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法律状态信息
法律状态
2017-10-31
专利权有效期届满 IPC(主分类):A61K7/48 授权公告日:20030409 申请日:19970919
专利权的终止
2013-01-16
专利权人的姓名或者名称、地址的变更 IPC(主分类):A61K7/48 变更前: 变更后: 申请日:19970919
专利权人的姓名或者名称、地址的变更
2003-04-09
授权
授权
1999-08-04
实质审查请求的生效
实质审查请求的生效
1998-07-01
公开
公开
在水包油型乳剂中包含视黄醇或其短链酯的皮肤护理组合物。
天然的和人工合成的维生素A的衍生物已经广泛用来治疗各种皮肤病和用作皮肤修复或更新剂。已经使用视黄酸治疗皮肤病，例如痤疮、皱纹、牛皮癣、老年斑和褪色。例如见Vahlquist，A.等人：J.Invest.Dermatol.，Vol.94，Holland D.B.and Cunliffe，W.J.(1990)，第496-498页；Ellis，C.N.等人：“有关皮肤的视黄醇药理学”，Vasel，Karger，第三卷(1989)，第249-252页；Lowe，N.j.等人：“有关皮肤的视黄醇药理学”，第三卷(1989)，第240-248页；PCT专利申请第WO93/19743。
据信使用视黄醇或视黄醇的短链酯优先于使用视黄酸。视黄醇为天然存在于人体中的内源性物质，它对于正常上皮细胞分化是必需的。视黄醇的短链酯在体内水解产生视黄醇。据认为视黄醇和视黄基酯比视黄酸更安全。
长链视黄基酯尤其棕榈酸视黄酯已经广泛用在皮肤化妆组合物中。该组合物可以是水包油型乳剂，例如由Chsebrough-Pond’s生产的Age Defying ComplexR。作为本发明的一部分已发现视黄醇或视黄醇的短链酯比视黄醇的长链酯，例如棕榈酸视黄酯(见实施例7)更有效。据信棕榈酸视黄酯在体内不水解产生视黄醇和/或不渗透皮肤。
遗憾的是视黄醇和短链视黄基酯比视黄酸或长链视黄基酯更不稳定。见Idson，“维生素和皮肤”，Cosmetics&Toiletries，第108卷，1993年12月，第79-94页，Allured Publishing Corp.(1993)；Hoffman-La Roche Inc.，Data Sheet“维生素A-‘正常化剂’”，Roche Vitamins&Fine Chemicals；Hoffman-La Roche Inc.，Product Data“维生素A醇共混物”。它们尤其在水存在下迅速降解。
包含无水视黄醇的组合物在本技术领域是公知的。例如见Dulak等人：美国专利第4888363号和Wilmott等人：美国专利第4826828号。但是这类组合物一般不包含水溶性有益于皮肤的成分，尤其所包含的成分含量很高时更是如此。
包含油相的视黄醇的水包油乳剂也是公知的。例如见欧洲专利第440398号(Johnson&Johnson)、国际专利申请WO93/00085(Johnson&Johnson)和欧洲专利申请631772(Johnson&Johnson)。无水组合物和油包水型乳剂共有的一系列缺点是因为其连续相为油相，所以它们与水包油型乳剂相比更滑腻和作为化妆品缺乏吸引力。
因而，需要将视黄醇或视黄醇的短链酯配制成水包油型乳剂。但是，由于在该体系中(与无水体系或油包水乳剂相比)，类视色素更多的暴露于水相中，所以，使不稳定的类视色素在该体系中稳定一直是不可能的。例如见上述欧洲专利第440398号(第一页，34-37行)所述：水包油型乳剂中的类视色素“是不稳定的…并发生化学降解，因而不能达到其效果。”上述国际专利申请第WO 930085(第8页，2-7行)所述：“由于未明确理解的原因，只有通过利用特定形式的乳剂即油包水型乳剂，然后，仅使用特定的稳定体系，才能得到作为工业品的令人满意的稳定性。”
本发明部分基于如下发现：借助于几个重要参数的结合，例如使用特定的油相以便形成包含溶解的不稳定的类视色素的油滴和使用固体化合物的可选组合物以便形成特定粒度结晶组成的所述油滴的阻挡层，使不稳定的类视色素即视黄醇或其短链酯在水包油型乳剂中稳定。
在本发明中用来形成由结晶阻挡层包围的油滴的固体化合物和/或油已经用在皮肤护理组合物中，例如作为润肤剂。其中一些组合物也包含类视色素，一般多为视黄酸或棕榈酸视黄酯。例如见罗马尼亚专利文摘RO 92576，RO 93807，RO 84823；美国专利第3906108号(Felty等人)；美国专利第5380764号(Herzog)；美国专利第4981845号(Pereira)；美国专利第5037850号(Elliott等人)；美国专利第4333924号(Bowley等人)；美国专利第5492894号(Bascom等人)。但是，这些组合物与本发明的不同之处至少在于在由一定粒度结晶的阻挡层包围的油滴中，它们不包含不稳定的类视色素(视黄醇或其短链酯)。现有技术不提供包含视黄醇或其短链酯的稳定的水包油型乳剂。
