免疫球蛋白和细胞生长因子在制备治疗哮喘药物中的应用

摘要

本发明公开了免疫球蛋白和细胞生长因子在制备治疗哮喘药物中的应用。本发明的药物治疗哮喘的作用机理为：(1)sIgA覆盖在支气管粘膜顶层，封闭抗原经粘膜侵入体内，(2)杀灭侵入体内的细菌和病毒，从而消除哮喘重要诱发因素；(3)生长因子EGF修复呼吸道和支气管破损粘膜与组织，故停药后抗原入侵不再发生痕迹性过敏反应。本发明治疗有效率可达到93％，随访2(1/2)年以上，本发明80％未见复发。本发明的药物，对各种年龄的治疗支气管哮喘均有十分显著的疗效，值得推广应用。

说明书

技术领域

本发明涉及一种治疗支气管哮喘的药物，尤其涉及一种从人初乳中分离的分泌型免疫球蛋白A(sIgA)和上皮细胞生长因子EGF组成的活性药物。

背景技术

支气管哮喘患者全球超过1亿人，患病率仍不断上升。目前治疗方法有：(1)β受体兴奋剂使支气管平滑肌松弛达到发作缓解，但是其停药后又复发；(2)皮质激素：起非特异性消炎作用，近年应用气雾剂小剂量吸入治疗，疗程3-5年以上，仍难根治；(3)脱敏疗法：定期注射过敏原脱过敏，多年多次注射难以坚持；且过敏原发现达100种以上，有的疗效不肯定，有的无法脱过敏。

发明内容

本发明需要解决的技术问题是公开一种由分泌型免疫球蛋白A(sIgA)和上皮细胞生长因子EGF组成的活性药物；

本发明需要解决的另一个技术问题是公开一种含有上述活性成分的药物组合物；

本发明需要解决的再一个技术问题是公开上述活性药物或组合物在制备治疗支气管哮喘药物中的应用，以克服现有技术存在的上述缺陷，满足人们的需要。

本发明需要解决的再一个技术问题是公开上述活性药物的制备方法，以便于工业化生产。

发明人在长期的医疗实践中发现，由分泌型免疫球蛋白A(sIgA)和上皮细胞生长因子EGF组成的活性药物对支气管哮喘有显著的治疗作用，可以用于制备治疗支气管哮喘的药物。

由分泌型免疫球蛋白A(sIgA)和上皮细胞生长因子EGF组成的活性药物的组分和重量份数包括：

分泌型免疫球蛋白A(sIgA)    1份

上皮细胞生长因子EGF        0.001～0.02份

优选的重量份数包括：

分泌型免疫球蛋白A(sIgA)    1份

上皮细胞生长因子EGF        0.002～0.01份

许多文献对所说的分泌型免疫球蛋白A(sIgA)和生长因子EGF进行了详细的研究：

所说的分泌型免疫球蛋白IgA为具有4条轻链、4条重链的IgA双体，以及1条J链将A(sIgA)双体连接和外包有一分泌片(Sc)的免疫球蛋白，分子量为380,000。

sIgA的致密结构，特别是J链和分泌片的存在，能抵御酸、碱的破坏和蛋白分解酶的降解作用。

May，JT 1998-1999年指出，温度对sIgA的影响：72℃10秒与56℃30分钟后sIgA 85％保存，4℃7天与-10℃3月则100％保存。

根据May，JT 1998-1999年报道，sIgA可杀灭多种细菌，包括流感杆菌、链球菌、金黄色葡萄球菌、百日咳杆菌、肺炎球菌、脑膜炎菌和白色念珠菌等。且能灭活多种病毒，包括流行性感冒病毒、呼吸道合胞病毒、柯萨基与埃可病毒、脊髓灰质炎病毒、水痘一带状疱疹病毒、腮腺炎病毒和单纯疱疹病毒等。

文献：CNR：The Colostrum，Miracle：Too Good to be True？Copyright1996，1997，1998，1999，CNR Publications报道，人初乳内含sIgA5mg/ml；

