一种治疗产后及流产并发症的中药组合物及其制备方法

摘要

本发明公开了一种治疗、预防产后及人工流产术后并发症的中药组合物及其制备方法。该组合物主要由益母草、川芎、鱼腥草、香附、旱莲草、马齿苋等组成。该中药组合物制备中，对不同原料药分别采用蒸馏、煎煮、醇沉的方法，使得有效成分的充分溶出，并经过科学的工序直接或间接加入药学上可接受的赋型剂制成临床可接受的剂型，包括片剂、口服液、胶囊、滴丸、颗粒剂、注射剂、冻干粉针和各种缓释制剂等剂型，本组合物具有很好的化淤祛邪、理气止痛、益阴养血功效，对产后及人工流产术后所出现的阴道出血、腰腹痛、发热有很好的治疗、预防作用。

说明书

发明领域

本发明涉及一种中药组合物，特别涉及用于治疗、预防产后及人工流产术后并发症的中药组合物，同时涉及该组合物的制备方法。

背景技术

计划生育工作属我国基本国策范围。面临着人口与社会发展的新形势，进入现阶段仍为这种特点。并显得更为突出和鲜明。如健康的人民体质，较好的人民素质已和国家之进步相互统一起来。

我国计划生育工作近30余年来，取得了显著的成效。节育率超过了世界水平，虽然如此，但也应该看到和总结并加以防止与计划生育有关的不足和缺乏的方面，予以可能的措施，这是国家政策的需要，也是科学进步的需要，更是药品流通中之需要。

人工流产不是避孕方法，但在计划生育的规划中却是不可缺少的部分，没有人工流产的补救措施，面对现实，必须对不愿生育而避孕失败的妇女采取人工流产以解决她们之需求。同时人工流产已成为各国控制当年人口出生率的重要措施，我国同样是这样。

凡在妊娠3个月以内用人工流产或药物方法终止妊娠，称之为人工流产。它是避孕失败的补救措施。

近年来，国内外人工流产数在逐年增加。据我国卫生部1996年统计。我国每年约有1300万人次，而未生育的年轻妇女要求人工流产数目，据统计约占人工流产总数的22.9％-42.7％(目前可能会更突出)。

本发明在开发前，也曾对两个部门的初诊患者，对患有妇科病，其中有人工流产史者做了实际调查。如：A地1035初诊中，有过人工流产者383人，其比例为37％；B地480初诊患者，有人工流产史者167人，其比例34.79％。两组相加为1515人，有人工流产者为550人，其比例为36.30％。也曾对每日50人次门诊数中有17人左右的患者，有人工流产史，其比例约为34％。

此为曾对1035例患妇科病，有人工流产史者详情列表参照：

 病名  不孕  闭经 多囊卵巢  经少 内膜异位  后错  稀发   功血 盆腔炎  其它 人数   376  102    145   59    59    22   14    46   158   58 人流史   102  36    54   24    29    15    9    14    84   16

样本虽小，但也能看出一些现象，人工流产术后由于多种因素，引起的远期并发症，是一种比较值得重视的医学和社会问题。

人工流产在计划生育措施中，应属辅助方法，国内外在技术操作方面均有很大进步。对于早期术后之处理，已很为完善。但近年来，已被多数学者所重视的问题。已经看到了近期和远期并发症的区别和其中的相联之处。从世界的有关报道中看到，每年约有2000万妇女遭受不安全的人工流产(非全指负压人工流产)的危害，并有千百万以上的妇女遭受长期疾病折磨，甚或丧失劳动力。可见，人工流产术后的及时维护措施，应该是很为重要的环节。

虽然目前在行人工流产术后均给予预防药，但并不统一。如单用消炎药，或单用益母草冲剂等化瘀药，与中医对妇女流产后身体正值衰微状态，除自身气血失调之外，对于抗御暴戾之邪气之力也是比较薄弱的。故而容易导致发病。如湿毒结聚盆腔，或瘀血逆留盆腔等病机，都是有症可见的。如何进入这一防治领域，中医妇科学是有其依据的，并应为广大妇女的健康着想，也应该予以探索。

发明内容

本发明的一个目的在于公开一种新的治疗、预防产后及人工流产术后并发症的中药组合物；本发明的另一个目的在于公开制备一种新的治疗、预防产后及人工流产术后并发症的中药组合物的制备方法。

