一种具有抗疲劳和延缓衰老功能的鲨烯复合剂

摘要

本发明属保健食品技术领域。本发明提供了一种具有抗疲劳和延缓衰老功能的鲨烯复合剂。本发明的复合剂包括鲨鱼肝油、大豆卵磷脂、蜂王浆、人参和氢化大豆油。本发明制剂无毒性，人体服用后，适能指数、三项神经反应功能与肺功能均不同程度的提高，高密度脂蛋白的显著升高、低密度脂蛋白的显著下降，明显感到精神振奋，工作精力旺盛，食欲和睡眠得到改善。本发明提供了制备方法。

说明书

技术领域：

本发明属保健食品技术领域。具体涉及一种具有抗疲劳和延缓衰老功能的鲨烯复合剂。

背景技术：

随着社会的进步，膳食结构的变化与工作节奏的加快，加上环境污染等因素，各类人员的高血压、高血脂、肿瘤、糖尿病、疲劳症和心脑血管疾病等现代“文明病”日趋严重，并成为困扰人类健康长寿的难题。而随着人民的生活水平不断提高，人们需要天然的滋补保健食品来提高其生活质量和健康水平。

从20世纪80年代以来，国内外已有较多的文献报道了有关鲨烯、人参、蜂皇浆等天然物质对动物和人体均具有增强体质，减少疲劳，以及延年益寿等功效。作为保健食品已作鉴定和投产。但现有的产品多为单一成分的药或食品，或只有1-2种物质复合，作用单一，且原料含量纯度不一。再加上鲨烯有腥味，蜂皇浆较为脆弱，易受理化因素的影响，人参性热等等，这些问题都较难解决。因而功效单一，多属于较为原始和低层次的食品。从科技文献查新结果显示，未见有油性的天然功能食品与粉剂型天然滋补品相结合的功能食品问世。

发明内容：

本发明所要解决的技术问题在于克服上述不足之外，研制一种具有促进组织对氧的利用，提高能量利用率的保健食品。

本发明提供了一种具有抗疲劳和延缓衰老功能的鲨烯复合剂。

本发明是以中国传统的药食同源原理和现代高技术手段，从众多的天然活性物质中，筛选出具有促进组织对氧的利用，活跃体内生物氧化还原反应与提高能量利用率的深海巨鲨肝脏提取物——鲨烯，与我国传统的滋补上品人参提取物——人参皂甙和“全营养素”——蜂皇浆，辅以各种天然营养成分，按严格的科学方法配伍精制，而成为抗疲劳、延缓衰老的制剂——鲨烯复合剂胶囊。

本发明的鲨烯复合剂包括下列成份：

    鲨角肝油    25％～75％    50％    大豆卵磷脂    55～25％    24.5％    蜂皇浆冻干粉    5％～25％    20％    人参    1％～25％    5％    氢化大豆油    0.1％～1.0％    0.5％

本发明的鲨烯复合剂主要组份的功效如下：

鲨烯(Squlene)不仅存在于鲨鱼肝脏中，而且在人体肝脏内也广泛存在，人脂肪细胞内含有浓度极高的鲨烯。因而它是人体内含物质，在人体内参与胆固醇的生物合成及多种生化反应，具有重要的生理功能。研究表明，服用鲨烯后，血清铜蓝蛋白、转铁蛋白以及超氧物歧化酶与乳酸脱氢酶活性皆有显著的提高。鲨烯具有类似红细胞摄取氧的功能，生成活化的氧化鲨烯，随血液被运输到机体末端细胞中释放出氧，增加机体组织氧的利用能力，促进肝脏功能与胆汁分泌，从而增进食欲，加速因缺氧引起的各种疾病的恢复。鲨烯对于风湿病、关节炎、糖尿病、高血压、肝病、心脏病等患者是一种理想的保健滋补品。鲨烯有提高组织对氧的利用能力，增强机体的活力，消除疲劳，改善心肺功能等功效，可用于高血脂症、肿瘤患者作为降血脂、抗癌防癌药物。“疲劳”是一种复杂的生理生化过程，它通常与代谢紊乱，自由基过多，免疫功能失调相关，鲨烯正是具有消除自由基、调节免疫功能等作用。

蜂皇浆(Royal jelly)的功效与其所含的蛋白质、维生素、有机酸、微量元素四种成分相关，被营养学家誉为“全营养素”。

①蛋白质和氨基酸是皇浆的基本成分，它对人体的作用机理已经研究得较透彻。蜂皇浆中的氨基酸不论在含量还是种类上都是令人注目的一大类有活性作用的成分。

皇浆的蛋白类高活性成分可分为三类：类胰岛素、活性多肽、γ球蛋白。其中有重要作用的清蛋白约占2/3，球蛋白约占1/3，这和人类血液中的清蛋白、球蛋白的比例相似。皇浆中的球蛋白是一种γ球蛋白的混合物，它具有延缓衰老、抗菌、抗病毒作用，它还能和皇浆其他成分起复合作用。

②维生素大量的多种维生素作为强活性物质，存在于皇浆中。其中B族维生素含量最高，特别是维生素B₁对人体疲劳、倦怠、睡眠障碍、肌肉痉挛、神经痛等有明显功效。试验表明，用过皇浆的小鼠游泳时间明显延长。B₁还能促进食欲，增强记忆，提高智力，维持正常的糖代谢。维生素B₂对促进发育、强壮身体、防止衰老有直接作用。全部的磷酸和核酸等的结合活性型也靠维生素B₂的作用。它与碳水化合物、脂肪及氨基酸的代谢有着密切的关系。蜂皇浆中的烟酸是两种辅酶的成分，参与细胞代谢。烟酸对于保护皮肤、造血机能及多神经系统的健康产生作用。皇浆中的泛酸，能促进细胞更新，促进生长、延缓衰老。维生素B₆对蛋白质氨基酸的代谢起重要作用，尤其是色氨酸、蛋氨酸、胱氨酸、谷氨酸、甘氨酸等的代谢，离不开维生素B₆，它在合成血红蛋白方面也有特殊作用。皇浆可以改善贫血和促进毛发生长也与此有关系。

乙酰胆碱是皇浆活性物质的重要成分，它是记忆和信息传递的支柱，在脑力、思维和记忆能力的提高和改善中起重要作用。蜂皇浆中还有一定量的脂溶性维生素，如维生素A、D、E，100克鲜皇浆中分别含有维生素A349.9微克，维生素D66.6微克，维生素E933.35微克。维生素D的主要作用是促进机体对钙和磷在肠道内的吸收和利用。维生素E具有保护和维持细胞膜的正常脂质结构和生理功能，因而具有抗衰老的作用。

③有机酸  皇浆所含有机酸中主要是脂肪酸。至少含有26种游离脂肪酸，如壬酸、癸酸、十一烷酸、亚油酸等。其中有一种特殊的不饱和脂肪酸，10-羟基-α-癸烯酸[(E)-10-hydroxy-α-decylenic acid]自然界只有皇浆中才有，故亦称皇浆酸(10-HDA)。有抗辐射、抑制和杀伤癌细胞、延长患癌动物存活时间、抗炎和杀菌、消毒等作用。

