超临界萃取葡萄籽油及树脂吸附提取原花青素的方法

摘要

本发明公开了一种超临界萃取葡萄籽油及树脂吸附提取原花青素的方法，具体为葡萄籽油及原花青素的制备技术。该方法包括以下过程：首先在萃取压力20～35MPa、温度40～50℃下采用超临界二氧化碳从粉碎后葡萄籽中提取葡萄籽油；再将去油葡萄籽25～35％采用乙醇水溶液加热回流，提取液浓缩后加入50～70％乙醇或异丙醇液搅拌静置后减压抽滤得原花青素粗提液，再用聚苯乙烯树脂吸附，上样液流速1.0～3.0BV/h，上样量为树脂体积的2～6倍，吸附温度20℃，上样液浓度为0.05～0.5g/ml，pH值3～5，吸附饱和后采用解吸剂解吸，将洗脱液减压干燥得精制原花青素产品。本方法的优点在于将两种技术集成得到两种具有保健和药用价值的产品，具有操作简单、参数易控、吸附选择性高、稳定性好、低能耗等特点。

说明书

技术领域

本发明涉及一种超临界萃取葡萄籽油及树脂吸附提取原花青素的方法，具体为葡萄籽油及原花青素的制备技术。

背景技术

葡萄籽中含有约9～15％的葡萄籽油，其中亚油酸含量为45～72％。葡萄籽油中含有的亚油酸具有防治高血压、动脉硬化、心脏病的功能；对降低人体血清胆固醇和植物性神经功能失调有明显的疗效，在食品、化妆品及医药工业中均有好的应用。

原花青素(PC)是植物王国中广泛存在的一大类多肽酚化合物的总称，是由不同数量的儿茶素或表儿茶素缩合而成。最简单的原花青素是儿茶素或表儿茶素或儿茶素与表儿茶素形成的二聚体，此外还有三聚体、四聚体等直至十聚体。原花青素是一种多酚物质，具有抗氧化剂活性、酶抑制活性、抗致突变活性、降低毛细血管通透性(抗炎活性)、心血管活性等。现有的提取葡萄籽油的方法有：(1)压榨法；(2)有机溶剂萃取法；(3)超临界CO₂萃取法，已有文献报道有关原花青素的提取方法包括有机溶剂萃取法、膜分离法、水提醇沉-树脂吸附法等。目前的工业生产多采用水提醇沉-树脂吸附技术直接从未粉碎的葡萄籽中提取原花青素，而后葡萄籽残渣大多廉价卖给农民作饲料或进一步粗提葡萄籽油，葡萄籽中的有效成分未得到充分利用。将两种技术集成一体同时得到葡萄籽油和原花青素两种产品的工艺未见报道。

发明内容

本发明的目的在于提供一种超临界萃取葡萄籽油及树脂吸附提取原花青素的方法，该方法集由葡萄籽中提取葡萄籽油和原花青素的工艺于一体，且所得产品质量好。

本发明是通过下述技术方案加以实现的。一种从葡萄籽中超临界萃取葡萄籽油及树脂吸附提取原花青素的方法，其特征在于包括以下过程：

1.将葡萄籽粉碎至粒度为20～100目，粉碎后葡萄籽装入萃取釜，CO₂通过升压系统后送入萃取系统与原料相接触，在萃取压力20～35MPa、温度40～50℃进行超临界CO₂萃取，CO₂流速10Kg/h，溶解了葡萄籽油的CO₂进入分离釜在温度20℃、压力3～10MPa下分离，葡萄籽油用接收器接收，CO₂循环利用，整个过程萃取时间1～3小时。

2.配制25～35％乙醇水溶液与去油后葡萄籽混合后加热回流，过滤得提取液。将提取液蒸发浓缩至1.2g/ml后以10mL/min的流速向其中滴加50～70％乙醇或异丙醇液以沉淀杂质，而后用双层滤纸减压过滤，并滴加醋酸得浓度为0.05～0.5g/ml、pH值为3～5的原花青素粗提液。

3.将处理好的聚苯乙烯树脂装入吸附柱中，按2步骤处理好的溶液上样，上样液流速1.0～3.0BV/h，上样量为树脂体积的2～6倍，吸附温度20℃，树脂吸附达饱和后，使用15～45％乙醇溶液脱附，洗脱液流速0.5～2BV/h，脱附温度70℃，再用蒸馏水以600ml/h的流速进行漂洗，洗至无色为止。收集器分部收集流出液。流出液经旋转蒸发得精制原花青素产品。

本方法的优点在于将两种技术集成得到两种具有保健和药用价值的产品，其中超临界萃取技术具有低能耗、无污染、操作简单、参数易控等优点，产品无任何溶剂残留，整个操作过程简单方便、得率高且耗时短。树脂吸附技术利用树脂发生吸附-解吸作用从而达到对物质的分离、净化的目的，具有吸附选择性高、稳定性好等特点。

