基于秀丽隐杆线虫的抗肺癌耐药作用的药物筛选方法

摘要

本发明为一种基于秀丽隐杆线虫的抗肺癌耐药作用的药物筛选方法。利用此线虫的EGFR基因DNA片段(1323aa)与人体EGFR的cDNA的编码，通过PCR技术扩增、克隆、组装得到LET23：：hEFGR(1388aa)片段。将此hEFGR上的21外显子L858R点及20外显子T790M点突变分别得到LET23：：hEGFR[L858R](药物敏感性基因)和LET23：：hEGFR[T790M‑L858R](耐药型基因)，再通过酶剪切及转基因技术，将上述两种LET23：：hEGFR‑TK质粒嵌合在LET23基因序列LET‑23N至LET‑23C之间形成人体化LET23：：hEGFR‑TK[L858R](1323aa)线虫模型和人体化LET23：：hEGFR‑TK[T790M‑L858R](1323aa)线虫模型。该方法具有体内外可比性强、成本低，效率高等优点，可为肺癌EGFR‑TKIs耐药后的药物治疗提供实验依据。