一种抗氧剂RN－L的高效液相色谱分析法

摘要

一种非凝胶色谱分析聚合物中各种主要活性物质含量的方法。抗氧剂RN－L的高效液相色谱分析法，其特征是高效液相色谱的条件为：色谱柱：C18，5um，200×4.6mm(I.D.)；柱温：室温；流动相组成：80％乙腈－20％甲醇；流动相流速：0.5ml/min；检测波长：280nm；进样量：5ul。本发明的抗氧剂RN－L高效液相色谱分析法，可以准确分析出抗氧剂RN－L中各主要活性组分的含量，为生产抗氧剂RN－L的质量控制分析提供了简单可靠的方法。

说明书

技术领域

本发明涉及利用高效液相色谱法建立抗氧剂RN-L工业产品的质量控制分析法。

背景技术

对于聚合物的分析，一直以来都是采用凝胶色谱，我们所生产的抗氧剂RN-L是对甲苯酚与双环戊二烯的丁基化产物，是一个聚合物。由于分子量不是很大且在紫外有一定的吸收，所以考虑用非水反相色谱测其抗氧剂中各主要峰与次要峰的含量，再与标准品各主峰与次要峰吸收强度作对比得出结论。

对于用C₁₈的非水反相色谱作抗氧剂RN-L的质量控制分析的测定方法暂未见公开报道。

发明内容

本发明的目的是利用高效液相色谱法建立抗氧剂RN-L工业产品的质量控制分析法，一种抗氧剂RN-L的高效液相色谱分析法。

本发明的技术方案如下：

一种抗氧剂RN-L的高效液相色谱分析法，其特征在于高效液相色谱的条件为：

色谱柱：C18，5um，200×4.6mm(I.D.)；

柱温：室温

流动相组成：

80％乙腈-20％甲醇

流动相流速：0.5ml/min；

检测波长：280nm；

进样量：5ul

本发明的抗氧剂RN-L高效液相色谱分析法，可以准确分析出抗氧剂RN-L中各主要活性物质的含量，为生产抗氧剂RNFY的质量控制分析提供了简单可靠的方法。

附图说明

图1为抗氧剂标准品谱图  三个含量最高的峰1#峰(15.3min)，2#峰(13.5min)，3#峰(14.3min)

图2为抗氧剂样品的色谱图

具体实施方式

根据试验得出如下结论：

一种抗氧剂RN-L的高效液相色谱分析法，高效液相色谱的条件为：

色谱柱：C18，5um，200×4.6mm(I.D.)；

柱温：室温

流动相组成：

80％乙腈-20％甲醇

流动相流速：0.5ml/min；

检测波长：280nm；

进样量：5ul

主要仪器

Waters高效液相色谱仪，2487型紫外检测器，515高效液相色谱泵，77251进样阀(定量管5ul)，Water Empower色谱工作站，上海精密科学仪器有限公司757型紫外可见分光光度计。

样品和试剂

抗氧剂RN-L，自制；

标准品，伊利欧化学公司提供；

甲醇：HPLC级；

乙腈：HPLC级；

实验中流动相和溶液用水均为二次石英蒸馏水。

实施例1高效液相色谱条件的选择

1.1色谱条件的选择

1.1.1色谱柱的选择

当选用C18 5um，150×4.6mm(I.D.)色谱柱时，由于抗氧剂是一个结构比较复杂的混合物，用150mm长的色谱柱会使两个主要的峰1#峰与3#峰重合达不到很好的分离，影响对产品质量的判断。改用C18 5um 200×4.6mm长的色谱住后使得被重合的二个色谱峰得到了良好的分离。

1.1.2流动相的选择

我们先后试验了几种不同的流动相，甲醇/水＝100∶15由于抗氧剂在水中溶解性很差，在有机相溶解的比较好，用此流动相时，需先用有机溶剂溶解样品再用流动相稀释的办法，虽然分离的比较好但柱压比较高。所以考虑用非水反向。甲醇/二氯甲烷＝90∶10样品溶解性很好，但出峰太快不能达到很好的分离。兼顾溶解性与分离度选用甲醇/磷酸/乙酸乙酯＝97∶0.3∶3此流动相的溶解及分离都比较好，但由于乙酸乙酯的挥发性，放置时间长，挥发会造成溶液浓度升高，保留时间变化。最终选用甲醇/乙腈＝20∶80。

1.2检测波长的选择

用757紫外可见分光光度计在200nm-400nm处进行扫描，抗氧剂分别在217nm和280nm处有特征吸收。由于我们侧重考虑抗氧剂中大分子的含量，而这些大分子在280nm处吸收的更强，所以最后我们选280nm作为检测波长。

实施例2.标准溶液及样品溶液的配制

精确称量40mg抗氧剂RN-L标准对照品，置于50ml容量瓶中，先加入少量甲醇使之溶解，再用流动相定容至50ml，配成抗氧剂RN-L浓度为0.8mg/ml的标准液。进样5ul，色谱图如图1。面积归一化法计算出所需要的峰含量。标准液重复进样7次，峰面积的标准偏差、变异系数为：1#样0.43％，1.17％。2#样0.14％，1.38％。3#样0.18％，2.08％。所以在没有每种物质标准品的情况下用面积归一化法测此抗氧剂含量误差不大。

 1#样含量％2#样含量％ 3#样含量％ 36.3110.34 8.68 37.1110.12 9.02 37.2110.22 8.42 36.429.99 8.62 36.469.98 8.56 36.7810.03 8.70 37.4010.23 8.66 平均％      36.81 标准偏差％  0.43 变异系数％  1.17平均％     10.13标准偏差％ 0.14变异系数％ 1.38 平均％     8.67 标准偏差％ 0.18 变异系数％ 2.08

实施例3样品的测定

精确称量40mg抗氧剂RN-L样品，置于50ml容量瓶中，先加入少量甲醇使之溶解，再用流动相定容至50ml，进样5ul，色谱图如图2。面积归一化法计算出所需要的峰含量。

同样配制三份样品溶液，测得1#样品中抗氧剂RN-L的平均含量：1#峰39.15％，标准偏差0.41％，变异系数1.05％。2#峰10.04％，标准偏差0.12％，变异系数1.20％。3#峰8.82％，标准偏差0.17％，变异系数1.93％。取其中一份样品溶液，重复进样三针，测得抗氧剂RN-L的平均含量：1#峰39.19％，标准偏差0.30％，变异系数0.77％。2#峰10.10％，标准偏差0.11％，变异系数1.09％。3#峰8.82％，标准偏差0.16％，变异系数1.81％。