本发明部分包括用于皮肤润湿的水包油型乳剂，该乳剂包括：
(a)包含占所述乳化剂重量的0.1％-50％的含流体油的油滴和占所述乳化剂重量的0.001％-10％的选自视黄醇和视黄醇的C2-C3酯的类视色素(其中，该类视色素溶于该油)的油相；
(b)占所述乳化剂重量的50％-98％的水相；和
(c)占所述乳化剂重量的1％-20％的阻挡层成分，其中该阻挡层成分提供在所述油滴和所述水相之间的结晶阻挡层。其中，所述阻挡层中结晶的粒度经显微测定结晶粒度试验(MicroscopicCrystal Sizing Test)(下文叙述)测试为1μm-50μm；其中，在所述阻挡层中，单个油滴与单个结晶的粒度比在5∶1-100∶1的范围内；其中，所述流体油和所述阻挡层成分的混合物的熔点在40℃-100℃的范围内。
在此，所用术语“润湿”指的是预防和治疗干性皮肤、光致损伤皮肤、表面皱纹、老年斑、老化皮肤，增加角质层的柔韧性和一般增加皮肤的发光、红润和质量。所述组合物可以用来改善皮肤脱屑和上皮分化。
根据本发明，通过制备包含溶解的不稳定的类视色素和由一定粒度范围的结晶阻挡层包围的油滴，在水包油型乳剂中的类视色素的稳定性基本改善。根据本发明，通过选择流体油和具有令人满意的熔点、结晶粒度和溶解性要求的所述结晶阻挡层(在下文中将详细叙述)保证包含类视色素和由结晶阻挡层包围的油滴的存在。
除非另外指明，水包油型乳剂的所有用量以重量计算。
在本发明组合物中包括的水包油型乳剂包含在连续水相中的油滴。
所述油滴包含作为第一必需成分，选自视黄醇和视黄醇的C2-C3酯的类视色素。如实施例7中所述，这些化合物比棕榈酸视黄酯更有效。
在此，所用术语“视黄醇”包下列视黄醇的异构体：全反式视黄醇、13-顺式视黄醇、11-顺式视黄醇、9-顺式视黄醇、3，4-二脱氢视黄醇。优选的异构体是全反式视黄醇、13-顺式视黄醇、3，4-二脱氢视黄醇、9-顺式视黄醇。由于全反式视黄醇的广泛的商业可获得性，所以，最为优选。
视黄基酯是视黄醇酯。术语“视黄醇”以上已定义。适合用于本发明中的视黄基酯为视黄醇的C2和C3酯，也称为乙酸视黄酯和丙酸视黄酯。特别优选乙酸视黄酯，因为它最有效，商业上最易得和最便宜。基于同样原因，在本发明中最优选使用视黄醇。
视黄醇或视黄基酯在本发明组合物中的用量为占所述乳剂重量的0.001％-10％，优选用量为0.01％-0.5％，最优选用量为0.05％-0.2％。
在本发明乳剂中，所述油相的第二必需成分为流体油。本发明乳剂的油相可以由单一化合物或化合物的混合物所形成。根据本发明的油相必须是流体和在储存温度下(一般为25℃)，必须能使需要量的视黄醇或其C2-3酯溶解。此外，所述油相和所述阻挡层成分的混合物必须满足熔点试验的要求(以下将详细讨论)。在此，所用术语“流体”指的是至少50％的油在25℃下为液体。
形成所述油相的合适化合物包含(但不限于此)脂肪酸或脂肪醇的酯和烃类化合物，优选脂肪酸或脂肪醇的一元酯，只要它们满足在此所述熔点和溶解度的要求即可。最优选，流体油选自棕榈酸异十八烷基酯、水杨酸十三烷基酯、辛酸C12-15酯、硬脂酸异丙基酯、十四烷酸异丙基酯和棕榈酸异丙酯。
包含所述类视色素的油滴可以以占所述乳剂重量的0.1％-50％，优选1％-30％，最优选5％-15％的用量包含在本发明乳剂中。
本发明乳剂的第三必需成分为阻挡层成分。此处所用术语“阻挡层成分”指的是至少两种化合物的混合物：第一种化合物为用于形成结晶的化合物(“成结晶化合物”)；第二种为用于控制结晶粒度的化合物(“控制结晶粒度化合物”)。作为本发明的一部分发现，如果只使用成结晶化合物，那么所形成结晶就太大(见实施例4)并且所述类视色素在该组合物中不稳定。也发现，第二种化合物，控制结晶粒度化合物尽管本身不能形成足够粒度的结晶，但是可以控制所述结晶的粒度(见实施例5)。为稳定所述类视色素，所述成结晶和控制结晶粒度化合物共存是必需的。
所述结晶粒度对于保证本发明乳剂的稳定性是至关重要的。如果包围所述油滴的结晶太大，那么所述结晶将迁移离开油/水界面并在所述乳剂中作为独立本体存在。如果所述结晶太小，那么增加油相在水相中的暴露。在这两种情况下，均损害了类视色素在油相中的稳定性。经显微测定结晶粒度试验测试，在本发明乳剂中的单个结晶的平均粒度在1μm-50μm的范围内，优选在1μm-20μm的范围内，最优选5μm-10μm的范围内。组成所述流体相和所述结晶阻挡层的成分的一致性和用量决定所述结晶的粒度。
