一种利用CRISPR/Cas9系统在猪胎儿成纤维细胞中实现基因敲除的方法

摘要

本发明公开了一种利用CRISPR/Cas9系统在猪胎儿成纤维细胞中实现基因敲除的方法，包括下述步骤：构建Cas9/sgRNA真核表达载体；构建RGS‑CR双荧光代替性报告载体；将Cas9/sgRNA真核表达载体和RGS‑CR报告载体共转至293T细胞中，筛选最高效的sgRNA序列；将筛选出的Cas9/sgRNA质粒电转至猪胎儿成纤维细胞中，实现敲除。本发明的方法操作简单，可在猪体细胞上可实现高效的基因编辑。