本发明药物组合物的原料药组成及配比如下(按重量份)：

A方案：益母草5-20重量份  川芎1-10重量份  旱莲草5-20重量份。

A方案原料药配比优选如下(按重量份)：

益母草7-15重量份  川芎1-6重量份  旱莲草7-15重量份。

本发明药物组合物的原料药组成及配比还可以是(按重量份)：

B方案：益母草5-20重量份  川芎1-10重量份  鱼腥草5-20重量份旱莲草5-20重量份  马齿苋5-20重量份。

B方案原料药配比优选如下(按重量份)：

益母草7-15重量份  川  芎1-6重量份  鱼腥草7-15重量份

旱莲草7-15重量份  马齿苋7-15重量份。

本发明药物组合物的原料药组成及配比还可以是(按重量份)：

C方案：益母草5-20重量份  川芎1-10重量份  鱼腥草5-20重量份香附3-12重量份  旱莲草5-20重量份  马齿苋5-20重量份。

C方案原料药配比优选如下(按重量份)：

益母草7-15重量份   川  芎1-6重量份   鱼腥草7-15重量份

香  附5-9重量份    旱莲草7-15重量份  马齿苋7-15重量份。

上述的香附优选制香附。

本发明C方案中药组合物的制备方法为：

以上六味，制香附加水4-10倍量，水蒸汽蒸馏3-10小时，提取挥发油，水溶液留用；药渣和益母草、马齿苋、旱莲草及鱼腥草混合后加水5-15倍量，煎煮1-5次，每次1-5小时，滤过；合并滤液及上述提油后的水溶液，浓缩至相对密度为1.10-1.20(45-60℃测)，加乙醇使醇浓度达30-90％，放置过夜，滤过。挥发油用倍他环糊精包结(挥发油-倍他环糊精-水＝1-3∶6-10∶80-120，50-70℃搅拌1-4小时)，冷藏20-28小时，滤过，低温干燥。川芎加3-10倍量50-90％乙醇回流提取1-3次，每次1-3小时，滤过，滤液和上述醇沉液合并，回收乙醇并浓缩至相对密度为1.28-1.30(45-60℃测)的稠膏，减压干燥，粉碎成细粉，和挥发油倍他环糊精包结物混合，经过常规工序直接或间接加入药学上可接受的赋型剂制成临床可接受的剂型，如片剂、口服液、胶囊、颗粒剂、注射剂、冻干粉针和各种缓释制剂等。

本发明A、B、C方案组合物制剂具有很好的化瘀祛邪、理气止痛、益阴养血功效，对产后及人工流产术后所出现的阴道出血、腰腹痛、发热有很好的治疗、预防作用；药理实验公开的本发明组合物制剂具有很好抑制子宫平滑肌增厚、止血、抗炎、镇痛、抑菌等药理作用，这也充分表明本发明组合物制剂在治疗、预防产后及人工流产术后并发症方面的良好作用；同时本发明组合物制剂临床应用安全，无毒副作用。

以下实验例进一步说明本发明。

以下实验所用益母安宫胶囊为本发明C方案组合物胶囊制剂。

实验例1 药理实验

试验材料：受试药物：益母安宫胶囊，含20.25g生药/g干膏，临用前以蒸馏水配制至所需浓度。剂量设计：临床用量为48g生药/d，按60kg计算，即0.8g生药/kg/d。按动物与人公斤体重等效剂量折算，小鼠用8.8g/kg/d(11倍)、大鼠用4.4g/kg/d(5.4倍)，家兔用2.5g/kg/d(3.1倍)，相当于临床等效剂量为中剂量，高剂量为中剂量的2倍，低剂量为中剂量的1/2倍。阳性对照药：益母草颗粒，某上市产品，批号：020612，成人日用量30g/d，按平均体重60kg计算为0.5g/kg，小鼠用11.0g/kg、家兔用3.1g/kg；宫血宁胶囊，某上市产品，批号：010605，成人日用量0.78g/d，按平均体重60kg计算为0.013g/kg，大鼠用0.14g/kg、小鼠用0.286g/kg，以上均相当于临床等效剂量的2倍。阿司匹林，某上市产品，批号：010626，实验室常规用量0.05g生药/kg。给药量和给药途径：小鼠给药量为20ml/kg；大鼠给药量为10ml/kg，采用灌胃给药方式，家兔给药量为2ml/kg，采用十二直肠给药方式。动物：小鼠昆明种，体重20±2g；北京生物制品研究所提供，合格证号为京动许字1999第012号；大鼠，SD种，体重200±20g，由北京维通利华实验动物技术有限公司提供，合格证号SCXK(京)-02-0003；家兔，由北京学院路通利试验动物养殖场提供，合格证号第024总069号。试剂：己烯雌酚，上海第九制药厂，批号：010102；米非司酮片，北京紫竹药业有限公司生产，批号：43020305；米索前列醇片，SearlePharmaceuticals Englishi(英国)，批号：2070 FEB2004；缩宫素注射液，上海第一生化药业公司，上海生物化学制药厂，批号：020161；甲醛，北京化工厂生产，批号：840601。(美国)戊巴比妥钠，佛山市化工实验厂，批号：860901。细菌菌种  金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、B族链球菌。由北京大学第一医院细菌室鉴定并提供。培养基  胰酶消化大豆胨琼脂(TSB)和酵母粉均为英国OXOID产品；M-琼脂由北京陆桥商检新技术公司生产，批号：000317。材料及仪器：消毒手术器械；ZS-3型半自动生化分析仪，上海中生生物工程高技术公司出品；EP型电子天平，日本岛津株氏会社出品；MP-100多导生理记录系统，美国；恒温干燥箱，北京朝阳区来广营医疗器械厂。

