龙牙楤木叶总皂甙及其提取工艺

摘要

一种龙牙楤木叶总皂甙及其提取工艺,是将龙牙楤木叶干燥,粉碎为粗粉,然后将龙牙楤木叶粗粉用乙醇浸泡2小时,以92%的药用乙醇回流提取三次,每次2小时,过滤,合并乙醇液,低温减压回收乙醇至稠膏状,得乙醇提取物,将其加水悬浮,以石油醚萃取3次,水层用氯仿萃取3次,水层继续用水饱和正丁醇萃取5次,正丁醇萃取液合并后,减压回收溶剂至干,得正丁醇提取物,这种物质具有细胞毒作用、具有明显的抗肿瘤作用。

说明书

本发明涉及一种具有抗肿瘤作用的植物及其有效物质的提取工艺。

龙牙楤木系五加科楤木属植物，又名辽东楤木。在祖国医学中，以龙牙楤木的根皮和树皮入药，称为刺老鸦，其性味辛苦、有小毒，具有补气安神、祛风活血等功效，主要治疗神经衰弱、风湿性关节炎、肝炎、糖尿病等症。目前国内外尚没有对龙牙楤木叶的抗肿瘤作用及其有效物质进行研究。

本发明的任务是：提出龙牙楤木叶总皂甙的抗肿瘤作用及其有效物质的提取工艺。

本发明的任务是以如下方式实现的：龙牙楤木叶分离出叶皂甙A、B、C和D四种单体化合物，总皂甙具有抗肿瘤作用。其提取工艺是：a、将龙牙楤木叶干燥，粉碎为粗粉；b、将龙牙楤木叶粗粉用乙醇浸泡2小时；c、以92％药用乙醇回流提取三次，每次2小时；d、过滤；e、合并乙醇液，低温减压回收乙醇至稠膏状，得乙醇提取物；f、将此提取物加水悬浮，以石油醚萃取3次，水层再用氯仿萃取3次，水层继续用水饱和正丁醇萃取5次；g、正丁醇萃取液合并后，减压回收溶剂至干，得正丁醇提取物(总皂甙类成份)。

龙牙楤木叶总皂甙经生物活性研究试验表明，该成分具有明显的抗肿瘤作用。体外试验证明，试管内药物浓度达0.011、0.045和0.09mg/ml时，对S₁₈₀和H₂₂细胞的抑制率为95.7、99.5、100％和73.0、87.1、95.5％，表明本发明药物具有细胞毒作用。体内试验证明，口服给药，小鼠按25-200mg/kg灌服，对S₁₈₀实体瘤小鼠的抑瘤率在50-80％之间，对H₂₂腹水瘤小鼠的生命延长率在20-40％之间，表明口服给予龙牙楤木叶总皂甙具有明显的抗肿瘤作用。

本发明的最佳实施例，首先将龙牙楤木叶干燥后粉碎成为粗粉取1kg，在浓度为92％的乙醇中浸泡2小时，以浓度为92％的药用乙醇回流提取三次，每次2小时，然后过滤，合并乙醇液，低温减压回收乙醇至稠膏状，得乙醇提取物，将此提取物加水悬浮，以石油醚萃取3次，水层再用氯仿萃取3次，水层继续用水饱和正丁醇萃取5次，将正丁醇萃取液合并后，80℃减压回收溶剂至干，得正丁醇提取物55g，经硅胶柱层析CHCl₃∶MeOH∶H₂O(5∶1∶0.1)得木叶皂甙A、B、C、D，楤木叶皂甙A为白色粉末，LiebermamBurchard反应阳性，泡沫反应阳性，Monsh反应阳性，其快原子轰击质谱(FAB-MS)m/z997(m+k⁺)，(981M+Na⁺)峰表明木叶皂甙A的分子量为958，分子结构为3-0-[β-D-葡萄吡喃基(1→2)][B-D-葡萄吡喃糖基(1→3)]-β-D-葡萄吡喃糖基-常春藤皂甙元(3-0-[β-D-glucapyranasyl(1-2)][β-D-glucapyranasyl(1→3)]-β-D-glucapyranosylhederagenin)。

楤木叶皂甙B为白色针状结晶，其分子量为472。

楤木叶皂甙C为淡黄色粉末，其分子量为1120。

楤木叶皂甙D为淡黄色粉末，其分子量超过1500。

经过上述工艺1kg粉碎成粗粉楤木叶可得楤木叶皂甙。