作为G－蛋白偶联受体(GPCR)的配体的四氢咔唑衍生物

摘要

本发明涉及新的四氢咔唑衍生物，它们作为G－蛋白偶联受体(GPCR)的配体，特别是作为促性腺激素释放激素(GnRH)的拮抗剂。本发明还涉及一种含有所述新四氢咔唑衍生物的药物组合物及其制备方法。而且，本发明涉及向需要这种治疗的哺乳动物、特别是人给予四氢咔唑衍生物以治疗GPCR介导的病理学状态、特别是抑制GnRH，以及四氢咔唑衍生物用于制备治疗GPCR介导的病理学状态、特别是抑制GnRH的药物的用途。

说明书

本发明涉及新的四氢咔唑衍生物，它们是G-蛋白偶联受体的配体，特别是促性腺激素释放激素的拮抗剂，其制备方法，其用途，以及包括这些四氢咔唑衍生物的药物组合物。本发明还涉及一种治疗哺乳动物、特别是人内G-蛋白偶联受体介导的病理学状态的方法。

技术背景

所有G-蛋白偶联受体(GPCR)家族成员常见的结构元件是存在7个跨膜α-螺旋片段，它们通过改变细胞内环和细胞外环，与位于细胞外侧的氨基末端以及位于细胞内侧的羧基末端连接在一起。GPCR家族可以分成许多子家族(主要家族有A、B和C)，在这些子家族中进一步存在序列同源性。由于GPCR主要涉及信号接收和转导，大量的生理功能受到它们的影响。GPCR配体因此有效地适宜作为治疗或预防大量病理学状态的药物。可用GPCR配体治疗的疾病的简单调查示于S.Wilson等人，Pharmaceutical News 2000，7(3)的表1中。

大多数已知的GPCR配体具有肽结构。然而，肽受体配体经常具有一些严重的缺陷，例如生物利用率低并且代谢不稳定。这就是最近开展对小的、非肽分子形式的配体进行深入研究的原因。在对新的非肽受体配体的研究中一个特别部分是所谓的“特许结构(privilegedstructure)”。这些“特许结构”是提供用于大量不同的受体的配体的基本分子结构。这些“特许结构”首先是Evans等人结合苯并二氮类为基础的CCK(胆囊收缩素，一种得自天然产物曲林菌素(asperlicin)的拮抗剂)使用的(B.E.Evans等人，J.Med.Chem.1988，31，2235)。就蛋白酶而言，例如已知某些结构类型可以用作各种酶的抑制剂已有一段时间了。而过去的描述尤其在于各种蛋白酶的基于机理的抑制剂，然而，最近，由于化合物三维结构非常好地适合各种酶的活性结合区，因此有关这些化合物的实例的报道频率增加(参见M.Whittaker，Cur.Opin.Chem.Biol.1998，2，386；A.S.Ripka等人，同前，441)。这些“特许结构”也已经对GPCR进行了描述。其实例，除了上述的苯并二氮类之外，还有肽类，4-取代的4-芳基哌啶类，以及特定刚性化的β-扭转模拟物(B.A.Bunin等人，Ann.Rep.Med.Chem.1999，34，267；R.N.Zuckennann等人，J.Med.Chem.1994，37，2678；G.C.B.Harr iman，Tetrahedron Lett.2000，41，8853)。有关这方面的综述可参见A.A.Patchett等人，Ann.Rep.Med.Chem.1999，35，289。本发明的四氢咔唑衍生物为GPCR提供了另一类的“特许结构”。

尽管本发明提供了GPCR的配体，但是通常本发明提供的这些化合物尤其适用于作为这类GPCR中特别的代表性的配体，即促性腺激素释放激素(GnRH)。GnRH可以认为是GPCR的亚家族A(参见U.Gether等人，Endocrine Reviews 2000，21(1)，90)。

GnRH主要是哺乳动物内由下丘脑的神经细胞合成的(但不是绝对)，经门静脉输送到脑垂体并以控制方式递送到促性腺细胞。GnRH与其具有7个跨膜域的受体的相互作用刺激借助第二信使肌醇-1，4，5-三磷酸酯和和Ca²⁺离子产生并释放促性腺激素。黄体化激素(LH)和卵泡刺激素(FSH)，它们都是通过GnRH释放的促性腺激素，刺激两性内产生性别类固醇和配子成熟。除了GnRH(也称之为GnRH1)之外，还有其它两种形式的GnRH，即GnRH 2和3。

GnRH受体用作许多取决于功能性激素产生的紊乱、例如前列腺癌、绝经前乳腺癌、子宫内膜异位和子宫纤维瘤的药理学靶。GnRH超激动剂或拮抗剂可以成功地用于这些紊乱。进一步可能的适应症特别是结合替代剂量的雄性激素的男性生育力控制。

与GnRH超激动剂相比，GnRH拮抗剂的一个优点是其直接阻滞促性腺素分泌的活性。超激动剂最初使得脑垂体过度刺激，导致促性腺激素释放和性别类固醇释放增加。该激素反应仅仅在以GnRH受体浓度脱敏和下调的基础上某些延迟之后终止。因此GnRH超激动剂本身及其与睾酮的结合可能不能有效抑制男性产生精子，并因此不适合用于控制男性生育力。与此相反，肽GnRH拮抗剂、特别是与替代剂量的雄性激素结合的肽GnRH拮抗剂能够在人体内诱导显著的精子减少。

然而，肽GnRH拮抗剂有许多缺点。因此，它们比超激动剂的活性低得多，并且因此必需以相当高的剂量给药。此外，其口服生物利用率低，这样它们必需通过注射给药。重复注射因此使得依从性降低。而且，与非肽化合物相比，肽GnRH拮抗剂的合成复杂并且成本高。

例如在WO 97/14682中公开了喹啉衍生物作为非肽GnRH拮抗剂。然而，迄今为止还不能将任意的非肽GnRH拮抗剂投放市场。

技术问题

本发明基于该问题提供了适用于治疗GPCR-介导的病理学状态的新的化合物，并且特别显示了GnRH抑制(GnRH拮抗剂)功效。这些新的GPCR配体、优选GnRH拮抗剂应该可以优于已知的肽化合物，并且呈现有效的替换或者对已知的非肽化合物的改进。这些新的GPCR配体，特别是GnRH拮抗剂尤其应具有高的活性，并且可能的话具有高的口服生物利用率。而且其合成应该尽可能简单，并且成本最低。本发明还提供了药物组合物，它包含这些新的非肽GPCR配体、特别是GnRH拮抗剂。

本发明基于的另一问题是提供了新的GPCR配体，优选GnRH拮抗剂，它们可用作药物并且可用于制备药物，这些药物包含这些GPCR配体，优选GnRH拮抗剂。

此外，本发明的一个目的是提供一种治疗哺乳动物、特别是人体内GPCR-介导的病理学状态的方法，尤其是用于抑制GnRH。

通过提供这些新的四氢咔唑衍生物、含有这些四氢咔唑衍生物的药物组合物，这些四氢咔唑衍生物的制备方法、以及通过给予这些四氢咔唑衍生物治疗哺乳动物、特别是人内GPCR-介导的病理学状态的方法、优选用于抑制GnRH的方法、或者这些四氢咔唑衍生物用于制备治疗GPCR-介导的病理学状态、尤其是用于抑制GnRH的药物的用途，所有这些问题都出人意料地得到了解决。

发明概述

在第一个方面，本发明提供了新的通式(I)的四氢咔唑衍生物。

在第二个方面，提供了药物组合物，它包含至少一种新的通式(I)的四氢咔唑衍生物。

在第三个方面，本发明提供了用作药物的通式(I)的四氢咔唑衍生物。

在另一方面，本发明涉及通式(I)的四氢咔唑衍生物用于制备一种治疗GPCR-介导的病理学状态、尤其是用于抑制GnRH的药物的用途。同样，本发明涉及一种治疗哺乳动物、优选人内GPCR-介导的病理学状态、尤其是用于抑制GnRH的方法，其中向需要这种治疗的哺乳动物、优选人给药有效量的本发明的通式(I)的化合物。

另外本发明提供了一种制备通式(I)的四氢咔唑衍生物的方法。该方法例如包括步骤：缩合环己酮衍生物，将其固定于一固定相上并方便地用适宜取代的苯肼衍生物取代，接着衍生，这取决于最终化合物所需的结构，最后从固定相脱去，并分离出产物。

发明详述

在本发明的第一个方面，提供了新的通式(I)的四氢咔唑化合物

其中基团R¹是氢原子、C₂-C₆链烯基或C₁-C₆烷基并且可以任选被芳基、杂芳基或基团-COOR¹¹取代，其中所述芳基或杂芳基可以被不超过3个彼此独立地选自如下的取代基取代：-NO₂、-CH₃、-CF₃、-OCH₃、-OCF₃和卤原子，并且

基团R¹¹是氢原子、C₁-C₁₂烷基、C₁-C₁₂芳烷基、芳基、杂芳基或基团-COCH₃并且可以任选被选自如下的取代基取代：-CONH₂、-COCH₃、-COOCH₃、-SO₂CH₃和芳基；

基团R²、R³、R⁴和R⁵各自彼此独立地是氢原子、卤原子、基团-COOH、-CONH₂、-CF₃、-OCF₃、-NO₂、-CN、C₁-C₆烷基、C₁-C₆链烯基、C₁-C₆烷氧基、C₁-C₁₂芳烷基、芳基或杂芳基；

基团R⁶是基团-CONR⁸R⁹、-COOR⁸、-CH₂NR⁸R⁹、-CH₂R⁸、-CH₂OR⁸或任选被基团R⁸和R⁹取代的C₁-C₁₂链烯基，

其中基团R⁸和R⁹各自彼此独立地是氢原子、C₁-C₁₂烷基、C₁-C₁₂芳烷基、C₁-C₁₂杂芳烷基、芳基或杂芳基，它们各自可以被一个或多个选自如下的取代基取代：-OH、-NH₂、-CONHR¹⁰、-COOR¹⁰、-NH-C(＝NH)-NH₂和卤原子，

其中基团R¹⁰是氢原子、C₁-C₁₂烷基、C₁-C₁₂芳烷基、芳基或杂芳基，并且任选被基团-CON(R¹¹)₂取代，或者其中基团R⁸和R⁹可以在一起形成一仅有碳原子或者碳原子与杂原子组合组成的环状结构；

基团R⁷是氢原子、C₁-C₁₂烷基、C₁-C₁₂链烯基、C₁-C₁₂芳烷基、芳基或杂芳基、基团-NR¹²R¹³、-NHCOR¹⁴、-NHCONHR¹⁴、-NHCOOR¹⁴或-NHSO₂R¹⁴，并且可以任选被一个或多个选自如下的取代基取代：-OH、-NH₂、-CONH₂、-COOH和卤原子，

基团R¹²和R¹³各自彼此独立地是氢原子、C₂-C₆链烯基或C₁-C₁₂烷基并且可以任选被一个或多个芳基或杂芳基取代，所述芳基或杂芳基接着可以被不超过3个彼此独立地选自如下的取代基取代：-NO₂、-CH₃、-CF₃、-OCH₃、-OCF₃和卤原子，

并且基团R¹⁴是氢原子、C₁-C₁₂烷基、C₁-C₁₂链烯基、C₁-C₁₂芳烷基、芳基或杂芳基，它们可以任选被选自如下的取代基取代：-NO₂、-CH₃、-OR¹¹、-CF₃、-OCF₃、-OH、-N(R¹¹)₂、-OCOR¹¹、-COOH、-CONH₂、-NHCONHR¹¹、-NHCOOR¹¹和卤原子；

并且基团R^a、R^b、R^c、R^d、R^e和R^f各自彼此独立地是氢原子、卤原子、基团-COOH、-CONH₂、-CF₃、-OCF₃、-NO₂、-CN、C₁-C₆烷基、C₁-C₆烷氧基、芳基或杂芳基；

前提是通式(I)的化合物不选自3-氨基-1，2，3，4-四氢咔唑-3-甲酸、3-氨基-6-甲氧基-1，2，3，4-四氢咔唑-3-甲酸、3-氨基-6-苄氧基-1，2，3，4-四氢咔唑-3-甲酸、3-乙酰氨基-1，2，3，4-四氢咔唑-3-甲酸、3-乙酰氨基-1，2，3，4-四氢咔唑-3-甲酸甲酯、(-)3-乙酰氨基-1，2，3，4-四氢咔唑-3-羧酸-甲酯、或3-叔丁氧基羰基氨基-1，2，3，4-四氢咔唑-3-甲酸。

本发明的一个实施方式是上述通式(I)的化合物，(I)中所含的基团都具有上面所述的所有含义，其中基团R¹¹是杂烷基或杂芳基烷基。

Maki等人在Chem.Pharm.Bull.1973，21(11)，2460-2465以及R.Millet等人在Letters in Peptide Science 1999，6，221-233中介绍了上面具体排除在通式(I)定义范围内的化合物之外的那些化合物的基本四氢咔唑结构。

用于解释通式(I)化合物的所述术语具体具有下面的含义：

C₁-C₆或者C₁-C₁₂“烷基”分别是指支链或无支链、环状或非环、任选取代的具有1-6或1-12个碳原子的烷基。这些烷基的代表性实例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、正戊基、2，2-二甲基丙基、3-甲基丁基、正己基、正庚基、正辛基、正壬基、正癸基、正十一烷基和正十二烷基，以及环状基团，特别是环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、1-环丙基、1-环丁基、1-环戊基、1-环己基、1-环庚基乙基、2-环丙基、2-环丁基、2-环戊基、2-环己基、2-环庚基乙基等，但不限于此。

C₂-C₆“链烯基”是指支链或无支链、环状或非环、任选取代的、一-或多不饱和的具有2-6个碳原子的链烯基。这些链烯基的代表性实例包括乙烯基、烯丙基、丙-1-烯基、丁-1-烯基、丁-2-烯基、丁-3-烯基、丁-1，3-二烯基、戊-1-烯基、戊-2-烯基、戊-3-烯基、戊-4-烯基、戊-1，3-二烯基、戊-1，4-二烯基、戊-2，3-二烯基、异戊基、己-1-烯基、己-2-烯基、己-3-烯基、己-4-烯基、己-5-烯基、己-1，3-二烯基、己-1，4-二烯基、己-1，5-二烯基、己-2，4-二烯基、己-2，5-二烯基、己-1，4-二烯基、己-1，3，5-三烯基等，但是并不限于此。

C₂-C₆“烷氧基”是指支链或无支链、环状或非环、任选取代的具有2-6个碳原子的烷氧基。这些烷氧基的代表性实例包括甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、叔丁氧基、正戊氧基、正己氧基、环己氧基等，但是并不限于此。

C₁-C₁₂“芳烷基”是指被一个或多个芳基取代的具有1-12个碳原子的烷基。为了本发明的目的的这些芳烷基的代表性实例包括苄基、1-苯基乙基、1-苯基丙基、1-苯基丁基、1-苯基己基、1-苯基-2-甲基乙基、1-苯基-2-乙基乙基、1-苯基-2，2-二甲基乙基、二苯甲基、三苯甲基、2-或3-萘基甲基、2-苯基乙基、3-苯基丙基、4-苯基丁基、5-苯基戊等，但是并不限于此。因此，“杂烷基”是被杂芳基取代的烷基。

“芳基”是指任选取代的单环或多环芳族基团。这些芳基的代表性实例包括苯基、萘基等，但不限于此。

术语“杂芳基(hetaryl radical)”与术语“杂芳基(heteroarylradical)”相同，并且代表其结构中包括一个或多个杂原子，特别是氮、磷、氧、硫和砷原子的上面定义的芳基。这些杂芳基的代表性实例包括不饱和的杂芳基和饱和杂芳基，特别是咪唑基、吡啶基、喹啉基等，但不限于此。

术语“环状结构”包括任选取代的单环或多环结构，具有许多环单元，特别是5-、6-和7-元环状结构。这些环状结构可以包括碳原子以及一个或多个杂原子，特别是例如氮、磷、氧、硫和砷原子。这些环状结构可以包括饱和、部分或完全不饱和的结构单元。这些环状结构的代表性实例包括氮杂-、氧杂-、硫代-、磷杂环戊烷-、-环己烷-、-环庚烷-、二氮杂-、二氧杂-、二硫代-、二磷杂环戊烷、-环己烷、-环庚烷基本环状结构等，以及具有混合杂原子交换的基本环状结构，但不限于此。

“卤原子”尤其包括氟、氯、溴和碘原子，特别优选氯原子。

在这一点上，也可以参考如下事实，除了如上定义的通式(I)的化合物之外，正如本身提到的，本发明还包括生理耐受的衍生物或类似物，特别是这些化合物的盐。

还可以注意到这一点，术语“受体配体”或“配体”意指为了本发明的目的以任意方式与受体(在本发明中，该受体是GPCR受体，优选是GnRH受体)结合的任意化合物并对该受体诱导激活、抑制或其它可以理解的影响。因此术语“配体”包括激动剂、拮抗剂、部分激动剂/拮抗剂以及对该受体引起与激动剂、拮抗剂或部分激动剂/拮抗剂的效果相似的效果的其它配体。本发明的通式(I)的化合物优选GnRH拮抗剂。

本发明的一个实施方式是本发明的通式(I)的新的四氢咔唑衍生物，其中当基团R⁶同时是烷基时，基团R⁷不是氢原子。

本发明的另一实施方式是通式(I)的化合物，其中基团R⁷在任意情况下都不是氢原子。

本发明通式(I)的优选的新的四氢咔唑衍生物是基团R^a、R^b、R^c、R^d、R^e和R^f都是氢原子的那些化合物。

同样，本发明通式(I)的优选的新的四氢咔唑衍生物是基团R¹是氢原子的那些化合物。

本发明通式(I)的优选的新的四氢咔唑衍生物还有基团R²、R³、R⁴和/或R⁵不是氢原子的那些化合物。在这一点上，通式(I)的特别优选的化合物是基团R²、R³、R⁴和R⁵彼此独立地是甲基、氯或甲氧基的那些化合物。在这一点上，通式(I)的非常优选化合物是至少基团R²不是氢原子的那些化合物，特别是如下化合物

[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙基]氨基]羰基)-2，3，4，9-四氢-8-甲基-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯(实施例中的化合物号150a)

[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙基]氨基]羰基]-6-氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯(148a)，

[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙基]氨基]羰基]-2，3，4，9-四氢-8-甲氧基-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯(147a)。

本发明通式(I)的优选的新的四氢咔唑衍生物还有其中R⁶是疏水基团的那些化合物，所述疏水基团包括烷基、芳基和/或杂芳基结构，并且从被基团R⁶和R⁷取代的碳原子计算，以2-4个单键的距离负载氢键供体-受体系统。通式(I)的特别优选的化合物是

基团R⁶是苯基丙氨酰胺残基(phenylalanylamide residue)的那些化合物，特别是化合物[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[[(1S)-2-氨基-2-氧代-1-(苯基甲基)乙基]氨基]羰基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯(66)，

基团R⁶是异亮氨酰胺残基(isoleucylamide residue)的那些化合物，特别是化合物[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丁基]氨基]羰基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯(64)，

基团R⁶是缬氨酰基-4-氨基苯甲酰胺残基的那些化合物，特别是化合物[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[[(1S)-1-[[[4-(氨基羰基)苯基]氨基]羰基]-2-甲基丙基]氨基]氨基]羰基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯(45)，

基团R⁶是缬氨酰基-N-甲基酰胺残基的那些化合物，特别是化合物[(1S，2S)-2-甲基-1-[[[(3R)-2，3，4，9-四氢-3-[[[(1S)-2-甲基-1-[(甲基氨基)羰基]丙基]氨基]羰基]-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]丁基]氨基甲酸苯基甲酯(222a)，