【试验方法和结果】

1. 益母安宫胶囊对药物致孕鼠流产的影响

1.1 益母安宫胶囊对药物致早孕大鼠流产的影响

1.1.1 试验方法  将大鼠按雌、雄2∶1的比例合笼，次日晨观察雌性大鼠有无阴道栓，以发现有阴道栓为妊娠第1天。将受孕的大鼠按体重随机分为5组，分别为模型组、阳性药组、受试药高、中、低三个剂量组，正常对照组不经任何处理，仅用于病理学观察，每组10只，于受孕第7天，除正常组外其余各组分别灌胃米非司酮8.3mg/kg(上午8:00)和米索前列醇100ug/kg(下午4:00)10ml/kg，同时每鼠于阴道内置入定量棉球0.072-0.075g，造模后次日即怀孕第8日开始灌胃给药，正常组及模型组给予等体积的蒸馏水，每日一次，连续给药7日，每日更换棉球，将取出的棉球装入塑料袋中密闭冷藏保存，连续收集至受孕第14天。受孕第15天大鼠尾静脉取血20ul，加入4ml(50g/L)氢氧化钠溶液中，混匀待测。将孕鼠处死，取出子宫，作病理组织学检查。将每鼠连续收集的棉球用适量的50g/L氢氧化钠溶液浸提，取5ml浸提液过滤，以50g/L氢氧化钠溶液为空白对照，用分光光度计于545nm波长下，测定尾静脉血氢氧化钠溶液A值和子宫浸提液A值，按下列公式计算造模7日内的子宫出血量：以t检验进行统计学处理。

式中：V₂为浸提子宫血所用50g/L氢氧化钠的量(ml)

      V₁为稀释静脉血所用50g/L氢氧化钠的量(ml)

1.1.2 实验结果  由表1结果可见，益母安宫胶囊可减少药物流产致早孕大鼠的子宫出血量。子宫组织形态学检查结果显示(表2、附照片及病理报告)，益母安宫胶囊明显抑制子宫内膜增厚，与模型对照组相比有显著性差异，高剂量组对子宫平滑肌增厚亦有一定的抑制效果。

表1  益母安宫胶囊对早孕流产大鼠子宫出血量的影响

              剂量       鼠数       出血量        抑制率

组别

             (g/kg)      (只)         (ml)         (％)

模型对照组     --         10       0.313±0.076

宫血宁胶囊    0.14        10       0.245±0.060*    21.57

益母安宫胶囊  8.8         10       0.239±0.059*    23.49

              4.4         10       0.242±0.056*    22.79

              2.2         10       0.244±0.059*    21.93

注：与对照组相比，*p＜0.05

表2  益母安宫胶囊对早孕流产大鼠组织形态的影响

              剂量       鼠数       内膜厚度             平滑肌厚度

组别

             (g/kg)       (只)        (微尺)               (微尺)

模型对照组     --          10      37.05±3.95           9.77±1.57

正常对照组     --          10      24.20±7.32**         10.75±2.69

宫血宁胶囊    0.14         10      29.80±3.90**         9.97±2.38

益母安宫胶囊  8.8          10      28.53±4.64**         8.03±1.36*

              4.4          10      29.17±4.94**         8.70±0.89

              2.2          10      32.90±6.54           8.97±1.62

注：与模型对照组相比，*p＜0.05，**p＜0.01

1.2 益母安宫胶囊对药物致早孕小鼠流产子宫出血量的影响

1.2.1 试验方法  将小鼠按雌、雄2∶1的比例合笼，次日晨进行阴道涂片检查，以发现精子为妊娠第1天。将受孕的小鼠随机分为5组，分别为对照组、受试药大、中、小三个剂量组，阳性药组，每组10只，与受孕第7天造模，灌胃米非司酮12.5mg/kg，体积为10ml/kg，同时每鼠于阴道内置入定量海绵0.032-0.035g，造模当日给药，模型组给予等体积的蒸馏水，连续给药5日，每日更换海绵，将取出的海绵装入塑料袋中密闭冷藏保存，连续收集至受孕第11天。测定自造模5日内的子宫出血量，方法和计算同前。

1.2.2 实验结果  由表3.结果可见，益母安宫胶囊所试剂量可明显减少药物流产致早孕小鼠的子宫出血量。

表3  益母安宫胶囊对早孕小鼠子宫出血量的影响

                   剂量          鼠数         出血量         抑制率

组别

                  (g/kg)         (只)          (ml)           (％)

对照组             --              10        0.154±0.040

宫血宁胶囊         0.28            10        0.121±0.025*    21.41

益母安宫胶囊       17.6            10        0.113±0.030*    26.93

                   8.8             10        0.117±0.030*    23.89

                   4.4             10        0.119±0.033*    23.04

注：与对照组相比，*p＜0.05

2. 益母安宫胶囊对动物出、凝血时间的影响

2.1 益母安宫胶囊对小鼠凝血时间的影响

2.1.1 试验方法  取体重18-22g健康雌性小鼠50只，按体重随即分为5组，每组10只，对照组，宫血宁胶囊组，益母安宫胶囊高、中、低剂量组，每天灌胃给药1次，对照组给予同体积的蒸馏水，连续7d，末次给药1h后，用毛细管插入鼠内眦静脉丛，采血两滴与玻片上，每隔10s用针头挑一次，从采血到出现血凝丝时间，即为凝血时间，所得数据与对照组进行t检验。

表4  益母安宫胶囊对小鼠凝血时间的影响

组别            剂量(g/kg)      鼠数(只)    凝血时间(秒)    抑制率(％)