④灰分  皇浆干物质中约有0.9克为无机盐。其中钾650毫克，钠130毫克，钙30毫克，镁85毫克，铜2毫克，铁7毫克，锌6毫克。皇浆中微量元素很容易被人体吸收。此外，干物质中含有20％-39％的糖类，以葡萄糖为主，有麦芽糖、龙胆二糖、蔗糖等。鲜皇浆中还含有磷酸化合物。用光谱分析测定是以三磷酸腺苷(ATP)的形式存在，其生理功能是向机体提供能源。

人参(PanaxginsengC.A.Meyen)是名贵中药，《神农本草经》中列为上品，有“大补元气，生津止渴，扶正固本”等功效。具有广泛的生理作用，对神经、内分泌、循环、血液、造血、泌尿及免疫等系统都有调节作用，并对蛋白质、核酸、糖、脂肪等物质代谢均有不同程度的影响。人参皂甙是从人参中提取的有效成分，能提高机体的智力和体力的活动能力。而疲劳通常可分为中枢神经系统的功能疲劳和体力上的疲劳。当人们由于过度紧张地脑力劳动，大脑皮层的兴奋和抑制两种过程失去平衡，导致神经过程疲惫性升高，主观上产生不适症状，客观上智力迟钝，容易出差错。人参皂甙能增强兴奋过程的灵活性，降低兴奋过程的疲惫性，从而使机体工作持久，不易疲劳。

人参皂甙有促进分化抑制过程和加快大脑皮层暂时联系的建立，使机体记忆力和分辨力加强。然而，体力疲劳和中枢神经疲劳是不能截然分开的，它们是彼此联系和相互影响的生理过程，实验证明，人参皂甙不但有助于中枢神经疲劳的消除，更能缓解体力疲劳的发展。

综合功效

通过设计的各单一组分与复合组分的功效比较试验证明，我们选择的三个组分配方效果最佳，其动物耐力和延缓衰老功能均比单一组分和两两组分结合有显著提高。小鼠的游泳和爬杆耐力有显著提高，增加运动后，小鼠血乳酸消除幅度增加，血清尿酸氮含量降低。果蝇生存试验表明，平均寿命和最高寿命均有显著提高，能明显增加SOD酶的活性，降低丙二醛含量。

随着社会的进步，膳食结构的变化与工作节奏的加快，加上环境污染等因素，各类人员的高血压、高血脂、肿瘤、糖尿病、疲劳症和心血管疾病等现代“文明病”日趋严重，并且成为困扰人类健康和长寿的难题。但由于现代生物技术与生化药物研究的深入，崇尚自然，回归自然的保健方式和观念日益成熟。本发明顺应了这一理念，制剂，具有延缓衰老、抗疲劳的功能，安全无毒性，且有较好的稳定性。证明了本发明卓越的功能和功效，使之具有强大的生命力。本发明的鲨烯复合剂的毒理试验结果如下：

1、急性毒性试验(经口LD50)试验：

目的：观察受试样品一次经口给予动物引起不良反应和死亡情况并确定半数致死剂量。

检测依据：GB15193-94

1.1材料和方法：

1.1.1样品名称：鲨烯复合剂胶囊。

1.1.2样品性状：内容物为淡黄色油状混悬液。

1.1.3受试样品与配制：称取样品10000mg，加蒸馏水至20ml，充分混匀后配制成均匀混悬液，作为受试样品。

1.1.4受试动物：

清洁级小鼠20只，雌雄各半，体重：18-22克，由复旦大学实验动物部提供。合格证号：02-22-1。饲养室温度：20±2℃，相对湿度：40％-70％。动物室合格证号：02-28。小鼠饲料由苏杭实验动物科技发展公司提供，合格证号：苏E饲生字(2002)006。

1.1.5仪器设备：电子称ACS-3A 90401582，天平BP3100S-91006909

1.1.6.1动物禁食(不禁水)16小时后，按体重要求选用雌、雄小鼠各10只，分放于两鼠笼内，同性别小鼠之间体重之差不超过3g。

1.1.6.3将受试样品采用一次经口灌胃方式对实验动物染毒，小鼠逐只称重，灌胃容量按0.4ml/20g体重计。

1.1.6.4染毒后，观察动物的一般状态、体重变化、中毒症状和死亡情况等，观察期为一周。

1.1.6.5实验末再次对动物称重。对死亡动物及到期处死动物进行尸体解剖，肉眼观察大体病理改变情况。

1.1.6.6实验全过程及观察内容均做详细记录。

1.7.结果：

                        表1  雌雄小鼠急性经口毒性试验结果

  动物性别    剂量(mg/kg)    动物数(只)    死亡数(只)    死亡率(％)  雌性小鼠    10000    10    0    0  雄性小鼠    10000    10    0    0

1.7.1主要症状表现：试验期间各组动物活动正常，毛色光泽度好，

未见任何中毒症状和死亡。

1.7.2半数致死量：雌性小鼠：LD₅₀＞10000mg/kg。

                 雄性小鼠：LD₅₀＞10000mg/kg。

1.8结论：根据急性毒性半数致死剂量分级，属实际无毒级物质。

2、微核试验：

目的：利用体内实验方法，检测受试物是否诱发小鼠骨髓染色体畸变。

检测依据：GB15193-94

2.1样品性状：样品鲨烯复合剂胶囊，内容物为淡黄色油状混悬液。

2.2样品的处理及配制：称取样品5000、2500、1250mg，分别加蒸水至20ml，充分混匀后为受试样品。

2.3受试动物：

来源：复旦大学实验动物部。种属与品系：清洁级小鼠。

性别：雌性和雄性。体重：25-30克，合格证号：02-22-1。

2.4实验条件：室温：20±2℃，相对湿度：40％-70％。

2.5实验方法：

2.5.1将动物随机分为5组，每组10只，雌雄各半，分别作为样品

三个剂量组及蒸馏水阴性对照组和环磷酰胺阳性对照组。

2.5.2采用30小时两次灌胃法，动物称重，将配制的不同水浓度样品按0.4ml/20g体重，分别对各组动物灌胃。

2.5.3于第二次灌胃后6小时，颈椎脱臼处死动物，取股骨骨髓加小牛血清混匀，常规涂片、固定，Giemsa染色制片。

2.5.4镜检观察，每鼠计数1000个嗜多染红细胞的微核数，计算微核发生率，并进行统计分析。

2.6结果：

                   表2动物骨髓嗜多染红细胞微核发生率

剂量             性别    动物数    受检细胞数    微核细胞    微核率    统计学

(mg/kg)                  (只)      (个)          数(个)      (‰)      检验(P值)^*

5000             雄性    5         5000          4           0.8       ＞0.05

5000             雌性    5         5000          5           1.0       ＞0.05

2500             雄性    5         5000          4           0.8       ＞0.05

2500             雌性    5         5000          6           1.2       ＞0.05

1250             雄性    5         5000          4           0.8       ＞0.05

1250             雌性    5         5000          6           1.        ＞0.05

阴性对照         雄性    5         5000          4           0.8

(蒸馏水20ml/kg)  雌性    5         5000          7           1.4

阳性对照         雄性    5         5000          131         26.2      ＜0.01

(环磷酰胺40ml/kg)雌性    5         5000          133         26.6      ＜0.01

*与阴性对照组相比(经卡方检验)

