14,15－二氢20,21－二降象牙烯宁－14－醇衍生物及其应用

摘要

本发明涉及新颖的14，15－二氢20，21－二降象牙烯宁－14－醇衍生物，具有右式(I)，其中，R代表基团－AR’，其中A代表杂原子，R’代表：C

说明书

技术领域

本发明涉及新颖的14，15-二氢20，21-二降象牙烯宁(dinoreburnamenin)14-醇衍生物及其作为人类药物的应用。

背景技术

抑郁症是最常见的心理问题之一。在法国，患抑郁症的人的比例是14.9％，其中包括三分之一没有得到医学治疗的患者。每五个女性中的一个受该病侵袭。从1970年起，公告的抑郁症的发病率已增长到了6倍。从1992年到1997年，遭受抑郁症困扰的人的比例有所增加，特别在20和29岁(+65％)之间的年轻人中。因此，找到更好的适合抑郁症的治疗方法变得尤其重要，特别是因为传统的抗抑郁药对某些患者没有效果。

20，21-二降象牙烯宁的衍生物，包括14，15-二氢20，21-二降象牙烯宁-14-醇，已知具有血管扩张特性，特别是脑血管扩张特性，以及具有调整蓝斑中的酪氨酸羟化酶的活性(Bourde etal.，Neurochem.Int.，23(6)，567-574，1993)。它们用于脑血管通道和所有由脑循环量改变所引起的综合症。1978年9月15日公开的专利申请FR2381048描述了这些衍生物和它们最早为人所知的治疗学应用。该专利申请描述于1980年3月14日公开的附加证书申请FR2433528中。

更具体地，专利申请FR2381048描述了20，21-二降象牙烯宁的衍生物和它们的制备方法。另外还描述了这些化合物的药理特性：这些化合物是有用的大脑充氧器和血管调整剂，其特别增加脑微循环的脑流量。专利申请FR2433528也描述了衍生自20，21-二降象牙烯宁的特殊的异构体的制备方法，以及由该方法得到的异构体。

1989年6月1日公开的专利申请WO89/04830描述了新的20，21-二降象牙烯宁的替代衍生物，它们的制备方法以及它们作为药物特别是作为抗抑郁药的应用。

抑郁症是一种病理性的精神疾病，其伴随着紧张的情绪改变以及智力活动和运动力的迟钝。它是一种病态，或多或少长期的，表现出某种哀愁和能量张性减少的特性。双向抑郁症的特征在于交替阶段：第一阶段表现为明显的沮丧和迟钝，第二阶段表现为欣快和极度活跃。

用于诊断人的抑郁症的主要症状是：抑郁的心情、显著的兴趣或乐趣的降低、进食问题、睡眠问题、精神活动的焦虑或迟钝、疲倦或丧失活力、缺乏自尊，或过度的感觉有过失、思考或集中注意力能力的减少，或表现无常、病态的想法(60％病例)、自杀的想法(15％病例)。

抑郁症的病因包括：

1/遗传因素

最可能受到影响的是近亲中有患抑郁症或已经患抑郁症的人。这些人患抑郁症的风险性为15％，而近亲中没有患抑郁症的人患抑郁症的风险性仅为2到3％。

2/生物化学因素

当前抑郁症的研究针对于神经递质。进而注意到，5-羟色胺缺陷或失衡导致失眠和食欲降低，还注意到，去甲肾上腺素的减少对丧失活力，丧失乐趣有影响。

3/环境因素

曾经经历失去亲人例如父母的孩子很可能在他们长大以后患抑郁症。亲属关系，人际关系问题和家族的难关，职业的或其他的冲突也可能引起孤独，疏远并导致抑郁症。资金困难及其他压力也具有重要的影响。

季节性因素不可忽视：在日照最低的月份中，患抑郁症的几率较高。季节性抑郁症仅发生在一年中日照最短期间，因此它发生在冬季，并消失在春季。症状包括疲倦、沮丧、缺少活力和丧失兴趣、集中注意力问题和性欲问题、突然希望吃到甜的东西、在冬季睡眠增加或体重增加。因此有时称其为冬季抑郁症。中欧所有成年人中的2％受季节性抑郁症的影响，且受影响的女性比男性多4倍。

抑郁症通常伴随着其他的心理问题，或其伴随着另一个心理问题。急性惊恐发作和强迫症是最常见的问题。

精神分裂症是一种以精神分裂或不协调为特征的慢性精神病，这种精神分裂或不协调扰乱思维过程(其变得与外界隔绝的和无序的)，改变行为(其变得奇怪且孤癖)且使情感失常(古板且反常)，该慢性精神病与抽象的和象征性的精神错乱有关，该精神错乱产生听觉和普通感觉幻觉的影响，且体验自我感觉丧失氛围。

两种精神疾病，躁狂-抑郁症(双向抑郁症)和精神分裂症，有着相同的遗传原因：位于一些脑细胞和髓脂质位点(其传播电信号)中的各种基因的表达降低了。尽管这两种疾病具有不同的临床进程，它们有着一些相似的症状，并且通常用相似的药物来治疗。

现有技术描述了两种主要的治疗抑郁症和精神分裂症的形式：通过药物和心理疗法来治疗。通过药物治疗包括使用抗抑郁药，适于所有类型的抑郁症。抗抑郁药对神经递质的平衡起作用。心理疗法有助于患者，但是不能作为唯一的治疗。其他的治疗形式例如行为的或认识的疗法(特别用于神经官能性抑郁症)，振动疗法和电击疗法(作为最终手段)。

抑郁症的发展变化很快，并且取决于许多参数：病原学，患者的性格，等等。

如果不给予任何治疗，一个抑郁症病人可以持续6个月或更长，有时以极端的自杀方式结束。高达15％的患严重抑郁症的患者自杀。经治疗后，所有病例中的约60％复发。

抑郁症可以用DSM IV标准(Diagnostic and Statistical Manual ofMental Disorders，4th edition，American Psychiatric Association Publisher：Washington DC)来判断：DSM IV是用于精神错乱的症状和统计学基准，由美国精神病学协会出版。根据DSM IV标准，严重的抑郁症亦即严重的和最普通类型的抑郁症，其中仅有10到25％的患者寻求治疗，其特征为一次或几次发作的情绪改变或至少两周的兴趣丧失，其中伴随至少四种额外的抑郁症症状：这些症状可能要例如食欲，体重，睡眠或精神活性的改变；活力减少，自尊降低，或有负罪感，思考，集中注意力，做判断困难，或周期性的死亡的想法，计划或试图自杀的念头。

重症抑郁症包括治疗抵抗性抑郁症(TRD)，以及严重周期性发作抑郁症(MRDD)，其与轻躁狂症发作相关。

常见有售的传统的抗抑郁药归于以下主类：三环类抗忧郁药(TCA)、单胺氧化酶抑制剂(MAO)(MAOIs)、选择性的5-羟色胺再捕获抑制抑制剂(SSRIs)、5-羟色胺和去甲肾上腺素再捕获抑制抑制剂(SNDRIs)、去甲肾上腺素和选择性的5-羟色胺抗抑郁药(NASSAs)和5-羟色胺受体调节剂。

