用于预防心力衰竭及其他年龄相关性器官功能障碍、年龄相关性疾病并延长寿命的Na

摘要

本发明涉及卡立泊来德和雷米普利的联合制剂，该制剂用于预防或延迟或影响年龄相关性功能失调(尤其是心脏衰竭)、年龄相关性疾病的恶化、疾病的部分复发以及用于延长寿命。本发明也涉及所述的联合制剂的用途。

说明书

本发明描述了细胞Na⁺-H⁺交换抑制剂卡立泊来德(Hoe 642)与ACE抑制剂雷米普利的联合，并且描述了它们在医学和兽医学中的用途，用于预防心力衰竭及其他年龄相关性功能紊乱和身体器官的功能失调并且用于预防年龄相关性疾病并且在保持生命质量改善的同时延长寿命。

在WO 00/38661中描述了Na⁺-H⁺交换抑制剂(NHE)在用于预防年龄相关性的功能障碍、年龄相关性的疾病以及用于延长寿命的药物(制备中的用途。在该文献中，所描述的细胞Na⁺-H⁺交换抑制剂用于制备用于预防年龄相关性的功能紊乱和身体器官中的功能障碍并且预防年龄相关性的疾病并且在保证改善生命质量的同时延长寿命的药物。所提到的NHE抑制剂的典型代表为卡立泊来德类以及它们药学上可接受的盐，如下式的卡立泊来德甲磺酸盐：

在下文中，术语卡立泊来德包括卡立泊来德游离碱以及它们药学上可接受的盐(包括卡立泊来德甲磺酸盐)。

在WO 00/38661中公布了对血压正常的健康大鼠的生物学发现。

在年老的血压正常的大鼠中，血管紧张素转换酶(ACE)抑制剂(如雷米普利)相对于NHE抑制剂在所述的年龄相关性的器官病理改变上根本没有保护作用。而且，在WO 00/38661中，为了利用NHE抑制剂除了抗老化的保护作用外，可能还具有降低由降压药引起的对血压影响的益处，发明人考虑将NHE抑制剂与降低血压的药物(如ACE抑制剂、血管紧张素受体拮抗剂等)联合。但是，未预期会产生增强延长寿命的作用或年龄相关性器官病理改变的保护作用。

近来从文献中获知，具有式

的雷米普利明显延长了患有自发性高血压病而短寿的大鼠的寿命。

在本试验中发现，NHE抑制剂本身以及它们与ACE抑制剂的联合同样在患有自发性高血压的大鼠(SHR)中可以产生寿命明显延长的作用以及年龄相关性器官病理改变的保护作用。为了消除ACE抑制剂雷米普利降低血压的作用对延长寿命的作用产生任何可能的副作用，在低于降低血压的阈剂量下应用雷米普利。此外，令人惊奇地是在NHE抑制剂卡立泊来德与ACE抑制剂雷米普利的联合治疗中，明显具有更佳的年龄保护作用，而同时没有降低血压的副作用。显然，该联合治疗优于两者分别使用。

在大鼠中，不降低血压的雷米普利的阈剂量范围通常为每天每公斤体重1-50μg。在人中，体重约70kg的人给予雷米普利亚阈剂量的范围通常为每人每天0.1-1.0mg，优选每人每天0.3-0.7mg，如每人每天0.625mg。

为了试验，对年老患有自发性高血压的大鼠(18月龄)用NHE抑制剂卡立泊来德、不降血压的亚阈剂量的ACE抑制剂雷米普利或者用相当的两种活性成分的联合进行治疗。这种高血压大鼠的模型通常被认为代表人自发性高血压。每个试验组采用18月龄的高血压大鼠27只。治疗开始的3个月后，当在安慰剂对照组中存活动物的数量仅为7时，对每组7只动物进行中期分析。用小剂量雷米普利治疗的SHR的心脏相对于安慰剂对照组显示心肌收缩力量的显著降低。与此相反，卡立泊来德和雷米普利/卡立泊来德的联合显著改善了心脏功能。