2.7结论：

经统计学分析，样品鲨烯复合剂胶囊骨髓嗜多染红细胞微核试验结果为阴性。

3、精子畸形试验：

目的：通过检测确认受试物对精子生成发育的影响，及在体内对生殖细胞的遗传毒性。

3.1样品性状：样品鲨烯复合剂胶囊，内容物为淡黄色油状混悬液。

3.2样品的处理及配制：称取样品5000、2500、1250mg，分别加蒸水至20ml，充分混匀后为受试样品。

3.3受试动物：

来源：复旦大学实验动物部。种属与品系：清洁级小鼠。

性别：雌性。体重：25-30克，合格证号：02-22-1。

3.4实验条件：室温：20±2℃，相对湿度：40％-70％。

3.5实验方法：

3.5.1将动物随机分为5组，每组5只，分别作为样品三个剂量组及蒸馏水阴性对照组和环磷酰胺阳性对照组。

3.5.2动物称重后，将配制的不同水浓度样品按0.4ml/20g体重，分别对各组动物灌胃。每日一次，边续5天。

3.5.3于首次给样后第35天，颈椎脱臼处死动物，取二次副睾放入生理盐水中，剪碎，四层过滤，取滤液涂片、固定，2％伊红染色制片。

3.5.4镜检观察，每鼠计数1000个精子的畸形数，计算精子畸形发生率，并进行统计分析。

3.6结果：

                                表3  动物精子畸形发生率

剂量       动物数    受检精子          畸形类型数(个)        畸变精子  畸变率    统计学

(mg/kg)   (只)       数(个)    无  香  胖   无   尾   双  双  数(个)    (‰)    检验(P值)^*

                               钩  蕉  头   定   折   头  尾

                                   形       表   叠

5000      5          5000      4   2   16   56   2    1   1   82        16.4    ＞0.05

2500      5          5000      3   5   15   54   2    1   1   81        16.2    ＞0.05

1250      5          5000      4   7   20   57   2    0   1   92        16.0    ＞0.05

阴性对照  5          5000      4   3   19   50   2    1   1   80        16.0

(蒸馏水20ml/kg)

阳性对照  5          5000      19  6   6719 229  2    3   2   328       65.6    ＜0.01

(蒸馏水40ml/kg)

^*与阴性对照级相比(经卡方检验)

3.7结论：

经统计学分析，样品鲨烯复合剂胶囊精子畸形试验结果为阴性。

4.Ames试验：

目的：检测受试物的诱变性，从而预测其遗传危害和潜在致癌作用的可能性。

检测依据：GB15193-94

4.1样品性状：样品鲨烯复合剂胶囊，内容物为淡黄色油状混悬液。

4.2溶剂：无菌蒸馏水。

4.3样品处理及配制：取样品原液为高剂量组受试液，吸取上述受试液5.0，2.0，1.0，0.2ml，分别加无菌蒸馏水至10mL，作为以下个剂量组得受试液。

4.4测试剂量：2μl/皿、10μl/皿、20μl/皿、50μl/皿、100μl/皿。

4.5实验环境条件：温度：20±2℃，相对湿度：50％-70％

4.6仪器设备：电热恒温培养箱PYX-DHS 193

电热恒温水槽DK-600

电子天平AE163 1010002

4.7测试菌株：TA97、TA98、TA100、TA102。由美国加利福尼亚大学生物化学系提供，生物学性状符合菌株要求。测试用菌液浓度1-2×10⁹/ml。

4.8大鼠肝S₉的诱导和制备：

选健康成年SD大鼠，体重150g左右，将多氯联苯溶于玉米油中，浓度为200mmg/ml，按500mg/kg(体重)无菌操作一次腹腔注射，5d后断头处死动物，取出肝脏称重后，用新鲜冰冷的0.15mol/L氯化钾溶液连续冲洗肝脏数次，每克肝(湿重)加0.15mol/L氯化钾溶液3ml，连同烧杯移入冰浴中，用消毒剪刀剪碎肝脏，用组织匀浆器(20000r/min，1min)制成肝匀浆，随后将制成的肝匀浆在低温(0-4℃)高速离心机以9000g离心10min，吸取上清液即为S₉组分，将S₉组分分装于无菌冻存管，放入液氮保存，以上操作需注意无菌和局部冷环境。S₉制成后经无菌、蛋白含量测定和间接诱变剂生物活性鉴定。鉴定结果：无菌试验合格、蛋白质含量为33mg/ml。S₉生物活性符合标准要求。试验时每平皿加入0.5mlS₉，混合液(含S₉50μl)。

4.9溶剂对照：无菌蒸馏水。

4.10阳性对照：-S₉：TA97阿的平(500μl/皿)、TA98对硝基喹啉(200μl/皿)，TA100、TA102、MMS(1μl/皿)。

           +S₉：TA97、TA100 2-氨基芴(10μl/皿)

           TA102 1.8-二羟基蒽醌(50μl/皿)。

以上阳性对照除阿的平用无菌蒸溜水作溶剂外，其余均用二甲基亚砜(DMSO)作溶剂。

4.11测试方法：按GB15193-94标准平板掺入法：45℃顺层琼2ml，依次加入菌液0.1ml、受试物0.1ml、活化需加S₉混合液0.5ml，充分混匀后迅速倾入底层培养基上，37℃培养48小时，观察结果。每次试验重复一次。

4.12第一次试验测试结果：

剂量                                         回复菌落数(个/皿)    ±SD

μl/m皿             TA97                 TA98               TA100            TA102

                -S₉     +S₉       -S₉     +S₉      -S₉    +S₉    -S₉     +S₉

2               155±8    162±14    30±5    31±5    133±6   141±10  246±6   263±14

10              157±11   165±11    28±3    30±5    131±9   135±15  253±8   265±16

20              148±4    157±11    29±4    30±5    136±7   142±6   259±8   266±8

50              150±19   155±10    31±3    32±3    135±8   141±11  261±12  263±16

100             151±19   158±12    30±3    31±3    132±7   139±7   252±9   266±9

空白对照        148±8    154±11    29±4    30±4    135±13  143±8   257±12  263±6

溶剂对照        146±9    151±10    31±5    32±4    138±11  144±8   254±12  274±11

阿的平(500μg皿)1135±127

对硝基喹啉(200μg皿)                 643±24

甲基甲烷磺酸酯                                         127±48           3263±81

(1μg皿)

2-氨基芴(10μg皿)         1350±95            1940±92          1377±68

1，8-二羟基蒽醌                                                                   751±27

(50μg皿)

4.13第二次试验测试结果：

剂量                                 回复菌落数(个/皿)    ±SD

μl/m皿              TA97              TA98            TA100             TA102

                -S₉     +S₉      -S₉   +S₉     -S₉     +S₉     -S₉    +S₉

2               145±9   162±9    30±1   31±2   137±12  146±9   249±6   259±8

10              154±16  158±15   28±3   30±6   136±10  144±7   253±8   266±9

20              157±11  165±5    29±3   30±5   140±18  142±21  257±6   261±15

50              151±4   163±7    30±3   31±3   136±7   146±5   264±9   267±3

100             149±13  161±7    31±5   32±4   132±5   148±5   265±4   277±9

空白对          152±8   161±8    31±5   32±3   134±7   147±10  265±16  269±18

溶剂对照        155±15  159±17   32±2   33±2   137±12  140±9   256±9   262±16

阿的平(500μg皿)1100±50

对硝基喹啉(200μg皿)               644±20

甲基甲烷磺酸酯                                     1303±47          3245±44

(1μg皿)

