混合物(10∶1)；梯度100％二氯甲烷至80％二氯甲烷历经30min，流速25mL/min)，继之以半制备型HPLC纯化(洗脱用乙腈(0.05％TFA)/水(0.05％TFA)；5％乙腈(0.05％TFA)至90％乙腈(0.05％TFA)历经40分钟)，得到橙色的油(26mg)。将这种油用2N HCl的乙醚溶液转化为双盐酸盐，得到标题化合物(26mg，13％)，为橙色固体；¹H NMR(500MHz，CD₃OD)δ8.67(s，1H)，8.35-8.33(d，J＝6.4Hz，1H)，8.05-8.04(d，J＝6.4Hz，1H)，7.71-7.70(d，J＝3.6Hz，1H)，7.41-7.40(d，J＝3.6Hz，1H)，4.09-4.05(dd，J＝16.0，5.9Hz，1H)，3.87-3.83(dd，J＝16.1，8.3Hz，1H)，3.73-3.57(m，8H)，3.53-3.48(m，1H)，3.36-3.32(m，1H)，2.97(s，3H)，2.27-2.21(m，2H)，2.04-2.00(m，4H)；¹³C NMR(125MHz，CD₃OD)δ149.8，147.1，147.0，141.3，137.8，134.9，133.9，130.0，122.3，113.2，105.2，57.7，57.4，50.7，50.2，46.6，45.1，26.3，25.4；HPLC t_R＝10.8min，95.6％；ES-MS：(M+H)＝378m/z。

实施例40

1-(6-(吡啶-4-基)-3-(吡咯烷-1-基)吡嗪-2-基)-1，4-二氮杂环庚烷盐酸盐

步骤A：叔丁基4-(6-溴-3-(吡咯烷-1-基)吡嗪-2-基)-1，4-二氮杂环庚烷-1-羧酸酯

从步骤B产物(实施例38)和1-boc-高哌嗪开始，按照一般工艺4(方法2)制备，得到二氨基吡嗪(1.78g，quant.)，为深色的油；¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ7.68-7.66(d，J＝6.8Hz，1H)，3.56(s，4H)，3.52-3.37(m，4H)，3.31-3.29(m，4H)，1.91-1.90(m，4H)，1.88-1.83(m，2H)，1.46-1.45(d，J＝3.5Hz，9H)；ES-MS：(M+H)＝426，428m/z。

步骤B：叔丁基4-(6-(吡啶-4-基)-3-(吡咯烷-1-基)吡嗪-2-基)-1，4-二氮杂环庚烷-1-羧酸酯

从步骤A产物和4-吡啶基代硼酸开始，按照一般工艺6(方法1)制备。经过柱色谱纯化(12g ISCO柱，洗脱用二氯甲烷和10∶1甲醇/氢氧化铵混合物；梯度100％二氯甲烷至95％然后90％最后85％二氯甲烷)，得到偶联产物(200mg，75％)，为橙色固体；¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ8.62-8.61(d，J＝3.9Hz，2H)，8.22(s，1H)，7.78(s，2H)，3.64-3.53(m，4H)，3.52-3.49(m，2H)，3.43-3.41(m，5H)，3.35-3.32(m，1H)，1.94-1.91(m，6H)，1.44-1.43(d，J＝3.9Hz，9H)。

步骤C：将步骤B产物(150mg，0.354mmol)溶于甲醇(5mL)，加入2N HCl的乙醚溶液(10mL)。将混合物搅拌3h，此后生成黄色沉淀。将混合物浓缩，溶于10％氢氧化铵的甲醇溶液(5mL)，再浓缩。经过柱色谱纯化(4g ISCO柱，洗脱用二氯甲烷和10∶1甲醇/氢氧化铵混合物；梯度100％二氯甲烷至90％然后85％二氯甲烷)，得到标题化合物的游离碱，为油。转化为HCl盐(2N HCl的乙醚溶液，lequiv.)，得到盐(81mg，63％)，为黄色固体；¹H NMR(500MHz，CD₃OD)δ8.54-8.53(d，J＝4.7Hz，2H)，8.41(s，1H)，7.99-7.98(d，J＝5.0Hz，2H)，3.89-3.88(m，2H)，3.66-3.64(m，2H)，3.51-3.50(m，6H)，3.38-3.36(m，2H)，2.15-2.14(m，2H)，1.98-1.97(m，4H)；¹³C NMR(75 MHz，CD₃OD)δ149.0，148.6，146.2，145.6，135.1，132.5，119.8，49.1，47.1，46.4，45.8，25.9，25.0(一个脂族碳信号被溶剂掩蔽)；HPLC t_R＝9.64min，100％；ES-MS：(M+H)＝325m/z。

实施例41

4-(6-(1，4-二氮杂环庚烷-1-基)-5-(吡咯烷-1-基)吡嗪-2-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶

步骤A：叔丁基4-(3-(吡咯烷-1-基)-6-(三甲基锡烷基)吡嗪-2-基)-1，4-二氮杂环庚烷-1-羧酸酯

从步骤A产物(实施例40)和六甲基二锡开始，按照一般工艺7。经过柱色谱纯化(12g ISCO柱，洗脱用己烷和乙酸乙酯；梯度100％己烷至80％己烷)，得到芳基锡烷(190mg，79％)，为浓稠的油，放置后固化：¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.64-7.63(d，J＝3.7Hz，1H)，3.58-3.53(m，4H)，3.47-3.41(m，2H)，3.36-3.22(m，6H)，1.92-1.87(m，4H)，1.85-1.81(m，2H)，1.47-1.45(d，J＝4.1Hz，9H)，0.36-0.18(t，J＝26.8Hz，9H)。

步骤B：叔丁基4-(3-(吡咯烷-1-基)-6-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)吡嗪-2-基)-1，4-二氮杂环庚烷-1-羧酸酯

