一种水芹总酚酸的制备工艺和以该总酚酸为活性成分的药物制剂及应用

摘要

本发明公开一种水芹总酚酸及其所含有效成分金丝桃苷、异槲皮苷、廖黄素、氯原酸等。本发明还公开了水芹总酚酸的制备方法，其包括以下步骤，取水芹药材，加乙醇提取，回收乙醇，得醇浸膏，以沸水溶解，过滤，上清液上聚酰胺柱，先用水洗脱，再用乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇，真空干燥得干浸膏，用比色法测定总酚酸含量，以此干浸膏为药用有效部位，总酚酸含量达到50％以上，达到国家5类中药原料药标准。此外，本发明还公开水芹总酚酸作为原料药和以该成分为活性成份的药物组合物的抗心血管(降压、抗心律失常)疾病、脑缺血和糖尿病作用。

说明书

技术领域

本发明属于植物药有效部位分离、纯化技术领域，可使水芹有效部位总酚酸含量大于50％，达到国家5类中药原料药标准；并涉及以该成分为原料药的药物制剂及作用、用途。

背景技术

常用提取分离工艺为：醇提-水沉-乙酸乙酯提取法或酸碱法，得总酚酸，这些方法或有效成分损失大或成分被破坏，使得总酚酸得率低，成本高。因此需要研究一种新的简便、高效的提取分离方法，并适用于工业化生产。

发明内容

本发明目的在于公开制备水芹总酚酸的方法；本发明的另一个目的在于公开以该总酚酸为活性成分的药物制剂及其抗心血管(降压、抗心律失常)疾病、脑缺血和糖尿病作用。

本发明目的是通过如下技术方案实现的：

将干燥的水芹全草粉碎成粗粉，用10-30倍量的亲水性溶剂加热回流提取或冷浸渗滤提取，热提2-3次，每次1-3小时，然后将提取液于低于60℃条件下减压浓缩至比重1.15-1.30(70℃)的浸膏；加入原生药量4-6倍热水，分次溶解，静置24小时，过滤，滤液聚酰胺为载体的柱层析，用水冲洗及用水：醇比例为50∶50-5∶95的混合溶剂洗脱，收集水-纯系脱液，于低于60℃的条件下减压浓缩，真空干燥得水芹总酚酸提取物。

本发明的药物制剂含有0.5％-99.5％的水芹总酚酸和99.5％-0.5％的赋形剂(包括其他配用的药物)，优先含有1％-60％的水芹总酚酸和99％-40％的药用赋形剂(包括其他配用的药物)。

按药剂学方法，可以将本发明的水芹总酚酸制备成多种临床药物剂型作为抗心血管(降压、抗心律失常)疾病、脑缺血和糖尿病作用。，包括口服制剂或非肠道给药的剂型。所说的口服制剂选自于片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂、混悬剂、滴丸、口服液体制剂中的任何一种；所说的非肠道给药剂型选自于注射剂、气雾剂、栓剂或皮下给药剂型中的一种。

本发明的抗心血管(降压、抗心律失常)疾病、脑缺血和糖尿病作用。药物中的辅料是指常规的赋形剂，如溶剂、崩解剂、矫味剂、防腐剂、着色剂、粘合剂等。本法明抗心血管(降压、抗心律失常)疾病、脑缺血和糖尿病作用中的其他配伍用的药物，指的是以有效剂量的水芹总酚酸为一定的药物原料，配伍其他已允许合用的中药或化学药品。

附图是水芹总酚酸提取物分离提取工艺流程图。

下面实验例用于进一步说明本发明，但不以任何方式限制本发明。

1、药理作用

1对心脏的影响  水芹总酚酸在0.15％和0.5％浓度下，可使离体蟾蜍心脏的心率减慢，收缩力减弱，输出量减少，而且随浓度增加而增强，这一作用可能与阻断β受体，对抗肾上腺素兴奋的作用有关。在体实验表明，水芹总酚酸注射液0.15g/kg iv 30秒钟后，对大鼠心电图有短暂的影响，心室率减慢至正常心率的75％，这一结果提示水芹总酚酸对整体心脏主要是抑制作用。

