飞蓬酯乙及其制备方法和在制药中的应用

摘要

本发明涉及结构式(I)的新咖啡酸酯类化合物飞蓬酯乙，它可以菊科飞蓬属植物灯盏细辛Erigeron breviscapus(Vant.)Hand.－Mazz.的干燥全草中提取分离得到。化合物(I)具有抗血小板聚集、抗氧化和扩张血管活性，可作为治疗心脑血管疾病药物。

说明书

1、技术领域

本发明涉及一种具有治疗心脑血管疾病活性的新化合物飞蓬酯乙(Erigeroster B)，具体地说是从灯盏细辛中提取的新化合物飞蓬酯乙(Erigeroster B)、制备方法及在制药中的应用。

2、背景技术

心脑血管疾病日益增多，其病情严重，是人类病死的第一原因，因而其发病与治疗也受到医药界和社会的格外关注。加以经济发展，人口老龄化，老年人的心脑血管疾病又多，使问题更尖锐。灯盏细辛又名灯盏花，系菊科飞蓬属植物短葶飞蓬Erigeron breviscapus(Vant.)Hand.-Mazz.的干燥全草，具有散寒解表，祛风除湿，活络止痛的功效。云南药物研究所张人伟等首次从灯盏细辛中分离到黄酮类活性成分灯盏乙素，并把灯盏花乙素为主、含少量灯盏甲素(芹菜素苷)的混合物称为灯盏花素(breviscapin)[张人伟，杨生元，林永月，药学学报(1981)，16(1)，68-6]。除了灯盏乙素外，专利CN1136434公开了二咖啡酸奎宁酸酯类化合物3，5-二咖啡酰基奎宁酸和3，4-二咖啡酰基奎宁酸(3，4-dicaffeoyl quinic acid)]。CN1064236C则公开了焦袂康酸(promenonic acid)及飞蓬苷(erigenoide)在治疗心脑血管疾病方面应用。张卫东等申请了从灯盏细辛中分离到的活性成分1-(2’-γ-吡喃酮)-6-咖啡酰基-β-D-葡萄糖苷的制剂和制备方法的专利CN1252276。以上公开的是已知化合物新用途的专利，没有新化合物专利。

3、发明内容：

本发明针对现有技术的空白，本发明公开新活性成分飞蓬酯乙，本发明

提供了如下技术方案：

具有如下的结构式化合物飞蓬酯乙：

                         Erigoster B

                          飞蓬酯乙

本发明提供了制备权利要求1的化合物的方法，取灯盏细辛(Erigeronbrevicapus)的全草或地上部分，粉碎，用0-95％乙醇水溶液或丙酮水溶液提取三次，合并三次提取液，减压浓缩。浓缩液上大孔树脂层析，先用水洗脱，再用40％，收集40％乙醇洗脱液后减压浓缩，此部分用Sephdex HL-20反复纯化便飞蓬酯乙(Erigeroster B)。

本发明还提供了含化合物飞蓬酯乙(Erigeroster B)作为活性成分的治疗心脑血管疾病的药用组合物。

本发明同时提供了化合物飞蓬酯乙(Erigeroster B)在制备预防或治疗癌症药物中的应用。

化合物结构数据如下：分子式，C₂₆H₂₄O₁₃，分子量，544.46，[α]_D，+37.14°(0.00175，丙酮)；IR(KBr压片)：2970.57-3645.31，1694.68，1632.87，1520.46，1605.84，1283.57，1162.82cm^-1；UVλ_max(MeOH)：330(22018)，302(14620)，244(5966)，218(12267)nm；¹HNMR(500Hz，pyridine-d₅，ppm，J in Hz)：2.84-2.93(2H，m，H-2α，H-2β)，6.03(1H，t，5.1，H-3)，4.72(1H，t，5.1，H-4)，4.93(1H，t，4.3，H-5)，5.07(1H，m，H-6)，5.17(1H，dd，12.3，2.7，H-9a)，6.04(1H，dd，8.8，12.3，H-9b).6.60，7.14(each 1H，d，15.8，H-2’，H-2”)，8.09，8.06(each 1H，d，15.8，H-3’，H-3”)，7.31，7.31(each 1H，dd，8.0，1.5，H-5’，H-5”)，7.18，7.18(each 1H，d，8.0，H-6’，H-6”)，7.80，7.56(each 1H，brs，H-9’，H-9”)。¹³CNMR(100.62Hz，pyridine-d₅，ppm)：104.82(C-1)，38.24(C-2)，67.49(C-3)，67.40(C-4)，78.01(C-5)，80.45(C-6)，64.18(C-9)，170.97(C-10)，167.95，167.77(C-1’，C-1”)，115.97，115.23(C-2’，C-2”)，146.25，146.21(C-3’，C-3”)，127.51，127.28(C-4’，C-4”)，122.57，122.31(C-5’，C-5”)，116.84，116.79(C-6’，C-6”)，150.37，150.186(C-7’，C-7”)，147.62，147.59(C-8’，C-8”)，116.13，115.89(C-9’，C-9”)。

该化合物具有独特结构骨架，虽然都具有两个咖啡酰基，但不同于结构已知的咖啡酰基奎宁酸，是结构新奇的化合物。

本发明公开飞蓬酯乙的制备方法，取灯盏细辛(Erigeron brevicapus)的全草或地上部分，粉碎，用0-95％乙醇水溶液或丙酮水溶液提取三次，合并三次提取液，减压浓缩。浓缩液上大孔树脂层析，先用水洗脱，再用40％，收集40％乙醇洗脱液后减压浓缩，此部分用Sephdex HL-20反复纯化便飞蓬酯乙(Erigeroster B)。