2-氨基芴(10μg皿)        1353±31          1867±50         1385±93

1，8-二羟基蒽醌                                                               774±14

(50μg皿)

4.14结论：本实验条件下，样品鲨烯复合剂胶囊Ames试验结果为阴性。

5.30天喂养试验：

目的：通过检测：进一步了解受试样品的毒性作用，并可初步估计最大无作用剂量。

5.1样品性状：样品鲨烯复合剂胶囊，内容物为淡黄色油状混悬液。

5.2剂量设计：样品人体推荐剂量为每日2g/60kg。本实验设低、中、高三个剂量，即0.33、1.67、3.33g/kg，相当于人体推荐剂量的10倍，50倍，100倍，另设空白对照组。

5.3样品的处理及配制：

根据本实验剂量设计要求及动物饲料摄入情况(约10g/100BW/日)，分别将样品33、167、333g掺入10kg饲料内，拌匀，经饲料机制成颗粒饲料，即成低、中、高三种不同样品含量的饲料，分别给三组动物喂饲。空白对照组给予不含样品的同种饲料。

5.4实验动物：

5.4.1来源：复旦大学实验动物部

5.4.2种属：大鼠，合格证号：02-22-1

5.4.3品系：SD

5.4.4性别：雌性和雄性

5.4.5体重：60-80克

5.5实验方法：

5.5.1将动物随机分为4组，每组20只，雌雄各半。分别作为样品三个剂量组及空白对照组，单位笼喂养，自由饮食，边疆喂养30天。

5.5.2实验开始实验后每周称量一次动物体重，绘制生长曲线，并记录饲料摄入量。

5.5.3连续喂养30天后，逐只称重，取鼠血进行血液学、生化学检查，处死，大体解剖观察有无明显病变，取肝、肾、脾、性器官等脏器进行称重。计算脏体比，并对肝、肾、脾、胃肠、性器官等脏器进行组织病理学检查。

5.6结果：

5.6.1生长情况及食物利用率

          各实验组动物体重增长情况(±SD)单位：g

性别   组别      0周      1周       2周       3周       4周

       对照      71±5    123±5    168±8    214±8    265±9

       低剂量    72±6    124±5    164±9    211±8    269±11

♂     中剂量    71±6    119±3    165±6    211±6    269±6

       高剂量    70±5    122±5    163±5    215±5    265±11

       对照      71±5    112±6    131±10   150±10   179±12

       低剂量    70±6    116±8    133±10   157±7    180±11

♀     中剂量    69±6    112±5    129±6    153±7    180±11

       高剂量    69±5    114±7    130±8    149±8    176±15

             各实验组动物体重增长情况(±SD)单位：g

性别    组别     实验初    实验终    增重(g)      食物摄取    食物利用

                 体重(g)    体重(g)    (g)        量(g)       率(％)

        对照     71±5      265±9     194±10    557±32     35±1.3

        低剂量   72±6      269±11    197±13    569±52     35±1.5

♂      中剂量   71±6      269±6     198±10    568±35     35±1.4

        高剂量   70±5      265±11    195±12    565±50     35±1.4

        对照     71±5      179±12    108±11    422±36     26±1.3

        低剂量   70±6      179±12    109±13    425±55     26±1.5

♀      中剂量   69±6      180±11    111±12    442±58     25±1.5

        高剂量   69±5      176±15    107±16    421±65     25±1.3

由以上两表及下图可见，样品各实验组大鼠生长情况基本良好。

5.6.2血液学检查：

            血常规测定结果(±SD)

组别   性   白细胞      红细胞      血色素                白细胞分类

       别   (109个/L)   (1012个/L)  (g/L)    中性    淋巴    单核    嗜酸    嗜碱

                                             (％)    (％)    (％)    (％)    (％)

对照           9.8±2.7     6.77±0.34    134±8.3   11.3±2.6   81.4±2.5   4.5±1.2  1.7±0.7  1.4±1.0

低剂量         10.5±2.9    6.88±0.42    133±8.7   10.3±2.5   81.9±3.4   4.8±1.0  1.6±0.7  1.4±0.9

中剂量      ^♂10.0±289    6.86±0.46    133±8.1   9.8±2.6    82.6±2.1   4.5±1.2  1.8±1.0  1.3±0.7

高剂量         10.3±3.6    6.90±0.60    134±8.1   9.9±2.1    82.4±1.6   4.7±1.0  1.4±1.1  1.6±0.8

对照           10.2±2.7    6.86±0.43    137±8.9   10.8±2.7   81.0±2.3   5.1±1.0  1.6±0.6  1.5±0.8

低剂量         10.8±1.9    6.85±0.42    137±8.5   10.2±2.6   82.7±2.0   4.4±0.9  1.4±0.7  1.3±0.8

中剂量      ^♀9.9±3.1     6.93±0.40    137±8.8   10.1±2.1   81.9±2.6   4.7±1.1  1.7±0.8  1.6±0.8

高剂量         10.0±2.6    6.96±0.48    135±6.8   10.9±2.7   81.5±3.4   4.8±1.2  1.3±0.8  1.5±1.0

以上结果可见，各实验组与对照大鼠的血色素、红细胞、白细胞计数及其分类的检查结果均在正常范围内。

5.6.3生化学检查：

             生化检测结果(±SD)(其余结果见后)

性别   组别      葡萄糖        白蛋白        胆固醇        尿素氮

                 (mmol/L)      (g/dl)        (mmol/L)      (mmol/L)

       对照      6.89±0.47    4.17±0.21    1.81±0.13    8.82±0.75

       低剂量    6.69±1.01    4.01±0.21    1.85±0.10    8.42±0.64

♂     中剂量    6.66±1.05    4.20±0.24    1.78±0.16    8.64±0.72

       高剂量    6.13±0.70    4.02±0.25    1.79±0.16    8.64±0.72

       对照      6.24±0.74    4.21±0.37    1.73±0.13    9.06±0.53

       低剂量    6.55±0.97    4.21±0.22    1.79±0.07    8.82±0.99

♀     中剂量    6.43±0.91    4.19±0.34    1.78±0.17    8.92±0.61

       高剂量    6.45±0.55    4.16±0.30    1.73±0.14    8.85±0.46

                      生化检测结果(±SD)(续)

性别    组别       谷丙转氨酶   谷草转氨酶  总蛋白        甘油三酯      肌酐

                   (IUI/L)      (IU/L)      (g/dL)        (mmol/L)      (μmol/L)

        对照       79.5±6.9    180±17.2   7.55±0.61    0.91±0.13    81.0±11.7

        低剂量     75.6±12.8   188±17.2   7.24±0.22    0.94±0.15    80.3±7.8

♂      中剂量     75.9±3.7    187±14.9   7.45±0.50    0.94±0.14    79.9±9.2

        高剂量     80.8±12.2   183±16.0   7.57±0.5716  0.92±0.17    84.5±8.6

        对照       80.6±8.5    181±10.7   7.34±0.80    0.97±0.12    78.2±13.3

        低剂量     77.4±7.8    178±14.8   7.53±0.56    0.98±0.13    84.2±14.1

♀      中剂量     87.1±6.3    179±14.0   7.27±0.51    0.93±0.17    78.8±12.8

        高剂量     79.7±10.8   179±9.9    7.29±0.26    0.98±0.14    83.6±7.5

5.6.4脏器重量结果

             各剂量组大鼠脏体比值(±SD)

