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法律状态
2011-07-06
未缴年费专利权终止 IPC(主分类):C07H19/01 授权公告日:20060329 终止日期:20100426 申请日:20010426
专利权的终止
2008-05-21
专利申请权、专利权的转移(专利权的转移) 变更前: 变更后: 登记生效日:20080411 申请日:20010426
专利申请权、专利权的转移(专利权的转移)
2006-03-29
授权
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2004-09-22
专利申请权、专利权的转移专利申请权的转移 变更前: 变更后: 登记生效日:20040820 申请日:20010426
专利申请权、专利权的转移专利申请权的转移
2003-11-12
实质审查的生效
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2003-08-27
公开
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发明背景
本发明涉及一系列新的具有杀螨，杀虫和抗蠕虫活性价值的13-取代的米尔螨素(milbemycin)衍生物，上述活性使它们非常适合用于保护植物和动物，其可以是人或不是人的动物以免受寄生虫的侵害。本发明还提供了应用这些化合物的方法和组合物以及它们的制备方法。
现有的几类具有16-元大环内酯环结构的已知化合物是通过各种微生物发酵或通过上述天然发酵产物的化学衍生半合成获得的，并表现出杀螨，杀虫，抗蠕虫和抗寄生活性。米尔螨素和阿维菌素是上述几类已知化合物中的两个实例，但还存在其它化合物且在现有技术中通常将它们用不同化学名称或代码区分。上述各种大环内酯化合物的名称通常是取自可产生各类天然发生物质的微生物名称或代码，而后这些名称已扩展至包括了同类物质的化学衍生物，结果是普遍地还没有制定出上述化合物的标准化系统命名原则。
为避免混淆，这里将采用命名原则的标准化体系，其遵守国际纯化学和应用化学联合会(IUPAC)，有机化学分会，有机化学命名委员会推荐的命名有机化学衍生物的通用规则，并以此处被定义为“米尔螨素”的假定母体化合物即由下式(A)代表的化合物为基础：其中Ra和Rb都代表氢原子。
为避免疑问，上式(A)中还显示了大环内酯环系的位置编号，它们是应用于本发明化合物的最相关的那些位置。
天然产生的米尔螨素是已知的具有抗蠕虫，杀螨和杀虫活性的系列大环内酯类化合物。米尔螨素D公开在美国专利号US 4,346,171中，其中将它称作“化合物B-41D”，以及米尔螨素A3和A4公开在美国专利号US 3,950,360中。这些化合物可由上式(A)表示其中在13位的Ra是氢原子以及25位的Rb是甲基，乙基或异丙基，分别将这些化合物称为米尔螨素A3，米尔螨素A4和米尔螨素D。13位代表氢原子以及25位被仲丁基取代的米尔螨素类似物公开在美国专利号US 4,173,571中，其中将它称作“13-脱氧-22，23-二氢阿维菌素B1a苷元”。
其后，已经制备出原始米尔螨素和阿维菌素的各种衍生物并测定了它们的活性。例如，5-酯化米尔螨素公开在美国专利号US4,201,861，US4,206,205，US4,173,571，US4,171,314，US4,203,976，US4,289,760，US4,457,920，US4,579,864和US4,547,491，欧洲专利公开号EP 0008184，EP 0102721，EP0115930，EP 0180539和EP 0184989以及日本专利申请公开号(即待审公开)JP57-120589和59-16894。
美国专利号US4,423,209中公开了13-羟基-5-酮米尔螨素衍生物。在美国专利号US 4,547,520和欧洲专利公开号EP0203832中公开了米尔螨素5-肟衍生物。
与本发明特别相关的是13位含有酯键的米尔螨素以及其中上式(A)化合物的13-羟基已被酯化的大量化合物公开在欧洲专利公开号EP0186043中，其中公开了各种羧酸如链烷酸的酯。欧洲专利公开号EP0246739，EP0675133和EP0765879中公开了其它13位上含有酯键的米尔螨素衍生物，它们可能代表了最接近的现有技术。然而，它们与本发明化合物的区别是13位的基团类型不同，而欧洲专利公开号EP0765879的情况下是5位的基团类型不同。
上述引用的各类与米尔螨素相关的大环内酯化合物都已公开了具有一种或多种活性如抗菌，抗蠕虫，杀体外寄生虫，杀螨或用作其它农药制剂。然而，仍然需要提供抗一种或多种农业和园艺有害动物的更高活性的上述试剂。
目前已发现可通过适当选择大环内酯环系上的取代基，特别是13位取代基的组合提高上述米尔螨素相关衍生物的活性。特别是，目前已发现如下所述可通过在13位上适当选择某些特定的酯基提高了这些化合物的活性。已发现本发明化合物比现有技术化合物具有更优的农药活性，以及多数本发明化合物具有非常显著的更高的活性。
发明概述
因此，本发明的目的之一是提供了上述提高活性的米尔螨素衍生物。
本发明的另一目的是提供了上述化合物的制备方法。
本发明的再一个目的是提供了杀螨，杀虫和抗蠕虫组合物以及上述化合物的使用方法。
本发明的其它目的和优点将随着说明的继续变得更加清晰。
因此本发明提供了式(I)化合物及其农业，园艺，药物和兽医领域可接受的盐：
其中：
R1代表甲基，乙基，异丙基或仲丁基；
R2代表氢原子或具有1-6个碳原子的烷基；
R3代表氢原子，任选被1或2个各自独立地选自下述定义的取代基A的取代基取代的1-6个碳原子的烷酰基，任选被1或2个各自独立地选自下述定义的取代基A的取代基取代的3-5个碳原子的烯酰基，任选被1或2个各自独立地选自下述定义的取代基A的取代基取代的3-5个碳原子的炔酰基，烷基磺酰基其中烷基部分具有1-6个碳原子，或烷氧基羰基其中烷氧基部分具有1-6个碳原子，或
R2和R3与它们连接的氮原子一起代表形成饱和的含有一个环中的氮原子和任选含有另一个选自硫原子，氧原子和氮原子的环中杂原子的4-至6-元杂环基，所述饱和的杂环任选被1或2个各自独立地选自下述定义的取代基B的取代基取代；
-a-与它连接的碳原子一起形成3-至6-元环烷基；
取代基A选自下列一组基团：卤素原子，氰基，羟基，1-6个碳原子的烷氧基，1-6个碳原子的烷硫基，1-6个碳原子的烷酰氧基，任选被1或2个选自下列基团的取代基取代的氨基：1-6个碳原子的烷基，1-6个碳原子的烷酰基，烷基部分含有1-6个碳原子的烷基磺酰基和烷氧基部分含有1-6个碳原子的烷氧基羰基，以及饱和的含有一个环中的氮原子和任选含有另一个选自硫原子，氧原子和氮原子的环中杂原子的4-至6-元杂环基，所述杂环基任选被1或2个各自独立地选自下述定义的取代基B的取代基取代；
取代基B选自下列一组基团：卤素原子，氰基，羟基，1-6个碳原子的烷氧基，1-6个碳原子的烷硫基，1-6个碳原子的烷酰氧基，任选被1或2个选自下列基团的取代基取代的氨基：1-6个碳原子的烷基，1-6个碳原子的烷酰基，烷基部分含有1-6个碳原子的烷基磺酰基和烷氧基部分含有1-6个碳原子的烷氧基羰基，以及氧代基。
本发明还进一步提供了抗蠕虫，杀螨和杀虫组合物包括抗蠕虫，杀螨和杀虫化合物和农业，园艺，药物或兽医上可接受的载体或稀释剂，其中所述化合物选自式(I)化合物及其农业，园艺，药物或兽医上可接受的盐。
本发明还提供了保护植物和动物，其可以是人或不是人的动物免受选自蜱螨，蠕虫和昆虫的寄生虫侵害的方法，该方法包括将活性化合物施用至所述植物或动物或所述植物的各部分或繁殖材料(例如种子)或施用至包括所述植物，所述动物或所述植物的各部分或所述植物的繁殖材料的环境中，其中活性化合物选自式(I)化合物及其农业，园艺，药物或兽医上可接受的盐。
本发明还提供了式(I)化合物或其药物或兽医上可接受的盐在制备用于保护动物，可以是人或不是人的动物免受选自蜱螨，蠕虫和昆虫的寄生虫侵害的药剂的应用。
上述的抗蠕虫、杀螨和杀虫应用包括：
(i)在兽医方面的应用，特别是抗寄生在哺乳动物上的蠕虫，蜱螨或昆虫，特别是跳蚤，以及最优选抗猫栉头蚤和狗栉头蚤。
(ii)在农业方面的应用，其中可杀死侵害农作物的有害昆虫；
(iii)杀取食木材的有害昆虫如白蚁的应用；以及
(iv)预防和治疗对人类有威胁的昆虫的应用。
发明详述
R2定义中的烷基以及在取代基A和B定义中氨基上任选的取代基烷基都代表1-6个碳原子的直链或支链烷基，其实例包括甲基，乙基，丙基，异丙基，正丁基，仲丁基，叔丁基，正戊基，异戊基，2-甲基丁基，新戊基，1-乙基丙基，正己基，异己基，4-甲基戊基，3-甲基戊基，2-甲基戊基，1-甲基戊基，3，3-二甲基丁基，2，2-二甲基丁基，1，1-二甲基丁基，1，2-二甲基丁基，1，3-二甲基丁基，2，3-二甲基丁基和2-乙基丁基。优选具有1-3个碳原子的烷基，并最优选甲基。
在R3的定义中任选被1或2个取代基A取代的烷酰基和在取代基A和B的定义中氨基上任选的取代基烷酰基都是直链或支链的1-6个碳原子的烷酰基，它们的实例包括甲酰基，乙酰基，丙酰基，丁酰基，异丁酰基，戊酰基，异戊酰基，新戊酰基和己酰基。优选1-4个碳原子的烷酰基并更优选乙酰基。
在R3的定义中任选被1或2个取代基A取代的烯酰基可以是直链或支链的3-5个碳原子的烯酰基。这些基团的实例包括丙烯酰基，丁烯酰基和戊烯酰基，其中特别优选4-戊烯酰基。
在R3的定义中任选被1或2个取代基A取代的炔酰基可以是直链或支链的3-5个碳原子的炔酰基。这些基团的实例包括丙炔酰基，丁炔酰基和戊炔酰基，其中特别优选4-戊炔酰基。
在R3的定义中烷基磺酰基以及在取代基A和B的定义中氨基上任选的取代基烷基磺酰基都是直链或支链的1-6个碳原子的烷基磺酰基，它们的实例包括甲磺酰基，乙磺酰基，丙磺酰基，异丙磺酰基，丁磺酰基，戊磺酰基和己磺酰基。其中，优选1-3个碳原子的烷基磺酰基，以及特别优选甲磺酰基。
取代基A和B定义中的烷氧基是直链或支链的1-6个碳原子的烷氧基，它们的实例包括甲氧基，乙氧基，丙氧基，异丙氧基，丁氧基，戊氧基和己氧基。其中，优选具有1-4个碳原子的烷氧基，以及特别优选甲氧基。
在R3的定义中烷氧基羰基以及在取代基A和B的定义中氨基上任选的取代基烷氧基羰基都代表被1-6个碳原子的烷氧基取代的羰基，它们的实例包括甲氧基羰基，乙氧基羰基，丙氧基羰基，异丙氧基羰基，丁氧基羰基，仲丁氧基羰基，叔丁氧基羰基，异丁氧基羰基，戊氧基羰基和己氧基羰基。其中，优选烷氧基部分具有1-4个碳原子的烷氧基羰基以及特别优选甲氧基羰基。
当R2和R3与它们连接的氮原子一起代表饱和的杂环基或当取代基A代表饱和的杂环基时，该基团是含有一个环中的氮原子和任选含有另一个选自硫原子，氧原子和氮原子的环中杂原子的4-至6-元杂环基，所述饱和的杂环任选被1或2个各自独立地选自取代基B的取代基取代。这些基团的实例包括氮杂环丁烷，吡咯烷基，吡咯啉基，咪唑烷基，吡唑烷基，噁唑烷基，噻唑烷基，哌啶基，哌嗪基，吗啉基和硫代吗啉基。其中，优选氮杂环丁烷，吡咯烷基，噁唑烷基和哌啶基。当R2和R3与它们连接的氮原子一起代表饱和的杂环基时，特别优选吡咯烷-1-基和噁唑烷-1-基。当取代基A代表饱和的杂环基时，特别优选吡咯烷基。