对照组            --              10         131.0±79.2

宫血宁胶囊        0.28            10         43.0±35.6**      67.2

益母安宫胶囊      17.6            10         62.0±42.1*       52.7

                  8.8             10         50.0±34.0*       61.8

                  4.4             10         57.0±49.7*       56.5

注：与对照组相比，*p＜0.05，**p＜0.01

2.1.2 试验结果  表4结果显示，益母安宫胶囊所试剂量均可缩短小鼠的凝血时间。

2.2 益母安宫胶囊对小鼠出血时间的影响[2]

2.2.1 试验方法  动物分组、给药等同小鼠凝血时间实验，末次给药0.5h，分别以利剪将小鼠尾尖0.5cm处剪断，血液自行流出后记时，每隔10s用滤纸吸去血滴一次，直至血液自行停止，计算出血时间，所得数据与对照组进行t检验。

2.2.2 试验结果  表5结果显示，益母安宫胶囊所试剂量均可缩短小鼠的出血时间，表明有较强的止血作用。

表5  益母安宫胶囊对小鼠出血时间的影响

组别             剂量(g/kg)      鼠数(只)    出血时间(秒)  抑制率(％)

对照组              --             10        274.0±107.1

宫血宁胶囊          0.28           10        130.0±44.5**    52.5

益母安宫胶囊        17.6           10        164.0±59.5*     40.1

                    8.8            10        172.0±62.0*     37.2

                    4.4            10        144.0±72.3**    47.4

注：与对照组相比，*p＜0.05，  **p＜0.01

3. 益母安宫胶囊对动物子宫平滑肌收缩的影响

3.1 益母安宫胶囊对家兔在体子宫平滑肌收缩的影响

3.1.1 试验方法  家兔30只，分为5组，分别为对照组、受试药高、中、低三剂量组、阳性药组，每组6只。用10％乌拉坦腹腔注射5ml/kg，麻醉后背位固定于兔台上，腹部剪毛并沿腹中线切开下腹，暴露子宫，经子宫角切一小口，将末端带有橡皮球囊的塑料管插入子宫内，自导管缓慢注入生理盐水，使球囊充满液体并排尽其中气体，使球囊壁紧贴子宫壁，导管的另一端通过张力换能器与TSD140放大器相连，记录子宫内压的变化，十二指肠给药，记录给药前及给药后30、60、90、120、150分钟内子宫收缩的改变(子宫内压的变化)。通过MP-100数据采集器，连续记录各参数，并保存于计算机，待实验结束后，用该系统专用程序进行实时分析整理，以t检验进行统计学处理。

表6-1  益母安宫胶囊对家兔在体子宫平滑肌收缩强度的影响

                                                  强度增加值

           剂量

组别

          (g/kg)           30min            60min            90min             120min          150min

对照组     --            0.22±1.15       -0.05±2.8       -0.69±3.07      -2.64±3.92      -3.26±4.02

益母草     3.1           8.37±5.13*      8.67±5.84*      8.43±4.56**     5.78±3.83**     4.15±4.31*

益母安宫   5.0           8.76±4.53**     10.1±5.88**     10.0±3.76**     8.68±5.23**     7.94±7.46*

           2.5           7.50±5.39*      8.47±5.45*      8.35±5.27**     6.21±5.33**     4.82±4.85*

           1.25          6.33±3.97*      4.64±2.13**     0.74±4.02       0.33±3.14       -2.23±4.38

注：与对照组相比，*p＜0.05，**p＜0.01(n＝6)

表6-2益母安宫胶囊对家兔在体子宫平滑肌收缩频率的影响

           剂  量                                        频率增加值

组别

           (g/kg)

                          30min            60min            90min           120min         150min

对照组       --         0.67±2.73       -1.00±4.15      -1.00±5.06     -1.33±3.78    -2.33±3.27

益母草       3.1        -1.17±3.30      -0.83±6.40      -3.00±6.78     -3.00±5.44    -2.67±6.86

益母安宫     5.0        -0.67±2.73      -2.83±4.31      -5.17±4.02     -3.00±2.83    -5.00±5.02

             2.5        1.67±1.86       1.83±1.94       1.00±0.89      2.67±1.63     1.33±2.34

             1.25       -1.17±2.56      0.50±3.73       -1.83±5.71     -0.50±4.14    -2.50±40.6

注：与对照组相比，*p＜0.05，**p＜0.01(n＝6)

3.1.2 实验结果 表 6结果可见，益母安宫胶囊所试剂量可不同程度的增加在体子宫平滑肌收缩强度，与对照组相比有显著性差异，高、中剂量作用明显，对子宫平滑肌收缩频率无明显影响。

3.2 益母安宫胶囊对大鼠离体子宫平滑肌的影响

3.2.1 试验方法  取雌性未孕大鼠，实验前两天皮下0.1mg/kg注射己烯雌酚促情，实验时用颈椎脱臼法处死大鼠，剖腹取出子宫，立即置于盛有洛氏液的平皿中，轻柔剥离附着于子宫上的结缔组织和脂肪组织，取一侧子宫角长约2cm，一端固定于含洛氏液的恒温浴槽内，另一端与张力换能器相连，浴槽内浴液温度保持在37℃，连续通入混合气(含95％的O₂和5％的CO₂)，每秒通1-2个小气泡，使子宫保持1g的起始张力，待子宫自发收缩稳定后，记录一段正常收缩曲线后，对照组加40μl营养液，其他组加入相同体积的药液，观察给药后20min内子宫收缩强度和频率的变化，通过MP-100数据采集器，连续记录各参数，并保存于计算机，待实验结束后，用该系统专用程序进行实时分析，并计算子宫的活力，活力＝强度×频率。

