一种用高压液相色谱测定去氢枞酸铜乳油有效成分的方法

摘要

本发明属于乳油铜制剂的测定方法。乳油铜制剂中的去氢枞酸铜含量的测定方法以往采用的碘量法,误差较大,气相色谱分析又因被测物质的热稳定性而不宜采用,本发明提供一种用高压液相色谱测定铜乳油制剂中去氢枞酸铜有效成分的方法。该方法准确度较高,简便易行,可作为有关产品的企业质量检测方法。

说明书

本发明属于乳油铜制剂的测定方法。

去氢枞酸铜乳油是一种新型广谱、高效、低毒乳油铜制剂，它不仅保持铜素杀菌剂的广谱、低毒、持久等优点，而且还弥补了铜素杀菌剂药效不强、容易出现药害的不足，可称是目前开发较为理想的农用杀菌剂。去氢枞酸铜乳油的成分主要为：去氢枞酸铜、渗透剂、乳化剂、溶剂及枞酸衍生物，其有效成分为去氢枞酸铜，因此去氢枞酸铜的含量是该乳油的纯度指标。传统的铜制剂的含量测定方法是采用碘量法，虽然较为简单，但是采用碘量法测定的是有机铜总量并非是去氢枞酸铜有效成分的含量，故该方法测定误差较大。虽有报道采用导数光谱法和核磁共振法测定天然产物松香中枞酸和去氢枞酸的含量，这些方法对于天然混合物可以适用，但是对于进行了一定化学反应并加入一定量助剂后的混合物就无法准确测定其有效成分，只能通过色谱分离才能定量准确测定，然而气相色谱分析受枞酸类物质热稳定性限制而不宜采用。根据去氢枞酸、枞酸、四氢枞酸在化学结构上有差异，因此采用液相色谱法测定，该方法目前尚未有文献报道。

本发明的目的是提供一种高压液相色谱测定去氢枞酸铜乳油有效成分的方法。

本发明所指的测定方法的实施过程分为两个部分：

1、产品的预处理：根据去氢枞酸、枞酸、四氢枞酸在化学结构上存在极性差异，先将产品进行除铜处理，具体方法是在被测定产品去氢枞酸铜乳油中加入Na₂S4-8克，进行反应，过滤去掉沉淀物后，滤液用1mol/lHCl调至pH＝3，然后用乙酸乙酯萃取三次，合并有机相，用无水Na₂SO₄干燥15分钟，减压蒸除乙酸乙酯得枞酸类混合物，用甲醇稀释定容，过0.45um滤膜，即得测试样品。

2、建立枞酸类物质高压液相最佳色谱条件，从而测得产品中有效成分的含量。

A、仪器：高压液相色谱仪，Waters-991色谱工作站。

B、最佳色谱条件：

色谱柱：150nm×3.9(I.d)C18柱流动相：甲醇∶水∶乙酸＝94∶5∶1流速：1.0ml/min    柱温：室温检测波长：UV254nm进样量：5-20ul，最佳10ul

在上述操作条件下，将标准溶液，试样溶液用外标法进行分析并测得试样色谱分析图。

去氢枞酸的含量： $>>>X>i>>(>\%>)>=>>>>Y>i>>\times >N>\times >100>\times >\rho >>>>V>i>>\times >>m>i>>>>\times >100>\%>$>

Y_i：根据工作曲线及所测峰面积得到去氢枞酸量(微克)

V_i：某次进样量(微升)

m_i：取样量(毫克)

N：稀释倍数

100：样品处理后转移至100毫升容量瓶，容积为100mL。

ρ：标准物质的含量(95％)

去氢枞酸铜的含量y_i＝1.013X_i

本测定方法的准确度：标准样品回收率在98％-101％之间，标准偏差0.46，变异系数2.96％，由此表明本测定方法精确度和精密度符合要求。本方法得到广东省企业产品质量检测部门认可。同时表明该测试方法是可行的。

实例1：

准确称取去氢枞酸铜乳油10.099克，加入6克Na₂S放置过夜，将生成的沉淀过滤除去，滤液用1mol/1HCl调至pH＝3，然后用50ml乙酸乙酯萃取三次，合并有机相，并用无水Na₂SO₄干燥15分钟，用旋转蒸发仪蒸除乙酸乙酯溶剂即得到去氢枞酸类混合物。用分析纯级甲醇稀释至100ml容量瓶，再取其中的1ml稀释至10ml容量瓶，过0.45um滤膜，待上机测试。数据处理如下：Y_i＝13.53ug  N＝10    ρ＝0.95％V_i＝10ul     m_i＝10.0099(g)＝10.0099×10³(mg)据上述公式计算得：去氢枞酸％＝12.73％

去氢枞酸铜％＝1.103×12.73％＝14.04％即：去氢枞酸铜乳油有效成分的含量：14.04％

实例2：

准确称取去氢枞酸铜乳油10.1718克，其余操作步骤同实例1。数据处理如下：Y_i＝13.68ug  N＝10   p＝0.95％V_i＝10ul     m_i＝10.1718(8)＝10.1718×10³(mg)据上述公式计算得：去氢枞酸％＝12.78％

去氢枞酸铜％＝1.103×12.78％＝14.09％即：去氢枞酸铜乳油有效成分的含量：14.09

附色谱图如下：图1试样色谱图图2去氢枞酸标样色谱图