同样地，经由卡立泊来德单一治疗以及经由雷米普利/卡立泊来德联合治疗使与心脏衰竭相关的心肌纤维变性显著减少。在明显降低了心脏的重量的同时，雷米普利/卡立泊来德联合和卡立泊来德也显示出抗纤维变性作用，使心脏衰竭的恶化受到抑制。

相对于安慰剂治疗组，雷米普利和卡立泊来德均可提高存活率。在此情况下，发现用雷米普利和卡立泊来德治疗存活率没有显著性差异。但是，令人惊奇地是，就存活率而言，雷米普利/卡立泊来德的联合相对于各单独的化合物所产生的作用则出现明显的增加。

因此，根据本发明，可以以便利的方式将卡立泊来德与雷米普利一起用作动物用药，优选哺乳动物用药，尤其人用。本发明涉及雷米普利和卡立泊来德联合用作人用药物和兽用药物(如狗用)。可通过在一种药物(联合产品)中同时给予雷米普利和卡立泊来德或者采用同时或任意先后给予一种含有活性成分卡立泊来德的药物以及另一种含有活性成分雷米普利的药物这样的方式将这两种活性成分联合。先后给药包括为了达到较佳的效果在不同时间及通过不同方法给予各自药物的联合。然而，也可以首先给予适当剂量的一种药物、随后如通过输注给予另一种药物，直到出现所需的联合效果，如改善了心脏功能。根据个体情况的不同，较佳的方式为给予定量含有两种活性成分雷米普利和卡立泊来德的药物联合形式，或者分别给予它们各自的单一药物。在后一种情况下，两种活性成分的量的比例可以改变，可以将两种产品分别包装于适当的初包装中，然后将它们在包装于一个包装中，如果需要，其中可以包括根据本发明的使用说明，或者在独立包装中，每个独立包装中均包括根据本发明的使用说明。本发明包括所用这些药物及形式。

在本发明联合中，雷米普利与卡立泊来德的重量比通常为1∶0.0001-1∶1的范围内，优选1∶0.0001-1∶0.1，如1∶0.0005-1∶0.01。

此外，本发明还涉及药物制剂，除了包括常用药学上可接受的载体和赋形剂外，该制剂也包括卡立泊来德和雷米普利作为活性成分。所述药物制剂通常包括0.01-90％重量的卡立泊来德和雷米普利。通过本身已知的方法，可以进行生产药物制剂。为此，将活性成分与一种或多种固体或液体药物载体和/或赋形剂一起转变成适当的给药形式或剂型，使它在人医学或兽医学中用作药物。相关阐述也适用于包括分别的活性成分卡立泊来德和雷米普利的药物制剂以及根据本发明的应用。

本发明尤其涉及卡立泊来德和雷米普利联合产品，可以在人医学或兽医学中用于抑制年龄相关性疾病恶化，用于抑制年龄相关性器官损伤恶化，用于延长寿命和/或预防或抑制心脏衰竭的进一步加重以及疾病的局部衰竭的。

本发明也涉及卡立泊来德和雷米普利在药物制剂生产中的用途以及其在人医学或兽医学中作为抑制年龄相关性疾病恶化、抑制年龄相关性器官损伤恶化、延长寿命和/或预防或抑制心脏衰竭的进一步加重以及疾病的部分复发的药物的用途。

根据个体情况决定给予活性成分卡立泊来德和雷米普利的剂量，并且应当具体患者所处的环境对剂量加以调整，以获得最佳效果。因此，该剂量当然不仅要根据给药的频率以及在每种情况中治疗或预防所用的药物制剂的性质，而且还要根据所治疗疾病的种类和严重性，以及根据人或动物的性别、年龄、体重和对治疗的个体反应，并且还要根据是急性治疗还是慢性治疗或者是预防目的。在本发明作为动物(优选哺乳动物，更优选人)用药使用时，雷米普利的剂量可以在每人(体重约70kg)每天0.1-10mg范围内变化，优选每人每天0.1-5mg，特别优选每人每天0.2-2.5mg。也可以给予雷米普利亚阈剂量范围为每人每天0.1-1mg，优选每人每天0.3-0.7mg。卡立泊来德的剂量可以在每人每天50mg-1g的范围内变化，优选每人每天100-500mg。例如可以每人每天给予雷米普利0.625mg剂量，每人每天给予卡立泊来德200mg剂量。