性别   组别      肝/体         肾/体         脾/体         睾丸或卵巢/体

                 (％)          (％)          (％)          (％)

       对照      4.63±0.21    0.95±0.04    0.36±0.02    1.32±0.06

       低剂量    4.49±0.31    4.93±0.06    0.35±0.02    1.28±0.07

♂     中剂量    4.48±0.24    0.93±0.05    0.35±0.02    1.28±0.07

       高剂量    4.61±0.24    0.95±0.05    0.36±0.02    1.31±0.07

       对照      4.69±0.57    0.95±0.12    0.36±0.05    0.087±0.014

       低剂量    4.68±0.58    0.95±0.12    0.35±0.04    0.088±0.013

♀     中剂量    4.70±0.57    0.95±0.11    0.36±0.04    0.089±0.012

       高剂量    4.66±0.63    0.95±0.13    0.35±0.05    0.087±0.013

5.6.5组织学检查结果：

由下表可见，各组动物大体检查均无异常，肝、肾、脾、胃肠、性器官等主要脏器的组织学检查结果未发现与实验有关的病变。

肝

    组别   样品高剂量组^*    对照组    动物数(只)    被膜改变(只)   20   0    20    0肝小叶汇管区坏死(例)出血(例)空泡变(例)颗粒变性(例)肝细胞索断裂(例)肝细胞肿胀(例)炎症细胞浸润(例)其它(例)坏死(例)出血(例)胆管增生(例)炎症细胞浸润(例)其它(例)   0   0   4   0   0   0   0   0   0   0   0   2   0    0    0    2    2    0    2    0    0    0    0    0    2    0

^*大体检查未发现明显病变，因此仅选高剂量组作组织学检查。

肾

  组别样品高剂量组^*    空白对照组  动物物(只)20    20  皮  质  部  髓  质  部  被膜改变(例)0    0  肾  小  管  上  皮  细  胞  变  性  坏死(例)  肿胀(例)  空泡变(水样  变与脂肪变(例)  管型(例)  炎症细胞浸润(例)00 060    0    0     0    3    0  肾小球变性(例)  间质内病变(炎症  细胞浸润(例)  其它(例)0 00    0     0    0  曲  管  上  皮  细  胞  变  性  坏死(例)  肿胀(例)  空泡变(例)  管型(例)  炎症细胞浸润00320    0    0    0    1    0  间贡炎症细胞浸润(例)0    0  肾盂部乳头改变(例)  移形上皮细胞改变(例)00    0    0

^*大体检查未发现明显病变，因此仅选高剂量组作组织学检查。

脾脏

                  空白对照组         样品高剂量组*

                  雌    雄           雌    雄

动物数(只)        10    10           10    10

红髓扩张          0     0            0     0

白髓萎缩          0     0            0     0

造血细胞增生      0     0            0     0

炎细胞浸润        0     0            0     0

色素沉着          0     0            0     0

其它              0     0            0     0

^*大体检查未发现明显病变，因此仅选高剂量组作组织学检查

胃肠

                空白对照组     样品高剂量组^*

                雌   雄        雌   雄

动物数(只)      10   10        10   10

粘膜出血        0    0         0    0

水肿            0    0         0    0

炎细胞浸润      0    0         0    0

坏死            0    0         0    0

萎缩            0    0         0    0

增生            0    0         0    0

^*大体检查未发现明显病变，因此仅选高剂量组作组织学检查睾丸

                      空白对照组        样品高剂量组^*

                      雌   雄           雌   雄

动物数(只)            10   10           10   10

生精上皮细胞减少      0    0            0    0

生精上皮细胞变性      0    0            0    0

生精上皮细胞坏死      0    0            0    0

多核巨细胞            0    0            0    0

间质出血              0    0            0    0

间质水肿              0    0            0    0

^*大体检查未发现明显病变，因此仅选高剂量组作组织学检查卵巢

                空白对照组        样品高剂量组^*

                雌   雄           雌   雄

动物数(只)      10   10           10   10

萎缩            0    0            0    0

囊肿            0    0            0    0

其它            0    0            0    0

^*大体检查未发现明显病变，因此仅选高剂量组作组织学检查

兴奋剂检测结果：

经国家体育总局运动医学研究所兴奋剂检测中心测试，鲨烯复合剂胶囊，未发现国际奥委会2000年规定禁用的刺激剂、麻醉剂、β-阻断剂、利尿剂和甾体激素类药物。

本发明的鲨烯复合剂的动物试验结果如下：

1.延缓衰老作用

1.1抗氧化作用功能试验：

1.1.1样品性状：样品鲨烯复合剂胶囊，内容物为淡黄色油状混悬液。

1.1.2剂量设计：本品人体推荐剂量为每日2g/60kg。本实验设低、中、高三剂量组，分别为0.17、0.33、1g/kg，分别相当于人体剂量的5倍、10倍和30倍。并设老龄动物对照组(以蒸馏水灌胃)，青年动物对照组。

1.1.3样品处理：取样品0.17、0.33、1g，分别加蒸馏水至10ml，使成均匀混悬液，即为低、中、高三剂量的供试液。

1.1.4实验动物：SD大白鼠，20月龄，雄性，由复旦大学试验动物部提供。合格证号02-22-4。实验动物饲养温度22±2℃，相对湿度50％-70％，动物房合格证号02-28，动物饲养料，由苏杭实验动物科技发展公司提供。

1.1.5给药途径：灌胃，灌胃容积1ml/100g。

1.1.6实验方法与结果：

各剂量组给以样品，对照组以蒸馏水灌胃，连续30天。第31天，6组动物摘眼球取血，离心，取血清。测定如下生化指标：血中过氧化脂质降解产物丙二醛(MDA)含量和血中超氧化物歧化酶(SOD)活力。实验结果用Spss软件进行统计。

               样品对动物体重的影响

组别        动物数    初始体重        中期体重       终期体重

老年对照    10        482±11         513±9         545±14

低剂量      10        478±13         504±12        540±17

中剂量      10        471±19         502±13        545±23

高剂量      10        475±20         507±12        533±20

青年对照    10        72±3^*         134±12^*     182±10^*

由上表可见，样品各剂量组与老年对照组相比，均无显著性差异。

       血中过氧化脂质降解产物丙二醛(MDA)含量

组别            动物数      MDA含量(nmol/ml)

老年对照          10            2.63±0.48

低剂量            10            2.46±0.29

中剂量            10            1.70±0.39

高剂量            10            1.39±0.28^*

青年对照          10            1.14±0.23^*

^*P＜0.05与老年对照组相比(经方差分析)

由上表可见，样品高剂量组与老年对照组相比，有显著差异。

      血中超氧化物歧化酶(SOD)活力

组别          动物数        MDA含量(nmol/ml)

老年对照        10            117.6±18.8

低剂量          10            131.0±9.8

中剂量          10            155.3±12.1

高剂量          10            181.6±19.9^*

青年对照        10            185.0±24.6^*

^*P＜0.05与老年对照组相比(经方差分析)

由上表可见，样品高剂量组与老年对照组相比，有显著差异。

1.2果蝇生存试验

1.2.1样品性状及处理：样品鲨烯复合剂胶囊，内容物为淡黄色油状混悬液。加入玉米培养基配成所需样品含量的培养基供试。

1.2.2剂量设计：样品人体推荐剂量为每日2g/60kg本试验设四个剂量组，分别为含样品浓度0.02％、0.07％、0.02％和0.6％的培养基，每组用果蝇400只，雌雄各半。对照组给予普通玉米粉培养基。

