一种新型的治疗脑神经系统疾病的口服药物及其制备方法

摘要

本发明公开了一种治疗脑神经系统疾病的口服药物,它以脑神经营养因子为主料,以黄芪、人参、蜂王浆等中药为辅料制成。其过程为将新鲜羊脑组织匀浆化、再经反复冻溶、酸解、中和、离心取上清液、分离纯化、合并生物活性组份,制得脑神经营养因子;再将人参片用水浸渍、过滤、滤液蒸馏,浓缩蒸馏液,醇化,得人参液;将黄芪片多次醇浸,得黄芪液;将蜂蜜加热滤过,加入蜂王浆,搅拌依次加入白糖、人参液、黄芪液、山梨酸醇溶液、脑神经营养因子浓缩液、补蒸馏水至需要量、搅拌、滤过、分装。

说明书

本发明涉及一种治疗神经系统疾病，尤其对重症恢复期病人的一种口服药物，具体地说是以一种新型脑神经营养因子为主料，以中药为辅料的治疗神经系统疾病，康复脑、健脑、补脑的口服液，本发明还涉及上述药物的制备方法。

本发明所指的神经系统疾病是指人脑系统因外伤、病变、衰老或先天发育不良而产生的功能障碍，是严重危害人类健康的常见多发病。据有关资料报道，我国脑神经系统疾病发病率占人口的18.4‰，弱智儿童发病率占22.2‰，老年病的发病率占老年人口的10％，再加上外伤、脑卒中等等以及这些疾病的恢复期病人，总数估计可达上亿人口。

十年以前，我国治疗以上疾病的口服药物几乎只有谷维素一种(现基本被淘汰)，目前在临床普遍应用的治疗以上疾病的口服药物是脑复康及康脑灵两种西药。前者由于在治疗过程中对脑神经系统起一种抑制作用，因而病人治疗中一直有头晕、乏力的感觉；后者主要是多种氨基酸的营养补充剂，它们不能达到更好的临床效果，远远不能满足目前临床治疗神经系统疾病的需要。

本发明人经多年的医学实验及临床经验发现以中药黄芪的补气、升血、降水，人参、蜂王浆的补气、健脑、补肾、扶正固本之功效，加之以脑神经营养因子的激活神经细胞，促进神经再生的特点，可以大大提高临床疗效，达到标本兼治的目的。

本发明的目的在于提供一种以脑神经营养因子为核心，辅以中药成分，发挥最大药性功能，且价格低廉，使用方便的口服液体药物。

本发明还提供了制备上述治疗神经系统疾病口服液体药物的方法。

本发明的治疗神经系统疾病的药剂，其特征在于，它是由下述原料制成的药剂(以下均为重量比)：

干燥脑神经营养因子0.06-0.12

人参(红参)    0.2-0.35       蜂王浆0.2-0.35

黄芪          0.3-0.55       蜂蜜    8-12

山梨酸        0.012-0.014    白糖  0.02-0.03制备上述治疗脑神经系统疾病的药剂优选原料配方为：

干燥脑神经营养因子0.06-0.1

人参(红参)  0.25-0.35      蜂王浆  0.25-0.35

黄芪        0.45-0.55      蜂蜜      9-12

山梨酸      0.012-0.014    白糖    0.02-0.03

制备上述治疗神经系统疾病的药剂最佳原料配方为：

干燥脑神经营养因子  0.08

人参(红参)    0.3      蜂王浆  0.3

黄芪          0.5      蜂蜜    10

山梨酸        0.013    白糖    0.025

所述的药剂是口服液。

上述治疗脑神经系统疾病的药物的制备方法，依次按下述步骤进行：

(A)脑神经营养因子的制备

取新鲜羊脑，匀浆化后反复冻溶，再酸解、中和至PH＝7，离心吸取上清液，分离纯化，合并生物活性组份，滤膜除菌，冷藏。

(B)中药辅剂的制备

取人参切片，加水浸渍后，滤过，滤液蒸馏，收集馏出液，另器保存；滤渣加水煎煮3次，滤过，滤液蒸馏，收集馏出液，合并蒸馏液，浓缩，加乙醇搅拌，静置，取上清液；残留物加乙醇，搅拌，静置，取上清液；低温保藏人参液，回收乙醇；取黄芪切片洗净，加入40％乙醇，浸泡，滤过，留滤液，药渣再加40％乙醇浸泡，滤过，留滤液，合并滤液，低温保藏黄芪液；去药渣，回收乙醇；