本发明公开飞蓬酯乙的药理活性研究结果，通过药理实验表明，飞蓬酯乙对体外肝组织匀浆脂质过氧化生成有明显的抑制作用，表明它们具有抗氧

化活性。对ADP诱导大鼠的血小板聚集具有一定的抑制作用。对苯肾上腺素诱导兔主动脉收缩具有舒张作用，表明它们具有扩张血管作用。

表1.飞蓬酯乙对大鼠肝匀浆MDA含量的影响(i/n vitro)

药品        剂量      N             MDA含量(nmol/g组     抑制

                                    织湿重)              率(％)

            空白对    32            81±21               -

            照

F(飞蓬酯    10        12            67±10*             18

乙)         μg/ml

            30        10            64±11*             22

            μg/ml

            100       10            52±6**             36

            μg/ml*P＜0.05，**P＜0.01vs空白对照组。

     表2.飞蓬酯乙对ADP诱导大鼠血小板聚集的作用

药品          剂量         n     最大聚     最大聚      平均聚集    平均聚集

              (μg/ml)           集率       集抑制      率(％)       抑制率

                                 (％)       率(％)                   (％)

              溶剂对照     7     79±80     0           71±9

              250          6     75±7      5           54±18*      24飞蓬酯乙

              750          7     71±9      10          48±25*      32P＜0.05，**P＜0.01vs溶剂对照组。

     表3.飞蓬酯乙对苯肾上腺素诱导兔主动脉收缩的影响药品            浓度     样      苯肾上腺素诱发血管张    舒张

            μg/     本             力(g)            百分

            ml       数     给药前对照   给药后      率溶剂对照                 1      4.7±0.78    4.3±0.6    8％

                     5F(飞蓬酯乙)     100      9      4.4±0.6     3.±                 23％

                                         0.6****P＜0.01vs给药前对照

鉴于飞蓬酯乙具有以上药理活性，因此预想飞蓬酯乙可用与治疗心脑血管疾病。

本发明涉及的化合物可单独或与其它药用许可的的辅料按现有技术制成片剂、胶囊、滴丸、颗粒剂等口服剂型。将飞蓬酯乙单独或与其它药用许可的辅料配合后按现有方法制成注射液或冻干剂。

化合物飞蓬酯(Erigeroster B)的口服剂型制备方法是将提取物单独或与其它药用许可的辅料配合后按现有方法制成片剂、胶囊等剂型。

化合物飞蓬酯(Erigeroster B)的注射剂的制备方法是将提取物单独或与其它药用许可的辅料配合后按现有方法制成注射液或冻干剂。

附图说明：图1为本发明化合物飞蓬酯乙的结构图。

为了更好地理解本发明，本发明结合实施例进一步说明本发明的实质性内容，但本发明的内容并不局限于此。

实施例1：飞蓬酯乙的提取制备工艺

取灯盏细辛(Erigeron brevicapus)的全草或地上部分50kg，粉碎，用70％

丙酮水溶液提取三次，合并三次提取液，减压浓缩。浓缩液上大孔树脂层析，先用水洗脱，再用40％，收集40％乙醇洗脱液后减压浓缩得提取物800g，此部分用Sephdex HL-20反复纯化便飞蓬酯乙(Erigeroster B)150g。

实施例2、飞蓬酯乙的片剂的制备工艺

            片剂处方飞蓬酯乙                           10g淀粉                               50g10％淀粉浆                         10g硬脂酸镁                           2g

将飞蓬酯乙与淀粉混合均匀后，加如10％的淀粉浆制成软材，过14目筛制粒，在70-80℃温度下干燥，过12目筛整粒，加硬脂酸镁混合后，压制成1000片，即得。每片含有效提取物10mg。

实施例3、飞蓬酯乙的胶囊剂制备工艺

         胶囊剂处方飞蓬酯乙                           10g淀粉                               50g硬脂酸镁                           2g

加处方量飞蓬酯乙，加80℃干燥的淀粉和硬脂酸镁混合均匀后，分装成1000粒胶囊，每粒胶囊含有提取物10mg。

实施例4.飞蓬酯乙的注射剂制备

         注射剂处方飞蓬酯                             10g氯化钠                             85g亚硫酸钠                           2g

10g飞蓬酯乙溶解在5000ml冷的注射用蒸馏水中，85g氯化钠、2g亚硫酸钠混合后溶解在1000ml热的注射用蒸馏水中。将两种溶液混合，加水至10000ml，调节pH值在5.0-7.0滤棒过滤，膜过滤，澄明度检查合格后加氮气封瓶，在115℃，10atm压力下灭菌25分钟。

实施例5.飞蓬酯乙的注射用冻干剂制备

        片剂处方飞蓬酯乙                           10g碳酸氢钠                           2g甘露醇                             252g注射用水                           加至2000ml

按处方取辅料碳酸氢钠、氯化钠、甘露醇，加注射用水1600毫升溶解，加活性炭3.2g，吸附30分钟除热原，过滤除去活性碳，在滤液中加入飞蓬酯乙，超声处理使溶解，用1N盐酸调节pH为5.0～7.0，微孔滤膜滤过，加注射用水至2000ml，分装为1000支，冷冻干燥，上塞，轧盖，即得。