发明内容

我们仍需要能治疗患者抑郁症、重症抑郁症的化合物，这些患者可能对如上所述的传统抗抑郁药的治疗无效。这是以下描述和权利要求的本发明的目的。

已发现新颖的14，15-二氢20，21-二降象牙烯宁-14-醇衍生物可以用于治疗抑郁症患者。

因此，一方面，本发明的目的是下式(I)化合物

其中，R代表基团-AR’，其中A代表杂原子，R’代表：

-选自直链或支链的C₁-C₆烷基、C₁-C₆链烯基、C₁-C₆炔基、芳基烷基(例如苄基、烷氧基芳基烷基、杂芳基烷基和杂环烷基)的基团；

-式-R₁-CO-O-R₂所示的酯，其中R₁代表选自直链或支链的C₁-C₆烷基、C₂-C₆链烯基或C₂-C₆炔基的基团，且R₂代表下列基团

-氢，直链或支链的C₁-C₆烷基、C₂-C₆链烯基、C₂-C₆炔基或C₃-C₁₂环烷基，优选C₃-C₆或C₆-C₁₂环烷基；

-式所示的酰胺，其中R₃代表选自直链或支链的C₁-C₆烷基、C₂-C₆亚链烯基或C₂-C₆亚炔基的基团，且Y代表选自氢、直链或支链的C₁-C₆烷基、C₂-C₆链烯基、C₂-C₆炔基、芳基、芳基烷基、杂芳基烷基或杂环烷基的基团；且Z代表选自氢、直链或支链的C₁-C₆烷基、C₂-C₆链烯基、C₂-C₆炔基、芳基、芳基烷基、杂芳基烷基或杂环烷基，Y和Z可以共同形成可被一个或若干个C₁-C₆烷基、芳基、杂芳基或卤素取代的C₃-C₆环烷基或C₂-C₆杂环基；

-被至少一种式所示的胺所取代的选自直链或支链的C₁-C₆烷基、C₂-C₆链烯基或C₂-C₆炔基的氨基烷基，其中Y和Z如上定义；

或它的一种药学可接受盐，包括其异构体、对映体、非对映异构体和它们的混合物。

药学可接受的加成盐包括，例如无机或有机酸的加成盐，特别是由盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硝酸、硫酸、磷酸、乙酸、甲酸、安息香酸、马来酸、反丁烯二酸、琥珀酸、酒石酸、柠檬、草酸、水合乙醛酸、天冬氨酸、抗坏血酸、烷酰基单磺酸例如甲磺酸、乙磺酸、丙磺酸、烷酰二磺酸例如甲二磺酸、α，β-乙二酸和芳基单磺酸例如苯磺酸和芳基二磺酸形成的盐，所提到的这些盐仅仅出于说明性目的而非形成限制。

术语“烷基”表示烃类的、直链或支链的基团，优选含有1到6个碳原子，特别是例如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、叔丁基、戊基、n-己基。

“芳基”是芳香族单或二环的烃类基团，通常含有5到6个链，5到10个碳原子。芳基的例子是苯基和萘基。“杂芳基”是芳香族含碳基团，其环上含有至少一个杂原子，例如氮、硫或氧。

术语“杂环”表示芳香族单或二环的烃类基团，其环上含有至少一个杂原子，例如氮、硫或氧。环可以有至少一处不饱和。杂环基的例子特别包括哌啶、哌嗪、吡咯烷、吗啉、类哌嗪、类哌啶、硫代吗啉、四氢吡啶、噻吩、呋喃、吡啶、嘧啶、哒嗪、吡嗪基。

“烷氧基”相当于如上定义的烷基通过醚键结合到分子的其余部分。

“卤素”指氟、碘、溴或氯原子。“杂原子”指氮、氧和硫原子。

“芳基烷基”、“杂芳基烷基”或“杂环烷基”为如上定义的芳基、杂芳基或杂环基分别通过烷基链结合到分子的其余部分。芳基烷基的具体例子是苄基和苯乙基。

根据本发明的优选实施例，R’代表式R₁-CO-O-R₂所示的基团，其中R₁代表C₁-C₆烷基，优选-CH₂-基团。特别根据该实施例，R₂优选代表氢原子，可被一个或若干个C₁-C₆烷基取代的C₁-C₆烷基或C₃-C₆杂环基。

根据本发明的另一个优选实施例，R’代表式所示的酰胺，其中R₃如上定义，且Y和Z共同形成可被一个或若干个C₁-C₆烷基取代的C₃-C₆杂环基，。

根据本发明的另一个优选实施例，R’代表氨基烷基，其选自被式所示的至少一个胺取代的C₁-C₆烷基，其中Y和Z共同形成可被一个或若干个C₁-C₆烷基取代的C₂-C₆杂环基。

根据本发明另一个优选实施例，R’代表杂芳基烷基。

本发明特别优选以下通式的化合物：

                              (Ii)

本发明优选化合物(Ia)、(Id)、(Ie)、(If)和(Ig)，特别优选化合物(Ie)。

式(I)化合物的特征在于，它有两种对映异构型3α和16α，且如适用的话，每一种这些对映体的特征在于有一对碳14型的非对映异构体：((3α，14α)和(3α，14β))对以及((14α，16α)和(14β，16α))对。

有利地，在式(I)化合物中，3位氢原子和16位氢原子为反位，且14位的基团R可以为α或β型(根据甾类衍生物命名惯例，术语α和β指的是取代基而不是氢)。

在本发明中，3α型对应当3位碳为S构型且16位碳为R构型时的式(I)。在本发明中，16α型对应当3位碳为R构型且16位碳为S构型时的式(I)。

因此，本发明的一个特殊的目的是，式(I)化合物或它的一种药学可接受盐为外消旋或光学活性混合物的形式。

式(I)化合物或它的一种药学可接受的盐优选选自以下具有式(I)的化合物之一：

a)右旋和/或左旋型(3α)化合物；和

b)右旋和/或左旋型(16α)化合物，

且其中，存在于化合物a)和b)中的两种左旋和右旋的非对映异构体的混合物的摩尔比可以相同或不同。

根据本发明的一个优选实施例，式(I)化合物或它的一种药学可接受的盐选自以下具有式(I)的化合物之一：

a)右旋和/或左旋形式的化合物(3α，14α)；

b)右旋和/或左旋形式的化合物(3α，14β)；

c)右旋和/或左旋形式的化合物(14α，16α)；和

d)右旋和/或左旋形式的化合物(14β，16α)。

在本发明中，“反式差向异构体”指一种差向异构体，其中碳3和碳16位上的氢原子始终处于反位，且取代基R相对于碳16位上的氢原子处于反位。在本发明中，术语“顺式差向异构体”指一种差向异构体，其中碳3和碳16位上的氢原子始终处于反位，且取代基R相对于碳16位上的氢原子处于顺位。