应用本发明联合治疗时，相对于仅仅给予两种活性成分的一种，有可能给予更低剂量的卡立泊来德和雷米普利。

应用本发明联合治疗时，也可将全部日剂量的活性成分一次给药，也可以将它分成多次给药，如两次、三次或四次。

含有卡立泊来德和雷米普利的本发明的联合药物可通过口服、胃肠外(如经静脉)、直肠、经皮或局部给药，可以根据个体情况决定优选的给药方式。

所需的药物制剂的适当赋形剂对本领域技术人员而言是熟悉的，可以由技术人员根据其专业知识决定。除了溶剂、凝胶形成剂、栓剂基质、片剂赋形剂以及其他活性成分载体外，也可使用抗氧化剂、分散剂、乳化剂、防沫剂、掩蔽剂、防腐剂、增溶剂、储存剂、缓冲物质或着色剂。

对于用于口服的剂型而言，可将活性化合物与适当的添加剂(如载体、稳定剂或惰性稀释剂)混合，并通过常用方法将得到的混合物转化为适当的给药形式，如片剂、包衣片剂、硬凝胶胶囊、水溶液、醇或油溶液。可用的惰性载体的例子为阿拉伯树胶、氧化镁、碳酸镁、磷酸钾、乳糖、葡萄糖或淀粉，尤其是玉米淀粉。优选的制剂既可以为干的也可以为湿的颗粒剂。适当的油载体或溶剂的例子为如向日葵油或鱼肝油的植物油或动物油。用于水溶液或醇溶液的适当溶剂的例子为水、乙醇或糖溶液或者它们的混合物。用于其他给药形式的另外的赋形剂的例子为聚乙二醇和聚丙二醇。

用于皮下或静脉给药时，可将活性化合物配制为溶液、混悬液或乳液，如果需要，还可加入通常用于该目的的物质，如增溶剂、乳化剂或其它赋形剂。适当溶剂的例子为水、生理盐水或醇类(如乙醇、丙醇、甘油)，以及糖溶液(如葡萄糖)或甘露醇溶液，或者所提及的各种溶剂的混合物。

试验数据

研究雷米普利和卡立泊来德联合对患有遗传性高血压的大鼠的存活率、纤维变性以及心脏重量上的影响。

为此，对年老患有自发性高血压的大鼠(18月龄)用NHE抑制剂卡立泊来德、不降血压的亚阈剂量的ACE抑制剂雷米普利或者两种活性成分相应的联合进行治疗。使用四种治疗方法，每种治疗27只患有高血压的大鼠(18月龄)。每天经由饲料(在大鼠的标准食谱中含有0.6％的卡立泊来德)给予卡立泊来德，400mg/每公斤体重，并经由饮水给予雷米普利10μg/每公斤体重。治疗开始3个月后，当在安慰剂对照组中存活动物的数量n仅为7时，对每组7只动物进行中期分析。每组剩余的依旧存活的大鼠从第18个月开始继续进行上述治疗方法。为了证明雷米普利不降低血压，通过尾套的方式规律地测量大鼠的血压，在四个治疗组中均未发现显著性差异。

因而，用20只(18月龄)大鼠研究每个试验组的存活率(表1)。表2显示观察结果。

表1：试验组

  组  治疗  N  1  安慰剂  20  2  雷米普利  20  3  卡立泊来德  20  4  联合药物  20

表2：存活大鼠数目

  年龄(月龄)  安慰剂  卡立泊来德  雷米普利  联合药物  18  20  20  20  20  19  10  18  18  20  20  4  16  15  18  21  0  12  11  18  22  0  8  9  18  23  0  7  4  16  24  0  7  0  14  25  0  5  0  13  26  0  0  0  8  27  0  0  0  7  28  0  0  0  3  29  0  0  0  0

观察研究药物组相对于安慰剂组是否有可检测的存活率的改进，并观察联合用药组相对于单一药物组是否有可检测的存活率的改进。

描述性分析

图1详细地显示了所有治疗组存活率的概况。在试验仅进行了3-4个月后，在安慰剂组与药物组之间以及单一药物组和联合药物组之间就出现了明显的不同。

在整个试验过程中，联合治疗组的试验结果最好。同样明显地是安慰剂对照组是所有治疗中最差的。

统计学分析

表3显示了每两个治疗组中两两比较的结果。试验结果以多元显著性水平5％表示。

表3：Holm校正的时序检验(Holm-adjusted log rank test)

  组  对照组  试验结果  安慰剂  卡立泊来德  *  雷米普利  *  联合药物  *  联合药物  雷米普利  *  卡立泊来德  *  雷米普利  卡立泊来德  n.s.