表7-1  益母安宫胶囊对正常大鼠离体子宫平滑肌收缩的影响

          剂量                         强度增加值

组别

          (mg)        5min              10min            15min         20min

对照组    --       -0.10±0.07       -0.10±0.14      -0.03±0.17    -0.10±0.14

缩宫素    0.72     3.07±0.90**      2.31±0.83**     1.97±0.77**   1.80±0.60**

益母安宫  36       0.17±0.30        0.02±0.15       -0.10±0.08    0.02±0.15

          18       0.24±0.25*       0.11±0.15       0.03±0.15     0.08±0.27

          9        0.04±0.18       -0.04±0.15       0.03±0.21     0.09±0.21

表7-2  益母安宫胶囊对正常大鼠离体子宫平滑肌收缩的影响

          剂量                      频率增加值

组别

          (mg)          5min          10min            15min               20min

对照组     --        -0.70±0.52    -0.30±1.21      -0.30±1.21        -0.30±0.82

缩宫素     0.72      5.33±1.37**   4.67±1.37**     4.00±1.27**       4.00±0.89**

益母安宫   36        0±0.89        0±0.89          -0.70±0.52        0±0.89

           18        0.50±1.05*    -0.20±0.75      -0.80±0.75        -0.80±0.75

           9         0±0.89        -0.70±1.03      -0.70±1.03        0±0.89

表7-3  益母安宫胶囊对正常大鼠离体子宫平滑肌收缩的影响

          剂量                         活力增加值

组别

          (mg)          5min              10min           15min             20min

对照组     --        -0.64±0.53       -0.27±1.25      -0.32±1.41      -0.35±1.04

缩宫素     0.72      31.3±9.74**      23.7±10.8**     19.1±9.01**     17.4±7.14**

益母安宫   36        0.50±1.78        0.27±1.37       -0.80±0.78      0±1.39

           18        1.12±1.33*       0.20±0.86       -0.60±0.68      -0.50±0.77

           9         0.23±1.15        -0.50±1.03      -0.30±1.40      0.45±1.39

注：与对照组相比，*p＜0.05，**p＜0.01

3.2.2 试验结果  表7结果可见，益母安宫胶囊对大鼠离体子宫平滑肌收缩均无明显影响。

4 抗炎作用

4.1 益母安宫胶囊对大鼠棉球肉芽肿形成的影响[5]

4.1.1 试验方法  取SD雌性大鼠50只，体重210-240g，腹腔注射3％戊巴比妥钠1.0ml/kg麻醉，每只大鼠腹部碘酒消毒，75％酒精棉球脱碘后，切1cm长小口，用眼科镊子将20mg的高压灭菌棉球，从切口处植入两侧腹股沟皮下，随即缝合皮肤。将术后大鼠按体重随即分为5组，对照组，阿司匹林组，益母安宫胶囊高、中、低剂量组。对照组每天按10ml/kg给蒸馏水，其余各组给相应药物，连续7天，第8天打开原切口，将棉球连同周围结缔组织一起取出，剔除脂肪组织，放烘箱37℃24小时，烘干，称重。将称得的重量减去棉球原重量即得肉芽肿重量，以t检验进行统计学处理。

4.1.2 试验结果  表8结果显示，益母安宫胶囊所试剂量均可明显抑制大鼠棉球肉芽组织生成，大剂量组作用显著。

表8  益母安宫胶囊对大鼠棉球肉芽肿形成的影响

           剂量       鼠数    肉芽组织重量    抑制率

组别

          (g/kg)      (只)       (mg)          (％)

对照组     --          10    54.18±14.97

阿司匹林   0.05        10    36.25±14.16**    33.3

益母安宫   8.8         10    40.61±14.35**    25.9

           4.4         10    42.45±18.67*     22.2

           2.2         10    44.33±14.10*     18.5

注：与对照组相比，*p＜0.05，  **p＜0.01

4.2. 益母安宫胶囊对大鼠子宫炎症的影响

4.2.1 试验方法  取230-260g SD雌性大鼠50只，腹腔注射3％戊巴比妥钠1.0ml/kg进行麻醉，剪下腹部毛，用碘酒消毒，75％酒精棉球脱碘后，于腹正中线切口2cm，暴露子宫，沿右侧子宫角上1cm处做一横切口，将一塑料管(管径2mm，长0.5cm，重10mg，酒精消毒)放置于子宫内，与子宫切口缝合固定，以防脱落。伤口滴入青霉素0.1ng(溶于注射用水0.2ml中)，以防感染，缝合皮肤。将术后大鼠分为5组，对照组，阿司匹林组，益母安宫胶囊高、中、低三个剂量组。对照组每天按10ml/kg给蒸馏水，其余各组给相应药物，连续7天，7天后杀死动物，取出两侧子宫，电子天平称重，每鼠的右侧子宫减去左侧子宫重量，即为炎症肿胀程度，以t检验进行统计学处理。