根据本发明的一个优选实施例，式(I)化合物或它们的一种药学可接受盐代表合成过程中得到的大部分，其可以是反式差向异构体或顺式差向异构体。

在本发明的一个优选实施例中，该化合物为由下式对映体(3α，14β)和(16α，14α)对组成的差向异构体(Ie1)：

可见在该差向异构体(Ie1)中，碳14原子位上的取代基(在该例中为乙基吗啉)，相对于碳原子16位上的氢始终处于反位，碳3和碳16位上的氢原子始终为反式。

更特别地，优选化合物是当所述差向异构体(Ie1)((3α，14β)和(16α，14α)对)经过HPLC(高效液相色谱)时，第二个从柱中洗出的对映体(Ie1b)(第二个洗脱的化合物)，其中所使用的柱的固定相由硅胶颗粒(粒径5μm)组成，其上接有三(2，5-二甲苯氨基甲酸)纤维素，所使用的流动相是乙腈。

我们现在将描述化合物(I)中的基团R代表连有碳14和碳15之间的双键的氢原子的化合物作为药物的用途，该化合物满足下式(Ij)：

化合物(Ij)特别由式(I)化合物(其中基团R代表如上定义的基团-AR’)脱水得到。

特别是，我们将在说明书中描述化合物(Ij1)，其包含下列两种对映体：

本发明第二个方面的目的是本发明的式(I)化合物用作药物，且药物组合物包括本发明化合物和药学可接受的赋形剂。

特别地，本发明的目的是本发明式(I)化合物或本发明组合物在制备用于治疗和/或预防抑郁症的药物组合物中的应用。

特别地，本发明目的是，本发明的化合物或组合物在制备用于治疗和/或预防重症抑郁症(MDD)(参考14，15，16)的药物组合物中的应用，其中化合物(I)的基团R还可以表示连有碳14和碳15之间的双键的氢原子(式(Ij)特别是式(Ij1))。

本发明化合物是更有效的抗抑郁药，且比传统的抗抑郁药具有更快速的效果。

根据另一个特殊的方面，化合物(I)的基团R还可以代表连有碳14和碳15之间的双键的氢原子的本发明的化合物或组合物用于治疗或预防抑郁症患者，这些患者对传统的抗抑郁药治疗部分或完全抵抗(TRD患者)，例如属于由三环类抗忧郁药组成的类别的抗抑郁药(TCA)，单胺氧化酶抑制剂(MAOIs)，选择性的5-羟色胺再捕获抑制剂(SSRIs)，5-羟色胺和去甲肾上腺素再捕获抑制剂(SNDRIs)，去甲肾上腺素和选择性的5-羟色胺抗抑郁药(NASSAs)或5-羟色胺受体调节剂。

根据另一个特殊的方面，化合物(I)的基团R还可以代表连有碳14和碳15之间的双键的氢原子的本发明的化合物或组合物用于对传统的抗抑郁药治疗有耐受性的患者以及抑郁症患者，特别是重症抑郁症患者，使得他们对这些治疗敏感。

根据另一个特殊的方面，化合物(I)的基团R还可以代表连有碳14和碳15之间的双键的氢原子的本发明的化合物或组合物用于治疗和/或预防DSM IV所定义的双相重症抑郁症，特别是重症周期性的抑郁病症(MRDD)。

根据另一个特殊的方面，化合物(I)的基团R还可以代表连有碳14和碳15之间的双键的氢原子的本发明的化合物或组合物用于治疗和/或预防抑郁症，该抑郁症的严重程度为，当以HAMD(《Hamilton Depression》)尺度评估时超过26分，或当以MADRS(Montgomery and Asberg DepressionRating scale)尺度评估时超过35分。

根据另一个特殊的方面，本发明的化合物或组合物(其中化合物(I)的基团R还可以代表连有碳14和碳15之间的双键的氢原子)用于治疗和/或预防精神分裂症。

因此，化合物(I)的基团R还可以代表连有碳14和碳15之间的双键的氢原子的本发明化合物可用于治疗和/或预防双向抑郁症和/或精神分裂症，特别用于校正双向抑郁症(参考17)和精神分裂症(参考18)的阴性症状。

因为本发明化合物在Balb/c小鼠上的测试显示，这些化合物能够：1)大量恢复蓝斑里的去甲肾上腺素激活的表现型；2)恢复前额皮层里的去甲肾上腺素激活的神经分布；3)恢复亚数量下丘脑神经元里的下视丘分泌素表现型；和4)在被剥夺睡眠之后，将这些同血亲的小鼠由无能力转向增加速波睡眠；根据一个新的方面，本发明还涉及所述化合物(其中化合物(1)的基团R还可以代表连有碳14和碳15之间的双键的氢原子)的用途，用于制备预防和/或治疗觉醒-睡眠周期紊乱的药物或药物组合物。所述觉醒-睡眠周期紊乱特别选自：嗜睡病、睡眠过度和长期的亚觉醒(hypoarousal)状态。

根据一个新的方面，本发明的目的是本发明式(I)化合物(其中化合物(I)的基团R还可以代表连有碳14和碳15之间的双键的氢原子)或本发明组合物的应用，用于制备治疗和/或预防认知部分的症状性额叶紊乱(轻度认知障碍(参考18))的治疗，例如与阿尔茨海默氏疾病或帕金森氏疾病有关(参考12)的预痴呆和痴呆症或行为问题：活动减退、注意力问题、品德问题(characterial problems)(参考21，注意力缺乏-活动过度(ADHD)型)。因此，依据这种新的方面，本发明的目的是这种用途，其中认知部分的症状性额叶问题选自：与阿尔茨海默氏疾病或帕金森氏疾病有关(参考12)的预痴呆和痴呆病症，或选自注意力问题和品德问题的行为疾病。

根据另一个特殊的方面，本发明的目的是本发明式(I)化合物或本发明组合物(其中化合物(I)的基团R还可以表示连有碳14和碳15之间的双键的氢原子)的应用，用于制备治疗和/或预防记忆问题的药物组合物，所述记忆问题特别与衰老或阿尔茨海默氏疾病或帕金森氏疾病相关。

更特别地，本发明的目的是本发明式(I)化合物或它的一种药学可接受盐作为药物的应用，所述药物可以以口服，静脉注射，腹膜内或肌内方式给药，或通过任何其他的方法来得到本发明的抗抑郁效果，或使患重性抑郁症的、对传统的抗抑郁药治疗有抗性的患者对这种治疗敏感，或在上述用途中得到所需的预防或治疗。

本发明药物活性物质或药物组合物可以包含在任何口服盖仑制剂剂型中，通常所使用的剂型包括片剂、胶囊剂和液体剂例如含各种着色剂、矫味剂和稳定掩蔽剂的西也剂和悬浮剂。

为制备本发明的口服盖仑制剂剂型，活性成分可以与各种普通的材料例如淀粉，碳酸钙，乳糖，蔗糖和磷酸二钙混合，以促进封装过程。如有必要，硬脂酸镁作为添加剂，提供有用的润滑功能。