*代表具有显著性差异，n.s.＝无显著性

在统计学上所有的药物组均明显地不同于安慰剂组，结合图1，可将这些治疗理解为治疗有效。图1还表明，联合药物相对于单一药物显示出明显的优势。

平均存活时间

表4显示中间遗落时间的估计值，在此时间试验动物中的存活率恰恰为50％。

表4：平均存活时间

  组  平均值  95％区间  安慰剂  1.5  [1，2]  卡立泊来德  4.0  [3，7]  雷米普利  4.0  [3，5]  联合药物  8.0  [6，10]

由上述结果可以看出，在安慰剂组中存活动物的比例仅在1.5个月后就降至50％，而在联合治疗组直到8个月后也未观测到该结果。

单一药物组的平均存活时间为4个月，比联合药物组少一半多的时间。统计方法

采用SAS/STAT程序LIFETEST进行统计分析[SAS Institute Inc(1989)：SAS/STAT User’s Guide，第二卷，Version 6，4th Edition；Cary，NC；SAS Institrte Inc.]。将每两个试验组中两两进行时序检验，并且根据S.Holm(1979)：A Simple Sequentially Rejective Multiple Test Pricedure；Scand.J.Statist.；6，pp.65-70，将时序检验进行校正得到多元显著性水平为5％。

关于存活率的结论

相对于安慰剂治疗，单一药物雷米普利和卡立泊来德在统计学上使存活率得到显著的提高。从所选的显著性水平看，用卡立泊来德和雷米普利进行治疗，存活率无显著性差异。联合治疗显著优于两个单一药物。

在年老的自发性高血压动物中，慢性高血压使心肌组织出现转化过程，它基本上相当于在人的心肌组织中所发生的(在早期(10-15月龄)为伴有肥大的代偿性心脏衰竭(NYHA I-II期)，而在晚期(16-21月龄)为伴有心室扩张和纤维变性的代偿失调性心脏衰竭(NYHA III-IV期)。

如上所述，试验开始的3个月后，当安慰剂对照组中存活的剩余动物仅为7只时，对每组中7只动物进行中期分析。测定标志心肌纤维变性的心脏总重量和左右心室重量以及心脏组织中羟脯氨酸与精氨酸的摩尔比(由HPLC测定)。重要的是，先前存在的纤维变性可因卡立泊来德而不是雷米普利的晚期治疗而减轻，并观察到用雷米普利/卡立泊来德联合使纤维变性更减轻(图2)。这些作用也反映在心脏重量上(图3)。

图中所用的标题和说明如下：

图1：Kaplan-Meier存活时间

Y轴：存活率(1＝100％)

X轴：从治疗开始起以月计算的时间(治疗开始＝0，相当于第18月龄)

图2：在年老的自发性高血压大鼠中，用卡立泊来德和雷米普利晚期治疗心肌纤维变性的影响

Y轴：药物组

X轴：作为纤维变性标志的羟脯氨酸与精氨酸的比hyp/arg

*相对于安慰剂组，平均值p＜0.05

每组n＝7

图3：用卡立泊来德和雷米普利晚期治疗自发性高血压大鼠对心脏重量的影响

Y轴：药物组

X轴：镁100g体重心脏重量的mg数

整个心脏

左心室

右心室

*相对于安慰剂组，p＜0.05

每组n＝7

结果总结

上述结果表明，用NHE1抑制剂卡立泊来德和雷米普利联合治疗具有延长寿命的作用并且抑制了年龄相关性器官损伤的恶化或部分复发，尤其晚期治疗心脏衰竭和/或高血压疾病。