蓝浆果的提取纯化方法及其产品

摘要

本发明涉及一种蓝浆果提取纯化方法及其产品，蓝浆果经酸化乙醇回流提取、除杂、浓缩、超滤、干燥后可得到粗提物；在超滤和干燥之间增加上柱工序可得到高纯度的蓝浆果花色甙，花色甙含量大于35％。本发明方法操作简单、成本低、生产安全，能够显著的提高提取物中总花色甙的纯度。用本发明方法所获得的产品具有营养价值和药理作用，并且生物活性好，它是保健食品和药品生产的宝贵原料。

说明书

                      技术领域

本发明是关于植物中有效成分的提取分离方法，具体涉及一种从蓝浆果中提取花色甙化合物有效成分的方法，属于生物制药技术领域。

                      背景技术

蓝浆果(Vaccinium myrtillus L.)是一类富含多种营养成分的保健果品，其抗氧化能力居于果品和蔬菜之首，被联合国粮农组织列为人类5大健康食品之一。目前，蓝浆果中的多种生物活性成分，特别是花色甙类物质，是国外研究的热点。

蓝浆果中花色甙类是迄今为止已被利用的最好的天然色素之一，它作为一种植物色素顺应了绿色食品的发展潮流。

近几年，许多文献报道了蓝浆果花色甙的营养价值和药理作用，主要为以下几点：1.促进视网膜上视红素的再合成，增强人眼视力；2.延缓脑神经衰老；3.改善循环系统机能；4.很强的除去活性氧的功能。所以，蓝浆果花色甙的研发价值不仅仅在于它能作为一种优质天然色素被开发为添加剂或着色剂，更重要的是它可作为一种新的生物活性成分，被开发为保健、功能食品和药品。

蓝浆果中有效成分的提取在我国研究非常少，国外文献报道也很少，就所报道的文献中，蓝浆果有效成分的提取工艺是，先用未指定酸碱性的乙醇提取回流，再经静置沉淀、化学方法除杂，然后浓缩、真空干燥获得提取物。所述提取方法的整个过程工序复杂，成本高，所获得的提取物纯度较低。

                      发明内容

本发明的目的是提供一种从蓝浆果果渣中提取有用的药用成分，并使其提取物纯度较高的蓝浆果提取纯化方法及其产品。

本发明的目的是这样实现的：

一种蓝浆果的提取纯化方法，包括提取、除杂、浓缩、干燥步骤，其特征在于在浓缩和干燥之间还有超滤工序，其中：

A、提取：将浓度为30％-80％，PH为2-6的乙醇与蓝浆果果渣粉末以1∶1-1∶10的料液比混合，在30℃-90℃下回流提取0.5-2小时，过滤并收集滤液和残渣，再以相同料液比与同浓度的酸化乙醇溶液混合，在相同温度下再回流提取0.5-2小时，过滤并收集滤液，合并两次的滤液；

B、除杂：将A步骤所得合并滤液在0℃-4℃低温下，放置12-24小时，用布氏漏斗过滤；

C、浓缩：将滤液在50℃下减压蒸发浓缩，浓缩10-12小时；

D、超滤：将浓缩液通过孔径为0.45um和0.22um的微孔滤膜后，除去细菌和大分子蛋白；

E、干燥：将滤液或者洗脱液除去大部分乙醇后，在50℃-60℃真空中干燥。

按照上述的蓝浆果的提取纯化方法，可得到粗提取物，粗提物中花色甙含量大于5％。如果在超滤和干燥步骤之间，增加上柱工序，可得到高纯度的提取物，该提取物中花色甙含量大于35％。所述上柱是指：先将滤液以每小时1-3倍柱体积的速度流过大孔吸附树脂，然后用2-5倍柱体积的蒸馏水以相同的速度流过树脂，洗去大部分杂质；再用1-3柱体积的60％-90％的乙醇溶液以相同速度流过树脂，将树脂上吸附的花色甙洗脱下来，收集洗脱液。

本发明采用有别于传统工艺的酸化乙醇(PH＝2-6)进行回流提取，能充分提高花色甙在乙醇中的溶出率，从而尽可能多的溶出花色甙，而且花色甙在酸性环境中更稳定，抑制花色甙的降解。

本发明引入传统工艺中没有的超滤工序，这样极大的简化了化学除杂过程中繁琐步骤、减少了花色甙在除杂过程中的损失、节约了成本；同时超滤除杂可以截留大分子蛋白以及大部分细菌，这较之化学除杂更彻底、更完全的提高了产品中总花色甙的纯度，而截留大部分细菌为后续加工奠定了无菌基础。