药物组合物的活性成分可以溶解或悬浮在药学可接受的无菌液体例如无菌水，无菌的有机溶剂或这两种液体的混合物的悬浮液中。优选地，这样的液体适于胃肠外注射。

当活性物质能充分溶解时，它可以溶解在生理盐溶液例如药学可接受的无菌液体里；如果不能充分溶解，它可以溶解在适当的有机溶剂例如丙二醇或聚乙二醇的水溶液中。包含10到75wt％的乙二醇的丙二醇水溶液通常是适当的。其他的例子，其他的组合物可以通过将活性物质作为一种很精细的浓缩物分散在淀粉粒纤维素或钠的羧甲基的水溶液中，或分散在适当的油例如花生油中得到。

液体的药物组合物例如无菌溶液或悬浮液能用于肌内，腹膜内或皮下注射。

优选地，该药物组合物是单元剂量形式，例如片剂或胶囊剂。在这种形式中，组合物被细分到包含适当量活性物质的单元剂量中：单元剂量可以是小包装组合物，例如粉末，小水瓶或药瓶。一个组合物单位剂量中的活性物质的量可以改变或调整为2mg或更少，或为50mg或更多，视特殊的需要和活性物质的活性而定。

式(I)化合物的建议口服剂量可以是20到60mg/天，该剂量可以分成2份或3份给药，优选在用餐时服用。20mg/天的剂量对大多数的抑郁症患者有效，但是40mg乃至60mg可能是必需的。

根据本发明，本领域的普通技术人员知道这种化合物的给药方法可以显著地改变。除了其他的口服给药，缓释组合物可能是优选的。其他的给药方法可以包括但不限于：静脉注射，肌内和腹膜内注射，皮下植入，和口腔，舌下，透皮，直肠和鼻内给药。

根据一个特殊的实施例，本发明的目的是式(I)或它的一种药学可接受的盐的应用，其特征在于，成年人的日常剂量为20到60mg。

专家将能确定每个患者的适当剂量；该剂量可以作为特定患者的年龄，体重和对治疗的反应的函数而变化。上文给出的剂量实例表示平均数。然而，也可以以比该平均数较小或较大的剂量给药。

式(I)化合物的制备方法：根据本发明，那些定义在通式(I)中的化合物可以由以下方法，从14，15-二氢-20，21-二降象牙烯宁-14-醇开始制备。

1)14，15-二氢-20，21-二降象牙烯宁-14-醇的制备

处理式(II)或(II’)的旋光性化合物来制备14，15-二氢-20，21-二降象牙烯宁-14-醇化合物。

使用还原剂；得到的产物是两种14，15-二氢-20，21-二降象牙烯宁-14-醇的非对映异构体对[(3α，14α)，(3α，14β)]和[(14α，16α)，(14β，16α)]，或它们的混合物，如果需要的话，用无机酸或有机酸处理反应产物，以形成盐。

通式(II)和(II′)的产物可以如法国专利申请FR2190113所描述的方法制备。通式(II)的化合物的外消旋混合物可以通过裂解而分离。

14，15-二氢-20，21-二降象牙烯宁-14-醇的一对非对映异构体(±)或具有很大可变比例的两种非对映异构体的混合物，可以通过减少通式(II)的两种对映异构体中的一种来得到。法国专利申请FR2623503中描述的实验显示，在实践中，仅得到两种非对映异构体中的一种(见实施例B)。

通式(II)化合物可以以消旋型或旋光活性型使用。显而易见的，由通式(II)的产物得到的14，15-二氢-20，21-二降象牙烯宁-14-醇的还原化合物具有相应的立体化学形式。

式(II)化合物可以以一种它们与无机或有机酸的加成盐形式使用。在这种情况下，取决于所选择的操作条件，产物14，15-二氢-20，21-二降象牙烯宁-14-醇可以以盐化或非盐化形式得到。

14，15-二氢-20，21-二降象牙烯宁-14-醇化合物的外消旋或旋光活性混合物还可以如公开号为FR2381048的法国专利申请和公开号为FR2433528的法国附加证书申请中所描述的方法制备。

在本发明实施例的优选情况下，上面描述的方法如下进行。

所用的还原剂可以是氢化物，特别是混合氢化物，例如氢化锂和氢化铝混合物，二乙基氢化钠铝，硼氢化钠，硼氢化锂，二异丁基-氢化铝。还原反应在使用有机溶剂或溶剂混合物下进行，例如醚，如二乙醚，四氢呋喃，或芳烃例如甲苯，苯，二甲苯。还原反应在-20℃到反应介质的回流温度下进行。优选在室温下进行。如果金属氢化物用作还原剂，14，15-二氢-20，21-二降象牙烯宁-14-醇从中间络合物中释放，该中间络合物由氢化物用现行办法如添加碱性水溶液例如氢氧化钠而生成。

还原反式3α化合物(II)，生成(+)(3α，14α)14，15-二氢20，21-二降象牙烯宁-14-醇化合物。还原反式16α化合物(II’)，生成(-)(14β，16α)14，15-二氢20，21-二降象牙烯宁-14-醇化合物。

这些化合物经酸例如盐酸处理，分别得到最普通的(-)(3α，14β)14，15-二氢-20，21-二降象牙烯宁-14-醇和(+)(14α，16α)14，15-二氢20，21-二降象牙烯宁-14-醇类型(见下面的示意图和图2)。

示意图表示由通式(II)化合物合成14，15-二氢20，21-二降象牙烯宁-14-醇化合物的旋光异构物的一般方法(公开号为BE764166的比利时专利描述了申请通式(II)化合物)。

非对映异构体中的一个，或者非对映异构体的混合物，可以通过常用方法分离出来：色谱法，直接结晶作用，差异溶解法例如在热的甲苯中的差异溶解。

2)式(I)化合物的制备

本发明化合物可以在强碱例如NaH的存在下，从14，15-二氢-20，21-二降象牙烯宁-14-醇通过O-烷基化或N-烷基化制备，或从本发明上述合成的化合物制备。

附图说明

图1：图1表示冷冻冠状大脑部分在硝酸纤维素滤膜上直接转化之后，测定的TH(酪氨酸羟化酶)蛋白质的含量，以每个解剖间隔(80μm)，对照组小鼠(白条)和以式(If1)化合物治疗的治疗组小鼠(灰条)，用任意单位(UTA代表用于任意的酪氨酸羟化酶单位)表示。

图2：LC中含TH的细胞数目的后-前分布，由对照组balb/c小鼠(白条)和通过式(Ie1)分子治疗的治疗组小鼠(灰条)通过免疫组织化学测得。

图3A和3B：对照组小鼠(图3A)以及通过式(Ie1)分子连续治疗后的小鼠组(图3B)通过免疫组织化学测定的Balb/c小鼠的前额皮层样品上得阳性TH纤维分布。对于阳性TH纤维做了画面强化处理。信号“分子层”展示在这些图上。