显微测定结晶粒度试验
使预期的流体油和形成阻挡层的化合物以作为最终乳剂的相同比例共熔。将一滴该共熔混合物置于显微镜的载薄片上，加盖薄片。在显微镜下观察所述结晶的大小和形状。结晶应该为小的和相对平滑的(不像尖锐的针晶)。通过拍照显微照片和用尺子测量结晶并考虑放大因素来确定粒度。必须测定几个结晶(即至少5个结晶，优选至少10个结晶)，并取其平均值，以便防止可能测到不规则结晶或簇晶。
一开始，可以使用光学显微镜在交叉极化(crosspolar)的条件下，定性地观察所述结晶形式。如果最初的观察结果为所述结晶的粒度合适，如上所示进行所述显微测定结晶粒度试验。
熔点
此外，必须以所述用量选择阻挡层成分和流体油，以使其混合物的熔点为40℃-100℃。其熔点必须在该范围内，以保证所述结晶阻挡层在储存中的存在。优选所述混合物的熔点在40℃-75℃的范围内，最优选在45℃-55℃的范围内。此外，所述流体油和所述阻挡层成分组成的混合物的熔点必须非常准确，即在所述阻挡层成分和所述流体油中的组成必须都彼此非常一致。其熔点的变化范围必须不大于25℃，优选不大于10℃，最优选其熔点在使用差式扫描量热法(DSC)测定时为单一的锐峰。
在本发明的组合物中，所述阻挡层成分(即至少两类形成阻挡层的化合物的混合物)的用量为占所述乳剂重量的1％-20％，优选用量为约5％-约15％，最优选用量为约8％-约12％。
正如上述，根据本发明的阻挡层是通过至少两类化合物的相互作用形成的：成结晶化合物和控制结晶粒度化合物。所述控制结晶粒度化合物的加入量为占所述结晶形成化合物重量的1％-75％，优选5％-40％，最优选10％-20％。
用在本发明乳剂中的合适的结晶形成化合物包含(但不限于此)脂肪酸、脂肪酸与其皂盐的混合物、脂肪醇和脂肪酸或脂肪醇的乙氧基化的衍生物、甾醇(例如羊毛脂或胆甾醇)和它们的混合物。优选所述结晶形成化合物为选自C12-C22(优选C16-C22)的脂肪酸或脂肪醇或它们的乙氧基化衍生物及它们的混合物。最优选，所述结晶形成化合物选自棕榈酸、硬脂酸、十八烷醇、十六烷醇、二十二烷酸、二十二醇、胆甾醇和脱水山梨醇硬脂酸酯及它们的混合物。
所述控制结晶粒度化合物选自羟基化的脂肪酸或脂肪醇(C12-C22)和它们的乙氧基化衍生物。优选使用羟基化的脂肪酸或脂肪醇或混合物。其优选的链长度为C16-C22。最优选所述控制结晶粒度化合物为选自甘油羟基硬脂酸一酯、羟基硬脂酸、异硬脂醇、异硬脂酸和它们的混合物。
所述控制结晶粒度化合物可以含在或不含在形成结晶阻挡层的实际结晶中。该控制结晶粒度化合物调节所述结晶的粒度，因而对于形成合适的结晶阻挡层是必需的，然而，其所处位置可以在所述结晶中或可以在所述油滴中或两种位置都有。
在本发明乳剂中，单个油滴与单个结晶的相对大小在5∶1-100∶1的范围内，优选在5∶1-50∶1的范围内，最优选在5∶1-20∶1的范围内。通过上述显微结晶粒度试验测定结晶粒度。也可通过使用显微测定结晶粒度试验或通过使用粒度分析仪(例如MastersizerR)测定油滴大小。
根据本发明，由油滴和包围该油滴的结晶所形成的粒子的整体粒度也是非常重要的。所述类视色素在该粒子中的半衰期与该粒子的粒度成反比。粒子越大，所述类视色素扩散得越慢。而且，如果所述粒子的粒度过大，也影响所述乳剂的物理稳定性。因此，所述粒子的粒度必须如此，以便既能获得所述类视色素的化学稳定性，又保留所述乳剂的物理稳定性。作为本发明的一部分已发现，平均粒子粒度(容重)在5μm-500μm的范围内，优选在10μm-50μm的范围内。
可以使用粒度分析仪(例如MastersizerR)测定其粒度，如依照Mastersizer手册所述测定d(5，3)或d(4，3)平均粒径。
本发明乳剂的另一必需成分在含水相中。本发明乳剂的水相包含至少20％的水。然而，本发明乳剂的具体优点在于它们可以掺入大量的水。优选的乳剂包含至少40％的水，优选40％-95％的水，最优选60％-70％的水。含水相可选包含其它的水溶性溶剂或成分。特别优选掺入含水相的水溶性成分为以下将详细叙述的羟基酸。总的含水相优选至少占所述乳剂重量的65％，最优选至少占70％。
本发明组合物具有的半衰期在50℃下，至少为15天，优选20天-45天，最优选35-45天。
“半衰期”定义为在一定的温度下，视黄醇或其短链酯降低到其原有浓度一半时所用的时间。
优选的根据本发明的组合物基本不含有低链的简单醇例如甲醇、乙醇或丙醇，以避免该醇类对皮肤的干燥和刺激作用。
所述组合物的pH在2.5-10的范围内。优选的本发明组合物具有的pH为约6-约9，最优选约6.5-约7.5。
应该理解，本发明乳剂可以与其它乳剂共混，包括复乳。此外，本发明乳剂可以包含其它的油滴，该油滴可以不含本发明的流体油或类视色素。只要组合物包含水包油乳剂，其油相包含约0.1％-约50％在此所述的油滴，那么它在本发明的范围内。