文献：Hanson，LA et al：Immunological aspects of breast milk，NationalWorkshop on Breast-feeding with International Participation，11～6 Oct.1982，Shanghai和文献：翁维楷：母乳与免疫，临床儿科杂志1983，1(1)：36报道，sIgA的致密结构，特别是J链和分泌片的存在，能抵御酸、碱的破坏和蛋白分解酶的降解作用；

文献：May，JT：Human Milk-Tables of the antimicrobial factors andmicrobiological contaminants relevant in human milk banding，Department ofMicrobiology La Trobe University，Bundoora Victoria 3083，Australia CraigLighton-1 February，1999指出了温度对sIgA的影响：72℃10秒与56℃30分钟后sIgA 85％保存，4℃7天与-10℃3月则100％保存；

文献：CNR：The Colostrum，Miracle：Too Good to be True？Copyright1996，1997，1998，1999，CNR Publications；文献Hanson，LA et al：Immunological aspects of breast milk，National Workshop on Breast-feedingwith International Participation，11～6 Oct.1982，Shanghai和文献翁维楷：母乳与免疫，临床儿科杂志1983，1(1)：36均对生长因子细胞生长因子(Epithelial Growth Factor，EGF)进行了详细的研究，1983年Spom等首先在牛初乳中发现EGF，并发现EGF主要在人初乳中含量较多，为75μg/l。EGF分子量为6,000。

EGF的作用为：

a.再生和加速衰老或损伤的皮肤、粘膜、肌肉等正常生长；

b.修复机体有生命活性DNA和RNA；

c.灼伤、手术、切割、创伤和口腔溃疡等愈合。

值得指出，人初乳尚含有转化生长因子(TGF-β₂)，含2.2～7.2mg/ml和类胰岛素生长因子(IGF-I)，含量为17～68μg/l。1990年在Tucson的Arizana大学研究者显示共同存在时显示加强刺激正常生长和修复细胞组织，刺激的细胞群将合为肌肉纤维，增加肌肉细胞的生长和修复数量；

文献Clark，DG & Wyatt，K：Colostrum，p.51-52，CNR Publications，1998指出，初乳是一种天然原料，经数百年人类应用和临床研究，已证明在任何剂量应用时，是完全安全的、无药物相互作用或副作用。

所说的上皮细胞生长因子EGF可采用基因工程方法制备的产品，如可采用大江公司生产的上皮细胞生长因子EGF。

本发明优选采用来源于人初乳的分泌型免疫球蛋白A(sIgA)。

本发明还涉及一种药物组合物，所说的药物组合物含有治疗有效量的所述及的活性成分和一种或多种医药学上可接受的载体，所述及的药物载体包括稀释剂、赋形剂如水、人初乳等，填充剂如淀粉等，粘合剂如纤维素衍生物、明胶等，崩解剂如碳酸钙，吸附载体如高岭土和肥黏土等。可采用常规的方法制成常规的固体制剂，如片剂、粉剂或胶囊；制成液体制剂，如口服液。

含有所述活性成分的组合物可以采用医药学领域的常规生产进行制备，所述及的组合物中，优选的活性成分的重量百分比含量为0.01～0.1wt％；

所述及的组合物可通过口腔喷雾或口服的给药的形式施用于需要这种治疗的患者，

本发明的施用量可根据患者年龄、体重、疾病的类型和严重程度等进行变化，其日剂量为0.001～0.01mg/公斤体重。

分泌型免疫球蛋白A(sIgA)和生长因子EGF的含量可采用常规的方法进行测定。

所说的由分泌型免疫球蛋白A(sIgA)和生长因子EGF组成的活性药物的制备方法包括如下步骤：

(1)将人初乳置于0～4℃的温度下，在5000～20000转/分钟的离心机中离心分离，收集含有sIgA的分离液；

(2)采用孔径为0.01～0.3μm的超滤膜分离，以进一步去杂质，然后采用常规的方法并消毒；

(3)在-10～-30℃的温度下冷冻干燥，获得含有分泌型免疫球蛋白A(sIgA)的粉剂；

(4)加入基因工程方法制备的上皮细胞生长因子EGF，搅拌均匀，即获得产品。

本发明的药物治疗哮喘的作用机理为：(1)sIgA覆盖在支气管粘膜顶层，封闭抗原经粘膜侵入体内，(2)杀灭侵入体内的细菌和病毒，从而消除哮喘重要诱发因素；(3)生长因子EGF修复呼吸道和支气管破损粘膜与组织，故停药后抗原入侵不再发生痕迹性过敏反应。