从步骤A产物和4-溴吖吲哚开始，按照一般工艺8制备。经过柱色谱纯化(12g ISCO柱，洗脱用己烷和乙酸乙酯；梯度100％己烷至0％己烷)，得到偶联产物(86mg，50％)，为黄色泡沫状固体，含有一些PPh3残余物：¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ9.11(brs，1H)，8.91(s，1H)，8.35-8.34(d，J＝4.9Hz，1H)，7.48-7.47(m，1H)，7.38-7.37(m，1H)，7.04-7.02(m，1H)，3.69-3.60(m，4H)，3.56-3.46(m，7H)，3.38-3.36(m，1H)，2.05-1.93(m，6H)，1.45-1.44(d，J＝4.6Hz，9H)。

步骤C：从步骤B产物开始按照与步骤C(实施例40)所述相似的方式制备。经过柱色谱纯化(4g ISCO柱，洗脱用二氯甲烷和10∶1甲醇/氢氧化铵混合物；梯度100％二氯甲烷至90％然后85％二氯甲烷)，得到标题化合物(48mg，72％)，为黄色固体；¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ9.37(brs，1H)，8.39(s，1H)，8.35-8.34(d，J＝5.1Hz，1H)，7.59-7.58(d，J＝5.1Hz，1H)，7.38-7.37(d，J＝3.6Hz，1H)，7.06-7.05(d，J＝3.6Hz，1H)3.67-3.64(m，4H)，3.49-3.47(m，4H)，3.08-3.06(m，2H)，2.95-2.93(m，2H)，1.98-1.95(m，4H)，1.91-1.86(m，2H)；¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)δ149.6，147.1，146.7，143.2，138.2，138.0，132.4，124.8，116.9，113.3，101.8，52.9，49.4，49.3，48.4，48.2，31.0，25.1(一个脂族碳信号被溶剂掩蔽)；HPLC t_R＝10.7min，100％；ES-MS：(M+H)＝364m/z。

实施例42

5-(6-(1，4-二氮杂环庚烷-1-基)-5-(吡咯烷-1-基)吡嗪-2-基)-1H-吲唑盐酸盐

步骤A：叔丁基4-(6-(1H-吲唑-5-基)-3-(吡咯烷-1-基)吡嗪-2-基)-1，4-二氮杂环庚烷-1-羧酸酯

从步骤A产物(实施例41)和5-溴吲唑开始，按照一般工艺8制备制备。经过柱色谱纯化(12g ISCO柱，洗脱用己烷和乙酸乙酯；梯度100％己烷至0％己烷)，得到偶联产物(105mg，46％)，为黄色泡沫状固体，含有一些PPh₃残余物。无需鉴别直接进行。

步骤B：从步骤A产物开始按照与步骤C(实施例40)所述相似的方式制备。经过柱色谱纯化(4g ISCO柱，洗脱用二氯甲烷和10∶1甲醇/氢氧化铵混合物；梯度100％二氯甲烷至90％然后85％二氯甲烷)，得到标题化合物的游离碱。转化为HCl盐(2N HCl的乙醚溶液，lequiv.)，得到盐(73mg，81％)，为黄色固体；¹H NMR(500MHz，CD₃OD)8.40(s，1H)，8.18(s，1H)，8.01-7.99(d，J＝8.7Hz，1H)，7.84(s，1H)，7.67-7.65(d，J＝8.7Hz，1H)，3.97-3.96(m，2H)，3.81-3.80(m，4H)，3.72-3.71(m，2H)，3.62-3.61(m，2H)，3.45-3.44(m，2H)，2.24-2.23(m，2H)，2.14-2.13(m，4H)；¹³C NMR(75MHz，CD₃OD)δ151.1，142.6，140.2，129.6，126.8，120.2，118.0，112.6，52.7，47.3，47.1，26.8，26.7(由于重叠丢失三个芳族信号；两个脂族信号被溶剂掩蔽)；HPLC t_R＝11.69min，98.4％；ES-MS：(M+H)＝364m/z。

实施例43

5-(6-(1，4-二氮杂环庚烷-1-基)-5-(吡咯烷-1-基)吡嗪-2-基)-3-甲基-1H-吲唑盐酸盐

步骤A：1-(5-溴-2-氟苯基)乙醇

在0℃氮粘性，历经30min将甲基溴化镁(3M四氢呋喃溶液，18mL，54.2mmol)加入到5-溴-2-氟苯甲醛(10.0g，49.3mmol)的溶液中。使所得溶液历经14h升温至室温，此时TLC分析显示没有剩余的原料，有两种新产物。将混合物用水淬灭，用乙酸乙酯稀释，除去有机相，经硫酸钠干燥。然后浓缩，经过柱色谱纯化(120g ISCO柱，洗脱用己烷和乙酸乙酯；梯度100％己烷至50％己烷)。收集第二级分作为产物，得到醇(5.8g，53％)，为油；¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ7.65-7.63(dd，J＝6.5，2.6Hz，1H)，7.36-7.33(ddd，J＝8.7，4.6，2.6Hz，1H)，6.93-6.89(dd，J＝9.9，8.7Hz，1H)，5.17-5.16(m，1H)，1.91-1.90(m，1H)，1.51-1.49(d，J＝6.4Hz，3H)。

步骤B：1-(5-溴-2-氟苯基)乙酮

将三氧化铬(2.6g，26.0mmol)溶于水(3.7mL)，在冰浴中冷却。历经5min加入浓硫酸(2.2mL)，溶液用水(7.4mL)稀释。然后在0-20℃下历经30min将混合物滴加到步骤A产物(5.7g，26.0mmol)的丙酮(17mL)溶液中。使所得溶液历经14h升温至室温。然后在乙醚(300mL)与水(300mL)之间分配，除去有机相。水相用乙醚(100mL)洗涤，合并有机相，经硫酸钠干燥，然后浓缩，得到酮(5.2g，92％)，为深色液体：¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ8.01-7.98(dd，J＝6.2，2.3Hz，1H)，7.64-7.59(m，1H)，7.08-7.02(t，J＝10.0Hz，1H)，2.65-2.63(d，J＝4.9Hz，3H)。