1.2.3实验动物：Oregon K野生型黑腹果蝇(Drosophilamelanogaster)

1.2.4实验方法与结果：

收集八小时内新羽化的果蝇成虫，乙醚麻醉下区分雌雄，随机分组，分别称重后进行试验。二周后，试验组分别给予不同浓度样品的培养基。实验条件：气温25±1℃，相对湿度60％～70％，每四天更换新鲜配制的培养基一次。每两天观察记录果蝇生存数和死亡数，直到全部果蝇死亡为止。计算出半数死亡时间、平均寿命和平均最高寿命等三个指标。

                                对果蝇生存试验的影响

          橛本数(只)   平均体得(μg)   半数死亡时间(天)  平均寿命(天)       平均最高寿命(天)a

样品浓度

(％)      雄     雌     雄    雌       雄    雌          雄       雌        雄       雌

普通对照  200    200    619   628      53    58          53±12   58±13    71±2    75±1

0.02      200    200    521   622      53    58          53±12   59±15    72±3    78±3

0.07      200    200    624   627      57    62          55±13   59±13    75±2^*  79±2^*

0.2       200    200    613   626      57    64          56±13^* 60±14    76±2^*  79±2^*

0.6       200    200    620   630      58    65          57±12   63±14^*  76±2^*  81±2^*

a由寿命最长的20只果蝇计算得出

^*P＜0.05，与普通对照组相比(经方差分析)

由上表可见，样品0.07％、0.2％、0.6％剂量组雌、雄性果蝇的半数死亡时间与普通对照组相比均延长4天以上；0.2％、0.6％剂量组雄性果蝇和0.6％剂量组雌性果蝇的平均寿命与普通对照组相比，均有显著性差异；0.07％、0.2％、0.6％剂量组雌、雄性果蝇的最高寿命与普通对照组相比，均有显著性差异。

1.3结论：样品鲨烯复合剂胶囊具有延缓衰老作用。

2.抗疲劳作用：

2.1样品性状：样品鲨烯复合剂胶囊，内容物为淡黄色油状混悬液。

2.2剂量设计：本品人体推荐剂量为每日2g/60kg，本实验设低、中、高三个剂量组，分别为0.17、0.33、1g/kg，分别相当于人体推荐剂量的5、10、30倍，另设对照组(给予蒸馏水)。

2.3样品处理：取样品0.17、0.33、1g分别加蒸馏水至20ml，充分混匀后作为低、中、高三剂量的供试液。

2.4实验动物：昆明种小白鼠，雄性，18-22克，由复旦大学试验动物部提供。合格证号02-22-4。实验动物饲养温度22±2℃，相对湿度50％-70％，动物房合格证号02-28，动物饲养料，由苏杭实验动物科技发展公司提供。

2.5给药途径：灌胃，灌胃容积0.4ml/20g体重。

2.6实验方法与结果：

2.6.1体重

取昆明种小白鼠120只，逐只称重，按体重分层随机分为12组，每组10只。以每四组为一个实验组，按剂量设计连续喂养30天。

             样品对动物体重的影响

组别      动物数                     体重(克)

          (只)        实验初         实验中期        实验末

对照      30          19±1.0        27±1.2         33±1.1

低剂量    30          19±1.1        26±1.2         32±1.1

中剂量    30          20±0.9        27±1.0         33±1.3

高剂量    30          20±1.0        27±1.0         33±1.0

由上表可见，样品对动物体重无明显影响。

2.6.2负重游泳试验

取上述按剂量设计连续喂养30天后的三剂量组及对照组动物各一组，于末次灌胃后30分钟，将小鼠放入水中游泳，水深30cm，水温25±0.5℃，鼠尾根部负荷5％体重的铅皮，记录小鼠自游泳开始至死亡的时间。

  样品对小鼠负重游泳时间的影响(±SD)

组别          动物数            负重游泳时间(秒)

对照          10                  436±155

低剂量        10                  558±201

中剂量        10                  547±247

高剂量        10                  701±247^*

^*P＜0.05与对照组相比(经方差分析)

由上表可见，样品高剂量组负重游泳时间明显延长，与对照组相比，有显著性差异。

2.6.3血乳酸测定：取上述按剂量设计连续喂养30天后的三剂量组及对照组动物各一组，测血乳酸并在给样后30分钟，负重2％(体重)在温度25-30℃水中游泳30-分钟，取出，测血乳酸，热风烘干，安静30分钟后，再测血乳酸。

  样品对小鼠运动后血乳酸升高幅度的影响(±SD)

组别      动物数                    血乳酸(mmol/l)

          (只)    运动前         运动后0分钟    差值(0分钟-实验前)

对照      10      4.54±0.43     11.16±0.28      6.62±0.28

低剂量    10      4.71±0.18     11.75±0.53      7.04±0.53

中剂量    10      4.44±0.07     11.60±0.59      7.16±0.59

高剂量    10      4.42±0.22     11.34±0.42      6.92±0.42

由上表可见，样品各剂量组实验后0分钟动物血乳酸升高幅度与对照组相比，均无显著性差异。

     样品对小鼠运动后血乳酸消除幅度的影响(±SD)

组别      动物数                 血乳酸(mmol/l)

          (只)    运动前         运动后0分钟    差值(0分钟-实验前)

对照      10      11.16±0.28    8.17±0.45          2.99±0.58

低剂量    10      11.75±0.43    7.87±0.54          3.88±0.70

中剂量    10      11.60±0.59    7.40±0.43          4.20±0.78

高剂量    10      4.42±0.22     5.99±0.63^*        5.35±0.73^*

^*P＜0.05与对照组组比(经方差分析)

由上表可见，样品各剂量组实验后0分钟动物血乳酸升高幅度与对照组相比，均无显著性差异。

2.6.4尿素氮测定

取上述按剂量设计连续30天后的三剂量组及对照组动物各一组，于末次灌胃后30分钟，将小鼠放入30℃水中游泳90分钟，取出，热风烘干，使安静，取鼠血，离心，取血清测尿素氮。

样品对小鼠运动后血清尿素氮的影响(±SD)

组别            动物数(只)        尿素氮(mmol/l)

对照            10                9.42±0.97

低剂量          10                9.65±0.93

中剂量          10                9.04±0.99

高剂量          10                7.92±1.21^*

^*P＜0.05与对照组相比(经方差分析)

由上表可见，样品高剂量小鼠运动后血清尿素氮明显下降，与对照组相比，有显著差异时间明显延长，与对照组相比，有显著性差异。

2.7总结：经口给予小鼠不同剂量样品鲨烯复合剂胶囊30天后，具有抗疲劳作用。

本发明的鲨烯复合剂的人体功效试验结果如下：

角鲨烯为深海大型鱼肝脏中提取的接近无色的油状液体，其结构类似β-胡萝葡素异戊间二烯化合物。栖息在深海环境中的大型鲨鱼，尽管处于低温、阴暗、缺氧条件下，但它们仍具强大的生命力。研究发现，大型鲨鱼肝脏巨大，约占体重的25％，占内脏总量的90％，其肝脏含有大量的角鲨为其活力之源。

