一种治疗高泌乳素血症的仙甲颗粒的制备方法

摘要

本发明涉及一种治疗高泌乳素血症的仙甲颗粒的制备方法。该方法采用先将牡丹皮、柴胡用水蒸气蒸馏提取挥发性成份,然后与其余药材加水提取,提取液浓缩,合并蒸馏液与提取浓缩液加糊精喷雾干燥制成颗粒的方法,最大限度地保留了处方中的各活性成份,使制剂的疗效更为确切。同时采用喷雾干燥使浸膏与蒸馏液直接干燥成颗粒,减少了制剂中辅料的加入量,方便制成各种口服制剂,便于患者服用。

说明书

本发明涉及中药的制备方法，具体涉及一种治疗高泌乳素血症的仙甲颗粒的制备方法。

高泌乳素血症是一种妇科病，临床表现为闭经、泌乳、不孕等，发病率较高。仙甲冲剂就是治疗该种疾病的传统中药复方制剂。中国专利92107608.8公开了仙甲冲剂的制备方法，该专利采用传统的中药水煎煮方法，直接水煎浓缩成浸膏，然后制成颗粒。由于仙甲冲剂处方中有多味含有挥发性活性成份的中药，采用这种方法提取，挥发性活性成份全部丧失殆尽，影响了疗效；再则用水煎煮方法获得的流浸膏需加入大量辅料才能制成制备冲剂的颗粒，服用剂量大。

本发明的目的是要公开一种能充分保留各种活性成份的仙甲颗粒的制备方法。

本发明公开的仙甲颗粒的制备方法包括下列步骤：1.配方

柴胡2.8-24％淫羊藿5.6-48％茯苓2.8-24％青皮2.8-24％麦芽5.6-48％肉苁蓉2.8-24％牡丹皮2.8-24％赤芍2.8-24％栀子2.8-24％夏枯草2.8-24％穿山甲0.15-1.5％地黄5.6-48％当归4.4-37％白芍2.8-24％牛膝2.8-24％2.颗粒制备方法

将处方中的牡丹皮、柴胡水蒸气蒸馏，收集蒸馏液为生药1-10倍，另器保存，药渣中加入除穿山甲粉外其余药材，加水为总生药3-30倍，提取二次，合并提取液，滤过，真空浓缩至相对密度为1.03-1.30(60-65℃)的浸膏，加牡丹皮等蒸馏液及糊精，糊精加入量相当于生药重量7.0-25％(亦相当于干浸膏的0.30-1.1倍量)，以进风温度为145-155℃进行喷雾干燥，干粉与穿山甲粉混匀，制成颗粒，即得。  

原处方中穿山甲为国家保护动物，但在方中又必不可少，在保证临床疗效的基础上，本发明将穿山甲在方中的比例由原来的4.3-36％降低到0.15-1.5％，原来穿山甲与其余药材一起水煎改为穿山甲单独粉碎与其余药材的提取浸膏粉混合制成颗粒。

处方中有几味富含挥发性成份的药物，牡丹皮挥发性成份中主含丹皮酚，丹皮酚药效学证明对小鼠的实验性疼痛有镇痛作用，对实验性大鼠后肢足跖浮肿有抗炎作用。柴胡挥发性成分对巴豆油引起的小鼠耳部炎症有抗炎作用。因牡丹皮、柴胡挥发性成份的药效作用与本病临床作用相一致，故本发明制法中先提取牡丹皮、柴胡挥发性成份。经比较共水蒸馏和水蒸气蒸馏两种方法，水蒸气蒸馏提取的挥发性成份高，故选用水蒸气蒸馏。将蒸馏液与其他成份提取浸膏合并，经喷雾干燥制成颗粒，这样能充分保留牡丹皮与柴胡的活性成份。

本发明喷雾干燥的进风温度控制非常重要，将影响产品的质量。

表进风温度对成品的影响

  进风温度           135℃    145℃           155℃项目  干燥前   干燥后   干燥前   干燥后   干燥前   干燥后浸膏量  57kg  57kg  57kg含总固体  18.7kg  18.7kg  18.7kg糊精加入量  13.0kg  13.0kg  13.0kg总固体  30.8kg  30.3kg  30.8kg  29.7kg  30.8kg  29.6kg丹皮酚量  33.3g  25.5g  33.3g  25.1kg  33.3g  24.8g淫羊藿甙量  47.5g  45.7g  47.5g  46.1g  47.5g  46.3g干粉含水量  4.9％  2.2％  1.9％