具体实施方式

在以下给出的实施例1到9中：

-3位氢原子和16位氢原子是反式的(键可以是(3β，16α)或3α，16β))

-在14位，术语α和B指的是取代基而非氢。

此外，在以下给出的实施例1到9中合成的化合物可以是两种差向异构体(换句话说，四个非对映异构体)或单个差向异构体的混合物、顺式差向异构体或反式差向异构体(换句话说，两种对映体)的混合物形式。这两种差向异构体定义为14位碳原子所携带的R基团的位置(在前面或后面)的函数，且定义为其相对于碳16位上的氢的位置的函数。

每个差向异构体有两个对映体，作为3位和6位氢原子的位置(在前面或后面)的函数(这些氢原子始终为反式的)。

在以下给出的实施例1到9中，术语“2差向异构体”指的是该化合物(初始或合成的化合物)为两个差向异构体(四个非对映异构体)的混合物形式，术语“1差向异构体”指的是该化合物(初始或合成)为单个差向异构体(两个对映体)形式，顺式差向异构体或反式差向异构体。

实施例1：式(Ia)化合物：(±)(16α)14，15-二氢14-乙氧基羰基甲氧基-20，21-二降象牙烯宁的制备方法

将50mg(0.19mmol)化合物(1)溶解在4ml无水二甲基甲酰胺(DMF)中，然后加入19mg60％NaH(1.2eq)。一旦气体停止释放，加入25μl(1.2eq)溴乙酸乙酯并在室温搅拌过夜。然后浓缩反应介质，且用二氯甲烷(CH₂Cl₂)溶解残渣。用水洗涤有机相。在硫酸镁(MgSO₄)上干燥，滤过且蒸发直至干燥。在二氧化硅柱上(洗脱液为CH₂Cl₂/MeOH以99∶1混合，然后CH₂Cl₂/MeOH以98∶2混合)提纯。得到2差向异构体形式的式(Ia)化合物：28mg本白色粉末(Ia1)和3mg黄色粘性固体(Ia2)。收率：46％(42％的Ia1和4％的Ia2)。熔点＝105℃-108℃

RMN 1H CDCl₃(300MHz)δ(ppm)：1.25(m，2H，-CH₂)；1.27(t，3H，-CH₂CH₃)；1.79(m，2H，-CH₂)；2.33(m，4H，2-CH₂)；2.72(m，3H，-CH₂，-CH)；3.12(m，3H，-CH₂，-CH)；4.11(m，AB system，2H，-COCH₂，J＝15.9Hz)；4.22(q，2H，-CH₂CH₃)；5.77(m，1H，CHOH)；7.15(m，aromatic 2H，H)；7.45(dd，1H，aromatic H，J＝7.22Hz，J＝1.55Hz)；7.68(dd，1H，aromatic H，J＝7.03Hz，J＝1.69Hz)。

实施例2：式(Ib1)化合物：(±)(3β，16α)14，15-二氢14-羧基甲氧基20，21二降象牙烯宁钠的制备方法

将182mg(0.51mmol)化合物(Ia)溶解在8ml的四氢呋喃(THF)/H₂O为3∶1的混合物中。加入485μl(0.95eq)1N的苏打溶液。在室温下搅拌过夜。浓缩THF，用CH₂Cl₂和水溶解。用CH₂Cl₂洗涤水相三次。浓缩水相，干燥所得固体。得到160mg所需化合物，为黄色固体。收率：90％，熔点＝200℃。

RMN 1H MeOD(300MHz)δ(ppm)：1.31(m，1H，-CH)；1.59(m，1H，-CH)；1.87(m，4H，2-CH₂)；2.41(m，2H，-CH₂)；2.71(m，2H，-CH₂)；2.93(m，3H，-CH₂，-CH)；3.13(m，1H，-CH)；3.92(m，AB system，2H，-COCH₂，J＝15Hz)；5.70(m，1H，CHOH)；7.07(m，aromatic 2H，H)；7.39(d，1H，aromatic H，J＝7.1Hz)；7.70(d，1H，aromatic H，J＝7.9Hz)。

实施例3：式(Ic1)：(±)(3β，16α)14，15-二氢14-[2-(N-甲基-哌嗪-1-基)-2-氧代-乙氧基]20，21-二降象牙烯宁的制备方法

(Ib1)：化合物(Ib)合成之后所分离出来的大部分差向异构体。

将80mg(0.23mmol)化合物(Ib1)溶解在5mlDMF中。加入31μl(1.2aq)N-甲基哌嗪，53mg(1.2eq)1-(3-二甲基氨基丙基-3-乙基盐酸碳二酰亚胺(EDCI.HCl)和37mg(1.2eq)水合1-羟基苯并三唑(HOBt.H₂O)。在室温搅拌48小时，然后浓缩反应混合物。用CH₂Cl₂溶解残渣，用NaHCO₃饱和溶液洗涤有机相。在MgSO₄上干燥，滤过且浓缩。得到的黄色油在二氧化硅柱(洗脱液为CH₂Cl₂/MeOH以95∶5混合，然后CH₂Cl₂/MeOH以90∶10混合)上纯化。得到50mg粘性黄色粉末(Ic1)。收率：53％，熔点＝44℃-48℃

RMN 1H CDCl₃(300MHz)δ(ppm)：1.26(m，1H，-CH)；1.60(m，1H，-CH)；1.82(m，4H，2-CH₂)；2.34(m，6H，3-CH₂)；2.42(m，3H，-CH₂，-CH)；2.75(m，3H，-CH₂，-CH)；3.04(m，3H，-CH₂，-CH)；3.42(m，2H，-CH₂)；3.60(m，2H，-CH₂)；4.19(m，AB system，2H，-COCH₂，J＝13.5Hz)；5.78(m，1H，CHOH)；7.12(m，aromatic 2H，H)；7.44(d，1H，H aromatic)；7.55(d，1H，Haromatic)。

实施例4：化合物(Id)：(±)(3β，16α)14，15-二氢14-苄氧基20，21-二降象牙烯宁的合成

使用与合成化合物(Ia)(实施例1)的相同的方法，用溴化苄代替溴乙酸乙酯。收率52％(Id)(两个差向异构体没有分离)。熔点112℃-115℃。

RMN 1H(300 MHz，CDCl₃)δ(ppm)1.15-1.35(m，2H)；1.78-2.02(m，4H)；2.18-2.40(m，2H)；2.54-2.89(m，3H)；2.94-3.21(m，3H)；4.48-4.73(m，2H)；5.74(m，1H)；7.13(m，2H)；7.18-7.38(m，5H)；7.45(m，1H)；7.54(m，1H)。

