公开/公告号CN1614381A
专利类型发明专利
公开/公告日2005-05-11
原文格式PDF
申请/专利权人 中国科学院沈阳应用生态研究所;
申请/专利号CN200310105008.6
发明设计人 赵敏;
申请日2003-11-05
分类号G01N1/04;G01N21/00;
代理机构沈阳科苑专利商标代理有限公司;
代理人许宗富
地址 110016 辽宁省沈阳市沈河区文化路72号
入库时间 2023-12-17 16:08:21
法律状态公告日
法律状态信息
法律状态
2012-01-11
未缴年费专利权终止 IPC(主分类):G01N1/04 授权公告日:20061108 终止日期:20101105 申请日:20031105
专利权的终止
2006-11-08
授权
授权
2005-07-13
实质审查的生效
实质审查的生效
2005-05-11
公开
公开
技术领域
本发明涉及林木病害的鉴定技术,具体地说是一种林木干部病害徒手切片方法。
背景技术
徒手切片是林木病害鉴定工作中常用的技术手段。要鉴定一种林木病害,除观察病害的外部症状外,重要的是用显微镜观察病原物的形态特征,来进行病害的鉴定,这就必须做病害标本的组织切片。
切片制作的常用方法有两种:一种是石蜡切片法;另一种是徒手切片法。石蜡切片法是用切片机将经过选择、固定、脱水、透明、浸蜡、包埋等前处理的材料切成薄片。它的制片效果较好,保存时间长,但手续繁多,化学处理复杂,病原物易变形,还需要有特殊的实验设备,制片时间较长。因此,在林木病害的鉴定工作中,除特殊需要外,一般是采用徒手切片的方法。徒手切片法,就是把不经过任何处理的新鲜或保存的病组织,夹在由通草、木髓或胡萝卜、马铃薯块等维持物中,用刀片将病组织切成薄片。它的优点是用具简单,方法简便,制片时间短,而且可以观察到新鲜切片组织和天然色彩。由于没有经过复杂的化学处理,所以病原物不变形,能保持原有的形态特征,在植物和病原体的形态和组织结构观察上经常使用。
徒手切片制作的方法是:取待切病斑的部分,一般以不大于3~5平方毫米为宜,夹在由通草、木髓(经5%乙醇液浸泡)或胡萝卜、马铃薯块等维持物中,用左手的大拇指、食指和中指三个手指夹住维持物,用右手平稳持刀片,从外向内平行拉切。这种切片方法适用于做柔嫩的叶部病害组织切片。然而对表皮粗硬的干部病害组织,尤其是隔年已干枯的干部病害组织的切片,就显得有一定的困难。
发明内容
为了解决上述不足,本发明的目的在于提供一种能适用于表皮粗硬的干部病害组织的徒手切片方法。
为了实现上述目的,本发明的技术方案为:平稳握住待切的树木干部病害标本,使病斑上待切子实体面向操作者,手持刀片直接在树木干部病害病斑的子实体上进行切片;
在切片时,刀片与被切标本成85~95度角,刀口向内,从上向下切,刀片从前方向后方移动时,中途不停顿;第一刀可切在子实体约4/10~6/10处,并将第一刀切片舍去,采用在这之后的子实体中心部位的切片;可从子实体边缘逐渐向中心部位做连续切片;病害标本为隔年的标本时,应经保湿处理,待软化后,再行切片;工具可以是双面或单面刀片。
本发明具有如下优点:
1.方法简单,快速,易掌握,切片效果好。采用本发明的方法,可以不用通草、木髓、胡萝卜等维持物,直接在树木干部的病害组织—病斑上做子实体的徒手切片,获得了理想的制片效果,此法更加简便易行。
2.适用范围广。本发明适合室内病害鉴定及野外调查病害鉴定时使用。从树木病害材料类型上看,它更适用于新鲜的树木干部(包括幼茎)病害组织的切片,对表皮粗硬的隔年已干枯的干部病害组织,经保湿处理后也可适用。
具体实施方式
下面通过实施例对本发明作进一步详细说明。
实施例1
工具:双面或单面刀片;显微镜;载玻片;盖玻片;毛笔或接种针。
浮载剂:水
具体操作:左手的拇指和食指平稳夹住待切的干部病害标本,使病斑上待切子实体面向操作者,右手持刀片直接在病斑的子实体上进行切片。应注意:手握干部病害标本的姿势,原则上是使两只手可以自由活动,但不要紧靠身体或压在桌子上。切片时,刀片与被切标本约成90度角,刀口向内,从上向下切,刀片从左前方向右后方移动时,中途不要停顿,这样切出的切片能较完整地反映出病原物的形态特征。
为了取得较好的切片,首先要求操作者精力高度集中,刀片锋利,技术熟练,切片用力适度,其次应正确地掌握用刀方法。切片时,右手的大拇指和食指应拿在刀片的下端,以便于把握切片时的用力程度,同时,避免因用力过猛而使刀片划伤手指。
切片组织完整且较薄,才能有好的透明度,以便于在显微镜下能清晰地观察到林木病原物的形态特征。第一刀可切在子实体约1/2处,第一刀切片舍去,在这之后的子实体中心部位的切片,均是理想切片;亦可从子实体边缘逐渐向中心部位做连续切片,切片完成后,在手持放大镜下用毛笔或接种针挑取组织完整,切得较薄的切片,放置于事先准备好的载玻片上的水滴中,盖上载玻片,以待镜检。以上切片的操作过程如能在解剖镜下完成,则切片效果将更佳。此法切当年采集的病害标本效果最好,隔年的标本应经湿滤纸(或湿棉花)保湿处理,待软化后,再行切片。
实验证明,林木干部病害徒手切片方法是切实可行的,尤其对基层设备条件有限的地区,更为适用。
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