根据上述实验，综合考虑各项因素，进风温度应控制在145-155℃。

本发明采用喷雾干燥、干式制备颗粒的方法，辅料用量由原来的流浸膏的3倍量降低到浸膏的0.15-1.5倍量，方便了携带和服用。

用本发明方法制得的仙甲颗粒，可方便地制成各类口服制剂如丸剂、胶囊剂、片剂、口服液等。

用本发明的仙甲颗粒进行药效学试验证明可明显对抗胃复胺所致大鼠泌乳素的升高，增加家兔的排卵点数。一、实验材料(一)药品及试剂

仙甲颗粒剂为深棕色液体，口服，含量按生药计算为4.0g/ml，成人日用量为80g/50kg，由中国人民解放军第四五四医院提供。临用前用蒸馏水配成所需浓度(按生药量计算)。

Parlodel(溴隐亭)：SANDOZ PHARMA LTD，EXP1297。临用前用蒸馏水配成所需浓度(按制剂量计算)。

甲氧氯普胺(胃复胺)注射液，无锡市第七制药厂，批号：960107。

枸橼酸氯米芬(胶囊)，上海衡山药业有限公司，批号：951001。

泌乳素药盒，天津九鼎医学生物工程公司提供。

苯甲酸雌二醇注射液，上海第九制药厂，批号：941102。

硫酸铜(化学纯)，上海试剂一厂，批号：840917。(二)动物

ICR小鼠、SD大鼠，由南京中医药大学实验动物中心提供，苏动(质)95040。(三)82-1型离心机，中国制造。

FT-630型微机多探头放免测定仪，北京核仪器厂。

UV-3000紫外分光光度计，日本岛津。二、实验条件

给药前后，实验小鼠、大鼠均雌雄分笼用全价颗粒饲料喂养，自由饮水，室温20±2℃。三、实验方法与结果(一)仙甲颗粒剂对大鼠实验性泌乳素升高的影响

选用雌性SD大鼠50只，体重180-210g，各鼠先眼眶取血，测定大鼠血清正常乳泌素(PRL)值。然后随机分为五组，(1)正常组：蒸馏水10ml/kg；(2)模型组：蒸馏水10ml/kg：(3)溴隐亭组：1.6mg/kg；(4)仙甲颗粒剂小剂量组：8.6g/kg；(5)仙甲颗粒剂大剂量组：25.8g/kg。各组按10ml/kg每天灌胃给药1次，连续34天。在给药后的第13天，除(1)组外，开始皮下注射胃复胺40mg/kg，每天1次，连续23天。于第10、12、21天皮下注射胃复胺10h后，对各大鼠进行眼眶取血，再次测定血清PRL值，结果见表1。然后将大鼠脱颈椎处死，剖腹，取出卵巢和子宫，称重，计算脏器系数(每百克大鼠所占脏器的重量(mg/100g)，结果见表2。

表1仙甲颗粒剂对大鼠实验性泌乳素升高的影响(X±SD)

         药物剂量           PRL(μg/L)

          (g/kg)组别

                                                   给胃复胺后

                           正常       第10天         第12天           第21天  正常组        -           2.80±0.26  2.71±0.24      2.86±0.32      2.78±0.22  模型组        -           2.65±0.34  5.59±1.47△△  5.68±0.86△△  5.88±0.63△△溴隐亭组      1.6mg/kg×34d 2.70±0.26  3.21±0.54**    3.18±0.24**    3.26±0.74**仙甲小剂量组  8.6×34d      2.90±0.39  5.12±1.83      3.94±0.83**    3.50±0.54**仙甲大剂量组  25.8×34d     2.74±0.39  3.45±0.87**    3.27±0.64**    2.93±0.90**注：各组动物数n＝10t检验：△△P＜0.01与正常组比较；**P＜0.01与模型组比较表2仙甲颗粒剂对大鼠卵巢、子宫脏器系数的影响(X±SD)

          动物数  药物剂量组别

                                     脏器系数(mg/100g)

            (只)  (g/kg)

                                      卵巢        子宫正常组          10      -              63.1±10.3   184.2±56.6模型组          10      -              56.0±7.0    150.8±37.3溴隐亭组        10      1.6mg/kg×34d  59.7±7.7    168.2±83.2仙甲小剂量组    10      8.6×34d       55.8±8.0    156.3±19.8仙甲大剂量组    10      25.8×34d      58.4±8.3    155.6±19.1