可选对皮肤有益的物质和化妆品添加剂
在本发明的化妆品乳剂中，可以包含各种有益于皮肤的成分。尽管对这类成分没有加以限制，一般实例包含抗皱化合物和防晒剂和鞣剂。
特别优选的成分为羟基酸。本发明乳剂的优点之一为它们可以掺入所述高含量的含水相中。因而，一般来说，高含量的水溶性活性成分尤其羟基酸可以与类视色素活性成分共存。
所述羟基酸可以选自α-羟基酸、β-羟基酸(例如水杨酸)、其它的羟基酸(例如二羟基羧酸、羟基二羧酸、羟基三羧酸)和其混合物或它们的立体异构体(DL、D或L)的混合物。
优选的羟基酸为选自具有通式(1)的α-羟基酸，
其中，M为氢或包含1-27个碳原子的饱和或不饱和、直链或支链烃链。
更优选的羟基酸选自羟基乙酸、乳酸、2-羟基辛酸、羟基月桂酸和它们的混合物。当有立体异构体存在时，最优选L-异构体。
在根据本发明的乳剂中所述羟基酸成分的用量优选占所述乳剂重量的0.01-20％，更优选0.05-12％，最优选0.5-8％。
防晒剂包含那些常用来阻止紫外线的物质。例证性化合物为PABA的衍生物、肉桂酸酯和水杨酸酯。例如，可以使用甲氧基肉桂酸辛酯和2-羟基-4-甲氧基二苯酮(也称氧苯酮)。甲氧基肉桂酸辛酯和2-羟基-4-甲氧基苯二酮分别以商品名Parsol MCX和Benzophenone-3可买到。使用在所述乳剂中防晒剂的确切用量可根据需要防护太阳紫外辐射的程度来变化。
在本发明化妆品组合物中可选的添加成分为增稠剂。增稠剂通常的用量为占所述乳剂重量的0.1-20％(重量)，优选0.5-10％(重量)。典型的增稠剂为由B.F.Goodrich Company提供的以商品名Carbopol可得到的交联聚丙烯酸酯材料。可以使用树胶例如合成生物聚合胶、角叉菜胶、明胶、刺梧桐树胶、果胶和刺槐豆胶。在某些情况下，所述增稠功能可以由同时作为硅氧烷或润滑剂的物质来完成。例如，超出10厘沲的硅橡胶纯胶料和酯例如甘油硬脂酸酯具有双重功能。
可以将粉末剂掺入本发明化妆品组合物中。这些粉末剂包含白垩粉、滑石粉、漂白土、高岭土、淀粉、绿土粘土、化学改性的硅酸铝镁、有机改性的蒙脱石粘土、水合硅酸铝、锻制二氧化硅、铝淀粉琥珀酸辛酯和它们的混合物。
也可以将其它添加剂微量成分掺入所述化妆品组合物中。这些成分可以包含着色剂、遮光剂和芳香剂。这些其它添加剂微量成分的用量为占所述乳剂重量的0.001％-20％(重量)。
此外，重要的是保证其它成分不干扰所述结晶的位置，例如如果使用高HLB的乳化剂，它将破坏所述结晶。
制备所述组合物
制备本发明组合物的优选方法包含下列步骤：
(1)制备水相并加热到75-80℃，同时混合；
(2)制备油相，它包含流体油和阻挡层成分化合物，但不包含类视色素，并加热到75-80℃，同时混合；
(3)缓慢将所述油相加入所述水相中(两相均在75-80℃)；
(4)于75-80℃，混合步骤(3)所得混合物至少15分钟；
(5)将所述混合物冷却到50-55℃后，加入类视色素，同时混合；
(6)装入储存容器中。
如果该最终组合物包含羟基酸，优选在步骤(4)后，于50-60℃下将其单独加入。
根据本发明的组合物主要用作人皮肤表面涂敷的产品，特别是作为润湿和润滑皮肤的制剂，及用来防止或降低皮肤表面干燥、皱纹或老化皮肤。使用时，将少量的在合适的容器或涂敷器中的所述组合物，例如1-100ml涂敷在皮肤裸露的表面上，然后，如需要，使用手或手指或合适的装置使其分布和/或擦进皮肤中。
产品的形式和包装
可以将本发明乳剂配制成洗剂、流体乳膏、乳膏和凝胶。可将所述组合物以适应其粘度方便消费者使用的合适容器来包装。例如，洗剂或流膏乳剂可以装于瓶子或滚球涂敷器或胶囊(capsule)或雾化气溶胶装置(propellant-driven aerosol device)或配有适合手指操作的泵的容器中。当所述组合物为乳膏时，可将其简单地存放于不变形的瓶子或挤压容器中例如管子或带盖的瓶子中。
因此，本发明也提供在此定义的包含化妆品可接受的组合物的密闭容器。
下列特定实施例进一步解释本发明。
稳定性的评价
制备待试验的组合物并装在瓶子中或高密度聚乙烯(HDPE)管内。将所述瓶子或管子封口并置于在30℃、41℃或50℃的烘箱中。在50℃下进行的稳定性研究为加速稳定性研究。半衰期以1∶6∶9∶18(50℃∶30℃∶25℃∶20℃)比例决定于温度。例如，在50℃下40天的半衰期相当于30℃下8个月，25℃下(标准室温)1年和20℃下2年。此外，通过在下述过量氧气存在的不利条件下储存样品，使稳定性研究加速。就商品的最佳稳定性而言，我们建议置于惰性气体氩(优选)或氮气体系中。缺少过量的空气将至少通过两方面因素增加视黄醇的稳定性至少一倍或两倍。就充气条件下所做的稳定性研究而言，将所述管子或瓶子装入1/3的组合物，同时上面2/3的空间充入气体。每隔一定时间，分析该组合物，直到未被氧化的视黄醇低于最初视黄醇的10％时为止。