本发明所述提取纯化方法与现有技术相比，操作简单、成本低、生产安全，能够显著的提高提取物中总花色甙的纯度。用本发明方法所获得的产品具有营养价值和药理作用，它是保健食品和药品生产的宝贵原料。通过实验证明，用本发明方法所得提取物经紫外分光光度法和高效液相色谱分析，总花色甙纯度达到了35％，而传统工艺只能达到20％；并且具有较高的生物活性。

                    具体实施方式

实施例1：

以蓝浆果果渣20克为原料，于通风干燥箱中烘干除去水分后，装入平底烧瓶，加入2倍体积、PH为2、浓度为30％的乙醇溶液，置于水浴锅上，在30℃条件下回流提取0.5小时，用布氏漏斗过滤后分别收集滤液与残渣。将残渣装入平底烧瓶中，加入2倍体积、PH为2、浓度为30％的乙醇溶液，在相同的条件下回流提取0.5小时后过滤，合并两次滤液并装入平底烧瓶中，再放入温度为0℃的冰箱内，静置10小时。然后，取出冰箱，用布氏漏斗过滤，将滤液置于旋转蒸发器上，在50℃下浓缩10小时，得到50毫升浓缩液。将浓缩液通过孔径为0.45微米微孔滤膜后，再用0.22微米的膜进行超滤，收集洗脱滤液。将洗脱液置于真空干燥箱中，在50℃下干燥得蓝浆果粗提物，其花色甙含量为15％。该提取物可作为保健食品生产的原料。

实施例2：

以蓝浆果果渣20克为原料，于通风干燥箱中烘干除去水分后，装入平底烧瓶，加入5倍体积、PH为3、浓度为80％的乙醇溶液，置于水浴锅上，在50℃条件下回流提取1小时，用布氏漏斗过滤后分别收集滤液与残渣。将残渣装入平底烧瓶中，加入5倍体积、PH为3、浓度为80％的乙醇溶液，在相同的条件回流提取1小时后过滤，合并两次滤液。将滤液置于旋转蒸发器上，于50℃下浓缩12小时，得到150毫升浓缩液。将浓缩液装入平底烧瓶中，再放入温度为4℃的冰箱内，静置12小时。然后，取出冰箱，用布氏漏斗过滤，将滤液通过孔径为0.45微米微孔滤膜后，再用0.22微米的膜进行超滤，收集滤液。将AB-8大孔吸附树脂洗净后装入吸附柱。将150毫升滤液以每小时2倍柱体积的速度流过树脂，待树脂将花色甙充分吸收后，用4倍柱体积的蒸馏水以相同的速度流过树脂，以洗去大部分杂质，再将2倍柱体积的70％乙醇溶液以相同速度流过树脂，将花色甙洗脱下来，收集洗脱液。将洗脱液置于真空干燥箱中，于50℃下干燥即得纯度为35％的蓝浆果花色甙，它用作药品生产的原料。

实施例3：

以蓝浆果果渣20克为原料，于通风干燥箱中烘干除去水分后，装入平底烧瓶，加入10倍体积、PH为6、浓度为60％的乙醇溶液，置于水浴锅上，在90℃条件下回流提取2小时，用布氏漏斗过滤后分别收集滤液与残渣。将残渣装入平底烧瓶中，加入10倍体积、PH为6、浓度为60％的乙醇溶液，在相同的条件回流提取2小时后过滤，合并两次滤液。将合并滤液装入平底烧瓶中，再放入温度为2℃的冰箱内，静置11小时。然后，取出冰箱，用布氏漏斗过滤，将滤液置于旋转蒸发器上，于50℃下浓缩10-12小时，得到200毫升浓缩液。将浓缩液通过孔径为0.45微米微孔滤膜后，再用0.22微米的膜进行超滤，收集滤液。将AB-8大孔吸附树脂洗净后装入吸附柱。将200毫升滤液以每小时3倍柱体积的速度流过树脂，待树脂将花色甙充分吸收后，用6倍柱体积的蒸馏水以相同的速度流过树脂，以洗去大部分杂质，再将3倍柱体积的80％乙醇溶液以相同速度流过树脂，将花色甙洗脱下来，收集洗脱液。将洗脱液置于真空干燥箱中，于50℃下干燥即得纯度为30％的蓝浆果花色甙，它用作药品生产的原料。