基团R⁶是甲氧基甲基-4-吡啶基的那些化合物，特别是化合物2，3，4，9-四氢-3-(3-苯基丙基)-O-(4-吡啶基甲基)-1H-咔唑-3-甲醇(287)，

基团R⁶是羧基的那些化合物，特别是化合物2，3，4，9-四氢-3-(3-苯基丙基)-1H-咔唑-3-甲酸(273)，

或者基团R⁶是丙酸乙酯基团的那些化合物，特别是化合物3-[2，3，4，9-四氢-3-(3-苯基丙基)-1H-咔唑-3-基]-2-丙酸乙酯(289)。

同样特别优选如下通式(I)的化合物：

基团R⁶是羰基缬氨酰胺残基(carbonylvalylamide residue)的那些化合物，特别是化合物[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙基]氨基]羰基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯(58)，

基团R⁶是羰基苏氨酰胺残基(carbonyl threonylamide residue)的那些化合物，特别是化合物[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[[(1S，2R)-1-(氨基羰基)-2-羟基丙基]氨基]羰基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯，

基团R⁶是环状甲酰胺基团(例如，羰基脯氨酰胺基团)的化合物，特别是化合物[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[(2S)-2-(氨基羰基)-1-吡咯烷基]羰基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]-羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯(181a)，

或基团R⁶是羰基八氢吲哚基-2-甲酰胺残基的化合物，特别是化合物[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[(2S)-2-(氨基羰基)八氢-1H-吲哚-1-基]羰基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]-氨基甲酸苯基甲酯(190a)，

基团R⁶是4-甲酰胺基苯基甲酰胺残基的那些化合物，特别是化合物[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[[4-(氨基羰基)苯基]氨基]羰基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯(62)，

基团R⁶是甲基氨基-甲基-2-吡啶基的那些化合物，特别是化合物2，3，4，9-四氢-3-(3-苯基丙基)-N-(2-吡啶基甲基)-1H-咔唑-3-甲胺(279)，

基团R⁶是羰基缬氨醇残基的那些化合物，特别是化合物[(1S，2S)-1-[[[(3S)-3-[[[(1S)-1-(羟基甲基)-2-甲基丙基]氨基]羰基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯(267b)

和2，3，4，9-四氢-N-[(1S)-1-(羟基甲基)-2-甲基丙基]-3-(3-苯基丙基)-1H-咔唑-3-甲酰胺(276)

或基团R⁶是甲基缬氨醇基团的那些化合物，特别是化合物(2S)-3-甲基-2-[[[2，3，4，9-四氢-3-(3-苯基丙基)-1H-咔唑-3-基]甲基]氨基]-1-丁醇(284)。

本发明通式(I)的优选的新的四氢咔唑衍生物还有R⁷是包括烷基、芳基和/或杂芳基结构的疏水基团的化合物。在这一点上特别优选基团R⁷是2，3-二苯基丙酰基氨基的通式(I)的化合物，特别是化合物N-[[(3R)-2，3，4，9-四氢-3-[(1-氧代-2，3-二苯基丙基)氨基]-1H-咔唑-3-基]羰基]-L-缬氨酰基-L-天冬氨酸酰胺(aspartamide)(18)，

基团R⁷是吲哚基氨基的通式(I)的化合物，特别是化合物(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙基]-3-[[(2，3-二氢-1H-茚-1-基)羰基]氨基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺(162a)，

基团R⁷是吲哚基乙酰基氨基的通式(I)的化合物，特别是化合物(3S)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙基]-2，3，4，9-四氢-3-[(1H-吲哚-3-基乙酰基)氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺(164b)，

基团R⁷是2-萘基乙酰基氨基的通式(I)的化合物，特别是化合物(3S)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙基]-2，3，4，9-四氢-3-[(2-萘基乙酰基)氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺(161b)，

或者基团R⁷是3-丙酰基氨基的通式(I)的化合物，特别是化合物N-[[(3R)-2，3，4，9-四氢-3-[[(2S，3S)-3-甲基-1-氧代-2-[(1-氧代-3-苯基丙基)氨基]戊基]氨基]-1H-咔唑-3-基]羰基]-L-缬氨酰基-L-天冬氨酸酰胺(22)。

同样特别优选R⁷是在芳系上取代的苯基甲基甲酰胺基团的通式(I)的化合物，特别是化合物(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙基]-2，3，4，9-四氢-3-[[(4-甲基苯基)乙酰基]氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺(165a)，

N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙基]-2，3，4，9-四氢-3-[[(4-甲氧基苯基)乙酰基]氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺(175)，

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙基]-3-[[(3-溴苯基)乙酰基]氨基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺(96)，

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙基]-3-[[(4-氟苯基)乙酰基]氨基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺(91)，

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙基]-3-[[(4-氯苯基)乙酰基]氨基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺(167a)，

R⁷是苯基己基胺的那些化合物，特别是化合物(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙基]-2，3，4，9-四氢-3-[(6-苯基己基)氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺(234a)

或者R⁷是苯基丙基的那些化合物，特别是化合物6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-3-(3-苯基丙基)-1H-咔唑-3-甲酸(275)和6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-3-(3-苯基丙基)-1H-咔唑-3-甲酸乙酯(272)。

还优选如下的通式(I)的本发明的新的化合物：其中被R⁶和R⁷基团取代的碳原子为R构型，此时基团R⁶和R⁷一起形成α-氨基羧酸结构单元。

为了本发明的目的，更优选化合物为[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙基]氨基]羰基]-6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯(184a)、[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[[(1S)-1-(羟基甲基)-2-甲基丙基]氨基]羰基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯(267a)、(2S)-1-[[(3R)-3-[[(4-氯苯基)乙酰基]氨基]-2，3，4，9-四氢-8-甲氧基-1H-咔唑-3-基]羰基]-2-吡咯烷甲酰胺(189a)和6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-3-(3-苯基丙基)-N-(2-吡啶基甲基)-1H-咔唑-3-甲胺(283)。

通式(I)的本发明新化合物的其它代表包括其制备列举于实施例中。

上面定义的本发明的四氢咔唑衍生物(I)是GPCR的配体并且尤其可用于抑制，即作为拮抗剂抑制促性腺激素释放激素，例如用于雄性生育力控制、激素疗法、治疗雌性低生育力或不育、雌性避孕和肿瘤控制。

在雄性生育力控制方面，本发明的化合物使得精子生成降低。与雄性激素例如睾酮或睾酮衍生物如睾酮酯混合给药为优选。这些睾酮衍生物在这种情况下例如可以通过注射如通过肌内贮存注射。

适当的时候，本发明的化合物(I)也可以与其它激素，例如雌激素或/和孕激素混合用于激素疗法，例如治疗子宫内膜移位、子宫平滑肌瘤和子宫纤维瘤。特别优选本发明的这些GnRH拮抗剂和组织选择性部分雌激素激动剂如Raloxifen混合。另外，本发明化合物可用于激素替代疗法。本发明的化合物(I)还可用于增加雌性生育力，例如通过诱导排卵，并用于治疗不育。

另一方面，本发明的新的化合物(I)也适用于妇女避孕。因此，本发明的GnRH拮抗剂可以在周期1-15天内与雌激素、优选非常少量的雌激素剂量一起给药。在服用周期的第16-21天，将孕激素加入到该雌性激素/GnRH拮抗剂组合中。本发明的GnRH拮抗剂可以在整个周期内连续给药。以这种方式可以降低激素剂量，并因此使非生理性激素水平的副作用降低。此外，可以在患多囊卵巢综合征和雄性激素依赖性紊乱如痤疮、皮脂溢和多毛症的妇女中获得有益效果。与以前的给药方法相比，也预料到该周期的控制有所改善。其它适应征有良性前列腺增生、化学疗法期间生殖腺保护、控制卵巢刺激/辅助生殖技术、婴儿发育失调，例如青春期早熟和多囊卵巢。

最后，如上定义的本发明的化合物(I)通过抑制内源性类固醇激素还可用于治疗激素依赖性肿瘤疾病如经绝前癌症、前列腺癌、卵巢癌和子宫内膜癌。

如上定义的本发明的新化合物(I)作为GPCR配体、特别是GnRH拮抗剂，适用于给予到哺乳动物，特别是人，以治疗上面详述的病理学状态，还可用于兽医目的，例如在宠物和产出性牲畜，而且也用于野生动物。

可以已知方式给药，例如口服或非口服，特别是局部、直肠、阴道内、鼻或者通过注射或植入。优选口服。本发明的新化合物(I)可以转化成可以给药的形式，并且在适当的时候，与药用可接受的载体或稀释剂混合。适当的赋形剂和载体例如描述在Ullman′s Encyclopedia ofTechnical Chemistry，Vol.4，(1953)，1-39；Journal ofPharmaceutical Sciences，Vol.52(1963)，918 ff；H.v.Czetsch-Lindenwald，″Hilfsstoffe für Pharmazie und angrenzendeGebiete″，Pharm.Ind 2，1961，72ff；Dr.H.P.Fiedler，″Lexikon derHigsstoffe für Pharmazie，Kosmetik und angrenzende Gebiete″，Cantor KG，Aulendorf in Württemberg，1971。

口服可以固态如片剂、胶囊、凝胶胶囊、包衣片剂、颗粒或粉剂进行，也可以可饮用的溶液形式进行。就口服而言，如上定义的本发明通式(I)的新化合物，可以与已知且常用的生理耐受性赋形剂和载体如阿拉伯胶、滑石、淀粉、糖如甘露醇、甲基纤维素、乳糖、明胶、表面活性剂、硬脂酸镁、环糊精、含水或不含水的载体、稀释剂、分散剂、乳化剂、润滑剂、防腐剂和调味剂(例如精油)混合。本发明的化合物也可以分散到微粒、例如纳米颗粒的组合物中。

非口服给药可以通过静脉内、皮下或肌内注射无菌水溶液或油溶液、悬液或乳液、借助植入物或软膏、霜或栓剂进行。在适当的时候也可以延长释放的形式给药。植入物可以含有惰性物质，例如可生物降解的聚合物或合成硅氧烷如硅氧烷橡胶。例如可以借助子宫托进行阴道内给药。借助隔膜可以进行子宫内给药，等等。此外，也可以提供透皮给药，特别是借助适用于此目的的制剂和/或适当的装置例如贴剂。

正如前面已经解释的，本发明的新化合物(I)也可以与其它活性药用成分混合。在混合治疗期间，单个活性成分可以同时或单独给药。特别是通过相同途径(例如口服)或者通过单独途径(例如口服和注射)。它们可以在单位剂量中以相同或不同量存在和给药。也可以采用显示有利的特定剂量方案。以这种方式也可以将本发明的许多新的化合物(I)混合到一起。

剂量可以在很大范围内变化，这取决于适应症的性质、紊乱程度、给药方式、年龄、性别、体重和待治疗的对象的敏感性。决定混合药用组合的“药理学有效量”在本领域技术人员的能力范围内。优选每千克待治疗的对象的体重的单位剂量是1μg-100mg，特别优选1μg-10mg，最优选1μg-1mg。可以单一剂量或者多个单独的剂量进行给药。

因此，在本发明的另一方面，本发明还包括上面所述的药物组合物，它包括至少一种上面定义的本发明新的化合物(I)，并且在适当的时候还包括药用可接受的载体和/或赋形剂。优选并且特别优选的药物组合物是包括至少一种优选或者特别优选的本发明新的化合物(I)，特别是上面提到的那些化合物的组合物。在本发明的药物组合物中，除了上面定义的至少一种通式(I)的化合物之外，还可以有其它活性药用成分存在，如上面详细描述的。

至少一种上面定义的本发明新化合物(I)以上面作为优选、特别优选或最优选的提到的单位剂量之一存在于本发明的药物组合物中，特别和优选以可以口服给药形式存在的。

此外，在另一方面，本发明提供了上面定义的通式(I)化合物用作药用治疗剂。

用作药用治疗剂的上面定义的本发明通式(I)的优选四氢咔唑化合物依次是上面作为优选和特别优选的化合物提到的那些化合物，特别是通过名称提到的本发明优选化合物以及实施例中提到的化合物。

关于包括本发明化合物(I)的药物组合物以及关于用作药物的本发明化合物(I)，可以参照已经对上面定义的本发明新化合物(I)进行描述的用途和给药的可能性关系。

另一方面，本发明还提供了如上所述本发明通式(I)的至少一种四氢咔唑衍生物-最初定义的-在Millet等人和Maki等人的出版物中公开的四氢咔唑不在通式(I)的范围内，用于制备治疗GPCR-介导的疾病，特别是抑制促性腺激素释放激素(GnRH)的药物的用途。

此外，本发明在另一方面提供了至少一种上面定义的通式(I)的化合物，但是包括前面从Millet等人和Maki等人的出版物中排除的化合物，即3-氨基-1，2，3，4-四氢咔唑-3-甲酸、3-氨基-6-甲氧基-1，2，3，4-四氢咔唑-3-甲酸、3-氨基-6-甲氧基-1，2，3，4-四氢咔唑-3-甲酸、3-乙酰氨基-1，2，3，4-四氢咔唑-3-甲酸、3-乙酰氨基-1，2，3，4-四氢咔唑-3-甲酸甲酯、(-)-薄荷基-3-乙酰氨基-1，2，3，4-四氢咔唑-3-甲酸酯和3-叔丁氧基羰基氨基-1，2，3，4-四氢咔唑-3-甲酸，用于制备抑制GnRH，优选用于控制雄性生育力、用于激素疗法、用于治疗雌性低生育力和不育、用于雌性避孕和用于控制肿瘤的药物的用途。为了更清楚地描述，术语“上面定义的通式(I)，但是包括上面通过名称排除的化合物的化合物”是指通式(I)的化合物

其中基团R¹是氢原子、C₂-C₆链烯基或C₁-C₆烷基并且可以任选被芳基、杂芳基或基团-COOR¹¹取代，其中所述芳基或杂芳基可以被不超过3个彼此独立地选自如下的取代基取代：-NO₂、-CH₃、-CF₃、-OCH₃、-OCF₃和卤原子，并且

基团R¹¹是氢原子、C₁-C₁₂烷基、C₁-C₁₂芳烷基、芳基、杂芳基或基团-COCH₃并且可以任选被选自如下的取代基取代：-CONH₂、-COCH₃、-COOCH₃、-SO₂CH₃和芳基；

基团R²、R³、R⁴和R⁵各自彼此独立地是氢原子、卤原子、基团-COOH、-CONH₂、-CF₃、-OCF₃、-NO₂、-CN、C₁-C₆烷基、C₁-C₆链烯基、C₁-C₆烷氧基、C₁-C₁₂芳烷基、芳基或杂芳基；

基团R⁶是基团-CONR⁸R⁹、-COOR⁸、-CH₂NR⁸R⁹、-CH₂R⁸、-CH₂OR⁸或任选被基团R⁸和R⁹取代的C₁-C₁₂链烯基，其中基团R⁸和R⁹各自彼此独立地是氢原子、C₁-C₁₂烷基、C₁-C₁₂芳烷基、C₁-C₁₂杂芳烷基、芳基或杂芳基，它们各自可以被一个或多个选自如下的取代基取代：-OH、-NH₂、-CONHR¹⁰、-COOR¹⁰、-NH-C(＝NH)-NH₂和卤原子，

其中基团R¹⁰是氢原子、C₁-C₁₂烷基、C₁-C₁₂芳烷基、芳基或杂芳基，并且任选被基团-CON(R¹¹)₂取代，或者其中基团R⁸和R⁹可以在一起形成一仅有碳原子或者碳原子与杂原子组合组成的环状结构；

基团R⁷是氢原子、C₁-C₁₂烷基、C₁-C₁₂链烯基、C₁-C₁₂芳烷基、芳基或杂芳基、基团-NR¹²R¹³、-NHCOR¹⁴、-NHCONHR¹⁴、-NHCOOR¹⁴或-NHSO₂R¹⁴，并且可以任选被一个或多个选自如下的取代基取代：-OH、-NH₂、-CONH₂、-COOH和卤原子，

基团R¹²和R¹³各自彼此独立地是氢原子、C₂-C₆链烯基或C₁-C₁₂烷基并且可以任选被一个或多个芳基或杂芳基取代，所述芳基或杂芳基接着可以被不超过3个彼此独立地选自如下的取代基取代：-NO₂、-CH₃、-CF₃、-OCH₃、-OCF₃和卤原子，

并且基团R¹⁴是氢原子、C₁-C₁₂烷基、C₁-C₁₂链烯基、C₁-C₁₂芳烷基、芳基或杂芳基，它们可以任选被选自如下的取代基取代：-NO₂、-CH₃、-OR¹¹、-CF₃、-OCF₃、-OH、-N(R¹¹)₂、-OCOR¹¹、-COOH、-CONH₂、-NHCONHR¹¹、-NHCOOR¹¹和卤原子；

并且基团R^a、R^b、R^c、R^d、R^e和R^f各自彼此独立地是氢原子、卤原子、基团-COOH、-CONH₂、-CF₃、-OCF₃、-NO₂、-CN、C₁-C₆烷基、C₁-C₆烷氧基、芳基或杂芳基。

与通式(I)的本发明新化合物，如上所述(即排除Maki等人和Millet等人的出版物公开的化合物和上面用名称提到的)有关的已提到的适应症已经在上面针对本发明的新化合物(I)给出了。刚刚定义的用于制备抑制GnRH的药物的用途中优选和特别优选的化合物与上面在本发明通式(I)的新化合物(如上所述)提到的优选和特别优选的化合物相同。

本发明另一方面提供了上面定义的本发明化合物，但是同时包括最初用名称排除的化合物用于控制雄性生育力或用于雌性避孕的用途。用于该用途的优选和特别优选的本发明化合物是最初已经提到的作为如上面定义的本发明通式(I)的优选或特别优选的化合物。

此外，本发明提供了一种控制雄性能育性或用于雌性避孕的方法，包括向对象，优选哺乳动物，特别优选人给予有效地控制雄性生育力或雌性避孕量的上一段定义的本发明化合物。

另一方面，本发明涉及一种治疗GPCR-介导的病理学状态的方法。该方法包括当需要这种治疗时，向哺乳动物，特别是人给予至少一种上面定义的本发明化合物(I)。给药通常是以药用有效量进行的。正如上面就本发明新的化合物(I)和本发明的药物组合物已经解释的，决定药用有效量是本领域技术人员的任务，这取决于个体的特定需求。然而，优选以1μg-100mg、特别优选1μg-10mg、最优选1μg-1mg单位治疗对象体重的单位剂量给予本发明化合物(I)。优选给药形式是口服。还提供了将一种或多种本发明的化合物(I)与至少一种其它活性成分混合给药，如上面已经解释的。

此外，本发明还涉及一种抑制患者体内的GnRH的方法，包括将药用有效量的通式(I)化合物(上面定义的)以及上面通过名称排除的化合物给予需要这种治疗的患者。该方法优选用于控制雄性生育力、激素疗法、雌性避孕、治疗雌性低生育力或不育以及控制肿瘤。

最后，本发明最后一个方面还提供了一种制备本发明通式(I)的新的四氢咔唑衍生物的方法。本发明通式(I)的化合物的制备方法可以各种方式进行，例如在液相中或者作为部分或完全固相合成。制备具体的代表性通式(I)化合物的适宜合成条件可以由本领域技术人员根据常规知识进行选择。下面首先描述用于制备本发明通式(I)的化合物的本发明的一种方法。然后描述本方法的特定变体，即固相法。为了进一步描述本发明，下面所列的实施例包括通式(I)的许多代表性化合物。