具体实施方式

本发明的实施方案如下：

例1

将粉碎葡萄籽原料1563g投入萃取釜中，萃取釜压力30MPa、温度50℃，待稳定30分钟后连续向萃取釜通入超临界CO₂进行萃取，CO₂流速10Kg/h，萃取时间3小时，控制分离釜温度20℃、压力6MPa，由接收器收集产品，最后得葡萄籽油204g，葡萄籽油产率为13.02％。

称取100g葡萄籽萃余物与配制的30％乙醇-水溶液500mL混合放入三口烧瓶中，搅拌速度20rpm，加热温度60℃回流约1h。滤液减压过滤，回收药渣，加入溶剂，进行第二和第三次加热回流，时间分别为0.5h左右。将三次提取液合并蒸发浓缩为1.2g/ml，将醇液以10ml/min恒速滴加同时快速搅拌。密闭静置12h后，用双层滤纸减压过滤。滴加60％无水乙醇沉淀，所得原花青素醇沉率达7.45％，含量70.15％；滴加60％异丙醇沉淀，所得原花青素醇沉率达5.93％，含量73.16％。

进行吸附条件为吸附柱柱径22mm，高径比9，上样液流速2.0BV/h，上样量为树脂体积的4倍，药液浓度0.25g/ml，pH值3.8，吸附温度20℃，使用40％乙醇溶液脱附，吸脱液流速1.0BV/h，脱附温度70℃，经大孔树脂吸附后所得原花青素含量94.57％，原花青素提取率5.36％。按照上述条件进行第二次吸附：将解吸下的原花青素重新进行吸附解吸，可以得到原花青素含量97.82％，水不溶物含量1.67％，原花青素提取率4.88％。例2

将粉碎葡萄籽原料1587g投入萃取釜中，萃取釜压力25MPa、温度45℃，待稳定30分钟后连续向萃取釜通入超临界CO₂进行萃取，CO₂流速10Kg/h，萃取时间1小时，控制分离釜温度20℃、压力5MPa，由接收器收集产品，最后得葡萄籽油204g，葡萄籽油产率为12.90％。

称取100g葡萄籽萃余物与配制的25％乙醇-水溶液500mL混合放入三口烧瓶中，搅拌速度20rpm，加热温度60℃回流约1h。滤液减压过滤，回收药渣，加入溶剂，进行第二和第三次加热回流，时间分别为0.5h左右。将三次提取液合并蒸发浓缩为1.2g/ml，将醇液以10ml/min恒速滴加同时快速搅拌。密闭静置12h后，用双层滤纸减压过滤。滴加50％无水乙醇沉淀，所得原花青素醇沉率达7.69％，含量62.86％；滴加50％异丙醇沉淀，所得原花青素醇沉率达6.37％，含量63.10％。

进行吸附条件为吸附柱柱径22mm，高径比9，上样液流速1.5BV/h，上样量为树脂体积的2倍，药液浓度0.05g/ml，pH值4.7，吸附温度20℃，使用45％乙醇溶液脱附，吸脱液流速0.5BV/h，脱附温度70℃，经大孔树脂吸附后所得原花青素含量91.62％，原花青素提取率3.75％。按照上述条件进行第二次吸附：将解吸下的原花青素重新进行吸附解吸，可以得到原花青素含量95.11％，水不溶物含量4.83％，原花青素提取率3.22％。例3

将粉碎葡萄籽原料1576g投入萃取釜中，萃取釜压力35MPa、温度40℃，待稳定30分钟后连续向萃取釜通入超临界CO₂进行萃取，CO₂流速10Kg/h，萃取时间2小时，控制分离釜温度20℃、压力6MPa，由接收器收集产品，最后得葡萄籽油205g，葡萄籽油产率为12.97％。

称取100g葡萄籽萃余物与配制的35％乙醇-水溶液500mL混合放入三口烧瓶中，搅拌速度20rpm，加热温度60℃回流约1h。滤液减压过滤，回收药渣，加入溶剂，进行第二和第三次加热回流，时间分别为0.5h左右。将三次提取液合并蒸发浓缩为1.2g/ml，将醇液以10ml/min恒速滴加，并伴随快速搅拌。密闭静置12h后，用双层滤纸减压过滤。滴加80％无水乙醇沉淀，所得原花青素醇沉率达6.68％，含量61.91％；滴加80％异丙醇沉淀，所得原花青素醇沉率达6.21％，含量60.67％。

进行吸附条件为吸附柱柱径22mm，高径比9，上样液流速3.0BV/h，上样量为树脂体积的6倍，药液浓度0.5g/ml，pH值3.8，吸附温度20℃，使用40％乙醇溶液脱附，吸脱液流速2.0BV/h，脱附温度70℃，经大孔树脂吸附后所得原花青素含量92.63％，原花青素提取率5.11％。按照上述最佳条件进行第二次吸附：将解吸下的原花青素重新进行吸附解吸，可以得到原花青素含量95.25％，水不溶物含量4.12％，原花青素提取率4.26％。