本项研究采用角鲨烯为主要成份，适量配以蜂皇浆、人参皂甙等制备成复合剂。经动物的游泳、爬杆、离体心脏灌流等试验，以及动物雄性器官等观察，结果表明：具有提高机体力与耐力等功效。动物的急性毒性试验，长期毒性试验均表明，本制剂安全无毒副作用。在此基础上，我们对各类人员分别进行了为期一个月的人体服用效应试验。现实验方法和结果报告如下：

1.材料和方法

1.1实验仪器

1.1.1 XF-5型心率发射机，上海体育技术开发所生产。

1.1.2 RDH-2000型氧、二氧化碳测定仪南京市分析仪器厂生产。

1.1.3哈佛台阶：22.5cm和45.0cm高度，海军医学研究所自制。

1.2受试人员：

1.2.1耐力运动员：上海市业余长跑运动员50名，平均年龄27.5±5.4

1.2.2体力运动员：上海市少体校举重队员39名，平均年龄15.4±3.8岁。

1.3服用剂量

早晚空腹各服一次，每次20ml，

2.实验方法

连续服用一个月。

2.1适能指数测定：按照完全随机化分组，并设空白对照组。双盲法进行。分别在服药前后测定适能指数。将运动员按体重的8％负重，进行哈佛台阶运动。分别测定安静时、运动中及运动后心率。运动过程为15min。然后按下式计算：

2.2血液生化指标测试：随机分组后，在服药前、后分别从前臂静脉采血2ml，分别测定血清中总胆固醇、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白和极低密度脂蛋白。

3.实验结果：

3.1对适能指数的影响

运动员在做负荷运动中，分别记录负荷总时间，及三次心率，然后，按公式计算适能指数。结果如表1所示。

表1  耐力运动员服用鲨烯复合制剂前后适能指数的变化(±S)

对照组        例数         服药前            服药后

给药组        11       226.90±2L762     248.35±15.101^*

对照组        9        212.68±10.063    231.50±20.267

^*表示耐力组运动员服药后，给药组与对照组比较，P＜0.05

 3.2对血脂蛋白的影响：

运动员在服药前后，分别采取前臂静脉血，进行血清胆固醇(T-ch)，高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、极低密度脂蛋白(VLDL)等含量的测定。其结果见表2-4。

     表2服用前后运动员T-ch的变化(±S)

组别      例数    服药前(mg/100m1)        服药后(mg/100ml)

给药组    24      162.85±23.94           175.90±41.41

对照组    16      180.65±22.03           176.35±29.56

        表3服用前后运动员HDL的变化(±S)

组别      例数    服药前(mg/100ml)        服药后(mg/100ml)

给药组    11      60.61±6.54             74.40±14.34^*

对照组    7       65.37±15.26            72.35±16.60

^*表示给药组服药前后自身比较，HDL有显著提高，即p＜0.01；而对照组无明显变化。

        表4服用前后运动员HDL的变化(±S)

组别      例数        服药前(mg/100ml)        服药后(mg/100ml)

给药组    13          25.02±17.13            9.75±5.69^*

对照组    10          21.14±11.24            10.12±5.81

^*表示给组服用前后自身对照，有显著降低，即P＜0.01。

3.3对肺功能的影响

体力与耐力组运动员服药后，在运动试验过程中，以多氏袋收集呼吸气体，分别以气体分析仪测定运动员摄氧量、通气量以及排出的二氧化碳百分比的变化。结果见表5-7。

表5运动员服用鲨烯复合制剂后摄氧量的变化(±SD)

               体力组                   耐力组

组别

          例数    摄氧量(L)         例数    摄氧量(L)

给药组    14      3.29±0.46        14      3.57±0.71*

对照组    12      3.17±0.45        12      3.27±0.04

*表示耐力组服用后，其摄氧量比对照组有明显提高，即P＜0.01。

表6运动员服用鲨烯复合制剂后通气量的变化(±SD)

               体力组               耐力组

组别

              例数     通气量(L)             例数    通气量(L)

给药组        18       42.89±22.01          25      39.15±11.21

对照组        12       28.92±11.72          18      3.27±21.84

服用后，体力组与耐力组的勇气量皆高手对照组。

表7运动员服用鲨烯复合制剂后排出CO₂％的变化(±SD)

               体力组               耐力组

组别

          例数     CO₂％        例数    CO₂％

给药组    14       3.24±0.46    14      3.75±0.71*

对照组    12       3.17±0.45    12      3.27±0.04

*表示耐力组运动员服药后，CO₂排出丰分率较之对照组有非常显著提高，即P＜0.01服用后，体力组与耐力组的通气量皆高于对照组。

4.结果讨论：

有资料表明，服用外源性角鲨烯对机体具有多种生理功能：具有类似红细胞那样摄取氧的作用，生成活化的氧化鲨烯，被输送到组织中，能释放出氧，促进机体组织氧的利用能力，从而达到提高机体耐力的功效，本实验也证实，服用复合剂后，运动员负荷运动中适能指数值显著提高。

鲨烯在临床上其有广泛的用途，它通过抑制羟甲基戌二酰辅酶A(HMG-COA)还原酶活性而阻止体内胆固醇的生物合成，同时可调节机体中过剩的胆固醇排泄。使血液中胆固醇浓度维持正常水平。运动员服药后高密度胆蛋白有显著提高而极低密度脂蛋白有显著降低，证实了这一点。

“疲劳”是一种复杂的生理生化过程，通常与代谢紊乱，自由基过多，免疫功能失调相关，鲨烯正是具有消除自由基，调节免疫功能等作用。蜂。除机体受自由基的损伤。并能清除自由基；对幼物体内的单胺氧化酶-B产生抑制作用。人参皂甙能使机体更强济地用临床和三胺酸腺苷。蛋白质及换的合成，从而有助于缓解疲劳的产生。

在上述大量的动物试验的基础上，按照评价运动员机体耐力有关指标，分别对50名耐力运动员与39名体力运动员进行了服用“鲨参皇”效应观察，结果表明，服药后，适能指数、三项神经反应功能与肺功能等均不同程度的提高，而血液生化指标亦有改善，即服药前后耐力组运动员高密度脂蛋白(HDL)有显著增高，而极低密度脂蛋白(VLDL)却有显著下降。经海军两个基地某驱逐舰支队和两个潜艇支队的官兵服用证明，舰艇人员服用后，明显感到精神振奋，工作精力旺盛，食欲和睡眠改善等。

本发明的另一目的是提供了上述鲨烯复合剂的制备方法，该方法包括下列步骤：

(1)严格控制原辅材料的质量。

(2)将鲜皇浆冻干处理，使半流体的鲜皇浆成为冻干粉。

(3)按配方比例将皇浆冻干粉与鲨烯、人参皂甙和其他适量营养辅料称量，由复合员复合投料，混匀，检查合格后，进入下道工序。在洁净室进行，温度控制在40℃以内。

(4)溶胶

a.浓缩锅在生产前应进行15～30分钟蒸汽杀菌，包括进出口关口。

b.用真空压力将预热至80℃的纯化水、甘油、对羟基苯甲酸乙酯酒精溶液、明胶倒入吸料桶内经管道吸入浓缩锅。

c.加热溶解，蒸汽压力不得超过0.1Mpa，升温时间不宜超过20分钟。

d.继续升温至额定温度时进行脱泡，脱泡务必完全，以防止制丸时产生皮泡。

e.过滤、出料，压力不得超过0.06Mpa，温度应控制在60℃±2℃。

(5)在胶囊机械中，按软胶囊制剂工艺，压制成胶囊。室温调整到24-26℃，相对湿度控制在60％以内。

(6)低温干燥温度控制在20-32℃，相对湿度控制在45％以内，并开启净化流通风，进行干燥。

(7)高温干燥开启去湿机系统，向隧道烘房输送干燥风源。烘房温度控制在40℃左右，相对湿度控制在28％以内。

(8)整理先开启紫外线灭菌15-30分钟。根据产品质量标准把油泡丸、皮泡丸、杂质丸、不规则丸、粘连丸等剔除，检出的废丸送到溶胶间处理回收。在产品交接卡上写明品名、日期、班次、数量、重量、操作工号，并按药品胶囊制剂的方法检验，合格后，送入包装程序。