制备本发明通式(I)的化合物的一个方法优选按照下面的方式进行：

中心四氢咔唑结构可以通过本身已知的Fischer吲哚合成获得。为此目的，将适当情况下提供有保护基团的适当取代的环己酮衍生物与每种情况所需的苯肼衍生物缩合，所述苯肼衍生物同样适当地被取代并且适当的时候提供有保护基团(例如Britten & Lorkwood，J C.S.PerkinI 1974，1824或者Maki等人，Chem.Pharm.Bull.1973，21，240所述的)。具体地说，环己酮结构在位置3，3′、5，5′和6，6′经基团R^a-R^f取代，并且在位置4，4′经这些基团取代，或者适当的时候由这些基团的前体R⁶和R⁷取代。该苯肼结构任选取代有基团R²-R⁵。不能商购获得的苯肼衍生物可以通过本领域技术人员已知的方法制得。在环己酮衍生物和苯肼衍生物缩合时适当获得的位置异构体可以通过色谱法，例如HPLC分离。

在合成中心四氢咔唑结构之后，可以使用碱用适当的R¹-卤化物通过9位的氮原子的N-烷基化引入基团R¹(例如Pecca & Albonico，J.Med.Chem.1977，20，487或Mooradian等人，J.Med.Chem.1970，13，327所述的)。

如上所述的基团R⁶和R⁷可以各种方式引入，这取决于它们的性质，其将在下面详细解释。

这些基团中的α-氨基羧酸结构可以通过用NH₄(CO)₃和KCN在本身已知的Schotten-Baumann条件下处理酮，接着将形成的乙内酰脲碱水解获得(Britten & Lockwood，J.C.S.Perkin I 1974，1824)。

优选使用对肽化学而言本身已知的方法产生酰胺基团。为此目的，将酸成分用激活剂如DCC或者HATU激活(Tetrahedron Lett.1994，35，2279)并在有碱如DIPEA和/或DMAP情况下与氨基成分缩合。

也可以使用所需醇在类似条件下获得酯基。这种情况下所用的溶剂优选无水。

仲或叔酰胺基团是由伯胺通过烷基卤的亲核取代或者通过醛/酮的还原胺化获得(例如J.Org.Chem.1996，61，3849或Synth.Comm.1994，609)。

磺酰胺基团是由相应的酰胺通过与磺酰氯反应获得的。

脲基团是通过将胺与适当的异氰酸酯反应获得的。

尿烷基团可以通过用羰基二羟基苯并三唑((HOBt)₂CO)将适当的醇预活化，接着与胺反应制得(Warass等人，LIPS 1998，5，125)。

醇也可以由羧酸酯通过用LiAlH₄还原获得。

醛基团可以由醇前体通过例如在本身已知的Swern条件下用DMSO/草酰氯氧化获得(Pansavath等人，Synthesis 1998，436)。

取代的胺基团是通过用醛将胺还原胺化获得的(J.Org.Chem.1996，61，3849)。

醚基团可以通过用碱如NaH在本身已知的Williams条件下将醇前体去质子，接着与烷基卤反应获得。

基团中的双键可以在本身已知的Wittig条件下通过将醛或酮前体与适当的膦酰化物反应引入。

本发明通式(I)化合物的固相制备方法优选包括下面详细解释的步骤(a)-(d)：

步骤(a)基本上与Fischer吲哚合成类似地进行，如Britten &Lockwood，J.C.S.Perkin I 1974，1824；Maki等人，Chem.Pharm.Bull.1973，21，240或Hutchins & Chapman，Ttrahedron Lett.1996，37，4869所述，并包括在有酸优选乙酸和金属盐优选ZnCl₂的情况下将环己酮衍生物(II)(含有基团G并且通过适用于形成基团R⁶的连接子L固定(tether)到固相SP上，这种情况下基团R⁷是氢原子、C₁-C₁₂烷基、C₁-C₁₂芳烷基或杂芳基，基团G与基团R⁷相同，并且在这种情况下基团R⁷具有通式(I)中R⁷所述的另一种含义，基团G等于基团-NH-Pg，其中Pg是一保护基团)

与取代有R²-R⁵的苯肼衍生物(III)缩合。优选DMF为溶剂。基团R^a-R^f的定义与上面通式(I)中所述的相同。适当的时候，某些取代基或基团也可以保护形式存在，这种情况下在合成期间的适当时间通过本身已知的方法再将这些保护基团除去。

为了本发明目的而特别适宜的固相SP是Rink酰胺-树脂(Rink，Tetrahedron Lett.1989，28，3787)、HMB树脂(Sheppard等人，Int.J.Peptide Protein Res.1982，20，451)、Wang树脂(Lu等人，J.Org.Chem.1981，46，3433)或氯三苯甲基-树脂(Barlos等人，Int.J.Peptide Protein Res.1982，20，451)，其中环己酮衍生物(II)应通过(氨基)羧酸固定在固相SP上。环己酮衍生物(II)的醇前体可以使用DHP连接子(Liu & Elman，J.Org.Chem.1995，60，7712)固定。环己酮衍生物(II)的芳族前体可以不留痕迹地固定在三嗪树脂上(Brse等人，Angew.Chem.Int.Ed.1998，37，3413)。

适当的时候包括在基团G内并保护α-氨基-NH₂的保护基团Pg优选是“Fmoc”(9-芴基甲氧基羰基)保护基团，但是也可以是另一常规氨基保护基团，例如得自烷氧基羰基保护基团(例如“Z”(苄氧基羰基)或“Boc”(叔丁氧基羰基)基团)或另一适宜的保护基团，例如“三苯甲基”(三苯基甲基)保护基团。

连接子L的结构是这样的，适宜的衍生(步骤(b)和(c))和操作(步骤(d))获得具有上面对最终产物-通式(I)的四氢咔唑衍生物所述含义之一的所需基团R⁶。为了描述连接子L的构型，下面通过其中R⁶等于基团-CONR⁸R⁹的实例进行解释。

在本发明通式(I)的产物中的基团R⁶具有含义-CONR⁸R⁹时，首先将形成连接子L的化合物Pg-N(R⁸)-R^9′-COOH通过活化剂如DCC(二环己基碳二亚胺)或HATU(O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N-N′，N′-四甲基脲鎓(uronium)六氟磷酸盐)经SP的自由氨基固定到SP上，其中Pg和SP具有上述的含义，并且R^9′形成后面基团R⁹的一部分。接着去除保护基团Pg，例如在为Fmoc保护基团的情况下通过哌啶/DMF。其导致生成化合物HR⁸N-R^9′-CONH-SP。然后依次使用激活剂如DCC或HATU将后一化合物与环己酮衍生物(II)的前体，即环己酮羧酸(II′)反应，

最终获得如上定义的环己酮衍生物(II)。在所述情形下连接子L的含义是-CONR⁸-R^9′-CONH-SP。可以在所述制备过程中通过HPLC以已知方式分馏任何形式的任意生成的异构体(对映异构体、非对映异构体或位置异构体)。

然后进行实际步骤(a)即环己酮衍生物(II)与取代的苯肼衍生物(III)的缩合，并且在适当的时候，消除基团G中的保护基团Pg，例如借助哌啶(在为Fmoc保护基团的情况下)，以致再次产生自由α-氨基。

在基团R⁷是基团-NHCOR¹⁴、-NHSO₂R¹⁴、-NR¹²R¹³(其中R¹²和R¹³不都是氢原子)、-NHCONHR¹⁴或-NHCOOR¹⁴的情况下，最后在步骤(b)中进行树脂结合的环己酮衍生物(II)的现在未保护的α-氨基的衍生，这样可以实施上面定义的各种其它基团R⁷。

根据本发明四氢咔唑最终产物(I)中的所需基团R⁷，该步骤如下：

在R⁷是基团-NHCOR¹⁴的情况下，将步骤(a)的反应产物与羧酸R¹⁴COOH在有活化剂如DCC或HATU的情况下并在有碱如DIPEA(二异丙基乙基胺)或DMAP(4-二甲基氨基吡啶)的情况下通过形成肽链的已知方法反应(参见例如Tetrahedron Lett.1994，35，2279；或者(i))。

在R⁷是磺酰胺基团-NHSO₂R¹⁴的情况下，将步骤(a)的反应产物与磺酸衍生物R¹⁴SO₂X(其中X是离去基团，优选卤原子，特别是氯原子)，在有碱例如DMAP或DIPEA的情况下反应(参见例如Gennari等人，EJOC1998，2437；或者(ii))。

在R⁷是基团-NR¹²R¹³的情况下(其中R¹²和R¹³不都是氢原子)，在基团R¹²是氢原子的情况下，将步骤(a)的产物与试剂R¹³X(其中X是离去基团如卤原子，特别是氯原子)在有碱如DBU或DIPEA(参见Green，JOC 1995，60，4287或JOC 1996，61，3849)的情况下反应，或者与醛R¹³CHO在有还原剂如NaH/B(OAc)₃的情况下反应。在基团R¹²和R¹³都不是氢原子的情况下，将步骤(a)的反应产物与酮R¹²COR¹³在有还原剂的情况下反应(参见Ellmann等人，JOC 1997，62，1240或者Synth.Commun.1994，609；或者(iii))。在等于-NR¹²R¹³的R⁷中的基团R¹²和R¹³都是氢原子的情况下，使用下面的方式(vi)。

在R⁷是基团-NHCONHR¹⁴(脲衍生物)的情况下，将步骤(a)的反应产物与异氰酸酯R¹⁴NCO反应(参见Brown等人，JACS 1997，119，3288；或者(iv))。

在R⁷是氨基甲酸酯基或尿烷基-NHCOOR¹⁴时，将步骤(a)的反应产物与用羰基二羟基苯并三唑((HOBt)₂CO)预活化的醇HOR¹⁴反应(参见Warass等人，LIPS 1998，5，125；或者(v))。

在R⁷是氢原子、C₁-C₁₂烷基、C₁-C₁₂芳烷基、芳基、杂芳基或基团-NH₂时(即等于-NR¹²R¹³的R⁷中的基团R¹²和R¹³都是氢原子)，省去步骤(b)，由于不需要进一步衍生(或者(vi))。

与上面解释的步骤(b)相似，步骤(c)，即在吲哚-氮原子上的衍生，也相应于下面详细解释的各种方式：

就上面定义的步骤(b)的情形(i)-(v)而言，将(b)中获得的反应产物去质子是通过碱例如NaH或NaHMDS以及接下来通过基团R¹X衍生进行的，其中X是离去基团，例如卤原子，特别是氯原子(参见Collini &Ellingboe，Tetrahedron Lett.1997，38，7963；Pecca & Albonico，J.Med.Chem.1977，20，487或Mooradian等人，J.Med Chem.1970，13，327)。

就上面定义的步骤(b)中的情形(vi)而言，即当步骤(b)省去时，与上面所述类似，将(a)中获得的反应产物去质子是通过碱例如NaH或NaHMDS以及接下来通过基团R¹X衍生进行的，其中X是离去基团，例如卤原子，特别是氯原子。

步骤(d)最后基本上包括从固相SP除去(c)的中获得的反应产物。在为Wang、三苯甲基、DHP和Rink酰胺树脂的情况下，(c)中获得的反应产物的消除是借助酸，特别是用TFA(三氟乙酸)进行的。在从HMB树脂上氨解消除的情况下，所用消除试剂例如是甲醇中的氨水。然后用常规方式将所需产物分离。

下面详细描述本发明四氢咔唑衍生物的制备的例证实施方式。

实施例

I.本发明化合物的常规合成方法

A 羧酸与Rink酰胺-树脂的偶联：

将0.1mmol的Fmoc-保护的Rink酰胺-树脂(166mg，负载0.6mmol/g)在一玻璃料底的容器中用1.5ml DMF预溶胀20分钟。抽吸之后，加入1.5ml的20％哌啶/DMF并搅拌5分钟。抽吸之后，再加入1.5ml的20％哌啶/DMF并搅拌15分钟。接着抽吸，之后用DMF洗涤4次。然后加入675μl的0.267M Fmoc保护的氨基羧酸的DMF溶液、675μl的HATU溶液(0.267M，于DMF中)和150μl的NMM溶液(2，4M，于DMF中)和0.01mmol的DMAP并在40℃下搅拌4小时。抽吸之后，再次加入相同的试剂并在40℃下搅拌4小时。接着抽吸并用DMF洗涤4次。

B 羧酸与三苯甲基-树脂的偶联：

将2.98mmol的Fmoc保护的氨基羧酸溶解在30ml无水二氯甲烷中，并混合有14.3mmol(2.45ml)的DIPEA并加入到2.98mmol的2-氯三苯甲基氯-树脂(2g，负载1.49mmol/g树脂)中。摇荡2小时之后，通过一玻璃料将树脂抽滤出并用20ml二氯甲烷/MeOH/DIPEA17∶2∶1洗涤3次。接着用20ml二氯甲烷洗涤3次，用甲醇洗涤3次并用20ml乙醚洗涤3次，在真空下干燥。获得负载0.5-1mmol氨基羧酸/g树脂的树脂。

C 羧酸与HMB-树脂的偶联：

将21.3mmol氨基羧酸和21.3mmol HATU溶解在60ml的DMF中并混合有63.9mmol(10.9ml)的DIPEA。5分钟之后，加入5g聚苯乙烯-HMB-树脂(负载0.71mmol/g树脂)并在室温下摇荡5分钟。然后加入21.3mmol(2.6g)的DMAP并在室温下摇荡1小时。接着将树脂抽滤出并用100ml DMF、DCM和DMF各洗涤1次。将该树脂与100ml的10％Ac₂O(乙酸酐)/DMF/5％DMAP混合并摇荡15分钟。抽吸之后，用100ml的DCM和乙醚各洗涤3次并在真空下干燥。

D 羧酸与Wang树脂的偶联：

将54.6mmol羧酸和27.3mmol(4.2ml)的DIC溶解在500ml的无水DCM中并在室温下搅拌10分钟。将沉淀的脲过滤出之后，将溶液蒸发至干并将剩余物溶解在160ml的无水DMF中。将该溶液加入到4.55mmol(5g，负载0.91mmol/g树脂)在DMF中预膨胀过的Wang树脂中并加入4.55mmol(556mg)的DMAP。在室温下摇荡1.5小时之后，将树脂抽滤出并溶于100ml的10％Ac₂O/DMF/5％DMAP中，摇荡15分钟。抽吸之后，用100ml的DCM和乙醚各自洗涤3次，并在真空下干燥。

E 醇与DHP-树脂的偶联：

将0.5mmol的DS-树脂(0.5g，负载密度1mmol/g)在2ml的二氯甲烷中预溶胀15分钟。向其中加入2ml的0.75M醇/0.37M对甲苯磺酸吡啶鎓，并在80℃下搅拌16小时。冷却至室温，接着加入5ml吡啶，简单颠倒摇荡并抽滤。用5ml DMF、DCM和己烷各洗涤2次。

F 树脂结合的Fmoc保护基团的去保护：

向0.1mmol树脂结合的Fmoc基团中加入1.5ml的20％哌啶/DMF并搅拌5分钟。抽吸之后，再加入1.5ml的20％哌啶/DMF并搅拌15分钟。抽吸之后，用DMF洗涤4次。

G 羧酸与树脂结合的氨基官能团的偶联：

将675μl的0.267M Fmoc保护的氨基羧酸的DMF溶液、675μl的HATU溶液(0.267M，于DMF中)和150μl的NMM溶液(2.4M，于DMF中)和0.01mmol的DMAP加入到0.1mmol树脂结合的氨基官能团中并在40℃下搅拌4小时。抽吸之后，再加入相同的试剂并在40℃下搅拌4小时。之后抽吸并用DMF洗涤4次。

H 乙酸与树脂结合的氨基官能团的偶联：

将1.5ml的10％乙酸酐的DMF溶液加入到0.1mmol树脂结合的氨基官能团中并在室温下搅拌15分钟。之后抽吸并用DMF洗涤4次。

I 由树脂结合的环己酮开始合成四氢咔唑：

在反应之前，将0.1mmol环己酮-树脂用2ml DMF洗涤2次并用2ml乙酸洗涤2次。然后将1ml的DMF和2ml的0.5M肼/0.5M ZnCl₂的乙酸加入到该树脂中并在70℃下搅拌20小时。之后抽吸并用2ml乙酸和2ml DMF洗涤2次。

J 由树脂结合的酰胺合成磺酰胺：

将该树脂用2ml DMF和DCE各洗涤2次。向0.1mmol树脂结合的胺中加入1ml 0.5M磺酰氯的DCE溶液和400μl 2.5M NMM/1当量的0.25M DMAP的DMF溶液。在60℃下搅拌12小时，接着抽吸，并重复该偶联过程。抽吸之后用2000ml DMF洗涤4次。

K 通过树脂结合的胺与异氰酸酯反应合成脲：

将2ml 0.5M异氰酸酯的DCM溶液加入到0.1mmol树脂结合的胺中并在室温下搅拌18小时。抽吸之后，用DMF洗涤4次。

L 通过树脂结合的胺与预活化的醇反应合成氨基甲酸酯：

为了预活化，将0.4M醇与0.39M二苯并三唑基碳酸酯和0.39M吡啶在DMF中于40℃下搅拌15分钟。将1mmol树脂结合的胺与1ml预活化的醇混合，并加入167ml 2.4M NMM的DMF溶液。在60℃下搅拌4小时之后，抽吸并用DMF洗涤4次。

M 通过用烷基卤和催化的KI树脂结合的胺的N-烷基化合成N-烷基胺：

将1ml 0.5M卤化物/0.05M KI的DMF和416μl 2.4M DIPEA的DMF溶液加入到0.1mmol树脂结合的胺中并在90℃下搅拌12小时。抽吸之后，用2ml DMF将树脂洗涤4次。

N 用卤化物/NaH的DMF溶液对树脂结合的吲哚氮进行N-烷基化：

向0.1mmol树脂结合的胺中加入1ml DMF和0.5mmol NaH(油中55％的悬液)。在室温下搅拌30分钟之后，加入1ml 0.5M卤化物的DMF并在45℃下搅拌8小时。之后抽吸，用2ml甲醇、DMF、甲醇和DMF备洗涤2次。

O 从Wang、三苯甲基、DHP、Rink酰胺-树脂上的消除：

向0.1mmol树脂中加入2ml的95％TFA/5％H₂O溶液并在室温下振荡3小时。然后将树脂过滤出并再用2ml TFA洗涤。将混合的TFA溶液蒸发至干并得到粗产物。

P 从HMB-树脂的氨解消除：

向0.1mmol树脂中加入2ml DMF和2ml 7M NH₃的甲醇溶液并在室温下振荡18小时。然后将树脂过滤出，并用DMF洗涤。将混合溶液蒸发至干，得到粗产物。

所需原料化合物的制备：

3-[[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]氨基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酸1

将38.4mmol(6.0g)4，4-亚乙基二氧基环己酮和39.8mmol(4.3g)苯肼分别溶解在50ml和10ml水中，然后混合。将搅拌10分钟之后获得的乳白色乳液用乙酸乙酯萃取5次，用MgSO₄干燥并蒸发至干。产率：9.2g橙色油。

室温下将9.2g未纯化的苯腙溶解在240ml甲苯中并加入4.9g刚磨碎的ZnCl₂。用水脱水器回流90分钟之后，大多数甲苯蒸馏掉，加入过量的2N NaOH，并用乙酸乙酯将该混合物萃取3次。萃取物用盐水洗涤并用MgSO₄干燥，并将溶剂蒸馏掉。剩余的黑色油在硅胶上用乙酸乙酯/己烷1∶9纯化。产率：2.7g米色固体。