4.2.2 试验结果  表9结果显示，益母安宫胶囊可抑制子宫炎症模型大鼠子宫内肉芽组织增生，具有抗子宫炎症的作用。

表9  益母安宫胶囊对子宫炎症大鼠子宫内肉芽肿形成的影响

                剂量      鼠数      肿胀率      抑制率

组别

               (g/kg)     (只)       (％)        (％)

对照组          --         10     110.9±41.0

阿司匹林片      0.05       10     68.9±41.8*    37.8

益母安宫胶囊    8.8        10     72.4±29.2*    34.7

                4.4        10     74.1±18.8*    33.2

                2.2        10     90.1±35.3     18.7

注：与对照组相比，*p＜0.05

5 镇痛作用

5.1 益母安宫胶囊对醋酸所致小鼠疼痛反应的影响

5.1.1 试验方法：选取健康雌性小鼠60只，体重为19-21g，分为6组，每组10只，对照组，益母安宫胶囊高、中、低三个剂量组，阳性对照药益母草颗粒组、阿司匹林组(0.05g/kg)，每天灌胃1次，给药组按20ml/kg给药，空白对照组给蒸馏水，连续3d，末次给药1h后腹腔注射0.7％冰醋酸溶液0.2ml/20g，5分钟后观察记录小鼠15分钟内扭体次数，比较各组的差异，并计算扭体抑制率。

5.1.2 实验结果  由表10可见，益母安宫胶囊所试剂量均可减少醋酸致小鼠疼痛的扭体发生数，高、中剂量镇痛作用明显，抑制率可达40％以上。

5.2 益母安宫胶囊对缩宫素所致小鼠疼痛反应的影响

5.2.1 试验方法  选取健康成熟雌性小鼠50只，体重19-21g，随机分为5组，每组10只，每天灌胃1次，空白对照组给予相同体积的蒸馏水，连续3d，给药第1、2两天，皮下注射己烯雌酚0.1ml/10g，末次给药后1h腹腔注射缩宫素0.2u/只，观察记录各小鼠40min内扭体次数，比较各组的差异。

5.2.2 试验结果  由表11可见，益母安宫胶囊所试剂量均明显减少缩宫素致小鼠疼痛的扭体发生数，与对照组相比有显著性差异。

6 体外抑菌试验

试验方法

琼脂稀释法。将药物加入溶化的琼脂培养基中，作系列倍比稀释，倾注成含不同药物浓度的琼脂平板培养基。用比浊法将肉汤增菌16小时的各菌株比浊至1号管，3亿/1ml，再按不同菌株作适当稀释各吸取5ul滴加于各浓度含药平板上，置37℃恒温箱内培养24小时，观察各皿中细菌生长情况，同时设细菌对照、阳性对照药对照。

试验结果  表12结果表明，培养24小时后，细菌对照均有细菌生长，益母安宫胶囊对所试的金黄色葡萄球菌等4种细菌20菌株均有不同程度的抑制作用。

表12  益母安宫胶囊体外抑菌作用(最低抑菌浓度)

           菌种          最低抑菌浓度(稀释度)     阳性对照(400u/ml)      细菌对照

名称             菌株数    益母安宫胶囊            青霉素      链霉素

金黄色葡萄球菌     6       1∶64～1∶128             -           -           +

大肠杆菌           4       1∶64～1∶128                   -                 +

绿脓杆菌           5       1∶4～1∶32                     -                 +

B族链球菌          5       1∶32～1∶64              -           -           +

注：“-”表示无细菌生长，“+”表示有细菌生长。

通过以上药理实验，表明益母安宫颗具有以下药理作用：

1、对药物致孕鼠流产的影响  益母安宫胶囊可减少因药物致大、小孕鼠流产后的子宫出血，病理组织形态学检查结果显示，益母安宫胶囊明显抑制子宫内膜增厚，与模型对照组相比有显著性差异，高剂量组对子宫平滑肌增厚亦有一定的抑制效果。

2、止血作用  益母安宫胶囊在所试剂量范围内可使小鼠的出、凝血时间明显缩短，具有较强的止血作用。

3、对大鼠子宫平滑肌的影响  益母安宫胶囊可促进家兔在体子宫平滑肌收缩，对正常大鼠离体子宫平滑肌收缩无明显影响。

4、抗炎作用  益母安宫胶囊可抑制大鼠子宫炎症模型的肿胀，对大鼠棉球肉芽组织生成亦有明显的抑制作用。

5、镇痛作用  益母安宫胶囊对乙酸及缩宫素所致小鼠扭体发生数均有明显的抑制作用。

6、抑菌作用  益母安宫胶囊对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、B族链球菌等4种细菌20株临床分离菌均有不同程度的抑制作用。

实验例2  临床实验

选取50例为2002年5月至2002年9月，在北京中医医院妇科门诊就诊的患者。按随机数字表将50例患者分为治疗组和对照组，治疗组35例，年龄19-43岁，平均年龄33.12±5.00岁；停经天数39-70天，平均47.28±6.94天，平均孕周6.52±0.57周，平均胎囊直径23.96±8.51mm；对照组15例，年龄19-42岁，平均29.33±8.14岁，停经天数38-61天，平均46.41±5.05天，平均孕周6.41±0.56周，平均胎囊直径22.6±6.51mm。两组患者在年龄、孕周等方面比较差异无显著性(p＞0.05)。

