一种零背景高通量定向表达克隆的方法

摘要

本发明提出了一种零背景、高通量、定向克隆表达的方法,它是基于特定限制性内切酶双酶切表达载体,利用T4DNA聚合酶消化经特殊设计的引物扩增的PCR产物,然后将PCR产物定向克隆到表达载体上的方法。特定的限制性内切酶可以是CpoI、NotI、EarI、SapI、StyI中的任两种(同种或异种)。本发明可与目前报道的所有基于PCR建库的方法相容,能做到零背景,高通量定向克隆,且实验周期短,成本低,适合于以细菌、真菌、动物、植物等作为宿主的高通量克隆和表达。是一个非常经济的克隆方法。