将11.6mmol(2.7g)1，2，4，9-四氢螺[3H-咔唑-3，2′-[1，3]二噁烷]和640mg对-甲苯磺酸溶于70ml丙酮中并在室温下甲苯2.5小时。将该乳液加入到NaHCO₃溶液中，用乙酸乙酯萃取，用盐水洗涤，用MgSO₄干燥并浓缩。剩下2.13g红褐色固体。由乙醚重结晶得到1.1g米色固体。

将60.2mmol(11.1g)1，2，4，9-四氢螺-3H-咔唑-3-酮、8.3g KCN和22.0g(NH₄)₂CO₃于高压釜中的550ml 60％乙醇中在80℃下加热3小时。冷却至室温之后，将该反应混合物加入到冰水中，并将沉淀的固体过滤出。产率：10.1g灰色固体。

44.2mmol(11.3g)1，2，4，9-四氢螺[3H-咔唑-3，4′-咪唑烷]-2′，5′-二酮与62g Ba(OH)₂×8 H₂O的145ml的H₂O溶液中于150℃下加热13小时。冷却至室温之后，在搅拌下将该粘性物料与37g(NH₄)₂CO₃混合并在100℃下加热30分钟。冷却至室温，之后过滤，用水洗涤，将滤液蒸发至干。产率：7.7g米色固体。

室温下将26mmol(5.8g)3-氨基-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酸的26ml 1N NaOH溶液与26mmol(8.76g)Fmoc-ONSu的28ml乙腈混合并用130ml乙腈/H₂O 1∶1稀释。2小时之后，用NEt₃(1.5ml)将pH再次调整至9并将该混合物在室温下搅拌过夜。然后再加入溶解在19ml乙腈中的6.3g(18.7mmol)Fmoc-ONSu，继续搅拌2小时，同时控制其pH。蒸馏除去乙腈之后，用0.01M HCl酸化并用乙酸乙酯萃取。萃取物洗涤至中性，用Na₂SO₄干燥并在旋转蒸发器内蒸发至干。由乙醚/己烷重结晶。产率：10.7g。

¹H-NMR(d⁶DMSO)：δ＝2.07ppm(m，1H)；2.50(m，1H)；2.70(bs；2H)；3.04(q，2H)；4.17(m，2H)；4.28(m，2H)；6.92(tr，2H)；6.99(tr，2H)；7.23(tr，2H)；7.24-7.35(m，3H)；7.38(tr，2H)；7.62(s，1H)；7.68(dd，2H)；7.87(d，2H)；10.71(s，1H)。

熔点：119℃

通过手性HPLC分馏成两种对映异构体。

(R)-3-[[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]氨基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酸1a

t_R＝6.4分钟(Chiralcel OD 10μm LC50 250×4.6cm，己烷/异丙醇75∶25，80ml/min)

(S)-3-[[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]氨基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酸1b

t_R＝7.5分钟(Chiralcel OD 10μm LC50 250×4.6cm，己烷/异丙醇75∶25，80ml/min)

1-[[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]氨基]-4-氧代环己烷羧酸2

将320mmol(50g)4，4-亚乙基二氧基环己酮悬浮于800ml的50％EtOH中，并加入1500mmol(144.5g)(NH₄)₂CO₃和640mmol(41.7g)KCN。在60℃下搅拌5小时之后，真空下除去乙醇，并将用冰冷却之后的含水剩余物过滤出，用水洗涤并干燥，产率：72.4g 4，4-1，4-二氧杂-9，11-二氮杂二螺[4.2.4.2]十四烷-10，1 2-二酮。

将295mmol(66.8g)的4，4-1，4-二氧杂-9，11-二氮杂二螺[4.2.4.2]十四烷-10，12-二酮和826mmol(260.6g)Ba(OH)₂×8H₂O于2.5升的150℃高压釜中搅拌6小时。冷却至室温之后，向该溶液中加入1032mmol(99.2g)(NH₄)₂CO₃并在60℃下搅拌1小时。将该悬液过滤并洗涤，将滤液冷冻干燥。剩余物用H₂O/MeOH重结晶。产率：45.4g的8-氨基-1，4-二氧杂螺[4，5]癸烷-8-甲酸。

将213mmol(42.9g)8-氨基-1，4-二氧杂螺[4，5]癸烷-8-甲酸的213ml 1N NaOH溶液和213mmol(71.9g)Fmoc-ONSu的240ml乙腈溶液混合并用1000ml乙腈/H₂O 1∶1稀释。将pH调整至9，接着在室温下搅拌过夜。在旋转蒸发器中除去乙腈，接着用0.01 M HCl酸化并用乙酸乙酯萃取。将萃取物洗涤至中性，用Na₂SO₄干燥并蒸发至干。剩余物用乙酸乙酯/己烷重结晶。产率：79.0g的8-[[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]氨基]-1，4-二氧杂螺[4，5]癸烷-8-甲酸。

将187mmol(79 g)的8-[[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]氨基]-1，4-二氧杂螺[4，5]癸烷-8-甲酸溶解于3.51的丙酮/0.1M HCl 1∶1中并在室温下搅拌4小时。在旋转蒸发器中汽提掉丙酮，并将沉淀产物过滤出，用水洗涤并干燥。产率：68.7g的2。

¹H-NMR(d⁶ DMSO)：δ＝1.52-1.73(m，4H)；1.82-2.14(m，4H)；4.27(m，3H)；7.85(tr，2H)；7.42(tr，2H)；7.67(s，1H)；7.75(d，2SI)；7.91(d，2H)

熔点：157℃

4-氧代环己烷羧酸3

将20mmol(3.4g)的4-氧代环己烷羧酸乙酯悬浮于40ml的2％H₂SO₄中并在90℃搅拌2小时。之后用乙酸乙酯萃取4次，用Na₂SO₄干燥并除去溶剂。用乙醚/己烷重结晶，得到2.9白色固体3。

¹H NMR(d⁶DMSO)：δ＝1.72(m，2H)；2.08-2.18(m；2H)；2.19-2.47(m，4H)；2.72(m，1H)；12.23(bs；1H)。

4-氯-3-[[(苯基氨基)羰基]氨基]苯乙酸4

向18.55mmol(4g)4-氯-4-硝基苯乙酸的50ml MeOH溶液中加入18.55mmol(2.21g)SOCl₂，同时在冰中冷却并搅拌。搅拌30分钟之后，将该混合物加热至室温，再加入3.71mmol(0.44g)的SOCl₂。搅拌过夜，接着加热至回流持续30分钟。汽提掉溶剂之后，用乙醚/己烷重结晶。产率：3.43g的4-氯-3-硝基苯乙酸甲酯，其为淡黄色固体。

将13.07mmol(3.0 g)4-氯-3-硝基苯乙酸甲酯和198.8mmol(13.0g)Zn粉在500ml MeOH中加热至回流持续10分钟。然后，在回流下，滴加13ml浓HCl，并继续回流30分钟。将悬液趁热过滤，并将甲醇蒸馏掉，剩余物用NaHCO₃溶液调整至pH 14。用乙酸乙酯萃取，用Na₂SO₄干燥并通过蒸馏除去溶剂，得到2.3g的3-氨基-4-氯苯乙酸甲酯，其为米色固体。

将2.08mmol(415mg)3-氨基-4-氯苯乙酸甲酯溶解在40ml DCM中，并在0℃下，加入0.83mmol(246.3 mg)三光气和0.6ml吡啶。在0℃下搅拌1小时之后，加入10.4mmol(1.11g)苄胺，并在室温下连续搅拌过夜。用DCM/H₂O继续萃取，将有机相干燥，并除去溶剂。产率：727mg的4-氯-3-[[(苯基氨基)羰基]氨基]苯乙酸甲酯。

将2.98mmol(990mg)4-氯-3-[[(苯基氨基)羰基]氨基]苯乙酸甲酯溶于10ml甲醇中，并加入6mmol的1N NaOH。在室温下搅拌2小时之后，将甲醇蒸馏掉并用1M HCl将剩余物酸化至pH 2-3。用乙酸乙酯进行萃取，并用Na₂SO₄干燥，将溶剂除去。由沸腾的异丙醇重结晶。产率：830mg白色固体4。

¹H RMR(d⁶DMSO)：δ＝3.57(S，2H)；6.92(d，1H)；6.99(tr，1H)；7.35-7.50(m，3H)；8.10(s，1H)；8.30(s，1H)；9.42(s，1H)；12.40(bs，1H)。

4-氯-3-[[[(苯基甲基)氨基]羰基]氨基]苯乙酸5

如4.)中所述，将2.08mmol(415mg)3-氨基-4-氯苯乙酸甲酯与10.4mmol(969mg)苯胺混合并进行类似的处理。产率：662mg固体。

为了酯开裂，将2.47mmol(790mg)4-氯-3-[[[(苯基甲基)氨基]羰基]氨基]苯乙酸甲酯用1N NaOH以与上面类似的方法水解。获得产物5没有重结晶。产率：693mg淡黄色固体。ES-MS：319(M+H⁺)

4-氯-3-[[(4-吡啶基氨基)羰基]氨基]苯乙酸6

如4.)所述，将2.08mmol(415mg)3-氨基-4-氯苯乙酸甲酯与10.4mmol(979mg)4-氨基吡啶混合并进行类似的处理。产率：664mg固体。

以与上面相似的方法，为了酯开裂，将2.63mmol(840mg)4-氯-3-[[(4-吡啶基氨基)羰基]氨基]苯乙酸甲酯用1 N NaOH进行水解。获得产物6，没有重结晶。产率：481mg淡黄色固体。

¹H NMR(d⁶ DMSO)：δ＝3.57(s，2H)；6.94(d，1H)；7.40(m；3H)；8.05(s，1H)；8.35(d，2H)；8.50(s，1M)；9.92(s，1H)；12.40(bs，1H)

4-氯-3-[[(2-吡啶基氨基)羰基]氨基]苯乙酸7

如4.)所述，将2.08mmol(415mg)3-氨基-4-氯苯乙酸甲酯与10.4mmol(979mg)2-氨基吡啶混合并进行类似的处理。产率：617mg固体。

以与上面类似的方法，为了酯开裂，将2.47mmol(790mg)4-氯-3-[[(2-吡啶基氨基)羰基]氨基]苯乙酸甲酯用1 N NaOH水解。获得产物7，没有重结晶。产率：693mg淡黄色固体。

¹H NMR(d⁶DMSO)：δ＝3.59(s，2H)；6.94(dd，1H)；7.03(dd，1H)；7.22(d，1H)；7.42(d，1H)；7.78(dtr，1H)；8.29(m，2H)；10.02(s，1H)；11.82(bs，1H)；12.50(s，1H)。

II.本发明化合物(I)的实施例

实施例1：

将0.3mmol(42.6mg)4-氧代环已烷羧酸溶解在1ml乙酸中并加入到0.3mmol(43.3mg)苯肼盐酸盐和0.3mmol(40.0mg)ZnCl₂的1ml乙酸悬浮液中。在70℃下搅拌20小时之后，用20ml水稀释并用乙酸乙酯萃取。该乙酸乙酯相用水洗涤，用Na₂SO₄干燥并蒸发至干。产率：65.6mg(100％)白色固体。

名称                            编号        M_实测          M_计算

2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酸    8           215             215.2507

这里引入的通栏标题(名称、化合物编号、M_fnd(实测分子量)、M_calc(计算分子量))也用于以下实施例，因此不再重复。

实施例2：

以0.2mmol的规模通过方法A、I和O进行合成。

2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺         9            214             214.2666

实施例3：

以0.2mmol规模通过方法A、F、G、I和O进行合成。

N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙            10a          314             313.3987基]-(3S)-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙            10b          314             313.3987基]-(3R)-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

N-(2-氨基-2-氧代乙基)-2，3，4，9-四氢-1H-11           271             271.3183咔唑-3-甲酰胺

实施例4：

以0.2mmol的规模通过方法D、F、G、F、G、I和O进行合成。

N-[(3S)-(2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基)羰    12a    442     442.513基]-L-缬氨酰基-L-谷氨酰胺

N-[(3R)-(2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基)羰    12b    442     442.513基]-L-缬氨酰基-L-谷氨酰胺，异构体B

实施例5：

以0.2mmol的规模通过方法D、F、G、I、F和O进行合成。

N-[[(3S)-3-氨基-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑     13     301     301.3441-3-基]羰基]-L-丙氨酸

实施例6：

将0.1mmol羧酸、0.1mmol HOBt和0.15mmol胺组分溶解在15ml的无水DMF(以及THF，DCM)，同时在冰中冷却并搅拌，加入0.5mmol的NMM。约15分钟之后，加入0.15mmol EDCI×HCl，并将该混合物搅拌1小时，加热至室温并搅拌过夜。就处理而言，将溶剂汽提掉，并将该产物溶解在乙酸乙酯中并各自用0.1N HCl和饱和NaCl溶液洗涤2次。干燥并汽提掉溶剂之后，如果需要的话进行重结晶。

[(3S)-3-[[[(4-溴苯基)甲基]氨基]羰           14     620     620.5439基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基甲酸9H-芴-9-基甲酯

N-[[(3S)-3-[[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基)        15     537     537.6129氨基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]羰基]-L-丙氨酸甲酯

实施例7：

以0.2mmol的规模通过方法A、F、G、F、G、F、G和O进行合成。

N-[[(3R)-3-[[(2S，3S)-2-[[(9H-芴-9-基      16      779     777.9176甲氧基)羰基]氨基]-3-甲基-1-氧代戊基]氨基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]羰基]-L-缬氨酰基-L-天冬氨酸酰胺(aspartamide)

N-[[(3S)-3-[[(2S，3S)-2-[[(9H-芴-9-基      17      779     777.9178甲氧基)羰基]氨基]-3-甲基-1-氧代戊基]氨基-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]羰基]-L-缬氨酰基-L-天冬氨酸酰胺

N-[[(3R)-2，3，4，9-四氢-3-[(1-氧代-2，3-  18      651     650.7758二苯基丙基)氨基]-1H-咔唑-3-基]羰基]-L-缬氨酰基-天冬氨酸酰胺

N-[[(3S)-2，3，4，9-四氢-3-[(1-氧代-2，3-  19      651     650.7758二苯基丙基)氨基]-1H-咔唑-3-基]羰基]-L-缬氨酰基-L-天冬氨酸酰胺，异构体A

N-[[(3S)-2，3，4，9-四氢-3-[(1-氧代-2，3-  20      651     650.7758二苯基丙基)氨基]-1H-咔唑-3-基]羰基]-L-缬氨酰基-L-天冬氨酸酰胺，异构体B

N-[[(3S)-2，3，4，9-四氢-3-[[(2S，3S)-3-   21      688     687.8371甲基-1-氧代-2-[(1-氧代-3-苯基丙基)氨基]戊基]氨基]-1H-咔唑-3-基]羰基]-L-缬氨酰基-L-天冬氨酸酰胺

N-[[(3R)-2，3，4，9-四氢-3-[[(2S，3S)-3-   22      688     687.8371甲基-1-氧代-2-[(1-氧代-3-苯基丙基)氨基]戊基]氨基]-1H-咔唑-3-基]羰基]-L-缬氨酰基-L-天冬氨酸酰胺

N-[[(3S)-2，3，4，9-四氢-3-[[(2S)-1-氧代   23      648     647.7289-2-[[(苯基甲氧基)羰基]氨基]丙基]氨基]-1H-咔唑-3-基]羰基]-L-缬氨酰基-L-天冬氨酸酰胺

N-[[(3R)-2，3，4，9-四氢-3-[[(2S)-1-氧代  24    648    647.7289-2-[[(苯基甲氧基)羰基]氨基]丙基]氨基]-1H-咔唑-3-基]羰基]-L-缬氨酰基-L-天冬氨酸酰胺

N-[[(3R)-2，3，4，9-四氢-3-[[(2S，3S)-3-  25    662    661.7557甲基-1-氧代-2-[[(苯基甲氧基)羰基]氨基]戊基]氨基]-1H-咔唑-3-基]羰基]-L-丙氨酰基-L-天冬氨酸酰胺

N-[[(3R)-2，3，4，9-四氢-3-[[(2S，3S)-3-  26    647    646.7844甲基-1-氧代-2-[[(苯基甲氧基)羰基]氨基]戊基]氨基]-1H-咔唑-3-基]羰基]-L-缬氨酰基-L-丙氨酰胺

N-[[(3S)-2，3，4，9-四氢-3-[[(2S，3S)-3-  27    690    689.8093甲基-1-氧代-2-[[(苯基甲氧基)羰基]氨基]戊基]氨基]-1H-咔唑-3-基]羰基]-D-缬氨酰基-L-天冬氨酸酰胺

N-[[(3R)-2，3，4，9-四氢-3-[[(2S，3S)-3-  28    690    689.8093甲基-1-氧代-2-[[(苯基甲氧基)羰基]氨基]戊基]氨基]-1H-咔唑-3-基]羰基]-D-缬氨酰基-L-天冬氨酸酰胺

N-[[(3R)-2，3，4，9-四氢-3-[[(2S，3S)-3-  29    690    689.8093甲基-1-氧代-2-[[(苯基甲氧基)羰基]氨基]戊基]氨基]-1H-咔唑-3-基]羰基]-L-缬氨酰基-D-天冬氨酸酰胺

N-[[(3S)-2，3，4，9-四氢-3-[[(2S，3S)-3-  30    690    689.8093甲基-1-氧代-2-[[(苯基甲氧基)羰基]氨基]戊基]氨基]-1H-咔唑-3-基]羰基]-L-缬氨酰基-D-天冬氨酸酰胺

N-[[(3S)-2，3，4，9-四氢-3-[[(2S，3S)-3-  31    662    661.7557甲基-1-氧代-2-[[(苯基甲氧基)羰基]氨基]戊基]氨基]-1H-咔唑-3-基]羰基]-L-丙氨酰基-L-天冬氨酸酰胺

N-[[(3S)-2，3，4，9-四氢-3-[(苯基乙酰基)  32    651    560.6514氨基]-1H-咔唑-3-基]羰基]-L-缬氨酰基-L-天冬氨酸酰胺

N-[[(3R)-2，3，4，9-四氢-3-[(1-氧代-3-苯  33    575    574.6782基丙基)氨基]-1H-咔唑-3-基]羰基]-L-缬氨酰基-L-天冬氨酸酰胺

N-[[(3S)-2，3，4，9-四氢-3-[(1-氧代-苯基  34    575    574.6782丙基)氨基]-1H-咔唑-3-基]羰基]-L-缬氨酰基-L-天冬氨酸酰胺

N-[[(3S)-2，3，4，9-四氢-3-[[(2S，3S)-3-  35    647    646.7844甲基-1-氧代-2-[[(苯基甲氧基)羰基]氨基]戊基]氨基]-1H-咔唑-3-基]羰基]-L-缬氨酰基-L-丙氨酰胺

N-[[(3R)-2，3，4，9-四氢-3-[(苯基乙酰基)  36    561    560.6514氨基]-1H-咔唑-3-基]羰基]-L-缬氨酰基-L-天冬氨酸酰胺

N-[[(3R)-2，3，4，9-四氢-3-[(1-氧代-4-苯  37    589    588.705基丁基)氨基]-1H-咔唑-3-基]羰基]-L-缬氨酰基-L-天冬氨酸酰胺

N-[[(3S)-2，3，4，9-四氢-3-[(1-氧代-4-苯  38    589    588.705基丁基)氨基]-1H-咔唑-3-基]羰基]-L-缬氨酰基-L-天冬氨酸酰胺

N-[[(3R)-3-[(二苯基乙酰基)氨              39    637    636.749基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]羰基]-L-缬氨酰基-L-天冬氨酸酰胺