在下列实施例中的所有稳定性研究都是在充气下进行的。
我们的研究结果已表明作为本发明评价的组合物中的视黄醇的氧化反应遵循按照视黄醇浓度的一级动力学反应。因此，为测定其反应半衰期，制作视黄醇浓度的自然对数(lnC)对储存时间(t)的曲线，得到斜率为k的直线，其中，k为以时间单位为倒数的视黄醇氧化速度。然后通过ln2/k的比值确定该研究体系中视黄醇的半衰期(t1/2)。
用HPLC分析视黄醇
使用高压液相层析分析所有样品的视黄醇含量(硬件：Waters600MS系统控制器，Waters 717自动进样器，Waters 996光电二极管矩阵检测器，软件：Millenium 2010)。用于视黄醇分析的柱参数如下：柱子： Nucleosil C185μm(Sigma-Aldrich)
250mm×4.6mm种类#：Z226181流动相：47％(v/v)乙腈
45％(v/v)甲醇
8％(v/v)二氯甲烷
均为HPLC级溶剂进样体积：10μl流速： 1ml/min运行时间： 10分钟检测器：UV/可见光，于325mm，带有光电二极管矩阵保留时间：视黄醇为约5分钟。
标准溶液的制备
每次分析样品的视黄醇含量后，产生标准曲线。视黄醇标准溶液按如下方法制备：逐次在并丙醇中稀释所述视黄醇共混物，产生最终浓度为0、10、20、30、40和50ppm(w/w)的标准溶液。标准溶液一周制备一次，并在-21℃下储存。
样品的制备
大多数样品通过在异丙醇中简单稀释而得，因而，最终视黄醇的浓度在所述标准曲线的范围内，优选约30ppm。
乳剂样品例如包含树胶的粘稠的乳膏更难以制备。为了保证从所述乳剂中能完全提取视黄醇，将所述样品按下列方式处理：将约0.5g样品精确称量，开始与6-7克水混合并旋转形成淤浆。然后，将约10克异丙醇加入所述淤浆中，接着第二次旋转。然后，用异丙醇使所述样品达到最终重量。接着使用带有0.2μm的一次性滤膜的一次性注射器过滤所述样品。
所有样品使用分析天平以w/w为基准的三倍量或四倍量制备。
使用HPLC分析乙酸视黄酯
使用与视黄醇相同的方法和流动相。乙酸视黄酯的洗脱大约比视黄醇滞后30秒钟。
实施例1
制备组合物1、2和3(均在本发明的范围内)。
下列过程用于制备所述组合物：1.将水相(A)加热到75-80℃，同时在压力混合器(overhead mixer)中混合：2.将油相(B)力热到75-80℃，同时混合；3.在两相均为75-80℃下，缓慢将油相(B)加入到水相(A)中；4.使用来自加热到75-80℃的(C)中的水洗涤油相的剩余部分；5.于75-80℃，混合至少15分钟；6.开始冷却；7.于室温下制备相(D)并于50-60℃加入到(ABC)中；8.于50-55℃，将视黄醇共混物(E)加入批料中，同时混合；9.混合，同时冷却到40℃；10.于40℃，加入(F)，同时混合；11.停止混合并装入储存容器中。
观察：
当在光学显微镜下观察时，组合物1、2、和3基本上具有类似的特性：当在交叉极化下观察时，通过在每个油滴周围存在的明亮的双折射光圈测定的由结晶阻挡层所包围的球形油滴直径约为50微米。通过所述本体水相基本上不含单个结晶的事实也证实这一点。使用显微测定结晶粒度试验，发现结晶为规则型，直径约为8微米。
比较实施例2
制备比较实施例A、B、C、D、E、F和G(均在本发明范围以外)：
根据上述过程(使用充气试验)测定组合物1-3(实施例1)和比较组合物A-G的储存稳定性。所得结果归总于表1、1A和1B中。
表1
储存稳定性
表1A
储存稳定性
表1B
储存稳定性
观察：
组合物A和B(表1A)的储存稳定性测定结果表明视黄醇在油环境(组合物A)中比在水环境(组合物B)中稳定得多：A的t1/2于50℃为34天(于30℃为297天)，作为比较，B于50℃为2天(于30℃为24天)。出乎意外的是，组合物1-3显示视黄醇的稳定性类似于视黄醇在矿物油中(组合物A)的稳定性：于50℃，1、2和3的t1/2分别为20、39和20天，于30℃，分别为120、260和149天。鉴于这些体系包含80％(w/w)连续水相，组合物1-3的视黄醇稳定性是显著的。因为视黄醇保存在有本发明的界面结晶阻挡层存在的所述乳剂中的分散油的微环境中，所以它是稳定的。