步骤C：5-溴-3-甲基-1H-吲唑

将肼(20mL)和步骤B产物(5.1g，2 4.0mmol)加热至回流，保持24h。然后将混合物冷却至室温，用水(250mL)淬灭。生成沉淀；过滤分离之，用水洗涤，然后将固体溶于乙酸乙酯。将有机混合物肼硫酸钠干燥，然后浓缩，得到吲唑(3.54g，71％)，为米色固体；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ9.95(brs，1H)，7.83-7.82(dd，J＝1.7，0.4Hz，1H)，7.47-7.44(dd，J＝8.7，1.8Hz，1H)，7.33-7.31(d，J＝8.7Hz，1H)，2.56(s，3H)；ES-MS：(M+H)＝211，213m/z。

步骤D：叔丁基4-(6-(3-甲基-1H-吲唑-5-基)-3-(吡咯烷-1-基)吡嗪-2-基)-1，4-二氮杂环庚烷-1-羧酸酯

从步骤A产物(实施例41)和步骤C产物开始，按照一般工艺8制备。经过柱色谱纯化(12g ISCO柱，洗脱用己烷和乙酸乙酯；梯度100％己烷至25％己烷)，得到偶联产物(109mg，47％)，为黄色泡沫状固体；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ9.80(brs，1H)，8.18-8.16(m，2H)，8.00-7.97(d，J＝8.7Hz，1H)，7.48-7.45(d，J＝8.7Hz，1H)，3.70-3.65(m，4H)，3.59-3.53(m，2H)，3.46-3.33(m，6H)，2.64(s，3H)，1.99-1.94(m，6H)，1.46-1.44(d，J＝5.3Hz，9H)。

步骤E：从步骤D产物开始按照与步骤C(实施例40)所述相似的方式制备。经过柱色谱纯化(4g ISCO柱，洗脱用二氯甲烷和10∶1甲醇/氢氧化铵混合物；梯度100％二氯甲烷至90％然后80％二氯甲烷)，得到标题化合物的游离碱。转化为HCl盐(2N HCl的乙醚溶液，lequiv.)，得到盐(94mg，99％)，为黄色固体；¹H NMR(500MHz，CD₃OD)δ8.43(s，1H)，8.16-8.14(d，J＝8.9Hz，1H)，8.00(s，1H)，7.68-7.66(d，J＝8.9Hz，1H)，3.97-3.96(m，2H)，3.82-3.81(m，4H)，3.72-3.70(m，2H)，3.61-3.60(m，2H)，3.45-3.43(m，2H)，2.72(s，3H)，2.23-2.21(m，2H)，2.13-2.12(m，4H)；¹³C NMR(125MHz，CD₃OD)δ150.8，144.3，142.5，142.4，139.4，129.8，128.3，123.2，119.3，118.0，112.5，52.2，46.8，46.6，26.4，26.3，11.2(两个脂族信号被溶剂掩蔽)；HPLC t_R＝12.0min，98.1％；ES-MS：(M+H)＝378m/z。

实施例44

2-(4-(6-(吡啶-4-基)-3-(吡咯烷-1-基)吡嗪-2-基)哌嗪-1-基)乙醇)三盐酸盐

步骤A：2-(4-(6-溴-3-(吡咯烷-1-基)吡嗪-2-基)哌嗪-1-基)乙醇

从步骤B产物(实施例38)和1-甲基高哌嗪开始，按照一般工艺4(方法1)制备，经过柱色谱纯化(12g ISCO柱，洗脱用二氯甲烷和甲醇；梯度100％二氯甲烷至85％二氯甲烷)制备，得到二氨基吡嗪(186mg，72％)，为黄色的油；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.73(s，1H)，3.66-3.63(t，J＝5.3Hz，2H)，3.42-3.38(t，J＝6.7Hz，4H)，3.23(br，4H)，2.66-2.59(m，6H)，1.94-1.89(m，4H)。

步骤B：从步骤A产物和4-吡啶基代硼酸开始，按照一般工艺6(方法2)制备。经过柱色谱纯化(12g ISCO柱，洗脱用二氯甲烷和10％氢氧化铵的甲醇溶液；梯度100％二氯甲烷至80％二氯甲烷)，继之以制备型TLC纯化(洗脱用90∶10∶1二氯甲烷/甲醇/氢氧化铵)，得到标题化合物的游离碱。用2M HCl的二乙醚溶液转化为三-HCl盐，继之以用二氯甲烷/己烷研制，得到盐(141mg，59％)，为橙色-黄色固体；¹H NMR(300MHz，CD₃OD)δ8.78(br，2H)，8.67-8.62(m，3H)，3.97(br，4H)，3.86-3.77(m，6H)，3.41-3.31(m，6H)，2.09(br，4H)；¹³C NMR(75MHz，CD₃OD)δ154.9，148.4，148.1，142.9，133.5，132.0，123.2，60.2，56.9，52.9，52.2，47.4，23.7；HPLC t_R＝9.1min，＞99％；ES-MS：(M+H)＝355m/z。

实施例45

N-(哌啶-3-基)-6-(吡啶-4-基)-3-(吡咯烷-1-基)吡嗪-2-胺二盐酸盐

步骤A：叔丁基3-(6-溴-3-(吡咯烷-1-基)吡嗪-2-基氨基)哌啶-1-羧酸酯

从步骤B产物(实施例38)和3-氨基-N-Boc-哌啶开始，按照一般工艺4(方法2)制备，产物经过柱色谱纯化(12g ISCO柱，洗脱用己烷和乙酸乙酯；梯度100％己烷至40％己烷历经30min，流速25mL/min)制备，得到二氨基吡嗪(168mg，24％)，为澄清的油；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.48(s，1H)，4.12-4.06(brs，1H)，3.67-3.56(brs，2H)，3.47-3.21(brm，7H)，1.93-1.83(m，5H)，1.41-1.29(m，11H)。

