非洲菊工厂化试管快繁方法

摘要

本发明涉及一种非洲菊大规模工厂化试管快繁方法,包括以非洲菊幼小花蕾为外植体,对其进行脱分化及再分化的诱导,利用组培技术得到的试管成苗,通过使用100%蛭石作为基质,过渡一个月,再经过三至四个月的过渡培养,就可得到5－6片叶,株高10－13厘米的成株,半年后开花,可达销售水平的商品苗。本方法成本低,简便易行,节约土地,周期短见效快,后代遗传性稳定不会出现性状分离,可四季生产,是一种适于工厂化开发生产非洲菊鲜切花及盆栽花的有效方法。

说明书

本发明涉及试管内快速繁殖非洲菊微型种苗的方法。

非洲菊又名扶郎花是一种极具观赏价值的花卉，切花园艺品种很多有白、橙、红、黄、粉等多种颜色，四季常开。经检索国内外未见申报涉及非洲菊组培和工厂化育苗技术的专利。常规的繁殖方法有分株繁殖、播种繁殖，速度较慢不利于快速大面积生产，且播种繁殖易产生性状分离。

本发明目的在于提供一种适于非洲菊快速繁殖的方法，该方法具有繁殖速度快，适于大面积生产，性状稳定等特点。

本发明是这样实现的：它包括非洲菊组培试管苗的快繁过程和试管苗过渡培养过程。

上述的试管苗快繁过程包括非洲菊外植体的采集，外植体的消毒、接种，外植体的脱分化、再分化、试管苗的继代及试管苗的生根过程。组培试管苗的快繁过程包括：

1)、非洲菊外植体的采集：

于春秋两季选择萼片包裹未开放的花蕾，直径范围为0.1～2厘米，最适0.3～1厘米，生长健壮且无病虫侵害的植株花蕾为外植体，流水冲洗。

2)、外植体的消毒、接种：

A、外植体的消毒：用75％的酒精浸泡30秒～2分钟，然后用0.1％的新洁尔灭消毒5～15分钟，再用0.1％的升汞消毒3～10分钟，用无菌水冲洗4-5遍。

B、接种：培养基MS+BA0.2~10PPM+NAA0.1~5PPM上。

3)、外植体的脱分化、再分化及试管苗的继代。

A、花蕾脱分化：接种在MS+BA0.2~10PPM+NAA0.1~5PPM的培养基上，培养基最适为MS+BA10PPM+NAA0.2PPM，置于光下培养。一个月后，即产生愈伤组织。

B、愈伤组织再分化：愈伤组织接种在MS+BA0.2~10PPM+NAA0.1~5PPM培养基上，培养基最适为MS+BA10PPM+NAA0.2PPM，经过30~40天的培养，可转绿，产生半透明颗粒状生长点称之为球状体。

C、试管苗继代：出现球状体后立即将其转入MS+BA0.5~3PPM+NAA0.1~0.5PPM的生芽培养基上生成不定芽，当株高达1～3CM时可用上述培养基进行继代培养。

4)试管苗的生根

将株高2-3厘米，具有3-4片叶的健壮试管苗从分化培养基移至1/2MS+NAA0.3~2PPM或1/2MS+IBA0.1~1PPM培养基中进行生根，加少量活性炭(每升培养基中加0.5-1.5克)可提高生根效率。大约15天后基部即可生出3-5条根，长度0.2~2CM。

上述试管苗过渡培养过程指：

1)无菌苗过渡：选择已生根的无菌苗，转移至100％蛭石基质中继续培养，第一周弱光照射，湿度60～90％，温度控制在15-28℃。

2)经上述过渡的试管苗暴露到外界环境中，加强光照，每周施一次全营养液。营养液各元素浓度为，N：224PPM、P：42PPM、K：315PPM、Ca：162PPM、Mg：50、S：65PPM、Fe 3PPM、Mn：0.5PPM、B：0.5PPM、Cu：0.02、Zn：0.05、Mo：0.01。经过3-4个月的培养，可长成具有5-6片叶，株高10-13厘米的健壮植株。过渡成活后的试管苗也可定植于草炭∶马粪∶珍珠盐=3∶1∶1的营养土中，每周只需浇一次清水，半年施一次全营养液补肥。本发明的优点和效果1．本发明提供了一整套非洲菊种苗生产的工艺流程，可大规模开发种苗   生产，简便易行，方便适用。2．采用组培快繁技术和无土栽培技术相结合，可以在温室内四季生产，   节约土地。3．繁殖速度快效率高，一个月为一个周期，繁殖系数为3，是常规分株   繁殖年产量的几万倍，单株组培苗成本仅0.2～0.3元，经济效益可观。4．无性繁殖观赏花卉，可完全继承原种优良的遗传性状，避免杂交后代   常出现的性状分离现象，安全可靠。

以下为本发明的实施例：一．组培试管苗的快繁过程：1．外植体的采集：选择直径大小在0.3～1cm的非洲菊小花蕾(此时的花   蕊由萼片包裹)作为培养材料，由于其叶片基生花朵位于叶片基部叶腋   处离土较近，养护不精心时极易污染污物不易消毒处理，采集前可加   适当的袋罩保持花蕾的清洁。2．材料清洁消毒处理：新采集的外植体流水冲洗表面污物，无菌消毒-75   ％医用酒精杀菌一分钟，在用0.1％新洁尔灭消毒10分钟，然后用0.1％   升汞继续消毒5分钟，无菌水冲洗4～5次，无菌滤纸吸干材料表面水   分。3．接种离体无菌培养脱分化：消毒接种用具，在洁净工作台上小心将非   洲菊小花蕾外包裹的萼片剥除，露出内部花蕊并将其切分成0.2~0.3m   m的小块接种于MS+BA10PPM+NAA0.5PPM的培养基上，一周就可启动花   蕊胀大转绿，一个月后可见白色或乳白色半透明愈伤组织出现，并慢慢   转绿。4．愈伤组织再分化：转绿后的愈伤组织待发现有绿色半透明球状体出现   时立即转入MS+BA2PPM+NAA0.2PPM使胚性愈伤分化出苗。5．试管苗继代培养：成苗后的非洲菊株高2～3CM，可利用   MS+BA1~3PPM+NAA0.1~0.5PPM继代培养以扩大基数，30天为一个周期，   3倍增值。6．试管苗生根：株高2～3CM的健壮试管苗可进入生根培养，此时应使用   1/2MS+NAA0.3~2PPM或1/2MS+IBA0.1~1PPM十五天后根长1CM以上可以   过渡移栽。二．试管苗过渡培养过程：

生根后的组培苗移栽前先打开瓶盖练苗一天，然后从培养瓶中取出，小心洗净根部培养基可在蛭石中过渡一个月，其中每周浇一次全营养液，三十天后可定植入土或上盆。基质比例草炭∶马粪∶珍珠盐=3∶1∶1。非洲菊喜温暖，阳光充足，通风良好的环境最适温20～25。