2降血压作用  用水芹总酚酸制成50％的注射液，分别给正常的Wistar大鼠及自发性高血压大鼠(SHR)静注不同的剂量，可见血压呈现剂量依赖性降低，以给药后1-5分钟最明显，与给药前相比差别显著(p＜0.01)。水芹总酚酸还可使正常家兔血压降低，按1∶1浓度1ml/kg，ig，血压由给药前的124±10.1mmHg降至76±30.3mmHg(p＜0.01)，下降38.7％。

3抗心律失常静注水芹总酚酸注射液3ml/kg，分别对乌头硷，氯化钡和氯化钙诱发大鼠心律失常进行药效观察。乌头硷实验结果表明，水芹总酚酸组显著提高引起VP，VT，VF及HS的乌头硷的累积剂量(p＜0.01)。氯化钡实验结果，生理盐水对照组大鼠45min内无一例转窦性心律，而水芹总酚酸组与利多卡因组在15min内全部转为窦性。氯化钙实验结果，生理盐水组全部出现室颤，5min内死去。水芹组室颤发生率降低25％，死亡率降低50％，维拉帕米组室颤及死亡率均降低25％。以上结果说明，水芹总酚酸可明显对抗乌头硷和氯化钡引起的大鼠心律失常。此外，水芹总酚酸对心肌再灌注性损伤有显著的保护作用。

4抗糖尿病作用  研究发现水芹总酚酸给正常小鼠ig20g/kg可使血糖显著降低(p＜0.05)，10g或20g/kg预防给药可使四氧嘧啶致高血糖小鼠的血糖明显降低(p＜0.05)。胰腺病理观察，可见水芹总酚酸给药组胰岛损伤程度及其形状大小均比对照组为轻，表明水芹总酚酸既有降血糖作用，可能还有保护胰腺作用。实验还发现水芹总酚酸20g/kg不能对抗肾上腺素引起的血糖升高，提示具有降血糖和降血作用。

2、水芹总酚酸原料药的制备

将干燥的水芹全草粉碎成粗粉，加10倍量的70％乙醇加热回流提取2小时，共3次，合并提取液，放冷，过滤，然后将提取液于低于60℃条件下减压浓缩至比重1.15-1.30(70℃)的浸膏；加入原生药量6倍热水，分次溶解，静置24小时，过滤，滤液加于相当于生药5倍量，已处理好的聚酰胺柱上，用水冲洗至流出液呈淡黄色后，用70％醇洗脱，收集乙醇洗脱液至洗脱液承担黄色为止，于低于60℃的条件下减压浓缩，真空干燥得水芹总酚酸提取物。

3、胶囊剂的制备

水芹总酚酸原料100g，药用淀粉100g

将水芹总酚酸和药用淀粉分别过100目筛，并混合均匀，用适量乙醇制粒。于60℃干燥，整粒，装入胶囊。

4、片剂的制备

水芹总酚酸原料100g，药用淀粉100g

将水芹总酚酸和药用淀粉分别过100目筛，并混合均匀，用适量乙醇制粒。于60℃干燥，经整粒机整粒，压片。

5、颗粒剂的制备

水芹总酚酸原料100g，药用淀粉100g，糖粉40g

将水芹总酚酸、药用淀粉和糖粉分别过100目筛，并混合均匀，用适量乙醇制粒。于60℃干燥，整粒，分装。

6、注射剂的制备

水芹总酚酸原料10g，丙二醇20ml，聚乙二醇-400 50ml，注射用水300ml，混合，水浴加热30min，加苯甲醇50ml，再用注射用水加至1000ml，在超声波中处理10min，再在水浴上加热30min，调PH值5.5-6.5，过滤澄明，灌封，灭菌即得。