组合物C-G表明，视黄醇在极性环境中例如吐温20、丁二醇、甘油或癸醇(t1/2于90℃，分别为36小时、14小时、19小时和25小时)中比其在非极性环境例如矿物油(t1/2于90℃为77小时)中更不稳定。因为所述环境极性越大，所述类视色素越不稳定，我们可以理解为什么在含水乳剂体系中，视黄醇或短链视黄醇酯比长链酯例如棕榈酸视黄酯更不稳定。视黄醇或短链视黄醇酯比长链酯例如棕榈酸视黄酯极性更大，由于极性更大，所以，它们比长链酯更趋向于分配在极性溶剂例如水中。它们离开油分配进入极性溶剂越多，越不稳定，这解释了在乳剂体系中，为什么棕榈酸视黄酯一般比视黄醇或乙酸视黄酯更稳定(参见B.Idson，C&T，108卷，86页：“棕榈酸维生素A酯是所能得到的最稳定的维生素A酯”，Roche：“视黄醇比维生素A脂肪酸酯更敏感”)。
比较实施例3
制备组合物G1和H(二者均在本发明范围之外)。这两种组合物均包含视黄醇胶囊，即在凡士林中的视黄醇分散在硬化的聚丙烯酸/角叉菜凝胶中形成胶囊，使其进一步再分散(冷)在最终组合物(G1或H)中。所形成的组合物在本发明范围之外。视黄醇胶囊组成：A雪白凡士林 17.1％A视黄醇共混物 3.1％B Aculyn 33溶液(4％中和到pH7) 45.3％B Gelcarin 6p-911(kappa carraghenan) 34.5％
胶囊的制备：于40-45℃，混合视黄醇和雪白凡士林形成相A。将预先中和到pH7的Aculyn 33溶液加热到60-70℃，并加入所述carraghenan。将B加入A中并使用低剪切匀化过程(例如Denver浮选设备)，以650rpm，乳化4分钟。通过将所述乳剂逐滴倒入由10％KCl和0.5％triton X-100制成的硬化浴中，制备胶囊。将该胶囊在滤纸上干燥，称重和在冷的情况下，人工慢慢搅拌，加入到本发明的浓缩乳剂中。将表2中所列的其它成分在冷的情况下，温和搅拌下加入。所测定组合物G1和H中的视黄醇含量在开始储存时为0.1％。
*除了不包含相D和E外，与实施例1中组合物1的组成相同。
尽管组合物G1和H包含如实施例1中组合物1的阻挡层成分，但是，这些成分没有作为包围视黄醇的阻挡层以便制备组合物G1和H，因为视黄醇胶囊是后加入组合物1中的。组合物G1和H均包含溶解在流体油相中的视黄醇，但是该油相未被形成根据本发明的结晶阻挡层的阻挡层成分的混合物所包围。荧光显微照片显示视黄醇位于所述胶囊的凡士林相中。光学显微镜未显示存在不均匀的界面阻挡层，但是显示在所述几士林中存在无规律分散的结晶。
根据上述过程(使用充气试验)测定组合物G1和H的储存稳定性。所得结果归总于表3中。
将表3中的储存稳定性结果与表1中组合物1和2的储存稳定性相比较。与组合物G1和H相比，组合物1和2包含包围视黄醇液滴的阻挡层成分。
在没有包围视黄醇液滴的本发明阻挡层成分存在的情况下，于50℃，组合物1的半衰期由20天降低到组合物G1的6天；组合物2的半衰期由39天降低到组合物H的12天。这证明包围视黄醇液滴的阻挡层的存在对稳定本发明组合物中类视色素起着关键的作用。
该实施例也表明使用本发明方法在制备本发明组合物中的临界性。
比较实施例4
制备组合物K(在本发明范围以外)。所述组合物包含在所述阻挡层成分中的控制结晶粒度化合物，但不包含结晶形成化合物。除不包含结晶形成化合物即组合物K中缺少硬脂酸和硬脂醇外，组合物K与组合物1(pH＝3.6)相同。
根据上述过程(使用充气试验)测定组合物K的储存稳定性。所得结果归总于表4中。
将表4中的储存稳定性结果与组合物1和2的储存稳定性(表1)相比较。在没有本发明的结晶形成化合物存在的情况下，于50℃，其半衰期由20天(组合物1)降低到4天(组合物K)。这证明，所述结晶形成化合物在稳定本发明组合物中的类视色素方面起着关键的作用。组合物K的显微镜观察表明存在非常小的结晶，其直径小于1微米(超出本权利要求书所述范围)。
比较实施例5
制备组合物L(在本发明范围之外)。该组合物包含在所述阻挡层成分中的结晶形成化合物，但不包含控制结晶粒度化合物。
首先，通过于73℃将B加到A中，同时于45-55℃以500rpm混合15分钟制备视黄醇浓缩物。然后，于35-40℃，将所述浓缩物加入组合物1中(除了不加相D和E外)，产生的视黄醇的浓度约为0.1％。加入α羟基酸到pH＝3.6。
视黄醇浓缩物：A 去离子水 59.25％A Keltrol 1000 0.5％A TEA(99％) 0.25％B 二十二烷酸 12％B ISP 20％B 视黄醇共混物 8％
组合物L：改进组合物1 74.96％去离子水 5％羟基乙酸(70％) 11.4％氢氧化铵(29％) 2.5％羟基辛酸 0.1％视黄醇浓缩物 3.3％去离子水 2.51％红没药醇 0.2％香料 0.03％
测定组合物L的储存稳定性。所得的结果归总于表5中。
在不加入所述控制结晶粒度化合物的情况下，于50℃，其半衰期由20天(组合物1)降低到8天(组合物L)。这表明，所述控制结晶粒度化合物在稳定本发明化合物中的类视色素方面具有关键的作用。
没加控制结晶粒度化合物其本身可通过在显微镜下观察时，大的不规则结晶(直径约为60微米)的存在而证明。