步骤B：叔丁基3-(6-(吡啶-4-基)-3-(吡咯烷-1-基)吡嗪-2-基氨基)哌啶-1-羧酸酯

从步骤A产物和4-吡啶基代硼酸开始，按照一般工艺6(方法2)制备，产物经过柱色谱纯化(12g ISCO柱，洗脱用己烷和乙酸乙酯；梯度90％己烷至10％己烷历经30min，流速25mL/min)制备，得到偶联产物(95mg，57％)，为黄色的油；¹H NMR(300MHz，CD₃OD)δ8.49-8.48(d，J＝5.4Hz，2H)，8.05(s，1H)，7.97(brs，2H)，4.11-4.07(m，1H)，3.59-3.44(m，7H)，2.04-1.92(m，5H)，1.88-1.78(m，2H)，1.64-1.59(m，1H)，1.48-1.36(m，4H)，1.27-1.22(m，6H)。

步骤C：将步骤B产物(95mg，0.24mmol)在TFA(2mL)中搅拌2h，反应混合物浓缩，在二氯甲烷与饱和碳酸钠溶液之间分配。除去有机层，经硫酸钠干燥，浓缩，得到黄色的油。将这种油用2N HCl的二乙醚溶液处理，得到标题化合物(73mg，76％)，为橙色固体；¹H NMR(500MHz，CD₃OD)δ8.79-8.77(d，J＝6.9Hz，2H)，8.70-8.69(d，J＝6.9Hz，2H)，8.29(s，1H)，4.67-4.63(m，1H)，3.99-3.97(m，4H)，3.71-3.67(dd，J＝12.0，3.2Hz1H)，3.41-3.38(m，1H)，3.10-3.14(m，2H)，2.23-2.20(m，1H)，2.14-2.04(m，6H)，1.95-1.90(m，1H)；¹³C NMR(125MHz，CD₃OD)δ154.4，146.2，144.5，142.5，133.0，124.0，123.2，52.7，47.2，47.0，45.0，28.8，26.5，22.2；HPLC t_R＝9.3min，＞99％；ES-MS：(M+H)＝325m/z。

实施例46

3-(哌啶-4-基氧基)-5-(吡啶-4-基)-2-(吡咯烷-1-基)吡嗪

步骤A：叔丁基4-(6-溴-3-(吡咯烷-1-基)吡嗪-2-基氧基)哌啶-1-羧酸酯

从步骤B产物(实施例38)和4-羟基-N-Boc-哌啶开始，按照一般工艺5制备，产物经过柱色谱纯化(40g ISCO柱，洗脱用己烷和乙酸乙酯；梯度100％己烷至30％己烷历经40min，流速40mL/min)，得到烷氧基吡嗪(1.10g，52％)，为黄色固体；¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ7.64(s，1H)，5.26-5.23(qui，J＝3.6Hz，1H)，3.65-3.63(m，5H)，3.61-3.58(m，1H)，3.45-3.40(m，2H)，1.99-1.95(m，2H)，1.93-1.91(m，4H)，1.80-1.75(m，2H)，1.47(s，9H)。

步骤B：叔丁基4-(6-(吡啶-4-基)-3-(吡咯烷-1-基)吡嗪-2-基氧基)哌啶-1-羧酸酯

从步骤A产物和4-吡啶基代硼酸开始，按照一般工艺6(方法2)制备，产物经过柱色谱纯化(12g ISCO柱，洗脱用己烷和乙酸乙酯；梯度100％己烷至20％己烷历经30min，流速25mL/min)，得到偶联产物(103mg，51％)，为黄色的油；¹H NMR(500MHz，CD₃OD)δ8.48-8.47(d，J＝5.8Hz，2H)，8.25(s，1H)，7.90-7.88(dd，J＝4.9，1.4Hz，2H)，5.48-5.45(m，1H)，3.81-3.78(t，J＝6.8Hz，4H)，3.66-3.64(brm，2H)，3.53-3.52(brm，2H)，2.10-2.05(m，2H)，2.01-1.96(m，4H)，1.86-1.83(m，2H)，1.47(s，9H)。

步骤C：从步骤B产物开始按照与步骤C(实施例45)所述相似的方式制备，得到标题化合物(62mg，79％)，为白色固体；¹H NMR(500MHz，CD₃OD)δ8.48-8.47(dd，J＝4.7，1.5Hz，2H)，8.22(s，1H)，7.88-7.86(dd，J＝4.7，1.5Hz，2H)，5.39-5.34(m，1H)，3.81-3.78(t，J＝6.5Hz，4H)，3.10-3.06(m，2H)，2.86-2.81(m，2H)，2.15-2.11(m，2H)，2.01-1.95(m，4H)，1.86-1.79(m，2H)；¹³C NMR(125MHz，CD₃OD)δ150.3，148.5，147.2，147.1，132.6，132.4，120.3，72.9，50.7，44.3，32.2，26.4；HPLC t_R＝9.5min，＞99％；ES-MS：(M+H)＝326m/z。

实施例47

4-(6-(哌啶-4-基氧基)-5-(吡咯烷-1-基)吡嗪-2-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶

步骤A：叔丁基4-(3-(吡咯烷-1-基)-6-(三甲基锡烷基)吡嗪-2-基氧基)哌啶-1-羧酸酯

从步骤A产物(实施例46)和六甲基二锡开始，按照一般工艺7制备。经过柱色谱纯化(12g ISCO柱，洗脱用己烷和乙酸乙酯；梯度100％己烷至60％己烷历经30min，流速25mL/min)，得到芳基锡烷(285mg，79％)，为无色的油；¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ7.59(t，J＝4.2Hz，1H)，5.32(m，1H)，3.68-3.65(t，J＝6.7Hz，4H)，3.62-3.57(m，2H)，3.47-3.44(m，2H)，1.98-1.88(m，6H)，1.83-1.78(m，2H)，1.47(s，9H)，0.31-0.19(s，9H)。

步骤B：叔丁基4-(3-(吡咯烷-1-基)-6-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)吡嗪-2-基氧基)哌啶-1-羧酸酯