(C)成品制备

将山梨酸溶于95％乙醇中备用；将蜂蜜加热95-100℃，保温20分钟，滤过，凉至室温加入蜂王浆，搅拌依次加入白糖及上述人参液、黄芪液、山梨酸醇溶液、脑神经营养因子浓缩液，最后补加蒸馏水至所需量，搅拌1小时，滤过至澄明，消毒，分装。

本发明的一个特点是本发明的药物中含有丰富的激活神经细胞，促进神经细胞生长，抗衰老，调节生命机能的有效成分。

经北京市XXXXXX测定，每支制剂(10毫升)中含有以下成分(克)：

名  称        含量

 多肽         0.1

氨基酸        0.65 人参总皂甙       0.06

黄酮类        0.1

多糖          3.8

蛋白质        0.08

本发明药物中脑神经营养因子的化学特性：在由总匀浆经过酸解、中和、离心获得的上清液组分粗产品的生物活性组份对胰蛋白酶是敏感，表明该因子中肽类为主要成分。上述上清液提出物粗产品中存在的生物活性组份在SephadexG-50柱上洗脱下来，洗脱时间近似于细胞色素C，表明活性分子的等电位近似于细胞色素C，即约10-10.5。对所得到的生物活性组份进行SDS-PAGE电泳，由TSK-CM-35W柱得到的生物活性物质的信号带的移动情况与标准溶菌酶相近，因而具有的大分子量为10KD。

本发明的药物基于下述的药效原理：

1、促进神经营养：脑神经营养因子是一群属于自然生成，具有对脑神经特异作用的多肽。其主要作用在于促进神经元的分化(轴突和树突的形成)，保持神经细胞的完整性(特定传导物质的代谢)，和防止神经细胞的退化(免于损伤的保护)。本发明药物中的脑神经营养因子及黄芪对中枢和外周神经系统不同的神经细胞具有促进生长的功效，而此功效是随着该因子的多少而定。本发明药物是一种具有营养神经，刺激神经元再生的药物，它能诱导神经元的分化，保持神经元的存活，并保护神经细胞免受缺血和毒性的伤害，免疫组织化学方法揭示其作用是高度特异性的，它可以达到以下功效：①防止自由基生成；②保护易受伤的海马CA1锥状细胞；③防止细胞毒性水肿的生成；④稳定脑的微循环；⑤降低急性脑缺血的死亡率。

2、调节神经功能：电生理显示本发明药物对于海马及皮质细胞具有持久的电生理效应(长期的电位增强效应)，而此电生理效应通常可作为判断学习过程的依据。组织学的研究显示，本发明药物可以明显促进海马锥状神经突触的形成。动物实验也显示，本发明药物可以明显改善动物的学习能力，多项实验征明，黄芪、蜂王浆均有这种功能。

3、调节神经代谢：脑组织切片和匀浆研究实验显示本发明药物可以改善有氧性的能量代谢，此外还可提高蛋白质合成及改善细胞离子内的交换泵的功能。另外，在活体内本发明药物可以明显降低脑内的乳酸的浓度，说明本发明药物对于局部缺血或缺氧的突发事件具有保护作用。由于脑内的乳酸浓度降低，使氧自由基减少，因此神经元的线粒体不易受到损害。本发明药物中脑神经营养因子、黄芪、蜂王浆、蜂蜜都具有明显的抗衰老及组织修复的功能。

我们对上述本发明药物用动物进行了毒性或不良影响的实验，结果如下：

1.急性毒性实验：当使用本发明药物，大鼠口服灌胃至2000mg(药剂量)/kg(鼠体重)，小鼠口服灌胃至3000mg/kg时，3天内观察，均无任何不良反应。

2.长期毒性实验：用大鼠对本发明药物进行长期毒性实验，剂量为5、25、125mg/kg，口服用药26周，在13周时处死部分动物，结果血液生化、尿化验均正常。用药组动物体重、脑重、肝重在用药13周及26周均较对照组增加快，但组织病理学检查(包括胃)未发现病变。而人的用药量为0.3mg/kg/天，是动物实验的416分之一。证明本发明药物安全可靠。

本发明药物于1995年由北京XXXXXX批准为内部制剂，在XXXXXX及XXXXXX两所医院经3年对数百名病人试用，其中有脑外伤恢复期，脑外伤神经反应，腔隙性脑梗塞，脑卒中恢复期，老年痴呆，手术后恢复期，偏头痛等各类病人，年龄在5-91岁不等，男女均有，进行系统的观察比较。结果疗效非常满意。

为了说明本发明药物的疗效，特选择下列三组病人对照，第一组为实验组，使用本发明药物进行治疗，口服10ml/次，3次/天。第二组为对照组1，使用从北京XXXXXX医药公司购得，由XXXXXX当年生产的西药脑复康治疗，0.4g/次，3次/天。第三组为对照组2，使用从北京XXXXXX医药公司购得由XXXXXX当年生产的西药康脑灵治疗，3g/次，3次/天，将三组治疗结果进行对比。