(9)包装包装前包装场地用紫外线灯杀菌15-30分钟，工器具用75％浓度酒精消毒。直接接触胶丸的包装材料在生产前进行紫外线灯杀菌1小时。按工艺卫生制度，穿戴衣裤、鞋帽，手消毒。室温控制在20-25℃以内。再作理化与微生物检验，应符合食品卫生有关规定。

具体实施方式：

实施例一、

1.严格控制原辅材料的质量。

2.将鲜皇浆冻干处理，使半流体的鲜皇浆成为冻干粉。

3.按配方比例将皇浆冻干粉30％与鲨烯60％、人参皂甙5％和其他营养辅料5％称量，由复合员复合投料，混匀，检查合格后，进入下道工序。在洁净室进行，温度控制在30℃。

4.溶胶

4.1浓缩锅在生产前应进行30分钟蒸汽杀菌，包括进出口关口。

4.2用真空压力将预热至80℃的纯化水、甘油、对羟基苯甲酸乙酯酒精溶液、明胶倒入吸料桶内经管道吸入浓缩锅。

4.3加热溶解，蒸汽压力不得超过0.1Mpa，升温时间不宜超过20分钟。

4.4继续升温至额定温度时进行脱泡，脱泡务必完全，以防止制丸时产生皮泡。

4.5过滤、出料，压力不得超过0.06Mpa，温度应控制在60℃±2℃。

5.在胶囊机械中，按软胶囊制剂工艺，压制成胶囊。室温调整到26℃，相对湿度控制在60％。

6.低温干燥温度控制在32℃，相对湿度控制在45％，并开启净化流通风，进行干燥。

7.高温干燥开启去湿机系统，向隧道烘房输送干燥风源。烘房温度控制在40℃，相对湿度控制在28％。

8.整理先开启紫外线灭菌30分钟。根据产品质量标准把油泡丸、皮泡丸、杂质丸、不规则丸、粘连丸等剔除，检出的废丸送到溶胶间处理回收。在产品交接卡上写明品名、日期、班次、数量、重量、操作工号，并按药品胶囊制剂的方法检验，合格后，包装得成品。

9.包装包装前包装场地用紫外线灯杀菌30分钟，工器具用75％浓度酒精消毒。直接接触胶丸的包装材料在生产前进行紫外线灯杀菌1小时。按工艺卫生制度，穿戴衣裤、鞋帽，手消毒。室温控制在25℃。再作理化与微生物检验，还应符合食品卫生有关规定。

实施例二、

1.严格控制原辅材料的质量。

2.将鲜皇浆冻干处理，使半流体的鲜皇浆成为冻干粉。

3.按配方比例：将皇浆冻干粉25％与鲨烯50％、人参皂甙5％和其他营养辅料20％称量，由复合员复合投料，混匀，检查合格后，进入下道工序。

在洁净室进行，温度控制在25℃。

4.溶胶

4.1浓缩锅在生产前应进行25分钟蒸汽杀菌，包括进出口关口。

4.2用真空压力将预热至80℃的纯化水、甘油、对羟基苯甲酸乙酯酒精溶液、明胶倒入吸料桶内经管道吸入浓缩锅。

4.3加热溶解，蒸汽压力不得超过0.1Mpa，升温时间不宜超过20分钟。

4.4继续升温至额定温度时进行脱泡，脱泡务必完全，以防止制丸时产生皮泡。

4.5过滤、出料，压力不得超过0.06Mpa，温度应控制在60℃。

5.在胶囊机械中，按软胶囊制剂工艺，压制成胶囊。室温调整到20℃，相对湿度控制在60％。

6.低温干燥温度控制在20℃，相对湿度控制在40％，并开启净化流通风，进行干燥。

7.高温干燥开启去湿机系统，向隧道烘房输送干燥风源。烘房温度控制在40℃，相对湿度控制在20％。

8.整理先开启紫外线灭菌30分钟。根据产品质量标准把油泡丸、皮泡丸、杂质丸、不规则丸、粘连丸等剔除，检出的废丸送到溶胶间处理回收。在产品交接卡上写明品名、日期、班次、数量、重量、操作工号，并按药品胶囊制剂的方法检验，合格后，包装得成品。

9.包装包装前包装场地用紫外线灯杀菌30分钟，工器具用75％浓度酒精消毒。直接接触胶丸的包装材料在生产前进行紫外线灯杀菌1小时。按工艺卫生制度，穿戴衣裤、鞋帽，手消毒。室温控制在20℃以内。再作理化与微生物检验，还应符合食品卫生有关规定。

实施例三、

1.严格控制原辅材料的质量。

2.将鲜皇浆冻干处理，使半流体的鲜皇浆成为冻干粉。

3.按配方比例：将皇浆冻干粉30％与鲨烯58％、人参皂甙10％和其他营养辅料2％称量，由复合员复合投料，混匀，检查合格后，进入下道工序。

在洁净室进行，温度控制在28℃。

4.溶胶

4.1浓缩锅在生产前应进行30分钟蒸汽杀菌，包括进出口关口。

4.2用真空压力将预热至80℃的纯化水、甘油、对羟基苯甲酸乙酯酒精溶液、明胶倒入吸料桶内经管道吸入浓缩锅。

4.3加热溶解，蒸汽压力不得超过0.1Mpa，升温时间为15分钟。

4.4继续升温至额定温度时进行脱泡，脱泡务必完全，以防止制丸时产生皮泡。

4.5过滤、出料，压力不得超过0.06Mpa，温度应控制在60℃。

5.在胶囊机械中，按软胶囊制剂工艺，压制成胶囊。室温调整到20℃，相对湿度控制在55％。

6.低温干燥温度控制在18℃，相对湿度控制在30％，并开启净化流通风，进行干燥。

7.高温干燥开启去湿机系统，向隧道烘房输送干燥风源。烘房温度控制在40℃，相对湿度控制在20％。

8.整理先开启紫外线灭菌30分钟。根据产品质量标准把油泡丸、皮泡丸、杂质丸、不规则丸、粘连丸等剔除，检出的废丸送到溶胶间处理回收。在产品交接卡上写明品名、日期、班次、数量、重量、操作工号，并按药品胶囊制剂的方法检验，合格后，包装得成品。

9.包装包装前包装场地用紫外线灯杀菌30分钟，工器具用75％浓度酒精消毒。直接接触胶丸的包装材料在生产前进行紫外线灯杀菌1小时。按工艺卫生制度，穿戴衣裤、鞋帽，手消毒。室温控制在28℃以内。再作理化与微生物检验，还应符合食品卫生有关规定。