当R2和R3与它们连接的氮原子一起代表饱和的如上定义并例举的杂环基或当取代基A代表饱和的如上定义并例举的杂环基时，这些基团任选被1或2个各自独立地选自取代基B的取代基取代。在取代基B中，特别优选氧代基。上述取代的饱和杂环基的实例包括氮杂环丁烷酮基，2-吡咯烷酮基，2-噁唑烷酮基和2-哌啶酮基。当R2和R3与它们连接的氮原子一起代表被氧基取代的饱和的杂环基时，特别优选2-吡咯烷酮-1-基和2-噁唑烷酮-3-基。当取代基A代表被氧基取代的饱和的杂环基时，特别优选2-氧代吡咯烷基。
当-a-与它们连接的碳原子一起代表环烷基即3-至6-元环烷基时，它们的实例包括环丙基，环丁基，环戊基和环己基。其中，优选4-或5-元环烷基，并特别优选环戊基。
当取代基A或取代基B代表卤素原子时，其实例包括氟，氯，溴和碘原子，其中特别优选氟原子。
当取代基A或取代基B代表烷硫基，也就是直链或支链的1-6个碳原子的烷硫基时，它们的实例包括甲硫基，乙硫基，丙硫基，异丙硫基，丁硫基，戊硫基和己硫基。其中，优选1-3个碳原子的烷硫基，并特别优选甲硫基。
当取代基A或取代基B代表烷酰氧基，也就是氧原子被如上定义并例举的直链或支链的1-6个碳原子的烷酰基取代。这些烷酰氧基的实例包括甲酰氧基，乙酰氧基，丙酰氧基，丁酰氧基和异丁酰氧基，其中优选乙酰氧基。
当取代基A或取代基B代表被1或2个取代基取代的氨基时，优选的实例包括被1或2个选自下列基团的取代基取代的氨基：1-3个碳原子的烷基，1-4个碳原子的烷酰基，1-3个碳原子的烷基磺酰基和2-5个碳原子的烷氧基羰基。在这些被取代的氨基中，特别优选乙酰基氨基，N-甲磺酰基氨基，N-甲氧基羰基氨基和N-乙酰基-N-甲基氨基。
通过常规处理使用相应的酸可将本发明式(I)化合物转化为农业，园艺，药物或兽医上可接受的盐，以及这些盐也构成本发明的一部分。例如，室温下在溶剂(例如醚、酯或醇，优选醚或醇如二乙醚或甲醇)中用酸处理式(I)化合物1-30分钟，然后过滤或浓缩反应混合物获得相应的盐。这些盐的实例包括无机酸盐如氢卤酸盐(例如盐酸盐，氢溴酸盐和氢碘酸盐)，硝酸盐，高氯酸盐，硫酸盐和磷酸盐；有机酸盐如低级链烷磺酸盐(例如甲磺酸盐，三氟甲磺酸盐和乙磺酸盐)，芳基磺酸盐(例如苯磺酸盐和对甲苯磺酸盐)，乙酸盐，丙酸盐，丁酸盐，苹果酸盐，富马酸盐，琥珀酸盐，柠檬酸盐，抗坏血酸盐，酒石酸盐，草酸盐和马来酸盐；以及氨基酸盐如甘氨酸盐，赖氨酸盐，精氨酸盐，鸟氨酸盐，谷氨酸盐和天冬氨酸盐。
当与式(I)的游离化合物相比活性不是不可接受的低且与式(I)的游离化合物相比毒性不是不可接受的高的情况下，本发明式(I)化合物的盐应该是农业，园艺，药物或兽医上可接受的盐。这可通过与式(I)游离化合物的比较活性和毒性试验而容易地确定。
本发明式(I)化合物及其盐含有不对称碳，因此它们存在光学异构体。对于本发明化合物来说，各所述异构体以及所述异构体的混合物都由一个通式表示，即式(I)。因此，本发明既包括单个异构体还包括任意比例的异构体混合物，包括外消旋混合物。式(I)化合物的特定的立体异构体可由常规方法使用旋光起始物制备或通过常规旋光拆分方法从非立体有择合成路线获得的立体异构体混合物中分离。
当暴露于空气中或在重结晶吸收水或形成水合物时本发明式(I)化合物及其盐常常会吸收水分，以及上述水合物也包括在本发明范围内。相应的，本发明化合物还可吸收某些其它溶剂产生溶剂合物，这也构成本发明的一部分。
本发明化合物的优选结构类型是那些式(I)化合物及其农业，园艺，药物或兽医上可接受的盐其中：
(A)R1是甲基或乙基；
(B)R2是氢原子或1-3个碳原子的烷基；
(C)R2是氢原子或甲基；
(D)R2是氢原子；
(E)R3是氢原子，
具有1-4个碳原子的，任选各自独立的选自下列基团的1或2个取代基取代的烷酰基：卤素原子，氰基，羟基，1-3个碳原子的烷氧基，1-3个碳原子的烷硫基，1-4个碳原子的烷酰氧基，任选被1或2个选自下列基团的取代基取代的氨基：1-3个碳原子的烷基，1-4个碳原子的烷酰基，烷基部分含有1-3个碳原子的烷基磺酰基和烷氧基部分含有1-4个碳原子的烷氧基羰基，以及饱和的含有一个环中的氮原子和任选含有另一个选自硫原子，氧原子和氮原子的环中杂原子的4-至6-元杂环基，所述杂环基任选被氧基取代，
3-5个碳原子的烷酰基，
烷基部分含有1-3个碳原子的烷基磺酰基，或
烷氧基部分含有2-5个碳原子的烷氧基羰基；
(F)R3是氢原子或任选被选自下列基团的取代基取代的乙酰基：卤素原子，氰基，羟基，1-3个碳原子的烷氧基，1-3个碳原子的烷硫基，1-4个碳原子的烷酰氧基，氨基，任选被1或2个选自下列基团的取代基取代的氨基：1-3个碳原子的烷基，1-4个碳原子的烷酰基，烷基部分含有1-3个碳原子的烷基磺酰基和烷氧基部分含有1-4个碳原子的烷氧基羰基，以及饱和的含有一个环中的氮原子和任选含有另一个选自硫原子，氧原子和氮原子的环中杂原子的4-至6-员杂环基，所述杂环基任选被氧基取代；
(G)R3是氢原子，乙酰基，羟基乙酰基，甲氧基乙酰基，乙氧基乙酰基或三氟乙酰基；
(H)R3是甲氧基乙酰基；
(I)R2和R3与它们连接的氮原子一起形成饱和的含有一个环中的氮原子和任选含有另一个选自硫原子，氧原子和氮原子的环中杂原子的4-至6-元杂环基，所述饱和的杂环任选被氧基取代；
(J)R2和R3与它们连接的氮原子一起形成2-吡咯烷酮-1-基或2-噁唑烷酮-3-基；
(K)R2和R3与它们连接的氮原子一起形成2-噁唑烷酮-3-基；
(L)-a-与其连接的碳原子一起形成环丁基或环戊基；
(M)-a-与其连接的碳原子一起形成环戊基。
优选其中R2选自上述(B)组基团的式(I)化合物，更优选其中R2选自(C)组基团的式(I)化合物以及最优选其中R2选自(D)组基团的式(I)化合物。
优选其中R3选自上述(E)组基团的式(I)化合物，更优选其中R3选自(F)组基团的式(I)化合物，还更优选其中R3选自(G)组基团的式(I)化合物以及最优选其中R3选自(H)组基团的式(I)化合物。
在R2和R3与它们连接的氮原子一起形成饱和的杂环基的式(I)化合物中，优选其中R2和R3与它们连接的氮原子一起代表如(I)中列出的基团的那些化合物，更优选其中R2和R3与它们连接的氮原子一起代表如(J)中列出的基团的那些化合物以及最优选其中R2和R3与它们连接的氮原子一起代表如(K)中列出的基团的那些化合物。
优选的化合物是那些其中R1如上述(A)中所述定义，R2和R3与它们连接的氮原子一起如上述(I)中所述定义以及-a-与其连接的碳原子一起如上述(L)中所述定义的化合物。
更优选的化合物是那些其中R1如上述(A)中所述定义，R2和R3与它们连接的氮原子一起如上述(J)中所述定义以及-a-与其连接的碳原子一起如上述(M)中所述定义的化合物。
最优选的化合物是那些其中R1如上述(A)中所述定义，R2和R3与它们连接的氮原子一起如上述(K)中所述定义以及-a-与其连接的碳原子一起如上述(M)中所述定义的化合物。
优选的化合物是那些其中R1如上述(A)中所述定义，R2如上述(B)中所述定义，R3如上述(E)中所述定义以及-a-与其连接的碳原子一起如上述(L)中所述定义的那些化合物。
更优选的化合物是那些其中R1如上述(A)中所述定义，R2如上述(C)中所述定义，R3如上述(F)中所述定义以及-a-与其连接的碳原子一起如上述(M)中所述定义的那些化合物。
还更优选的化合物是那些其中R1如上述(A)中所述定义，R2如上述(D)中所述定义，R3如上述(G)中所述定义以及-a-与其连接的碳原子一起如上述(M)中所述定义的那些化合物。
最优选的化合物是那些其中R1如上述(A)中所述定义，R2如上述(D)中所述定义，R3如上述(H)中所述定义以及-a-与其连接的碳原子一起如上述(M)中所述定义的那些化合物。
下表用于解释本发明的有代表性的化合物但并不表示限制本发明的范围。
下表1中，使用的缩写如下：
Bu：丁基
iBu：异丁基
sBu：仲丁基
tBu：叔丁基
Et：乙基
Me：甲基
Pr：丙基
iPr：异丙基
OPA：2-氧代吡咯烷-1-基乙酰基
Pyl：4-戊炔酰基
表1
优选的本发明式(I)化合物是下列序号的化合物：No1，2，3，6，7，8，12，16，20，24，35，41，42，44，45，46，50，51，55，59，63，67，78，84，85，86，87，92，93，94，98，102，106，110，130，131，132，136，137，141，145，149，153，174，175，178，179，180，184，188，192，196，207，213，214，217，218，222，223，227，231，235，239，250，256，257，258，259，264，265，266，270，274，278，282，303，304，308，309，313，317，321，325，346，349和353。
更优选的本发明式(I)化合物是下列序号的化合物：No1，2，6，7，8，12，16，20，24，35，42，44，45，46，50，51，55，59，63，67，174，175，179，180，184，188，192，196，217，218，222，223，227，231，235，239，346，349和353。
最优选的本发明式(I)化合物是下列序号的化合物：No1，2，6，7，8，20，50，51，63，179，180，192，222，223，235和346。
本发明式(I)化合物可很容易地根据常规方法，例如根据下述反应路线A中所示的合成方法制备：
反应路线A
上式中，R1，R2和-a-如上定义，X是硝基或结构式为-NR2R3的基团其中R2和R3如上定义，以及除氢原子外R3a与R3的定义相同。
式(III)的起始化合物是本领域公知的15-羟基米尔螨素衍生物。它们的制备方法公开在，例如日本专利申请公开号昭-60-158191和EP-A-0147852中。
下式(VIb)起始化合物(其中R2，R3和-a-如上定义)可通过已知方法使用已知的下式(VIa)化合物制备。
例如，式(VIb)化合物的制备方法如下，其中R2是烷基以及R3是如上定义的结构式为R3a的基团：
首先，将式(VIa)化合物酯化以保护羰基。然后将所得酯化了的化合物进行催化还原使硝基转化为氨基。然后将上述氨基化合物或酰化或磺酰化使氨基转化为式-NHR3a的酰胺基其中R3a如上定义。然后在存在碱如氢化钠的条件下将所得酰胺化合物用烷基化剂如甲基碘处理以使结构式为-NHR3a的基团转化为结构式为-NR2R3a的基团，其中R2是烷基以及R3a如上定义。最后，将该酰胺化合物的酯基水解从而获得所需的式(VIb)化合物其中R2是烷基以及R3代表如上定义的基团R3a。
如需要合成式(VIb)化合物其中R2和R3与它们连接的氮原子一起形成饱和的4-至6-员杂环基时可根据需要调整上述合成方法。在这种情况下，仿效上述合成方法的三步中的第一步获得具有式-NHR3a的酰胺基的酰胺衍生物。然后将该酰胺衍生物与其中烷基被亲核离去基团如卤素原子取代的烷基化剂反应，随后加入碱如氢化钠进行分子内环化反应由此获得具有所需饱和杂环的式(VIb)化合物。
反应路线A的步骤的更详细的描述如下。
步骤A
在该步中，存在有机酸如三氟甲磺酸或三甲基甲硅烷基三氟磺酸盐的条件下将式(III)化合物与式(VIa)或(VIb)化合物反应获得式(IV)化合物。由于有机酸，如三氟甲磺酸或三甲基甲硅烷基三氟磺酸酯用作催化剂，因此原则上酸的用量并不要求大于催化量。然而，根据使用的式(VIa)或(VIb)的羧酸的反应活性，用量可在很宽的范围内变化。然而，通常，相对于式(VIa)或(VIb)的起始物来说有机酸的用量必须不大于等摩尔量。
