(S)－(+)－和(R)－(－)－10,11－二氢－10－羟基－5H－二苯并/b,f/氮杂－5－甲酰胺及其光学富集的混合物的手性反转方法

摘要

本文公开了一种在三取代的膦和二取代的偶氮二甲酸酯存在下在基本惰性的溶剂中用羧酸亲核体手性反转光学纯或光学富集的混合物(S)－(+)－10，11－二氢－10－羟基－5H－二苯并/b，f/氮杂－5－甲酰胺(I)和(R)－(－)－10，11－二氢－10－羟基－5H－二苯并/b，f/氮杂－5－甲酰胺(II)的方法。

说明书

技术领域

本发明涉及(S)-(+)-10，11-二氢-10-羟基-5H-二苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺和(R)-(-)-10，11-二氢-10-羟基-5H-二苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺(分别为式(I)和(II)的化合物)的光学纯或光学富集的(opticallyenriched)混合物的手性反转方法。

背景技术

外消旋的(±)-10，11-二氢-10-羟基-5H-二苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺(III)已被证实具有抗惊厥活性(Schutz，H.等.，Xenobiotica，16，769-778(1986))，并且是已确定的抗癫痫药物奥卡西平(oxcarbazepine)(IV)的主要代谢物。这一外消旋体(III)充当了制备光学纯的(S)-(-)-10-乙酰氧基-10，11-二氢-5H-二苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺(V)和(R)-(+)-10-乙酰氧基-10，11-二氢-5H-二苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺(式VI)的有用的中间体，它们是近来公开的另外两种被认为是抗癫痫药物的具有改良的生物活性的单一对映体(Benes，J.等.，J.Med.Chem.，42，2582-2587(1999))。已证实尤其是(S)-(-)-对映体(V)具有非常有利的抗惊厥性。

合成光学纯的单独的乙酸酯(V)或(VI)的关键步骤包括将外消旋的(±)-10，11-二氢-10-羟基-5H-二苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺(III)拆分成其单独的、光学纯的立体异构体，(S)-(+)-10，11-二氢-10-羟基-5H-二苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺(I)和(R)-(-)-10，11-二氢-10-羟基-5H-二苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺(II)，它们是合成对映纯的(enantiomericallypure)乙酸酯(V)和(VI)的主要中间体。最近公开了这种拆分的一种改良方法，其包括有效分离外消旋的(±)-10，11-二氢-10-羟基-5H-二苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺(III)的非对映异构的酒石酸半酯(Learmonth，D.，PCT/GB02/02176)。

外消旋的(±)-10，11-二氢-10-羟基-5H-二苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺(III)可以容易地通过利用如金属氢化物在醇介质中还原奥卡西平(IV)的酮基来制备。然而，奥卡西平(IV)是一种昂贵的物质，并且即使是非常有效的拆分方法(以单一非对映异构体计算大约98％收率)，例如仅制备(S)-(-)乙酸酯(V)将意味着损失大约50％的贵重原料。因此非常有必要采用一种方法重复利用这种不需要的但昂贵且可以从拆分混合物中回收的(R)-(-)-10，11-二氢-10-羟基-5H-二苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺(II)。然而，由于即使是在非常温和的条件下C10-C11处都容易消除水而产生一种经济价值可以忽略的烯产品，因此这种原料的重复利用非常复杂。尽管这样，可以设想重复利用包括通过Mitsunobu反应将C-10位的手性中心反转并同时酯化(Mitsunobu，O.，Synthesis，1-29，(1981))，其中所回收的不需要的光学富集的(R)-(-)-10，11-二氢-10-羟基-5H-二苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺(II)被直接转化为(S)-(-)-乙酸酯(V)或者类似的具潜在生物学意义的手性反转的酯衍生物。Mitsunobu方法应该优选使用容易得到的溶剂和试剂，并且操作简单同时能获得高收率的手性反转的酯化产物。因此，开发Mitsunobu反转反应对于大规模制备用途是非常有益的，其使得能够通过非常简单的纯化过程获得高纯度和高收率的反转产物，而无需借助于不方便且繁琐的硅胶柱色谱纯化，该过程通常需要除去不需要的试剂以及与Mitsunobu反应有关的副产物，例如三苯基膦、氧化三苯基膦、二取代的偶氮二甲酸酯及其还原的肼衍生物。