实施例5：化合物(Ig)：(±)(3β，16α)14，15-二氢14-(3-甲基-[1，2，4]氧二氮茂-5-基甲氧基)20，21-二降象牙烯宁的合成

以溴乙酸甲酯代替溴乙酸乙酯，用合成化合物(Ia)相同的方法来合成初始甲酯。

将209mg(2.82mmol)肟乙酰胺和113mg(2.82mmol)60％的NaH溶解在10ml无水二氧化二乙烯中。加入分子筛压舌板，将反应混合物加热到65℃，保持1小时。在此温度下，将溶解于10ml无水二氧化二乙烯中的320mg(0.94mmol)甲酯加入其中，将反应混合物加热到75℃过夜。浓缩反应混合物，用NaHCO₃不饱和溶液溶解残渣，研磨并过滤。得到的黄色固体在二氧化硅柱(洗脱液为CH2Cl2/MeOH以99∶1混合)上纯化。分离两种差向异构体。得到的79mg大部分差向异构体(Ig1)为白色粉末。收率：大部分差向异构体为23％，少部分差向异构体未分离出。熔点：124℃-125℃。

RMN 1H(300MHz，CDCl₃)δ(ppm)：1.21-1.38(m，1H)；1.60-1.73(m，1H)；1.75-2.03(m，4H)；2.29-2.55(m，5H)；2.65-2.96(m，3H)；2.98-3.23(m，3H)；4.68(d，1H，J＝14.1Hz)；4.80(d，1H，J＝14.1Hz)；5.83(m，1H)；7.16(m，2H)；7.46(m，1H)；7.59(m，1H)。

实施例6：化合物(Ih)：(±)(3β，16α)14，15-二氢14-(2-羟基-乙氧基)20，21-二降象牙烯宁的合成

将300mg(1.12mmol)化合物(1)投入10ml无水DMF中悬浮，然后加入54mg(1.2eq)60％的NaH。加入492mg(5.0eq)碳酸亚乙酯，反应混合物加热到110℃，保持1小时，然后加热到80℃，保持4小时。

浓缩反应混合物，用CH₂Cl₂溶解残渣。用水洗涤有机相两次，用NaHCO3饱和溶液洗涤有机相一次。在MgSO₄上干燥，滤过且浓缩。得到的棕色油在二氧化硅柱(洗脱液为CH₂Cl₂/MeOH以99∶1混合，然后CH₂Cl₂/MeOH以98∶2混合，然后CH₂Cl₂/MeOH以96∶4混合)上纯化。

得到的化合物是2差向异构体形式：111mg(Ih1)米色固体和100mg米色固体(Ih2)。收率61％(32％的(Ih1)和29％的另一个差向异构体)。

RMN 1H(400MHz，CDCl3)δ(ppm)：1.22-1.38(m，1H)；1.78-2.18(m，6H)；2.21-2.41(m，2H)；2.61(m，1H)；2.71-2.85(m，2H)；2.97-3.20(m，3H)；3.56-3.82(m，4H)；5.61(m，1H)；7.14(m，2H)；7.44(m，1H)；7.52(m，1H)。

熔点：129℃-132℃

实施例7：化合物(Ie)的合成

a)4-(2-氯乙烷)-吗啉的合成

将5.0g(26.9mmol)4-(2-氯乙烷吗啉)的盐酸盐溶解在16mL蒸馏水中。以15g每份加入碳酸钾(K₂CO₃)。用乙酸乙酯(AcOEt)提取水溶液五次。在MgSO₄上干燥，过滤并浓缩有机相。

得到3.3794-2(氯乙烷吗啉)，为透明的黄色油。

收率：84％。

b)化合物(Ie)：(±)(3β，14β，16α)14，15-二氢14-(2-吗啉-4-基-乙氧基)20，21-二降象牙烯宁和(±)(3β，14α，16α)14，15-二氢14-(2-吗啉-4-基-乙氧基)20，21-二降象牙烯宁的合成

将500mg(1.86mmol)化合物(1)投入20mL无水DMF中悬浮。加入90mg(1.2eq)60％的NaH，在室温搅拌45分钟。加入溶于10mL无水DMF中的558mg(2.0eq)4-(2-氯乙烷)吗啉，随后加入140mg(0.5eq)碘化钠。在45℃搅拌8小时，然后于相同的温度下加入90mg(1.2eq)60％的NaH，溶于2ml无水DMF中的558mg(2.0eq)4-(2-氯乙烷)吗啉和280mg(1.0eq)碘化钠。继续加热18小时，然后再加入90mg(1.2eq)60％的NaH，溶于2ml无水DMF中的558mg(2.0eq)4-(2-氯乙烷)吗啉和280mg(1.0eq)碘化钠。45℃下继续搅拌24小时。浓缩反应混合物，用CH₂Cl₂溶解残渣。用水洗涤有机相三次。在MgSO₄上干燥，滤过并浓缩。得到的残渣用Et₂O溶解，滤过不溶性物质并浓缩滤液。得到的棕色油在二氧化硅柱(洗脱液为CH₂Cl₂/MeOH/NH₂OH以99∶0.5∶0.5混合)上纯化。

得到两种差向异构体：340mg粘性黄色固体(Ie1)和29mg(Ie2)黄色固体。收率：52％(48％的(Ie1)和4％的(Ie2))。

(Ie1)：

RMN 1H(300MHz，CDCl₃)δ(ppm)0.86(m，1H)；1.1 8-1.40(m，1H)；1.78-1.92(m，4H)；2.21-2.41(m，2H)；2.48-2.92(m，9H)；2.98-3.15(m，3H)；3.59(m，1H)；3.70-3.92(m，5H)；5.62(m，1H)；7.08-7.21(m，2H)；7.44(m，1H)；7.63(m，1H)。

熔点：116℃-118℃

(Ie2)：

RMN 1H(300MHz，CDCl₃)δ(ppm)1.12-1.32(m，1H)；1.79-2.82(m，16H)；2.95-3.21(m，3H)；3.43-3.80(m，6H)；5.69(bs，1H)；7.11(m，2H)；7.34-7.52(m，2H)。

熔点：91℃-93℃

c)两种对映体(Ie1a)和(Ie1b)通过制备chiracel的HPLC分离

化合物(Ie1)的每个对映体通过使用CHIRACEL_OD-H的制备色谱法，在如下条件下分离：

制备的液相色谱法：

柱：250×20mm的CHIRACEL_OD-H5μm

流动相：乙腈

流速：20ml/min

检测：UV300nm

温度：25℃

分析的液相色谱法：

柱：250×4.6mm的CHIRACEL_OD-H5μm

流动相：乙腈

流速：1.0ml/min

检测：UV230nm

温度：25℃

结论：

从582mg初始产物中得到以下两种对映体(Ie1a)和(Ie1b)(表1)。

   首先洗脱的对映体(Ie1a)   其次洗脱的对映体(Ie1b) 保留时间(min)  5.87  保留时间(min)    6.80 量(mg)  265  量(mg)    264 化学纯度(230nm处的％表面积)  99.3  化学纯度(230nm处的％表面积)    99.8 光学异构过量(％)  ＞99.5  光学异构过量(％)    ＞99.5