某些情况下，将粉末状无机化合物加入反应混合物中可加速反应。具有上述特性的适合的无机化合物的实例包括：金属盐，如三氟甲磺酸铜，碘化亚铜，碘化锡，碘化钴或碘化镍；CeliteTM；硅胶或氧化铝。其中，优选铜盐，如三氟甲磺酸铜或碘化亚铜，以及最优选碘化亚铜。
在式(VIa)或(VIb)的羧酸衍生物仅是微溶情况下，可以使用上述相应的羧酸衍生物的甲硅烷基酯。例如，用式(VIa)或(VIb)的相应的羧酸化合物的三甲基甲硅烷基酯溶液处理式(III)起始化合物，上述的三甲基甲硅烷基酯是在存在三氟甲磺酸或三氟甲磺酸三甲基甲硅烷基酯作为催化剂的条件下由上述羧酸化合物与等摩尔量的烯丙基三甲基硅烷反应获得的。
反应通常并优选存在溶剂的条件下进行。该反应中对使用的溶剂特性没有严格的限制，条件是对反应或使用的试剂没有不利影响以及至少可在某种程度上溶解试剂。适合的溶剂的实例包括：芳族烃，如苯，甲苯或二甲苯；以及卤代烃如二氯甲烷，1，2-二氯乙烷或氯仿。
反应可在很宽的温度范围内进行，精确的反应温度并不是关键。优选的反应温度可根据如溶剂特性以及使用的起始物或试剂等因素而确定。然而，通常发现在-10℃至100℃，更优选0℃至50℃的温度下进行反应是有利的。
反应所需时间也是根据许多因素，特别是反应温度，以及使用的起始物和溶剂的特性而在很宽的范围内变化。然而，通常反应时间是5分钟至6小时，更优选10分钟至2小时。
步骤B1和B2
在步骤B1或B2中，使用还原剂将上述步骤A获得的式(IV)化合物的5位上的羰基还原获得5位上带有羟基的式(V)化合物(步骤B1)或式(Ia)化合物(步骤B2)。
该反应中对还原剂的特性没有严格的限制，条件是式(IV)化合物的其它部分不受其影响。上述还原剂的实例包括硼氢化钠和硼氢化锂，其中优选硼氢化钠。
反应通常并优选存在溶剂的条件下进行。该反应中使用的溶剂特性没有严格的限制，条件是对反应或使用的试剂没有不利影响以及至少可在某种程度上溶解试剂。适合的溶剂的实例包括：低级醇如甲醇，乙醇或丙醇；以及醚衍生物如四氢呋喃或二甲氧基乙烷。
反应可在很宽的温度范围内进行，精确的反应温度并不是关键。优选的反应温度可根据如溶剂特性以及使用的起始物或试剂等因素而确定。然而，通常发现在-50℃至50℃的温度下进行反应是有利的。
反应所需时间也是根据许多因素，特别是反应温度，以及使用的起始物和溶剂的特性而可以在很宽的范围内变化。然而，通常反应时间是在1小时至10小时。
步骤C
在步骤C中，苯基的4位上带有氨基的式(Ib)化合物是通过将步骤B1制备的式(V)化合物的硝基还原而制备的。
硝基的还原是通过常规方法获得的。例如，使用贵金属作为催化剂通过催化还原反应进行。优选的催化剂包括负载在碳上的钯，负载在硫酸钡上的钯和氧化铂。
反应通常并优选存在溶剂的条件下进行。该反应中使用的溶剂特性没有严格的限制，条件是对反应或使用的试剂没有不利影响以及至少可在某种程度上溶解试剂。适合的溶剂的实例包括：醇如甲醇或乙醇；醚衍生物如四氢呋喃或二噁烷；以及酯衍生物如乙酸乙酯。
反应可在很宽的温度范围内进行，精确的反应温度并不是关键。优选的反应温度可根据如溶剂特性以及使用的起始物或试剂等因素而确定。然而，通常发现在10℃至80℃的温度下进行反应是有利的。
反应所需时间也是根据许多因素，特别是反应温度，以及使用的起始物和溶剂的特性而可以在很宽的范围内变化。然而，通常反应时间是在30分钟至5小时。
另一可供选择的方法是，在乙酸中使用锌粉将式(V)化合物的硝基还原。反应可在很宽的温度和时间范围内进行，以及精确的反应温度和时间不是关键。优选的反应温度和时间可根据如溶剂特性，以及使用的起始物或试剂等因素而确定。然而，通常发现在0℃至室温以及反应时间为30分钟至12小时条件下进行反应是有利的。
另一可供选择的方法是，存在镍催化剂条件下使用硼氢化钠将式(V)化合物的硝基还原。这些镍催化剂是镍盐如氯化镍或溴化镍，优选上述镍盐的三苯膦络合物。
反应通常并优选存在溶剂的条件下进行。该反应中使用的溶剂特性没有严格的限制，条件是对反应或使用的试剂没有不利影响以及至少可在某种程度上溶解试剂。适合的溶剂的实例包括：醇如甲醇或乙醇；以及醚衍生物如四氢呋喃或二噁烷。
反应可在很宽的温度范围内进行，精确的反应温度并不是关键。优选的反应温度可根据如溶剂特性以及使用的起始物或试剂等因素而确定。然而，通常发现在0℃至室温下进行反应是有利的。
反应所需时间也是根据许多因素，特别是反应温度，以及使用的起始物和溶剂的特性而可以在很宽的范围内变化。然而，通常反应时间是在10分钟至2小时。
步骤D
在步骤D中，式(Ic)化合物是通过如步骤C所述制备的式(Ib)化合物与式R3aOH的酸或其活性衍生物反应而制备的，其中R3a如上定义。
式R3aOH化合物的活性衍生物包括，例如，所有在缩合反应中常用的酰基卤(酰基氯，酰基溴等)，酸酐，混合酸酐，活性酯以及活性酰胺。
当使用式R3aOH的酸时，缩合反应中可使用脱水剂。在该缩合反应中可以使用任意常用的脱水剂，及其实例包括二环己基碳二亚胺(DCC)，2-氯-1-甲基碘化吡啶，对甲苯磺酸和硫酸，其中优选2-氯-1-甲基碘化吡啶。通常脱水剂的量是酸的1-5摩尔当量，并优选1-2摩尔当量。
应用式R3aOH的酸的缩合反应，通常并优选存在溶剂的条件下进行。该反应中对使用的溶剂特性没有严格的限制，条件是对反应或使用的试剂没有不利影响以及至少可在某种程度上溶解试剂。适合的溶剂的实例包括：烃如己烷，石油醚，苯或甲苯；卤代烃如二氯甲烷，1，2-二氯乙烷或氯仿；醚衍生物如二乙醚或四氢呋喃；酰胺衍生物如N，N-二甲基甲酰胺；亚砜衍生物如二甲基亚砜；腈衍生物如乙腈；或其混合物。优选，使用的溶剂是二氯甲烷或1，2-二氯乙烷。
反应可在很宽的温度范围内进行，精确的反应温度并不是关键。优选的反应温度可根据如溶剂特性以及使用的起始物或试剂等因素而确定。然而，通常发现在-70℃至90℃，优选0℃至60℃的温度下进行反应是有利的。
反应所需时间也是根据许多因素，特别是反应温度，以及使用的起始物和溶剂的特性而可以在很宽的范围内变化。然而，通常反应时间是在15分钟至24小时，优选30分钟至6小时。
当使用具有式R3aOH结构的酸的活性衍生物(优选酰基卤)时，优选反应在存在碱的条件下进行。可以使用任何可在上述缩合反应中常用的碱，以及实例包括有机碱如三乙胺，N，N-二甲基苯胺，吡啶，4-二甲基氨基吡啶，1，5-二氮杂二环[4.3.0]壬-5-烯(DBN)和1，8-二氮杂二环[5.4.0]十一碳-7-烯(DBU)。
式R3aOH的酸的酰基卤衍生物的用量通常为式(Ib)化合物的1至10摩尔当量以及碱的用量通常为式(Ib)化合物的1至10摩尔当量。
反应通常并优选存在溶剂的条件下进行。该反应中对使用的溶剂特性没有严格的限制，条件是对反应或使用的试剂没有不利影响以及至少可在某种程度上溶解试剂。适合的溶剂的实例包括：烃如己烷，石油醚，苯或甲苯；卤代烃如二氯甲烷，1，2-二氯乙烷或氯仿；醚衍生物如二乙醚或四氢呋喃；酰胺衍生物如N，N-二甲基甲酰胺；亚砜衍生物如二甲基亚砜；腈衍生物如乙腈；或其混合物。优选，使用的溶剂是二氯甲烷或1，2-二氯乙烷。
反应可在很宽的温度范围内进行，精确的反应温度并不是关键。优选的反应温度可根据如溶剂特性以及使用的起始物或试剂等因素而确定。然而，通常发现在-70℃至90℃，优选0℃至50℃的温度下进行反应是有利的。
反应所需时间也是根据许多因素，特别是反应温度，以及使用的起始物和溶剂的特性而可以在很宽的范围内变化。然而，通常反应时间是在5分钟至24小时，优选5分钟至6小时。
上面步骤A至D中所述的各反应完成后，通过常规方法将所需化合物从反应混合物中分离出来。例如，通过以下步骤获得：如必要中和反应混合物，以及如存在不溶物滤除不溶物质，加入互相不混溶的有机溶剂，如水和乙酸乙酯，用水等洗涤，分离含有所需化合物的有机层，用无水硫酸镁等干燥，然后蒸馏掉溶剂。
如需要，通过常规方法如重结晶或再沉淀法或色谱方法分离并纯化获得的目标化合物。色谱方法的实例包括使用载体如硅胶，氧化铝或硅酸镁载体Florisil型的吸附柱色谱，使用合成吸附剂的色谱方法，例如使用载体如Sephadex LH-20(Pharmacia的产品)，AmberliteXAD-11(Rohm & Haas的产品)或Diaion HP-20(Mitsubishi Chemical的产品)的分配柱色谱，离子交换色谱和使用硅胶或烷基化硅胶的普通相转移相柱色谱(高效液相色谱)。如需要，可以结合使用上述两种或多种方法分离并纯化目标化合物。
式(III)起始化合物是发酵产生的天然米尔螨素或其衍生物。式(III)化合物可以纯的单一化合物或具有不同取代基R1定义的混合物的形式存在。式(I)化合物也可以制备成纯的单一化合物或具有不同取代基R1定义的混合物的形式。
具体实施方式
下述实施例，对比实施例和试验实施例用于进一步解释本发明但无论如何并不表示限制本发明的范围。
实施例1
13-[1-(4-甲氧基乙酰基氨基苯基)环戊烷羰氧基]-5-羟基-米尔>4[(I)：R>1＝Et，R2＝H，R3＝CH3OCH2CO，a＝环戊基，(化合物No.8)]
1(a)13-[1-(4-硝基苯基)环戊烷羰氧基]-5-羟基米尔螨素A4[(V)：R1＝Et，X＝NO2，a＝环戊基]
在室温，氮气氛中将0.18ml三氟甲磺酸加入10.13g(40.0mmol)1-(4-硝基苯基)环戊烷甲酸的150ml二氯甲烷悬浮液中。在同样温度下将所得混合物搅拌20分钟。搅拌结束后加入5.57g(10.0mmol)的15-羟基-5-氧代米尔螨素A4，然后将所得混合物室温下搅拌30分钟。搅拌结束后将反应混合物倾入4％碳酸氢钠水溶液中，然后用乙酸乙酯萃取。将有机提取物依次用4％碳酸氢钠水溶液和水洗涤，然后用无水硫酸镁干燥。减压条件下蒸馏除去乙酸乙酯从而获得粗产物13-[1-(4-硝基苯基)环戊烷羰氧基]-5-氧代米尔螨素A4[(IV)：R1＝Et，X＝NO2，a＝环戊基]，然后其不需纯化用于下一步骤。
在-40℃，边搅拌边向如上所述制备的经搅拌的含13-[1-(4-硝基苯基)环戊烷羰氧基]-5-氧代米尔螨素A4的200ml甲醇溶液中加入1.52g(40mmol)的硼氢化钠和两滴二乙醚合三氟化硼，然后将混合物搅拌10分钟。搅拌结束后，将400ml乙酸乙酯加入反应混合物。将乙酸乙酯用水洗涤三次，无水硫酸钠干燥，然后减压条件下蒸馏除去乙酸乙酯。将所得剩余物通过硅胶柱色谱纯化，使用以体积计乙酸乙酯和己烷1∶1的混合物作为洗脱剂，获得6.79g(8.75mmol，收率为87.5％)的非晶形固体的目标化合物。
1H核磁共振波谱(400MHz，CDCl3)δppm：
8.16(2H，双峰，J＝7.9Hz)；
7.53(2H，双峰，J＝7.9Hz)；
5.70-5.90(2H，多重峰)；
5.37(1H，单峰)；
5.25-5.40(3H，多重峰)；
4.84(1H，双峰，J＝10.6Hz)；
4.67和4.63(2H，AB-四重峰，＝14.4Hz)；
4.28(1H，多重峰)；
4.07(1H，单峰)；
3.94(1H，双峰，J＝6.4Hz)；
3.55(1H，多重峰)；
3.25(1H，多重峰)；
3.02(1H，多重峰)；
1.88(3H，单峰)；
1.29(3H，单峰)；
0.99(3H，三重峰，＝73Hz)；
0.82(3H，双峰，J＝6.5Hz)；
0.77(3H，双峰，J＝6.4Hz).