发明内容

如今已发现光学富集的(对映体过量范围为1-99.5％)(R)-(-)-10，11-二氢-10-羟基-5H-二苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺(II)或(S)-(+)-10，11-二氢-10-羟基-5H-二苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺(I)与三取代的膦、二取代的偶氮二甲酸酯以及羧酸亲核体在适当的惰性溶剂中的反应得到高收率的手性反转的酯化产物，而没有明显生成不需要的烯产物。出人意料地，该酯化产物可以容易地从其他不需要的Mitsunobu反应副产物中通过从适当的溶剂中结晶分离，而不需要色谱分离，从而给出如以下合成路线所示的本发明方法：

具体实施方式

根据本发明，光学纯或光学富集的(R)-(-)-10，11-二氢-10-羟基-5H-二苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺(II)或(S)-(+)-10，11-二氢-10-羟基-5H-二苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺(I)的C-10位的手性醇官能团通过与适当的羧酸亲核体，例如脂肪族、环状、芳香族或杂芳族羧酸，包括甲酸、乙酸、丙酸、丁酸、环己酸、任选地被取代的苯甲酸、烟酸等，发生Mitsunobu反应而经历手性转换及伴随的酯化作用。该羧酸亲核体可采用相对于光学纯或光学富集的醇(I)或(II)1.02-5的摩尔比例，但优选为在1.05-2.2范围内。该反应是利用三取代的膦和二取代的偶氮二甲酸酯的氧化还原组合来进行的。可用于该反应的典型的膦包括三正丙基膦、三正丁基膦、三苯基膦、三邻甲苯基膦、二苯基(2-吡啶基)膦、(4-二甲基氨基)二苯基膦、三(二甲基氨基)膦等。如果优选，三取代的膦可以支撑在惰性聚合物上。优选的二取代的偶氮二甲酸酯包括偶氮二甲酸二甲酯、偶氮二甲酸二乙酯、偶氮二甲酸二异丙酯、偶氮二甲酸二叔丁酯、1，1’-(偶氮二羰基)二哌啶等。优选地，所述三取代的膦和二取代的偶氮二甲酸酯都以相对于光学纯或光学富集的醇(I)或(II)的等摩尔的量应用。该反应可以在于反应条件下为惰性的溶剂中进行，举例而言，如氯化溶剂，包括二氯甲烷、氯仿和四氯化碳；脂肪醚或环醚，包括乙醚、四氢呋喃和二氧六环；酰胺，包括二甲基甲酰胺；以及烃，包括甲苯等。该反应可以在宽的温度范围下进行，从-78℃到所用溶剂的沸点，但优选是在0℃-30℃范围内。反转的产物可以非常容易地从反应混合物中通过蒸发反应溶剂，并用适当的结晶溶剂置换而分离得到，所述结晶溶剂为例如低级脂肪醇，如含水或不含水的甲醇、乙醇或异丙醇；酯，包括乙酸乙酯和乙酸异丙酯；或酮，包括丙酮或甲基乙基酮。之后，将该反转的产物通过过滤回收，并且如果优选，可以通过从适当的溶剂中浆化(slurrying)或重结晶从而进一步纯化，所述适当的溶剂为例如低级脂肪醇，如含水或不含水的甲醇、乙醇或异丙醇；酯，包括乙酸乙酯和乙酸异丙酯；或酮，包括丙酮或甲基乙基酮。反转的酯化产物的光学纯度可以容易地通过手性HPLC分析来确定。