从步骤A产物和4-溴吖吲哚开始，按照一般工艺8制备。经过柱色谱纯化(12g ISCO柱，洗脱用己烷和乙酸乙酯；梯度100％己烷至0％己烷历经30min，流速25mL/min)，得到偶联产物(118mg，45％)，为无色的油；¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ8.31(s，1H)，8.20-8.19(d，J＝5.3Hz，1H)，7.51-7.50(d，J＝5.2Hz，1H)，7.42-7.41(d，J＝3.5Hz，1H)，6.98-6.97(d，J＝3.5Hz，1H)，5.52-5.49(m，1H)，3.84-3.81(t，J＝6.5Hz，4H)，3.71-3.67(m，2H)，3.55-3.50(m，2H)，2.15-2.09(m，2H)，2.03-1.99(m，4H)，1.96-1.89(m，2H)，1.49(s，9H)。

步骤C：从步骤B产物开始按照与步骤C(实施例45)所述相似的方式制备。经过柱色谱纯化(12g ISCO柱，洗脱用二氯甲烷和甲醇/氨混合物(10∶1)；梯度100％二氯甲烷至80％二氯甲烷历经30min，流速25mL/min)，得到标题化合物(50mg，55％)，为黄色固体；¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ9.72(brs，1H)，8.39-8.38(d，J＝4.1Hz，1H)，8.33-8.32(d，J＝5.1Hz，1H)，7.51-7.50(d，J＝4.1Hz，1H)，7.38-7.37(d，J＝3.6Hz，1H)，7.03-7.02(d，J＝3.6Hz，1H)，5.44-5.39(m，1H)，3.84-3.81(t，J＝6.7Hz，4H)，3.18-3.14(m，2H)，2.91-2.86(m，2H)，2.19-2.17(m，2H)，2.00-1.95(m，4H)，1.87-1.81(m，2H)；¹³C NMR(125MHz，CDCl₃)δ149.7，147.0，145.2，143.1，138.0，134.0，133.3，124.7，116.5，112.6，101.6，71.4，49.4，43.9，31.9，25.5；HPLC t_R＝9.5min，＞99％；ES-MS：(M+H)＝365m/z。

实施例48

1-甲基-4-(3-(哌啶-1-基)-6-(吡啶-4-基)吡嗪-2-基)-1，4-二氮杂环庚烷盐酸盐

步骤A：2-(哌啶-1-基)吡嗪

从氯吡嗪和哌啶开始，按照一般工艺2制备，得到氨基吡嗪(1.74g，粗产物)，为黄褐色固体；¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ8.13-8.12(d，J＝1.4Hz，1H)，8.03-8.02(dd，J＝2.5，1.5Hz，1H)，7.77-7.76(d，J＝2.6Hz，1H)，3.58-3.56(m，4H)，1.67-1.63(m，6H)；ES-MS：(M+H)＝164m/z。

步骤B：3，5-二溴-2-(哌啶-1-基)吡嗪

从步骤A产物和N-溴代琥珀酰亚胺开始，按照一般工艺3制备，得到二溴吡嗪(1.0g，31％)，为黄色固体；¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ8.15(s，1H)，3.36-3.34(m，4H)，1.74-1.70(m，4H)，1.67-1.62(m，2H)；ES-MS：(M+H)＝320m/z。

步骤C：1-(6-溴-3-(哌啶-1-基)吡嗪-2-基)-4-甲基-1，4-二氮杂环庚烷

从步骤B产物和1-甲基高哌嗪开始，按照一般工艺4(方法1)制备，经过柱色谱纯化(12g ISCO柱，洗脱用二氯甲烷和甲醇/浓氢氧化铵(10∶1)；梯度100％二氯甲烷至90％二氯甲烷)，得到二氨基吡嗪(0.23g，65％)，为绿黄色粘性的油；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.63(s，1H)，3.88-3.84(t，J＝4.8Hz，2H)，3.75-3.71(t，J＝6.1Hz，2H)，3.06-3.03(m，4H)，2.62-2.59(m，2H)，2.55-2.51(t，J＝5.6Hz，2H)，2.36(s，3H)，1.97-1.90(m，2H)，1.67-1.66(m，6H)；ES-MS：(M+H)＝354m/z。

步骤D：从步骤C产物和4-吡啶基代硼酸开始，按照一般工艺6(方法2)制备，经过柱色谱纯化(12g ISCO柱，洗脱用二氯甲烷和甲醇/浓氢氧化铵(10∶1)；梯度100％二氯甲烷至90％二氯甲烷)制备，得到标题化合物的游离碱。使用1M HCl的乙醚溶液转化为HCl盐，得到盐(56mg，21％)，为红色固体；¹H NMR(500MHz，CD₃OD)δ8.62-8.61(d，J＝4.5Hz，2H)，8.49(s，1H)，8.24-8.218(d，J＝5.5Hz，2H)，3.93-3.91(m，2H)，3.77-3.32(m，10H)，2.93(s，3H)，2.27-2.22(m，2H)，1.73-1.67(m，6H)；¹³C NMR(75MHz，CD₃OD)δ150.2，149.6，148.1，147.3，137.6，132.7，122.1，57.9，57.6，50.0，49.5，45.5，45.2，26.9，26.1，25.7；HPLC t_R＝10.35min，96.5％；ES-MS：(M+H)＝353m/z。