N-[[(3S)-3-[(二苯基乙酰基)氨             40    637    636.749基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]羰基]-L-缬氨酰基-L-天冬氨酸酰胺

N-[[(3R)-2，3，4，9-四氢-3-[(1-氧代-2-苯 41    575    574.6782基丙基)氨基]-1H-咔唑-3-基]羰基]-L-缬氨酰基-L-天冬氨酸酰胺，异构体A

N-[[(3R)-2，3，4，9-四氢-3-[(3-甲基-1-氧 42    617    616.7586代-2-苯基戊基)氨基]-1H-咔唑-3-基]羰基]-L-缬氨酰基-L-天冬氨酸酰胺，异构体B

N-[[(3S)-2，3，4，9-四氢-3-[(3-甲基-1-氧 43    617    616.7586代-2-苯基戊基)氨基]-1H-咔唑-3-基]羰基]-L-缬氨酰基-L-天冬氨酸酰胺，异构体A

N-[[(3S)-2，3，4，9-四氢-3-[(3-甲基-1-氧 44    617    616.7586代-2-苯基戊基)氨基]-1H-咔唑-3-基]羰基]-L-缬氨酰基-L-天冬氨酸酰胺，异构体B

[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[[(1S)-1-[[[4-(   45    695    694.8284氨基羰基)苯基]氨基]羰基]-2-甲基丙基]氨基]羰基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-1-[[[(3S)-3-[[[(1S)-1-[[[4-(   46    695    694.8284氨基羰基)苯基]氨基]羰基]-2-甲基丙基]氨基]羰基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

N-[[(3S)-2，3，4，9-四氢-3-[(3-甲基-1-氧 47    603    602.7318代-2-苯基丁基)氨基]-1H-咔唑-3-基]羰基]-L-缬氨酰基-L-天冬氨酸酰胺，异构体A

N-[[(3S)-2，3，4，9-四氢-3-[(3-甲基-1-氧  48    603    802.7318代-2-苯基丁基)氨基]-1H-咔唑-3-基]羰基]-L-缬氨酰基-L-天冬氨酸酰胺，异构体B

N-[[(3R)-2，3，4，9-四氢-3-[(3-甲基-1-氧  49    603    602.7318代-2-苯基丁基)氨基]-1H-咔唑-3-基]羰基]-L-缬氨酰基-L-天冬氨酸酰胺

[(1S，2S)-1-[[[(3S)-3-[[[(1S)-1-[[[[4-    50    715    714.9026(氨基羰基)环己基]甲基]氨基]羰基]-2-甲基丙基]氨基]羰基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

N-[[(3R)-2，3，4，9-四氢-3-[[(3-苯氧基苯  51    653    652.748基)乙酰基]氨基]-1H-咔唑-3-基]羰基]-L-缬氨酰基-L-天冬氨酸酰胺

N-[[(3S)-2，3，4，9-四氢-3-[[(3-苯氧基苯  52    653    652.748基)乙酰基]氨基]-1H-咔唑-3-基]羰基]-L-缬氨酰基-L-天冬氨酸酰胺

[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[[(1S)-1-[[[[3-    53    709    708.8552(氨基羰基)苯基]甲基]氨基]羰基]-2-甲基丙基]氨基]羰基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-1-[[[(3S)-3-[[[(1S)-1-[[[[3-    54    709    708.8552(氨基羰基)苯基]甲基]氨基]羰基]-2-甲基丙基]氨基]羰基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙        55    608    607.7509基]-2，3，4，9-四氢-3-[[(2R)-1-氧代-2-[(1-氧代-3-苯基丙基)氨基]-3-苯基丙基]氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

N-[[(3S)-2，3，4，9-四氢-3-[(1-氧代-2-苯  56    575    574.6782基丙基)氨基]-1H-咔唑-3-基]羰基]-L-缬氨酰基-L-天冬氨酸酰胺

[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[[(1S)-1-[[[[4-    57    715    714.9026(氨基羰基)环己基]甲基]氨基]羰基]-2-甲基丙基]氨基]羰基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

实施例8：

以0.2mmol的规模通过方法A、F、G、F、G和O进行合成。

[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[[(1S)-1-(氨基     58    576    575.7059羰基)-2-甲基丙基]氨基]羰基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

N-[[(3S)-3-[[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]      59    565    664.759氨基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]羰基]-L-缬氨酰基-L-天冬氨酸酰胺

N-[[(3R)-3-[[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]      60    565    664.759氨基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]羰基]-L-缬氨酰基-L-天冬氨酸酰胺

[(1S，2S)-1-[[[(3S)-3-[[[(1S)-1-(氨基     61    576    575.7059羰基)-2-甲基丙基]氨基]羰基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[[4-(氨基羰基)    62    596    595.6963苯基]氨基]羰基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-1-[[[(3S)-3-[[[4-(氨基羰基)    63    596    595.6963苯基]氨基]羰基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[[(1S，2S)-1-(氨  64    590    589.7327基羰基)-2-甲基丁基]氨基]羰基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-1-[[[(3S)-3-[[[(1S，2S)-1-(氨  65    590    589.7327基羰基)-2-甲基丁基]氨基]羰基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[[(1S)-2-氨基     66    623    623.7499-2-氧代-1-(苯基甲基)乙基]氨基]羰基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-1-[[[(3S)-3-[[[(1S)-2-氨基     67    623    623.7499-2-氧代-1-(苯基甲基)乙基]氨基]羰基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙       68    460    460.6748基]-2，3，4，9-四氢-3-[(1-氧代-2-苯基丙基)氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

[(1S，2S)-1-[[[(3S)-3-[[[[3-(氨基羰基)   69    610    609.7231苯基]甲基]氨基]羰基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[[[3-(氨基羰基)  70    610    609.7231苯基]甲基]氨基]羰基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-1-[[[(3S)-3-[[[[4-(氨基羰基)   71    615    615.7705环己基]甲基]氨基]羰基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[[[4-(氨基羰基)   72    615    615.7705环己基]甲基]氨基]羰基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-1-[[[(3S)-3-[[[3-(氨基羰基)    73    596    595.6963苯基]氨基]羰基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[[3-(氨基羰基)    74    596    595.6963苯基]氨基]羰基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-1-[[[(3S)-3-[[[(1S)-2-氨基     75    610    609.7231-2-氧代-1-苯基乙基]氨基]羰基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-1-[[[(3S)-3-[[[(1R)-2-氨基     76    610    609.7231-2-氧代-1-苯基乙基]氨基]羰基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[(2-氨基-2-氧代  77    609    609.7231-1-苯基乙基)氨基]羰基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯，异构体A

[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[(2-氨基-2-氧代  78    609    609.7231-1-苯基乙基)氨基]羰基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯，异构体B

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙      79    462    462.547基]-2，3，4，9-四氢-3-[[(3-羟基苯基)乙酰基]氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-3-[[[3-(乙酰基氧基)苯基]乙酰基]    80    504    504.5838氨基]-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

3-[2-[[(3R)-3-[[[(1S)-1-(氨基羰基)-2-   81    597    596.6804甲基丙基]氨基]羰基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]-2-氧代乙基]苯基3-羟基苯乙酸酯

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙      82    462    462.547基]-2，3，4，9-四氢-3-[(羟基苯基乙酰基)氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙      83    525    525.4441基]-3-[[(4-溴苯基)乙酰基]氨基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙      84    481    480.9931基]-3-[[(2-氯苯基)乙酰基]氨基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙      85    497    496.9921基]-3-[[(3-氯-4-羟基苯基)乙酰基]氨基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-3-[[[4-(乙酰基氧基)-3-氯苯基]乙  86    539    539.0289酰基]氨基]-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙    87    481    480.5371基]-3-[[(3-氟-4-羟基苯基)乙酰基]氨基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-3-[[[4-(乙酰基氧基)-3-氟苯基]乙  88    523    522.5739酰基]氨基]-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙   89     492    491.5461基]-2，3，4，9-四氢-3-[[(4-硝基苯基)乙酰基]氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙   90     515    515.4382基]-3-[[(2，4-二氯苯基)乙酰基]氨基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙   91     464    464.5381基]-3-[[(4-氟苯基)乙酰基]氨基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙   92     462    482.547基]-2，3，4，9-四氢-3-[[(4-羟基苯基)乙酰基]氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙   93     525    525.4441基]-3-[[(2-溴苯基)乙酰基]氨基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙   94     491    491.5451基]-2，3，4，9-四氢-3-[[(2-硝基苯基)乙酰基]氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙  95    491    491.5451基]-2，3，4，9-四氢-3-[[(3-硝基苯基)乙酰基]氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙   96    525    525.4441基]-3-[[(3-溴苯基)乙酰基]氨基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙  97    499    498.9832基]-3-[[(2-氯-4-氟苯基)乙酰基]氨基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙  98    523    522.6456基]-3-[([1，1′-联苯基]-4-基乙酰基)氨基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙  99    475    474.6016基]-3-[[(3，5-二甲基苯基)乙酰基]氨基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙  100   490    490.557基]-3-[(1，3-苯并间二氧杂环戊烯-5-基乙酰基)氨基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙  101   481    480.9931基]-3-[[(3-氯苯基)乙酰基]氨基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙  102   461    460.5748基]-2，3，4，9-四氢-3-[[(3-甲基苯基)乙酰基]氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-氨基羰基)-2-甲基丙     103   464    464.5381基]-3-[[(2-氟苯基)乙酰基]氨基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙  104   461    460.5748基]-2，3，4，9-四氢-3-[[(2-甲基苯基)乙酰基]氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙       105    489   488.6284基]-2，3，4，9-四氢-3-[[[4-(1-甲基乙基)苯基]乙酰基]氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙       106    490   489.6165基]-3-[[[4-(二甲基氨基)苯基]乙酰基]氨基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙       107    524   524.6388基]-2，3，4，9-四氢-3-[[[4-(甲基磺酰基)苯基]乙酰基]氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙       108    478   478.5649基]-3-[[(3-氟-4-甲基苯基)乙酰基]氨基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

实施例9：

以0.2mmol的规模通过方法B、F、G、F、G、F、G和O进行合成。

N-[[(3R)-2，3，4，9-四氢-3-[[(2S，3S)-3- 109    691    690.7934甲基-1-氧代-2-[[(苯基甲氧基)羰基]氨基]苯基]氨基]-1H-咔唑-3-基]羰基]-L-缬氨酰基-L-天冬酰胺

N-[[(3S)-2，3，4，9-四氢-3-[[(2S，3S)-3- 110    691    690.7934甲基-1-氧代-2-[[(苯基甲氧基)羰基]氨基]戊基]氨基]-1H-咔唑-3-基]羰基]-L-缬氨酰基-L-天冬酰胺

实施例10：

以0.2mmol的规模通过方法A、F、G、F、G、F、G、F、H和O进行合成。

N-[[(3R)-3-[[(2S，3S)-2-(乙酰基氨           111    598    597.7127基)-3-甲基-1-氧代戊基]氨基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]羰基]-L-缬氨酰基-L-天冬氨酸酰胺

N-[[(3S)-3-[[(2S，3S)-2-(乙酰基氨           112    598    597.7127基)-3-甲基-1-氧代戊基]氨基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]羰基]-L-缬氨酰基-L-天冬氨酸酰胺

N-[[(3R)-3-[[(2R，3R)-2-(乙酰基氨           113    598    597.7127基)-3-甲基-1-氧代戊基]氨基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]羰基]-L-缬氨酰基-L-天冬氨酸酰胺

N-[[(3S)-3-[[(2R，3R)-2-(乙酰基氨           114    598    597.7127基)-3-甲基-1-氧代戊基]氨基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]羰基]-L-缬氨酰基-L-天冬氨酸酰胺

实施例11：

以0.2mmol的规模通过方法A、F、G、F、G、F、H和O进行合成。

N-[[(3R)-3-(乙酰基氨基)-2，3，4，9-四氢-1H- 115    484    484.5538咔唑-3-基]羰基]-L-缬氨酰基-L-天冬氨酸酰胺

N-[[(3S)-3-(乙酰基氨基)-2，3，4，9-四氢-1H- 116    484    484.5538咔唑-3-基]羰基]-L-缬氨酰基-L-天冬酰胺

N-[[(3S)-3-(乙酰基氨基)-2，3，4，9-四氢-1H- 117    484    484.5538咔唑-3-基]羰基]-D-缬氨酰基-L-天冬氨酸酰胺

N-[[(3S)-3-(乙酰基氨基)-2，3，4，9-四氢-1H- 118    484    484.5538咔唑-3-基]羰基]-L-缬氨酰基-D-天冬氨酸酰胺

实施例12：

以0.2mmol的规模通过方法A、F、G和O进行合成。

[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-(氨基羰基)-           119    476    476.57382，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-1-[[[(3S)-3-(氨基羰基)-           120    476    476.57382，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

实施例13：以0.2mmol的规模通过方法A、F、G、F、G、F、G、F、G和O进行合成。

N-[[(3R)-2，3，4，9-四氢-3-[[(2S)-1-氧代    121    722    721.8543-2-[(1-氧代-3-苯基丙基)氨基]-3-苯基丙基]氨基]-1H-咔唑-3-基]羰基]-L-缬氨酰基-L-天冬氨酸酰胺

N-[[(3R)-2，3，4，9-四氢-3-[[(2R，3R)-3-    122    688    687.8371甲基-1-氧代-2-[(1-氧代-3-苯基丙基)氨基]戊基]氨基]-1H-咔唑-3-基]羰基]-L-缬氨酰基-L-天冬酰胺

实施例14：以0.2mmol的规模通过方法D、F、G、F、G和O进行合成。

N-[[(3R)-2，3，4，9-四氢-3-[[(2S，3S)-3-甲基  123    577    576.69-1-氧代-2-[[(苯基甲氧基)羰基]氨基]戊基]氨基]-1H-咔唑-3-基]羰基]-L-缬氨酸、

N-[[(3R)-2，3，4，9-四氢-3-[[(2S)-3-甲基-1-氧代-2-[[(苯基甲氧基)羰基]氨基]戊基]氨基]-1H-咔唑-3-基]羰基]-L-缬氨酸

N-[[(3S)-2，3，4，9-四氢-3-[[(2S，3S)-3-甲基  124    577    576.69-1-氧代-2-[[(苯基甲氧基)羰基]氨基]戊基]氨基]-1H-咔唑-3-基]羰基]-L-缬氨酸

实施例15：以0.2mmol的规模通过方法C、F、G、F、G、F、G和P进行合成。

N-[[(3R)-3-[[(2S，3S)-2-[[(1，1-二甲基        125    656    655.7921乙氧基)羰基]氨基]-3-甲基-1-氧代戊基]氨基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]羰基]-L-缬氨酰基-L-天冬氨酸酰胺

实施例16：

以0.2mmol的规模通过方法A、F、G、F、G、F和O进行合成。

N-[[(3S)-3-氨基-2，3，4，9-四氨-1H-咔唑       126    442    442.517-3-基]羰基]-L-缬氨酰基-L-天冬氨酸酰胺

N-[[(3R)-3-氨基-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑       127    442    442.517-3-基]羰基]-L-缬氨酰基-L-天冬氨酸酰胺

(3S)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙            128    441    441.5725基]-3-[[(2S，3S)-2-氨基-3-甲基-1-氧代戊基]氨基]-2，3，4，9-四氢-1-咔唑-3-甲酰胺

实施例17：

以0.2mmol的规模通过方法D、F、G、F、G、F、H和O进行合成。

N-[[(3S)-3-(乙酰基氨基)-2，3，4，9-四氢  129    485    485.5379-1H-咔唑-3-基]羰基]-L-缬氨酰基-L-天冬酰胺

实施例18：

以0.2mmol的规模通过方法A、F、G、F、H和O进行合成。

(3R)-3-(乙酰基氨基)-N-[(1S)-2-氨基-2-    130    418    418.4944氧代-1-(苯基甲基)乙基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-3-(乙酰基氨基)-N-[(1S)-2-氨基-2-    131    418    418.4944氧代-1-(苯基甲基)乙基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

实施例19：

以0.2mmol的规模通过方法B、F、G和O进行合成。

(3S)-2，3，4，9-四氢-3-[[(2S，3S)-3-甲基 132    478    477.5579-1-氧代-2-[[(苯基甲氧基)羰基]氨基]戊基]氨基]-1H-咔唑-3-甲酸

实施例20：

以0.2mmol的规模通过方法B、F、G、F和O进行合成。

(3S)-3-[[[(2，2-二苯基乙基)氨基]乙酰         134    468    467.5661基]氨基-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酸

实施例21：

以0.2mmol的规模通过方法A、F、C、F、H和O进行合成。

(3S)-3-(乙酰基氨基)-N-[[3-(氨基羰基)苯基]甲  135    404    404.4676基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-3-(乙酰基氨基)-N-[[4-(氨基羰基)环己基]甲136    410    410.515基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-3-(乙酰基氨基)-N-[[4-(氨基羰基)环己基]甲137    410    410.515基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-3-(乙酰基氨基)-N-[(1S)-2-氨基-2-氧代-1- 138    404    404.4676苯基乙基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

实施例22：

以0.2mmol的规模按照实施例18和6的方法进行合成。

[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[(乙基氨基)羰          139    505    504.6274基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-2-甲基-1-[[[(3R)-2，3，4，9-四     140    519    518.6542氢-3-[[(1-甲基乙基)氨基]羰基]-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-2-甲基-1-[[[(3R)-2，3，4，9-四     141    533    532.681氢-3-[[(2-甲基丙基)氨基]羰基]-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[(2，2-二甲基丙       142    547    546.7078基)氨基]羰基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-2-甲基-1-[[[(3R)-2，3，4，9-四  143    553    552.6714氢-3-[(苯基氨基)羰基]-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-2-甲基-1-[[[(3R)-2，3，4，9-四  144    567    566.6982氢-3-[[(苯基甲基)氨基]羰基]-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-2-甲基-1-[[[(3R)-2，3，4，9-四  145    581    580.725氢-3-[[(2-苯基乙基)氨基]羰基]-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-2-甲基-1-[[[(3R)-2，3，4，9-四  146    595    594.7518氢-3-[[(3-苯基丙基)氨基]羰基]-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]丁基]氨基甲酸苯基甲酯

实施例23：

以0.2mmol的规模通过方法A、F、G、I、F、G和O进行合成。

[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[[(1S)-1-(氨基     147a   606    605.7317羰基)-2-甲基丙基]氨基]羰基]-2，3，4，9-四氢-8-甲氧基-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-1-[[[(3S)-3-[[[(1S)-1-(氨基     147b   606    605.7317羰基)-2-甲基丙基]氨基]羰基]-2，3，4，9-四氢-8-甲氧基-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[[(1S)-1-(氨基     148a   610    610.151羰基)-2-甲基丙基]氨基]羰基]-6-氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-1-[[[(3S)-3-[[[(1S)-1-(氨基   148b    610    610.151羰基)-2-甲基丙基]氨基]羰基]-6-氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[[(1S)-1-(氨基羰  180a    610    610.151基)-2-甲基丙基]氨基]羰基]-8-氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-1-[[[(3S)-3-[[[(1S)-1-(氨基   180b    610    610.151羰基)-2-甲基丙基]氨基]羰基]-8-氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[[(1S)-1-(氨基   149a    644    643.703羰基)-2-甲基丙基]氨基]羰基]-2，3，4，9-四氢-8-(三氟甲基)-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-1-[[[(3S)-3-[[[(1S)-1-(氨基   149b    644    643.703羰基)-2-甲基丙基]氨基]羰基]-2，3，4，9-四氢-8-(三氟甲基)-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[[(1S)-1-(氨基   150a    590    589.7327羰基)-2-甲基丙基]氨基]羰基]-2，3，4，9-四氢-8-甲基-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-1-[[[(3S)-3-[[[(1S)-1-(氨基   150b    590    589.7327羰基)-2-甲基丙基]氨基]羰基]-2，3，4，9-四氢-8-甲基-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[[(1S)-1-(氨基  151a    590    589.7327羰基)-2-甲基丙基]氨基]羰基]-2，3，4，9-四氢-5-甲基-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-1-[[[(3S)-3-[[[(1S)-1-(氨基  151b    590    589.7327羰基)-2-甲基丙基]氨基]羰基]-2，3，4，9-四氢-5-甲基-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[[(1S)-1-(氨基  151c    590    589.7327羰基)-2-甲基丙基]氨基]羰基]-2，3，4，9-四氢-7-甲基-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-1-[[[(3S)-3-[[[(1S)-1-(氨基  151d    590    589.7327羰基)-2-甲基丙基]氨基]羰基]-2，3，4，9-四氢-7-甲基-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[[(1S)-1-(氨基  152a    610    610.151羰基)-2-甲基丙基]氨基]羰基]-5-氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-1-[[[(3S)-3-[[[(1S)-1-(氨基  152b    610    610.151羰基)-2-甲基丙基]氨基]羰基]-7-氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[[(1S)-1-(氨基  152c    610    610.151羰基)-2-甲基丙基]氨基]羰基]-7-氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