方法：给药方法：所有病例均于术日开始服药，连续用药7天。

治疗组：予以益母安宫胶囊，粒数，日二次，连用7天。

对照组：益母草冲剂，1袋，日二次，连用7天，同时加用抗生素(利复星)5天。

1、观察项目及方法：观察两组治疗后，阴道出血天数、腰腹疼痛情况、发热情况、带经天数及月经量，并观察治疗前后常规的变化。

2、统计学处理  采用x²和t检验。

结果：1、疗效标准  根据《实用妇科学》，近期治愈：阴道出血3-5天停止，腰腹痛消失，月经周期规律。好转：阴道出血7-14天，腰腹痛减轻，周期尚规律。无效：阴道出血超过14天，腰腹痛严重，需应用抗生素治疗者。

2、临床疗效比较：治疗组35例，近期治愈率71.43％(25/35)，好转29.57％(10/335)；对照组15例，近期治愈27.27％(4/15)，好转72.73％(11/15)，两组总有效率比较无显著差异(p＞0.05)，但治疗组与对照组的治愈率比较，差异有显著性(x²＝10.46，p＜0.01)，说明其化瘀之功优于益母草冲剂。

组别         例数          近期治愈率            好转

治疗组        35          71.43％(25/35)     29.57％(10/35)

对照组        15          27.27％(4/15)      72.73％(11/15)

p值                       ＜0.01

3、两组子宫收缩情况与出血天数比较：治疗组出血天数明显少于对照组(p＜0.05)，说明本发明组合物制剂有很好的止血作用。

组别         例数         术前宫腔深度(cm)   术后宫腔深度(cm)

治疗组        35             9.54±0.76          4.39±1.51

对照组        15             10.29±0.79         8.02±1.77

p值                          ＞0.05              ＞0.05

4、均未出现发热、腹痛等症状。说明“益母安宫胶囊”具对术后感染有防治作用。

实验例3 毒性试验

1、急性毒性试验：益母安宫胶囊以动物能耐受的最大浓度、最大体积的药量一日内连续三次灌胃给予小鼠，共20只，雌性，最大给药量为531.3g生药/kg，相当于临床用量的664倍。给药后即刻观察动物反应，并连续观察7天。未发生死亡，动物体重均增加，肉眼观察未见明显毒性反应。

2、长期毒性试验：大鼠分别灌胃给予益母安宫胶囊40.0、20.0、10.0g生药/kg/d，(相当于人临床用药剂量的50.0、25.0和12.5倍)连续两个月，停药后观察2周。给药期间对动物的一般情况、体重、进食量无明显影响，外周血象和肝、肾功能等十项生化指标均在正常范围内波动，对重要脏器的重量指数无明显影响肉眼检查均未见明显变化，经组织病理学观察亦未见有由于药物所引起的明显病理形态学改变。

急性及长期毒性试验表明，本发明组合物制剂应用安全。

下述实施例均能实现上述实验例的效果。

实施例1  胶囊剂

益母草833g  川芎167g  旱莲草833g

益母草、旱莲草混合后加水12倍量，煎煮二次，每次1小时，滤过；合并滤液，浓缩至相对密度为1.15(50℃测)，加乙醇使醇浓度达70％，放置过夜，滤过。川芎加5倍量70％乙醇回流提取二次，每次2小时，滤过，滤液和上述醇沉液合并，回收乙醇并浓缩至相对密度为1.28-1.30(50℃测)的稠膏，减压干燥，粉碎成细粉，加入乳糖适量，混匀，干压制粒、装胶囊、共制成胶囊1000粒，即得。

实施例2  胶囊剂

益母草833g  川芎167g  旱莲草833g  鱼腥草833g

马齿苋833g，益母草、马齿苋、旱莲草及鱼腥草混合后加水12倍量，煎煮二次，每次1小时，滤过；合并滤液，浓缩至相对密度为1.15(50℃测)，加乙醇使醇浓度达70％，放置过夜，滤过。川芎加5倍量70％乙醇回流提取二次，每次2小时，滤过，滤液和上述醇沉液合并，回收乙醇并浓缩至相对密度为1.28-1.30(50℃测)的稠膏，减压干燥，粉碎成细粉，加入乳糖适量，混匀，干压制粒、装胶囊、共制成胶囊1000粒，即得。

实施例3  胶囊剂

益母草833g      川  芎334g        旱莲草667g

鱼腥草833g      马齿苋833g        制香附500g

[制法]以上六味，制香附加水8倍量，水蒸汽蒸馏6小时，提取挥发油，水溶液留用；药渣和益母草、马齿苋、旱莲草及鱼腥草混合后加水12倍量，煎煮二次，每次1小时，滤过；合并滤液及上述提油后的水溶液，浓缩至相对密度为1.15(50℃测)，加乙醇使醇浓度达70％，放置过夜，滤过。挥发油用倍他环糊精包结(挥发油-倍他环糊精-水＝1∶8∶80，60℃搅拌1小时)，冷藏24小时，滤过，低温干燥。川芎加5倍量70％乙醇回流提取二次，每次2小时，滤过，滤液和上述醇沉液合并，回收乙醇并浓缩至相对密度为1.28-1.30(50℃测)的稠膏，减压干燥，粉碎成细粉，和挥发油倍他环糊精包结物混合，加入乳糖适量，混匀，干压制粒、装胶囊、共制成胶囊1000粒，即得。