1(b)13-[1-(4-氨基苯基)环戊烷羰氧基]-5-羟基米尔螨素A4[(Ib)：R1＝Et，a＝环戊基，(化合物No.1)]
将100ml甲醇和1.12g(1.7mmol)的氯化镍(II)的三苯膦络合物加入如实施例1(a)制备的6.79g(8.75mmol)13-[1-(4-硝基苯基)环戊烷羰氧基]-5-羟基米尔螨素A4的100ml乙酸乙酯溶液中。在冰浴上，10分钟内将1000mg(26.5mmol)的硼氢化钠分多次每次少量地加入至所得混合物中，然后在同样温度下再搅拌10分钟。搅拌结束后，将70ml乙酸乙酯加入反应混合物，然后将反应混合物用水洗涤三次并用无水硫酸钠干燥。减压蒸馏除去乙酸乙酯并将所得剩余物在乙酸乙酯和己烷混合物中结晶，获得5.87g(7.87mmol，收率为89.9％)的白色结晶固体状的目标化合物。
熔点：235-239℃
1H核磁共振波谱(400MHz，CDCl3)δppm：
7.16(2H，双峰，J＝8.6Hz)；
6.65(2H，双峰，J＝8.6Hz)；
5.77-5.84(2H，多重峰)；
5.44(1H，单峰)；
5.32-5.43(3H，多重峰)；
4.84(1H，双峰，J＝10.5Hz)；
4.70和4.73(2H，AB-四重峰，J＝14.5Hz)；
4.33(1H，多重峰)；
4.13(1H，单峰)；
4.00(1H，双峰，J＝6.2Hz)；
3.54(1H，多重峰)；
3.30(1H，多重峰)；
3.09(1H，多重峰)；
1.92(3H，单峰)；
1.36(3H，单峰)；
1.01(3H，双峰，J＝7.3Hz)；
0.87(3H，双峰，J＝6.5Hz)；
0.82(3H，双峰，J＝6.5Hz).
1(c)13-[1-(4-甲氧基乙酰基氨基苯基)环戊烷羰氧基]-5-羟基-米尔螨素A4[(I)：R1＝Et，R2＝H，R3＝CH3OCH2CO，a＝环戊基，(化合物No.8)]
在-30℃，边搅拌边向已如实施例1(b)所述制备的4.48g(60mmol)13-[1-(4-氨基苯基)环戊烷羰氧基}-5-羟基米尔螨素A4的60ml四氢呋喃溶液中加入0.52g(6.4mmol)吡啶和0.58ml(6.2mmol)的甲氧基乙酰氯，然后在同样温度下将所得混合物再搅拌10分钟。搅拌结束后，将250ml乙酸乙酯加入反应混合物中，然后将反应混合物依次用0.5M柠檬酸溶液，水，4％碳酸氢钠水溶液和水洗涤，然后用无水硫酸钠干燥。然后减压条件下蒸馏除去乙酸乙酯并将所得剩余物通过硅胶柱色谱纯化，使用以体积计乙酸乙酯和己烷2∶1的混合物作为洗脱剂，获得4.38g(5.35mmol，收率为89.2％)的白色结晶状固体的目标化合物。
熔点：176-178℃。
1H核磁共振波谱(400MHz，CDCl3)δppm：
8.20(1H，单峰)；
7.49(2H，双峰，J＝8.6Hz)；
7.29(2H，双峰，J＝8.6Hz)；
5.77(1H，多重峰)；
5.74(1H，多重峰)；
5.39(1H，单峰)；
5.27-5.37(3H，多重峰)；
4.80(1H，双峰，J＝10.5Hz)；
4.68和4.64(2H，AB-四重峰，J＝14.5Hz)；
4.28(1H，多重峰)；
4.08(1H，单峰)；
4.01(2H，单峰)；
3.95(1H，双峰，J＝6.4Hz)；
3.54(1H，多重峰)；
3.51(3H，单峰)；
3.25(1H，多重峰)；
3.01(1H，多重峰)；
2.64(2H，多重峰)；
2.32(1H，双峰，J＝8.1Hz)；
1.87(3H，单峰)；
0.96(3H，三重峰＝7.3Hz)；
0.82(3H，双峰，J＝6.5Hz)；
0.76(3H，双峰，J＝6.5Hz).
MS(FAB)：818(M+H+，M＝C47H63NO11).
实施例2
13-[1-(4-乙酰基氨基苯基)环戊烷羰氧基]-5-羟基米尔螨素A4，[(I)：R1＝Et，R2＝H，R3＝CH3CO，a＝环戊基(化合物No.2)]
采用与实施例1(c)的类似方法用乙酸酐处理如上述实施例1(a)和(b)所述制备的13-[1-(4-氨基苯基)环戊烷羰氧基]-5-羟基米尔螨素A4，获得非晶形固体的目标化合物(收率为89.8％)。
1H核磁共振波谱(400MHz，CDCl3)δppm：
7.41(2H，双峰，J＝8.6Hz)；
7.27(2H，双峰，J＝8.6Hz)；
5.70-5.80(2H，多重峰)；
5.39(1H，单峰)；
5.25-5.40(3H，多重峰)；
4.80(1H，双峰，J＝10.6H2)；
4.64和4.68(2H，AB-四重峰，J＝14.2Hz)；
4.28(1H，双二重峰，J＝6.3和8.4Hz)；
4.07(1H，单峰)；
3.95(1H，双峰，J＝6.3Hz)；
3.54(1H，多重峰)；
3.25(1H，多重峰)；
3.01(1H，多重峰)；
2.61(2H，多重峰)；
2.33(1H，双峰，J＝8.4Hz)；
1.87(3H，单峰)；
1.58(3H，单峰)；
0.96(3H，三重峰，J＝7.3Hz)；
0.82(3H，双峰，J＝6.5Hz)；
0.76(3H，双峰，J＝6.5Hz).
MS(FAB)：788(M+H+，M＝C46H61NO10).
实施例3
13-[1-(4-氰基乙酰基氨基苯基)环戊烷羰氧基]-5-羟基米尔螨素A4，[(I)：R1＝Et，R2＝H，R3＝NCCH2CO，a＝环戊基(化合物No.6)]
采用与实施例1(c)的类似方法用氰基乙酰氯处理如上述实施例1(a)和(b)所述制备的13-[1-(4-氨基苯基)环戊烷羰氧基]-5-羟基米尔螨素A4，获得非晶形固体的目标化合物(收率为89.8％)。
1H核磁共振波谱(400MHz，CDCl3)δppm：
7.68(1H，单峰)；
7.42(2H，双峰，J＝8.7Hz)；
7.33(2H，双峰，J＝8.7Hz)；
5.72-5.77(2H，多重峰)；
5.39(1H，单峰)；
5.28-5.37(3H，多重峰)；
4.81(1H，双峰，J＝10.6Hz)；
4.64和4.68(2H，AB-四重峰，J＝14.5Hz)；
4.29(1H，多重峰)；
4.07(1H，单峰)；
3.95(1H，双峰，J＝6.2Hz)；
3.55(2H，单峰)；
3.52(1H，多重峰)；
3.25(1H，多重峰)；
3.01(1H，多重峰)；
2.62(2H，多重峰)；
2.32(1H，双峰，J＝8.2Hz)；
1.87(3H，单峰)；
0.96(3H，三重峰，J＝7.3Hz)；
0.82(3H，双峰，J＝6.5Hz)；
0.76(3H，双峰，J＝6.5Hz).
MS(FAB)：813(M+H+，M＝C47H60N2O10).
实施例4
13-[1-(4-甲磺酰基氨基苯基)环戊烷羰氧基]-5-羟基米尔螨素A4，[(I)：R1＝Et，R2＝H，R3＝CH3SO2，a＝环戊基(化合物No.20)]
采用与实施例1(c)的类似方法用甲磺酰氯处理如上述实施例1(a)和(b)所述制备的13-[1-(4-氨基苯基)环戊烷羰氧基]-5-羟基米尔螨素A4，获得非晶形固体的目标化合物(收率为88.2％)。
1H核磁共振波谱(400MHz，CDCl3)δppm：
7.32(2H，双峰，J＝8.7Hz)；
7.14(2H，双峰，J＝8.7Hz)；
5.47(1H，单峰)；
5.70-5.80(2H，多重峰)；
5.39(1H，单峰)；
5.25-5.37(3H，多重峰)；
4.80(1H，双峰，J＝10.6Hz)；
4.64和4.68(2H，AB-四重峰，J＝14.0Hz)；
4.28(1H，双二重峰，J＝6.4Hz，J＝8.2Hz)；
4.07(1H，单峰)；
3.95(1H，双峰，J＝6.4Hz)；
3.54(1H，多重峰)；
3.25(1H，多重峰)；
3.01(1H，多重峰)；
2.93(3H，单峰)；
2.62(2H，多重峰)；
2.33(1H，双峰，J＝8.2Hz)；
1.87(3H，单峰)；
0.96(3H，三重峰，J＝7.3Hz)；
0.82(3H，双峰，J＝6.5Hz)；
0.74(3H，双峰，J＝6.5Hz).
MS(FAB)：824(M+H+，M＝C45H61NO11S).
实施例5
13-[1-(4-羟基乙酰基氨基苯基)环戊烷羰氧基]-5-羟基米尔螨素A4，[(I)：R1＝Et，R2＝H，R3＝HOCH2C0，a＝环戊基(化合物No.7)]
采用与实施例1(c)的类似方法将388mg(0.5mmol)的如上述实施例1(a)和(b)所述制备的13-[1-(4-氨基苯基)环戊烷羰氧基]-5-羟基米尔螨素A4，用114mg(0.6mmol)的叔丁基二甲基甲硅氧基乙酸和153mg(0.6mmol)的2-氯-1-甲基碘化嘧啶 处理获得中间体，13-[1-[4-(叔丁基二甲基甲硅氧基)乙酰基氨基苯基]环戊烷羰氧基]-5-羟基米尔螨素A4，其不需进一步纯化用于下一步骤。将0.5ml 1N盐酸溶液加入含中间体的5ml甲醇溶液并将所得混合物在室温下搅拌5小时。搅拌结束后向反应混合物中加入25ml乙酸乙酯，然后依次用4％碳酸氢钠水溶液和水洗涤，然后用无水硫酸钠干燥。然后减压蒸馏除去乙酸乙酯并将所得剩余物通过硅胶柱色谱纯化，使用体积比为3∶2的乙酸乙酯和己烷混合物作为洗脱剂获得非晶形固体的目标化合物(收率为78.7％)
1H核磁共振波谱(400MHz，CDCl3)δppm：
8.26(1H，单峰)；
7.49(2H，双峰，J＝8.5Hz)；
7.30(2H，双峰，J＝8.5Hz)；
5.70-5.80(2H，多重峰)；
5.39(1H，单峰)；
5.25-5.40(3H，多重峰)；
4.80(1H，双峰，J＝10.4Hz)；
4.64和4.68(2H，AB-四重峰，J＝14.4Hz)；
4.28(1H，双二重峰，J＝6.4Hz，J＝8.1Hz)；
4.25(2H，双峰，J＝5.2Hz)；
4.08(1H，单峰)；
3.95(1H，双峰，J＝6.4Hz)；
3.54(1H，多重峰)；
3.25(1H，多重峰)；
3.02(1H，双三重峰，J＝2.2Hz，J＝9.2Hz)；
2.69(1H，三重峰，J＝5.2Hz)；
2.62(2H，多重峰)；
2.35(1H，双峰，J＝8.1Hz)；
1.86(3H，单峰)；
0.96(3H，三重峰，J＝7.3Hz)；
0.82(3H，双峰，J＝6.5Hz)；
0.76(3H，双峰，J＝6.5Hz).
MS(FAB)：842(M+K，M＝C46H61NO11，+KI).
实施例6
13-{1-[4-(N-乙酰基-N-甲基甘氨酰氨基)苯基]环戊烷羰氧基)-5-羟基米尔螨素A4，[(I)：R1＝Et，R2＝H，R3＝CH3CON(CH3)CH2CO，a＝环戊基(化合物No.346)]
采用与实施例1(c)的类似方法，用79mg(0.6mmol)的N-乙酰基-N-甲基甘氨酸和85mg(0.6mmol)的1-甲基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺的5ml四氢呋喃溶液处理如上述实施例1(a)和(b)所述制备的388mg(0.5mmol)的13-[1-(4-氨基苯基)环戊烷羰氧基]-5-羟基米尔螨素A4，将混合物在室温下搅拌30分钟，获得非晶形固体的目标化合物(收率为87.0％)。
1H核磁共振波谱(400MHz，CDCl3)δppm：
8.51(1H，单峰)；
7.42(2H，双峰，J＝8.5Hz)；
7.26(2H，双峰，J＝8.5Hz)；
5.70-5.80(2H，多重峰)；
5.39(1H，单峰)；
5.25-5.40(3H，多重峰)；
4.80(1H，双峰，J＝10.6Hz)；
4.64和4.68(2H，AB-四重峰，J＝14.5Hz)；
4.28(1H，双二重峰，J＝6.1Hz，J＝8.2Hz)；
4.09(2H，单峰)；
4.0g(1H，单峰)；
3.95(1H，双峰，J＝6.1Hz)；
3.54(1H，多重峰)；
3.25(1H，多重峰)；
3.19(3H，单峰)；
3.02(1H，双三重峰，J＝2.3Hz，J＝9.4Hz)；
2.62(2H，多重峰)；
2.33(1H，双峰，J＝8.2Hz)；
2.18(3H，单峰)；
1.83(3H，单峰)；
0.93(3H，三重峰，J＝7.2Hz)；
0.82(3H，双峰，J＝6.5Hz)；
0.76(3H，双峰，J＝6.5Hz).
