基于CRISPR/Cas9系统介导的DNA靶向捕获方法

摘要

本发明公开了一种基于CRISPR/Cas9系统介导的DNA靶向捕获方法，针对目标DNA区域的上下游分别设计一条sgRNA，在两条sgRNA序列的3'末端添加不同的捕获序列和一段与sgRNA反向互补的序列从而构成pegRNA，当pegRNA‑Cas9蛋白复合物靶向结合目标DNA时，通过pegRNA介导的定点插入，在目标DNA区域上下游分别插入不同的捕获序列，然后通过含捕获序列的引物进行PCR扩增，从DNA文库或全基因组中靶向富集并分离目标DNA，可直接用于后续的捕获测序。本发明提供的方法与其它富集方法相比，简单、快速、特异性强、灵敏度高，在DNA序列分析上有广阔的应用优势。