(3R)-3-[[[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙   153a    620    619.7149基]氨基]羰基]-2，3，4，9-四氢-3-[[(2S，3S)-3-甲基-1-氧代-2-[[(苯基甲氧基)羰基]氨基]苯基]氨基]-1H-咔唑-8-甲酸

(3S)-3-[[[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙   153b    620    619.7149基]氨基]羰基]-2，3，4，9-四氢-3-[[(2S，3S)-3-甲基-1-氧代-2-[[(苯基甲氧基)羰基]氨基]苯基]氨基]-1H-咔唑-8-甲酸

[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[[(1S)-1-(氨基  154a    593    593.696羰基)-2-甲基丙基]氨基]羰基]-6-氟-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-1-[[[(3S)-3-[[[(1S)-1-(氨基  154b    593    593.696羰基)-2-甲基丙基]氨基]羰基]-6-氟-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[[(1S)-1-(氨基  155a    605    605.7317羰基)-2-甲基丙基]氨基]羰基]-2，3，4，9-四氢-6-甲氧基-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-1-[[[(3S)-3-[[[(1S)-1-(氨基  155b    605    605.7317羰基)-2-甲基丙基]氨基]羰基]-2，3，4，9-四氢-6-甲氧基-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[[(1S)-1-(氨基  156a    589    589.7327羰基)-2-甲基丙基]氨基]羰基]-2，3，4，9-四氢-6-甲基-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-1-[[[(3S)-3-[[[(1S)-1-(氨基  156b    589    589.7327羰基)-2-甲基丙基]氨基]羰基]-2，3，4，9-四氢-6-甲基-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[[(1S)-1-(氨基  157a    821    620.703羰基)-2-甲基丙基]氨基]羰基]-2，3，4，9-四氢-6-硝基-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-1-[[[(3S)-3-[[[(1S)-1-(氨基  157b    621    620.703羰基)-2-甲基丙基]氨基]羰基]-2，3，4，9-四氢-6-硝基-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[[(1S)-1-(氨基  158     633    632.7616羰基)-4-[(氨基亚氨基甲基)氨基]丁基]氨基]羰基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙     159a    447    447.5361基]-2，3，4，9-四氢-3-[(3-吡啶基乙酰基)氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-N-(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙      159b    447    447.5361基]-2，3，4，9-四氢-3-[(3-吡啶基乙酰基)氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙     160a    496    496.6078基]-2，3，4，9-四氢-3-[(1-萘基乙酰基)氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙     160b    496    496.6078基]-2，3，4，9-四氢-3-[(1-萘基乙酰基)氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙    161a     496       496.6078基]-2，3，4，9-四氢-3-[(2-萘基乙酰基)氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙    161b     496       496.6078基]-2，3，4，9-四氢-3-[(2-萘基乙酰基)氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙    162a     472       472.5858基]-3-[[(2，3-二氢-1H-茚-1-基)羰基]氨基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙    162b     472       472.5858基]-3-[[(2，3-二氢-1H-茚-1-基)羰基]氨基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙    163a     436       436.5132基]-2，3，4，9-四氢-3-[(1H-咪唑-4-基乙酰基)氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙    163b     436       436.5132基]-2，3，4，9-四氢-3-[(1H-咪唑-4-基乙酰基)氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙    164a     486       485.5849基]-2，3，4，9-四氢-3-[(1H-吲哚-3-基乙酰基)氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙    164b     486       485.5849基]-2，3，4，9-四氢-3-[(1H-吲哚-3-基乙酰基)氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙    165a     461       460.5748基]-2，3，4，9-四氢-3-[[(4-甲基苯基)乙酰基]氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙    165b     461       460.5748基]-2，3，4，9-四氢-3-[[(4-甲基苯基)乙酰基]氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙   166a    515    514.5451基]-2，3，4，9-四氢-3-[[[4-(三氟甲基)苯基]乙酰基]氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙   166b    515    514.5451基]-2，3，4，9-四氢-3-[[[4-(三氟甲基)苯基]乙酰基]氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-1(氨基羰基)-2-甲基丙    167a    481    480.9931基]-3-[[(4-氯苯基)乙酰基]氨基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙   167b    481    480.9931基]-3-[[(4-氯苯基)乙酰基]氨基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙   168a    515    514.5451基]-2，3，4，9-四氢-3-[[[3-(三氟甲基)苯基]乙酰基]氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙   168b    515    514.5451基]-2，3，4，9-四氢-3-[[[3-(三氟甲基)苯基]乙酰基]氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙   169a    465    464.5381基]-3-[[(3-氟苯基)乙酰基]氨基]-2，34，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙   169b    465    464.5381基]-3-[[(3-氟苯基)乙酰基]氨基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙    170a    477    476.5738基]-2，3，4，9-四氢-3-[[(3-甲氧基苯基)乙酰基]氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙     170b    477    476.5738基]-2，3，4，9-四氢-3-[[(3-甲氧基苯基)乙酰基]氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙  171a   477   476.5738基]-2，3，4，9-四氢-3-[[(2-甲氧基苯基)乙酰基]氨基]1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙  171b   477   476.5738基]-2，3，4，9-四氢-3-[[(2-甲氧基苯基)乙酰基]氨基]1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙  172a   479   478.5649基]-3-[[3-(4-氟苯基)-1-氧代丙基]氨基]-2，3，4，9-四氢-1EI-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙  172b   479   478.5649基]-3-[[3-(4-氟苯基)-1-氧代丙基]氨基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙  173a   497   496.555基]-3-[[3-(3，4-二氟苯基)-1-氧代丙基]氨基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙  173b   497   496.555基]-3-[[3-(3，4-二氟苯基)-1-氧代丙基]氨基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙  174a   593   592.6057基]-3-[[3-[3，4-双(三氟甲基)苯基]-1-氧代丙基]氨基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙  174b   593   592.6057基]-3-[[3-[3，4-双(三氟甲基)苯基]-1-氧代丙基]氨基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙       175    477   476.5738基]-2，3，4，9-四氢-3-[[(4-甲氧基苯基)乙酰基]氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙     176a     491   490.6006基]-2，3，4，9-四氢-3-[[3-(4-甲氧基苯基)-1-氧代丙基]氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙     176b     491   490.6006基]-2，3，4，9-四氢-3-[[3-(4-甲氧基苯基)-1-氧代丙基]氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙     177a     491   490.6006基]-2，3，4，9-四氢-3-[[3-(2-甲氧基苯基)-1-氧代丙基]氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙     177b     491   490.6006基]-2，3，4，9-四氢-3-[[3-(2-甲氧基苯基)-1-氧代丙基]氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙     178a     500   499.6117基]-2，3，4，9-四氢-3-[[3-(1H-吲哚-3-基)-1-氧代丙基]氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙     178b     500   499.6117基]-2，3，4，9-四氢-3-[3-(1H-吲哚-3-基)-1-氧代丙基]氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙     179a     503   502.6552基]-2，3，4，9-四氢-3-[(1-氧代-6-苯基己基)氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙     179b     503   602.6562基]-2，3，4，9-四氢-3-[(1-氧代-6-苯基己基)氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[(2S)-2-(氨基羰 181a     574   573.6901基)-1-吡咯烷基]羰基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-1-[[[(3S)-3-[[(2S)-2-(氨基羰  181b    574    573.6901基)-1-吡咯烷基]羰基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[[(1S)-1-(氨基   182a    645    644.5961羰基)-2-甲基丙基]氨基]羰基]-7，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-1-[[[(3S)-3-[[[(1S)-1-(氨基   182b    645    644.5961羰基)-2-甲基丙基]氨基]羰基]-7，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[[(1S)-1-(氨基   183a    604    603.7595羰基)-2-甲基丙基]氨基]羰基]-2，3，4，9-四氢-5，8-二甲基-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-1-[[[(3S)-3-[[[(1S)-1-(氨基   183b    604    603.7595羰基)-2-甲基丙基]氨基]羰基]-2，3，4，9-四氢-5，8-二甲基-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[[(1S)-1-(氨基   184a    645    644.5961羰基)-2-甲基丙基]氨基]羰基]-6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-1-[[[(3S)-3-[[[(1S)-1-(氨基   184b    645    644.5961羰基)-2-甲基丙基]氨基]羰基]-6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[[(1S)-1-(氨基  185a    655    654.602羰基)-2-甲基丙基]氨基]羰基]-6-溴-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-1-[[[(3S)-3-[[[(1S)-1-(氨基  185b    655    654.602羰基)-2-甲基丙基]氨基]羰基]-6-溴-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙     186a    511    511.0189基]-3-[[(4-氯苯基)乙酰基]氨基]-2，3，4，9-四氢-8-甲氧基-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙     186b    511    511.0189基]-3-[[(4-氯苯基)乙酰基]氨基]-2，3，4，9-四氢-8-甲氧基-1H-咔唑-3-甲酰胺

[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[[(1R)-2-氨基   187a    658    658.195-1-[(4-氯苯基)甲基]-2-氧代乙基]氨基]羰基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-1-[[[(3S)-3-[[[(1R)-2-氨基   187b    658    658.195-1-[(4-氯苯基)甲基]-2-氧代乙基]氨基]羰基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-1-[[[3-[[(3-氨基-3-氧代丙基) 188     548    547.6523氨基-J羰基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

(2S)-1-[[(3R)-3-[[(4-氯苯基)乙酰基]氨  189a    509    509.0031基]-2，3，4，9-四氢-8-甲氧基-1H-咔唑-3-基]羰基]-2-吡咯烷甲酰胺

(2S)-1-[[(3S)-3-[[(4-氯苯基)乙酰基]氨   189b    509    509.0031基]-2，3，4，9-四氢-8-甲氧基-1H-咔唑-3-基]羰基]-2-吡咯烷甲酰胺

[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[(2S)-2-(氨基羰  190a    628    627.7815基)八氢-1H-吲哚-1-基]羰基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-1-[[[(3S)-3-[[(2S)-2-(氨基羰  190b    628    627.7815基)八氢-1H-吲哚-1-基]羰基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[(2S，4R)-2-(氨  191a    590    589.6891基羰基)-4-羟基-1-吡咯烷基]羰基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-1-[[[(3S)-3-[[(2S，4R)-2-(氨  191b    590    589.6891基羰基)-4-羟基-1-吡咯烷基]羰基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)]-1-[[[(3R)-3-[[[(1S，2R)      291a    578    557.6781-1-(氨基羰基)-2-羟基丙基]氨基]羧基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)]-1-[[[(3S)-3-[[[(1S，2R)-1-(  291b    578    577.6781氨基羰基)-2-羟基丙基]氨基]羰基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲苯基甲酯

[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[(2-氨基-2-氧代  292    534    533.6255乙基)氨基]羰基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-1-[[[3-[[[2-氨基羰基)苯基]氨  192    596    595.6963基]羰基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙      193a   616    616.119基]-3-[[[4-氯-3-[[(4-吡啶基氨基)羰基]氨基]苯基]乙酰基]氨基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙      193b   616    616.119基]-3-[[[4-氯-3-[[(4-吡啶基氨基)羰基]氨基]苯基]乙酰基]氨基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙      194a   615    615.13基]-3-[[[4-氯-3-[[(苯基氨基)羰基]氨基]苯基]乙酰基]氨基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙      194b   615    615.13基]-3-[[[4-氯-3-[[(苯基氨基)羰基]氨基]苯基]乙酰基]氨基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙      195a   629    629.157基]-3-[[[4-氯-3-[[[(苯基甲基)氨基]羰基]氨基]苯基]乙酰基]氨基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙      195b   629    629.157基]-3-[[[4-氯-3-[[[(苯基甲基)氨基]羰基]氨基]-苯基]乙酰基]氨基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙     196a    616    616.119基]-3-[[[4-氯-3-[[(2-吡啶基氨基)羰基]氨基]-苯基]乙酰基]氨基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙     196b    616    616.119基]-3-[[[4-氯-3-[[(2-吡啶基氨基)羰基]氨基]苯基]乙酰基]氨基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

实施例24：

以0.2mmol的规模通过方法A、F、G、I、F、H和O进行合成。

(3R)-3-(乙酰基氨基)-N-[(1S)-1-(氨基羰  197a    400   400.4762基)-2-甲基丙基]-2，3，4，9-四氢-8-甲氧基-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-3-(乙酰基氨基)-N-[(1S)-1-(氨基羰  197b    400   400.4762基)-2-甲基丙基]-2，3，4，9-四氢-8-甲氧基-1H-咔唑-3-甲酰胺

3-(乙酰基氨基)-N-[(1S)-1-(氨基羰       198     405   404.8955基)-2-甲基丙基]-6-氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

3-(乙酰基氨基)-N-[(1S)-1-(氨基羰       199     769   768.9544基)-2-甲基丙基]-2，3，4，9-四氢-5-甲基-1H-咔唑-3-甲酰胺

3-(乙酰基氨基)-N-[(1S)-1-(氨基羰       200     769   768.9544基)-2-甲基丙基]-2，3，4，9-四氢-8-甲基-1H-咔唑-3-甲酰胺

3-(乙酰基氨基)-N-[(1S)-1-(氨基羰        201     810    809.7911基)-2-甲基丙基]-5-氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

3-(乙酰基氨基)-N-[(1S)-1-(氨基羰        202     810    809.7911基)-2-甲基丙基]-7-氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-3-(乙酰基氨基)-N-[(1S)-1-(氨基羰   203a    388    388.4405基)-2-甲基丙基]-6-氟-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-3-(乙酰基氨基)-N-[(1S)-1-(氨基羰   203b    388    388.4405基)-2-甲基丙基]-6-氟-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-3-(乙酰基氨基)-N-[(1S)-1-(氨基羰   204a    400    400.4762基)-2-甲基丙基]-2，3，4，9-四氢-6-甲氧基-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-3-(乙酰基氨基)-N-[(1S)-1-(氨基羰   204b    400    400.4762基)-2-甲基丙基]-2，3，4，9-四氢-6-甲氧基-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-3-(乙酰基氨基)-N-[(1S)-1-(氨基羰   205a    384    384.4772基)-2-甲基丙基]-2，3，4，9-四氢-6-甲基-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-3-(乙酰基氨基)-N-[(1S)-1-(氨基羰   205b    384    384.4772基)-2-甲基丙基]-2，3，4，9-四氢-6-甲基-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-3-(乙酰基氨基)-N-[(1S)-1-(氨基羰   206a    370    370.4504基)-2-甲基丙基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-3-(乙酰基氨基)-N-[(1S)-1-(氨基羰   206b    370    370.4504基)-2-甲基丙基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-3-(乙酰基氨基)-N-[(1S)-1-(氨基羰  207a    439    439.3406基)-2-甲基丙基]-7，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-3-(乙酰基氨基)-N-[(1S)-1-(氨基羰  207b    439    439.3406基)-2-甲基丙基]-7，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-3-(乙酰基氨基)-N-[(1S)-1-(氨基羰  208a    399    398.504基)-2-甲基丙基]-2，3，4，9-四氢-5，8-二甲基-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-3-(乙酰基氨基)-N-[(1S)-1-(氨基羰  208b    399    398.504基)-2-甲基丙基]-2，3，4，9-四氢-5，8-二甲基-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-3-(乙酰基氨基)-N-[(1S)-1-(氨基羰  209a    439    439.3406基)-2-甲基丙基]-6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-3-(乙酰基氨基)-N-[(1S)-1-(氨基羰  209a    439    439.3406基)-2-甲基丙基]-6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

实施例25：

以0.2mmol的规模通过方法A、F、G、I、F、G、F和O进行合成。

(3R)-3-[[(2S)-2-氨基-5-[(氨基亚氨基甲  210a    485    484.6014基)氨基]-1-氧代戊基]氨基]-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-3-[[(2S)-2-氨基-5-[(氨基亚氨基甲  210b    485    484.6014基)氨基]-1-氧代戊基]氨基]-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙  211a    497    496.652基]-2，3，4，9-四氢-3-[[[2-(1-哌啶基)乙基]氨基]乙酰基]氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙  211b    497    496.652基]-2，3，4，9-四氢-3-[[[2-(1-哌啶基)乙基]氨基]乙酰基]氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙  212a    529    528.6534基]-2，3，4，9-四氢-3-[[[2-(1H-吲哚-3-基)乙基]氨基]乙酰基]氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙  212b    529    528.6534基]-2，3，4，9-四氢-3-[[[2-(1H-吲哚-3-基)乙基]氨基]乙酰基]氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙  213a    520    519.5987基]-3-[[[(1，3-苯并间二氧杂环戊烯-5-基甲基)氨基]乙酰基]氨基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙  213b    520    519.5987基]-3-[[[(1，3-苯并间二氧杂环戊烯-5-基甲基)氨基]乙酰基]氨基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙  214a    566    565.7141基]-3-[[[(2，2-二苯基乙基)氨基]乙酰基]氨基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙  214b    566    565.7141基]-3-[[[(2，2-二苯基乙基)氨基]乙酰基]氨基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙      215a    533    532.685基]-2，3，4，9-四氢-3-[[[2-[甲基(苯基甲基)氨基]乙基]乙酰基]氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙      215b    533    532.685基]-2，3，4，9-四氢-3-[[[2-[甲基(苯基甲基)氨基]乙基]乙酰基]氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

实施例26：

以0.2mmol的规模通过方法A、F、G、I、F、G、F、H和O进行合成。

3-[[[乙酰基[2-(1-哌啶基)乙基]氨基]乙酰  216     539    538.6888基]氨基]-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-3-[[[乙酰基[2-[甲基(苯基甲基)氨基] 217a    575    574.7217乙基]氨基]乙酰基]氨基]-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-3-[[[乙酰基[2-[甲基(苯基甲基)氨基] 217b    575    574.7217乙基]氨基]乙酰基]氨基]-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-3-[[[乙酰基(2，2-二苯基乙基)氨基]乙218a    608    607.7509酰基]氨基]-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-3-[[[乙酰基(2，2-二苯基乙基)氨基]乙218b    608    607.7509酰基]氨基]-N-[(1S)-I-(氨基羰基)-2-甲基丙基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-3-[[[乙酰基(1，3-苯并间二氧杂环戊烯  219a    562    561.6355-5-基甲基)氨基]乙酰基]氨基]-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-3-[[[乙酰基(1，3-苯并二噁茂-5-基甲   219b    562    561.6355基)氨基]乙酰基]氨基]-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-3-[[[乙酰基[2-(1H-吲哚-3-基)乙基]    220a    571    570.6902氨基]乙酰基]氨基]-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-3-[[[乙酰基[2-(1H-吲哚-3-基)乙基]    220b    571    570.6902氨基-1乙酰基]氨基]-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