根据本发明的另一方面，本文提供一种制备通式(VIII)的化合物的方法：

其中R₁是氢、烷基、卤代烷基、芳烷基、环烷基、环烷基烷基、芳基或吡啶基；术语烷基是指包含1到18个碳原子，优选为1到8个碳原子，更优选为1到4个碳原子的直链或支链烃链；术语卤素是指氟、氯、溴或碘；术语环烷基是指含3到6个碳原子，优选为5或6个碳原子的脂环族饱和基团；而术语芳基是指未取代的苯基或被烷氧基、卤素或硝基取代的苯基，所述方法包括通过上述的方法将光学纯或光学富集的(R)-(-)-10，11-二氢-10-羟基-5H-二苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺(II)与相应的羧酸亲核体反应。

根据本发明的另一方面，本文提供一种制备通式(IX)的化合物的方法：

其中R₁是氢、烷基、卤代烷基、芳烷基、环烷基、环烷基烷基、芳基或吡啶基；术语烷基是指包含1到18个碳原子，优选为1到8个碳原子，更优选为1到4个碳原子的直链或支链烃链；术语卤素是指氟、氯、溴或碘；术语环烷基是指含3到6个碳原子，优选为5或6个碳原子的脂环族饱和基团；而术语芳基是指未取代的苯基或被烷氧基、卤素或硝基取代的苯基，所述方法包括通过上述的方法将光学富集的(S)-(+)-10，11-二氢-10-羟基-5H-二苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺(I)与相应的羧酸亲核体反应。

根据我们的申请PCT/GB02/02176中更详细的记载，可以将外消旋的(±)-10，11-二氢-10-羟基-5H-二苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺(III)拆分成其光学纯的立体异构体(S)-(+)-10，11-二氢-10-羟基-5H-二苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺(I)和(R)-(-)-10，11-二氢-10-羟基-5H-二苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺(II)。式(VIII)和(IX)的化合物在我们的美国专利5753646中有更详细的记载，其内容并入此处作为参考。

例如，在本发明中，现在有可能通过以乙酸作为亲核体在偶氮二甲酸二异丙酯和三苯基磷存在下在溶剂如四氢呋喃中进行手性反转并伴随O-乙酰化从而由相反立体化学构型的(R)-(-)-10，11-二氢-10-羟基-5H-二苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺(II)直接生成(S)-(-)-10-乙酰氧基-10，11-二氢-5H-二苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺(I)。

在US 5753646的实施例4到23中所述的化合物可以利用适当的羧酸亲核体通过手性反转以及伴随的酯化反应来制备。因此利用本发明可以生成所有下列化合物：

(1)10-乙酰氧基-10，11-二氢-5H-二苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺

(2)10-苯甲酰氧基-10，11-二氢-5H-二苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺

(3)10-(4-甲氧基苯甲酰氧基)-10，11-二氢-5H-二苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺

(4)10-(3-甲氧基苯甲酰氧基)-10，11-二氢-5H-二苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺

(5)10-(2-甲氧基苯甲酰氧基)-10，11-二氢-5H-二苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺

(6)10-(4-硝基苯甲酰氧基)-10，11-二氢-5H-二苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺

(7)10-(3-硝基苯甲酰氧基)-10，11-二氢-5H-二苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺

(8)10-(2-硝基苯甲酰氧基)-10，11-二氢-5H-二苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺

(9)10-(4-氯苯甲酰氧基)-10，11-二氢-5H-二苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺

(10)10-(3-氯苯甲酰氧基)-10，11-二氢-5H-二苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺

(11)10-(2-乙酰氧基苯甲酰氧基)-10，11-二氢-5H-二苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺

(12)10-丙酰氧基-10，11-二氢-5H-二苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺

(13)10-丁酰氧基-10，11-二氢-5H-二苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺

(14)10-新戊酰氧基-10，11-二氢-5H-二苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺

(15)10-[(2-丙基)戊酰氧基]-10，11-二氢-5H-二苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺

(16)10-[(2-乙基)己酰氧基]-10，11-二氢-5H-二苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺

(17)10-硬脂酰氧基-10，11-二氢-5H-二苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺

(18)10-环戊酰氧基-10，11-二氢-5H-二苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺

(19)10-环己酰氧基-10，11-二氢-5H-二苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺

(20)10-苯基乙酰氧基-10，11-二氢-5H-联苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺

(21)10-(4-甲氧基苯基)乙酰氧基-10，11-二氢-5H-二苯并/b，f/-氮杂-5-甲酰胺

(22)10-(3-甲氧基苯基)乙酰氧基-10，11-二氢-5H-二苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺

(23)10-(4-硝基苯基)乙酰氧基-10，11-二氢-5H-二苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺

(24)10-(3-硝基苯基)乙酰氧基-10，11-二氢-5H-二苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺

(25)10-烟酰氧基-10，11-二氢-5H-二苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺

(26)10-异烟酰氧基-10，11-二氢-5H-二苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺

(27)10-甲酰氧基-10，11-二氢-5H-二苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺

(28)10-氯乙酰氧基-10，11-二氢-5H-二苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺

(29)10-溴乙酰氧基-10，11-二氢-5H-二苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺

(30)10-(2-氯丙酰氧基-10，11-二氢-5H-二苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺

正如先前所述，光学纯的(R)-(-)-和(S)-(+)-10，11-二氢-10-羟基-5H-二苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺(III)或这两者的光学富集的混合物可以通过本发明反转并酯化，从而可生成所需的所有上述化合物的(R)-(+)-或(S)-(-)-立体异构体。

这些化合物或其药物学可接受的衍生物(例如盐)可以用于制备包含化合物本身或衍生物以及药物学可接受的载体的药物组合物。这种组合物具有抗惊厥性质并且可以用于治疗某些中枢或外周神经系统疾病，例如癫痫症。

通过以下制备实施例来举例说明本文公开的发明。应理解本发明并不限于确切的操作细节，因为明显的改变以及等同物对于本领域技术人员而言将是显而易见的。

实施例

实施例1、(S)-(-)-10-乙酰氧基-10，11二氢-5H-二苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺(V)

在冰水浴冷却下向(R)-(-)-10，11-二氢-10-羟基-5H-二苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺(II)(1.0g，3.94mmol)(手性HPLC分析其光学纯度为98.85％)、三苯基膦(1.03g，3.94mmol)和乙酸(0.47g，7.88mmol)在四氢呋喃(12mL)中的搅拌下的混悬液内滴加偶氮二甲酸二异丙酯(0.80g，3.94mmol)。加完后，将变成黄浊溶液的反应混合物在室温下搅拌4小时，从而蒸发四氢呋喃(40℃，水抽子压力(water-aspiratorpressure))。向油性残留物中加入异丙醇(5mL)并将混合物温热至溶剂沸点。之后将混合物冷却至室温，然后在5℃保存1小时。经过滤收集沉淀，然后从异丙醇中(4mL)重结晶。经过滤收集结晶并且在干燥至恒重后得到白色结晶(S)-(-)-10-乙酰氧基-10，11-二氢-5H-二苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺(V)(0.48g，41％)，m.p.186-187℃。

对该产物的手性HPLC分析(LiChroCART 250-4 HPLC CartridgeChiraDex 5μm，(Merck)，流速：0.8mL/min，流动相：0.1M Na₂HPO₄缓冲液pH7/甲醇88∶12，样品为溶于流动相中的每mL 0.2mg的分析物，进样量为20μL，于210/254nm的紫外检测显示反转和O-乙酰化完全，其中(R)-(+)-10-乙酰氧基-10，11-二氢-5H-二苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺(VI)占0.9％，保留时间为15.98分钟，而(S)-(-)-10-乙酰氧基-10，11-二氢-5H-二苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺(V)占99.2％，保留时间为21.33分钟。