实施例49

3-(哌啶-1-基)-N-(哌啶-3-基)-6-(吡啶-4-基)吡嗪-2-胺

步骤A：6-溴-3-(哌啶-1-基)-N-(哌啶-3-基)吡嗪-2-胺

从步骤B产物(实施例48)和3-氨基-1-Boc-哌啶开始，按照一般工艺4(方法2)制备。得到粗产物，为褐色糖浆物(0.54g)，无需纯化即可用于下一步。

步骤B：叔丁基3-(3-(哌啶-1-基)-6-(吡啶-4-基)吡嗪-2-基氨基)哌啶-1-羧酸酯

从步骤A产物和4-吡啶基代硼酸开始，按照一般工艺6(方法2)。得到粗产物，为褐黄色油(0.18g，41％)制备，无需纯化即可用于下一步。

步骤C：从步骤B产物开始按照与步骤C(实施例22)所述相似的方式制备，经过柱色谱纯化(12g ISCO柱，洗脱用二氯甲烷和甲醇/浓氢氧化铵(10∶1)；梯度100％二氯甲烷至90％二氯甲烷)，得到标题化合物(41mg，29％)，为黄色固体；¹H NMR(500MHz，DMSO-d₆)δ8.55-8.54(dd，J＝4.8，1.4Hz，2H)，8.12(s，1H)，8.03-8.01(dd，J＝4.7，1.4Hz，2H)，4.90(brs，1H)，4.64-4.56(brs，1H)，4.20-4.15(m，1H)，3.34-3.32(d，J＝9.8Hz，1H)，3.14-3.12(t，J＝5.0Hz，4H)，2.97-2.95(brd，J＝12.5Hz，1H)，2.67-2.63(m，1H)，2.59-2.54(dd，J＝11.6，9.3Hz，1H)，2.11-2.09(brd，J＝12.0Hz，1H)，1.82-1.72(m，5H)，1.71-1.57(m，4H)；¹³CNMR(125MHz，CD₃OD)δ150.4，149.7，148.2，147.5，140.9，127.6，121.7，51.8，50.9，48.9，46.9，31.8，26.9，26.1，25.6；HPLC t_R＝11.12min，96.7％；ES-MS：(M+H)＝339m/z。

实施例50

1-(3-(氮杂环庚烷-1-基)-6-(吡啶-4-基)吡嗪-2-基)-4-甲基-1，4-二氮杂环庚烷盐酸盐

步骤A：1-(吡嗪-2-基)氮杂环庚烷

从氯吡嗪和六亚甲基亚胺开始，按照-般工艺2制备，得到氨基吡嗪(1.74g，粗产物)，为黄褐色油；ES-MS：(M+H)＝178m/z。

步骤B：1-(3，5-二溴吡嗪-2-基)氮杂环庚烷

从步骤A产物和N-溴代琥珀酰亚胺开始，按照一般工艺3制备，得到二溴吡嗪(0.78g，42％)，为黄褐色固体。无需鉴别即可直接反应。

步骤C：1-(3-(氮环庚烷-1-基)-6-溴吡嗪-2-基)-4-甲基-1，4-二氮杂环庚烷

从步骤B产物和1-甲基高哌嗪开始，按照一般工艺4(方法1)制备，经过柱色谱纯化(12g ISCO柱，洗脱用二氯甲烷和甲醇/浓氢氧化铵(10∶1)；梯度100％二氯甲烷至90％二氯甲烷)，得到二氨基吡嗪(0.20g，54％)，为褐黄色粘性的油；¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ7.63(s，1H)，3.67-3.65(t，J＝4.7Hz，2H)，3.58-3.56(t，J＝6.0Hz，2H)，3.45-3.43(t，J＝5.8Hz，4H)，2.59-2.54(m，4H)，2.36(s，3H)，1.94-1.89(m，2H)，1.67(brs，4H)，1.55-1.51(m，4H)；ES-MS：(M+H)＝368m/z。

步骤D：从步骤C产物和4-吡啶基代硼酸开始，按照一般工艺6(方法2)制备，经过柱色谱纯化(12g ISCO柱，洗脱用二氯甲烷和甲醇/浓氢氧化铵(10∶1)；梯度100％二氯甲烷至90％二氯甲烷)制备，得到标题化合物的游离碱。使用1M HCl的乙醚溶液转化为HCl盐，得到盐(110mg，50％)，为红色固体；¹H NMR(500MHz，CD₃OD)δ8.71(s，1H)，8.69-8.64(d，J＝7.0Hz，2H)，8.56-8.54(d，J＝7.0Hz，2H)，4.13-4.08(m，1H)，3.95-3.82(m，5H)，3.72-3.58(m，4H)，3.50-3.44(m，1H)，3.27-3.23(m，1H)，2.94(s，3H)，2.23-2.18(m，2H)，1.87-1.74(m，4H)，1.50-1.59(m，4H)；¹³C NMR(125MHz，CD₃OD)δ155.6，150.5，145.4，142.2，136.6，132.1，122.4，57.8，57.4，51.5，49.9，46.0，45.2，29.4，27.7，25.6；HPLC t_R＝10.91min，95.7％；ES-MS：(M+H)＝367m/z。

实施例51

3-(氮杂环庚烷-1-基)-N-(哌啶-3-基)-6-(吡啶-4-基)吡嗪-2-胺二盐酸盐

步骤A：叔丁基3-(3-(氮杂环庚烷-1-基)-6-溴吡嗪-2-基氨基)哌啶-1-羧酸酯：

从步骤B产物(实施例50)和3-氨基-1-Boc-哌啶开始，按照一般工艺4制备。得到粗产物，为黄褐色粘性的油(175mg)，无需纯化即可用于下一步。

步骤B：叔丁基3-(3-(氮杂环庚烷-1-基)-6-(吡啶-4-基)吡嗪-2-基氨基)哌啶-1-羧酸酯

从步骤A产物和4-吡啶基代硼酸开始，按照一般工艺6(方法2)制备。得到粗产物，为褐色粘性的油(124mg)，无需纯化即可用于下一步。

步骤C：从步骤B产物开始按照与步骤C(实施例22)所述相似的方式制备，经过柱色谱纯化(12g ISCO柱，洗脱用二氯甲烷和甲醇/浓氢氧化铵(10∶1)；梯度100％二氯甲烷至90％二氯甲烷)，得到游离碱。使用1M HCl的乙醚溶液转化为双-HCl盐，得到标题化合物(43mg，37％)，为红色固体；¹H NMR(500MHz，CD₃OD)δ8.70-8.69(d，J＝6.9Hz，2H)，8.65-8.63(d，J＝7.0Hz，2H)，8.48(s，1H)，4.56-4.50(m，1H)，3.79-3.70(m，5H)，3.44-3.40(m，1H)，3.06-3.01(td，J＝12.0，3.5Hz，1H)，2.99-2.94(m，1H)，2.22-2.19(m，1H)，2.11-1.98(m，2H)，1.85-1.77(m，5H)，1.64-1.63(m，4H)；¹³C NMR(125MHz，CD₃OD)δ155.5，149.6，145.3，142.2，133.2，130.7，123.0，52.1，47.8，46.9，45.1，29.4，29.3，28.4，22.6；HPLC t_R ＝11.50min，97.4％；ES-MS：(M+H)＝353m/z。