3-[[(2S)-2-(乙酰基氨基)-5-[(氨基亚氨基    221     527    526.6382甲基)氨基]-1-氧代戊基]氨基]-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

实施例27：以0.2mmol的规模通过方法C、F、G、I、F、G和P进行合成。

[(1S，2S)-2-甲基-1-[[[(3R)-2，3，4，9-四  222a    589    589.7327氢-3-[[[(1S)-2-甲基-1-[(甲基氨基)羰基]丙基]氨基]羰基]-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-2-甲基-1-[[[(3S)-2，3，4，9-四  222b    589    589.7327氢-3-[[[(1S)-2-甲基-1-[(甲基氨基)羰基]丙基]氨基]羰基]-1H-咔唑-3-基]羰基]丁基]氨基甲酸苯基甲酯

实施例28：

以0.2mmol的规模通过方法A、F、G、I、F、J和O进行合成。

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙        223a    503    503.0203基]-3-[[(4-氯苯基)磺酰基]氨基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙        223b    503    503.0203基]-3-[[(4-氯苯基)磺酰基]氨基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙        224a    407    406.5044基]-2，3，4，9-四氢-3-[(甲基磺酰基)氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙        224b    407    406.5044基]-2，3，4，9-四氢-3-[(甲基磺酰基)氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙        225a    469    468.5752基]-2，3，4，9-四氢-3-(苯基磺酰基)氨基]-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙        225b    469    468.5752基]-2，3，4，9-四氢-3-[(苯基磺酰基)氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙        226a    483    482.602基]-2，3，4，9-四氢-3-[[(苯基甲基)磺酰基]氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙     226b     483     482.602基]-2，3，4，9-四氢-3-[[(苯基甲基)磺酰基]氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

实施例29：

以0.2mmol的规模通过方法A、F、G、I、F、L和O进行合成。

[(3R)-3-[[[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙  227a     491     490.6006基]氨基]羰基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基甲酸3-苯基丙酯

[(3S)-3-[[[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙  227b     491     490.6006基]氨基]羰基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基甲酸3-苯基丙酯

[(3R)-3-[[[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙  228a     463     462.547基]氨基]羰基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基甲酸苯基甲酯

[(3S)-3-[[[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙  228b     463     462.547基]氨基]羰基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基甲酸苯基甲酯

[(3R)-3-[[[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙  229a     449     448.5202基]氨基]羰基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基甲酸苯酯

[(3S)-3-[[[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙  229b     449     448.5202基]氨基]羰基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基甲酸苯酯

实施例30：

以0.2mmol的规模通过方法A、F、G、I、F、M和O进行合成。

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙   230a    464    463.5351基]-2，3，4，9-四氢-3-[[(4-硝基苯基)甲基]氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙   230b    464    463.5351基]-2，3，4，9-四氢-3-[[(4-硝基苯基)甲基]氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙   231a    356    356.4672基]-3-(乙基氨基)-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙   231b    356    356.4672基]-3-(乙基氨基)-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙   232a    433    432.5648基]-2，3，4，9-四氢-3-[(2-苯基乙基)氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙   232b    433    432.5648基]-2，3，4，9-四氢-3-[(2-苯基乙基)氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙  233a     447    446.5916基]-2，3，4，9-四氢-3-[(3-苯基丙基)氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙  233b     447    446.5916基]-2，3，4，9-四氢-3-[(3-苯基丙基)氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙  233c     565    564.7696基]-3-[双(3-苯基丙基)氨基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙  234a     489    488.672基]-2，3，4，9-四氢-3-[(6-苯基己基)氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙  234b    489    488.672基]-2，3，4，9-四氢-3-[(6-苯基己基)氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙  235a    370    370.494基]-2，3，4，9-四氢-3-[(1-甲基乙基)氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙  235b    370    370.494基]-2，3，4，9-四氢-3-[(1-甲基乙基)氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙  236a    385    384.5208基]-2，3，4，9-四氢-3-[(1-甲基丙基)氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙  236b    385    384.5208基]-2，3，4，9-四氢-3-[(1-甲基丙基)氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙   237a    399    398.5476基]-2，3，4，9-四氢-3-[(3-甲基丁基)氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙  237b    399    398.5476基]-2，3，4，9-四氢-3-[(3-甲基丁基)氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙  238a    342    342.4404基]-2，3，4，9-四氢-3-(甲基氨基)-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙  238b    342    342.4404基]-2，3，4，9-四氢-3-(甲基氨基)-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙   238c    356    356.4672基]-3-(二甲基氨基)-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙   238d    356    356.4672基]-3-(二甲基氨基)-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

实施例.31：

以0.2mmol的规模通过方法A、F、G、I、F、K和O.

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙   239a    385    385.4653基]-2，3，4，9-四氢-3-[[(甲基氨基)羰基]氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙   239b    385    385.4653基]-2，3，4，9-四氢-3-[[(甲基氨基)羰基]氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙   240a    448    447.5361基]-2，3，4，9-四氢-3-[[(苯基氨基)羰基]氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙   240b    448    447.5361基]-2，3，4，9-四氢-3-[[(苯基氨基)羰基]氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙   241a    462    461.5629基]-2，3，4，9-四氢-3-[[[(苯基甲基)氨基]羰基]氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙   241b    462    461.5629基]-2，3，4，9-四氢-3-[[[(苯基甲基)氨基]羰基]氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙  242a  476  475.5897基]-2，3，4，9-四氢-3-[[[(2-苯基乙基)氨基]羰基]氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙  242b  476  475.5897基]-2，3，4，9-四氢-3-[[[(2-苯基乙基)氨基]羰基]氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙  243a  454  453.5835基]-3-[[(环己基氨基)羰基]氨基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙  243b  454  453.5835基]-3-[[(环己基氨基)羰基]氨基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙  244a  414  413.5189基]-2，3，4，9-四氢-3-[[[(1-甲基乙基)氨基]羰基]氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙  244b  414  413.5189基]-2，3，4，9-四氢-3-[[[(1-甲基乙基)氨基]羰基]氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙  245a  428  427.5457基]-2，3，4，9-四氢-3-[[[(1-甲基丙基)氨基]羰基]氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙  245b  428  427.5457基]-2，3，4，9-四氢-3-[[[(1-甲基丙基)氨基]羰基]氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙  246a  476  475.5897基]-2，3，4，9-四氢-3-[[[(1R)-1-苯基乙基)氨基]羰基]氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙  246b  476  475.5897基]-2，3，4，9-四氢-3-[[[(1R)-1-苯基乙基)氨基]羰基]氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙  247a    482    481.9812基]-3-[[[(4-氯苯基)氨基]羰基]氨基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙  247b    482    481.9812基]-3-[[[(4-氯苯基)氨基]羰基]氨基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙  248a    476    475.5897基]-2，3，4，9-四氢-3-[[[[(1S)-1-苯基乙基]氨基]羰基]氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙  248b    476    475.5897基]-2，3，4，9-四氢-3-[[[[(1S)-1-苯基乙基]氨基]羰基]氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺

实施例32：

以0.2mmol的规模通过方法A、F、G、I、F、G、N和O进行合成。

(3R)-3-[[[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙249a    567    567.0825基]氨基]羰基]-3-[[(4-氯苯基)乙酰基]氨基]-1，2，3，4-四氢-9H-咔唑-9-乙酸乙酯

(3S)-3-[[[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙249b    567    567.0825基]氨基]羰基]-3-[[(4-氯苯基)乙酰基]氨基]-1，2，3，4-四氢-9H-咔唑-9-乙酸乙酯

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙  250a    599    599.1711基]-3-[[(4-氯苯基)乙酰基]氨基-2，3，4，9-四氢-9-(3-苯基丙基)-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙  250b    599    599.1711基]-3-[[(4-氯苯基)乙酰基]氨基]-2，3，4，9-四氢-9-(3-苯基丙基)-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-3-[[[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙    251a    539    539.0289基]氨基]羰基]-3-[[(4-氯苯基)乙酰基]氨基]-1，2，3，4-四氢-9H-咔唑-9-乙酸

(3S)-3-[[[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙    251b    539    539.0289基]氨基]羰基]-3-[[(4-氯苯基)乙酰基]氨基-1，2，3，4-四氢-9H-咔唑-9-乙酸

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙      252a    551    551.1271基]-3-[[(4-氯苯基)乙酰基]氨基]-2，3，4，9-四氢-9-(3-甲基丁基)-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙      252b    551    551.1271基]-3-[[(4-氯苯基)乙酰基]氨基]-2，3，4，9-四氢-9-(3-甲基丁基)-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙      253a    572    572.1056基]-3-[[(4-氯苯基)乙酰基]氨基]-2，3，4，9-四氢-9-(4-吡啶基甲基)-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙      253b    572    572.1056基]-3-[[(4-氯苯基)乙酰基]氨基]-2，3，4，9-四氢-9-(4-吡啶基甲基)-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙      254a    572    572.1056基]-3-[[(4-氯苯基)乙酰基]氨基]-2，3，4，9-四氢-9-(3-吡啶基甲基)-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙   254b    572    572.1056基]-3-[[(4-氯苯基)乙酰基]氨基]-2，3，4，9-四氢-9-(3-吡啶基甲基)-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙   255a    621    621.1773基]-3-[[(4-氯苯基)乙酰基]氨基]-2，3，4，9-四氢-9-(2-萘基甲基)-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙   255b    621    621.1773基]-3-[[(4-氯苯基)乙酰基]氨基]-2，3，4，9-四氢-9-(2-萘基甲基)-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙   256a    537    537.1003基]-3-[[(4-氯苯基)乙酰基]氨基]-2，3，4，9-四氢-9-(2-甲基丙基)-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙   256b    537    537.1003基]-3-[[(4-氯苯基)乙酰基]氨基]-2，3，4，9-四氢-9-(2-甲基丙基)-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙   257a    585    585.1443基]-3-[[(4-氯苯基)乙酰基]氨基]-2，3，4，9-四氢-9-(2-苯基乙基)-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙   257b    585    585.1443基]-3-[[(4-氯苯基)乙酰基]氨基]-2，3，4，9-四氢-9-(2-苯基乙基)-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙   258a    509    509.0467基]-3-[[(4-氯苯基)乙酰基]氨基]-9-乙基-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-N-[(1s)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙     258b    509    509.0467基]-3-[[(4-氯苯基)乙酰基]氨基]-9-乙基-2，3，4？9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙     259a    577    577.1649基]-3-[[(4-氯苯基)乙酰基]氨基]-9-(环己基甲基)-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙     259b    577    577.1649基]-3-[[(4-氯苯基)乙酰基]氨基]-9-(环己基甲基)-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙     260a    607    607.0977基]-3-[[(4-氯苯基)乙酰基]氨基]-9-[(2，6-二氟苯基)甲基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙     260b    607    607.0977基]-3-[[(4-氯苯基)乙酰基]氨基]-9-[(2，6-二氟苯基)甲基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

实施例33：

以0.2mmol的规模通过方法A、F、G、I、F、H、N和O进行合成。

(3R)-3-(乙酰基氨基)-N-[(1S)-1-(氨基羰  261a    489    488.6284基)-2-甲基丙基]-2，3，4，9-四氢-9-(3-苯基丙基)-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-3-(乙酰基氨基)-N-[(1S)-1-(氨基羰   261b    489    488.6284基)-2-甲基丙基]-2，3，4，9-四氢-9-(3-苯基丙基)-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-3-(乙酰基氨基)-N-[(1S)-1-(氨基羰   262a    441    440.5844基)-2-甲基丙基]-2，3，4，9-四氢-9-(3-甲基丁基)-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-3-(乙酰基氨基)-N-[(1S)-1-(氨基羰   262b    441    440.5844基)-2-甲基丙基3-2，3，4，9-四氢-9-(3-甲基丁基)-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-3-(乙酰基氨基)-N-[(1S)-1-(氨基羰   263a    511    510.6346基)-2-甲基丙基]-2，3，4，9-四氢-9-(2-萘基甲基)-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-3-(乙酰基氨基)-N-[(1S)-1-(氨基羰   263b    511    510.6346基)-2-甲基丙基]-2，3，4，9-四氢-9-(2-萘基甲基)-1H-咔唑-3-甲酰胺

3-(乙酰基氨基)-N-[(1S)-1-(氨基羰        264     511    510.6346基)-2-甲基丙基]-2，3，4，9-四氢-9-(1-萘基甲基)-1H-咔唑-3-甲酰胺

3-(乙酰基氨基)-N-[(1S)-I-(氨基羰        265     467    466.6222基)-2-甲基丙基]-9-(环己基甲基)-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3R)-3-(乙酰基氨基)-N-[(1S)-1-(氨基羰   266a    427    426.5576基)-2-甲基丙基]-2，3，4，9-四氢-9-(2-甲基丙基)-1H-咔唑-3-甲酰胺

(3S)-3-(乙酰基氨基)-N-[(1S)-1-(氨基羰   266b    427    426.5576基)-2-甲基丙基]-2，3，4，9-四氢-9-(2-甲基丙基)-1H-咔唑-3-甲酰胺

实施例34：

[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[[(1S)-1-(羟基  267a  563    562.7068甲基)-2-甲基丙基]氨基]羰基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-1-[[[(3S)-3-[[[(1S)-1-(羟基  267b  563    562.7068甲基)-2-甲基丙基]氨基]羰基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

实施例35：

2，3，4，9-四氢-3-(3-苯基丙基)-1H-咔唑-3-羧酸乙酯268

将10mmol(1.6ml)4-氧代环己烷羧酸乙酯、25mmol(1.4ml)乙二醇和10μmol pTsOH在无水甲苯中用脱水器(water trap)回流24小时。除去溶剂并将剩余物溶于乙酸乙酯/水中。有机相用水洗涤，干燥并蒸发至干。产物在Kugelrohr设备中于高真空、120℃和0.03mbar下蒸馏。

产率：1.52g的1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-甲酸4-乙酯269。

氩气下向-20℃的0.6mmol的1.6摩尔丁基锂庚烷溶液中滴加500μl无水THF中的85μl二异丙基胺，然后搅拌10分钟。冷却至-70℃之后，滴加0.5mmol(107mg)于200μl无水THF中的269，在1小时内使其达到0℃并再搅拌30分钟。冷却至-70℃之后，加入300μl无水THF中的0.7mmol(106μl)1-溴-3-苯基丙烷，并将该混合物搅拌30分钟。使其达到室温，然后搅拌1小时。向该有机相中小心地加入饱和NH₄Cl溶液和正己烷，将其搅拌10分钟。将有机相分离并用水洗涤。经Whatman过滤器过滤，接着蒸发至干。

产率：165mg的8-(3-苯基丙基)-1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-甲酸乙酯270。

将0.6mmol(200mg)的270溶于25ml丙酮/0.1M HCl 1∶1中并与催化量的pTsOH于50℃下搅拌48小时。在旋转蒸发器中汽提掉丙酮，并将沉淀产物过滤出，用水洗涤并干燥。

产率：156mg的4-氧代-8-(3-苯基丙基)环己烷羧酸乙酯271。

使用苯肼如实施例1中所述进行吲哚化(indolization)。

蒸发和制备型HPLC之后的产率：65mg的2，3，4，9-四氢-3-(3-苯基丙基)-1H-咔唑-3-甲酸乙酯268。

ES-MS：362(M+H⁺)

使用2，4-二氯苯肼类似地制备80mg的6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-3-(3-苯基丙基)-1H-咔唑-3-甲酸乙酯272。

ES-MS：430(M+H⁺)

实施例36：

2，3，4，9-四氢-3-(3-苯基丙基)-1H-咔唑-3-甲酸273

将3.94mmol(1.31g)的269在50ml甲醇和30ml的50％氢氧化钠溶液中于60℃下搅拌4小时。用稀HCl将该混合物酸化并用乙醚萃取。用Na₂SO₄干燥并蒸发，得到1.02g(85％)的白色固体8-(3-苯基丙基)-1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-甲酸274。

将65mg的274首先用HCl去保护，然后如270和271所述与苯肼反应用于吲哚化。

蒸发和制备型HPLC之后的产率：15mg的273。

ES-MS：334(M+H⁺)

使用2，4-二氯苯肼类似地制备39mg 6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-3-(3-苯基丙基)-1H-咔唑-3-甲酸275。

ES-MS：478(M+H⁺)

实施例37：

2，3，4，9-四氢-N-[(1S)-1-(羟基甲基)-2-甲基丙基]-3-(3-苯基丙基)-1H-咔唑-3-甲酰胺276

以与实施例6类似的方式将0.66mmol(200mg)的274与1.5当量的缬氨醇反应。获得277mg白色固体N-[(1S)-1-(羟基甲基)-2-甲基丙基]-8-(3-苯基丙基)-1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-甲酰胺277。

然后如270和271所述首先将0.3mmol(117mg)的277用HCl去保护，接着与苯肼反应进行吲哚化。

蒸发和制备型HPLC之后的产率：15mg的276。

ES-MS：418(M+H⁺)

用2，4-二氯苯肼类似地制备25mg 6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-N-[(1S)-1-(羟基甲基)-2-甲基丙基]-3-(3-苯基丙基)-1H-咔唑-3-甲酰胺278。

ES-MS：486(M+H⁺)

实施例38：

2，3，4，9-四氢-3-(3-苯基丙基)-N-(2-吡啶基甲基)-1H-咔唑-3-甲胺279

氩气、室温下向250ml无水THF中的18mmol(6g)270溶液中小心地加入54ml的1M无水THF中的LiAlH₄溶液。加热回流3小时之后，用300ml饱和NH₄Cl溶液小心进行水解，并加入250ml乙醚。过滤掉铝盐并用乙醚洗涤。用Na₂SO₄干燥醚相并将溶剂蒸发，得到3.4g的8-(3-苯基丙基)-1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-甲醇280。

将5.86mmol(1.7g)的280溶解在60ml的无水DCM和20ml的无水DMSO中。在氮气、室温下，首先加入44mmol(6.1ml)TEA，然后小心地加入17.6mmol(2.8g)SO₃-吡啶络合物，并将该混合物搅拌1小时。接着加入200ml的饱和NH₄Cl溶液并用150ml乙醚萃取。用Na₂SO₄将醚相干燥并将溶剂蒸发，得到1.9g的8-(3-苯基丙基)-1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-甲酸281，其为无色油。

向2.5ml1，2-二氯乙烷中的0.359mmol(103mg)281和0.359mmol(37ml)2-吡啶甲胺混合物中加入0.719mmol三乙酰氧基硼氢化钠。在N₂、室温下将该混合物搅拌3小时。加入饱和NaHCO₃溶液，并用乙醚萃取该混合物。该干燥且蒸发过的醚萃取物得到101mg(76％)的白色固体N-[8-(3-苯基丙基)-1，4-二氧杂螺[4.5]癸-8-基]-2-吡啶甲胺282。

接着，如270和271所述，将101mg的282首先用HCl去饱和，然后与苯肼反应进行吲哚化。

蒸发和制备型HPLC之后的产率：71mg的279。

ES-MS：410(M+H⁺)

用2，4-二氯苯肼类似地制备54mg 6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-3-(3-苯基丙基)-N-(2-吡啶基甲基)-1H-咔唑-3-甲胺283。

ES-MS：478(M+H⁺)