MS(FAB)：859(M+H+，M＝C49H66N2O11).
实施例7
13-(1-[4-(2-氧代吡咯烷-1-基)乙酰基氨基苯基]环戊烷羰氧基)-5-羟基米尔螨素A4，[(I)：R1＝Et，R2＝H，R3＝2-氧代吡咯烷-1-基-CH2CO，a＝环戊基(化合物No.350)]
采用与实施例1(c)的类似方法，用86mg(0.6mmol)的(2-氧代-吡咯烷-1-基)乙酸和85mg(0.6mmol)的1-甲基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺的5ml四氢呋喃溶液处理如上述实施例1(a)和(b)所述制备的388mg(0.5mmol)的13-[1-(4-氨基苯基)环戊烷羰氧基]-5-羟基米尔螨素A4，将混合物在室温下搅拌40分钟，获得非晶形固体的目标化合物(收率为89.5％)。
1H核磁共振波谱(400MHz，CDCl3)δppm：
8.33(1H，单峰)；
7.42(2H，双峰，J＝8.6Hz)；
7.27(2H，双峰，J＝8.6Hz)；
5.72-5.79(2H，多重峰)；
5.39(1H，单峰)；
5.28-5.37(3H，多重峰)；
4.81(1H，双峰，J＝10.6Hz)；
4.65和4.68(2H，AB.四重峰，J＝14.4Hz)；
4.27(1H，双二重峰，J＝6.3Hz，J＝8.3Hz)；
4.08(1H，单峰)；
4.04(2H，单峰)；
3.95(1H，双峰，J＝6.3Hz)；
3.59(2H，三重峰，J＝7.2Hz)；
3.54(1H，多重峰)；
3.25(1H，多重峰)；
3.01(1H，多重峰)；
2.60(2H，多重峰)；
2.33(1H，双峰，J＝8.3Hz)；
1.87(3H，单峰)；
0.96(3H，三重峰，J＝7.3Hz)；
0.82(3H，双峰，J＝6.5Hz)；
0.76(3H，双峰，J＝6.5Hz).
MS(FAB)：871(M+H+，M＝C50H67N2O11).
实施例8
13-[1-(4-甲氧基乙酰基氨基苯基)环戊烷羰氧基]-5-羟基米尔螨素A3，[(I)：R1＝Me，R2＝H，R3＝CH3OCH2CO，a＝环戊基(化合物No.51)]
8(a)13-[1-(4-氨基苯基)环戊烷羰氧基]-5-羟基米尔螨素A3，[(I)：R1＝Me，R2＝H，R3＝H，a＝环戊基(化合物No.44)]
采用与上述实施例1(a)和(b)的类似方法，但使用15-羟基-5-氧代米尔螨素A3作为起始物替代15-羟基-5-氧代米尔螨素A4，获得非晶形固体的目标化合物(收率为67.5％)，该化合物不需进一步纯化用于下一步骤。
1H核磁共振波谱(400MHz，CDCl3)δppm：
7.11(2H，双峰，J＝8.5Hz)；
6.60(2H，双峰，J＝8.5Hz)；
5.71-5.78(2H，多重峰)；
5.38(1H，单峰)；
5.25-5.40(3H，多重峰)；
4.80(1H，双峰，J＝10.6Hz)；
4.65和4.68(2H，AB-四重峰，J＝13.9Hz)；
4.28(1H，多重峰)；
4.08(1H，单峰)；
3.95(1H，双峰，J＝6.1Hz)；
3.59(2H，宽单峰)；
3.52(1H，多重峰)；
3.18-3.26(2H，多重峰)；
2.57(2H，多重峰)；
1.87(3H，单峰)；
1.31(3H，单峰)；
1.13(3H，双峰，J＝6.4Hz)；
0.83(3H，双峰，J＝6.5Hz)；
0.77(3H，双峰，J＝6.6Hz).
(b)13-[1-(4-甲氧基乙酰基氨基苯基)环戊烷羰氧基]-5-羟基米尔螨素A3，[(I)：R1＝Me，R2＝H，R3＝CH3OCH2CO，a＝环戊基(化合物No.51]
采用与实施例1(c)的类似方法，用甲氧基乙酰氯处理如实施例8(a)所述制备的13-[1-(4-氨基苯基)环戊烷羰氧基]-5-羟基米尔螨素A3，获得目标化合物，将该化合物在甲醇和水中重结晶获得纯化的白色结晶状固体的目标化合物(收率为92.3％)。
熔点：239-242℃
1H核磁共振波谱(4 00MHz，CDCl3)δppm：
8.21(1H单峰)；
7.49(2H，双峰，J＝8.6Hz)；
7.29(2H，双峰，J＝8.6Hz)；
5.71-5.78(2H，多重峰)；
5.33(1H，单峰)；
5.24-5.36(3H，多重峰)；
4.80(1H，双峰，J＝10.6Hz)；
4.64和4.68(2H，AB-四重峰，J＝13.7Hz)；
4.28(1H，多重峰)；
4.07(1H，单峰)；
4.01(2H，单峰)；
3.95(1H，双峰，J＝6.3Hz)；
3.51(3H，单峰)；
3.50(1H，多重峰)；
3.18-3.26(2H，多重峰)；
2.61(2H，多重峰)；
1.87(3H，单峰)；
1.28(3H，单峰)；
1.13(3H，双峰，J＝6.3Hz)；
0.83(3H，双峰，J＝6.6Hz)；
0.76(3H，双峰，J＝6.5Hz).
MS(FAB)：804(M+H+，M＝C46H61NO11).
实施例9
13-[1-(4-甲磺酰基氨基苯基)环戊烷羰氧基]-5-羟基米尔螨素A3，[(I)：R1＝Me，R2＝H，R3＝CH3SO2，a＝环戊基(化合物No.63)]
采用与实施例1(c)的类似方法，用甲磺酰氯处理如实施例8(a)所述制备的13-[1-(4-氨基苯基)环戊烷羰氧基]-5-羟基米尔螨素A3，获得非晶形固体状的目标化合物(收率为88.9％)。
1H核磁共振波谱(400MHz，CDCl3)δppm：
7.33(2H，双峰，J＝8.6Hz)；
7.14(2H，双峰，J＝8.6Hz)；
6.40(1H，单峰)；
5.73-5.80(2H，多重峰)；
5.33(1H，单峰)；
5.25-5.40(3H，多重峰)；
4.80(1H，双峰，J＝10.6Hz)；
4.64和4.68(2H，AB-四重峰，J＝14.4Hz)；
4.28(1H，双二重峰，J＝6.4Hz，J＝8.4Hz)；
4.07(1H，单峰)；
3.95(1H，双峰，J＝6.4Hz)；
3.51(1H，多重峰)；
3.17-3.25(2H，多重峰)；
2.97(3H，单峰)；
2.63(2H，多重峰)；
2.32(1H，双峰，J＝8.4Hz)；
1.87(3H，单峰)；
1.29(3H，单峰)；
1.13(3H，双峰，J＝6.1Hz)；
0.82(3H，双峰，J＝6.5Hz)；
0.74(3H，双峰，J＝6.6H2).
MS(FAB)：810(M+H+，M＝C44H59NO11S).
实施例10
13-脱氧-13β-[1-(4-甲氧基乙酰基氨基苯基)环戊烷羰氧基]-22，23-二氢阿维菌素B1a苷元
[(I)：R1＝s-Bu，R2＝H，R3＝CH3OCH2CO，a＝环戊基(化合物No.137)]
(a)13-脱氧-13β-[1-(4-氨基苯基)环戊烷羰氧基]-22，23-二氢阿维菌素B1a苷元
[(I)：R1＝s-Bu，R2＝H，R3＝H，a＝环戊基(化合物No.130)]
采用与实施例1(a)和(b)所述的类似方法，但使用13-表-5-氧代-22，23-二氢阿维菌素B1a替代15-羟基-5-氧代米尔螨素A4，获得的目标化合物通过硅胶柱色谱纯化，使用以体积计3∶2的乙酸乙酯和己烷的混合物作为洗脱剂获得纯化的非晶形固体状的目标化合物(收率为48.5％)。
1H核磁共振波谱(400MHz，CDCl3)δppm：
7.11(2H，双峰，J＝8.6Hz)；
6.60(2H，双峰，J＝8.6Hz)；
5.72-5.80(2H，多重峰)；
5.41(1H，单峰)；
5.23-5.36(3H，多重峰)；
4.80(1H，双峰，J＝10.4Hz)；
4.65和4.68(2H，AB-四重峰，J＝14.4Hz)；
4.28(1H，双二重峰，J＝6.4Hz，J＝8.1Hz)；
4.01(1H，单峰)；
3.95(1H，双峰，J＝6.4Hz)；
3.59(2H，宽单峰)；
3.56(1H，多重峰)；
3.14(1H，多重峰)；
2.58(2H，多重峰)；
2.33(1H，双峰，J＝8.1Hz)；
1.87(3H，单峰)；
1.31(3H，单峰)；
0.93(3H，三重峰，J＝7.4Hz)；
0.84(3H，双峰，J＝6.7Hz)；
0.78(3H，双峰，J＝5.4Hz)；
0.77(3H，双峰，J＝6.6Hz).
(b)13-脱氧-13β-[1-(4-甲氧基乙酰基氨基苯基)环戊烷羰氧基]-22，23-二氢阿维菌素B1a苷元
[(I)：R1＝s-Bu，R2＝H，R3＝CH3OCH2CO，a＝环戊基]
采用与实施例1(c)所述的类似方法，使用甲氧基乙酰氯处理如实施例10(a)所述方法制备的13-脱氧-13β-[1-(4-氨基苯基)环戊烷羰氧基]-22，23-二氢阿维菌素B1a苷元，获得非晶形固体状的目标化合物(收率为86.0％)。
1H核磁共振波谱(400MHz，CDCl3)δppm：
8.21(1H，单峰)；
7.49(2H，双峰，J＝8.7Hz)；
7.30(2H，双峰，J＝8.7Hz)；
5.72-5.80(2H，多重峰)；
5.41(1H，单峰)；
5.22-5.35(3H，多重峰)；
4.81(1H，双峰，J＝10.4Hz)；
4.65和4.68(2H，AB-四重峰，J＝14.4Hz)；
4.29(1H，双二重峰，J＝6.3Hz，J＝8.3Hz)；
4.01(2H，单峰)；
4.00(1H，单峰)；
3.95(1H，双峰，J＝6.3Hz)；
3.56(1H，多重峰)；
3.51(3H，单峰)；
3.25(1H，多重峰)；
3.13-3.24(1H，多重峰)；
2.62(2H，多重峰)；
2.32(1H，双峰，J＝8.3Hz)；
1.87(3H，单峰)；
1.28(3H，单峰)；
0.94(3H，三重峰，J＝7.4Hz)；
0.84(3H，双蜂，J＝6.9Hz)；
0.78(3H，双蜂，J＝5.6Hz)；
0.75(3H，双蜂，J＝6.6Hz).
MS(FAB)：846(M+H+，M＝C49H67NO11).
实施例11
13-脱氧-13β-[1-(4-甲磺酰氨基苯基)环戊烷羰氧基]-22，23-二>1a苷元>
[(I)：R1＝s-Bu，R2＝H，R3＝CH3SO2，a＝环戊基(化合物No.149)]
采用与实施例1(c)所述的类似方法，使用甲磺酰氯处理如实施例10(a)所述方法制备的13-脱氧-13β-[1-(4-氨基苯基)环戊烷羰氧基]-22，23-二氢阿维菌素B1a苷元，获得非晶形固体状的目标化合物(收率为87.4％)。
1H核磁共振波谱(400MHz，CDCl3)δppm：
7.33(2H，双蜂，J＝8.5Hz)；
7.14(2H，双蜂，J＝8.5Hz)；
6.36(1H，单峰)；
5.73-5.80(2H，多重峰)；
5.40(1H，单峰)；
5.22-5.36(3H，多重峰)；
4.81(1H，双蜂，J＝10.4Hz)；
4.64和4.67(2H，AB-四重峰，J＝14.5Hz)；
4.29(1H，双二重蜂，J＝6.3Hz，J＝8.1Hz)；
4.01(1H，单峰)；
3.95(1H，双蜂，J＝6.3Hz)；
3.56(1H，多重峰)；
3.26(1H，多重峰)；
3.14(1H，多重峰)；
2.97(3H，单峰)；
2.63(2H，多重峰)；
2.32(1H，双峰，J＝8.1Hz)；
1.86(3H，单峰)；
1.29(3H，单峰)；
0.93(3H，三重峰，J＝7.3Hz)；
0.84(3H，双峰，J＝7.0Hz)；
0.78(3H，双峰，J＝5.6Hz)；
0.75(3H，双峰，J＝6.5Hz).