实施例52

4-(3-(4-甲基-1，4-二氮杂环庚烷-1-基)-5-(吡啶-4-基)吡嗪-2-基)吗啉三盐酸盐

步骤A：4-(吡嗪-2-基)吗啉

从2-氯吡嗪和吗啉开始，按照一般工艺2制备，得到氨基吡嗪(953mg，100％)，为褐色固体，¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ8.14-8.13(m，1H)，8.09-8.08(m，1H)，7.90-7.89(m，1H)，3.85-3.82(t，J＝4.9Hz，4H)，3.58-3.55(t，J＝4.9Hz，4H)。

步骤B：4-(3，5-二溴吡嗪-2-基)吗啉

从步骤A产物和N-溴代琥珀酰亚胺开始，按照一般工艺3制备。反应完全后，将混合物倒入冰水(50g)中，搅拌1h，用碳酸氢钠中和，用乙酸乙酯萃取(3×25mL)，有机层经硫酸钠干燥，浓缩。经过柱色谱纯化(40g ISCO柱，洗脱用二氯甲烷和甲醇；梯度100％二氯甲烷至80％二氯甲烷)，得到二溴吡嗪(531mg，28％)，为黄-绿色油，¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ8.21(s，1H)，3.87-3.84(t，J＝4.7Hz，4H)，3.44-3.42(t，J＝4.7Hz，4H)。

步骤C：4-(5-溴-3-(4-甲基-1，4-二氮杂环庚烷-1-基)吡嗪-2-基)吗啉

从步骤B产物和1-甲基高哌嗪开始，按照一般工艺4(方法2)制备。经过柱色谱纯化(12g ISCO柱，洗脱用二氯甲烷和甲醇；梯度100％二氯甲烷至85％二氯甲烷)，得到二氨基吡嗪(144mg，59％)，为黄色的油；¹H NMR(500 MHz，CDCl₃)δ7.67(s，1H)，3.84-3.80(m，6H)，3.71-3.69(t，J＝6.0Hz，2H)，3.16-3.14(m，4H)，2.63-2.61(m，2H)，2.56-2.53(m，2H)，2.37(s，3H)，1.95-1.92(m，2H)。

步骤D：从步骤C产物和4-吡啶基代硼酸开始，按照一般工艺6(方法2)制备。经过柱色谱纯化(40g/12g ISCO柱，洗脱用二氯甲烷和10％氢氧化铵的甲醇溶液；梯度100％二氯甲烷至80％二氯甲烷)，继之以用2M HCl的二乙醚溶液转化为三-HCl盐，用二氯甲烷/己烷研制，得到标题化合物(28mg，49％)，为橙色固体；¹H NMR(300MHz，CD₃0D)δ8.79-8.76(m，2H)，8.70(s，1H)，8.63-8.60(m，2H)，4.40-4.27(m，1H)，3.95-3.72(m，9H)，3.55-3.47(m，6H)，2.95(s，3H)，2.26-2.25(m，2H)；¹³C NMR(125MHz，CD₃OD)δ155.3，150.5，147.6，143.2，137.7，134.9，123.6，67.9，57.9，57.7，57.6，45.6，45.4，26.0(一个脂族碳信号被溶剂掩蔽)；HPLC t_R＝13.4min，＞99％；ES-MS：(M+H)＝355m/z。

递送方式：

式(I)化合物可以被掺入到各种类型的眼科制剂中供递送。式(I)化合物可以被直接递送至眼(例如：局部滴眼剂或软膏剂；缓释装置，例如植入在盲管中或者植入于巩膜附近或眼内的药物递送海绵；眼周、结膜、sub-tenons、房室内、玻璃体内或小管内注射)或者全身递送(例如：口服、静脉内、皮下或肌内注射；肠胃外、真皮或鼻递送)，采用本领域普通技术人员熟知的技术。进一步涵盖本发明成分可以被配制在眼内插入件或植入装置中。

式(I)化合物优选地被掺入到局部眼科制剂中，供递送至眼。化合物可以与眼科学上可接受的防腐剂、表面活性剂、粘度增强剂、渗透增强剂、缓冲剂、氯化钠和水联合构成水性无菌的眼科悬液或溶液。将化合物溶于生理学上可接受的等渗水性缓冲液，可以制备眼科溶液制剂。进而，眼科溶液可以包括眼科学上可接受的表面活性剂，以帮助溶解化合物。此外，眼科溶液可以含有增加粘度的成分，例如羟甲基纤维素、羟乙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、甲基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮等，以延长制剂在结膜囊中的留置。也可以使用胶凝剂，包括但不限于革兰胶和黄原胶。为了制备无菌的眼科软膏制剂，将活性成分与防腐剂组合在适当的载体中，例如矿物油、液体羊毛脂或白矿脂。无菌的眼科凝胶制剂可以如下制备，按照已公布的类似眼科制备物的制剂，将化合物悬浮在从例如carbopol-974等的组合制备的亲水性基质中；可以掺入防腐剂和张性剂。

式(I)化合物优选地被配制成局部眼科悬液或溶液，pH约4至8。化合物在组合物中的含量足以降低IOP升高的患者的IOP和/或维持青光眼患者的正常IOP水平。这样的含量在本文中被称为“有效控制IOP的量”，或者更简单的“有效量”。化合物在正常情况下在这些制剂中的含量为0.01至5百分比，按重量/体积计(w/v％)，但是优选为0.25至2w/v％。因而，就局部呈递而言，按照医师的决定，1至2滴这些制剂将被递送至眼表面，每天1至4次。

