适用于三代测序技术检测人长链非编码RNA的样品处理方法

摘要

本发明涉及一种适用于三代测序技术检测人长链非编码RNA的样品处理方法，包括步骤：利用探针‑磁珠法去除人总RNA样品中的核糖体RNA，消除样品内大量核糖体RNA对长链非编码RNA的影响；之后进行RNA聚合酶和rATP条件下的加A反应，确保长链非编码RNA在三代测序中的识别，提高检出效率。同时提供一种检验样品处理是否成功的检测方法，将处理后的样品通过反转录PCR可以检测到未处理检测不到的非polyA尾巴的长链非编码基因hotair。本发明提供的方法能减少非必要的测序冗余，提高非编码RNA的检出率，通过加A反应，能在三代测序中一次性检测出polyA尾巴的和非polyA尾巴的长链非编码RNA，为构建完整的长链非编码RNA文库提供前期处理方法，为深入研究非编码RNA提供有效的技术手段。