实施例39：

(2S)-3-甲基-2-[[[2，3，4，9-四氢-3-(3-苯基丙基)-1H-咔唑-3-基]甲基]氨基]-1-丁醇284

将0.368mmol(106mg)的281和0.368mmol(38mg)缬氨醇溶解在1.5ml的无水甲醇中并在室温下搅拌30分钟。冷却至0℃之后，加入0.557mmol(21mg)NaBH₄并在室温下搅拌1小时。加入0.437mmol(25μl)乙酸，并在pH6下连续搅拌2小时。加入饱和NaHCO₃溶液，并用乙醚萃取该混合物。用Na₂SO₄干燥有机相并蒸发，得到106mg(77％)无色油，用于270和271。

然后如270和271所述进行去保护和吲哚化。蒸发和制备型HPLC之后的产率：18mg的白色固体284。

ES-MS：405(M+H⁺)

用2，4-二氯苯肼类似地制备17mg的(2S)-2-[[[6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-3-(3-苯基丙基)-1H-咔唑-3-基]甲基]氨基]-3-甲基-1-丁醇286。

ES-MS：473(M+H⁺)

实施例40：

2，3，4，9-四氢-3-(3-苯基丙基)-O-(4-吡啶基甲基)-1H-咔唑-3-甲醇287

在0℃、氮气下向10ml无水DMF中的0.344mmol(100mg)的280溶液中加入0.689mmol NaH(以矿物油中的55％悬浮液)。使该混合物达到室温并搅拌30分钟。加入1.377mmol的4-(氯甲基)吡啶，并在95-100℃下将该混合物搅拌过夜。冷却至室温，接着用2ml水水解，用乙醚萃取。将溶剂干燥并蒸发之后，得到115mg黄色油288。

然后如270和271所述进行去保护和吲哚化。蒸发和制备型HPLC之后的产率：14mg的白色固体287。

ES-MS：411(M+H⁺)

实施例41：

3-[2，3，4，9-四氢-3-(3-苯基丙基)-1H-咔唑-3-基]-2-丙酸乙酯289

向0.378mmol(三苯基亚正膦基)乙酸乙酯的1ml无水THF溶液中滴加0.347mmol 281的0.5ml THF溶液，同时在冰中冷却。加入结束之后，使该混合物加热至室温并再搅拌2天。然后用水水解并用乙醚萃取。用Na₂SO₄干燥，过滤掉phosphane oxide和干燥剂，并除去溶剂。产率80％，3-[8-(3-苯基丙基)-1，4-二氧杂螺[4.5]癸-8-基]-2-丙酸乙酯290。

然后如270和271所述进行去保护和吲哚化。

蒸发和制备型HPLC之后的产率：9mg的白色固体289。

ES-MS：388(M+H⁺)

此外，以0.2mmol的规模通过方法A、F、G、F、G和O获得本发明化合物293-300、302和304-306(它们包括在通式(I)的范围内)，通过方法B、F、G、F、G和0获得化合物301，通过方法A、F、G、F、G、F、L和O获得化合物303。

化合物名称                               编号    M_实测    M_计算

[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[[(1S)-1-(氨基-羰   293     612      611.6861基)-2-甲基丙基]氨基]羰基]-6，8-二氟-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[[(1S，2S)-1-(氨基  294     620      619.7585羰基)-2-甲基丁基]氨基]羰基]-8-甲氧基-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[[(1S，2S)-1-(氨基    295    659    658.6229羰基)-2-甲基丁基]氨基]羰基]-6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[[(1S)-1-(氨基羰      296    659    658.6229基)-3-甲基丁基]氨基]羰基]-6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[[(1S)-1-(氨基羰      297    699    698.6875基)-2-环己基乙基]氨基]羰基]-6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[[(1S)-1-(氨基羰      298    659    658.6229基)-2，2-二甲基丙基]氨基]羰基]-6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[[(1S)-1-(氨基羰      299    707    706.6669基)-3-苯基丙基]氨基]羰基]-6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[[(1S)-1-(氨基羰      300    685    684.6607基)-2-甲基丁基]氨基]羰基]-6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-环己基甲基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[[(1S，2S)-1-(羧基)   301    660    659.607-2-甲基丁基]氨基]羰基]-6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S)-1-[[[(3R)-3-[[[(1S，2S)-1-(氨基羰     302    709   708.6391基)-2-甲基丁基]氨基]羰基]-6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-(4-羟基苯基)乙基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S)-1-[[[(3R)-3-[[[(1S，2S)-1-(氨基羰     303    723   722.6659基)-2-甲基丁基]氨基]羰基]-6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基}-3-(4-羟基苯基)丙基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S)-1-[[[(3R)-3-[[[(1S，2S)-1-(氨基羰     304    707   706.6669基)-2-甲基丁基]氨基]羰基]-6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-3-苯基丙基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S)-1-[[[(3R)-3-[[[(1S，2S)-1-(氨基羰     305    659   658.6229基)-2-甲基丁基]氨基]羰基]-6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-3-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S)-1-[[[(3R)-3-[[[(1S)-1-氨基羰基)-3-    306    659   658.6229甲基丁基]氨基]羰基]-6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-3-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

III证实本发明化合物(I)的GnRH拮抗功效

材料：

布舍瑞林购自Welding(Frankfurt/Main，德国)。使用氯胺T法和Na¹²⁵I(4000 Ci/mmol；Amersham-Buchler，Braunschwcig，德国)将该化合物用¹²⁵I标记。标记的该物质通过逆相HPLC于Spherisorb ODSII-柱(250×4mm，粒径3μm)上经50％乙腈/0.15％三氟乙酸以0.5ml/min的流速洗脱纯化。特异性活性为2000Ci/mmol。

所有其它活性物质都是购自可获得的最高纯度的商业来源。

细胞培养：

αT3-1细胞(Bilezikjian等人，Mol.Endocrinol 5(1991)，347-355)于DMEM培养基(Gibco-BRL，Eggentstein-Leopoldshafen，德国)中用青霉素(100I.U./ml)、链霉素(0.1mg/ml)和谷氨酰胺(0.01mol/l)和10％胎牛血清(FCS；PAA Laboratories，Coelbe，德国)于塑料组织培养平皿(Nunc，245×245×20mm)中培养。将CHO-3-细胞(Schmid等人，J.Biol.Chem.275(2000)，9193-9200)于相同条件下培养，只是使用Ham′s F12培养基(Gibco-BRL)。

将10个融合细胞培养平皿用50ml磷酸盐缓冲盐水(PBS)洗涤2次。通过用橡胶淀帚刮入5ml PBS收集这些细胞，并在实验室离心机(Heraeus)中在800rpm下离心10分钟沉淀。将该细胞颗粒再次悬浮在5ml的0.25mol/l蔗糖/0.01mol/l三乙胺(pH7.4)中。这些细胞通过在干冰/乙醇浴中冷冻并在室温下熔融的3次循环溶解。溶解物在900rpm下离心10分钟，并将沉淀物弃去。上清液在18000rpm下于SorvallSS34转子中离心30分钟。在一Potter中将该颗粒(细胞膜)悬浮在5ml分析缓冲液(0.25mol/l蔗糖，0.01mol/l三乙胺，pH 7.5，1mg/ml卵清蛋白)，并以200μl等分试样贮存在-20℃下。通过Bradford法(Anal.Biochem.72(1976)，248-254)测定蛋白质。

受体试验：

以一式三份进行竞争图(competition plots)的结合研究。测定样品含义60μl细胞膜悬浮液(10μg αT 3-1-细胞的蛋白质或40μgCHO₃细胞的蛋白质)、20μl ¹²⁵I标记过的布舍瑞林(100000ipm/每个竞争图的样品和1500-200000ipm/饱和度试验)和20μl测定缓冲液或测定化合物溶液。将这些测定化合物溶解在蒸馏水或50％乙醇中。在测定缓冲液中进行系列稀释(5×10^-6mol/1-5×10¹²mol/l)。在有过量未标记的布舍瑞林(10^-6mol/l)的情况下测定其非特异性结合。将测定样品于室温下培养30分钟。使用Amicon 10x收集设备过滤将结合和游离的配体分离(Whatman GF/C过滤器2.5cm直径)，并用5ml的0.02mol/lTris/HCl，pH7.4洗涤2次。过滤器用0.3％聚乙烯亚胺(Serva，Heidelberg，德国)湿润30分钟，以便减少非特异性结合。在5-通道γ计数器(Wallac-LKB 1470 Wizard)中测定过滤器保留的放射性。

如上面定义的优选化合物获得的IC₅₀值示于下表。

化合物名称实施例编号hGnRH-受体IC₅₀[M]Ca²⁺释放人IC₅₀[M]N-[[(3R)-2，3，4，9-四氢-3-[(1-氧代-2，3-二苯基丙基)氨基]-1H-咔唑-3-基]羰基]-L-缬氨酰基-L-天冬氨酸酰胺18 0.0000009 0.000005(3S)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙基]-2，3，4，9-四氢-3-[(1H-吲哚-3-基乙酰基)氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺164b 0.000006 0.0000065(3S)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-乙基丙基]-2，3，4，9-四氢-3-[(2-萘基乙酰基)氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺161b 0.0000037 0.0000036 N-[[(3R)-2，3，4，9-四氢-3-[[(2S，3S)-3-乙基-1-氧代-2-[(1-氧代-3-苯基丙基)氨基]戊基]氨基]-1H-咔唑-3-基]羰基]-L-缬氨酰基-L-天冬氨酸酰胺22 0.000002 0.000001[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[[(1S，2S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丁基]氨基]羰64 0.0000017 0.0000015基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[[(1S)-1-[[[4-(氨基羰基)苯基]氨基]羰基]-2-甲基丙基]氨基]羰基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯45 0.0000003 0.000001[(1S，2S)-2-甲基-1-[[[(3R)-2，3，4，9-四氢-3-[[[(1S)-2-甲基-1-[(甲基氨基)羰基]丙基]氨基]羰基]-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]丁基]氨基甲酸苯基甲酯222a 0.0000025 0.000003[(1 S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙基]氨基]羰基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯58 0.0000003 0.00000037[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[(2S)-2-(氨基羰基)-1-吡咯烷基]羰基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯181a 0.0000007 0.000003[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[(2S)-2-(氨基羰基)八氢-1H-吲哚-1-基]羰基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯190a 0.000002 0.00000052，3，4，9-四氢-3-(3-苯基丙基)-N-(2-吡啶基甲基)-1H-咔唑-3-甲胺279 0.000002 0.000003(2S)-3-甲基-2-[[[2，3，4，9-四氢-3-(3-苯基丙基)-1H-咔唑-3-基]甲基]氨基]-1-丁醇284 0.000007 0.000007 N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙基]-2，3，4，9-四氢-3-[[(4-甲氧基苯基)乙酰基]氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺175 0.000008 0.0000018(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙基]-3-[[(3-溴苯基)乙酰基]氨基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺96 0.000004 0.000003(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙基]-3-[[(4-氟苯基)乙酰基]氨基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺91 0.0000024 0.000002(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙基]-3-[[(4-氯苯基)乙酰基]氨基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-甲酰胺167a 0.000001 0.0000026(3R)-N-[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙基]-2，3，4，9-四氢-3-[(6-苯基己基)氨基]-1H-咔唑-3-甲酰胺234a 0.000009 0.000001[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙基]氨基]羰基]-2，3，4，9-四氢-8-甲基-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯150a 0.00000011 0.00000028[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[[(1S)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙基]氨基]羰基]-6-氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯148a 0.00000008 0.00000014[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[[(1S)-1-(147a 0.000000076 0.00000025氨基羰基)-2-甲基丙基]氨基]羰基]-2，3，4，9-四氢-8-甲氧基-1H-咔唑-3-基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[[(1S)-1-氨基羰基)-2-甲基丙基]氨基]羰基]-6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基)-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯184a 0.000000015 0.000000045[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[[(1S)-1-(羟基甲基)-2-甲基丙基]氨基]羰基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯267a 0.0000004 0.0000005(2S)-1-[[(3R)-3-[[(4-氯苯基)乙酰基]氨基]-2，3，4，9-四氢-8-甲氧基-1H-咔唑-3-基]羰基]-2-吡咯烷甲酰胺189a 0.0000007 0.00000056，8-二氯-2，3，4，9-四氢-3-(3-苯基丙基)-N-(2-吡啶基甲基)-1H-咔唑-3-甲胺283 0.000001 0.000003

编号293-306的化合物是通过下面所述的方法测定的。

受体结合试验

材料：

¹²⁵I-曲普瑞林[¹²⁵I-(D)-Trp6-GnRH]购自Biotrend(Cologne，德国)。其特异性活性在每一情况下是2.13Ci/mmol。所有其它化学品购自可以获得的最高纯度的商业来源。

细胞培养：

将转染的LTK细胞(ATCC No.CCL-1.3)于DMEM培养基(InvitrogenLife Technologies，德国)中用青霉素(100I.U./ml)、链霉素(0.1mg/ml)和谷氨酰胺(0.01mol/l)和10％胎牛血清(FCS；Invitrogen LifeTechnologies，德国)在塑料组织培养平皿(Nunc，德国，245×245×20mm)上培养。

实验：

将80％融合细胞培养皿用50ml磷酸盐缓冲盐水(PBS)洗涤2次，然后用0.01M EDTA溶液脱附。将这些细胞在实验室离心机(Kendro，德国)中于200xg下离心5分钟来造粒。将这些细胞小丸再次悬浮于3ml结合培养基(DMEM；10mM Hepes；0.5％BSA；0.1％NaN₃；1g/l杆菌肽(加入新鲜的，储备液100x)；0.1g/1 SBTI(加入新鲜的，储备液1000x)，并通过在Neubauer计数室中台盼蓝染色测定该细胞数。用结合培养基将该细胞悬浮液调整至浓度5×10⁵个细胞/0.05ml。

以一式两份进行竞争图的结合研究。将这些测定物质以10mM DMSO溶液使用。将它们稀释至与结合培养基一起使用的最终浓度的4倍。将25μl该物质稀释液与25μl示踪剂溶液(¹²⁵I-曲普瑞林)混合。将该示踪剂浓度调整至约50000cpm(在Cobra II，γ计数器中测定，PE LiefeScience，德国)，最终反应体积是100μl。

在650μl圆锥性管(Roth，德国)中加入200μl的硅氧烷/液体石蜡混合物(84％∶16％)。将50μl细胞悬浮液吸移其上，接着吸移50μl测定物质/示踪剂混合物。将这些管盖上盖，并在垂直旋转下于一培养箱中在37℃下培养60分钟。培养之后，将这些样品在离心机(Kendro，德国)中于900rpm下离心，接着在液氮中震动冷冻。切去细胞小丸的顶部并将其转移到制备好的计数小瓶(Roth，德国)中。同样，将装有剩余上清液的圆锥性管中的剩余物转移到一计数小瓶中。在γ计数器中对每一样品测定1分钟。

在减去非特异性结合(过量未标记的配体，1μm)之后，与未处理的细胞相比计算特异性结合之后，通过GraphPad Prism(GraphPadSof tware，Inc.，USA)进行样品的评价。

功能性报道基因测定

材料：

所有活性物质购自可以获得的最高纯度的商业来源。

细胞培养：

稳定转染的LTK细胞(ATCC No.CCL-1.3)，它藏匿有GnRH受体并具有cAMP相应成分的异种表达，并且使用CMV最小促进剂驱动的虫荧光素酶报道基因进行功能调查。

将这些细胞于DMEM培养基(Invitrogen Life Technologies，德国)中用青霉素(100I.U./ml)、链霉素(0.1mg/ml)和谷氨酰胺(0.01mol/l)和10％胎牛血清(FCS；Invitrogen Life Technologies，德国)在塑料组织培养平皿(Nunc，德国，245×245×20mm)上培养。

实验：

将80％融合细胞培养皿用50ml磷酸盐缓冲盐水(PBS)洗涤2次，然后用胰蛋白酶EDTA溶液(Invitrogen Life Technologies，德国)脱离。将这些细胞在实验室离心机(Kendro，德国)中于200xg下离心5分钟来造粒。将这些细胞小丸再次悬浮于3ml有青霉素(100I.U./ml)、链霉素(0.1mg/ml)和谷氨酰胺(0.01mol/l)和10％胎牛血清(FCS；Invitrogen Life Technologies，德国)的测定培养基(InvitrogenLife Technologies，德国)中，并通过在Neubauer计数室中台盼蓝染色测定该细胞数。用测定培养基将该细胞悬液调整至浓度1×10⁴个细胞/100μl。将这些细胞放在白色96孔微量滴定平皿(Costar，德国)上并在一培养箱中培养18小时。

为了进行测定，将这些测定物质以10mM DMSO溶液稀释到测定培养基中，至最终所用浓度的6倍。将25μl该测定物质加入到100μl细胞中并在37℃、5％CO₂下培养60分钟。

然后加入曲普瑞林(D-Trp6-GnRH)/咯利普兰溶液(6nM/6μM)，接着在37℃、5％CO₂下培养6小时。

培养之后，加入50μl溶解/检测缓冲液(LucLite，PE Life Science)并在一Lumistar光度计(BMG Labtechnologies GmbH，德国)中测定。

在减去未刺激的对照之后，与未处理的刺激细胞相比计算抑制之后，通过GraphPad Prism(GraphPad Software，Inc.，USA)或者通过OMMM(Accelrys，德国)软件进行样品的评价。

化合物293-306所得的EC₅₀值示于下表。

化合物名称                        实施例     功能性人        人结合的曲普

                                  号         EC₅₀[M]        瑞林EC₅₀[M]

[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[[(1S)-1  293       0.000000762     0.000000332-(氨基羰基)-2-甲基丙基]氨基]羰基]-6，8-二氟-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[[(1S，2S 294       0.000000089     0.000000036)-1-(氨基羰基)-2-甲基丁基]氨基]羰基]-8-甲氧基-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[[(1S，2S 295       0.000000007     0.000000018)-1-(氨基羰基)-2-甲基丁基]氨基]羰基]-6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[[(1S)-1       296    0.000000014    0.000000022-(氨基羰基)-3-甲基丁基]氨基]羰基]-6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[[(1S)-1       297    0.000000284    0.000000482-(氨基羰基)-2-环己基乙基]氨基]羰基]-6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[[(1S)-1       298                   0.000000288-(氨基羰基)-2，2-二甲基丙基]氨基]羰基]-6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基)氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[[(1S)-1       299    0.000001497    0.000001307-(氨基羰基)-3-苯基丙基]氨基]羰基]-6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[[(1S)-1       300    0.000000017    0.000000023-(氨基羰基)-2-甲基丁基]氨基]羰基]-6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-环己基甲基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S，2S)-1-[[[(3R)-3-[[[(1S，2S      301    0.000000176    0.000000538)-1-(羧基)-2-甲基丁基]氨基]羰基]-6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S)-1-[[[(3R)-3-[[[(1S，2S)-1   302    0.000000324   0.000000475-(氨基羰基)-2-甲基丁基]氨基]羰基]-6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-2-(4-羟基苯基)乙基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S)-1-[[[(3R)-3-[[[(1S，2S)-1   303                  0.000000021-(氨基羰基)-2-甲基丁基]氨基]羰基]-6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-3-(4-羟基苯基)丙基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S)-1-[[[(3R)-3-[[[(1S，2S)-1   304    0.000000018   0.000000038-(氨基羰基)-2-甲基丁基]氨基]羰基]-6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-3-苯基丙基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S)-1-[[[(3R)-3-[[[(1S，2S)-1   305                  0.000000056-(氨基羰基)-2-甲基丁基]氨基]羰基]-6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-3-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯

[(1S)-1-[[[(3R)-3-[[[(1S)-1-(     306                  0.000000077氨基羰基)-3-甲基丁基]氨基]羰基]-6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基]氨基]羰基]-3-甲基丁基]氨基甲酸苯基甲酯