MS(FAB)：852(M+H+，M＝C47H65NO11S).
实施例12
13-{1-[4-(N-甲氧基乙酰基-N-甲基氨基)苯基]环戊烷羰氧基}-5-羟基米尔螨素A4[(I)：R1＝Et，R2＝Me，R3＝CH30CH2CO，a＝环戊基(化合物No.35)]
采用与实施例1(a)所述的类似方法，但使用1-[4-(N-甲氧基乙酰基-N-甲基氨基)苯基]环戊烷甲酸替代1-(4-硝基苯基)环戊烷甲酸，获得非晶形固体状的目标化合物(收率为48.0％)。
1H核磁共振波谱(400MHz，CDCl3)δppm：
7.40(2H，双峰，J＝8.6Hz)；
7.12(2H，双峰，J＝8.6Hz)；
5.70-5.80(2H，多重峰)；
5.39(1H，单峰)；
5.25-5.40(3H，多重峰)；
4.81(1H，双峰，J＝10.5Hz)；
4.68和4.64(2H-，AB-四重峰，J＝14.5Hz)；
4.28(1H，多重峰)；
4.08(1H，单峰)；
3.94(1H，双峰，J＝6.3Hz)；
3.67(2H，单峰)；
3.54(1H，多重峰)；
3.33(3H，单峰)；
3.25(1H，多重峰)；
3.24(3H，单峰)；
3.01(1H，多重峰)；
2.64(2H，多重峰)；
1.87(3H，单峰)；
0.96(3H，三重峰，J＝7.3Hz)；
0.82(3H，双峰，J＝6.5Hz)；
0.76(3H，双峰，J＝6.5Hz).
MS(FAB)：832(M+H+，M＝C48H65NO11).
实施例13
13-{1-[4-(2-噁唑烷酮-3-基)苯基]环戊烷羰氧基}-5-羟基米尔螨素A4[(I)：R1＝Et，R2，R3＝2-噁唑烷酮-3-基，a＝环戊基(化合物No.42)]
采用与实施例1(a)所述的类似方法，但使用1-[4-(2-噁唑烷酮-3-基)苯基]环戊烷甲酸替代1-(4-硝基苯基)环戊烷甲酸，获得非晶形固体状的目标化合物(收率为34.2％)。
1H核磁共振波谱(400MHz，CDCl3)δppm：
7.46(2H，双峰，J＝8.7Hz)；
7.34(2H，双峰，J＝8.7Hz)；
5.70-5.80(2H，多重峰)；
5.39(1H，单峰)；
5.25-5.40(3H，多重峰)；
4.81(1H，双峰，J＝10.4Hz)；
4.68和4.64(2H，AB-四重峰，J＝14.6Hz)；
4.49(2H，多重峰)；
4.28(1H，双二重峰，J＝6.1Hz，J＝8.3Hz)；
4.08(2H，多重峰)；
4.07(1H，单峰)；
3.95(1H，双峰，J＝6.1Hz)；
3.54(1H，多重峰)；
3.25(1H，多重峰)；
3.01(1H，多重峰)；
2.61(2H，多重峰)；
2.33(1H，双峰，J＝8.3Hz)；
1.87(3H，单峰)；
0.96(3H，三重峰，J＝7.3Hz)；
0.82(3H，双峰，J＝6.3Hz)；
0.76(3H，双峰，J＝6.5Hz).
MS(FAB)：815(M+H+，M＝C47H61NO11).
实施例14
13-[1-(4-甲氧基乙酰基氨基苯基)环戊烷羰氧基]-5-羟基米尔螨素A4[(I)：R1＝Et，R2＝H，R3＝CH3OCH2CO，a＝环戊基(化合物No.8)]
14(a)13-[1-(4-甲氧基乙酰基氨基苯基)环戊烷羰氧基]-5-氧代>4[(IV)：R1＝Et，X＝CH3OCH2CONH，a＝环戊基]
在室温下，向8.28g(30mmol)的1-(4-甲氧基乙酰基氨基苯基)环戊烷甲酸(根据下述对比实施例1制备的)的120ml二氯甲烷悬浮液中加入3.16ml(20.0mmol)烯丙基三甲基硅烷和0.6ml的三甲代甲硅烷基三氟甲磺酸酯，以及在室温，氮气氛中将所得混合物搅拌20分钟。搅拌结束后，在室温下，将5.57g(10.0mmol)的15-羟基-5-氧代米尔螨素A4加入所得的澄清混合物中并在同样温度下将上述混合物搅拌60分钟。搅拌结束后，将反应混合物分配于4％碳酸氢钠水溶液和乙酸乙酯中。将乙酸乙酯层依次用4％碳酸氢钠水溶液和水洗涤，无水硫酸镁干燥，然后减压蒸馏除去乙酸乙酯获得目标化合物，其不需进一步纯化可用于下一反应步骤。
14(b)13-[1-(4-甲氧基乙酰基氨基苯基)环戊烷羰氧基]-5-羟基>4
在-40℃，向由实施例14(a)制备的5-氧代衍生物的200ml甲醇溶液中加入1.52g(40mmol)硼氢化钠和2滴二乙醚合三氟化硼，在同样温度下将所得混合物搅拌10分钟。反应结束后，向反应混合物中加入400ml乙酸乙酯，将乙酸乙酯层用水洗涤三次，无水硫酸钠干燥，然后减压蒸馏除去乙酸乙酯。将所得剩余物通过硅胶柱色谱纯化，使用体积比为1∶1的乙酸乙酯和己烷混合物作为洗脱剂获得5.32g(收率为65％)的目标化合物。将该化合物在异丙醇和水混合物中重结晶获得熔点为176-178℃的结晶。该产物的理化特性，如1H核磁共振波谱，与实施例1获得的化合物的理化特性相同。
理论计算值C47H63NO11.H2O：C：67.53％，H：7.84％，N：1.68％
实测值：C：67.80％，H：7.49％，N：1.75％
实施例15-19
采用与实施例1(c)的类似方法，用实施例15-19中所述试剂处理下述实施例20制备的化合物获得下述实施例15-19的目标化合物。
实施例15
13-[1-(4-甲氧基乙酰基氨基苯基)环丁烷羰氧基]-5-羟基米尔螨>4，[(I)：R>1＝Et，R2＝H，R3＝CH3OCH2CO，a＝环丁基，(化合物No.180)]
试剂：甲氧基乙酰氯
收率：74.3％
1H核磁共振波谱(400MHz，CDCl3)δppm：
8.23(1H，单峰)；
7.52(2H，双峰，J＝8.6Hz)；
7.24(2H，双峰，J＝8.6Hz)；
5.75和5.79(2H，多重峰)；
5.39(1H，单峰)；
5.29～5.36(3H，多重峰)；
4.84(1H，双峰，J＝10.5Hz)；
4.65和4.68(2H，AB-四重峰，J＝13.7Hz)；
4.28(1H，多重峰)；
4.05(1H，单峰)；
4.02.(2H，单峰)；
3.95(1H，双峰，J＝6.1Hz)；
3.55(1H，多重峰)；
3.51(3H，单峰)；
3.25(1H，多重峰)；
3.02(1H，多重峰)；
1.87(3H，单峰)；
1.33(3H，单峰)；
0.97(3H，三重峰，J＝7.3Hz)；
0.82(3H，双峰，J＝6.5Hz)；
0.76(3H，双峰，J＝6.5Hz).
MS(FAB)：804(M+H+，M＝C46H61NO11).
实施例16
13-[1-(4-乙酰基氨基苯基)环丁烷羰氧基]-5-羟基米尔螨素>4，[(I)：R>1＝Et，R2＝H，R3＝CH3CO，a＝环丁基，(化合物No.174)]
试剂：乙酸酐
收率：83.2％
1H核磁共振波谱(400MHz，CDCl3)δppm：
7.44(2H，双峰，J＝8.3Hz)；
7.22(2H，双峰，J＝8.3Hz)；
7.14(1H，单峰)；
5.75～5.78(2H，多重峰)；
5.39(1H，单峰)；
5.29-5.37(3H，多重峰)；
4.84(1H，双峰，J＝10.5Hz)；
4.65和4.68(2H，AB-四重峰，J＝14.0Hz)；
4.28(1H，多重峰)；
4.06(1H，单峰)；
3.95(1H，双峰，J＝6.3Hz)；
3.54(1H，多重峰)；
3.25(1H，多重峰)；
3.02(1H，多重峰)；
2.18(3H，单峰)；
1.87(3H，单峰)；
1.33(3H，单峰)；
0.97(3H，三重峰，J＝7.3Hz)；
0.82(3H，双峰，J＝6.5Hz)；
0.76(3H，双峰，J＝6.5Hz).
MS(FAB)：774(M+H+，M＝C45H59NO10).
实施例17
13-[1-(4-甲磺酰基氨基苯基)环丁烷羰氧基]-5-羟基米尔螨素>4，[(I)：R>1＝Et，R2＝H，R3＝CH3SO2，a＝环丁基，(化合物No.192)]
试剂：甲磺酰氯
收率：70.5％
1H核磁共振波谱(400MHz，CDCl3)δppm：
7.27(2H，双峰，J＝8.6Hz)；
7.17(2H，双峰，J＝8.6Hz)；
6.43(1H，单峰)；
5.76～5.78(2H，多重峰)；
5.39(1H，单峰)；
5.28～5.37(3H，多重峰)；
4.84(1H，双峰，J＝10.6Hz)；
4.65和4.69(2H，AB-四重峰，J＝13.4Hz)；
4.29(1H，多重峰)；
4.06(1H，单峰)；
3.95(1H，双峰，J＝6.4Hz)；
3.55(1H，多重峰)；
3.25(1H，多重峰)；
3.02(1H，多重峰)；
2.98(3H，单峰)；
1.87(3H，单峰)；
1.33(3H，单峰)；
0.97(3H，三重峰，J＝7.3Hz)；
0.82(3H，双峰，J＝6.5Hz)；
0.76(3H，双峰，J＝6.5Hz).
MS(FAB)：810(M+H+，M＝C44H59NO11S).
实施例18
13-[1-(4-三氟乙酰基氨基苯基)环丁烷羰氧基]-5-羟基米尔螨素>4，[(I)：R>1＝Et，R2＝H，R3＝CF3CO，a＝环丁基，(化合物No.175)]
试剂：三氟乙酸酐
收率：70.7％
1H核磁共振波谱(400MHz，CDCl3)δppm：
7.85(1H，单峰)；
7.52(2H，双峰，J＝8.5Hz)；
7.30(2H，双峰，J＝8.5Hz)；
5.76～5.79(2H，多重峰)；
5.39(1H，单峰)；
5.27～5.37(3H，多重峰)；
4.85(1H，双峰，J＝10.4Hz)；
4.65和4.68(2H，AB-四重峰，J＝13.7Hz)；
4.28(1H，多重峰)；
4.06(1H，单峰)；
3.95(1H，双峰，J＝6.2Hz)；
3.54(1H，多重峰)；
3.25(1H，多重峰)；
3.01(1H，多重峰)；
1.87(3H，单峰)；
1.33(3H，单峰)；
0.97(3H，三重峰，J＝7.3Hz)；
0.82(3H，双峰，J＝6.5Hz)；
0.77(3H，双峰，J＝6.5Hz).
MS(FAB)：828(M+H+，M＝C45H56F3NO10).
实施例19
13-[1-(4-戊炔酰基氨基苯基)环丁烷羰氧基]-5-羟基米尔螨素>4，[(I)：R>1＝Et，R2＝H，R3＝CH≡CCH2CH2CO，a＝环丁基，(化合物No.354)]
试剂：4-戊炔酸/2-氯-1-甲基碘化吡啶
收率：37.9％
1H核磁共振波谱(400MHz，CDCl3)δppm：
7.46(2H，双峰，J＝8.5Hz)；
7.34(1H，单峰)；
7.23(2H，双峰，J＝8.5Hz)；
5.72～5.79(2H，多重峰)；
5.39(1H，单峰)；
5.29～5.37(3H，多重峰)；
4.84(1H，双峰，J＝10.4Hz)；
4.65和4.68(2H，AB-四重峰，J＝13.5Hz)；
4.28(1H，多重峰)；
4.05(1H，单峰)；
3.95(1H，双峰，J＝6.1Hz)；
3.55(1H，多重峰)；
3.25(1H，多重峰)；
3.02(1H，多重峰)；
2.56～2.66(4H，多重峰)；
1.87(3H，单峰)；
1.34(3H，单峰)；
0.97(3H，三重峰，J＝7.3Hz)；
0.82(3H，双峰，J＝6.5Hz)；
0.77(3H，双峰，J＝6.5Hz).
MS(FAB)：812(M+H+，M＝C48H61NO10).