实施例4  注射剂

益母草450g   川  芎190g    莲草360g

益母草、旱莲草及鱼腥草混合后加水12倍量，煎煮二次，每次1小时，滤过；合并滤液，浓缩至相对密度为1.15(50℃测)，加乙醇使醇浓度达70％，放置过夜，滤过。川芎加5倍量70％乙醇回流提取二次，每次2小时，滤过，滤液和上述醇沉液合并，回收乙醇并浓缩至相对密度为1.1-1.15(50℃测)的浸膏，加乙醇使醇浓度达到80％，冷藏48小时，回收乙醇，浓缩至约500ml，加入注射用水及适宜辅料，配成1000ml，经过滤，灌入10ml安瓿，灭菌，即得。

实施例5  颗粒剂

益母草1083g    川  芎333g    旱莲草1250g

鱼腥草1250g    马齿苋1250g

益母草、马齿苋、旱莲草及鱼腥草混合后加水12倍量，煎煮二次，每次1小时，滤过；合并滤液，浓缩至相对密度为1.15(50℃测)，加乙醇使醇浓度达70％，放置过夜，滤过。川芎加5倍量70％乙醇回流提取二次，每次2小时，滤过，滤液和上述醇沉液合并，回收乙醇并浓缩至相对密度为1.28-1.30(50℃测)的稠膏，减压干燥，粉碎成细粉，经常规制成颗粒剂。

实施例6  片剂

益母草1083g       川  芎333g      旱莲草1250g

鱼腥草1250g       马齿苋1250g     制香附666g，

[制法]以上六味，制香附加水8倍量，水蒸汽蒸馏8小时，提取挥发油，水溶液留用；药渣和益母草、马齿苋、旱莲草及鱼腥草混合后加水12倍量，煎煮二次，每次1小时，滤过；合并滤液及上述提油后的水溶液，浓缩至相对密度为1.15(50℃测)，加乙醇使醇浓度达70％，放置过夜，滤过。挥发油用倍他环糊精包结(挥发油-倍他环糊精-水＝1∶8∶100，60℃搅拌1小时)，冷藏24小时，滤过，低温干燥。川芎加5倍量70％乙醇回流提取二次，每次2小时，滤过，滤液和上述醇沉液合并，回收乙醇并浓缩至相对密度为1.28-1.30(50℃测)的稠膏，减压干燥，粉碎成细粉，和挥发油倍他环糊精包结物混合，加入淀粉适量，混匀，经常规制成片剂。

实施例7  注射剂

益母草666g    川芎250g    旱莲草666g，

益母草、旱莲草混合后加水12倍量，煎煮二次，每次1小时，滤过；合并滤液，浓缩至相对密度为1.15(50℃测)，加乙醇使醇浓度达70％，放置过夜，滤过。川芎加5倍量70％乙醇回流提取二次，每次2小时，滤过，滤液和上述醇沉液合并，回收乙醇并浓缩至相对密度为1.1-1.15(50℃测)的浸膏，加乙醇使醇浓度达到80％，冷藏48小时，回收乙醇，浓缩至约500ml，加入注射用水及适宜辅料，配成1000ml，经过滤，灌入10ml安瓿，灭菌，即得。

实施例8  口服液

益母草666g      川  芎250g      旱莲草666g

鱼腥草833g      马齿苋666g

益母草、马齿苋、旱莲草及鱼腥草混合后加水12倍量，煎煮二次，每次1小时，滤过；合并滤液，浓缩至相对密度为1.15(50℃测)，加乙醇使醇浓度达70％，放置过夜，滤过。川芎加5倍量70％乙醇回流提取二次，每次2小时，滤过，滤液和上述醇沉液合并，回收乙醇并浓缩至相对密度为1.15-1.20(50℃测)的浸膏，加入适量糖浆，纯化水及适量其他辅料，制成3000ml，灌入10ml小瓶，即得。每次一支，每日三次。

实施例9  片剂

益母草666g    川  芎334g    旱莲草667g

鱼腥草833g    马齿苋666g    制香附417g

[制法]以上六味，制香附加水8倍量，水蒸汽蒸馏8小时，提取挥发油，水溶液留用；药渣和益母草、马齿苋、旱莲草及鱼腥草混合后加水12倍量，煎煮二次，每次1小时，滤过；合并滤液及上述提油后的水溶液，浓缩至相对密度为1.15(50℃测)，加乙醇使醇浓度达70％，放置过夜，滤过。挥发油用倍他环糊精包结(挥发油-倍他环糊精-水＝1∶8∶100，60℃搅拌1小时)，冷藏24小时，滤过，低温干燥。川芎加5倍量70％乙醇回流提取二次，每次2小时，滤过，滤液和上述醇沉液合并，回收乙醇并浓缩至相对密度为1.28-1.30(50℃测)的稠膏，减压干燥，粉碎成细粉，和挥发油倍他环糊精包结物混合，加入淀粉适量，混匀，经常规制成片剂。