比较实施例6
制备组合物M和N(均在本发明范围之外)。所述组合物包含与视黄醇不相容的流体油(高分子量的硅油)。
首先，制备分散在所述不相容的油(由Dow得到的高分子量硅油)中的浓缩视黄醇。然后，于50-55℃将所述浓缩物加入组合物1中(只是不含相D和E)产生的视黄醇浓度约为0.05％。视黄醇浓缩物分散液：10000cst的Dow 200流体 79.4％cab-o-sil TS 7200(二氧化硅) 9％视黄醇共混物(Roche) 11.6％组合物M改进组合物1 74.96％去离子水 16.8％视黄醇浓缩物分散液 8％红没药醇 0.2％香料 0.03％pH 7.4％组合物N改进组合物1 74.96％去离子水 2.81％羟基乙酸(70％) 11.4％氢氧化铵(29％) 2.5％羟基辛酸 0.1％视黄醇浓缩物分散液 8％红没药醇 0.2％香料 0.03％pH 3.7
测定组合物M和N的储存稳定性。所得结果归纳于表6中
表6
储存稳定性
在没有本发明的类视色素相容油存在的情况下，于50℃下，所述半衰期由20天(组合物1)降低到4天(组合物N)及由39天(组合物2)降低到13天(组合物M)。通过使用二氧化硅以将所述类视色素密封在所述硅氧烷的液滴中，以便阻止类视色素扩散进入改进组合物1的油相中，其中，如在光学显微镜下观察所证实的，所述类视色素为不溶性的(类视色素以独立的液滴分散在高分子量的硅油中，但是，不溶解)。这证明所述流体油在稳定本发明的组合物中的类视色素方面起着重要的作用。
实施例7
目标
本研究的目的为评价下列制剂的效能：1.8％L-乳酸对8％L-乳酸/0.174％乙酸视黄酯(二者均在乳剂的基本成分中)2.8％L-乳酸/8％L-乳酸/0.25％棕榈酸视黄酯(二者均在乳剂的基本成分中)3.8％L-乳酸0.075％视黄醇对8％L-乳酸/0.09％乙酸视黄酯(二者均在乳剂的基本成分中)
治疗组1包括16名女性受试者(45岁或45岁以上)，而组2和组3各包括17名受试者。
这些制剂不在本发明的范围内：所述研究仅仅为证实视黄醇对乙酸视黄酯对棕榈酸视黄酯的相对效能，不评价其稳定性。
在每一个治疗组中，使试验产物左/右随机化。受试者在家中自己使用所述试验产物，每日二次(早晚)，进行12周。所述试验为双盲试验。50名其前臂上有适度皱纹(表面起皱纹)的女性受试者参与试验。受试者可以继续其日常清洁习惯，但是，她们被要求在开始就诊前一周(第0周)必须停止在她们的前臂和手上涂敷任何增加水分的产品。自开始，在第2、4、8和12周，进行目测评价(评价内容包括评价皱纹状态和整个外观)。每当可能时，在固定光照下在同一部位作出评价。在每次就诊时，都要称定所有产物，以便确定使用的顺应性。
评价：临床评价
下列参数由有经验的评价者做出。外前臂：皱状/皱纹皮肤-松弛/表面下陷/起皱纹/皱纹皮肤(改进的表现为皮肤变紧、起皱/皱纹减少)总的外观(光致损伤)-关于所述部位肌肤结构和总的表面特征状况的总括评价(改进的表现为总的皮肤状况较好)。所用的皱状/皱纹皮肤的0-9级评价尺度：轻度1-3小的环状细纹。初看不明显；仔细看皮肤有皱折。低于外前手臂/手背的25％。中度4-6明显的皱纹，带有“浮肿”感的环状皱纹。覆盖面积大于25％，但是，没有包括整个外前手臂/手背。重度7-9覆盖外前臂下部/手背的面积多至100％。非常明显，很容易发现。带有长的“浮肿”感(深度)纵向皱纹。中度等级不能归于对整个等级增加的响应。
无论评价者还是受试者都不知道是何种试验制剂。
统计学分析
使用基于SAS的宏计算机程序％WSIGNRNK，它执行WilcoxonSigned-Rank，Pratt程序。
分别根据每个配对产物的比较、试验部位(外前臂，手背)、评价时级别和属性测定，进行统计分析。对每个试验组进行配对比较统计分析。当p＞95％时，判断其差异在统计学上显著。
在治疗组间比较差异的临床评价归总于下列表7A-7C中。
表7A
8％L-乳酸(8LL)对0.174％乙酸视黄酯(RA)
有利于RA的正性皱纹等级差异
9级皱纹等级
周 8LL RA 差异
0 4.28 4.28 0
2 4.27 4.23 0.04
4 4.43 4.40 0.03
8 4.17 3.93 0.24*
12 3.90 3.77 0.13
*统计学上显著
表7B
8％L-乳酸(8LL)对8％L-乳酸+0.25％棕榈酸视黄酯(8LLRP)
有利于8LLRP的正性皱纹等级差异
9级皱纹等级
周 8LL 8LLRP 差异
0 4.41 4.41 0
2 4.32 4.35 -0.03
4 4.50 4.41 0.09
8 4.26 4.23 0.03
12 4.03 4.06 -0.03
表7C
8％L-乳酸+0.075％视黄醇(8LLR)对8％L-乳酸+0.09％乙酸视黄酯(8LLRA)