实施例20
13-[1-(4-氨基苯基)环丁烷羰氧基]-5-羟基米尔螨素A4，[(I)：R1＝Et，R2＝H，R3＝H，a＝环丁基，(化合物No.173)]
类似实施例1(a)，(b)和(c)所述方法，但使用1-(4-硝基苯基)环丁烷甲酸替代了1-(4-硝基苯基)环戊烷甲酸，获得非晶形固体状目标化合物，收率为59.8％。
1H核磁共振波谱(400MHz，CDCl3)δppm：
7.10(2H，双峰，J＝8.5Hz)；
6.74(2H，双峰，J＝8.5Hz)；
5.75和5.79(2H，多重峰)；
5.39(1H，单峰)；
5.29～5.38(3H，多重峰)；
4.84(1H，双峰，J＝10.4Hz)；
4.68和4.65(2H，AB-四重峰，J＝14.5Hz)；
4.28(1H，多重峰)；
4.06(1H，单峰)；
3.95(1H，双峰，J＝6.4Hz)；
3.55(1H，多重峰)；
3.25(1H，多重峰)；
3.02(1H，多重峰)；
1.87(3H，单峰)；
1.35(3H，单峰)；
0.97(3H，三重峰，J＝7.3Hz)；
0.82(3H，双峰，J＝6.5Hz)；
0.78(3H，双峰，J＝6.5Hz).
MS(FAB)：732(M+H+，M＝C43H57NO9).
实施例21
13-[1-(4-甲氧基乙酰基氨基苯基)环戊烷羰氧基]-5-羟基米尔螨素A4和13-[1-(4-甲氧基乙酰基氨基苯基)环戊烷羰氧基]-5-羟基米尔螨素A3的8∶2混合物[(I)：R1＝Et∶Me(8∶2)，R2＝H，R3＝CH3OCH2CO，a＝环戊基，(化合物Nos.8和51)]
采用基本上与实施例1相同的方法，但使用15-羟基-5-氧代米尔螨素A4和15-羟基-5-氧代米尔螨素A3的8∶2(质量比)混合物替代15-羟基-5-氧代米尔螨素A4作为起始物，获得了13-[1-(4-甲氧基乙酰基氨基苯基)环戊烷羰氧基]-5-羟基米尔螨素A4与13-[1-(4-甲氧基乙酰基氨基苯基)环戊烷羰氧基]-5-羟基米尔螨素A3的8∶2(以质量计)的混合物。
对比实施例1
1-(4-甲氧基乙酰基氨基苯基)环戊烷甲酸
向已在冰浴上冷却的25.3g(100mmol)的1-(4-硝基苯基)环戊酸的200ml体积比为1∶1的甲醇和四氢呋喃混合物溶液中加入13g(20mmol)的氯化镍(II)的三苯膦络合物。10分钟内将10g硼氢化钠分多次每次少量地加入至冷却的混合物中。然后将所得混合物在室温下搅拌20分钟，搅拌结束后，将反应混合物倾入500ml水中，然后用浓盐酸将pH调至4。将随后产生的1-(4-氨基苯基)环戊烷甲酸结晶的沉淀过滤收集。然后向已在冰浴上冷却后的结晶产物的100ml水悬浮液中加入22.2g(150mmol)碳酸钾和100ml四氢呋喃，而后加入9.0ml(100mmol)甲氧基乙酰氯。在同样温度下将所得混合物搅拌30分钟，然后加入200ml水，用醚洗涤混合物，然后用浓盐酸将醚提取物的pH调至4。将上述混合物在室温下放置2小时，过滤收集所得结晶获得25.4g(收率为91.6％)的白色结晶状目标化合物。
熔点162-163℃
1H核磁共振波谱(400MHz，CDCl3)δppm：
8.24(1H，单峰)；
7.50(2H，双峰，J＝8.7Hz)；
7.35(2H，双峰，J＝8.7Hz)；
4.00(1H，单峰)；
3.49(3H，单峰)；
2.63(2H，多重峰)；
1.90(2H，多重峰)；
1.73(4H，多重峰).
试验实施例1
抗猫栉头蚤的杀虫活性试验
制备试验容器，其中使用通常用作人造皮肤的ParafilmTM(购自Aldrich Chemical Co.Ltd.)将跳蚤的生存空间与牛血清隔离开。将足够量的测试化合物加入牛血清中至浓度为1ppm，在37℃，使跳蚤通过ParafilmTM吸吮牛血清样品。每组包括20头跳蚤。根据48小时后死亡的跳蚤数，评估测试化合物的抗跳蚤的杀虫活性。通过统计没有测试化合物的对照组中死亡的跳蚤数，校正死亡率。结果列于表2。
表2
化合物 死亡率(％)
实施例1(b) 95.0
实施例1(c) 90.2
实施例2 95.0
实施例3 81.4
实施例4 100.0
实施例5 74.4
实施例6 79.5
实施例8 87.6
实施例9 83.2
米尔螨素A4 20.9
对比化合物A 2.4
应该注意上表中化合物A是EP-A-0246739中公开的化合物并由下列结构式表示：
化合物A
试验实施例2
对狗身上的跳蚤的杀灭试验
用于该试验的比格尔犬在试验前已被猫栉头蚤侵染。统计侵染三天后从狗的身体表面收集的跳蚤数并通过计算侵染三天后统计的跳蚤数与用于侵染狗的最初跳蚤数之比来确定每只狗的侵染率。
测试化合物即由上述实施例1(c)制备的13-[1-(4-甲氧基乙酰基氨基苯基)环戊烷羰氧基]-5-羟基米尔螨素A4，将该测试化合物溶解在体积比为9∶1的苄醇和碳酸异丙烯酯的混合物中获得测试溶液其中测试化合物的浓度为10％(w/v)。将所得测试溶液逐滴给药至四只试验比格尔犬(4-7个月大)的各自肩胛间的区域，剂量为5mg/kg体重。测试化合物给药后第7天，21天和28天，每只狗用100头猫栉头蚤侵染。统计侵染三天后从狗的身体表面收集的跳蚤数。确定给药前后获得的跳蚤数从而得出杀灭率。
在该试验中，各自在给药后第7天，第21天和第28天被跳蚤侵染的三天后没有从狗的身体表面收集到跳蚤。因此，即使在测试化合物给药后28天，杀灭率仍为100％。
对照组中，用于试验的四只狗没有用测试化合物给药。在试验组进行试验的同时对照组也进行侵染试验，试验期间观察的侵染率没有明显变化。
试验实施例3
对狗身上的跳蚤的杀灭试验
使用的测试溶液是根据上述实施例21制备的13-[1-(4-甲氧基乙酰基氨基苯基)环戊烷羰氧基]-5-羟基米尔螨素A4和13-[1-(4-甲氧基乙酰基氨基苯基)环戊烷羰氧基]-5-羟基米尔螨素A3的8∶2混合物溶解在体积比为9∶1的苄醇和碳酸异丙烯酯的混合物中制备而成的10％(w/v)溶液，重复上述试验实施例2的方法。在该试验中，各自在给药后第7天，第21天和第28天被跳蚤侵染的三天后没有从试验狗的身体表面收集到跳蚤。因此，即使在测试化合物给药后28天，杀灭率仍为100％。
试验实施例4，5和6
试验实施例4：抗线虫(犬弓首线虫)活性试验
试验实施例5：抗钩虫(犬钩口线虫)活性试验
试验实施例6：抗鞭虫(狐毛尾线虫)活性试验
将由上述实施例1(c)制备的13-[1-(4-甲氧基乙酰基氨基苯基)环戊烷羰氧基]-5-羟基米尔螨素A4，溶解在体积比为9∶1的苄醇和碳酸异丙烯酯的混合物中获得10％(w/v)测试溶液。将测试溶液以5mg/kg体重的剂量逐滴给药至被线虫，钩虫和鞭虫自然侵染(即将狗放置在有寄生虫的环境中并挑选被侵染的狗用于试验)的每只试验狗的头顶部区域。对于上述三种寄生虫，各自在测试化合物给药之前以及给药后7-9天测定排泄的每克狗粪便中的卵的数量(EPG)。测定在测试化合物给药至试验结束之间在狗粪便中排出的蠕虫的数量(WEF)。试验完成后，将每只试验狗进行尸体剖检统计消化道中存活的蠕虫数(SWDT)。结果列于表3中。
表3狗的编号 给药前的 7-9天后 WEF SWDT 杀灭率(％)
EPG 的EPG试验4(线虫杀灭试验)
1 6,800 0 3 0 100
2 2,400 0 5 0 100
3 40,400 0 8 0 100试验5(钩虫杀灭试验)
4 200 0 - 0 100
5 3,000 0 - 0 100
6 200 0 - 0 100试验6(鞭虫杀灭试验)
7 34 0 - 0 100
8 5 0 - 0 100
正如上面所看到的，测试化合物对侵染试验狗的线虫表现出优异的杀线虫活性。在测试化合物逐滴给药前，EPG水平是非常高的。然而，测试化合物给药后7-9天EPG水平降至0。在对试验狗消化道的尸体剖检研究中没有发现存活蠕虫。
在研究对试验狗的杀钩虫和鞭虫试验中，测试化合物的效力也是显著的。给药后7-9天，EPG水平降至0以及在消化道中没有发现存活的钩虫或鞭虫。
由上面的结果可以看出，测试化合物对消化道中的试验寄生虫具有显著的抗蠕虫活性。
试验实施例7
抗疥螨活性试验
将被疥螨自然侵染的狗和猫用于该试验。制备10％(w/v)的测试溶液即将实施例1(c)制备的13-[1-(4-甲氧基乙酰基氨基苯基)环戊烷羰氧基]-5-羟基米尔螨素A4，溶解在体积比为9∶1的苄醇和碳酸异丙烯酯的混合物中获得10％(w/v)测试溶液。以5mg/kg体重的比例将其给药至实验动物的头顶部区域。在给药前以及在测试化合物给药后三周从实验动物的耳及四肢处刮下表皮层。然后将上述获得的表皮层放入1 0％氢氧化钾溶液中，通过显微镜观察螨虫及其卵的数量。结果列于表4中。
表4 试验动物 给药前 给药后
(三周后)
虫体 卵 虫体 卵
狗 70 11 9 0
猫 35 86 0 0
上面的结果证实了当将测试化合物逐滴给药至已证实被疥螨侵染的每只狗和猫的头顶部区域时其具有显著的抗疥螨活性。三周后在试验狗身上尚存的疥螨数仅为9头并完全抑制了它们的产卵。另一方面，对于猫，观察的杀螨率为100％以及抑制产卵活性为100％。因此，结果清楚地表明测试化合物具有优异的抗疥螨活性。
试验实施例8
抗微丝蚴活性试验
由被犬恶丝虫侵染的狗采集微丝蚴(mf)。通过培养mf，13-[1-(4-甲氧基乙酰基氨基苯基)环戊烷羰氧基]-5-羟基米尔螨素A4(100ng/ml)和嗜中性粒细胞研究由上述实施例1(c)制备的13-[1-(4-甲氧基乙酰基氨基苯基)环戊烷羰氧基]-5-羟基米尔螨素A4抗mf的抑制活性。将由被侵染的狗获得的血用皂苷溶血可获得mf。嗜中性粒细胞是通过向大鼠腹膜内注射酪蛋白以诱导其反式迁移，随后密度梯度离心获得的。制备仅含mf，含mf+嗜中性粒细胞，mf+测试化合物以及mf+测试化合物+嗜中性粒细胞的肉汤培养基，然后将它们培养在37℃的5％CO2的培养箱中。实验结束后通过与仅含mf的肉汤中存在的mf数量比较来确定含嗜中性粒细胞，测试化合物以及测试化合物+嗜中性粒细胞的肉汤中mf的减少百分率。结果列于表5。
表5
抗mf(线虫的前幼虫期)活性试验是研究抗犬恶丝虫侵染的试验化合物活性的模型。如本实验体系中对测试化合物的研究结果，可以看出存在嗜中性粒细胞条件下测试化合物具有良好的抗mf活性。从上述结果可以得出的结论是测试化合物对犬恶丝虫侵染具有预防活性。
试验实施例9
抗棉红蜘蛛的杀螨活性试验
将带有螨寄生虫的豇豆叶片浸在由上述实施例1(c)制备的含有100ppm 13-[1-(4-甲氧基乙酰基氨基苯基)环戊烷羰氧基]-5-羟基米尔螨素A4溶液中约10秒，所述溶液是通过将含有1000ppm上述化合物溶液，溶解在体积比为95∶5的丙酮和水混合物中，然后用水稀释获得的。去除剩余的测试化合物溶液并将处理后的叶片放置在包含一块用浸过水的滤纸覆盖的海绵的陪替氏培养皿中。待叶片上的测试化合物溶液晾干后，记录螨卵数。然后将叶片保持在25℃的不加盖的陪替氏培养皿中。用测试化合物处理后2天，测定螨的死亡率(以螨的总数的百分数表示)。处理后7-10天，计算螨卵的“死亡率”(以未孵化的螨卵的总数的百分数表示)以及新孵化螨的死亡率(以杀死的新孵化螨总数的百分数表示)。试验设计了不同浓度测试化合物的重复。该试验中“未处理”表示对照试验其中使用水替代测试化合物溶液。结果列于表6和7中。