实施例2、(S)-(-)-10-丁酰氧基-10，11-二氢-5H-二苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺

在冰水浴冷却下向(R)-(-)-10，11-二氢-10-羟基-5H-二苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺(II)(1.0g，3.94mmol)(手性HPLC分析其光学纯度为98.85％)、三苯基膦(1.03g，3.94mmol)和丁酸(0.69g，7.88mmol)在四氢呋喃(12mL)中的搅拌下的混悬液内滴加偶氮二甲酸二异丙酯(0.80g，3.94mmol)。加完后，将变成黄色溶液的反应混合物在室温下搅拌2小时，从而蒸发四氢呋喃(40℃，水抽子压力)。向油性残留物中加入异丙醇(5mL)并将混合物温热至溶剂沸点。之后将混合物冷却至室温，然后在5℃保存1小时。经过滤收集沉淀，然后从异丙醇中(4mL)重结晶。经过滤收集结晶并在干燥至恒重后得到白色结晶(S)-(-)-10-丁酰氧基-10，11-二氢-5H-二苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺(0.57g，45％)，m.p.173-175℃。

对该产物的手性HPLC分析(LiChroCART 250-4 HPLC CartridgeChiraDex 5μm，(Merck)，流速：0.8mL/min，流动相：0.1M Na₂HPO₄缓冲液pH7/甲醇88∶12，样品为溶于流动相中的每mL 0.2mg的分析物，进样量为20μL，于210/254nm的紫外检测显示反转和酯化完全，其中(R)-(+)-10-丁酰氧基-10，11-二氢-5H-二苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺占0.6％，保留时间为19.65分钟，而(S)-(-)-10-丁酰氧基-10，11-二氢-5H-二苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺占99.4％，保留时间为22.61分钟。

实施例3、(S)-(-)-10-苯甲酰氧基-10，11-二氢-5H-二苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺

在冰水浴冷却下向(R)-(-)-10，11-二氢-10-羟基-5H-二苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺(II)(1.0g，3.94mmol)(手性HPLC分析其光学纯度为98.85％)、三苯基膦(1.03g，3.94mmol)和苯甲酸(0.96g，7.88mmol)在四氢呋喃(12mL)中的搅拌下的混悬液内滴加偶氮二甲酸二异丙酯(0.80g，3.94mmol)。加完后，将变成黄色溶液的反应混合物在室温下搅拌2小时，从而蒸发四氢呋喃(40℃，水抽子压力)。向油性残留物中加入异丙醇(5mL)并将混合物温热至溶剂沸点。之后将混合物冷却至室温，然后在5℃保存1小时。经过滤收集沉淀，然后从异丙醇(4mL)中重结晶。经过滤收集结晶并在干燥至恒重后得到白色结晶(S)-(-)-10-苯甲酰氧基-10，11-二氢-5H-二苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺(0.68g，48％)，m.p.167-171℃。

对该产物的手性HPLC分析(LiChroCART 250-4 HPLC CartridgeChiraDex 5μm，(Merck)，流速：0.8mL/min，流动相：0.1M Na₂HPO₄缓冲液pH7/甲醇88∶12，样品为溶于流动相中的每mL 0.2mg的分析物，进样量为20μL，于210/254nm的紫外检测显示反转和酯化完全，其中(R)-(+)-10-苯甲酰氧基-10，11-二氢-5H-二苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺占21％，保留时间为42.61分钟，而(S)-(-)-10-苯甲酰氧基-10，11-二氢-5H-二苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺占78％，保留时间为45.4分钟。

实施例4、(S)-(-)-10，11-二氢-10-烟酰氧基-5H-二苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺

在冰水浴冷却下向(R)-(-)-10，11-二氢-10-羟基-5H-二苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺(II)(1.0g，3.94mmol)(手性HPLC分析其光学纯度为98.85％)、三苯基膦(1.03g，3.94mmol)和烟酸(0.97g，7.88mmol)在四氢呋喃(12mL)中的搅拌下的混悬液内滴加偶氮二甲酸二异丙酯(0.80g，3.94mmol)。加完后，将变成黄色溶液的反应混合物在室温下搅拌2小时，从而蒸发四氢呋喃(40℃，水抽子压力)。向油性残留物中加入异丙醇(5mL)并将混合物温热至溶剂沸点。之后将混合物冷却至室温，然后在5℃保存1小时。经过滤收集沉淀，然后从异丙醇(4mL)中重结晶。经过滤收集结晶并在干燥至恒重后得到白色结晶10，11-二氢-10-烟酰氧基-5H-二苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺(0.47g，34％)，m.p.167-170℃。

对该产物的手性HPLC分析(LiChroCART 250-4 HPLC CartridgeChiraDex 5μm，(Merck)，流速：0.8mL/min，流动相：0.1M Na₂HPO₄缓冲液pH7/甲醇88∶12，样品为溶于流动相中的每mL 0.2mg的分析物，进样量为20μL，于210/254nm的紫外检测显示反转和酯化完全，其中(R)-(+)-10，11-二氢-10-烟酰氧基-5H-二苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺占21％，保留时间为22.31分钟，而(S)-(-)-10，11-二氢-10-烟酰氧基-5H-二苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺占75％，保留时间为28.4分钟。

实施例5、(R)-(+)-10-乙酰氧基-10，11-二氢-5H-二苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺(VI)

在冰水浴冷却下向(S)-(+)-10，11-二氢-10-羟基-5H-二苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺(II)(1.0g，3.94mmol)(手性HPLC分析为99.4％光学纯度)、三苯基膦(1.03g，3.94mmol)和乙酸(0.47g，7.88mmol)在四氢呋喃(12mL)中的搅拌下的混悬液内滴加偶氮二甲酸二异丙酯(0.80g，3.94mmol)。加完后，将变成黄浊溶液的反应混合物在室温下搅拌4小时，从而蒸发四氢呋喃(40℃，水抽子压力)。向油性残留物中加入异丙醇(5mL)并将混合物温热至溶剂沸点。之后将混合物冷却至室温，然后在5℃保存1小时。经过滤收集沉淀，然后从异丙醇中(4mL)重结晶。经过滤收集结晶并在干燥至恒重后得到白色结晶(R)-(+)-10-乙酰氧基-10，11-二氢-5H-二苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺(V)(0.47g，40％)，m.p.186-187℃。

对该产物的手性HPLC分析(LiChroCART 250-4 HPLC CartridgeChiraDex 5μm，(Merck)，流速：0.8mL/min，流动相：0.1M Na₂HPO₄缓冲液pH7/甲醇88∶12，样品为溶于流动相中的每mL 0.2mg的分析物，进样量为20μL，于210/254nm的紫外检测显示反转和O-乙酰化完全，其中(R)-(+)-10-乙酰氧基-10，11-二氢-5H-二苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺(VI)占99.5％，保留时间为15.98分钟，而(S)-(-)-10-乙酰氧基-10，11-二氢-5H-二苯并/b，f/氮杂-5-甲酰胺(V)占0.5％，保留时间为21.33分钟。

在本说明书中，“光学纯”的表述是用于包括具有至少80％，优选为至少90％，最优选为至少95％的光学纯度的组合物。光学纯度的上限可以是如100％或者99.5％或99％。“光学富集”的表述是指在组合物中一种立体异构体多于另一种立体异构体，并且具体而言，优选是指一种立体异构体(所述“光学富集”的立体异构体)比另一种立体异构体至少多1％，即含至少50.5％的“光学富集”的立体异构体以及最多49.5％的另一种立体异构体。

应意识到上述的发明可以变化。