发明人对3组哮喘患者(包括儿童与成人)应用不同治疗方法，结果如下：

治疗方法        病例数     有效数    (％)

本发明          100        93        93.0

常规治疗        100        90        90.0

氨茶碱          100        78        78.0

本发明治疗组有效率93％，常规治疗组为90％，二组有效率(症状体征消失，发作缓解)差异不明显(t＝0.76，P＞0.05)。但二组有效率均较氨苯碱组为高(t＝3.08，P＜0.01；t＝2.35，P＜0.05)。三组停药后均随访21/2年以上，发现本发明组80％未见复发，国内外未见1月治疗根治报道。

由此可见，本发明的药物，对各种年龄的治疗支气管哮喘均有十分显著的疗效，值得推广应用。

具体实施方式

                           实施例1

由分泌型免疫球蛋白A(sIgA)和上皮细胞生长因子EGF组成的活性药物的制备：

(1)将1000克人初乳置于0℃的温度下，在10000转/分钟的离心机中离心分离，收集含有sIgA分离液；

(2)采用孔径为0.01μm的超滤膜分离，以进一步去杂质，然后采用常规的方法并消毒，获得100克分离液，采用琼脂扩散发测试，其中：含有sIgA 5毫克/克；

(3)将上述100克超滤膜分离液在-10℃的温度下冷冻干燥，获得含有泌型免疫球蛋白A(sIgA)的粉剂10克，其中：含有sIgA 5克；

(4)加入0.005克由大江公司生产的基因工程方法制备的上皮细胞生长因子EGF，搅拌均匀，即获得活性药物。

喷雾制剂的制备：

将上述获得的活性药物与10克水混合，即获得用于口腔喷雾或口服的制剂。

                          实施例2

(1)将1000克人初乳置于4℃的温度下，在15000转/分钟的离心机中离心分离，收集含有sIgA分离液；

(2)采用孔径为0.02μm的超滤膜分离，以进一步去杂质，然后采用常规的方法并消毒，获得100克分离液，采用琼脂扩散法测试，其中：含有sIgA 4毫克/克；

(3)将上述100克超滤膜分离液在-30℃的温度下冷冻干燥，获得含有泌型免疫球蛋白A(sIgA)的粉剂10克，其中：含有sIgA 4克；

(4)加入0.08克由大江公司生产的基因工程方法制备的上皮细胞生长因子EGF，搅拌均匀，即获得活性药物。

片剂的制备：

采用制剂领域公知的方法，将上述的活性药物与适量的淀粉、适量的纤维素和适量的蔗糖压制成为片剂。

                          实施例3

具体病例：

1、余某，男，3岁，患儿哮喘从小发作，经用多种药物治疗无效，来时哮喘正发作，采用实施例1的喷雾剂，每日数次，治疗1周，症状体征消失缓解，共治疗1月停药，随访10年以上未见复发。

2、张某某，男，9岁。患者哮喘7年，经用哮喘药常规治疗无效，来时哮喘正发作，应用实施例2的片剂治疗，每日3次，每次6片，共7天，症状体征消失缓解。共治疗1月停药，随访10年未见复发，正攻读大学。

3、吴某某，男，34岁，驾驶员，患哮喘20年，曾用多种药物治疗无效。来时哮喘正发作，采用实施例1的喷雾剂，每日数次，治疗7天，体征症状消失缓解。共治疗1月停药，随访2年未见复发。

4、陈某某，女，31岁，纺织厂职工，患哮喘14年，应用多种药物无效，近用天花粉治疗造成流产，哮喘仍发作。采用实施例1的喷雾剂，每日数次，治疗7天，症状体征消失缓解。共治疗1月停药，随访2年未见复发。