一种用于检测细胞早期凋亡的Annexin V荧光标记的方法

摘要

本发明提供了一种用于检测细胞早期凋亡的Annexin V荧光标记的方法，具体的标记方法如下：(1)构建pET‑22b‑SNAP‑Annexin V基因融合质粒载体；(2)通过原核表达并纯化pET‑22b‑SNAP‑Annexin V融合蛋白；(3)用荧光小分子标记融合蛋白并纯化。Annexin V蛋白是目前发现的最佳PS结合受体之一，表现为对PS结合的高选择性和高结合力，荧光标记的Annexin V是目前检测早期细胞凋亡的最常用试剂之一。本发明创造了Annexin V荧光标记的新方法，首先通过基因工程方法将SNAP标签蛋白与Annexin V蛋白融合、表达并纯化，随后用连接SNAP蛋白专一底物BG基团的小分子荧光探针标记融合蛋白进而标记Annexin V，通过细胞成像或者流式细胞仪检测凋亡细胞。本发明对细胞凋亡过程研究具有重要的意义。