表1：通过制备的chiracelHPLC法分离的两种对映体的特性

实施例8：化合物(If1)：(±)(3β，16α)14，15-二氢14-((2-吗啉-4-基-乙基氨基甲酰)-甲氧基)20，21-二降象牙烯宁的合成

使用与化合物(Ic)相同的合成方法，用4-(2-氨基乙基吗啉)代替N-甲基哌嗪。得到56mg黄色粉末(If1)。收率：56％，熔点：181℃-184℃。

RMN 1H(400 MHz，CDCl₃)δ(ppm)1.18-1.35(m，1H)；1.50-1.71(m，1H)；1.75-1.93(m，4H)；2.32-2.83(m，11H)；2.91-3.17(m，3H)；3.38(m，2H)；3.55-3.72(m，4H)；3.99(d，1H，J＝14.57Hz)；4.12(d，1H，J＝14.57Hz)；5.69(m，1H)；7.13(m，3H)；7.35-7.52(m，2H)。

实施例9：化合物(Ii)：(±)(3β，16α)14，15-二氢14-(2-吗啉-4-基-乙基氨基)20，21-二降象牙烯宁的合成

将200mg(0.75mmol)化合物(1)溶解在4mL4-(2-氨乙基)吗啉中，将反应混合物加热到110℃，保持4天。将混合物冷却到室温，用CH2Cl2溶解残渣。用水洗涤有机相10次。在MgSO₄上干燥，滤过且浓缩。得到的棕色油溶解在乙醚中，滤过，浓缩滤液。得到的棕色固体在二氧化硅柱(洗脱液为CH₂Cl₂/MeOH以98∶2混合，然后CH₂Cl₂/MeOH以96∶4混合)上纯化。得到含该两种差向异构体的44mg粘性黄色油。收率：15％。

RMN 1H(300MHz，CDCl₃)δ(ppm)1.18-1.38(m，3H)；1.78-2.81(m，17H)；2.93-3.21(m，3H)；3.40-3.57(m，1H)；3.61-3.78(m，3H)；5.18-5.40(m，1H)；7.03-7.21(m，2H)；7.31-7.64(m，2H)。

实施例10：药理学方案

该分子被选作为它们下述能力的函数：

1)蛋白质在Balb/c小鼠的蓝斑(LC)中的活性表达；

2)它们显示大量细胞群体的能力，其中通过治疗，细胞中酪氨酸羟化酶(TH)表型得以恢复。

TH蛋白质的含量在冷冻大脑的冠状切面直接转移到硝酸纤维素滤膜上之后测定。因此，蛋白质分布的精确取样为每80μm取样一次(由此定义每个解剖间隔)，该蛋白质通过定量的免疫化学显示。用一系列含增加量的TH蛋白质的脑组织匀浆做量化。

用相同的解剖取样，TH的免疫阳性细胞数从通过免疫组织化学固定的冠状大脑切面开始测定。

这些分析用以赋形剂治疗的动物和以腹腔内单剂注射要测试分子(100μl内20mg/kg)治疗的小鼠来进行。注射三天后，动物死亡。

典型的结果显示在附图1中。它清楚地显示，TH基因诱导的增加，出现在核的特定水平中。在给治疗组小鼠和对照组小鼠单剂注射之后3天，测定TH蛋白质的含量。测定沿由下至上的轴的每一解剖间隔的TH蛋白质的量。每条代表平均值±对照组(黑条)和治疗组(交叉影条)的标准误差。在该图中，星号“*”指结果显著(p＜0.05)；星号“***”指结果非常显著(p＜0.0005)。在LC中发现TH含量的总数提高了13±3％(使用ANOVA II测试，p＜0001)。

生物活性

考虑到诱导先天Balb/c变种的小鼠的蓝斑(LC)中酪氨酸羟化酶(TH)表达增加的能力，在体外合成和筛选所有具有通式(实施例)的分子。该遗传模式先前被证实能够显示通过外部方法给药的分子的能力，以使得“潜伏的”去甲肾上腺素细胞出现(参考1和2)。下表2含这种筛选结果的例子。

    分子    LC中测得的TH的量    式(1)化合物    120±4**    式(Ia1)化合物    151±5**    式(Id)化合物    129±5**    式(Ie1)化合物    138±4****    式(If1)化合物    113±4**    式(Ig1)化合物    118±3**    式(Ij1)化合物    123±2**

                         表2

对本说明书中的每个实施例来说，通过腹腔内(i.p.)法将100μl赋型剂或单剂量为20mg/kg产品注射到对照组动物和治疗组动物中。动物在注射后三天死亡，取出它们的大脑，冷冻并切成20μm的额切面。在含LC的区域中，每隔80μm取样一次，切面直接传输到硝酸纤维素滤膜上(参考3)。TH由免疫化学测定。结果表示平均值±每组治疗组在整个结构上所得的标准误差。它们以在相应的对照组^**p＜0.02；^***p＜0.002；^****p＜0.0002中发现的平均值的百分数表示。

所述使用式(Ie1)化合物的实施例中得到互补的结果，急性或连续的给药该化合物显示下图所示的蓝斑中去甲肾上腺素细胞群体的显著增加：

图2中结果显示了免疫组织化学确定的，在Balb/c对照组小鼠和通过分子式(Ie1)治疗的治疗组小鼠中的LC中含TH的细胞数的后前方向分布。

每条代表在每个实验组中每80μm的解剖间隔得到的平均值±标准误差。^***表示p＜0.0001，由ANOVA II(治疗因素)测定。应该注意表达TH的细胞数目的非常显著的增加。在整个结构中，得到的对照组和治疗组的平均值分别等于996±1和1250±58。(给药剂量20mg/kg，在第0、3、6、9和12天以i.p.方式连续治疗，动物在第16天死亡)。

这种现象可以通过适当的连续治疗(例如：20mg/kg，每3天i.p.注射一次，共15天，参见图2)得以稳定。在这些条件下，出现在LC中的阳性supernumaryTH细胞数目的增加在停止治疗之后仍然保持24天。

在细胞重现在LC中的同时，在通过化合物(Ie1)治疗的动物中，可以看到前额皮层(图3)的去甲肾上腺素能纤维密度的非常显著的增加。

图3结果显示Balb/c小鼠的前额皮层样品上阳性TH纤维的分布。左边：对照组小鼠中，用与TH蛋白质的存在有关免疫细胞化学反应确认的去甲肾上腺素能纤维的典型方位(与皮层表面平行)，被注意到存在于前额皮层的分子层里。右边：该图显示TH纤维的阳性密度的增加，这种增加被确定于在连续治疗之后(分子(Ie1)的5次i.p.注射；每三天一次，每次20mg/kg)出现在相同的脑区域中。动物在末次注射三天之后死亡。虚线标记前额皮层的分子层界限。

还表明：

-口服分子(Ie1)有效

-这种活性是依赖于腹腔内(i.p.)法和口服(p.o.)法的剂量。半数有效量(DE50)分别是0.5和1.5mg/kg。因此，优选实施例中的分子比它的式(1)(见4，5和6)的直接合成的前体物更有效30倍。