1.脑外伤性神经反应病人治疗对比：

本组病人均为脑外伤病人，CT检查未发现器质性病变，但均有明显的头痛、头晕、恶心、乏力、失眠、精神差等症状，受伤时间均在1周内，年龄在20-42岁，每个病人用上述剂量治疗10天，10天后测定治疗后上述症状是否完全消失。表1.脑外伤性神经反应病人治疗对比：

    组别    病例  治疗后症状  消失人数  治愈率％  实验组    20    19    95％  对照组1    20     6    30％  对照组2    20    12    60％

2.腔隙性脑梗塞病人治疗对比：

本组病人均经CT证实在大脑半球的不同部位有腔隙性脑梗塞病灶，所有病人均有头晕、乏力、精神差等症状，发病时间均在3个月内，年龄43-61岁之间，男女均有，每个病人用上述剂量治疗20天，20天时测定治疗后上述症状是否完全消失。

    组别    病例  治疗后症状  消失人数  治愈率％  实验组    10    9    90％    对照组1    10    1    10％    对照组2    10    4    40％3.开颅手术后恢复期病人治疗对比：

本组病人均因各种原因开颅手术，手术均顺利，效果好，本组病人均在术后3个月时留有头痛、头晕、记忆力下降、睡眠不好等术后反应症状，年龄16-58岁，男女均有，每个病人用上述剂量治疗20天，20天时测定上述症状消失情况。

    组别    病例  治疗后症状  消失人数  治愈率％  实验组    10    8    80％  对照组1    10    2    20％  对照组2    10    2    20％

实验统计表明，本发明药物对脑神经系统疾病的恢复有明显的治疗效果。尤其明显的是所有使用本发明药物的病人，用药后精神状态、思维能力、睡眠情况都有非常大的改善。

实施例

取：干燥脑神经营养因子  8克；

人参                   30克；

黄芪                   50克；

蜂王浆                 30克；

蜂蜜            1000克；

山梨酸           1.3克；

白糖            0.25克；(一)脑神经营养因子的制备：

1.冻溶：将新鲜羊脑，每批制品约60克，用3倍体积的磷酸缓冲液打成匀浆，在-20℃冰冻后，在20℃条件下熔化。以上重复5次，以加速蛋白裂解。

2.酸解：冻溶后的匀浆物，用磷酸缓冲液稀释2倍，放置80℃水浴锅加热，加热过程中同时逐渐滴入5N的盐酸，并不停给予震动搅拌3-4小时，酸解；

3.中和：将酸解稀释液，先滴入1N氢氧化钠粗调，接近范围后再用0.1N的氢氧化钠将其中和至PH7-7.2，将中和液放置过夜自然冷却。

4.离心：将冷却的中和液离心(15000rpm，10分钟)吸取上清液；

5.分离纯化：先用Sephadex G-100的柱凝胶滤过，再用Sephadex G-50的柱超滤。用分光光度计在A280处监测，合并生物活性组分；

6.除菌：在除菌罐中，先后用0.5微米及0.2微米的滤膜除菌2次，用上法获得的30ml(约40克)脑神经营养因子浓缩液，放置在0℃下保存。必要是可将其制备成干燥粉剂(约8克)。(二)中药辅剂的制备

1.人参液制备：取人参(红参)30克切片，加水浸渍后，滤过，滤液蒸馏，收集馏出液适量，另器保存；滤渣加水煎煮3次，每次1小时，滤过，滤液蒸馏，合并蒸馏液，浓缩至约400ml，放冷，加乙醇800ml，搅拌，静置，取上清液，低温保藏人参液；回收乙醇；

2.黄芪液制备：取黄芪50克切片洗净，加入40％乙醇150ml，在35-60℃温度下浸泡10天，滤过；药渣再加40％乙醇100ml浸泡，条件与时间同上。合并滤液，去药渣，回收乙醇，使浸液含量达250ml，如不足从回收乙醇液补充，低温静置，备用。(三)成品制备

将山梨酸1.3克溶于95％乙醇中备用。取PH3.5-4.5的蜂王浆30克在球磨机中研磨48小时后，低温静置，备用。将蜂蜜加热至95-100℃，保温20分钟，滤过，放凉后加入研好的蜂王浆，在搅拌的情况下依次加入白糖及上述人参液、黄芪液、山梨酸醇液、脑神经营养因子浓缩液，最后补加蒸馏水至1000ml，搅拌1小时滤过至澄明，分装。制得每支10ml本发明药物100支。