式(I)化合物也可以与其他青光眼治疗剂联合是哟嘎那，例如但不限于β-阻滞剂、前列腺素类似物、碳酸酐酶抑制剂、α₂激动剂、缩瞳剂和神经保护剂。

提供下列实施例以阐述某些发明实施方式，但是不应被解释为暗示对权利要求的任何限制。实施例1-5中的措辞“式(I)化合物”意味着相信在各实施例中所述制剂适合于任何根据式(I)的化合物。

组合物实施例1

成分浓度(w/v％)式(I)化合物0.01-2％羟丙基甲基纤维素0.5％磷酸氢二钠(无水)0.2％氯化钠0.5％EDTA二钠(乙二胺四乙酸二钠)0.01％聚山梨醇酯800.05％苯扎氯铵0.01％氢氧化钠/盐酸调节pH至7.3-7.4纯净水适量至100％

组合物实施例2

成分浓度(w/v％)式(I)化合物0.01-2％甲基纤维素4.0％磷酸氢二钠(无水)0.2％氯化钠0.5％EDTA二钠(乙二胺四乙酸二钠)0.01％聚山梨醇酯800.05％苯扎氯铵0.01％氢氧化钠/盐酸调节pH至7.3-7.4纯净水适量至100％

组合物实施例3

成分浓度(w/v％)式(I)化合物0.01-2％瓜儿胶0.4-6.0％磷酸氢二钠(无水)0.2％氯化钠0.5％EDTA二钠(乙二胺四乙酸二钠)0.01％聚山梨醇酯80 0.05％苯扎氯铵0.01％氢氧化钠/盐酸调节pH至7.3-7.4纯净水适量至100％

组合物实施例4

成分浓度(w/v％)式(I)化合物0.01-2％白矿脂和矿物油和羊毛脂软膏一致性磷酸氢二钠(无水)0.2％氯化钠0.5％EDTA二钠(乙二胺四乙酸二钠)0.01％聚山梨醇酯800.05％苯扎氯铵0.01％氢氧化钠/盐酸调节pH至7.3-7.4

ROCK-II抑制数据：

借助体外测定法评价某些式(I)化合物抑制rho激酶的能力。使用人重组Rho激酶(ROKα/ROCK-II，(aa 11-552)，人活性，目录#14-451，Upstate Biotechnology Co.，Lake Placid、NY)、MgCl₂/ATP鸡尾酒试剂和酶底物(Upstate)。

在96-孔平板格式中，利用Biomek 2000Robotic WO rkstation(Beckman Instruments，Palo Alto，CA)进行荧光极化测定法。如下利用IMAP ROCK II药盒(Molecular Devices，Sunnyvale，CA)进行测定。所用底物和ATP浓度分别为200nM和10μM，而酶浓度为3.96×10^-3单位每孔。用由供应商提供的反应缓冲液进行底物、酶和ATP稀释。将供试化合物稀释在10∶10DMSO-乙醇(vol/vol)中。就真正的测定而言，向黑色透明底的96-孔平板(Costar，Corning，NY)加入各种组分，最终体积为20μL每孔。酶反应(60min，23℃)后，每孔加入60μL结合溶液(IMAP药盒，由供应商提供)，在23℃暗处温育另外30分钟。然后在Analyst^TMHT仪器(Molecular Devices，Sunnyvale，CA)上测量反应混合物的荧光极化。    

然后利用从IDBS(Emeryville，CA)购买的非线性的、反复的、S形-适配的计算机程序分析所生成的数据，正如前人所述(Sharif etal.，J.Pharmacol.Exp.Ther.286：1094-1102，1998；Sharif etal.，J.Pharmacol.Expt.Ther.293：321-328，2000；Sharif et al.，J.Ocular Pharmacol.Ther.18：141-162，2002a；Sharif et al.，J.Pharmac.Pharmacol.54：539-547，2002b)，生成供试化合物的抑制常数。下表3显示在上文“合成”下所列举的实施例化合物的抑制常数。下表3的抑制常数是IC₅₀或Ki(化合物抑制酶活性达最大值的50％的浓度)(Sharif et al.，ibid.)。

表3.所得化合物对人重组ROCK-II酶的酶抑制常数(IC₅₀)

    实施例    IC₅₀(nM)    实施例    IC₅₀(nM)    1    3.0    27    5.2    2    58    28    3.0    3    2.8    29    45    4    0.53    30    0.30    5    25    31    0.053    6    ＞100    32    1.7    7    0.95    33    0.54    8    53    34    3.1    9    22    35    0.94    10    59    36    11    11    17    37    6.7    12    6.9    38    0.33    13    6.4    39    0.16    14    3.5    40    0.33    15    5.5    41    0.021    16    0.82    42    0.033    17    0.21    43    0.11    18    9.6    44    0.078    19    0.064    45    0.25    20    5.6    46    0.084    21    4.2    47    0.054    22    1.1    48    0.56    23    0.68    49    0.30    24    1.7    50    0.02    25    2.4    51    0.19    26    2.1    52    6.3

已经详细描述了本发明及其实施方式。不过，本发明的范围不打算受到在说明书中所描述的任何过程、制造、物质组合物、化合物、方式、方法和/或步骤的特定实施方式的限制。对于所公开的材料可以进行各种修改、取代和变化，而不背离本发明的精神和/或本质特征。因此，本领域普通技术人员将容易从公开内容领会到，按照这类相关的本发明实施方式，可以采用后来的修饰、取代和/或变化，它们基本上实现与本文所述实施方式基本上相同的功能或者达到基本上相同的结果。因而，下列权利要求旨在在它们的范围内涵盖对于本文所公开的过程、制造、物质组合物、化合物、方式、方法和/或步骤的修饰、取代和变化。