实验结果表明：①仙甲颗粒剂两剂量组能明显对抗胃复胺所致大鼠泌乳素的升高，与模型组比较，差异显著(P＜0.01)，提示仙甲颗粒剂具有降低泌乳素的作用。②胃复胺能减轻大鼠卵巢、子宫的脏器系数，但与正常组比较无明显差异(P＞0.05)，仙甲颗粒剂两剂量组对胃复胺减轻的大鼠卵巢、子宫的脏器系数无明显影响(P＞0.05)。(二)仙甲颗粒剂对家兔促排卵作用

取雌性成熟的青紫兰家兔42只，体重2.2-2.5kg，分笼饲养，随机均分为六组：即(1)正常组：蒸馏水5ml/kg；(2)模型组：蒸馏水5ml/kg；(3)模型+氯米芬组：18.0mg/kg；(4)模型+仙甲颗粒剂小剂量组：5.0g/kg；(5)模型+仙甲颗粒剂大剂量组：15.0g/kg：(6)：仙甲颗粒剂小剂量组：5.0g/kg；(7)仙甲颗粒剂大剂量组：15.0g/kg。各组于上午9-10时按5ml/kg的容积每天灌胃给药1次，连续10天。于给药后的第7天，除(1)、(6)、(7)组外，其余各组肌注雌二醇100μg，每天1次，连续2次；第3天静脉注射1％硫酸铜0.4ml/kg，以诱发排卵。注射硫酸铜后24h剖腹，检查两侧卵巢，记录排卵点(卵巢表面带有鲜红色小点的小突起，且用盖玻片轻轻压迫小点，鲜红色仍然存在)，并将卵巢称重，结果见表3。表3仙甲颗粒剂对家兔促排卵作用(X±SD)

             药物剂量             排卵点          卵巢重量 组别

              (g/kg)           (个/两侧卵巢)     (mg/kg体重)正常组              -               2.3±0.4         152.9±22.6模型组              -               4.8±0.7△△     166.8±16.9模型+氯米芬组       15.0mg/kg×10d  6.5±1.6△△*    187.5±26.7△模型+仙甲小剂量组   5.0×10d        6.7±1.1△△**   182.2±18.4△模型+仙甲大剂量组   15.0×10d       7.8±1.3△△**   185.2±20.8△仙甲小剂量组        5.0×10d        4.5±0.6△△     177.6±15.3仙甲大剂量组        15.0×10d       5.2±0.8△△     179.0±21.7

注：各组动物数n＝6t检验：△P＜0.05 △△P＜0.01  与正常组比较

   *P＜0.05  **P＜0.01    与模型组比较

实验结果表明：①仙甲颗粒剂大小剂量组及模型+仙甲颗粒剂大小剂量组均能增加家兔的排卵点数，与正常组比较差异非常显著(P＜0.01)；②仙甲颗粒剂大小剂量组亦能协同雌二醇和硫酸铜的促排卵作用，与单用雌二醇和硫酸铜(即模型组)比较，差异显著(P＜0.05、P＜0.01)，提示仙甲颗粒剂具有促排卵作用。

本发明公开的仙甲颗粒制备方法采用先用水蒸气蒸馏提取挥发性成份，然后与其余药材加水提取，提取液浓缩，合并蒸馏液与提取浓缩液加糊精喷雾干燥制成颗粒的方法，最大限度地保留了处方中的各活性成份，使制剂的疗效更为确切。同时采用喷雾干燥使浸膏与蒸馏液直接干燥成颗粒，减少了制剂中辅料的加入量，方便制成各种口服制剂，方便了患者的服用。

实施例1

配方：柴胡150g淫羊藿300g茯苓150g青皮150g麦芽300g肉苁蓉150g牡丹皮150g赤芍150g栀子150g夏枯草150g穿山甲33g地黄300g当归233g白芍150g牛膝150g

按处方量柴胡、牡丹皮水蒸气蒸馏，收集蒸馏液为生药重量5倍，另器保存，残渣加入除穿山甲粉外其余药材，加水10倍，提取二次，合并提取液，滤过，真空浓缩至相对密度为1.14的浸膏，加柴胡等蒸馏液及糊精4.3Kg，喷雾干燥，喷雾干燥的进风温度在148℃，干粉与穿山甲粉混匀，制成颗粒剂，即得。

实施例2按实施例1处方量柴胡、牡丹皮水蒸气蒸馏，收集蒸馏液为生药重量7倍，另器保存，残渣加入除川山甲粉外其余药材，加水15倍，提取二次，合并提取液，滤过，真空浓缩至相对密度为1.15的浸膏，加柴胡等蒸馏液及糊精4.4Kg喷雾干燥，喷雾干燥的进风温度在153℃，干粉与穿山甲粉混匀，制成颗粒剂，即得。