有利于8LLRA的皱纹等级差异
9级皱纹等级
周 8LLR 8LLRA 差异
0 4.74 4.74 0
2 4.69 4.72 -0.03
4 4.56 4.68 -0.12
8 4.29 4.24 0.05
12 3.87 4.23 -0.36*
*统计学上显著结果：
包含8％L-乳酸和0.25％棕榈酸视黄酯的组合物对于皱状的手臂皮肤没有产生比在同一基础制剂中的8％乳酸更显著的改进。相反，包含8％L-乳酸和0.17％乙酸视黄酯的相同基础制剂对皱状手臂皮肤产生比同一基础制剂中的8％L-乳酸临床上所测定到的(由临床医师评价和强迫选择，后者的结果未列出)更显著的改进(在第8周P＞95％)。此外，包含8％L-乳酸和0.075％视黄醇的相同基础制剂对皱状皮肤产生比在同一基础制剂中的8％L-乳酸和0.09％乙酸视黄酯临床上所测定到的(由临床医师评价和强迫选择)更显著的改进(在第12周，P＞95％)。
作为结论，棕榈酸视黄酯不增加羟基酸制剂的抗老化效能，而乙酸视黄酯则可以。当使用视黄醇代替乙酸视黄酯时所述效能进一步改进，视黄醇为用在本发明中最优选的类视色素。
实施例8
制备下列在本发明范围内的附加的组合物。它们是通过本发明方法制备。它们适合于化妆使用。所述组合物尤其适用于使用在起皱纹、粗糙、干燥、易脱屑、老化和/或UV损伤的皮肤上，以便改善外观和感觉以及使用在健康的皮肤上以便防止或延缓皮肤的退化。J6365(C)
组合物
8A 8B 8C成分 化学名/CTFA 名 wt/wt％ wt/wt％ wt/wt％去离子水 相同 47.10 47.28 51.41EDTA二钠 相同 0.05 0.05 0.05Veegum Ultra 硅酸铝镁 0.60 0.60 0.60羟苯甲酸甲酯 相同 0.15 0.15 0.15Aloe Vera Powder Aloe Vera Gel 0.10 0.10 0.10三乙胺(99％) 相同 1.20 1.20 1.20Antifoam Simethicone 0.01 0.01 0.01甘油 相同 2.00 2.00 2.00丁二醇 相同 3.00 3.00 3.00Keltrol CG1000 合成生物聚合胶 0.20 0.20 0.20Natrosol 250HHR 羟乙基纤维素 0.30 0.30 0.50Water Dl Flush 相同 1.00 1.00 1.00Pationic SSL 硬脂酰基乳酸钠 0.50Naturchem GMHS 羟基硬脂酸甘油酯 1.50 1.50 1.50Lanette 18DEO 十八烷醇 1.50 1.50 1.50Parsol MCX 甲氧基肉桂酸辛酯、 7.50 7.50
对甲氧基肉桂酸乙基己酯Uvirol M-40 Benzophenone-3 Oxybenzone 2.50 2.50FinsolvTN 苯甲酸C12-15烷基酯 3.00 3.00Protachem ISP 棕榈酸并硬脂醇酯 6.00Hetester FAO/Fine C12-15烷基辛酸酯 3.00Silicone Fluid 50 二甲聚硅氧烷 1.00胆甾醇 相同 0.50 0.50 0.50Arlacel 60 脱水山梨醇硬脂酸酯 1.00 1.00 1.00BHT 丁基化羟甲苯 0.05 0.05 0.05乙酸维生素E酯 乙酸生育酚酯 0.10 0.10 0.10Myrj 59 PEG-100硬脂酸酯 2.00 2.00 2.00Pristerene 4911 硬脂酸 3.00 3.00 3.00羟苯甲酸丙酯 相同 0.10 0.10 0.10Silicone Fluid 10 二甲聚硅氧烷 2.00 2.00LinoleamideMEA 相同 1.00 1.00Water Dl Flush 相同 1.50 1.50 1.47去离子水 相同 8.00 8.00 8.29羟基辛酸 相同 0.10羟基乙酸70％ 相同 5.70 5.70 5.70Ammonia，Aqua 28％ 氢氧化铵 1.30 1.30 1.20Water Dl Flush 相同 1.50 1.50 2.23棕榈酸维生素A酯 棕榈酸视黄酯 0.10 0.10 0.10红没药醇 相同 0.20 0.20 0.20香料 相同 0.03 0.03 0.03J6365(C)视黄醇50％ 维生素A醇 0.20 0.02 0.20乙酸视黄酯 乙酸维生素A酯 0.01 0.01
总量 100.00 100.00 100.00
机译： 皮肤护理组合物的水包油型乳状液中不稳定的类视色素的稳定性
机译： 用于皮肤护理组合物的水包油乳状液中不稳定的类视黄醇的稳定化作用。
机译： 皮肤护理组合物水包油乳液中不稳定类维生素A的稳定性