两个对映体对在分子(Ie)的合成过程中被分离。式(Ie1)对映体对被分离成两种纯的产品(Ie1a和Ie1b)。化合物(Ie1b)的活性是(Ie1a)型的两倍，因而是优选型。

发明人还证明，化合物(I)的基团R还可以代表连有碳14和碳15之间的双键的氢原子的式(I)化合物，和特别是化合物(Ie1)具有另一个创新的活性：在侧向下丘脑细胞群体活化下丘脑分泌素(hypocretin)表达，在正常生理条件下，这些肽在balbc/c中仅略微地表达，或根本不表达。该性质和它的直接合成的前体物，式(1)化合物相同。下表3说明了两个化学个体的这类结果：

              赋型剂                 化合物(1)    时间    间隔    细胞数    标准误    差    细胞数    标准误差    T测试 ANOVA(p) (4在后间隔)    1    42.49    8.18    60.357    8.326    0.05l＜0.05    2    85.47    11.61    116.369    6.673    0.020    3    149.20    11.34    177.209    11.705    0.034    4    275.75    23.01    317.237    24.075    0.118    5    367.94    17.26    367.454    16.960    0.984    6    398.84    18.47    377.594    14.783    0.387    7    356.35    13.23    365.523    6.777    0.549    8    275.71    15.35    236.600    20.493    0.153    9    124.58    11.74    136.166    11.203    0.489    10    58.43    10.42    60.840    13.779    0.891    11    27.52    4.86    23.177    3.570    0.485    总计    2162.23    60.21    2238.526    59.074    0.384

              赋型剂              化合物(Iel)    时间    间隔    细胞数    标准误    差    细胞数    标准误差    T测试 ANOVA(p) (4在后间隔)    1    15.77    2.57    31.9    7.3    0.038＜0.005    2    60.84    5.79    63.7    13.2    0.427    3    94.08    6.01    125.1    13.0    0.033    4    174.07    11.27    210.5    16.9    0.056    5    309.83    7.23    331.7    9.9    0.056    6    376.87    9.98    369.9    8.3    0.299    7    362.79    22.16    388.7    7.7    0.132    8    343.63    24.34    322.5    14.0    0.226    9    252.37    23.00    216.3    21.1    0.136    10    127.88    14.77    104.8    14.1    0.141    11    64.78    10.30    56.0    11.1    0.290    总计    2182.92    88.30    2221.1    57.9    0.358

表三

这里，以在连续的80μm厚的间隔，用后一前位取样来研究侧向下丘脑中表达下丘脑分泌素的细胞分布。使用特异性抗体通过免疫细胞化学来识别细胞。所研究的两种分子以i.p.法，20mg/kg的单剂量给药。动物在注射后三天死亡。由此，在大脑核心的后三分之一处识别约一百个supernumary细胞群体。

优选实施例中的分子(Ie1b)也做了行为活性试验，尾料悬浮试验(TST)，剂量为1mg/kg，i.p.，这两种试验由Balb/c变种中的抗抑郁药(参考7)证实。作为一个例子给出的实验在单剂量注射之后三天进行，效果可与丙咪嗪(30mg/kg，在该实验前30分钟i.p.)相比(见下表4)。

    n    给药剂量   平均固定时间(s)    标准差 P(标准试验) 赋型剂    8    0   180 化合物(elb)    7    1mg/kg i.p.   130    15.8 0.009  丙咪嗪    5    30mg/kg i.p.   70    15.5 0.0001

表4

在6分钟期测定的固定时间在单剂量注射化合物(Ie1b)，外消旋的(Ie1)的活性异构体后三天显著地降低。该结果是n个动物的平均值。

“体外”于浓度为10微摩化合物(Ie1)的74个受体和通道上所做的受体曲线表明，其既不与电压依赖的Na、K和Ca和SK+Ca通道发生相互作用，也不与儿茶酚胺运输系统发生相互作用，猜想其对M1和5HT5A受体有着中等的结合亲合力。

在以高剂量(分别为20和60mg/kg)i.p.和口服给药45分钟之后，分子(Ie1)的生物分布研究显示：

-在i.p.给药化合物(Ie)之后，在化合物(1)存在下，(合成前体物)不可检测。

-同时p.o.给药之后，化合物(Ie1)占大脑浓度的89％，化合物1仅占11％。

-对化合物(Ie1)，大脑浓度/肝脏浓度比在两种给药方法(分别为0.41和0.49)中一致。

这些结果证明，本发明化合物，其中化合物(I)的基团R还可以代表连有碳14和碳15之间的双键的氢原子，以及特别是优选化合物(Ie1)和更优选的(Ie1b)，特别地对如上所观察的效应负责，而且它们在大脑中的生物分布是有利的。

总之，本发明化合物，其中化合物(I)的基团R还可以代表连有碳14和碳15之间的双键的氢原子，以及特别是优选化合物(Ie1)和更优选的(Ie1b)，能够将塑性现象诱导入脑内，这使得Balb/c小鼠脑中的蓝斑综合体的静止的去甲肾上腺素细胞群体得以复苏。这种表型苏醒与遗传学纯的突变系小鼠的前额皮层的去甲肾上腺素神经分布增加有关，这种小鼠具有低密度前神经分布。确定优选化合物。它通过口服激活。它的活性比它的具有相似特性的直接化学前体物多三十倍。本发明化合物，其中化合物(I)的基团R还可以代表连有碳14和碳15之间的双键的氢原子，还能够长期激活侧向下丘脑中表达下丘脑分泌素的特定神经元群体。

鉴于该家族在中枢去甲肾上腺素媒介(特别是前额)，以及在与睡眠清醒周期和动物抑郁症模式有关的下丘脑分泌素神经元上的潜在功效是已知的(参考8，9)。鉴于通过去甲肾上腺素神经元施加于人的特殊控制管理着情绪(参考10，11)和认知现象(参考12)。鉴于几种精神病和神经病学病变中功能性额叶和前额叶的缺失，及先前观察到的重症抑郁症(参考10，11，12)和重症退化综合症例如阿尔茨海默氏病和帕金森氏病(参考12，13)中蓝斑中功能性额叶和前额叶的缺失的直接证据。由于对许多患者对现用疗法有耐药性，化合物(I)的基团R还可以代表连有碳14和碳15之间的双键的氢原子，且特别优选化合物(Ie1)和更优选(Ie1b)的本发明化合物可用于预防或治疗抑郁综合症特别是重症抑郁症，耐受性抑郁症如那些DSM4中定义的那些(参考14，15，16)，及用于校正双向抑郁症(参考17)和精神分裂症(参考18)的负面症状。这类分子还可用于治疗认知部分的症状性额叶紊乱(轻度认知障碍(参考9))；与阿尔茨海默氏疾病或帕金森氏疾病(参考20)有关的预痴呆和痴呆病症，或行为失常，包括活动减退、注意力问题、品德问题(注意力缺乏-活动过度(ADHD)型(参考21))，以及睡眠问题，特别是活动减退或表现为睡眠过度(发作性睡眠)。

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