表6化合物 浓度 棉红蜘蛛(2天后) 螨的死亡率
(ppm)
总数 死亡数 濒死挣 逃脱 (％)
扎的 的测试 100 48 48 - - 100化合物 10 39 39 - - 100溶液 1 55 55 - - 100
0.1 65 64 1 98.5未处理 - 37 0 0
表7化合物 浓度 棉红蜘蛛卵(7 螨卵的 新孵化螨的
(ppm) 天后) 死亡率 死亡率(％)
总数 死亡数 (％) (％)测试 100 20 18 90 100化合物 10 20 5 25 100溶液 1 20 0 0 30未处理 - 20 0 0 0
由上述结果可以看出测试化合物具有杀螨活性，包括杀成螨，杀卵和杀新孵化螨的活性。
试验实施例10
抗南方根结线虫的杀虫活性试验
在容器(70×70×20mm)中制备琼脂平板(80ml：含1.25ppm卡那霉素，1.25ppm链霉素和0.8585ppm青霉素)。将处于子叶期的黄瓜栽植在平板上。将滤纸片(直径为8mm的薄片)浸渍在含有1000ppm的由上述实施例1(c)制备的13-[1-(4-甲氧基乙酰基氨基苯基)环戊烷羰氧基]-5-羟基米尔螨素A4的体积比为95∶5的丙酮和水混合物溶液中。将经过上述处理的滤纸片中的一片放入琼脂平板，另外两片处理的滤纸片覆盖子叶。
处理后，将容器用丙烯酸板盖住以防止水分蒸发。四天后，将含500头南方根结线虫的二龄幼虫的约2.5ml悬浮液逐滴加入琼脂平板。加入幼虫后10天，统计线虫的虫瘿数。各试验都是在温度为25℃和湿度为65％的条件下进行的。该试验中“未处理”表示对照其中用水替代测试化合物溶液浸渍滤纸。
下列评价指标用于评估获得的结果：
0：相当于未处理组(51-150个虫瘿)
1：稍低于未处理组(36-50个虫瘿)
2：低于未处理组(21-35个虫瘿)
3：显著低于未处理组(0-20个虫瘿)
结果列于表8中。
表8
由上述结果可以看出测试化合物具有杀南方根结线虫的活性。
试验实施例11
抗白蚁的杀虫活性试验
用含预定浓度的由实施例21制备的13-[1-(4-甲氧基乙酰基氨基苯基)环戊烷羰氧基]-5-羟基米尔螨素A4和13-[1-(4-甲氧基乙酰基氨基苯基)环戊烷羰氧基]-5-羟基米尔螨素A3的8∶2混合物的20μl丙酮溶液处理试验滤纸，然后在空气中晾干。在采样管中装入试验滤纸和10只工白蚁，然后将其放置在温度为26±1℃的黑暗的地方。处理四天后，测定白蚁的死亡率。“对照”是用不含测试化合物的丙酮处理而后在空气中晾干的滤纸。结果列于表9中。
表9
由上述结果可以得出的结论是测试化合物可有效地杀灭白蚁。
试验实施例12
抗猫栉头蚤的杀虫活性试验
制备试验容器，其中使用通常用作人造皮肤的ParafilmTM(购自Aldrich Chemical Co.Ltd.)将跳蚤的生存空间与牛血清隔离开。将足够量的测试化合物加入牛血清中至浓度为1ppm，在37℃，使跳蚤通过Parafi1mTM吸吮牛血清样品。每组包括20头跳蚤。根据48小时后死亡的跳蚤数，评估测试化合物的抗跳蚤的杀虫活性。通过统计没有测试化合物的对照组中死亡的跳蚤数，校正死亡率。结果列于表10。
表10
化合物 死亡率(％)
实施例15 100
实施例16 92.9
实施例17 94.9
实施例18 91.5
实施例19 90.7
米尔螨素A4 20.9
化合物A 2.4
化合物A与试验实施例1所述化合物相同。
工业实用性
本发明式(I)的米尔螨素衍生物及其农业，园艺，药物和兽医上可接受的盐具有突出的杀虫，抗蠕虫和杀螨活性以及还具有显著的预防活性以保护免受由寄生在动物，包括人上的昆虫和其它寄生虫引起的各种病害。它们的杀虫活性表现在对寄生在家畜或人身上的跳蚤[例如，猫栉头蚤和狗栉头蚤]具有特别高的活性。本发明式(I)的米尔螨素衍生物及其盐还可用作农药，如用于杀有害食木昆虫的杀虫剂以及用作卫生杀虫剂。
本发明的式(I)米尔螨素衍生物及其兽医上可接受的盐在兽医领域具有突出的杀虫活性，例如对动物有害的昆虫[例如胃蝇科，皮蝇科，狂蝇科，家蝇科，疽蝇科，盲虱科，长颚虱科，虱科，短角鸟虱科，长角鸟虱科，兽鸟虱科，臭虫科或猎蝽科]以及还对动物上的其它各种有害寄生虫如蠕虫具有很高的活性[例如体外寄生虫如蜱科，喘螨科，刺皮螨科，隐喙蜱科，蠕形螨科，痒螨科，疥螨科]。
本发明的式(I)米尔螨素衍生物及其农业和园艺上可接受的盐还可以非常有效地防治由园林害虫引起的各种病害。特别是，本发明化合物具有显著的杀螨活性，不仅可以杀螨如叶螨科，瘿螨科等的成虫和卵，而且还可以杀死已对现有杀螨剂获得抗性且在最近几年造成严重问题的那些螨。它们还对土壤以及树干或树皮中发生的根结线虫属，伞滑刃属，Phizoglyphus等具有显著的杀线虫活性。
本发明的式(I)米尔螨素衍生物及其农业和园艺上可接受的盐具有显著的杀昆虫活性因此可用作杀昆虫剂。本发明化合物对有害昆虫表现出很强的预防保护作用而且没有植物毒性，因此可以有效地处理农作物而不会引起任何伤害。本发明的式(I)米尔螨素衍生物及其农业和园艺上可接受的盐还可用于杀灭各种害虫，包括通过吸吮或叮咬方式破坏植物的有害昆虫，其它植物寄生虫，损害储藏物品的有害昆虫，有害的取食木材的昆虫以及卫生害虫。这些害虫的实例包括鞘翅目如绿豆象，玉米象，赤拟谷盗，马铃薯瓢虫，细胸叩甲，丽金龟(Anomalarufocuprea)，马铃薯甲虫，叶甲属，松天牛，稻象甲和欧洲竹粉蠹；鳞翅目如舞毒蛾，天幕毛虫，菜粉蝶，斜纹夜蛾，甘蓝夜蛾，二化螟，野螟(Pyrausta nubilalis)，粉斑螟，茶小卷叶蛾，苹果蠹蛾，地老虎(Agrotis fucosa)，大蜡螟和小菜蛾；半翅目如黑尾叶蝉，稻褐飞虱，康氏粉蚧，矢尖蚧，桃蚜，苹果蚜，棉蚜，菜缢管蚜，梨花网蝽，Nazara spp.，臭虫，温室白粉虱和木虱属；直翅目如德国小蠊，美洲大蠊，烟色大蠊，非洲蝼蛄和亚洲飞蝗；等翅目如Deucotermes speratus和台湾家白蚁；以及双翅目如家蝇，埃及伊蚊，种蝇，尖音库蚊，中华按蚊，黄腹厩蝇和三带喙库蚊。
本发明的式(I)米尔螨素衍生物及其药物和兽医上可接受的盐具有突出的杀寄生虫活性并作为杀动物和人体内寄生虫的有效的抗蠕虫药剂。特别是，它们表现出优异的抗线虫的杀寄生虫活性[例如下列属的线虫：血矛属，毛圆属，奥斯特属，细颈属，古伯属，蛔属，仰口属，食道口属，夏伯特属，毛尾属，后圆属，圆线属，毛线属，网尾属，毛细属，异刺属，弓首属，蛔型属，类圆属，原圆属，吸吮属，柔线属，尾旋属，泡首属，筒线属，颚口属，泡翼属，尖尾属，钩口属，钩形属，弓蛔属和副蛔属]，它们是家畜，家禽以及农业上重要的动物如猪，绵羊，山羊，牛，马，狗，猫或鸡体中的寄生虫。
本发明化合物可特别有效地防治侵袭肠道的某些寄生虫：细颈属，古伯属和食道口属，在胃中发现的血矛属或奥斯特属的那些寄生虫以及在肺中发现的网尾属那些寄生虫。它们还对在其它组织或器官如心脏，血管和皮下以及淋巴组织中发现的丝虫科和腹腔丝科寄生虫表现出显著的杀寄生虫活性。
本发明化合物还可有效地防治人体内寄生虫，因此对经常在人消化道内观察到的寄生虫如钩口属，板口属，Asdaris，类圆属，毛线虫属，毛细属，毛尾属或住肠属的寄生虫表现出显著的杀寄生虫活性。
本发明化合物甚至还对在消化道外的血液，或组织以及器官中观察到的且为医学上重要的那些寄生虫表现出显著的杀寄生虫活性，特别是在肠外寄生条件下仍可存活的肠内寄生虫，例如副丝虫属，吴策属，布鲁线虫属，光丝虫属，盘尾属，负瘿属(Elaeophara)，恶丝虫属，或丝虫科的罗阿属，Neurofilaria，丝状属，双瓣属，冠丝虫属，腹腔丝科和无肛科(Aproctidae)的Neurofilaria寄生虫，龙线科龙线属的那些寄生虫以及类圆属或毛线虫属的寄生虫。
本发明式(I)米尔螨素衍生物及其药物和兽医上可接受的盐可用作人或不是人的动物的抗蠕虫剂，它们可以单位剂量方式口服给药，例如液体饮剂或干固体，或以分散于动物饲料中的方式给药；溶解或分散在液体载体赋形剂中的化合物的不经肠注射液形式；或将溶解在溶剂中的化合物通过点滴处理法体表应用。
液体饮剂可以包括溶解在适合的非毒性溶剂或水中的活性化合物溶液，悬浮液或分散液，通常与悬浮剂如膨润土，湿润剂或其它赋形剂混合，以及还任选加入消泡剂。液体饮剂通常含有以重量计约0.01-0.5重量％，优选0.01-0.1重量％的活性成分。
用于口服给药的单位剂量形式通常可以使用如含有需要量的活性成分的干固体，胶囊，丸剂或片剂。这些组合物可以通过将活性成分与适合的粉状稀释剂，填充剂，崩解剂和/或粘合剂(例如淀粉，乳糖，滑石，硬脂酸镁，植物橡胶等)均匀地混合而制备。如需要可根据欲处理的动物特性，侵染的严重程度，寄生虫的特性以及欲处理的动物的体重来调整制剂的重量和含量。
当本发明化合物作为动物饲料添加剂方式给药时，可将其通过顶肥或弹丸形式用于均匀地分散在食物中。所需的抗寄生虫活性可通过将0.0001-0.02％重量的本发明化合物加入饲料中获得。
已溶解或分散于液体载体赋形剂中的本发明式(I)的米尔螨素衍生物及其兽医上可接受的盐，可通过前胃，肌内，支气管内或皮下注射方式不经肠地给药于动物。作为不经肠给药方式，优选将本发明化合物与植物油如花生油或棉籽油混合。所需抗蠕虫活性通常是将0.05-50％重量的本发明化合物加入可注射用制剂中获得的。
在将本发明活性成分溶解在溶剂中向需处理的体表位置直接给药的情况下，可以使用已知可提高经皮吸收能力的溶剂。实例包括醇衍生物如乙醇，异丙醇，油醇和苄醇；羧酸衍生物如月桂酸和油酸；酯衍生物如肉豆蔻酸异丙酯和碳酸异丙烯酯；亚砜衍生物如二甲基亚砜；或酰胺衍生物如N-甲基吡咯烷酮；或上述例举的溶剂的混合物。
在治疗动物体内寄生虫侵染时，可获得最佳防治效果的本发明式(I)的米尔螨素衍生物及其药物或兽医上可接受的盐的用量将根据欲处理的动物特性以及上述侵染的特性和严重程度而变化。口服给药时，相当于动物的每1公斤体重使用约0.01-100mg，优选0.5-50.0mg的剂量可获得满意的效果。通常化合物每天分1-6次给药，1-5天一个疗程。然而，精确的给药方式必须考虑欲处理动物的确切状态。
机译： 米尔贝霉素的13-取代5氧衍生物和包含所述衍生物的抗蠕虫，杀螨和杀虫组合物
机译： 13-取代的米尔倍霉素的衍生物，其制备方法及其对昆虫和其他害虫的用途
机译： 二硫代碳酰亚胺衍生物;二硫代氨基甲酸酯，所述衍生物和所述二硫代氨基甲酸酯的制备方法，以所述衍生物为有效成分的杀真菌剂/杀虫剂/杀螨剂，防治真菌和昆虫或螨虫的方法，所述衍生物和杀真菌，杀虫或杀螨组合物的用途
